HELAC综合样本
hct 116、hela、MEFs细胞参数介绍.doc
HELAHeLa (ATCC® CCL-2™)ATCC:Hela细胞,源于黑人31岁女性,子宫颈腺癌,是一种附着型上皮细胞,要求存于液氮中。
These cells are a suitable transfection host.This cell line can be used to screen for Escherichia coli strains with invasive potential.Biosafety Level:(2 [Cells contain human papilloma virus]Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.)Complete Growth Medium:The base medium for this cell line is ATCC-formulated Eagle's Minimum Essential Medium, Catalog No. 30-2003. To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum to a final concentration of 10%.Subculturing(接种):Volumes used in this protocol are for a 75 cm2flask; proportionally reduce or increase amount of dissociation medium for culture vessels of other sizes. CorningT-75 flasks (catalog #430641) are recommended for subculturing this product.1.Remove and discard culture medium.2.Briefly rinse the cell layer with 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA solution to remove alltraces of serum which contains trypsin inhibitor.3.Add 2.0 to 3.0 mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an invertedmicroscope until cell layer is dispersed (usually within 5 to 15 minutes).Note: To avoid clumping do not agitate the cells by hitting or shaking the flask while waiting forthe cells to detach. Cells that are difficult to detach may be placed at 37C to facilitate dispersal.4.Add 6.0 to 8.0 mL of complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting.5.Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture vessels.6.Incubate cultures at 37C.Subcultivation Ratio:A subcultivation ratio of 1:2 to 1:6 is recommendedMedium Renewal:2 to 3 times per weekCryopreservation Freeze Medium: Complete growth medium supplemented with 5%(v/v) DMSOStorage Temperature: Liquid nitrogen vapor phaseCulture ConditionsAtmosphere: Air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%Temperature: 37°C论坛:贴壁生长,铺路石状,长得快,2-3天传代一次,传代不及时会造成老化的细胞堆积,看起来很脏。
HeLa_细胞内及组织内纳米碳点含量测定
引用格式:毕禄莎, 汪丹, 李昊, 等. HeLa 细胞内及组织内纳米碳点含量测定[J]. 中国测试,2023, 49(11): 76-82. BI Lusha, WANG Dan, LI Hao, et al. Measurement of nano-carbon dots in HeLa cells and tissues[J]. China Measurement & Test, 2023, 49(11): 76-82.DOI: 10.11857/j.issn.1674-5124.2023040035HeLa 细胞内及组织内纳米碳点含量测定毕禄莎1, 汪 丹2, 李 昊3, 赵梦凡4(1. 西南医科大学附属医院药学部,四川 成都 646000; 2. 成都大学,四川 成都 610106;3. 西南医科大学附属医院临床研究中心,四川 成都 646000;4. 西南医科大学附属医院乳腺外科,四川 成都 646000)摘 要: 为解决纳米碳点无对照品而难以定量的缺陷,该文利用碳点稳定的荧光性,以纯荧光化合物为“替代对照品”,建立碳点的细胞内及组织内含量测定方法。
将具有良好成像性能的碳点作为候选碳点,以甲酚紫、罗丹明6G 为对照品,建立候选碳点及其叶酸偶联物HeLa 细胞内以及生物组织中的含量测定法及其方法学验证。
结果表明,三种候选碳点DCCDs 、ACUCDs 、UCPG-Fe 及其叶酸偶联物在HeLa 细胞内和组织内,均在一定浓度范围内具有良好的线性关系(r 2=0.993 3~0.999 2),平均回收率为86.61%~102.5%,精密度RSD 在2.82%~3.91%之间。
以此分别检测出细胞内DCCDs 和FA-DCCDs 在摄取时间3 、6、9 、12 h 的纳米碳点含量在0.125 5~0.266 5 μg/mL 之间及0.891 7~1.239 μg/mL 之间;肝、肾组织内DCCDs 在摄取时间20、30、40、50、60、70 min 的纳米碳点含量分别在1.132~1.756 μg/mL 之间及0.335 8~0.704 3 μg/mL 之间。
抗体聚集体去除-文献分享
POROS Benzyl Ultra Increased hydrophobicity
FT mode residence time: 5 min load density was 50 mg/ml 50 mM NaAc-HAc, 0.05 M NaCl, pH 5.5 striped with 50 mM NaAc sanitized with 0.5 M NaOH
填料 结合能力 纯化模式 保留时间
载量 平衡buffer 洗脱buffer 剥离buffer CIP buffer
Hydroxyapatite Phosphoryl CEX Bind-Elute mode residence time: 5 min load density was 25 mg/ml A:10 mM NaPO4, pH 6.5/A1:10 mM NaPO4, 2.5% PEG 3350, pH 6.5 0-100%,10 mM NaPO4, 2 M NaCl, 2.5% PEG 3350, pH 6.5 striped with 0.5 M NaPO4 sanitized with 0.5 M NaOH
3350, pH 5.5
0-100%,50 mM NaAc-HAc, 0.3 M Arg, 2.5% PEG3350, pH 5.5
striped with 1 M Arg sanitized with 0.5 M NaOH
Insoluble aggregates: removed by filtration; soluble aggregates: cleared by chromatographic methods. 样品:表达于CHO,protein A(B-E) 和AEX(FT)纯化后的中间物,聚体含量14%
HCMVwho国际标准
结果和数据分析----研究样本的有效 性和稳定性评估
经过考虑,只有差异+ 0.204储存8个月的45 °C 样本的统计意义重大。 原因还不清楚 。 所有可用的数据显示足够的稳定性。 随后的测试将在12至18个月,然后在2、3、4、5年后进行。
2023/12/30
结果和数据分析----数据接受
样品1 - 3的结果显示,在不同的试验中病毒载量被报道有相当大的变 化,估计有相差大于2 log10(100倍)(表5)。这些定性试验的估计通常是 低于定量分析的。
与此同时,样品4的变化性大于样品1 - 3,虽然这主要是由于从五个不同 的试验结果得来的(图1d)。
2023/12/30
图1,单个实验室使用定量或定性的NAT试验所获得的研究样 本1-4的平均值。每个盒子代表每个实验室估计的平均值并且 贴上实验室代码标签。定性的结果分析用灰色阴影表示。
研究目的
该协作性研究的目的是通过一系列检测 HCMV 的NAT试验来确定候选标准品的效 力 评估候选标准品作为二级参考材料校准的 合适性 以及标化HCMV的病毒载量检测。
2023/12/30
材料----候选标准品的制备
该候选标准品是由原型的临床HCMV株----Merlin株组成的 无细胞游离活病毒制剂。 该低传代株拥有良好的HCMV的特征,与实验室其他株相比, 近似于完整的HCMV基因组,且已完全测序(Gene bank登录 号:AY446894)。 Merlin株为gB1基因型。 考虑到用于HCMV检测样本来源的多样性,候选标准品被 溶于通用的缓冲液,该缓冲液含有10mM的Tris-HCl 和人血 清白蛋白,然后运用正确的样本基质来进一步稀释。最后该 制剂经过冷冻干燥以确保长期稳定。
MERS-CoV样品采集和实验室检测
MERS-CoV受体 二肽基肽酶(hDPP4,也称 为CD26),位于人深部呼吸道组织。
该受体宿主分布广泛:蝙蝠、人、猪
MERS-CoV样品采集和实验室检测
二、病例定义
疑似病例
符合流行病学史和临床表现,但尚无实验室确认 依据。
患者时,可采集密接者上呼吸道标本。
MERS-CoV样品采集和实验室检测
采集的标本
下呼吸道标本的病毒载量高。 上呼吸道标本亦可检出。 血液标本中可检出病毒、抗体。 尿、粪便标本病毒载量较低。
MERS-CoV样品采集和实验室检测
采样的时间
PCR法检测的标本
在发病7天内采集。 解除隔离前,连续2天采集。
确诊病例
疑似和临床诊断病例具备下述4项之一:
至少双靶标PCR检测阳性。 单个靶标PCR阳性产物,经过基因测序确认。 从呼吸道标本中分离出中东呼吸综合征冠状病毒。 恢复期血清中东呼吸综合征冠状病毒抗体较急性期血
清抗体水平阳转或呈4倍以上升高。
中东呼吸综合征病例诊疗方案(2014年版)
MERS-CoV样品采集和实验室检测
冰、液氮上。 避免反复冻融标本。 运送时,三层包装:密闭的采样管、密封罐,防破碎、针刺的采
样箱。样品周围有冰排。 全血应该分离血清保存4℃或者-20℃冻存。 不建议保存于无霜冰箱,因为其温度变动范围大。 专人专车。
MERS-CoV样品采集和实验室检测
标本的签收
标本保存及运输正确; 标本状态完好,无泄漏; 送检单填写字迹清晰、内容完整,与标本信息
病毒分离 病毒核酸检测 血清免疫学检测
MERS-CoV样品采集和实验室检测
(一)标本采集注意事项
细胞生物学实验Hela细胞培养
3、酚红:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。酚红在无血清培养基时 可能带来细胞内外钠/钾失衡,影响细胞生长,这种作用在有血清培养时能被血清 中和或减轻。
底物:胶原、玻璃、塑料、其它细胞等 血清中有促使细胞贴壁的球蛋白和纤粘素、胶原等糖蛋白(生长 基质),这些带正电荷糖蛋白的促贴壁因子先吸附于底物上,悬浮细 胞再附着在吸附有促贴壁因子的底物上。 高级培养瓶多涂有生长基质以帮助细胞贴附。
细胞生物学实验Hela细胞培养
细胞贴壁的基本过程
细胞生物学实验Hela细胞培养
细胞的营养需要:特定的培养基和添加剂 细胞的生存环境: 温度: 37 ℃; CO2 、O2 ; pH: 7.2-7.4;渗透压;适宜的湿度 无化学和生物污染、无毒害
CO2: 5% -10% 缓冲体系: CO2 +H2O ← →H2CO3 ← →H+ + HCO3HEPES
细胞生物学实验Hela细胞培养
一般说来,含5%血清的培养基对大多数细胞可以维持细胞不死, 但支持细胞生长一般需要10%的血清。对于血清支持细胞生长的生物 学效应已得到证明,但血清中的复杂成分至今尚未完全研究清楚。血 清中不仅存在促细胞生长因子,同对也存在细胞生长的抑制因子或毒 性因子,因此含血清培养基中培养的细胞所反映的生物学特性是细胞 和复杂血清因子的综合反应。在生长因子、蛋白质工程、基因表达调 控等研究领域,迫切需要用无血清培养基培养细胞。
细胞生物学实验Hela细胞培养
细胞培养所需要的溶液
添加剂:
大戟苷诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究
大戟苷诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究目的:研究大戟苷对人宫颈癌Hela细胞凋亡的诱导作用及其机制。
方法:取Hela细胞分为空白对照组、顺铂组(阳性对照,10 mg/L)和大戟苷低、中、高剂量组(50、100、200 mg/L),分别加入相应药物进行培养。
药物作用24、48、72 h后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率。
药物作用48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Hoechst 33258染色法检测细胞核的形态变化;采用Western blot法检测细胞色素C(Cyt-C)、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和Caspase-10蛋白表达水平。
结果:与空白对照组比较,顺铂组和大戟苷各剂量组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率均显著升高(P<0.05或P<0.01),细胞核浓染,或有变形、缩小、碎裂,或出现凋亡小体。
与空白对照组比较,大戟苷低、中、高剂量组细胞中Cyt-C、Caspase-8和Caspase-9蛋白表达水平均显著升高,Bcl-2蛋白表达水平和Bcl-2/Bax比值均显著降低(P<0.05或P<0.01);大戟苷中、高剂量组细胞中Bax、Caspase-3和Caspase-10蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。
结论:大戟苷能显著抑制Hela细胞增殖、促进细胞凋亡,其作用可能是通过激活Caspase依赖的线粒体凋亡途径来实现的。
ABSTRACT OBJECTIVE:To study induction effect of euphornin on the apoptosis of cervical cancer Hela cells and its mechanism. METHODS:The cervical cancer Hela cells were divided into blank control group,cisplatin group (positive control,10 mg/L)and euphornin low-dose,medium-dose and high-dose groups (50,100,200 mg/L). They were treated with relevant medicine. The inhibitory effect of Hela cells proliferation was tested by MTT assay after 24,48,72 h of medicine treatment. The apoptotic rate of Hela cells was measured by flow cytometry after 48 h of medicine treatment. Morphology of nucleus was detected by Hoechst 33258 staining. The protein expression of Cyt-C,Bcl-2,Bax,Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9 and Caspase-10 were detected by Western blot assay. RESULTS:Compared with blank control group,inhibitory rate of cell proliferation and cell apoptosis rate were increased significantly in cisplatin group and euphornin groups (P<0.05 or P<0.01),and obvious staining,deformation,shrinking,fragmentation or apoptotic bodies was found in nucleus. Compared with blank control group,the protein expression levels of Cyt-C,Caspase-8 and Caspase-9 in euphornin low-dose,medium-dose and high-dose groups were increased significantly,while the protein expression level of Bcl-2 and Bcl-2/Bax ratio were decreased significantly (P<0.05 or P<0.01);the protein expression levels of Bax,Caspase-3 and Caspase-10 in euphornin medium-dose and high-dose groups were increased significantly (P<0.05 or P<0.01). CONCLUSIONS:Euphornin can significantly inhibit the proliferation of Hela cell and promote cell apoptosis,the effect of which will be achieved by activating the Caspase-dependent mitochondrion apoptosis pathway.KEYWORDS Euphornin;Cervical cancer;Hela cell;Apoptosis;Mechanism 宫颈癌是女性最常见的妇科恶性肿瘤之一,发病率在全球女性肿瘤中居第3位,严重威胁女性健康[1]。
hela细胞的epcam表达
hela细胞的epcam表达
在HELA细胞中,EPCAM的表达情况如下:
EPCAM(也称为CD326或TACSTD1)是一种在肿瘤细胞上高表达的糖蛋白,参与细胞间的相互作用和信号传递。
EPCAM在许多不同类型的癌症中
都有表达,包括卵巢癌、乳腺癌、结直肠癌等。
在HELA细胞中,EPCAM的表达水平相对较低。
HELA细胞是一种常用于
实验研究的宫颈癌细胞系,其基因组经过了多轮筛选和克隆,因此具有较高的基因稳定性和可重复性。
尽管EPCAM在HELA细胞中的表达水平较低,但在某些情况下,例如当HELA细胞发生恶性转化或发生基因突变时,EPCAM的表达可能会增加。
需要注意的是,EPCAM的表达水平并不是决定一个细胞是否具有恶性行为
的唯一因素。
其他基因和信号通路的改变也可能对细胞的恶性行为产生影响。
因此,要全面了解HELA细胞的恶性行为和生物学特性,需要结合其他实验手段和分子生物学技术进行深入研究。
以上信息仅供参考,建议查阅相关文献资料获取更专业的解答。
HELAC摆动油缸中文样本
3,000 210
3,000 210
3,000 210
3,000 210
高 高 高 高 高 高
无 无 无 无 无 无
180, 360 180
180, 360 200, 220
134, 180
120
根据不同型号 根据不同型号
高 高 高 高 高 高
• 通常情况下24小时零件周转 •
执行器翻新服务
1983
1985
迁至更大的工厂 公司扩张
业务发展到欧 洲市场
1989
10,000 第 个执行器 发货
注意事项及警告
重要注意事项
Helac 由于操作条件及应用无限的多样性, 公司不承担任何旋转执行器产品的 设计及性能之外的责任。客户对于任何H el ac公司产品或系统的最终选型以及 尚在考虑中的应用的适用性独自承担责任。 整体安装的完整性以及应用的安全性和所依据的工业标准和温升的要求最终 的责任在于客户。对于工程结构匹配,紧固件及其它与之相关的产品安装的
参数对输出扭矩的影响差不多在百分之 。
350%
扭矩对压力 L10 系列
300%
250%
200%
150%
100%
50%
0% 0
驱动 保持
1,000
2,000
psi 压力
3,000
弯矩
L10系列产品设计用于支撑大的弯矩及径向负载。 然而,当弯矩及径向负载增加时,轴承的摩擦力 会减小驱动扭矩。应用负载及其它操作参数对输
in
3.375
4.063
4.625
5.938
mm 86
103
117
151
F2
inch 5/16-18
Nature HeLa细胞争议圆满解决
Nature HeLa细胞争议圆满解决海拉细胞(英语:Hela Cells,有时音译为海乐细胞,亦称实验用增殖表皮癌细胞)是生物学与医学研究中使用的一种细胞,源自一位美国妇女海莉耶塔?拉克斯(Henrietta Lacks)的子宫颈癌细胞的细胞系。
在医学界海拉细胞被广泛应用于肿瘤研究、生物实验或者细胞培养,已经成为医学研究中非常重要的工具。
基本信息中文名:海拉细胞英文名:Hela Cell 其他外文名:海乐细胞种属:海拉细胞系特点:被认为“不死”应用:生物学与医学研究中使用的细胞名称由来Hela 细胞源自一位名叫Henrietta Lacks美国妇女的子宫颈癌细胞的细胞系。
这名美国妇女在1951年死于该癌症。
为了让拉克斯保持匿名,此细胞株原宣称是依“Helen Lane”命名。
特点1、可以连续传代。
2、细胞株不会衰老致死,并可以无限分裂下去。
3、此细胞系跟其它癌细胞相比,增殖异常迅速。
4、感染性极强。
Hela细胞系是被人类乳突状瘤病毒第18型(Human papillomavirus 18)转化的,和正常子宫颈细胞有许多不同。
已证实Hela细胞系难以控制。
此细胞系有时会污染同一实验室的其他细胞培养物(cell culture),干扰生物学的研究。
污染程度难以估计,因为研究人员很少检定已确立细胞系的本质和纯度。
据说有相当数目的体外细胞系(in vitro cell lines)其实就是HeLa细胞系,因为原先的细胞株已被快速增殖的HeLa细胞系污染物取代了。
有学者认为此细胞系是一新的物种,因为此细胞株能自行繁殖和散布。
在1991年此细胞株被命名为Helacyton gartleri。
Hela细胞生长奇快,甚至超越一般癌细胞。
Hela 细胞经历细胞分裂时可维持端粒酶活性以维持端粒长度,一般细胞的端粒会随着老化而变短,终至细胞死亡。
海乐细胞利用此机制避开海佛烈克极限(Hayflick limit)。
海佛烈克极限(黑弗利克极限)(Hayflick limit)指因为端粒(telomere)有分裂次数极限而使细胞停止分裂。
维尔斯迈尔-哈克-阿诺德反应
Me
Me
NH C+ O
POCl3
R -HOPOCl2
HN C
Cl
MFA
HO
R
C
H2O
-HN(CH3)C6H5
-HCl
R
R = aromatic ring-activating
(3)
electron-donor substituent
通过对反应机理的探讨和应用范围的扩展,该方法现在已经成为各种活性芳 烃和杂环芳烃甲酰化的通用方法。这就是经典的 VH 反应 (或称 Vilsmeier 甲 酰化反应),其中 N-甲基甲酰苯胺 (MFA) 和 POCl3 生成的加合物被称为 VH 试剂 (简称 Vilsmeier 试剂)。
Me N CH3
O
POCl3
Me
N MeN(Me)Ph来自Cl + Me
Cl (2)
N(Me)Ph
Cl
4
二. VH 反应和 VHA 反应的定义
2.1 VH 反应
1927 年,Vilsmeier 和 Haack 发表了题为“在卤代磷与烷基甲酰苯胺作用 下的对位取代仲/叔-烷基氨基苯甲醛的制备新方法”论文[1]。该论文报道了由 N甲基甲酰苯胺 (N-Methylformanilide, MFA) 和 POCl3 组成的加合试剂与推电子 取代基团活化的芳烃 [R = N(CH3)2] 发生的反应。如式 3 所示:反应首先形成 了一个亲电取代的中间体 (季铵盐),通常这类季铵盐中间体呈各种不同的红色。 经水解使红色消除后 (验证了 Friedel 实验现象),得到了相应的芳香(甲)醛产 物。由此,他们发现了一个在芳烃环上引入甲酰基的简便方法。
1
六. VHA 反应在天然产物和药物合成中的应用 ………………………………60 6.1 天然产物 Homofascaplysin C 的全合成…………………………………60 6.2 天然产物 FR-900482 的全合成…………………………………………61 6.3 天然产物 (±)-Illudin C 的全合成…………………………………………62 6.4 临床药物苹果酸舒尼替尼的合成…………………………………………62
Hela细胞早孕因子基因的克隆与原核表达
1 . 1 . 2 主要 试 剂 和 材 料 P r e mi x Ex T a q、 Xh o I 、
E c 0 RI、 DNA Ma r k e r 均 为大 连 Ta Ka Ra 公 司产 品 ; T4 DNA 连接酶 为 NE B公 司产 品 ; 低 分子 质 量蛋 白
1 . 1 . 1 茵株 、 质粒
大 肠 埃希 菌 B L 2 1 ( D E 3 ) 、 He l a
细胞均 由华 南农 业 大学兽 医学 院微 生 物 学教 研 室 惠 赠; 基 因工 程 菌 大肠 埃 希 菌 DH5 a 、 p RE S T — A 质 粒 由佛 山科学 技术 学 院生命 科学 学 院基 础兽 医学 实验 室 保存 。
采 用 Hi s 标 签蛋 白纯化 试 剂 盒 纯化 重组 蛋 白后 , 再用 S Ds - P AG E 和 We s t e r n b l o t分 别鉴 定 其 纯度 和特 异
性 。结果 表 明 , E P F c D NA 以正 确 的 阅读 框 架插入 表 达载体 p R E S T — A, 经I P T G 诱 导后 高效表 达 E P F重组 蛋白, We s t e r n b l o t 表 明其 与抗 E P F抗体 特 异性 结合 。论 文构 建 了 E P F的原 核 表 达载 体 , 纯化 获得 了重组 蛋白, 为进 一步 开展 E P F蛋 白的相 关研 究和猪 早孕诊 断试剂 盒的 开发 奠定 了基础 。 关键 词 : 早孕 因子 ; 表达; 纯化 ; 特性 鉴 定
荷尔登生物医学检测产品说明书
1mL
R
1mL
SST, R, GL
1mL
No capillary
1mL
collection
Order of Draw: 1. BLOOD CULTURES 2. LT BLUE 3. RED 4. SST 5. PST/LH GRN 6. LAV 7. GRAY
M2909 (1-19)
Microtainer Microtainer 1 mL
2 Microtainers Microtainer
2 mL FILL TO LINE 1 mL 1 mL Microtainer 1 mL 1 mL Microtainer
SST, R, GL
STAT to lab in 10 min
Also known as CMP SST, R, GL SST, R, GL
TOBRAMYCIN TOTAL PROTEIN TROPONIN TSH
TYPE AND CROSSMATCH
TYPE AND SCREEN URIC ACID
VANCOMYCIN VALPROIC ACID VITAMIN D
FEA
6LA LHC 6LIP
6LIVER 6LIPID LIA 6MG 6METX 6MONO PHNOC 6PFA 6PHOS 6PBNP 6PCAL 6KA 6PTIMEN PSAC 6PTT 6RETCT 6RENAL WHRIG 6SAL SYPHB TBSATA TT3C T4C TESTOC THEOC
CHEM8
QUICK CHEM 8 CBC/AUTO DIFF CKMB
COMP CREATININE CREATININE X-RAY EVALUATION D-DIMER DIGOXIN DILANTIN ELECTROLYTES FERRITIN FSH GLUCOSE
恒河猴主要组织相容性复合体elisa试剂盒使用
用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好 控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞
操作步骤
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标
准品100M,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50d,混匀;然后从第一孔、第二
孔中各取100d分别加到第三孔和第四孔, 再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50d,
混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50dl弃掉,再各取50dl分别加到第五、第六孔
&所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
试剂盒性能:
1•样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
0.2IU/L-6IU/L
浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分
钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
hela细胞正常形态特征
hela细胞正常形态特征Hela细胞正常形态特征Hela细胞是一种被广泛应用于生物学研究的人类细胞系,具有许多独特的形态特征。
本文将介绍Hela细胞的正常形态特征,以及这些特征对于细胞学研究的重要性。
Hela细胞是从一个患有宫颈癌的女性患者中分离出的细胞系,其在细胞学研究中具有重要的应用价值。
首先,Hela细胞是一种无限增殖的细胞系,具有高度的增殖活性。
在培养基中,Hela细胞呈现出典型的悬浮生长形态,细胞呈圆形或椭圆形,并且细胞质丰富,胞核明显。
细胞的增殖速度很快,通常可以在24小时内达到对数生长期。
Hela细胞的细胞质内含有大量的线粒体,这些线粒体在细胞的代谢过程中发挥重要作用。
线粒体呈椭圆形或长条状,大小约为2-5微米。
Hela细胞线粒体的数量较多,这是由于细胞的高度代谢活性所致。
线粒体是细胞中的能量工厂,参与细胞呼吸作用,产生细胞所需的能量。
Hela细胞的胞核也具有一些独特的形态特征。
Hela细胞的胞核呈圆形或椭圆形,位于细胞的中央位置。
胞核内含有染色质和核仁。
染色质是胞核内的染色体材料,负责细胞的遗传信息传递。
核仁是胞核内的明显结构,参与蛋白质合成。
Hela细胞的染色质呈现出紧密的排列,核仁明显,这些特征对于Hela细胞的形态鉴定具有重要意义。
Hela细胞在细胞分裂过程中也表现出独特的形态特征。
Hela细胞的有丝分裂过程较为明显,可以观察到细胞的核分裂、细胞质分裂和细胞的孢子体形成。
这些形态变化与Hela细胞的高度增殖活性密切相关,同时也为细胞学研究提供了重要的材料。
Hela细胞具有许多独特的形态特征,包括圆形或椭圆形的细胞形态、丰富的细胞质和明显的胞核结构等。
这些形态特征不仅对于Hela细胞的鉴定和分析具有重要意义,也为细胞学研究提供了重要的实验材料。
对Hela细胞的形态特征的深入研究,有助于我们更好地理解细胞的结构和功能,进而推动细胞学研究的发展。
家蝇免疫血淋巴抗HeLa肿瘤细胞蛋白的筛选及纯化
家蝇免疫血淋巴抗HeLa肿瘤细胞蛋白的筛选及纯化魏洪;吴建伟;王硕石;国果;付萍【期刊名称】《时珍国医国药》【年(卷),期】2011(22)11【摘要】目的从家蝇3龄幼虫血淋巴筛选具有抗肿瘤细胞HeLa(宫颈癌细胞)的蛋白。
方法采用固相萃取、反相高效液相色谱分离、四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法,从热诱导家蝇3龄幼虫免疫血淋巴筛选抗肿瘤多肽。
结果经10%~50%乙腈洗脱C18固相萃取柱,获得mp1、mp2、mp3、mp4、mp5等5个具有抗HeLa的活性组分,以40%乙腈萃取组分活性最强达38%,而顺铂抑制率为57%,经反相高效液相色谱分析,该固相萃取活性组分由2个片段组成,分别为出现在280nm波长下24 min和29 min,对HeLa具有抑制作用,与顺铂的抗肿瘤活性相接近。
结论家蝇3龄幼虫血淋巴具有抗He-La的mp1、mp2、mp3、mp4、mp5 5个组分,MP4活性最强,由2个分子量为16KDa成酸性的多肽片段组成。
【总页数】3页(P2606-2608)【关键词】家蝇幼虫;血淋巴;肿瘤细胞;HeLa;纯化【作者】魏洪;吴建伟;王硕石;国果;付萍【作者单位】贵阳医学院【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.抗人胸腺细胞免疫球蛋白与抗人T淋巴细胞免疫球蛋白体外淋巴细胞杀伤效价的比较 [J], 王筱啸;王军祥;赵越;李迎坤;陈刚2.应用iTRAQ标记技术结合2D LC-MS/MS分析家蝇幼虫免疫诱导后血淋巴蛋白质组 [J], 张勇;吴建伟;付萍;国果3.家蝇幼虫血淋巴蛋白组及血淋巴中热稳定蛋白研究 [J], 张勇;吴建伟;付萍;国果4.家蝇幼虫血淋巴对鸡免疫器官发育和免疫球蛋白IgA含量的影响 [J], 李国喜;赵银丽;李建华;崔淑贞5.家蝇免疫血淋巴的抑菌作用及其免疫活性的研究 [J], 郭海萍;林媛;莫秀英;林灿光;林淑芳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
琼脂培养MTT法测定混合培养HeLa细胞和人胚肺纤维母细胞药物…
琼脂培养MTT法测定混合培养HeLa细胞和人胚肺纤维母细
胞药物…
曹建国;廖端芳
【期刊名称】《中国肿瘤临床》
【年(卷),期】1995(022)007
【摘要】琼指培养MTT法测定是结合人癌干细胞集落形成能力测定HTCA和MTT比色法发展的一种新实验技术。
应用这种方法测定了1:4比例混合培养HeLa细胞和人胚肺纤维母细胞对顺氨氯铂、长春新碱、阿霉素、丝裂霉素和氟尿嘧啶的敏感性。
这种方法与HTCA测得的IC50值显著正相关,相关系数在0.874 ̄0.985间(P〈0.01);与MTT法测得的药敏结果有显著差异(P〈0.01)。
提示:该法可用于测定人实体瘤细
【总页数】5页(P495-499)
【作者】曹建国;廖端芳
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R73-361
【相关文献】
1.人肺泡巨噬细胞条件培养上清对人胚肺纤维母细胞... [J], 陈非;龙振州
2.琼脂培养MTT法测定肺癌和卵巢癌药物敏感性的临床评价 [J], 姜浩;曹建国;杨林;庄英帜;沈宝茗
3.人肺癌细胞药物敏感性的琼脂培养MTT测定 [J], 曹建国;廖端芳
4.MTT比色法测定药物对HeLa细胞作用的实验研究 [J], 彭勤;彭惠;骆云鹏;汤为学
5.三维立体培养人胚肺成纤维母细胞前列腺素E_2释放过程中蛋白酶激活受体的调节作用 [J], 王晶;李继红;张捷;方秋红;马迎民
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SBHL对HeLa细胞c-myc,H-ras和hTRT基因表达的研究
SBHL对HeLa细胞c-myc,H-ras和hTRT基因表达的研究艾金霞【期刊名称】《北华大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2009(010)004【摘要】目的观察澳洲茄胺盐酸盐对HeLa细胞c-myc,H-rass和hTRT基因表达的影响.方法用鼠抗人c-myc McAb,H-ras McAb和hTRT PcAb作为一抗,生物素化羊抗鼠IgG作为二抗,用免疫组化方法测定澳洲茄胺盐酸盐对HeLa细胞c-myc,H-ras和hTRT基因的表达.结果澳洲茄胺盐酸盐处理的HeLa细胞与对照组相比,c-myc,H-ras和hTRT基因的表达均明显降低(P<0.05).结论澳洲茄胺盐酸盐下调HeLa细胞c-myc和H-ras基因的表达,抑制细胞增殖,诱导分化;澳洲茄胺盐酸盐下调HeLa细胞hTRT基因的表达,抑制端粒酶活性,抑制细胞生长.【总页数】3页(P319-321)【作者】艾金霞【作者单位】北华大学,医学检验学院,吉林,吉林,132013【正文语种】中文【中图分类】R733.705【相关文献】1.榄香烯抑制人脑胶质瘤U251细胞株c-myc癌基因表达及其影响细胞凋亡机制的研究 [J], 杨卫忠;陈春美;石松生;王春华;杨贤义;王锐2.神经干细胞分化过程中c-myc内含子结合蛋白1与c-myc基因表达研究 [J],孙立军;张文治;只达石;黄楹;苏心;黄慧玲3.顺铂损伤U2-OS细胞诱导细胞周期阻滞、凋亡及p53、bcl-2、c-myc基因表达的实验研究 [J], 詹平;戴闽4.8-Br-cAMP对Hela细胞wtp53,mtp53,c-myc和iNOS基因表达的影响 [J], 宫璀璀;任伟宏;吴景兰;王文丽;刘影5.脂质体介导C-MYC反义寡核苷酸诱导HELA细胞凋亡的实验研究 [J], 李烿烿;马道新;程玉峰因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。