抗氧化性方法
抗氧化性能测试
实验步骤及操作
▪ 实验条件的设定
1.根据抗氧化性能测试的要求，设定合适的实验温度、时间和 湿度等条件。 2.确保实验条件的稳定性和可控性，以减小实验误差。
▪ 实验过程的操作
1.按照实验步骤，准确添加试剂和样品，避免操作失误。 2.实时监测实验过程，记录实验数据，发现异常及时处理。 3.保持实验过程的连贯性和稳定性，确保实验结果的可靠性。
抗氧化性能测试
结果分析与解读
结果分析与解读
▪ 结果总览
1.所有测试数据均表明，我们的系统在抗氧化性能测试中表现 出色。 2.与市场上的其他同类产品相比，我们的系统在多项指标上具 有优势。 3.我们的系统在持续高压和极端温度条件下的抗氧化性能尤其 突出。
▪ 抗氧化性能与时间的关系
1.随着时间的推移，系统的抗氧化性能始终保持在高水平，没 有明显下降。 2.在长时间运行后，系统的抗氧化性能依然稳定，没有出现明 显的性能损耗。
▪ 数据趋势分析与预测
1.通过数据分析，找出数据背后的趋势和规律，为决策提供支 持。 2.建立数据预测模型，对未来一段时间的抗氧化性能进行预测 。 3.结合行业趋势和发展动态，对数据趋势和预测结果进行全面 评估。 在抗氧化性能测试中，通过对历史数据的分析，可以揭示抗氧 化性能的变化趋势，为产品研发、改进和决策提供依据。同时 ，通过数据预测，可以为企业规划未来发展方向提供参考。 ---
▪ 数据处理技术与方法
1.掌握并运用先进的数据处理技术，如数据挖掘、数据清洗、数据分析等。 2.根据测试需求，选择合适的数据处理方法，确保结果的准确性和可靠性。 3.定期对数据处理技术进行更新和学习，保持与前沿技术的同步。 抗氧化性能测试涉及大量数据处理工作，合理运用相关技术和方法能够提高测试效 率，确保结果的准确性，并为进一步的研究提供有力支持。 ---
防氧化的方法
防氧化的方法氧化是指物质与氧气结合产生新的化学性质和物理性质的过程。
在日常生活中，许多物质都容易受到氧化的影响，导致质量下降甚至失去原有的功能。
为了防止物质氧化，我们可以采取一些方法。
选择适当的包装材料是防止氧化的第一步。
一些易氧化的物质，如食品、药品、化妆品等，在包装过程中应该选择具有良好氧化防护性能的材料。
常见的包装材料有铝箔、复合膜等，可以有效地防止氧气的渗透。
保持干燥是防止氧化的重要因素之一。
许多物质在潮湿的环境中容易发生氧化反应，因此应该尽量保持干燥。
例如，食品中的脂肪、蛋白质等容易受潮受氧化，因此应该储存在干燥的环境中，避免与空气接触。
适当的温度也是防止氧化的关键。
在一些需要长时间保存的物质中，如药品、化妆品等，应该选择适当的温度来延缓氧化反应的发生。
一般来说，较低的温度可以减缓氧化反应的速度，因此应该选择低温储存。
除了上述方法外，添加抗氧化剂也是常用的防止氧化的手段之一。
抗氧化剂是一类能够与氧气反应形成稳定物质的化合物，它可以中和氧气对物质的氧化作用。
常见的抗氧化剂有维生素C、维生素E等，可以通过食物或药物的方式补充。
定期检查和维护也是防止氧化的重要环节。
对于一些易氧化的设备或器材，如汽车、电子产品等，应定期进行检查和维护，以确保其正常运行。
例如，汽车电瓶中的电解液容易受到氧化的影响，因此应该定期检查电瓶的液位，并及时添加电解液。
防止氧化是保持物质质量的重要手段。
通过选择适当的包装材料、保持干燥、控制温度、添加抗氧化剂以及定期检查和维护，可以有效地延缓物质的氧化速度，从而保持其原有的功能和品质。
(完整版)抗氧化试验方法
一、试验方法1、DPPH自由基清除率的测定本实验采用1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl(DPPH)法测定样品清除自由基活性。
1.1实验原理1,1-二苯基-2-苦肼基（1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl(DPPH)）是一种稳定的以氮为中心的自由基，其乙醇溶液显紫色，最大吸收波长为517nm。
当DPPH 溶液中加入自由基清除剂时，其孤对电子被配对时，吸收消失或减弱，导致溶液颜色变浅，显黄色或淡黄色，在517nm处的吸光度变小，其变化程度与自由基清除程度呈线性关系，故该法可用清除率表示，清除率越大，表明该物质清除能力越强。
1.2溶液的配制0.08mmol/L DPPH溶液的配制：精密称取DPPH8.0mg，用无水乙醇溶解并定容至200ml棕色容量瓶中，得浓度为0.004%的DPPH溶液，避光保存，备用。
1.3实验步骤：分别取不同浓度的各样品溶液（0.24,0.48,0.72,0.96,1.20mg/ml）1.0ml，置10ml离心管中，加入3.0ml的DPPH溶液，室温避光反应30min，同时以无水乙醇为空白，于517nm波长处测定吸光值。
按下列公式计算DPPH自由基清除率。
DPPH自由基清除率（%）= A0-(A s-A c)/ A0×100%公式中，A0—1.0ml蒸馏水+3.0mlDPPH溶液的吸光度值A s—1.0ml样品溶液+3.0mlDPPH溶液的吸光度值A c—1.0ml样品溶液+3.0ml无水乙醇的吸光度值将实验重复三次，求得清除率的平均值。
2、总的抗氧化活性的测定总的抗氧化活性实验采用改良后的Prieto法。
2.1实验原理：磷钼络合物测定方法的原理是Mo(VI)被抗氧化物质还原成绿色的Mo(V)络合物，其最大吸收波长为695nm。
抗氧化物质活性越强，测定的吸光度值越大。
此方法操作简单，所用试剂低廉、方法重现性好，非常适合抗氧化性的测定。
3种抗氧化活性测定方法
3种抗氧化活性测定方法抗氧化活性是指物质对氧化过程的抑制作用，能够减缓或阻断自由基对细胞和组织的损害。
目前，常用的抗氧化活性测定方法主要包括DPPH 自由基清除法、ABTS自由基清除法和铁还原能力测定法。
以下将对这三种方法进行详细介绍。
1.DPPH自由基清除法：DPPH（2,2-二苯基-1-若氧基-苯基-π-苦味噁唑）自由基清除法是一种常用的抗氧化活性测定方法。
该方法是通过测定样品对DPPH自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。
DPPH自由基是一种紫色稳定的自由基，在接触到氢供体（抗氧化剂）后，会发生颜色变化从紫色转变为黄色。
可以通过测定样品溶液的吸光度来评估其抗氧化能力。
吸光度的降低表明样品对DPPH自由基的清除能力较强。
2.ABTS自由基清除法：ABTS（2,2'-联氨基双（3-乙基苯并噻唑））自由基清除法也是一种常用的抗氧化活性测定方法。
ABTS自由基是一种无色可溶性自由基，其生成主要通过氧化剂与ABTS反应而产生。
测定方法是将ABTS与过氧化氢反应，生成蓝色自由基溶液，然后将样品加入到溶液中，通过测定吸光度的变化来评估样品的抗氧化活性。
吸光度的降低表明样品对ABTS自由基的清除能力较强。
3.铁还原能力测定法：铁还原能力测定法是一种评估抗氧化活性的常用方法，通过测定样品对Fe3+还原为Fe2+的能力来评估其抗氧化能力。
在这个方法中，还原剂（如抗氧化剂）会与Fe3+反应，生成Fe2+，并且Fe2+的浓度可以通过测量其吸光度来确定。
浓度越高，吸光度越高，表明样品的抗氧化能力越强。
这三种抗氧化活性测定方法各有其优势和适用范围。
DPPH自由基清除法适用于评估样品对自由基的清除能力，但其结果受其他化合物的影响较大；ABTS自由基清除法对于水溶性和脂溶性样品均适用，但其结果也受其他化合物的影响；铁还原能力测定法适用于样品中还原型物质的测定，可评估样品对金属离子的还原能力。
因此，在实际应用中，可以根据需要选择适合的方法来评估样品的抗氧化活性。
抗氧化 方法
DPPH法是测定物质抗氧化性能的一种快速简便的方法。
DPPH是一种很稳定的以氮为中心的自由基, 在特定波长(515nm下有最大吸收)下测定DPPH与抗氧化物质反应前后吸收值的变化可定量测定被测物质的抗氧化能力，若受试物能清除它,则提示受试物具有降低羟自由基、烷自由基或过氧自由基的有效浓度和打断脂质过氧化链反应的作用。
一、实验方法用微量移液器按表1的体积准确吸取C1、C2、S1、S2四组样液加入96孔板中，室温避光孵育30min后，用酶标仪测定在492nm（我们实验条件下）处的吸光度。
为消除无水乙醇与样品溶液引起的吸光度，分别设定对照空白与样品空白。
所用试剂与DPPH清除率计算公式如下：DPPH：0.25mM 无水乙醇配制，现配现用；DPPH清除率(%)={1 - (S1– S2) / (C1– C2)} × 100(S1、S2、C1、C2分别为样品、样品空白、对照、对照空白的OD492nm)。
表1 样品试剂用量表C1C2S1S2无水乙醇(μL) 样品(μL) DPPH(μL)合计(μL) 100100200200200100100200100100200即2,2‘-azino-di(3-ethylbenzthiazoline6-sulfonic acid，该方法是以这种水溶性的自由基引发剂为显色剂。
ABTS与过硫酸钾反应生成稳定的蓝绿色阳离子自由基ABTS·+，向其中加入被测物质，如果该物质中存在抗氧化成分，则该物质会与ABTS·+发生反应而使反应体系褪色，然后在ABTS·+这种自由基的最大吸光波长下(一般选择734nm) 检测吸光度的变化来反映物质的抗氧化能力。
1、ABTS工作液的配制准确称量ABTS粉末溶于过硫酸钾(终浓度为2.45mM)配制为7mMABTS溶液，室温放置12-16h以备用。
实验前用无水乙醇稀释至其OD630nm=0.70(±0.02),标准曲线如下:表2不同浓度的ABTS自由基在630nm处光吸收值(OD)由表2知，实验应选择0.3mM的ABTS。
铜箔表面抗氧化处理
铜箔表面抗氧化处理
铜箔是一种常见的导电材料，但它容易氧化，导致表面出现氧化层，降低其导电性能。
为了提高铜箔的抗氧化能力，常采用以下方法进行表面抗氧化处理：
1. 化学抗氧化处理：可以使用化学方法将表面的铜箔和氧气之间形成一层化学保护膜，以防止进一步的氧化。
常用的方法包括浸泡在含有化学物质的溶液中，如含有二硫化碳的溶液、含有醋酸铜的溶液等。
2. 电化学抗氧化处理：利用电化学原理，在铜箔表面产生一层保护性的氧化物膜（如Cu2O、CuO），以防止进一步的氧化。
该方法可以通过电沉积或阳极氧化的方式实现。
3. 真空抗氧化处理：将铜箔放置在真空环境中加热，通过减少氧气的存在，减缓氧化反应的进行，达到抗氧化的效果。
4. 化学镀膜抗氧化处理：将铜箔表面进行化学镀膜，常用的镀膜材料有镀锡、镀银等。
镀膜可以形成一层保护膜，降低铜箔表面的氧化速度。
需要注意的是，不同的抗氧化处理方法适用于不同的具体应用场景，选择合适的方法需要根据实际需求和条件来确定。
测定抗氧化的六种方法是
测定抗氧化的六种方法是
1.自由基清除能力测定法：通过测定样品对自由基的清除能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括DPPH（2,2-二苯基-1-苦基肼）自由基清除法和ABTS（2,2'-联氨基二-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)）自由基清除法。
2.氧化还原能力测定法：通过测定样品在氧化还原反应中的电子接受能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括还原能力测定法和Ferric reducing antioxidant power（FRAP）法。
3.金属离子螯合能力测定法：通过测定样品对金属离子的螯合能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括铁离子螯合能力测定法和铜离子螯合能力测定法。
4.脂质过氧化抑制能力测定法：通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括脂质过氧化抑制能力测定法和TBARS（硫代巴比妥酸反应物）测定法。
5.蛋白质氧化抑制能力测定法：通过测定样品对蛋白质氧化的抑制能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括蛋白质碳氧化酶活性测定法和蛋白质过氧化物酶活性测定法。
6.细胞抗氧化能力测定法：通过测定样品对细胞内氧化应激的保护作用来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括细胞活力测定法和细胞内氧化应激指标测定法。
抗氧化能力分析方法
抗氧化能力分析方法抗氧化能力分析方法是评估物质对氧化损伤的抵抗能力的一种方法。
氧化损伤是指由于自由基和其他氧化物质的作用而导致的细胞和组织的损伤，与许多疾病的发展有关。
抗氧化能力分析方法可以帮助我们了解物质的抗氧化能力，进而在食品、医药和化妆品等领域中的应用。
以下是几种常用的抗氧化能力分析方法：1.自由基清除能力分析法：自由基清除能力是物质对自由基的消除能力，常用的分析方法包括DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法和超氧阴离子自由基清除法等。
这些方法通过测定物质与自由基反应后的颜色变化来评估其抗氧化能力。
2.还原能力分析法：还原能力是物质还原氧化剂的能力，可以通过测定物质与还原剂反应后的颜色变化来评估。
常用的方法有铁还原能力法、铁螯合能力法和硫酸钼蓝法等。
3.抗氧化酶活性分析法：抗氧化酶是一类能够清除自由基和其他氧化物质的酶，包括超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和谷胱甘肽还原酶（GR）等。
通过测定这些酶的活性，可以评估物质对氧化损伤的抵抗能力。
4.氧化指标分析法：氧化指标是反映物质氧化损伤程度的指标，通常通过测定脂质过氧化产物、蛋白质氧化产物和DNA氧化产物等来评估。
常用的方法有TBARS法、氧化还原电位法和免疫学方法等。
5.细胞实验分析法：细胞实验可以模拟体内环境，通过测定细胞对氧化损伤的抵抗能力来评估物质的抗氧化能力。
常用的方法有细胞存活率测定法、DNA损伤测定法和细胞色素C释放法等。
综上所述，抗氧化能力分析方法有多种不同的方法，可以通过测定自由基清除能力、还原能力、抗氧化酶活性、氧化指标和细胞实验等来评估物质的抗氧化能力。
这些方法在食品、医药和化妆品等领域中的应用，有助于筛选和评估具有抗氧化性能的物质，为开发新的抗氧化剂提供科学依据。
金属抗氧化方法
金属抗氧化方法
金属抗氧化可以采用以下几种方法：
1. 镀层：将金属表面涂覆上一层非易失性材料，如镀铬、镀锌等。
这种保护层能够隔绝空气和水分，阻止氧化反应，从而达到抗氧化的效果。
2. 涂层：用漆等材料覆盖在金属表面，以隔绝空气和水分，阻止氧化反应。
这种方法在金属制品的保养中很常见。
3. 封闭：将金属制品密封起来，例如使用塑料袋或其他密封材料，避免空气和水分的接触。
这种方法的适用范围有限，对于大规模的金属制品不便于实施。
4. 使用防腐剂：使用特殊的化学物质，如油脂、石油制品等，可以减缓金属表面的氧化反应，从而防止生锈。
这种方法需要定期添加防腐剂，维护成本较高。
5. 维护保养：定期清洁与涂抹护理油，以保持金属表面干燥、清洁，并填补表层的微瑕疵，减弱水分、空气对金属的影响。
这种方法需要耗费一定的人力物力，且不能完全防止金属氧化。
6. 合适的环境条件：将金属制品放置在干燥、通风、温度适宜的环境中，避免长时间暴露在潮湿或者高温多湿等不良的环境中。
这是从环境角度降低金属氧化的概率，需要严格控制环境条件。
7. 阳极保护：通过在金属表面插入比金属更易氧化的金属，使其成为阳极，以起到防腐作用。
这种方法需要使用额外的金属材料，成本较高。
8. 使用不易氧化的金属材料：例如不锈钢。
不锈钢具有较好的抗氧化性能，但成本也相对较高。
以上方法各有优缺点，可以根据实际情况选择适合的方法来抗氧化。
常见体外抗氧化实验方法-抗氧化试验-抗氧化活性实验方法-抗氧化测定法-李熙灿Xican Li
常见体外抗氧化实验方法(含原理、试剂配制、操作流程、实例分析、英文表述)- 2023-3①DPPH·自由基清除法 2 Array②ABTS·+自由基清除法 5③ FRAP法(铁还原法) 811④过氧自由基(超氧自由基，·O2-)清除法(连苯三酚自氧化法)⑤羟基自由基(·OH)清除法(脱氧核糖法) 14⑥PTIO·自由基清除法(水溶液中) 16⑦ CUPRAC法(铜还原法) 18⑧铁络合能力(Ferrozin法) 20⑨脂质过氧化清除法(亚油酸为底物) 23⑩抗氧化产物的预测26①DPPH·自由基清除法/DPPH法原理：DPPH·（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical）即α, α-二苯基-β-苦基肼基游离基，由于p-π共轭，所以，氮自由基能稳定存在[1]。
当DPPH自由基被某物质清除，其最大吸收波长519nm处的吸光度A值随之减小；相应地，某物质自由基清除活性增加，其体外抗氧化活性也增加。
实验操作[1]:1.1 DPPH测试液的配置（适用于酶标仪测量，总体积为100μL）取DPPH 2毫克溶于约40mL溶剂（乙醇、95乙醇或甲醇）中，超声5min，充分振摇，务使上下各部分均匀。
取DPPH溶液80μL加入到96孔板中，加95乙醇（或无水乙醇）20μL，稀释混合，测A值，使A＝0.20±0.01。
该DPPH溶液避光保存，4h内用完。
（注意：如果是用分光光度计．．．．．，则A＝0.6±0.02比较合适）1.2 样品液的配置样品用合适的溶剂溶解，为便于计算，可配成1mg/mL浓度。
溶剂根据样品的极性进行选择，首选95乙醇或无水乙醇，如不溶可用DMSO。
1.3 预试取DPPH溶液80μL，往其中加少量样品液，加样时，先少后多渐加，边加边混合，并观察溶液的褪色情况，当溶液颜色基本褪去时，记下样品的加样量。
抗氧化性测定方法
抗氧化性测定方法
抗氧化性测定方法是一种用于测试物质对氧气自由基、过氧化物和其他氧化性物质的抵抗能力的方法。
以下是常见的抗氧化性测定方法：
1. DPPH自由基清除法：使用一种紫色自由基DPPH，通过测定反应前后DPPH 吸收峰的差异来评估样品的自由基清除能力。
2. ABTS自由基清除法：使用一种蓝色自由基ABTS，通过ABTS的光谱变化来衡量样品对自由基的清除能力。
3. ORAC法：利用ORAC反应器测量被测样品对氧化过程中产生的自由基的清除能力。
4. FRAP法：利用FRAP反应器测量被测样品对铁离子的还原能力。
5. TAC法：通过测量总抗氧化能力评价样品的抗氧化能力。
6. 超氧化物歧化酶(SOD)活力测定法：利用SOD对超氧化物的清除作用来评估物质的抗氧化能力。
以上方法中，DPPH和ABTS自由基清除法是较常用的评估抗氧化性的方法。
抗氧化性是很多食品和保健品评估其品质和功效的重要指标，因此，准确测定物质
的抗氧化性对于推广新产品、提高产品质量和开发功能性食品有着重要意义。
抗氧化性测定方法
抗氧化性测定方法1.1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）法这是一种广泛应用的测定方法。
DPPH是一种深紫色的自由基，在接触到具有抗氧化能力的物质后会发生漂白反应。
在测定中，样品与DPPH 一起加入观察和记录，在吸收强度的变化可以反映出物质的抗氧化能力。
2.金属还原力抗氧化活性法（FRAP法）FRAP法基于物质的还原能力，测定物质对铁（Fe3+）的还原能力。
在该方法中，加入已知浓度的Fe3+溶液，并随着物质还原能力的增强，Fe3+逐渐被还原成可溶性Fe2+。
通过检测Fe2+的浓度变化，可以评估样品的抗氧化能力。
3.缩合亚硝酸盐法（NBT法）NBT法利用物质对亚硝酸盐的还原能力来测定其抗氧化能力。
NBT是一种黄色水溶性化合物，在接触到自由基后会转变为蓝色NBT还原物。
通过测定蓝色NBT还原物的吸光度，可以评估样品的抗氧化能力。
4.过氧化物过氧化物是一类非常有活性且具有氧化性的分子，在测定中被用作产生自由基的刺激源。
通过观察或测定样品与过氧化物产生的氧化反应，可以评估样品的抗氧化能力。
5.水溶性抗氧化能力（ORAC）法ORAC法是一种相对来说较复杂但更接近生物体内抗氧化能力的测定方法。
通过测定物质与自由基的竞争反应，以及维持反应平衡的时间，可以评估样品的抗氧化能力。
6.单线态氧发射（SOS）法SOS法是一种测定样品对单线态氧（1O2）的能力的方法。
在该方法中，通过检测样品对单线态氧的发射能力，评估其对自由基氧化损伤的能力。
在实际应用中，可以根据需要选择适当的抗氧化性测定方法，或者使用多种方法综合评估样品的抗氧化能力。
除了上述几种方法，还有其他一些方法如总抗氧化能力（TAC）法和细胞抗氧化测试（CAT）等方法也可以用于抗氧化性测定。
建筑材料的抗氧化与防氧化性能评价
建筑材料的抗氧化与防氧化性能评价在建筑行业中，材料的抗氧化与防氧化性能对于建筑的使用寿命和安全性具有重要影响。
本文旨在评价建筑材料的抗氧化与防氧化性能，并探讨其在建筑工程中的应用。
第一节：抗氧化性能评价方法抗氧化性能指材料在暴露于氧化条件下，能够有效地防止氧化反应的能力。
常用的评价方法有以下几种：1. 氧化指数氧化指数是评估材料抗氧化性能的标准之一。
通常采用热重分析法，通过材料在高温下的质量损失情况来计算。
氧化指数越低，代表材料的抗氧化能力越强。
2. 酸值测定酸值测定是评估材料抗氧化性能的另一种方法。
通过测量材料中产生的酸性物质含量来判断其抗氧化能力。
酸值测定结果越低，说明材料抗氧化性能越好。
3. 比较试验比较试验是一种直观的方法，通过将不同材料置于相同环境下，观察其抗氧化情况来评估其性能差异。
这种方法适用于材料之间的抗氧化性能差异较大的情况。
第二节：建筑材料的抗氧化性能在建筑工程中，许多材料需要具备一定的抗氧化性能以延长其使用寿命。
以下是常见建筑材料的抗氧化性能评价：1. 金属材料金属材料容易受到氧化的影响，因此需要具备较强的抗氧化性能。
常见的评价指标包括金属材料的腐蚀速率和电化学性能。
例如，不锈钢具有较高的抗氧化性能，可以在恶劣环境中长期使用。
2. 混凝土材料混凝土中的钢筋容易因长期暴露于潮湿环境中而产生氧化反应。
评价混凝土材料的抗氧化性能时，需要考虑混凝土的抗渗漏性、紧密性以及添加剂的使用情况。
同时，在混凝土材料的生产和使用过程中，对于材料的密封性和防水性也需要重视。
3. 聚合物材料聚合物材料对氧化敏感，并且容易受到紫外线的影响。
因此，评价聚合物材料的抗氧化性能需要考虑其耐候性、热稳定性以及防紫外线性能等。
例如，建筑中常用的塑料材料可以添加抗氧化剂来提高其抗氧化性能。
第三节：建筑材料的防氧化性能防氧化性能是指材料对外界氧化物的侵蚀能力，即在外界氧化条件下材料自身不发生氧化反应，并能有效保护材料表面。
抗氧化性测定方法
3. 2. 3 冬枣多酚含量的测定（1）福林-肖卡试剂（Folin-ciocalteu）的配制称取100克钨酸钠和25克钼酸钠，将两者溶于700mL水中，倒入2L的圆底烧瓶中，再加入50mL85%的磷酸和100mL浓盐酸，放入几粒玻璃珠，给烧瓶连上回流冷凝器，用文火回流10h（可不连续）;回流后用50mL蒸馏水冲洗冷凝管上的附着物，然后取下，加150克硫酸锂和几滴溴水（边加边摇直至溶液变黄），加热煮沸15min，（注：最后的颜色应是黄色，不带丝毫的蓝色绿色，发绿即不得使用）。
冷却后转移到1L的容量瓶中，用水定容至刻度，过滤贮存于棕色瓶中备用（2）多酚标准曲线的绘制取洁净干燥试管7支，分别标号0-6，分别加入预先配制的0.4mg/mL的没食子酸0，0.05，0.1，0.15，0.2，0.25，0.35mL，再分别加入双蒸水，2，1.95，.1.9，1.85，1.8，1.75，1.7，1.65mL。
将储存备用的福林肖卡试剂稀释3倍，于7支试管中分别加入1mL，将7支试管振荡摇匀，静置3-4min，再于7支试管中分别加入10%的碳酸钠各1mL，放入25℃恒温水浴中2h。
进行全波长扫描，在765 nm处有最大吸收波长，在此波长下测定不同浓度标准溶液的吸光值，绘制多酚浓度与吸光度的标准曲线。
（3）测定将上述八种原液稀释相应倍数之后，各取0.1mL于试管中，在各加入1.99mL双蒸水，其余操作同标准曲线绘制，于765nm波长处测定吸光值。
2.3.2多酚含量测定2.3.2.1多酚标准曲线的制作[5]准确称取没食子酸标准品200mg，加少量70%乙醇将样品溶化，用70%乙醇定容至100mL，摇匀，静置。
再用移液器吸取20mL，用70%乙醇定容至100mL，摇匀，配成浓度为400µg/mL 的没食子酸标准溶液，待用。
准确吸取浓度为的没食子酸标准溶液0,0.05,0.1,0.15,0.2,0.25,0.35ml于试管中。
抗氧化性测定方法
3. 2. 3 冬枣多酚含量的测定（1）福林-肖卡试剂（Folin-ciocalteu）的配制称取100克钨酸钠和25克钼酸钠，将两者溶于700mL水中，倒入2L的圆底烧瓶中，再加入50mL85%的磷酸和100mL浓盐酸，放入几粒玻璃珠，给烧瓶连上回流冷凝器，用文火回流10h（可不连续）;回流后用50mL蒸馏水冲洗冷凝管上的附着物，然后取下，加150克硫酸锂和几滴溴水（边加边摇直至溶液变黄），加热煮沸15min，（注：最后的颜色应是黄色，不带丝毫的蓝色绿色，发绿即不得使用）。
冷却后转移到1L的容量瓶中，用水定容至刻度，过滤贮存于棕色瓶中备用（2）多酚标准曲线的绘制取洁净干燥试管7支，分别标号0-6，分别加入预先配制的0.4mg/mL的没食子酸0，0.05，0.1，0.15，0.2，0.25，0.35mL，再分别加入双蒸水，2，1.95，.1.9，1.85，1.8，1.75，1.7，1.65mL。
将储存备用的福林肖卡试剂稀释3倍，于7支试管中分别加入1mL，将7支试管振荡摇匀，静置3-4min，再于7支试管中分别加入10%的碳酸钠各1mL，放入25℃恒温水浴中2h。
进行全波长扫描，在765 nm处有最大吸收波长，在此波长下测定不同浓度标准溶液的吸光值，绘制多酚浓度与吸光度的标准曲线。
（3）测定将上述八种原液稀释相应倍数之后，各取0.1mL于试管中，在各加入1.99mL双蒸水，其余操作同标准曲线绘制，于765nm波长处测定吸光值。
2.3.2多酚含量测定2.3.2.1多酚标准曲线的制作[5]准确称取没食子酸标准品200mg，加少量70%乙醇将样品溶化，用70%乙醇定容至100mL，摇匀，静置。
再用移液器吸取20mL，用70%乙醇定容至100mL，摇匀，配成浓度为400µg/mL 的没食子酸标准溶液，待用。
准确吸取浓度为的没食子酸标准溶液0,0.05,0.1,0.15,0.2,0.25,0.35ml于试管中。
抗氧化活性测定方法的比较
抗氧化活性测定方法的比较1.DPPH自由基清除法：DPPH是一种紫色自由基，具有很强的吸收特性。
该方法通过测定样品对DPPH自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。
这种方法简单、快速，广泛用于抗氧化活性的初步筛选。
但是该方法只能反映样品对一种自由基的清除能力，不能全面评估其抗氧化性能。
2.ABTS自由基清除法：ABTS是一种蓝色自由基，其吸收波长与DPPH不同，具有更广的吸收范围。
该方法通过测定样品对ABTS自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。
与DPPH法相比，ABTS法可以更全面地评估样品的抗氧化性能。
但是该方法需要较长时间才能得到准确结果。
3.过氧化氢清除法：该方法通过测定样品对过氧化氢的清除能力来评估其抗氧化活性。
过氧化氢是一种常见的氧化剂，可以导致细胞损伤。
该方法简单、快速，适用于多种样品的抗氧化活性测定。
但是过氧化氢法只能评估样品对过氧化氢的清除能力，不能反映其对其他自由基的清除能力。
4.铁离子还原能力法：该方法通过测定样品对Fe3+的还原能力来评估其抗氧化活性。
Fe3+是一种常见的氧化剂，可以与还原剂发生反应，形成Fe2+。
该方法简单、快速，适用于多种样品的抗氧化活性测定。
但是铁离子还原能力法只能评估样品对Fe3+的还原能力，不能全面评估其抗氧化性能。
5.脂质过氧化抑制能力法：该方法通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力来评估其抗氧化活性。
脂质过氧化是一种常见的氧化反应，可以导致脂质的氧化损伤。
该方法能够全面评估样品的抗氧化性能，适用于多种样品的抗氧化活性测定。
但是该方法操作繁琐，需要较长时间才能得到准确结果。
总体来说，不同的抗氧化活性测定方法各有优劣。
在实际应用中，可以根据需要选择适合的方法进行测定。
此外，多种方法的综合比较可以更全面地评估样品的抗氧化性能。
抗氧化能力检测方法如何选择
抗氧化能力检测方法如何选择1.避免氧自由基法避免氧自由基法是一种常用的营养物质抗氧化能力检测方法，通过测定物质对人工合成的活性氧自由基的清除能力来反映其抗氧化能力。
常用的活性氧自由基包括DPPH自由基和ABTS自由基。
该方法简单易行，适用于大批量样品处理。
2.过氧化氢降解法过氧化氢降解法是一种定量测定物质抗氧化能力的方法，通过测定物质对过氧化氢的消耗程度来评估其抗氧化能力。
该方法操作简便，适用于多种样品类型。
3.金属离子螯合能力法金属离子螯合能力法是一种常用的抗氧化能力检测方法，通过测定物质对金属离子的螯合能力来评估其抗氧化性能。
常用的金属离子包括铁离子、铜离子等。
该方法适用于多种样品类型，尤其适用于检测多酚类化合物的抗氧化能力。
4.体外细胞模型法体外细胞模型法是一种模拟人体细胞环境，通过测定物质对细胞的氧化损伤程度来评估其抗氧化能力。
常用的细胞模型包括人类肝细胞HepG2、人类白血病细胞HL-60等。
该方法较为贴近真实的生理环境，但操作较为繁琐。
5.动物模型法动物模型法是一种模拟人体内环境，通过测定物质对动物体内氧化损伤程度来评估其抗氧化能力。
常用的动物模型包括小鼠、大鼠等。
该方法能够更好地反映物质的抗氧化能力，在药物研发领域较为常见，但需注意动物伦理和实验条件等问题。
在选择抗氧化能力检测方法时，需要综合考虑实验目的、被测物的特性、实验条件、预算等因素。
有时需要结合多种方法来评估物质的抗氧化能力，增加研究可靠性。
同时，还需注意选择已经被广泛验证和接受的方法，以确保实验结果的准确性和可重复性。
抗氧化测定原理
抗氧化测定原理
抗氧化测定原理是通过测量样品当中的抗氧化能力来评估其对抗氧化作用的能力。
抗氧化作用是指物质能够防止或延缓氧化反应的能力。
常用的抗氧化测定方法包括自由基清除能力测定、还原能力测定、过氧化氢酶活性测定等。
这些方法依据不同的原理来评估样品的抗氧化能力。
自由基清除能力测定是一种常用的抗氧化测定方法。
该方法基于自由基反应与试剂的反应，通过测量试剂的消耗或生成来评估样品的抗氧化能力。
常用的自由基清除能力测定方法包括DPPH（二苯基肼）法、ABTS（2,2'-偶氮二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸铵)盐）法和FRAP（铁还原能力试剂）法等。
还原能力测定是另一种常用的抗氧化测定方法。
该方法基于标准还原电位的测定，通过测量样品对氧化还原反应的贡献来评估其抗氧化能力。
常用的还原能力测定方法包括Ferric reducing antioxidant power (FRAP)法、Cupric reducing antioxidant capacity (CUPRAC)法等。
过氧化氢酶活性测定是一种用于评估抗氧化能力的酶活性测定方法。
通过测量样品对过氧化氢酶的激活或抑制作用来评估其抗氧化能力。
这种方法常用于评估抗氧化剂对酶活性的影响。
总之，抗氧化测定的原理是通过不同的方法测量样品的抗氧化能力，以评估其抗氧化作用的能力。
这些方法可以提供有关样
品抗氧化性能的信息，对于研究抗氧化剂以及评估其应用领域具有重要意义。
抗氧化性测定方法
抗氧化性测定方法抗氧化性是指抗氧化物质对有害氧自由基的清除能力。
现代研究表明，氧自由基与许多疾病的发生和发展密切相关，如心血管疾病、癌症、阿尔茨海默病等。
因此，研究抗氧化性成为了一个重要的领域。
目前，常用于测定抗氧化性的方法有多种，包括化学方法、体外细胞试验、动物模型试验以及临床试验等。
以下将介绍其中一些常用的抗氧化性测定方法。
1.单位面积清除DPPH自由基法该方法利用DPPH自由基（2,2-二苯基-1-苦基肼）的紫色消退来测定样品的抗氧化能力。
实验中，将待测样品与DPPH自由基溶液混合，反应一段时间后，通过测量反应液的吸光度来评估样品的抗氧化能力。
抗氧化能力越强，吸光度下降越大。
该方法简单快速，常用于蔬菜、水果、茶叶等样品的抗氧化性测定。
2.生化物质抗氧化方法该方法通过测定待测样品对生化物质抗氧化能力的影响来评估其抗氧化性。
常用的生化物质包括DNA、脂质、蛋白质等。
例如，可以通过测定DNA的损伤程度来评估样品对DNA的保护能力。
DNA损伤越小，样品的抗氧化能力越强。
3.氧化还原能力测定方法该方法通过测定待测样品的氧化还原能力来评估其抗氧化性。
常用的氧化还原指标包括总抗氧化能力（TAC）、还原力（FRAP）以及氧化标志物（如谷胱甘肽、超氧化物歧化酶等）。
根据测得的氧化还原能力数值，可以评估样品的抗氧化性能。
4.活细胞抗氧化能力测定方法该方法通过使用活细胞进行体外试验，评估待测样品对细胞的保护能力。
常用的细胞包括人类乳腺癌细胞（MCF-7）、人类肝癌细胞（HepG2）等。
实验中，将细胞暴露在氧化应激条件下，并添加不同浓度的待测样品，通过测定细胞的存活率、DNA损伤程度、抗氧化酶活性等指标，来评估样品的抗氧化能力。
综上所述，抗氧化性测定方法具有一定的操作性、精确性、重现性以及规范性，在研究和评价抗氧化性方面发挥了重要的作用。
然而，不同的测定方法适用于不同的样品和需要，需根据具体情况选择合适的方法。
范围广泛的研究表明，物质的抗氧化能力与其健康益处或营养效应之间有着密切的关联，抗氧化性测定方法的研究也将进一步推动抗氧化物质的开发和应用。
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取0.2mL 甲醇，加入0.3 mL样品溶液（浓度50-800ug/mL ,甲醇配制），混匀，加入2.5mL 75uM DPPH（甲醇溶解）溶液，室温放置30min ,于517nm处测吸光值。
清除率=[A0-（A-A b）/A0]×100%
A0：不加入样品，DPPH吸光值（对照）
A：样品和DPPH吸光值
A b：样品，不加DPPH吸光值
2 O2-·
PMS吩嗪硫酸甲酯
NADH 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
NBT氯化硝基四氮唑蓝
0.1mL 样品溶液，加入1mL 16 mM Tris-HCl (pH 8.0)---78uM NADH, 1mL 16 mM Tris-HCl (pH 8.0)- --10uM PMS ，1mL 16 mM Tris-HCl (pH 8.0)- --50uM NBT, 25min保温5 min后于560 nm 处吸
光值。
清除率=（1-A
样品/A
对照
）×100%。
3 邻苯三酚自氧化
0.1mL 样品溶液，加入2.8mL 0.05M Tris-HCl (pH 8.0)---1mM EDTA,加入0.2mL 6mM 邻苯三酚。
室温迅速振摇，于325nm处每30s 测吸光值至4min。
清除率=（1-样品斜率/对照斜率）×100%
4 FRAP reagent：
10体积300 mmol/L pH3.6醋酸缓冲液,1体积10 mmol/L TPTZ---40 mmol/L HCl 溶液，1体积20mmol/L FeCl3.
1.5mL 新配制FRAP reagent加热至37℃,于593 nm处测空白吸光值。
然后加入50uL 样品溶液和150uL去离子水。
8min后测吸光值。
FRAP值=A样品-A空白
2.1 清除羟基自由基（HPLC法）
2.1.1色谱条件
色谱柱：Angilent HC-C18柱（(4.6×250mm，5um); 流动相：甲醇：0.1% H3PO4=30:70;流速：
1ml/min;柱温：35℃；紫外检测波长：254nm;进样量：20ul。
取1.5ml 0.18mmol/L对羟基苯甲酸，加入1.0ml蒸馏水，1.0ml 0.3%H2O2,，紫外照射30min前后进行HPLC分析计算清除率。
清除率=（空白反应后3,4-二羟基苯甲酸峰面积-样品反应后生成3,4-二羟基苯甲酸峰面积）/(空白反应后峰面积-空白反应前峰面积)
2.2 清除超氧阴离子（邻苯三酚自氧化）
0.1ml不同浓度的多糖溶液，加入5ml 0.05mol/L Tris-HCl buffer(pH 8.2),25℃水浴10min,加入0.2ml 6mmol/L 邻苯三酚，摇匀后每隔30s,4min内于325nm处测吸光值。
以0.1ml水代替多糖溶液，0.2ml水代替邻苯三酚作参比液，0.1ml水代替多糖溶液作对照溶液，其余同上述方法操作。
清除率=（1-样品斜率/对照斜率）×100%。
2.3 清除DPPH
反应体系:1ml浓度不同的多糖溶液，2ml0.6mmol/L DPPH,1ml 95%乙醇，2m0.6mmol/L DPPH加入3ml 95%乙醇作对照液，5ml 95%乙醇作参比，混匀后暗处反应30min,517nm处测定吸光值。
清除率=（1-A
样品/A
空白
）
2.4 分光光度计法测·OH
FeSO4溶液（1.8mmol/mL）:称取FeSO4晶体0.2736g，用水定容于100mL容量瓶中，使用时稀释9倍
H2O2（0.3%）：取30%的H2O2溶液1.0mL ，用水定容于100mL容量瓶中。
水杨酸-乙醇（1.8 mmol/mL）：取水杨酸固体0.2486g，用无水乙醇定容于100mL 容量瓶中，使用时稀释9倍。
向试管中加入一系列不同浓度多糖溶液1.0mL ，FeSO4溶液2.0mL，水杨酸-乙醇1.5mL，最后加H2O2 0.1mL 启动反应，振荡混合，水浴37℃，保温30min,在波长510nm下测量各自的吸光值。
以1.0mL蒸馏水代替多糖溶液，其余操作同上作为空白。
清除率=[(A0-A s)/A0]×100%
A0为空白管的吸光度，A s为加入样品后的吸光度。