MD酶标仪介绍
酶标仪工作原理及使用方法
酶标仪简介：酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。
可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。
测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
酶标仪原理：酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单.微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.光是电磁波，波长100nm~400nm称为紫外光，400nm~780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。
人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。
绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。
酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
酶标仪原理
酶标仪原理酶标仪是一种用于测定酶活性的仪器，其原理主要基于酶与底物之间的特异性反应。
酶标仪广泛应用于生物化学、生物医学、生物工程等领域，对于研究酶的特性和应用具有重要意义。
首先，酶标仪原理的核心在于酶与底物的反应。
酶是一种生物催化剂，能够加速生物化学反应的进行，而底物则是酶所作用的物质。
在酶标仪中，通过将待测酶与底物混合，观察其反应产物的生成情况，从而测定酶的活性。
这种特异性反应使得酶标仪能够对不同酶的活性进行准确测定。
其次，酶标仪原理还涉及到对反应产物的测定和分析。
一般来说，酶标仪通过测定反应产物的颜色、荧光、吸光度等性质的变化来确定酶活性。
这种测定方法可以通过光度计、荧光计等仪器进行，从而实现对酶活性的定量分析。
除此之外，酶标仪原理还包括了对酶反应动力学的研究。
通过改变底物的浓度、酶的浓度、反应时间等条件，可以获得酶反应速率与底物浓度的关系，从而揭示酶的催化机制和动力学特性。
总的来说，酶标仪原理是基于酶与底物的特异性反应，通过测定反应产物的性质变化来确定酶的活性，同时结合了对酶反应动力学的研究。
这种原理使得酶标仪成为了生物化学研究中不可或缺的重要工具，为酶的研究和应用提供了有力支持。
在实际应用中，酶标仪原理的理解和掌握对于正确操作酶标仪、准确测定酶活性具有重要意义。
只有深入理解酶与底物的反应特性，才能够准确、可靠地进行酶活性的测定和分析。
因此，对于从事生物化学、生物医学、生物工程等领域研究的科研人员来说，深入理解酶标仪原理，对于提高实验技术水平和研究成果的质量具有重要意义。
综上所述，酶标仪原理是基于酶与底物的特异性反应，通过测定反应产物的性质变化来确定酶的活性，同时结合了对酶反应动力学的研究。
深入理解酶标仪原理对于正确操作酶标仪、准确测定酶活性具有重要意义，对于推动生物化学研究和应用具有重要意义。
希望本文能够对读者对酶标仪原理有更深入的了解，为相关领域的研究工作提供帮助。
酶标仪的原理及应用
酶标仪的原理及应用酶标仪（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，简称ELISA）是一种基于酶反应原理的生化分析方法。
它广泛应用于医学诊断、生物学研究、环境监测以及食品安全等领域。
下面将从酶标仪的原理、操作步骤以及应用等方面进行详细介绍。
酶标仪的原理酶标仪原理主要基于免疫学的“抗原-抗体”反应。
在酶标仪实验中，首先将待测物（如细菌、病毒、蛋白等）与特异性抗体结合，在固定的试剂盘或板上形成抗原抗体复合物。
然后，通过添加与抗体结合的酶标记物，例如酶标记的辣根过氧化酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP），使抗原抗体复合物与酶标记物进行特异性反应。
最后，通过加入底物使酶标记物发生催化反应，并转化为显色产物。
测量产物的光密度或发光强度，可以获得待测物的定量信息。
酶标仪的操作步骤酶标仪的操作步骤主要包括涂覆试样、孵育、洗涤、添加酶标物、孵育、洗涤和测定结果等几个主要过程。
1. 涂覆试样：将待测物（如蛋白、抗原、抗体等）溶液涂覆到微孔板上，通过静置或离心等方式将试样固定在孔底或表面。
2. 孵育：将标样或样品加入微孔板中，与已固定的待测物结合形成复合物，保温孵育一段时间，使反应充分发生。
3. 洗涤：通过加入缓冲液，用洗涤机或离心等方式清洗微孔板，去除未结合的物质，如杂质、底物残留等。
4. 添加酶标物：将酶标记的抗体或物质加入微孔板孵育，将其与已结合的待测物发生特异性反应。
5. 孵育：保温孵育一段时间，使反应充分发展。
6. 洗涤：通过加入缓冲液，用洗涤机或离心等方式清洗微孔板，去除未结合的物质。
7. 测定结果：加入合适的底物，使酶标记物发生催化反应，形成显色产物。
通过酶标仪测量光密度或发光强度，根据标准曲线或对照组数据计算出待测物的浓度。
酶标仪的应用酶标仪在医学诊断、生物学研究等领域具有广泛应用。
1. 医学诊断：酶标仪可用于检测特定抗体或抗原，例如检测病毒感染、肿瘤标志物、自身免疫疾病等。
通过测定样品中特定物质的浓度，可以帮助医生进行病情判断、疾病诊断和疗效评估。
MD酶标仪介绍
卡盒 – “系统的心脏”
“plug-n-screen”
(1) 用户配置组合
用户可根据需要购买和安装卡盒
(2) 双PMTs
适用于有双发射波长分析实验
(3) LEDs 荧光激发
同一块板实时调节强度以适合不同浓度而达到 最大动态检测范围
• 手动或自动调节获取最佳信号 • 唯一底部Z轴高度聚焦酶标仪 – 增强灵敏度 • 振荡功能提供均相检测 • 3 种速度等级，圆周或线性振荡方式 • 温度控制 环境 (+2 ℃) to 45 ℃ – 细胞应用分析理想选择 • CO2 浓度环境应用于细胞分析
提高检测速度同时不牺牲数据质量?
• 高速检测模式 (“On-the-fly”) - 提高 速度同时保证数据质量
(4) 底部直接激发
底部激发同时聚焦以达最大动态范围
(5) 近距信号收集
针对化学发光和AlphaScreen的专有检测读头 以近距接近微孔板而达到最大信号和最小的邻 孔干扰
卡盒技术
检测卡盒包含:
1. 最佳的光源 2. 特殊的电子检测元件 3. 染料特异性光学元件
• 激发滤光片 • 发射滤光片 • 二色镜 • 偏振片 • 光栅 (ABS)
每个卡盒就是一台单独的酶标仪!
优化的滤光片 & 光源组合达到灵敏度和速度相结合 检测信号产生的位置 预储存的应用程序 单功能和多功能卡盒可选
用户自升级!
只需点击 硬件、预存指令 & 软件升级 “plug-n-screen”
未来无限扩展!
扩展所需要的功能
重要特点
• 高速飞行检测模式 (“On-the-fly”) 保证速度但不牺牲性能 • 1, 6, 12, 24, 48, 96, 384 1536, 3456 微孔板格式 • 微孔板高度探测 – 更佳的信号 & 减少干扰 • Z 轴高度自动调整（顶部阅读和底部阅读）
美国MD-SpectraMax M5 多功能酶标仪
标题美国ＭＤ－SpectraMax M5 多功能酶标仪信息描述有效期:2011-12-22目前世界上功能最强也是精度最高的单体台式酶标仪。
并且具有SpectraMax M2的所有特性。
三模式比色皿插槽，可检测吸光度（Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光（TRF)、荧光偏振（FP)、和化学发光（Lum)。
两个单色器可使吸收度波长范围达200~1000nm,FI、TRF和Lum波长范围250~850nm和FP波长范围400~750nm,步进波长1nm。
可读取6、12、24、48、96和384孔微孔板。
提供终点检测、动力学、单孔扫描和光谱扫描四种测读模式。
技术参数:光密度测读模式：波长范围 200~1000nm，精确选择波长1nm；带宽 <= 4nm；波长准确度 ±2.0nm；波长重现性 ±0.2nm；测读范围 0~4.0 OD；光分辨度：0.001 OD；测读准确度(微孔板) <±0.006 OD±1.0%,0~2.0 OD；(比色杯) <±0.005 OD±1.0%,0~2.0 OD；测读精确度 <±0.003 OD±1.0%,0~2.0 OD；杂散光 <0.05% 230nm；微孔盘测读时间 18秒；温度范围室温+4~45度。
在此的基础上增加了对时间分辨荧光（TRF)、荧光偏振（FL)、和化学发光（Lum)的测量支持。
时间分辨荧光法（TRF）：波长范围 280~850nm，单色器递增量1nm；数据采集可调；测读次数：1~100flashes，测读延迟0~600usec，读取数据积分时间50~1500usec；发射光带宽9nm，激发光带宽15nm；精确度：100fM/孔铕元素（96孔及384孔顶读模式）；读取速度：96孔板17秒，384孔48秒。
荧光偏振（FL）：光栅式连续波长，以1nm递增；波长范围400~750nm；发射光带宽9nm，激发光带宽15nm；检测灵敏度1nM荧光素/孔时，<5mp SD；读取速度96孔板42秒，384孔123秒。
多功能酶标仪
多功能酶标仪多功能酶标仪（Multifunctional Enzyme Labeling Instrument）是一种专门用于分析酶标记法的实验仪器。
酶标记法是一种常用的实验方法，它利用酶对底物进行催化反应，并通过测量酶催化底物的产物来分析样品中的目标分子。
多功能酶标仪集合了多个功能，使得实验过程更加简便、高效。
该仪器通常由主机、计算机、液晶显示屏和软件等组件组成。
首先，多功能酶标仪具有多种酶标记模式。
酶标记法有多种方法，如免疫酶标记、物质酶标记、辣根过氧化物酶标记等。
多功能酶标仪能够根据不同的实验需求选择不同的酶标记模式，以适应不同样品中目标分子的检测。
其次，多功能酶标仪具有高精度的测量能力。
仪器通过测量底物的光学信号，如吸光度、荧光强度等，来确定目标分子的含量。
仪器配备了高灵敏度的光电传感器和光学系统，能够准确地检测底物的信号，并通过算法和软件进行数据分析和处理。
另外，多功能酶标仪还具有自动化功能。
仪器可以自动进行多个步骤的操作，如样品装载、试剂添加、催化反应、信号检测等，大大提高了实验的效率。
同时，仪器还可以通过连接计算机进行数据传输和分析，实现实验结果的自动记录和存储。
多功能酶标仪的操作简便，用户只需要根据仪器的指引进行基本的参数设置和操作步骤即可。
仪器配备了直观易懂的界面和操作面板，提供了丰富的菜单选项和功能按钮，使得用户可以灵活选择实验参数和模式。
总结起来，多功能酶标仪作为一种专门用于分析酶标记方法的实验仪器，具有多种酶标记模式、高精度的测量能力、自动化功能和简便的操作等特点。
它的出现使得酶标记法的实验过程更加简单、快捷和准确，为科研工作者提供了强有力的工具和支持。
酶标仪使用详解范文
酶标仪使用详解范文酶标仪是一种常见的实验仪器，用于检测生物样本中特定分子的浓度。
它广泛应用于生物医学研究、药物研发和临床诊断等领域。
本文将详细介绍酶标仪的使用方法及注意事项。
一、酶标仪的基本原理酶标仪是通过光学测量来确定样本中特定分子浓度的仪器。
其工作原理是利用底物与酶的反应产生的物质颜色变化来测定样品中酶活性或者其中一种特定分子的浓度。
酶标仪通过测量底物产生的吸光度或荧光来确定管内样本中特定分子的浓度。
二、酶标仪的使用步骤1.准备工作：首先打开酶标仪电源，等待其预热。
然后根据需要选择合适的检测模式，如吸光度或荧光模式。
2.设定参数：按照实验要求，设定酶标仪的参数，包括波长、时间和增益等，这些参数取决于所使用的底物和样品类型。
通常需要根据实验所需设定不同的参数。
3.校准仪器：在进行测量之前，需要对酶标仪进行校准，以确保测量结果的准确性。
校准一般分为零点校准和标准曲线校准两个步骤。
零点校准是将酶标仪的读数归零，标准曲线校准则是使用已知浓度的标准样品制作标准曲线，以便后续测量时根据标准曲线确定待测样品中的物质浓度。
4.加样测量：用自动吸管器或移液器将样品加入酶标仪中，确保每个孔都有足够的样品进行测量。
加样完成后，将酶标板或孔板插入酶标仪的样品槽内，等待测量结果。
5.数据处理：酶标仪会自动测量各个孔的吸光度或荧光值，并将结果显示在仪器屏幕上。
根据实验要求，将数据导出并进行数据处理，如制作标准曲线、计算浓度等。
三、酶标仪使用注意事项1.酶标仪是一种精密仪器，使用前需仔细阅读使用说明书，并按照操作步骤进行操作。
2.操作时要注意保持操作平台的清洁和无尘，避免杂质对测量结果的影响。
3.底物的选取应根据实验目的和样品特性进行选择，不同底物对于不同物质浓度的测定有其特定的敏感性和检测范围。
4.样品的加入量需要根据实验要求准确控制，加样时尽量避免泡沫的产生。
5.酶标仪在校准时需要使用标准样品，为确保准确性应使用不同浓度的标准样品制作标准曲线。
酶标仪的使用方法和注意事项
酶标仪的使用方法和注意事项一、酶标仪的基本介绍酶标仪是一种用于定量分析的仪器，可以测定生物样品中的蛋白质、核酸等生物分子的浓度。
其原理是利用特定酶促反应，将待测物质转化为可检测的产物，并通过光学方法进行测定。
二、酶标仪的使用前准备1.检查设备：在使用前，需要检查设备是否正常工作。
首先，检查电源线是否牢固连接；其次，检查光源和探测器是否干净无污染；最后，打开电源开关进行预热。
2.准备样品：根据实验需要，准备好待测样品，并按照实验方案进行处理。
3.调节波长：根据实验需要，选择合适的波长进行测量。
通常情况下，选择与产物吸光度最大值相对应的波长进行测量。
三、操作步骤1.打开软件：将电脑与酶标仪连接，并打开相应软件。
2.设置参数：在软件界面上设置相关参数，如波长、板型、样品类型等。
3.加入标准曲线：根据实验需要，在板子上加入标准曲线，通常选择不同浓度的标准品进行加入。
4.加入样品：将处理好的样品加入板子中，并记录每个孔的位置和名称。
5.开始测量：将板子放入酶标仪中，并按照软件提示操作，开始测量。
6.保存数据：测量完成后，将数据保存在电脑中，并进行必要的数据分析和处理。
四、注意事项1.保持清洁：在使用酶标仪前后，需要保持仪器和实验环境的清洁。
特别是光源和探测器等灵敏部件，需要定期清洗和消毒。
2.注意波长选择：选择合适的波长进行测量非常重要。
如果波长选择不当，可能会影响到测量结果的准确性。
3.注意样品稀释：如果样品过于稠密或者杂质过多，可能会影响到反应效果。
因此，在进行酶标实验前，需要对样品进行必要的稀释或者纯化处理。
4.注意安全操作：在使用酶标仪时，需要注意安全操作。
尤其是涉及到有毒有害物质时，需要采取必要的防护措施。
5.注意数据分析：在完成实验后，需要对数据进行必要的分析和处理。
特别是需要注意数据的可靠性和可重复性。
五、总结酶标仪是一种非常重要的实验仪器，可以用于定量分析生物样品中的各种生物分子。
在使用酶标仪时，需要注意设备维护、样品处理、波长选择等方面的问题，以确保实验结果的准确性和可靠性。
md多功能酶标仪工作原理
md多功能酶标仪工作原理哎，说起这md多功能酶标仪的工作原理，真是挺有意思的。
你们知道嘛，我第一次看到这个仪器的时候，还以为是哪个大厨的厨房里的高级调料盒呢。
这玩意儿，长得五大三粗，颜色还五颜六色的，上面全是密密麻麻的小按钮，看着就让人头大。
先说说这个md多功能酶标仪是干嘛的吧。
简单来说，它就是一种检测生物分子的小工具，比如DNA、蛋白质啊这些。
咱们平时做实验，检测这些分子的时候，都得用到这个。
那它是怎么做到的呢？首先，这个仪器得先给样本洗个澡。
你们知道嘛，做实验就像做人，讲究个清洁。
所以啊，样本先得经过一个叫做“洗涤”的程序，把多余的杂质给洗掉，让咱们的目标分子洗个干干净净。
然后，样本得穿上件“衣服”，这衣服叫做“抗体”。
抗体是啥？它就像咱们的侦探，专门认得目标分子。
抗体穿上后，样本就像变魔术一样，变得可以检测了。
接下来，就是“显色”环节了。
这仪器里面装的是一种特殊的化学物质，它就像个魔术师，把抗体和目标分子结合后，就能变成一种特殊的颜色。
颜色越深，说明目标分子越多。
但是，这还不算完。
咱们得把颜色和数值对应起来，这个数值就是“酶标仪的读数”。
这个读数，就像是个成绩单，告诉我们目标分子到底有多少。
你们说，这md多功能酶标仪的工作原理是不是挺有意思的？其实，它就像是个大侦探，通过各种方式，把那些看不见摸不着的分子给找出来，让我们对这些生命奥秘有更深的了解。
不过，这玩意儿也不是那么好玩的。
有时候，仪器会闹脾气，不肯好好工作。
这时候，咱们就得耐心地给它调调参数，就像哄孩子一样。
有时候，还得给它洗洗澡，让它的心情好一些。
总之，md多功能酶标仪这个大侦探，虽然有时候闹点小脾气，但只要我们耐心对待，它一定会帮我们揭开生命奥秘的面纱。
嘿，这仪器，还真挺有意思的。
[说明]酶标仪工作原理及使用方法
![[说明]酶标仪工作原理及使用方法](https://img.taocdn.com/s3/m/3899b2336294dd88d1d26b27.png)
[说明]酶标仪工作原理及使用方法酶标仪简介:酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。
可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。
测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
酶标仪原理:酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单.微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.光是电磁波，波长100nm~400nm称为紫外光，400nm~780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。
人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。
绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。
酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
MDMax384酶标仪操作说明
MDMax384酶标仪操作说明准备工作：1. 将MD Max384酶标仪放置在水平坚固的平台上，确保仪器稳定。
2.检查仪器的电源线是否连接良好，确保仪器供电正常。
3.打开仪器的电源开关，等待仪器启动。
仪器校准：1. 预热：打开仪器盖，将MD Max384酶标仪加热到所需的温度，通常为37℃。
2.校准标准曲线：使用内置的酶标准品校准仪器，按照仪器说明书的操作步骤进行操作。
校准通常包括设置曲线参数、添加标准品、测定标准品吸光度等步骤。
3.验证仪器性能：使用内置的控制品进行仪器性能验证，检查仪器的准确性和灵敏度。
样品准备：1.根据实验需求，合理选择样品类型和取样量。
常用的样品包括酶液、细胞提取物、体液等。
2.如果需要，对样品进行处理，如离心、稀释等。
实验操作：1.准备酶标板：根据实验需求选择合适的酶标板，将样品、控制品和标准品依次加入板孔中。
2. 设置实验条件：打开MD Max384酶标仪软件，进入实验设置界面，根据实验要求设置温度、波长、检测模式等实验条件。
3.加样：使用自动化多道点吸头将样品分别加到酶标板中的各孔，并确保准确无误。
4.启动测量：点击软件界面上的“开始测量”按钮，仪器将自动读取各孔的吸光度，并记录数据。
5.数据分析与结果输出：实验结束后，根据需要可以使用软件进行数据分析和结果输出，例如绘制曲线、计算酶活性等。
实验注意事项：1. 操作前应仔细阅读MD Max384酶标仪的操作手册，并按照操作要求进行操作。
2.严格控制实验条件，确保测量结果的精确性和准确性。
3.注意避免样品受到外界污染和干扰，保持实验环境干净整洁。
4.仪器使用完毕后应及时进行清洁和维护，包括清理残留样品、校准仪器等。
总结：MD Max384酶标仪是一款高通量酶标仪，具有快速、准确的特点。
通过严格的操作和合理的样品处理，能够得到可靠的实验结果。
在使用过程中，需要注意仪器的校准和验证，合理设置实验条件，细心操作，保证实验结果的准确性。
酶标仪基本知识及其检测原理
酶标仪基本知识及检测原理酶标仪（MicroplateReader）是对酶联免疫检测（EIA）实验结果进行读取和分析的专业仪器。
酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。
酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别在近几年中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，同时促进了生殖健康技术水平提高。
目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目，如：乙肝五项、爱滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。
过去多数采用目测方法，报出的结果缺乏科学的依据。
例如：某弓形虫检测试剂盒中，临界值规定为：阴性对照品的OD值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。
肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行，但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。
国内多家权威机构，如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性，并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应使用酶标仪，并提供酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。
同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变（如：肝炎、爱滋病、优生优育等），判读更要求严谨，由误诊引起的纠纷很难处理。
另外，住院手术病人术前的丙肝、爱滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段，正逐渐被许多单位所采用。
酶标仪的使用方法作为微孔板比色计的酶标仪，其基本功能不外乎一个比色测定，所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面的差异，当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。
在临床实验室实际工作中，实验人员在使用酶标仪进行测定操作时，有时难免会对酶标仪的一些性能指标产生迷惑，甚至对酶标仪的应用产生错误的理解。
酶标仪的常见功能
酶标仪的常见功能
酶标仪是一种常用的实验仪器，主要用于酶标的相关实验和分析。
以下是酶标仪的一些常见功能：
1. 光吸收测定：酶标仪能够测定不同物质在不同波长的光吸收情况。
这对于测定酶促反应产生的色素变化等非荧光信号很有帮助。
2. 荧光测定：酶标仪可用于测定与荧光染料反应产生的荧光信号。
这对于测量荧光染料标记的分子数量、监测细胞内活性小分子的浓度等非荧光信号很有帮助。
3. 发光测定：酶标仪能测定与化学荧光染料或发光底物反应产生的发光信号。
这适用于较低浓度的目标分子检测福利使用，以及对活性分子的连续监测和定量分析。
4. 温度控制：酶标仪可以通过内置或外接的温度控制系统对样品进行恒温控制。
这对于温度敏感性酶的活性保持很重要。
5. 吸光度校正：酶标仪可以进行吸光度校正，确保测量的准确性和精确性。
6. 数据处理和分析：酶标仪通常配备有自动数据处理和分析功能，包括曲线拟合、数据萃取、浓度计算等，简化实验操作，并提供实验结果的可视化和统计分析。
7. 多通道检测：一些酶标仪具有多个独立的检测通道，可以同
时测量多个样品，提高实验效率。
8. 自动化操作：高级酶标仪还具有自动操作功能，如自动吸孔板加载、液体的自动加样等，使实验操作更加方便和高效。
总之，酶标仪具有多种功能，可以广泛应用于酶标实验、分析和检测等领域，帮助研究人员获得准确、可重复的实验结果。
美国MD-SpectraMax M5 多功能酶标仪
标题美国ＭＤ－SpectraMax M5 多功能酶标仪信息描述有效期:2011-12-22目前世界上功能最强也是精度最高的单体台式酶标仪。
并且具有SpectraMax M2的所有特性。
三模式比色皿插槽，可检测吸光度（Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光（TRF)、荧光偏振（FP)、和化学发光（Lum)。
两个单色器可使吸收度波长范围达200~1000nm,FI、TRF和Lum波长范围250~850nm和FP波长范围400~750nm,步进波长1nm。
可读取6、12、24、48、96和384孔微孔板。
提供终点检测、动力学、单孔扫描和光谱扫描四种测读模式。
技术参数:光密度测读模式：波长范围 200~1000nm，精确选择波长1nm；带宽 <= 4nm；波长准确度 ±2.0nm；波长重现性 ±0.2nm；测读范围 0~4.0 OD；光分辨度：0.001 OD；测读准确度(微孔板) <±0.006 OD±1.0%,0~2.0 OD；(比色杯) <±0.005 OD±1.0%,0~2.0 OD；测读精确度 <±0.003 OD±1.0%,0~2.0 OD；杂散光 <0.05% 230nm；微孔盘测读时间 18秒；温度范围室温+4~45度。
在此的基础上增加了对时间分辨荧光（TRF)、荧光偏振（FL)、和化学发光（Lum)的测量支持。
时间分辨荧光法（TRF）：波长范围 280~850nm，单色器递增量1nm；数据采集可调；测读次数：1~100flashes，测读延迟0~600usec，读取数据积分时间50~1500usec；发射光带宽9nm，激发光带宽15nm；精确度：100fM/孔铕元素（96孔及384孔顶读模式）；读取速度：96孔板17秒，384孔48秒。
荧光偏振（FL）：光栅式连续波长，以1nm递增；波长范围400~750nm；发射光带宽9nm，激发光带宽15nm；检测灵敏度1nM荧光素/孔时，<5mp SD；读取速度96孔板42秒，384孔123秒。
md多功能酶标仪工作原理
md多功能酶标仪工作原理
MD多功能酶标仪的工作原理基于酶联免疫吸附实验（ELISA）的原理。
在ELISA中，需要用抗体或其他亲和物质作为捕获物质，将其固定在试验板上。
样品中含有需要检测的物质，然后在样品中加入一个与之特异性结合的二抗或标记物（如酶），通过测量二者之间的反应信号来计算样品中目标物的含量。
具体来说，多功能酶标仪会在试验板上检测波长范围内的荧光强度和吸收率，并将其转换为数字信号。
用户可以根据反应信号的大小来估计样品中目标物的浓度。
此外，它还可以测量微量的生物成分的活性，并可以用来监测酶反应的动力学情况。
MD酶标仪应用介绍
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For research use only. Not for use in diagnostic procedures.
ELISA酶联免疫吸附实验：
• 根据检测分子的不同，主要分为三种方法： 间接法：检测抗体疫苗等 双抗夹心法：检测抗原或特异小分子或信号蛋白等 竞争法：可检测抗原或抗体 • 根据抗体标记的酶种类和底物种类的不同，检测波长不同： 碱性磷酸酶（AP）：常用底物PNPP 405nm ，本底低， 灵敏度高，较昂贵 辣根过氧化物酶(HRP)：底物有ABTS 410/650nm，或 OPD 492nm，或TMB 450nm ，成本低，但灵敏度不如AP 系统
MD酶标仪应用介绍
© 2012-2015. Trademarks property of Molecular Devices, LLC or their respective owners. For research use only. Not for use in diagnostic procedures. 1 For research use only. Not for use in diagnostic procedures.
• 检测对象：哺乳动物细胞、组织、血清及其他液体样本等 • 试剂盒和检测波长：
– ELISA Kit for Human Glutathione(GSH)， 450nm – Glutathione Assay Kit （Cayman），405nm
• 应用：作为GSH治疗时的血药浓度检测指标。
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For research use only. Not for use in diagnostic procedures.
• 检测波长：450nm
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For research use only. Not for use in diagnostic procedures.
酶标仪使用详解
工作原理
酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测 被测物的吸光值。在特定波长下测定每一 种物质都有其特定的波长，在此波长下， 此物质能够吸收最多的光能量。如果选择 其它的波长段，就会造成检测结果的不准 确。因此，在测定检测物时，我们选择特 定的波长进行检测，称为测量波长。注意 这里提出了两个关键概念OD值（吸光值） 和波长。
酶标板
模板
可以把当前设置好的酶标板保存为模板，供以 后使用。
标本号设置
可以使用拖动的方式增加标本号，标本号生成 可以分为横行和纵向。
酶标板
酶标板的显示内容
样本编号=标本号 原始OD值=仪器传回来没有减去空白的OD值 （OD值=吸光度值） OD值=根据参数来判断是否要减去空白孔的值 （BC）。 定性值=根据公式计算出孔是阴性、阳性、弱 阳性
阳性公式: OD>=NC*2.5
弱阳性公式
阳性公式: OD>= NC*2.1
CutOff公式
NC*2.1
控制界面
酶标板
酶标板
组成
酶标板是由12*8个孔组成的，每一个孔可以理 解为一个标本。每一板中还需要设置和阳性公 式相关的孔阳性、阴性、空白等。
酶标项目
每一行可以设置一个酶标项目（下拉方式）， 可以设置为单板单项和单板多项。
酶标板项目设置
单板单项
一个酶标标只有一个项目，常用于标本量比较 大的时候。
单板多项
一块板可以做多个项目，注意项目是横向排列 的而且每个项目都必须设置公式中需要的阴性 阳性孔。
工作流程
PC
R 连接仪器 OK
MK3
PC
F2 设置波长 OK
MK3
PC
酶标仪工作原理及使用方法
酶标仪简介：酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。
可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。
测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
酶标仪原理：酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单.微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.光是电磁波，波长100nm~400nm称为紫外光，400nm~780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。
人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。
绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。
酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用，如TECAN(M1000、M200等)，Thmeral(Varioskan Flash)，Bio-tek（Synergy 4等），MD（M2、M5）都可以应用于荧光检测。
1.概述室温下，大多数分子处于基态的最低振动能级，处于基态的分子吸收能量（光能、化学能、电能或热能）后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量，这种现象称为“发光现象”。
分子发光包括荧光，磷光，化学发光，生物发光等。
受到光照时发光，光照切断时发光立即消失的叫荧光，光照切断时，发光逐渐变弱以致消失的叫磷光，吸收化学反应的化学能量而发光叫化学发光，由生物能转变为光辐射的称作生物发光。
由于发光物质不同荧光有分子荧光和原子荧光之分，分子荧光为带光谱，原子荧光为线光谱，通常所说的荧光为分子荧光。
通过测定所发射荧光的特性和强度，可以对物质进行定性、定量分析。
2.荧光检测技术2.1荧光强度(FI)荧光强度与荧光物质的浓度成正比，这是荧光分析法是量分析的依据。
在生物学上的应用非常广泛，可以进行生物大分子定量，酶活性分析，荧光免疫分析，细胞学分析（细胞增殖，细胞毒理，细胞吸附等）和分子间相互作用。
2.1.1细胞凋亡检测Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。
Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。
但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase-3的活性明显下降。
设计出荧光物质偶联的短肽Z-DEVD-AMC。
在共价偶联时，AMC不能被激发荧光，短肽被水解后释放出AMC，自由的AMC才能被激发发射荧光（图1）。
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用，如TECAN（M1000、M200 等）,Thmeral（VarioskanFlash） Bio-tek （Synergy4等），MD （M2、M5）都可以应用于荧光检测。
1. 概述室温下，大多数分子处于基态的最低振动能级，处于基态的分子吸收能量（光能、化学能、电能或热能）后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量，这种现象称为“发光现象”。
分子发光包括荧光，磷光，化学发光，生物发光等。
受到光照时发光，光照切断时发光立即消失的叫荧光，光照切断时，发光逐渐变弱以致消失的叫磷光，吸收化学反应的化学能量而发光叫化学发光，由生物能转变为光辐射的称作生物发光。
由于发光物质不同荧光有分子荧光和原子荧光之分，分子荧光为带光谱，原子荧光为线光谱，通常所说的荧光为分子荧光。
通过测定所发射荧光的特性和强度，可以对物质进行定性、定量分析。
2. 荧光检测技术2.1 荧光强度（FI）荧光强度与荧光物质的浓度成正比，这是荧光分析法是量分析的依据。
在生物学上的应用非常广泛，可以进行生物大分子定量，酶活性分析，荧光免疫分析，细胞学分析（细胞增殖，细胞毒理，细胞吸附等）和分子间相互作用。
2.1.1 细胞凋亡检测Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。
Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。
但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase- 3 的活性明显下降。
设计出荧光物质偶联的短肽Z-DEVD-AMC在共价偶联时，AMC不能被激发荧光，短肽被水解后释放出AMC，自由的AMC才能被激发发射荧光（图1）。
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卡盒 – “系统的心脏”
“plug-n-screen”
(1) 用户配置组合
用户可根据需要购买和安装卡盒
(2) 双PMTs
适用于有双发射波长分析实验
(3) LEDs 荧光激发
同一块板实时调节强度以适合不同浓度而达到 最大动态检测范围
技术结构
光吸收模式卡盒
荧光模式卡盒 – 双发射 – FRET
卡盒的优化……
• 方法 • 一般分析检测 – 商业化的和个性化的 • 1-3456 微孔板格式 • 个性化定制需要
• 按照客户的规格要求和应用定制卡盒 • 联系 Rainer 了解细节
现有的卡盒类型
• 光吸收 (光栅基础) • 多功能模式 (单激发; 涵盖兼容所有通用标记)
List of installed PARADIGM units
量身定制多标记分析卡盒！
为什么选择 Paradigm?
任何实验分析，我们都有解决方案!!!
FilterMax F3, F5 & SpectraMax Paradigm
功能
FI – top FI – bottom
TRF FP Abs – visible Abs – UV ABS - monochromatic Luminescence, glow HTRF Certification Shaking Temperature Control 6- to 48-well Plates 96- to 384-well Plates 96- to 1536-well Plates
3 卡盒:
1. AlphaScreen 384 Std 2. AlphaScreen 384 HTS 3. AlphaScreen 1536 HTS
优化于:
价格 versus 速度 速度 verus 价格 微孔板格式
为何 Paradigm 优于 AlphaScreen/ AlphaLisa?
具有竞争性的技术参数 客户现场测试验证性能表现等于或优于 Envision 更好的性价比 更快的检测速度
卡盒系统
1. Plug-n-Screen 卡盒 2. 每个卡盒都有自己的光源, 闪烁氙灯只用于 HTRF 测量 ->更长寿命 3. 卡盒更换起来十分容易, 客户可以备用多一个卡盒以备不时只需
多标记分析 – 我们有答案
MultiTox Fluor – 双 Ex- 双 Em
1. 存活力和细胞毒性分析 2. Promega可提供 – 应用手册
• 双色化学发光 (双发射光, 有滤光片)
• CHROM: Promega Chroma-Glo (绿色和红色化学发光)
• BRET2: PerkinElmer BRET2 (蓝色和绿色化学发光)
• 定制:
依据客户的应用量身打造
• AlphaScreen (激光诱导化学发光; PerkinElmer)
(4) 底部直接激发
底部激发同时聚焦以达最大动态范围
(5) 近距信号收集
针对化学发光和AlphaScreen的专有检测读头 以近距接近微孔板而达到最大信号和最小的邻 孔干扰
卡盒技术
检测卡盒包含:
1. 最佳的光源 2. 特殊的电子检测元件 3. 染料特异性光学元件
• 激发滤光片 • 发射滤光片 • 二色镜 • 偏振片 • 光栅 (ABS)
荧光模式 – Coumarin, Fluorescein, Rhodamine, Texas Red 时间分辨 – DELFIA Europium 化学发光 – 无发射滤片
• 荧光模式 (双发射; FRET)
• CO-FL: Coumarin=>Fluorescein FRET; Coumarin type labels • G-BLAZER:Invitrogen GeneBLAzer (FRET) • CFP-YFP: Cyan=>Yellow Fluorescent Protein FRET; labels, e.g. Thioflavin • FL-RH: Fluorescein=>Rhodamine FRET; Fluorescein type labels • Cy3-Cy5: Cy3=>Cy5 or Cy5.5 FRET; Cy3 / Rhodamine type labels • Custom: taylored to customer’s application
1) 药筛分析技术
HTRF (CisBio) AlphaScreen (PerkinElmer) 定制 TR-FRET
2) 细胞存活力、增殖和细胞毒性分析
荧光法 光吸收法
3) 荧光蛋白表达报告分析
GFP(异构体) 细胞实验分析 GeneBLAzer (Invitrogen)
4) 荧光素酶分析
报告基因分析 (Promega): Dual Luciferase Reporter, Dual-Glo Luciferase, Chroma-Glo Luciferase assay
分析需求无延时 卡和更换十分简便, 用户可建立卡盒存库
为什么选择 Paradigm 做 HTRF 分析?
经过Cisbio HTRF认证
竞争性的技术参数
1. CisBio 的验证结果揭示 Paradigm HTRF性能表现 与他们的 HTRF 参照酶标仪品牌 (BMG)相当
2. 客户现场测试结果与 Envison 和 Pherastar 相比： • 比 Envision更灵敏 • 比 BMG 快20% • 速度是PEs 的2x 倍 • 更好的数据质量
• 手动或自动调节获取最佳信号 • 唯一底部Z轴高度聚焦酶标仪 – 增强灵敏度 • 振荡功能提供均相检测 • 3 种速度等级，圆周或线性振荡方式 • 温度控制 环境 (+2 ℃) to 45 ℃ – 细胞应用分析理想选择 • CO2 浓度环境应用于细胞分析
提高检测速度同时不牺牲数据质量?
• 高速检测模式 (“On-the-fly”) - 提高 速度同时保证数据质量
• 384 Std: 优化最适 384well 格式 • 384 HTS : 优化最适 快速检测 384well 格式 • 1536 HTS: 优化最适 快速检测 1536well 格式
应用
从研究到筛选…….
细胞学分析
• 细胞增殖 • 细胞存活力和毒性 • 细胞凋亡和坏死 • 细胞迁移 • ATP 检测 • GFP 表达 • 微生物生长 •…
每个卡盒就是一台单独的酶标仪!
优化的滤光片 & 光源组合达到灵敏度和速度相结合 检测信号产生的位置 预储存的应用程序 单功能和多功能卡盒可选
用户自升级!
只需点击 硬件、预存指令 & 软件升级 “plug-n-screen”
未来无限扩展!
扩展所需要的功能
重要特点
• 高速飞行检测模式 (“On-the-fly”) 保证速度但不牺牲性能 • 1, 6, 12, 24, 48, 96, 384 1536, 3456 微孔板格式 • 微孔板高度探测 – 更佳的信号 & 减少干扰 • Z 轴高度自动调整（顶部阅读和底部阅读）
F3
F5
Paradigm
Q&A
…..更多
• 荧光强度 双标记
• MultiTox: Promega’s MultiTox-Fluor 细胞毒性-存活力 分析
• 定制:
依据客户的应用量身打造
• 荧光偏振
• FP-FLUO: 荧光素类标记 • FP-RHOD: 罗丹明类标记 • Custom: 依据客户的应用量身打造
• 时间分辨荧光
• EU-SA: DELFIA 铕 &钐 (单或双标记)
• 定制:
依据客户的应用量身打造
• HTRF® (CisBio; 均相时间分辨荧光)
……更多
• 化学发光 (单发射光, 无滤光片)• LUM :优化最适 1536well 格式
• LUM 384: 优化最适 384well 格式
• LUM 96: 优化最适 96well 格式
5) DNA/RNA 定量
紫外光吸收 (260, 280nm) 荧光标记法
AlphaScreen / AlphaLisa
(激光激发)
珠子技术, 能量转移产生化学发光或荧光信号: 单插槽卡盒 光源: 激光: 680nm 波长选择: 发射光滤片: 570/100nm
检测器: PMT
客户自己选择性价比
药物筛选
• GPCR受体 • cAMP 定量 • IP 定量 • 核受体 • 激酶分析 • 酶活和动力学 • 分子相互作用 • 炎症和细胞因子分子 •…
分子生物学
• DNA/RNA 定量 • 蛋白定量 • 分子相互作用 • 报告基因分析 • SNP 基因定型 • 免疫分析 •…
….. 我们的产品覆盖所有这些领域
SpectraMax® Paradigm ® 多功能酶标仪检测平台
内容概要
• 特点 & 优势 • 检测卡盒 – “系统的心脏” • 应用
特点 & 优势
市场上唯一用户自己可升级酶标仪 用户升级所用时间 < 2 minutes
优势
高速检测!
主机单元配有双 PMTs = 2 x 速度于单 PMT 不以牺牲FP, FRET, TR-FRET灵敏度为代价