石蜡切片技术原理40页PPT
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石蜡切片技术课件
第25页，幻灯片共46页
二、固定的目的和效果 固定组织的目的是设法得到接近正常生命
状态的细胞结构，有人说“形态学的美是 良好固定产物”，这说明固定的特殊重要 作用。
第26页，幻灯片共46页
1、抑制自溶和腐败： 组织的固定能保持细胞与生活时的形态 相似。因为当机体生命活动停止、或局部器官、组织割离机体 之后，组织细胞的代谢功能即行丧失，新鲜组织如果不经固定 ，任意放置，由于细胞内酶对蛋白质的分解，以及细胞的孳生 等各种因素的作用，则易因细菌繁殖而致组织腐烂。细胞内的 蛋白质分解酶将蛋白质分解为氨基酸后脱离细胞而引起组织的 自溶。
第9页，幻灯片共46页
1. 了使组织切片的结构清楚，取材要及时，组织块必须争取时间
及时固定，组织的固定以愈新鲜愈好。
2. 取材时对大体标本（肉眼标本）绘制图象，进行仔细描述 。包括形状、大小，硬度，颜色，病灶（或可疑病变）部位等 。对所取的组织应定位编号。
3. 切取各组织块时，切勿挤压损伤，对典型或具有教学和 科研价值的肉眼标本，不能因取材而对标本造成人为的“ 病变”。
任何固定液对人体都有损害作用，因此固定液的容器必须密闭，以防挥发损伤 器官和眼睛，忌用手与固定剂直接接触，以免损伤皮肤。
第32页，幻灯片共46页
四、固定剂的选择 理想的固定剂应该具备下列几种性能： 1、渗透性强：固定剂必须能迅速渗入组织，这样组织内各种成分才能
尽快地被固定在原位置，而不致弥散。 2、组织在固定液的作用下，不应发生显著的收缩和膨胀现象
福尔马林主要是由甲醛的聚合形式构成，然而聚合形式的固定效
果低于单体形式构成的10%福尔马林，为阻止在放置一定时间 的重聚作用，一般将溶液的PH值调节至中性或偏碱性。
10. 切取镜检组织块后，可将剩余的组织放入70%洒精 中保存，这样有利于日后再取材切片时的细胞染色 。
二、固定的目的和效果 固定组织的目的是设法得到接近正常生命
状态的细胞结构，有人说“形态学的美是 良好固定产物”，这说明固定的特殊重要 作用。
第26页，幻灯片共46页
1、抑制自溶和腐败： 组织的固定能保持细胞与生活时的形态 相似。因为当机体生命活动停止、或局部器官、组织割离机体 之后，组织细胞的代谢功能即行丧失，新鲜组织如果不经固定 ，任意放置，由于细胞内酶对蛋白质的分解，以及细胞的孳生 等各种因素的作用，则易因细菌繁殖而致组织腐烂。细胞内的 蛋白质分解酶将蛋白质分解为氨基酸后脱离细胞而引起组织的 自溶。
第9页，幻灯片共46页
1. 了使组织切片的结构清楚，取材要及时，组织块必须争取时间
及时固定，组织的固定以愈新鲜愈好。
2. 取材时对大体标本（肉眼标本）绘制图象，进行仔细描述 。包括形状、大小，硬度，颜色，病灶（或可疑病变）部位等 。对所取的组织应定位编号。
3. 切取各组织块时，切勿挤压损伤，对典型或具有教学和 科研价值的肉眼标本，不能因取材而对标本造成人为的“ 病变”。
任何固定液对人体都有损害作用，因此固定液的容器必须密闭，以防挥发损伤 器官和眼睛，忌用手与固定剂直接接触，以免损伤皮肤。
第32页，幻灯片共46页
四、固定剂的选择 理想的固定剂应该具备下列几种性能： 1、渗透性强：固定剂必须能迅速渗入组织，这样组织内各种成分才能
尽快地被固定在原位置，而不致弥散。 2、组织在固定液的作用下，不应发生显著的收缩和膨胀现象
福尔马林主要是由甲醛的聚合形式构成，然而聚合形式的固定效
果低于单体形式构成的10%福尔马林，为阻止在放置一定时间 的重聚作用，一般将溶液的PH值调节至中性或偏碱性。
10. 切取镜检组织块后，可将剩余的组织放入70%洒精 中保存，这样有利于日后再取材切片时的细胞染色 。
《病理检验技术》课件——石蜡包埋组织切片
6.切片时室温不宜过高，一般先把组织蜡块面朝下 放在冰块上冷冻数分钟后才切片，可切出较薄的切 片。
石蜡包埋组织切片
7.若天气太冷，切片时组织蜡片容易碎裂，对着组织蜡块面 呵一口气后进行切片，可改善组织蜡片容易碎裂的情况，但 所切出的第一、二张组织蜡片厚度会比原来设定的切片厚度 稍厚一些，因此，前一、二张切出的组织蜡片不要。
石蜡包埋组织切片
6.调节切片刀的切片角度：切片机刀座上都有标 示切片刀切片角度的刻度，切片前需调节切片刀 至合适的切片角度，才能切好片。通常切片机上 刀座刻度范围为0°～10°，一般设定切片刀的 角度在8°左右为宜。但真正的切片角度是余隙 角。 所谓余隙角是指切片刀下刀锋倾斜面与组织蜡块 面的夹角。余隙角避免了切片时切片刀往返过程 中刀与组织蜡块面之间的摩擦。最理想的余隙角 是2°～4°，太大或太小都不能切好片。
3.如用金属框包埋组织蜡块，必须把四边修整平行，否 则在切片时会切出弯曲的组织蜡片带。
4.切片用毛笔应选用松软毛的水彩画笔，清扫切片刀上 的蜡屑时应顺着刀背往刀锋扫，避免刀锋切割笔毛，损 坏刀锋。
石蜡包埋组织切片
5.切片时转动切片手轮或推拉切片刀的动作要轻， 用力均匀。若用力太猛和速度太快，将会引起切片 压缩，也易导致轮转式切片机齿轮的磨损。
病理检验技术
石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
组织石蜡切片 石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
送检组织经过固定、 脱水、透明、浸蜡和 石蜡包埋制成组织蜡 块后即可马上进行切 片，称石蜡包埋组织 切片，简称石蜡切片。
石蜡包埋组织切片
一、石蜡切片操作过程
1.组织蜡块排序、冷冻：按病理号排序，先切在 前；蜡块组织面朝下放在一盘平整的冰块或冷冻 台上冷冻（-4～0℃）几分种后开始切片。
石蜡包埋组织切片
7.若天气太冷，切片时组织蜡片容易碎裂，对着组织蜡块面 呵一口气后进行切片，可改善组织蜡片容易碎裂的情况，但 所切出的第一、二张组织蜡片厚度会比原来设定的切片厚度 稍厚一些，因此，前一、二张切出的组织蜡片不要。
石蜡包埋组织切片
6.调节切片刀的切片角度：切片机刀座上都有标 示切片刀切片角度的刻度，切片前需调节切片刀 至合适的切片角度，才能切好片。通常切片机上 刀座刻度范围为0°～10°，一般设定切片刀的 角度在8°左右为宜。但真正的切片角度是余隙 角。 所谓余隙角是指切片刀下刀锋倾斜面与组织蜡块 面的夹角。余隙角避免了切片时切片刀往返过程 中刀与组织蜡块面之间的摩擦。最理想的余隙角 是2°～4°，太大或太小都不能切好片。
3.如用金属框包埋组织蜡块，必须把四边修整平行，否 则在切片时会切出弯曲的组织蜡片带。
4.切片用毛笔应选用松软毛的水彩画笔，清扫切片刀上 的蜡屑时应顺着刀背往刀锋扫，避免刀锋切割笔毛，损 坏刀锋。
石蜡包埋组织切片
5.切片时转动切片手轮或推拉切片刀的动作要轻， 用力均匀。若用力太猛和速度太快，将会引起切片 压缩，也易导致轮转式切片机齿轮的磨损。
病理检验技术
石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
组织石蜡切片 石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
送检组织经过固定、 脱水、透明、浸蜡和 石蜡包埋制成组织蜡 块后即可马上进行切 片，称石蜡包埋组织 切片，简称石蜡切片。
石蜡包埋组织切片
一、石蜡切片操作过程
1.组织蜡块排序、冷冻：按病理号排序，先切在 前；蜡块组织面朝下放在一盘平整的冰块或冷冻 台上冷冻（-4～0℃）几分种后开始切片。
皮肤病理石蜡切片PPT课件
观察细胞的大小、形态、 染色深浅等特征，判断细 胞的良恶性。
鉴别病变性质
根据切片的病理表现，鉴 别皮肤疾病的性质，如炎 症、肿瘤等。
02
皮肤病理石蜡切片在诊断中的应用
常见皮肤疾病的病理表现
皮肤肿瘤
良性和恶性皮肤肿瘤在石蜡切片 中呈现出不同的病理特征，如细 胞形态、组织结构、生长方式等。
感染性疾病
THANKS
感谢观看
皮肤病理石蜡切片ppt课 件
• 皮肤病理石蜡切片基础知识 • 皮肤病理石蜡切片在诊断中的应用 • 皮肤病理石蜡切片的临床意义 • 皮肤病理石蜡切片的未来发展 • 皮肤病理石蜡切片相关问题解答
01
皮肤病理石蜡切片基础知识
定义与重要性
定义
皮肤病理石蜡切片是指将皮肤组织经 过一系列处理后，用石蜡包埋、切片 ，再进行染色得到的病理组织学图片 。
皮肤病理石蜡切片的操作过程是怎样的？
皮肤病理石蜡切片的操作过程包括取材、固定、脱水、包埋、切片、染色等步骤，最后在 显微镜下观察并做出病理诊断。
注意事项
01
取材时需要注意什么？
取材时应该选取病变组织中具有代表性的部分，避免取材过度或不足，
影响诊断结果。
02 03
如何保证切片质量？
在制作石蜡切片过程中，需要保证脱水、包埋、切片等步骤的质量，以 确保切片平整、无气泡、无破损，从而提高显微镜下观察的准确性和可 靠性。
将固定后的组织进行石蜡包埋 、切片和染色。
观察与诊断
病理医生通过显微镜观察切片 ，根据病变特征做出诊断。
病例分析
病例一
病例三
患者皮肤出现红色斑块，病理表现为 血管增生和炎症细胞浸润，诊断为银 屑病。
患者皮肤出现水疱和糜烂，病理表现 为病毒感染引起的细胞病变，诊断为 单纯疱疹。
鉴别病变性质
根据切片的病理表现，鉴 别皮肤疾病的性质，如炎 症、肿瘤等。
02
皮肤病理石蜡切片在诊断中的应用
常见皮肤疾病的病理表现
皮肤肿瘤
良性和恶性皮肤肿瘤在石蜡切片 中呈现出不同的病理特征，如细 胞形态、组织结构、生长方式等。
感染性疾病
THANKS
感谢观看
皮肤病理石蜡切片ppt课 件
• 皮肤病理石蜡切片基础知识 • 皮肤病理石蜡切片在诊断中的应用 • 皮肤病理石蜡切片的临床意义 • 皮肤病理石蜡切片的未来发展 • 皮肤病理石蜡切片相关问题解答
01
皮肤病理石蜡切片基础知识
定义与重要性
定义
皮肤病理石蜡切片是指将皮肤组织经 过一系列处理后，用石蜡包埋、切片 ，再进行染色得到的病理组织学图片 。
皮肤病理石蜡切片的操作过程是怎样的？
皮肤病理石蜡切片的操作过程包括取材、固定、脱水、包埋、切片、染色等步骤，最后在 显微镜下观察并做出病理诊断。
注意事项
01
取材时需要注意什么？
取材时应该选取病变组织中具有代表性的部分，避免取材过度或不足，
影响诊断结果。
02 03
如何保证切片质量？
在制作石蜡切片过程中，需要保证脱水、包埋、切片等步骤的质量，以 确保切片平整、无气泡、无破损，从而提高显微镜下观察的准确性和可 靠性。
将固定后的组织进行石蜡包埋 、切片和染色。
观察与诊断
病理医生通过显微镜观察切片 ，根据病变特征做出诊断。
病例分析
病例一
病例三
患者皮肤出现红色斑块，病理表现为 血管增生和炎症细胞浸润，诊断为银 屑病。
患者皮肤出现水疱和糜烂，病理表现 为病毒感染引起的细胞病变，诊断为 单纯疱疹。
实验十二、石蜡切片法(一)取材、固定、洗涤、脱水
• 在更换高一级的脱水剂时，最好不要移动材料，以免损坏； • 在低浓度酒精中，每级停留时间不宜太长，防止材料解体； • 在高浓度酒精中，每级停留的时间也不宜太长，防止材料变脆； • 脱水必须彻底，否则不易透明。
五、思考题
1. 为什么切取病理材料时应加对照？ 2. 为什么固定液要以新配为好？
二、试剂与器材 1. 试 剂：10%中性福尔马林固定液、各级乙醇（50% 70%、 50%、70% 50% 70% 85%、95%、100%） 2.器 材：解剖刀、解剖针、剪刀、镊子、解剖盘、 单面刀片、培养皿、吸管、指形管、 橡皮圈、软木塞、胶布、塑料脸盆。
三、实验程序 1．取材：用锋利的刀片切取材料。 2．固定：将已切好的材料放入10%的福尔马林溶液中 固定12-24小时。固定剂一般为组织块体积的10-15倍。 3．洗涤：材料自固定液中取出，放入指形管，加入 半管水，用纱布将管口扎紧，置于水槽内，进行流水 冲洗。流水冲洗时间一般需要12-24小时。 4．脱水：材料自低浓度至高浓度的酒精进行脱水。 一般经50%、70%、85%、95%直至纯酒精。每级停留 约30分钟至1小时。如需过夜，应停留在70%酒精中。
实验十二
石蜡切片法（一）取材、固定、洗涤、脱水
一、实验原理 • 取 材： 用于制片的动植物材料应选择新鲜的，用陈 腐材料制片，往往不能反映材料的真正情况。 • 固 定： 固定是借助化学药品的作用,使细胞组织的形 态保存下来,不使其改变形态和变质。
• 洗 涤:是洗去渗入细胞内部的固定液。因材料中的固 定液有的会妨碍染色；有的会发生沉淀或结晶，影响观 察；有的会继续作用，使材料变坏等。 • 脱 水：材料经洗涤后含有大量的水分，必须用脱水 剂脱尽里面的水分，以利于材料的透明和制片的保存。 因为水分会使材料分解，而且透明剂与水是不相混合的， 只有在完全无水的情况下，透明剂才能完全透入。
五、思考题
1. 为什么切取病理材料时应加对照？ 2. 为什么固定液要以新配为好？
二、试剂与器材 1. 试 剂：10%中性福尔马林固定液、各级乙醇（50% 70%、 50%、70% 50% 70% 85%、95%、100%） 2.器 材：解剖刀、解剖针、剪刀、镊子、解剖盘、 单面刀片、培养皿、吸管、指形管、 橡皮圈、软木塞、胶布、塑料脸盆。
三、实验程序 1．取材：用锋利的刀片切取材料。 2．固定：将已切好的材料放入10%的福尔马林溶液中 固定12-24小时。固定剂一般为组织块体积的10-15倍。 3．洗涤：材料自固定液中取出，放入指形管，加入 半管水，用纱布将管口扎紧，置于水槽内，进行流水 冲洗。流水冲洗时间一般需要12-24小时。 4．脱水：材料自低浓度至高浓度的酒精进行脱水。 一般经50%、70%、85%、95%直至纯酒精。每级停留 约30分钟至1小时。如需过夜，应停留在70%酒精中。
实验十二
石蜡切片法（一）取材、固定、洗涤、脱水
一、实验原理 • 取 材： 用于制片的动植物材料应选择新鲜的，用陈 腐材料制片，往往不能反映材料的真正情况。 • 固 定： 固定是借助化学药品的作用,使细胞组织的形 态保存下来,不使其改变形态和变质。
• 洗 涤:是洗去渗入细胞内部的固定液。因材料中的固 定液有的会妨碍染色；有的会发生沉淀或结晶，影响观 察；有的会继续作用，使材料变坏等。 • 脱 水：材料经洗涤后含有大量的水分，必须用脱水 剂脱尽里面的水分，以利于材料的透明和制片的保存。 因为水分会使材料分解，而且透明剂与水是不相混合的， 只有在完全无水的情况下，透明剂才能完全透入。
石蜡切片实验原理
石蜡切片实验原理石蜡切片实验是一种常用的组织学实验方法，通过将组织样本制成切片，以便在显微镜下观察细胞和组织的形态结构。
石蜡切片实验的主要原理包括以下几个步骤：1. 取材：根据实验需求，选择合适的材料来源和部位。
例如，观察植物细胞有丝分裂时，常选择洋葱根尖作为材料，因为此处细胞分裂速度快且便于切取。
确保材料新鲜，避免长时间放置导致蛋白质分解、细胞自溶和细菌滋生，以保证观察到的组织结构能反映活体时的形态。
2. 固定：将切好的新鲜组织小块浸入适当浓度的固定液中，如中性甲醛固定液。
固定液可以迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分，终止细胞的一切代谢过程，防止细胞自溶或组织变化，尽可能保持其活体时的结构。
3. 洗涤和脱水：固定后，将组织样本用磷酸缓冲液洗涤，去除多余的固定液和杂质。
然后进行脱水，通常使用系列梯度酒精（如70%、95%和100%）进行脱水。
4. 透明：将脱水后的组织样本放入透明剂中，如二甲苯，使组织透明，便于切片。
5. 浸蜡：将透明后的组织样本放入蜡液中，如石蜡，进行浸蜡。
石蜡可以填充组织间隙，使切片更加完整。
6. 包埋：将浸蜡后的组织样本放入包埋盒中，固定并密封。
7. 切片：将包埋好的组织样本放入切片机中，切成薄片（通常厚度为4-6微米）。
8. 贴片：将切好的切片粘附在载玻片上，可用甘油蛋白贴片剂辅助。
9. 脱蜡：将贴片后的切片放入二甲苯中，脱去多余的石蜡。
10. 染色：采用适当的染色方法，如苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法），对切片进行染色。
这种方法适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色，可以长期保存。
11. 脱水、透明、封片：染色后，将切片依次放入系列梯度酒精、磷酸缓冲液、甘油中进行脱水、透明。
最后，用封片胶封片，完成石蜡切片制作。
石蜡切片实验原理就是这样啦。
这种方法不仅适用于观察正常细胞和组织，还广泛应用于病理学和法医学等领域，以研究、观察和判断细胞和组织的形态变化。
第二节石蜡切片制作精品PPT资料
❖ 4%多聚甲醛-磷酸盐缓冲液：4g多聚甲醛+100ml磷酸盐缓冲 液（适用于免疫组化学技术）。
不同浓度梯度酒精配制
梯度酒精的作用： 将组织中的水分经过梯度酒精的作用，置换出 来，以达到组织脱水的目的。
配制：例如70%的酒精配制，70ml（100%纯 酒精）+30ml蒸馏水混匀即可。
石蜡切片所需的实验器材
❖染色液的配制 2．增加浸蜡时间，重新包埋；
切片完毕，应及时用氯仿将切片机的有关部分擦净。 树胶封片 4．用正丁醇、叔丁醇和二氧六环等进行脱水和透明； 切片之前必须修整好蜡块，并且固定在木块之上，再将四周多余的残蜡用刀片削去，否则不易于切片和展片。 3．刀口上留有一层石蜡； 3．刀口锋利不一，局部产生差异；
❖ 注意：熔蜡及浸蜡温度保持在65℃左右。 ❖ 经过浸蜡之后的组织，前必须修整好蜡块，并且固定在木块 之上，再将四周多余的残蜡用刀片削去，否 则不易于切片和展片。
❖ 切片使用旋转切片机时，应固定好木块；调 整好切片刀与蜡块的距离与角度，一般刀的 倾斜度为4-6度；根据切片的厚度不同调节厚
❖ 仪器：石蜡切片机、恒温蜡箱、载玻片、盖 玻片、镊子、手术刀。
❖ 材料：小鼠的组织（小鼠肝脏）。
❖ 试剂：乙醚、无水乙醇、甲醛、冰醋酸、苦 味酸、、锇酸、正丁醇、二甲苯、石蜡、甘 油、中性树胶。
第一步：取材
❖ 一般根据观察目的选取动物 或人体组织，取材要迅速，
组织块不宜太大，一般 为组织学观察，取黄豆 大小为宜。取材要用锋利
第二节石蜡切片 制作
简介：
❖ 石蜡切片是教学与研究工作中广泛运用的一 种实验技术，特别对于细胞学、组织学、胚 胎学、病理学，更是一种必备的研究方法。 对于不同的显微镜具体的制作切片的技术也 是不同的！
不同浓度梯度酒精配制
梯度酒精的作用： 将组织中的水分经过梯度酒精的作用，置换出 来，以达到组织脱水的目的。
配制：例如70%的酒精配制，70ml（100%纯 酒精）+30ml蒸馏水混匀即可。
石蜡切片所需的实验器材
❖染色液的配制 2．增加浸蜡时间，重新包埋；
切片完毕，应及时用氯仿将切片机的有关部分擦净。 树胶封片 4．用正丁醇、叔丁醇和二氧六环等进行脱水和透明； 切片之前必须修整好蜡块，并且固定在木块之上，再将四周多余的残蜡用刀片削去，否则不易于切片和展片。 3．刀口上留有一层石蜡； 3．刀口锋利不一，局部产生差异；
❖ 注意：熔蜡及浸蜡温度保持在65℃左右。 ❖ 经过浸蜡之后的组织，前必须修整好蜡块，并且固定在木块 之上，再将四周多余的残蜡用刀片削去，否 则不易于切片和展片。
❖ 切片使用旋转切片机时，应固定好木块；调 整好切片刀与蜡块的距离与角度，一般刀的 倾斜度为4-6度；根据切片的厚度不同调节厚
❖ 仪器：石蜡切片机、恒温蜡箱、载玻片、盖 玻片、镊子、手术刀。
❖ 材料：小鼠的组织（小鼠肝脏）。
❖ 试剂：乙醚、无水乙醇、甲醛、冰醋酸、苦 味酸、、锇酸、正丁醇、二甲苯、石蜡、甘 油、中性树胶。
第一步：取材
❖ 一般根据观察目的选取动物 或人体组织，取材要迅速，
组织块不宜太大，一般 为组织学观察，取黄豆 大小为宜。取材要用锋利
第二节石蜡切片 制作
简介：
❖ 石蜡切片是教学与研究工作中广泛运用的一 种实验技术，特别对于细胞学、组织学、胚 胎学、病理学，更是一种必备的研究方法。 对于不同的显微镜具体的制作切片的技术也 是不同的！