201212 移液器、PCR仪和测序仪的使用与维护
移液器的使用注意事项这么多？还需要校准和修正？
移液器的使用注意事项这么多？还需要校
准和修正？
移液器又称移液枪，是一种用于定量转移液体的器具，被广泛用于生物、化学等领域和临床诊断试验室，生物技术试验室，药学和化学试验室，环境试验室，食品试验室的一种常用工具，常用的有手动可调移液器和电动的之分，详细还依据移取液体的容积的不同有很多可选规格。
移液器的使用方法移液器使用留意事项移液器快速校准的方法使用设备及物品：步骤：移液器的修正方法移液器的日常维护保养
（1）如长时间不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以爱护弹簧；
（2）定期清洁移液器外壁，可以用95%酒精或60%的异丙醇，再用蒸馏水擦拭，自然晾干；
（3）使用时要检查是否有漏液现象。
方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中，看看液面是否下降。
假如漏液，则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常；
（4）当移液器吸嘴内有液体时，严禁将移液器水平或倒置放置，以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞；
（5）使用正确的方法安装吸头，切记用力不能过猛，更不能实行剁吸头的方法来进行安装。
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移液枪的使用和维护
100 µl 500 µl 1000 µl
500 – 5,000 µl 100-1000µl
500 µl 2500 µl 5000 µl
1–
10 ml
1-10ml Standard
1000 µl 5000 µl
量程
第一一，移液器的量程范围一一般是其最大大量程到其最大大量程的10％。 第二二，对于同一一支支移液器，一一般随着其移液量的变小小，其精度也越来越小小。 一一般说来，当移液量为最大大量程的50％时，其精度比比最大大量程时略小小，但 变化不大大；当移液量为最大大量程的10％时，其精度与最大大量程时相比比会差 很多。 第三，一一支支移液器的最佳使用用量程范围是其最大大量程到其最大大量程的1/3 左右。如果您对精度有一一定的要求，一一般不建议在最大大量程的1/3到最小小 量程范围内使用用移液器。
0.5 - 1.0 µl
0.5-20µl
1 µl 5 µl 10 µl
2 - 20 µl
2-200µl
2 µl 10 µl 20 µl
10 - 100 µl
2-200µl
10 µl 50 µl 100 µl
20 - 200 µl
2-200µl
20 µl 100 µl 200 µl
100 – 1,000 µl 50-1000µl
1 控制钮— 第一一档：液体体积计量，吸入入并排出液体 第二二挡：吹出吸嘴内剩余液体 2 调节钮— 用用于设定移液量，对固定移液器而而言言， 此钮仅用用于调节功能 3 弹射键— 弹除吸嘴 4 调整开孔— 对移液器进行行调整时插入入扳手手 5 弹射套筒 6 多道移液器下半段 7 盖板 8 下半段分离键 9 外罩
移液枪的使用用 操作步骤
第一一步 设定移液体积
移液器的使用维护和校正规程
移液器的使用维护和校正规程移液器校正操作标准适用范围：1ml、2ml、3ml、5ml、10ml、15ml、20ml、50ml、100ml 单标线吸管的检定。
责任：检验人员对本规程的实施负责，检验室主任对本规程的有效执行承担监督检查责任。
校正规程：1. 检定的原理采用衡量法。
衡量法是用天平称量分度吸管中纯化水的质量，然后按照该温度下纯水的密度，算出单标线吸管的容积。
2. 检定项目和技术要求：2.1 单标线吸管的玻璃应清澈、透明。
2.2 分度线和量的数值应清晰、完整、耐久，分度线应平直，分格均匀并必须与器轴相垂直，相邻两分度线的中心距离应大于1mm。
2.3 单标线吸管应具有下列标记：2.3.1 厂名和商标2.3.2 标准温度（20℃）2.3.3 等待时间t xx S2.3.4 用法标记量出式用“Ex”2.3.5 标称总容量与单位xx ml2.3.6 准确度等级A、B2.4 容量允差、水的流出时间和分度线宽度均应符合下表之规定。
单标线吸管标称总容量（ml）1 2 3 5 10 15 20 25 50 100容量允差（ml） A ±0.007 ±0.010 ±0.015 ±0.020 ±0.025 ±0.030 ±0.05 ±0.08B ±0.015 ±0.020 ±0.030 ±0.040 ±0.050 ±0.060 ±0.10 ±0.16水的流出时间（S）A 7~12 15~25 20~30 20~35 25~35 35~45B 5~12 10~25 15~30 20~35 25~40 30~45分度线宽度（mm）≤0.43 .检定条件：3 .1 万分之一天平。
3 . 2温度范围0~50℃、分度值为0 .1℃的温度计。
3.3 分度值为0.1秒的秒表。
实验室移液枪的操作和维护
实验室移液枪的操作和维护移液枪的分类和工作原理气体活塞式移液枪工作原理：通过弹簧的伸缩运动，推动活塞，排除部分空气，利用大气压吸入液体，再由活塞推动空气排除液体。
塞式移液枪工作原理：通过分液管或吸头内活塞的连续运动移取和打出液体，活塞和液体直接接触，没有空气柱，适用于密度、黏度与水不同的液体，如易挥发性溶液、粘稠液体等。
移液枪使用诀窍气体活塞式移液枪1影响移液枪精度因素(1)温度：室温低时，手温较高，使得空气膨胀，吸入冷溶液时往往发生误差。
(2)气密性：吸头和枪体的结合部，以及枪内柱体之间的长期磨损，造成误差。
(3)吸速：容易造成吸头内气泡产生，而且会污染枪头。
(4)试剂的挥发：吸挥发性高的试剂时，蒸汽进入枪头，内压增高，结果在压出液体时，压力变大，而产生误差。
解决办法：反复抽吸4-5次就可改善。
2具体使用方法更换tip法：最精确。
(1)调节旋钮到所需刻度位置，诀窍：首先可略超过一些，再回旋至刻度。
注意禁止超过最大刻度，避免人为误差。
(2)插上tip:无菌操作时，要注意动作迅速正确，不能用手碰tip，动作的力度要保持一致，禁止废动作。
普通操作时，可用拇指食指上紧，但手不能碰tip尖端处。
(3)指压到第一段，tip尖端接触试剂。
白色tip进到液面1mm一下，黄色吸头2-3mm，蓝色吸头2-4mm，避免液压的影响造成的误差。
(4)缓慢吸试剂，禁止速度过快，液体进入枪头。
(5)移出吸头后，先在容器内壁轻轻靠住，使吸头外壁液体流下。
(6)将吸头贴在目标容器内壁，轻轻按到第一段，压出液体。
(7)吸头尖端在容器内壁略上滑动，保留尖端少量液体，移出目标容器，手指卸掉吸头，注意不要使试剂溅出。
一只吸头分注法：不适用于挥发性，有毒性试剂。
(1)同上述A-D，移出液面后，先缓慢按到第一段，在用力按到第二段，将试剂全压出。
(2)同上述C，缓慢吸出液体。
(3)在目标容器液体上空，压出试剂到第二段，注意压的力度要和A相同，还应注意试剂不要四处飞溅。
移液器的使用、保养及注意事项详解
吸液与放液
吸液操作
吸液时，先将吸头插入液体中，然后缓慢按下移液器的按钮，使 液体进入吸头。注意不要过快，以免液体倒吸入移液器内部。
放液操作
放液时，将吸头紧贴容器壁，先按下排放按钮的第一档，略作停 顿，再按至第二档排除余液。这样能确保吸头内无残留液体。
卸掉吸头与移液器的放置
01 卸掉吸头
按压卸载吸头的档位后，移液器会自动打 出吸头。注意卸掉的吸头一定不能与新的 吸头混放，以免产生交叉污染。
维护与保养
调整至最大量程刻度
不使用移液器时，应将其调至最大量程刻度处，使弹簧处于松弛状态，以保护弹簧并延 长使用寿命。
检查漏液现象
平时要注意是否有漏液现象。方法是在吸取液体后悬空垂直放置几秒，观察液面是否下 降。如有下降，需要检测吸头是否匹配或弹簧活塞是否正常。
定期校准与修正
校准的重要性
定期校准移液器是保证实验数据准确性的重要措施。根据厂家说明书进行定期的校准与修正，以确保移液器的准确性。
遵守实验室规定
遵守实验室的安全规定，正确使用移液器，确保实验安全。
移液器的选购与使用技巧
选购技巧
01
根据需求选择
在选购移液器时，要根据实验室的具体需求选择合适的类型和 容量范围。
02
考虑品牌和质量
选择知名品牌和质量可靠的移液器，以保证实验结果的准确性 和移液器的使用寿命。
使用技巧
01
熟悉操作流程
细胞培养
在细胞培养过程中，移液器用于转移细胞悬液和培养基， 保证细胞生长的均匀性和一致性。
化学实验室中的应用
标准溶液的配制
在化学实验室中，移液器用于准确配制标准溶液，为实验提供可靠的 数据支持。
01
样品分析
移液枪的使用与维护
工作原理移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。
在活塞推动下，排出部分空气，利用大气压吸入液体，再由活塞推动空气排出液体。
使用移液器时，配合弹簧的伸缩性特点来操作，可以很好地控制移液的速度和力度。
操作步骤1. 设定移液体积从大体积调节至小体积时，为正常调节方法，顺时针旋转刻度即可，从小体积调节至大体积时，可先逆时针调至超过设定体积的刻度，再回调至设定体积，可保证最佳的精确度。
2. 装配移液器吸头将移液器端垂直插入吸头，左右轻微旋转上紧吸头。
特别提示：用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的，长期这样操作，会导致移液器中的零部件因强烈撞击而松散，甚至会导致调节刻度的旋钮卡住。
3. 吸液和放液吸液↓吸头尖端垂直浸入液面3mm 以下↓慢吸慢放，控制好弹簧的伸缩速度↓放液时吸头尖端靠在容器内壁吸液的方法有：a. 预润湿吸液粘稠液体可以通过吸头预润湿的方式来达到精确移液，先吸入样液，打出，吸头内壁会吸附一层液体，使表面吸附达到饱和，然后再吸入样液，最后打出液体的体积会很精确。
b. 正向吸液正向吸液是指正常的吸液方式，操作时吸液可将按钮按到第一档吸液，释放按钮。
放液时先按下第一档，打出大部分液体，再按下第二档，将余液排出。
c. 反向吸液反向吸液是指吸液时将按钮直接按到第二档再释放，这样会多吸入一些液体，打出液体时只要按到第一档即可。
多吸入的液体可以补偿吸头内部的表面吸附，反向吸液一般与预润湿吸液方式结合使用，适用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体。
使用注意1.装配吸头时，移液器插入吸头，左右轻转旋转上紧吸头。
勿用移液器反复撞击吸头。
2. 选用与移液器匹配的，有质量保证的吸头。
3. 吸液时，移液器垂直吸液，做到慢吸慢放。
4. 吸头内含有未打出的液体时，将移液器垂直挂在移液器支架上，切勿移液器平置于桌面，否则吸头内的液体很容易污染移液器内部而可能导致弹簧生锈。
5. 移液体积需保证在移液器所提供的量程范围之内，不要用大量程的移液器移取小体积的液体。
移液器的使用与日常保养维护
内容简介： 1、加样枪的基础知识
5、加样枪的日常 维护保养
4、加样枪的校准
01
05
02
பைடு நூலகம்
04 03
2、加样枪的使用 方法
3、加样枪的使用 注意事项
I、 加样枪的基础知识
1、加样枪不使用时，应调至最大量程的刻度处，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧，延长使用寿命。
同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作
超过5%的则认为超出允许范围，不能再使用。
注意：1、如果移液量过大，则用倒退法移液时吸头内就没有额外空间容纳多余的剩余液体，因此本法常不适用于大量液体的移取。
重复操作移液法（适用于快速、简便地重复转移等量的同种液体。
4、判定标准：所有容量测定完毕后，%偏差在3%以内则在允许范围内。
从小量程调节至大量程时，应先调至超过设定体积刻度，再回调至设定体积，这样可以保证移液器的精确度
倒退移液法（适用于高粘度液体和/或容易起泡液体的移取，以 及极小量液体的移取。）
1、调好所需刻度，装上吸头后，将按钮向下压至第二停点位置。 2、将吸头浸入液面下2～3毫米深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。吸液完成后，将 吸头撤离液面并斜贴在试剂瓶的瓶壁上，以流去多余的液体。 3、轻轻压下按钮至第一停点，放出液体。 4、放液完成后，仍有少量不包括在移液量之内的液体留在吸头内，可将残留液体随吸 头一起扔掉，或放回原来的容器中。 注意：1、如果移液量过大，则用倒退法移液时吸头内就没有额外空间容纳多余的剩余 液体，因此本法常不适用于大量液体的移取。 2、当需移取4毫升以上粘稠或易起泡的液体时，可采用前进法吸取液体，然后将按钮 慢慢压至第一停点缓缓放出液体即可。此时，吸头外的液体需包括在移液量之内。
移液器保养
移液器保养
移液器是一种用于定量转移液体的器具，具有使用灵活、维护简便、体积小巧、携带便利等优点，被广泛用于生物、化学、科研等领域中。
移液器在使用中需要进行日常的维护保养，可以保证仪器的正常使用。
移液器维护保养要点
1、如较长时间不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧，不注意此点容易导致活塞无法回弹。
2、如果移液器每天都需要使用，则建议每三个月清洁并校准一次，可以用肥皂水或消毒乙醇，再用蒸馏水清洗，自然晾干。
3、清洁移液器步骤：(按如下操作)
(1) 按说明书拆开移液器。
(2)检查并擦拭灰尘和污迹。
(3) 只能用70%的乙醇擦拭，管嘴连件和推出器可浸泡在肥皂水或者异丙醇溶液中两小时。
有替换滤芯的型号产品要及时更换脏掉的滤芯，以保证腔体内的清洁。
(4)活塞、O形环和弹簧涂上硅油(没有硅油凡士林也可)。
(5) 装上并复原移液器。
注意：清洁后的移液器需要校准。
河南信诺仪器设备有限公司产品服务宗旨：
●向用户提供持续、高效、快捷的服务，构建优质服务品牌；
●建立完善的服务网络，向用户提供专业化、标准化、多元化，产品化服务；
河南信诺仪器设备有限公司售后服务宗旨：
●终身提供维修及维护服务，终身负责零配件的及时供应；
●终身免费提供技术咨询及技术支持服务；。
测序仪遗传分析仪安全操作及保养规程
测序仪遗传分析仪安全操作及保养规程随着遗传分析技术的不断发展，测序仪遗传分析仪在科学研究和生物医学领域中的应用越来越广泛。
随之而来的问题是如何正确地进行操作和保养，以确保设备的安全性和可靠性。
本文将简要介绍测序仪遗传分析仪的安全操作和保养规程。
安全操作规程1.遵守操作手册。
首先，用户应当认真阅读测序仪遗传分析仪的操作手册，并按照步骤进行操作。
操作手册中包括重要的安全说明和维护建议，用户必须遵守这些说明，以免发生安全事故或设备故障。
2.熟悉设备结构。
在操作测序仪遗传分析仪之前，用户应该熟悉设备的结构、部件和参数。
掌握这些信息有助于正确地进行操作，并避免不必要的损坏。
3.使用合适的工具和材料。
用户在进行维护和维修时，必须使用合适的工具和材料，以防止对设备造成不必要的损坏。
4.避免使用损坏的设备。
用户必须确认设备在运输和使用过程中没有受到损坏，如果发现损坏，应该立即停止使用。
5.使用防静电手环。
测序仪遗传分析仪灵敏的电子元件对静电电荷非常敏感。
在操作前，用户应戴上防静电手环，并将设备放在防静电工作台上。
6.定期清洁和维护设备。
设备在使用的过程中会积累灰尘和污垢，影响设备的运行。
用户应该定期清洁和维护设备，以确保设备的可靠性和使用寿命。
7.警惕设备的异常情况。
用户在使用设备时应始终保持警惕，及时发现设备的异常情况，并做出相应的处理。
保养规程1.定期清洁设备。
设备使用一段时间后会积累灰尘和污垢，影响设备的性能和寿命。
用户应该定期清洁设备，以确保设备的可靠性和使用寿命。
2.定期更换耗材。
测序仪遗传分析仪需要一些耗材，如电极、滤芯、滤网等。
这些耗材使用一段时间后需要更换，用户应该按照操作手册中的说明更换这些耗材。
3.注意存放和运输。
设备在存放和运输过程中需要注意防震、防水和防静电。
存放时应该放在干燥、洁净和防尘的环境中，运输时应该采取防震和防静电措施。
4.定期进行保养。
用户应该定期对设备进行保养，清洁设备和更换耗材。
移液枪的正确使用方法和日常保养清洗
实验室移液器的使用方法和日常保养前言：移液器作为生物实验室常用的实验仪器,定期清洁有着不可小觑的意义: 在实验过程中移液器经常会接触生物性的污染，如: DNA、RNA、微生物等，不进行定期清洁，容易导致实验受影响而失败，如PCR惧怕DNA、 RNA等核酸污染、细胞培养惧怕细菌、支原体污染;此外，实验人员也惧怕这些生物危险性的污染物危害健康。
移液器在实验中难免接触腐蚀性的液体，高盐浓度的液体，在操作失误的情况下，样品倒吸进入移液器内，腐蚀活塞，影响移液器性能，使得实验人员无法获得精准的移液结果，同样会导致研究失败。
越脏的移液器，越没人爱用和爱护，导致移液器使用寿命大大减少，不能物尽其用。
1 移液器的正确操作1.1 设定移液体积旋转移液器上端旋钮进行体积调节。
1000μL以下量程的移液器以μL为单位显示体积，5mL和10mL量程的移液器体积以mL为单位显示体积。
从大体积调节至小体积时，逆时针旋转至刻度即可；从小体积调节至大体积时，可先顺时针调过设定体积，再回调至设定体积，可保证最佳的精确度。
1.2 装配移液吸头对于单道移液器，将移液器末端垂直插入吸头，轻压上紧即可;对于多道移液器，将移液器的第一道对准第一个吸头，倾斜插入，前后稍许摇动上紧即可。
特别提示：♦移液器具有弹性吸嘴，无需用力也可保证气密性，同时确保吸头装配的均一性。
♦如使用5mL和10mL不带滤芯的吸头，请使用过滤器；如使用5mL或10mL带滤芯的吸头，则需要卸下移液器内的过滤器。
因为过滤器和滤芯会相互干扰，造成移液器的第一档控制档失效。
♦不可反复撞击移液器来确保吸头气密性，长期以这种方式装配吸头，会导致移液器的零部件因强烈撞击而松散，甚至会导致调节刻度的旋钮卡住。
1.3 吸液及放液1.3.1 吸液吸液时应采取垂直吸液，吸头尖端需浸入液面3mm吸液前枪头先在液体中预润洗。
1.3.2 放液放液时，应控制好弹簧的伸缩速度，慢吸慢放如果量很小时，吸头尖端可靠容器内壁。
移液器的使用与维护方法
移液器（移液枪）的使用与维护方法在进行分析测试方面的研究时，一般采用移液枪（pipette）量取少量或微量的液体。
对于移液枪的正确使用方法及其一些细节操作，是很多人都会忽略的。
现在分几个方面详细叙述。
1、量程的调节在调节量程时，用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。
在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
2、枪头（吸液嘴）的装配在将枪头（pipette tips）套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。
正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。
如果是多道（如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。
枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
3、移液的方法移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。
吸取液体时，四指并拢握住移液器上部，用拇指按住柱塞杆顶端的按钮，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2－3毫米，缓慢松开按钮，吸上液体，并停留1～2秒钟（粘性大的溶液可加长停留时间），将吸头沿器壁滑出容器，排液时吸头接触倾斜的器壁。
在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。
最后按下除吸头推杆，将吸头推入废物缸。
4、两种移液方法：4.1、一是前进移液法。
用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。
接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。
最后松开按钮。
4.2、二是反向移液法。
定量PCR仪的日常维护
定量PCR仪的日常维护定量PCR仪是一种常用的实验仪器，用于精确测定DNA的浓度和定量分析。
为了确保其正常运行和准确的实验结果，定量PCR仪需要进行日常维护。
以下是一些常见的维护步骤：1. 清洁：每次使用后，应将PCR仪的外壳和工作区域进行清洁。
可以使用无纺布蘸取少量乙醇擦拭仪器表面，确保无灰尘和污渍。
2. 检查灯泡：检查定量PCR仪中的灯泡是否运作正常。
如果发现灯泡不亮或发出昏暗的光，应及时更换。
确保灯泡的亮度和均匀度，以获得准确的测量结果。
3. 校准和验证：定量PCR仪的准确性和稳定性可能会随着时间而变化。
定期进行校准和验证是必要的。
可以使用DNA标准品，按照说明书的要求进行定量PCR检测，并与预期结果进行比较，以确保仪器的准确性和一致性。
4. 检查温控系统：PCR反应需要精确的温度控制。
检查温控系统的准确性和稳定性，确保温度控制在仪器规定的范围内。
如果发现温控系统有问题，应及时联系维修人员进行修理或更换。
5. 更换滤芯：PCR仪中的滤芯用于过滤空气中的灰尘和颗粒物，保护仪器内部的电子元件。
根据使用频率，定期更换滤芯可以延长仪器的使用寿命。
6. 更新软件和升级：随着技术的不断发展，PCR仪的软件也需要不断更新和升级。
定期检查仪器制造商的官方网站，了解是否有新的软件版本可供下载，并按照说明进行更新。
7. 记录日志：建立PCR仪的日常维护记录，包括维护日期、维护人员、维护项目和维护结果等信息。
这有助于及时发现仪器的问题，并为以后的维护和纠正措施提供参考。
定期进行以上的维护步骤可以保证PCR仪的正常运行和准确的实验结果。
同时，定期维护还可以延长仪器的使用寿命，节省实验时间和成本。
定量PCR仪是一种高度精密的实验仪器，广泛应用于分子生物学研究和临床诊断中。
为了确保PCR仪的正常运行和获得准确可靠的分析结果，日常维护是至关重要的。
以下是一些更详细的维护步骤和注意事项。
1. 清洁和消毒：定量PCR仪的外壳和工作区域是最容易受到污染的地方，因此每次使用后都需要进行彻底清洁。
移液器的使用校准及日常维护
移液器快速校准的方法
使用设备及物品：电子天平（测量范围200g；分度值0.1mg）；烧杯 （50ml）1个；烧杯（100ml）1个；定性滤纸若干小块；超纯水80ml
1 打开电子天平，空载调零； 2 放入小烧杯待天平显示稳定后，按下归零键归零。给移液 器上安装相应的吸液嘴，对移液器的枪头进行预洗； 3 将移液器的容量调至被检点。被检点一般选择最小，中间 和最大容量值。也可以是某一指定的容量点；
V m K t
式中：V ——在当前温度下的移液器的实际容量，μL； m ——被检移液器所排出的超纯水质量， mg； K(t) ——测定值m和测定时超纯水温度的比例系数； 移液器的容量相对误差计算：将换算得到的实际容量值带入以下公式，求得移液器在当前温度下的容量相对误差；
E
V V 100% V
式中：V ——标称容量，μL； V ——5次测量的算数平均值，μL 移液器的容量重复性计算：将换算得到的实际容量值带入以下公式，求得移液器在当前温度下的容量重复性；
S
n1
V
100%
式中：σn-1 ——标准偏差； n ——测量次数； S ——重复性；
移液器的评价标准
表 一 移 液 器 容 量 允 许 误 差 和 测 量 重 复 性
体 积 调 节 旋 钮
移液器的基本分类
排气式移液器是指移液器活塞与吸入液体上表面之间有空气柱，在操作中，被 移取的液体与活塞体之间因为空气柱的存在，将无法直接接触； 容积式移液器是指移液器活塞与吸入液体上表面之间没有空气柱，在操作中， 被移取的液体与活塞体之间因为没有空气柱的存在，将可以直接接触。
移液器的容量识别
标称容量：在给定的有效量程范围内最大的容量
例如标称容量为100μl的可调式移液器， 其有效量程是10μl-100μl，但实际上， 其最小值可调节到7μl左右，最大值可 调节到110μl左右，但这个范围7μl110μl并不是厂家所宣称的量程，也不 是该移液器的有效量程。
移液枪操作规范与保养维护
移液枪文件程序1.目的建立移液枪的操作规程，，使移液枪得到正确使用。
2.适用范围本公司标准使用的RAININ,Pipet-Lite PL 手动单道移液器3.职责实验员每人负责的移液器，并登录在册，简单的维护保养。
4．操作规程在对贵重样品移液之前，最好使用水吸液与分液。
4.1.设定目标量程4.1.1.逆时针方向扳动量程锁，使它斜着，然后设置移液枪溶剂大小。
4.1.2当开锁后，调整移液枪方向，确保可以看到量程指示器，然后转动活塞按钮该改变量程（逆时针转动为增加量程，顺时针转动为减少量程）自上而下读取量程指示窗口读数：2-20ul：黑色数字表示ul.红色数字：ul 的十分之一，百分之一。
100-200ul：所有数字为黑色：ul4.1.3安装新吸头。
使用足够的力气将套柄插入吸头，确保良好的封密性。
4.1.4将活塞按钮按至第一个停止点，并使其停止在此位置。
4.2吸液4.2.1.垂直手握移液器(或者在与垂直角度小于20°范围内)，将吸头浸入样品适当深度，然后放开对塞的压力。
轻质活塞弹簧将向上移动活塞，从而进行样品吸液。
不得松开活塞按钮，否则活塞会快速卡锁，从而产生不准确测量结果。
4.2.2暂停大约1秒钟（大容器移液器应延长时间），以确保将所有量样品吸入吸头。
4.2.3.将吸头与样品分离。
如果吸头外部依然存在任何液体，请使用无棉纤维布将其轻轻去除，注意不要触碰吸头开口。
4.3.分液4.3.1使吸头末端接触容器侧壁，然后缓慢按下活塞，使其通过第一个停止点到达第二停止点和吹液位置(按到底) 对于2-200 ul量程，等候1秒；(对于粘性溶液，请在到达吹出弹簧之前暂停。
)4.3.2依然手持活塞，沿容器壁滑动吸头使其收回，释放活塞。
4.3.3轻微按下吸头退出按钮将吸头取下。
每份样品需要更换新的吸头，以防样品残留。
执行下一个移液循环时重复此步骤。
4.4移液准则4.4.1.吸液与分液节奏一致。
4.4.2.移液时速度与平滑度一致。
PCR仪、DNA热循环仪的使用方法及注意事项
PCR仪、DNA热循环仪的使用方法及注意事项PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，它是使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段，它的每一循环包括在三种不同温度进行DNA变性、引物复性、DNA聚合酶催化的延伸反应的三个过程。
PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域，如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医学等等。
随着分子生物学的不断发展，PCR扩增技术也得到普及推广应用，因此了解PCR仪的性能，熟练掌握仪器的正确使用方法及使用过程中的注意事项，将是十分必要的。
现介绍PCR 扩增仪（Tl Thermocycler）的使用方法和注意事项。
1. 使用方法(1）接通电源开关，仪器进入准备状态；在显示屏上记录了当前仪器的温度和盖子（Lid）的温度。
若仪器正在运行时，须按“ B ”键（start/stop），才能退出运行并返回准备状态。
(2）编写程序段。
在准备状态下按“ C ”键(programs)进入编程状态，选定一程序号，然后按“enter”键，进入下一程序；按“A”(list)键后，选一文件号（empty program）；再按“enter”键，进入下一程序；按“ABC”键，进入下一程序，用上下左右键号选择一个字母（A、B、C、D、…），然后按“enter”键，进入下一程序；按“name ok”键，完成文件命名。
(3）设定盖子的温度。
“lid temp：℃”，盖子的温度一般比变性温度要高10℃，例如变性温度是95℃，那么盖子的温度就要设定为105℃。
待盖子预热后按“enter”键，进入下一程序。
(4）设定变性温度、变性时间、延伸温度、延伸时间、退火温度、退火时间及循环总数等参数。
从第一步依次按“enter”键进入，用四个移位键移动设定位置。
先设定温度，后设定时间，全部参数设置完后，按“pgm ok”键，所设定的程序自动被保存。
(5）运行程序。
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一、移液器的使用、校准与维护
8、记录称量值； 9、重复以上步骤10次，取得10次的称量值的平均值作为蒸 馏水的重量，按照蒸馏水Z因子表计算体积：体积=重量/Z 因子； 10、按照校准结果调节移液器。
每年应对移液器进行校准一次，可以送厂家进行校 准（最好），也可以自己简单校准
2016年11月28日9时38 分
※先吸取样品，然后排回样品池或废液槽 ※润洗有助于提高洗头多次相同移液操作的一致 性，一般可以提高0.5%的移液准确性
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一、移液器的使用、校准与维护
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一、移液器的使用、校准与维护
• 正向吸液：将移液器按钮按到第一档吸液，释放
按钮。放液时，先按到第一档，打出大部分液体， 再按下第二档，将余液排出。
方式即可；活塞清洁可用双蒸水，晾干即可。如
有必要，有些移液器、移液器的使用、校准与维护
3、移液器的消毒灭菌
● 121℃、1bar下，灭菌20min ● 用灭菌袋或牛皮纸包装灭菌部件
● 每次高温高压灭菌后，应进行性能检查。
每进行10次灭菌后，对活塞或密封件涂油脂 ● 紫外线照射灭菌 对移液器表面进行灭菌， 一般用在细胞培养室里
二、PCR仪的使用与维护
• 清洁反应模块和基座注意几点：
1、清洁散热片 使用软毛刷或湿布清除灰尘，可以保持样品 加热和冷却的精度
2、清洁反应模块孔 及时清除溢出液体以避免其风干，如使
用了清洁剂，应该用水冲洗多次以免残留。避免使用强碱
性溶液清洁模块，也不能使用油性物质清洁。
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4、来回吸吹蒸馏水3次，润湿吸头，用纱布拭干吸头外表； 5、垂直握住移液器，将吸头侵入液面2-3mm处，缓慢吸取 蒸馏水，停留1-3s； 6、提出吸头，靠在管壁，去掉吸头外部的液体； 7、以30角度放入称量烧杯中，缓慢一致放液，先按到第一
档，等1-3s,再按到第二档，使液体完成排出；
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一、移液器的使用、校准与维护
• 校准步骤
1、选定校准体积：A 拟校准体积；B移液器标定体积的中间 体积；C最小可调体积（不小于拟校准体积的1%）；D如
为固定体积移液器，则只有一种校准体积；
2、将移液器调至拟校准体积，选择合适的吸头；
3、调节好电子天平；准备小量杯
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一、移液器的使用、校准与维护
7、自动数据提取和分析
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三、测序仪的使用与维护
2016年11月28日9时38 分
三、测序仪的使用与维护
2016年11月28日9时38 分
三、测序仪的使用与维护
测序仪的维护
何时作光谱校正？
• 使用新的荧光染料
• 激光或CCD被调节或更换后
• 不同颜色的荧光间出现干扰（有拔起或下压峰）
二、PCR仪的使用与维护
3、清洁内盖 使用无毛软布和水清除内盖表面的碎屑和溶 液。不能使用磨擦性和粗糙的材料。 4、清洁外表面 使用湿布清除溢出外壁的液体，如有需
要可使用低浓度的肥皂液，但最后要用湿布擦干净。
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三、测序仪的使用与维护
ABI3130XL
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一、移液器的使用、校准与维护
● 去除DNA的污染
※10X储存液稀释1倍，将移液器
下半部分拆卸部件放入其中， 95℃侵泡30min ※用蒸馏水将部件冲洗干净 ※在60℃下烘干或完全晾干
※待冷却后，重新组装
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一、移液器的使用、校准与维护
一、移液器的使用、校准与维护
手温对聚乙烯和聚丙烯材质的影响
手温对移液误差的影响可以达到0.2%以上
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一、移液器的使用、校准与维护
（4）人为操作
不同使用经验者的比对
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一、移液器的使用、校准与维护
重复过度操作导致精密度下降
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使用厂家 配套的吸 头，更加 精确
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一、移液器的使用、校准与维护
10ul与300ul的吸头比较
在合适的范围量程内，尽量使用小量程的吸头
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一、移液器的使用、校准与维护
（3）温度
不同温度移液器吸液的对比
●移液器、吸头、液体同在室温
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4、移液器的密封性检查
● 绝大部分漏气的原因是，吸头不匹配、吸头质量不
合格、吸头未上紧、二次使用吸头、移液器本身气密 性不佳 ●目测法检查 200ul以下的移液器，先吸上水后，
将吸头侵入液面1-2mm，静待20s，观察是否液面下
降；1000ul及以上的移液器，将吸头朝下悬垂20s，
观察是否有液体下滴。
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一、移液器的使用、校准与维护
2016年11月28日9时38 分
一、移液器的使用、校准与维护
1、移液器的构造
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一、移液器的使用、校准与维护
2、移液器量程的设定
（1）选择合适量程 （2）旋转到所需量程 （3）所设量程在移液器量程范围内 （4）量程数字要清楚显示 （5）旋转要慢、匀速 大体积→小体积，逆时针旋转 小体积→大体积，顺时针超过预定刻 度，再回调
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一、移液器的使用、校准与维护
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一、移液器的使用、校准与维护
3、选择合适的吸头，最好是带滤芯的 4、样品的准备，室温放置平衡
液体温度＞吸头，移取的液体体积偏大
液体温度＜吸头，移取的液体体积偏小
2016年11月28日9时38 分
一、移液器的使用、校准与维护
5、装吸头
2016年11月28日9时38 分
一、移液器的使用、校准与维护
6、正确吸放液
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●吸头要侵入一定深度，因移取体积而定 ●慢吸慢放，控制好弹簧 ●停留一会
一、移液器的使用、校准与维护
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一、移液器的使用、校准与维护
●润洗洗头
※用同一样品对洗头进行润洗
2016年11月28日9时38 分
1、扩增前，开机预热30 min； 2、加样后离心，放置于热模块中；
3、合盖后，进行项目扩增程序编辑（一般都是预先编辑
好）； 4、设定编辑样本及荧光通道的选择； 5、分析结果。
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二、PCR仪的使用与维护
• 分析结果有手动模式、也有自动模式。有些品牌的 PCR仪还有其他的分析软件功能，比如在科学研究 中的基因表达。
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二、PCR仪的使用与维护
2016年11月28日9时38 分
二、PCR仪的使用与维护
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二、PCR仪的使用与维护
PCR仪的维护与保养
• 在仪器运行时，不能移动仪器、不能敞开或松动封盖 • 不能使用挥发性试剂，可能会导致爆炸并污染反应模块 • 不能再样本盖敞开或泄漏时运行程序，试剂可能会溢出， 造成模块、内盖、光学头的模糊和污染。
2016年11月28日9时38 分
二、PCR仪的使用与维护
2016年11月28日9时38 分
二、PCR仪的使用与维护
BIO-RAD CFX96
2016年11月28日9时38 分
二、PCR仪的使用与维护
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Lightcylce 480
二、PCR仪的使用与维护
PCR仪的使用
一、移液器的使用、校准与维护
（5）移液技术
甘油的移液
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反向比正向移液好， 电动多次移液比机械的好
一、移液器的使用、校准与维护
预润湿与未润湿的比较
预润湿3-5次效果较好
2016年11月28日9时38 分
一、移液器的使用、校准与维护
移液角度的比较
垂直吸液效果好
2016年11月28日9时38 分
2016年11月28日9时38 分
二、PCR仪的使用与维护
• 勿清洁或触摸内盖中加热器板孔后面的光学系统 • 定期清洁反应模块和内盖，防止积累污垢、危险生物 材料或荧光溶液 • 定期清洁外盖和C1000基座 • 定期清理磁盘，备份数据
2016年11月28日9时38 分
二、PCR仪的使用与维护
2016年11月28日9时38 分
2016年11月28日9时38 分
移液器常见故障及解决方案
2016年11月28日9时38 分
一、移液器的使用、校准与维护
移液器的校准
※室温20-25℃，波动范围不大于±0.5℃ ※电子天平：放于无震动无尘的台面，天平内相对湿度
60-90%
※测定液体：20-25℃的双蒸水
2016年11月28日9时38 分
2016年11月28日9时38 分
三、测序仪的使用与维护
2016年11月28日9时38 分
三、测序仪的使用与维护
3、软件设置 标记方法、毛细管长度、电泳胶的种类等 4、开始运行 不同的DNA片段从负极向正极移动
5、激发和检测 当标记有荧光素的DNA片段移动到检测窗， 就受到激发而产生信号 6、数据采集和处理
一、移液器的使用、校准与维护
误差的可能原因
2016年11月28日9时38 分