人卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)酶联免疫分析试剂盒使用说明

合集下载

碧云天 Human IgE ELISA Kit 产品说明书

碧云天 Human IgE ELISA Kit 产品说明书

Human IgE ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI479Human IgE ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IgE ELISA Kit (Human IgE Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人总免疫球蛋白E 酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆中的IgE 的ELISA 试剂盒。

本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。

多次重复检测结果表明,最小检出量为14.3ng/ml ,本试剂盒采用特异性抗体识别人IgE ,与IgG 、IgA 没有交叉反应性,板内、板间变异系数均小于10%。

免疫球蛋白E (IgE)只能在哺乳动物身上发现。

IgE 存在于血液中,是免疫系统抵御细菌和病毒等外来物质入侵的重要工具。

IgE 是一类具有δ链的亲同种细胞抗体,是参与过敏性鼻炎、过敏性哮喘和湿疹等发病机制调节的主要抗体。

IgE 是组胺和白三烯等肥大细胞释放抗炎剂水平的主要调剂者。

尽管只有少量IgE 在血液中,但它还负责触发严重过敏反应。

IgE 在I 型超敏反应中起作用,I 型超敏反应表现为各种过敏性疾病,如过敏性哮喘、大多数类型的鼻窦炎、过敏性鼻炎、食物过敏,以及某些类型的慢性荨麻疹和特应性皮炎。

此外,有足够证据证明IgE 还参与免疫系统对寄生虫入侵的反应,并增加与癌症发病有关的白血细胞数量。

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA 法(Sandwich ELISA)检测样品中人IgE 的浓度,其原理见图1。

人IgE 特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人IgE 会与捕获抗体结合。

当加入辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体后,辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体与人IgE 结合,形成夹心的免疫复合物。

最后加入显色剂TMB 溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。

过敏原特异性抗体igeelisa检测试剂盒说明书

过敏原特异性抗体igeelisa检测试剂盒说明书

过敏原特异性抗体IgE ELISA 检测试剂盒说明书【用途】定性和定量检测过敏原特异性人IgE。

过敏反应是一种特殊的病理性免疫反应,是人体对一种或多种原本无害的物质产生不正常的反应。

其主要原因是患者吸入或食入含有过敏性物体刺激机体,触发细胞大量分泌药理活性物质,引起一系列过敏症状,例如过敏性哮喘,过敏性鼻炎,湿疹、发痒、流泪、皮炎以及肠胃道过敏症等。

同时产生相当量的E型免疫球蛋白(Immunoglobulin E 即Ig E),引起人类过敏反应的过敏原种类繁多,如能从中查到引起机体过敏的物质,就能很好地预防和治疗过敏反应。

本检测盒是一种用酶联免疫法(ELISA)快速、精确测定体内引起过敏反应的特异E型免疫球蛋白的体外诊断工具。

它可定性和定量地测定人体抗特种过敏原的E型免疫球蛋白在血清中的水平,从而帮助医生正确地诊断引起病人过敏反应的过敏原。

本过敏原检测盒适合于广泛的过敏原检测,特别适用于少儿患者,同时也非常适用于湿疹以及其他皮肤病患者和对皮试过敏的患者。

【检测原理】本试剂盒采用酶免ELISA法。

当具有过敏抗原固化于表面的载体与病人血清培养在一起后,血清中特异性IgE(一抗)就会特异地结合到抗原上,此特异结合的抗体可被酶联的二抗所识别,加入显色剂后,二抗所联的酶使显色剂呈蓝色,加终止液后呈黄色。

显色的深度与血清中特异性IgE成正比;能定性/半定量地检测血清中特异性IgE的浓度。

【检测盒组成】过敏原包被微孔酶标板(Coated Wells) 96wells HRP酶联二抗12 ml浓缩洗涤液(15X)(Washing Conc.) 40ml×1 TMB单组分显色液12 ml硫酸终止液(Stop Solution) 12ml 样本稀释液(Sample Diluent) 12 ml【检测动态范围】0.35 ~100 IU/ml (0.84ng ~ 240 ng/ml)。

【重现性】CV 10%~15%【重现性】0.30IU/ml (0.72ng/ml)【注意事项】1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。

QuicKey-人免疫球蛋白 E(IgE)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书

QuicKey-人免疫球蛋白 E(IgE)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书

(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)QuicKey-人免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书QuicKey Human IgE(Immunoglobulin E) ELISA Kit产品货号:E-TSEL-H001696T/48T/24T使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************QQ客服800110755具体保质期请见试剂盒外包装标签。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。

QuicKey系列与传统ELISA试剂盒相比,在实验时间节省至少1小时的同时,获得更加灵敏和精确的实验结果。

Elabscience 自主开发的新技术,旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。

用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆中IgE浓度。

其它相关生物液体请咨询技术支持。

灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度:0.27ng/mL。

●检测范围:0.78-50ng/mL。

●特异性:可检测样本中的人IgE,且与其它类似物无明显交叉反应。

●重复性:板内,板间变异系数均<10%。

背景介绍免疫球蛋白E(IgE)早在1968年就被发现且命名,是人5种抗体中最后发现的一类抗体,常与多种过敏性疾病有关。

IgE的受体结合活性呈现其独有的特征,主要有两种受体,与FcγR家族其他成员结构同源的FcεRⅠ和FcεRⅡ/CD23。

成人血清IgE水平约20-200IU/mL,一般认为大于333IU/mL(800ng/mL)时为异常升高。

与IgE升高相关的常见疾病有:过敏性哮喘、季节过敏性鼻炎、特应性皮炎、药物诱导间质性肺炎、支气管肺曲霉病、麻风、类天疱疮及某些寄生虫感染等。

检测原理本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。

用抗人IgE抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)及生物素化的抗人IgE抗体同时加入酶标板中,样本(或标准品)中的人IgE会与包被抗体结合,同时抗人IgE抗体与结合在包被抗体上的人IgE结合,游离的成分被洗去。

人免疫球蛋白 D(IgD)酶联免疫吸附测定试剂盒说明书

人免疫球蛋白 D(IgD)酶联免疫吸附测定试剂盒说明书

人免疫球蛋白D(IgD)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中IgD含量。

实验原理用纯化的IgD抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的IgD抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的IgD 呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品):2瓶,请临用前15分钟内配制。

每瓶以样品稀释液稀释至1ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,000ug/ml,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成1,000ug/ml,500ug/ml,250ug/ml,125ug/ml,62.5ug/ml,31.2ug/ml,15.6ug/ml,样品稀释液直接作为空白孔0 ug/ml。

如配制500ug/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)1,000ug/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、样品稀释液:1×20ml。

4、检测稀释液A:1×10ml。

5、检测稀释液B:1×10ml。

6、检测溶液A:1×120/瓶(1:100)。

临用前以检测稀释液A1:100稀释(如:10检测溶液A/990检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

7、检测溶液B:1×120/瓶(1:100)。

临用前以检测稀释液B1:100稀释。

稀释方法同检测溶液A。

8、底物溶液:1×10ml/瓶。

达优 人 IgE ELISA试剂盒说明书

达优 人 IgE ELISA试剂盒说明书

产品信息和操作指南Human IgE预包被 ELISA kit Cat# : DKW12-1820-048 / DKW12-1820-096本试剂盒专用于科研,而非用于诊断Human IgEDKW12-1820目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒提供的试剂 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (5)操作过程 (7)结果分析 (9)试剂盒的保存 (9)操作步骤一览表 (10)参考文献 (11)ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法 (12)预包被ELISA 试剂盒系列产品 (15)1、产品简介:达优®人IgE ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术,体外定量检测人血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的IgE,可同时检测天然的和重组的IgE。

本试剂盒为预包被板,整个过程孵育时间不超过4小时,洗涤9次。

本试剂盒专用于科研,而非用于诊断。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分,若有任何疑问请与达科为生物工程有限公司联系,E-mail:*************.检测范围:32-0.5 ng/mL灵敏度:0.1ng/mL重复性:板内、板间变异系数均<10%。

2、知识背景:抗体根据抗原性和抗体重链分为IgG、IgA、IgM、IgE和IgD 五种。

IgE是介导I型变态反应的重要抗体,在支气管哮喘、鼻炎、食物过敏、药物、病原体等特应性疾病的发病过程中发挥着关键作用。

而抗IgE单克隆抗体可以与血液中IgE结合,降低血清总IgE水平,并下调肥大细胞、嗜碱性粒细胞表面的IgE高亲和力受体FcεRI的表达,从而抑制了IgE介导的免疫反应(1-6)。

3、试剂盒提供的试剂:试剂规格配制Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状,按瓶上说明操作Biotinylated antibody 2/1瓶* 1:100用Dilution buffer R(1×)稀释Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1:100用Dilution buffer R(1×)稀释Dilution buffer R(1×) 3/2瓶* 即用型Washing buffer(50×)1瓶 150∶用蒸馏水稀释TMB 1瓶即用型Stop solution 1瓶即用型Precoated ELISA plate 8×12或8×6*即用型封板膜 2/1张* 即用型说明书1份*:96/48 Tests4、需要实验者自行准备的试剂与仪器:1.酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)2.微量加液器及吸头:P10,P50,P100,P200,P1000 3.蒸馏水或去离子水4.全新滤纸5.旋涡振荡器和磁力搅拌器5、注意事项:1.试剂应按瓶上标签说明储存,使用前室温平衡20-30分钟。

人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程

人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程

1、 检验申请单独检验项目申请:人类免疫缺陷病毒抗体{缩写抗HIV (1+2)]测定。

临床医生根据需要提出检验申请。

2、 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml ,不抗凝,置普通试管中,或采用含分离胶的真空采血管。

也可采集血浆,用肝素、EDTA 或枸橼酸盐抗凝。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml 的全血标本,或少于0.1ml 的血清或血浆。

2.1.5.2对检测结果可能有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在置1-2h 后将标本离心分离出血清或血浆,避免溶血。

离心必须达到3000rpm 15min ,离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。

2.2.2标本保存时间:室温(15-25℃)下可稳定48h ,普通冰箱中(2-8℃)稳定7d ,在-20℃最多可保存4周。

避免反复冻融。

不可使用热灭活的标本。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4-8℃冰箱内保存7d 。

2.3标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛,避免剧烈活动。

医院检验科免疫室 体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程 生效日期: 年 月 日版本:第1版第 页,共 页3.方法原理本实验采用HIV 特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板,用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶。

当待测标本中存在HIV 抗体时,该抗体和固化的抗原结合于反应板上,并进一步与酶结合物相结合,在TMB 底物参与反应的情况下,产生显色反应。

小鼠卵清蛋白特异性 IgE(OVA sIgE) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书

小鼠卵清蛋白特异性 IgE(OVA sIgE) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书

小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号:E0720m2. 血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

3. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

操作步骤实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。

每次检测都应该做标准曲线。

如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。

空白孔加样品稀释液100ul,余孔分别加标准品或待测样品100ul,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。

每孔加检测溶液A工作液100ul(取1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。

3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100ul,37℃,60分钟。

5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7. 依序每孔加终止溶液50ul,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求xhl

过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求xhl

过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求xhl过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒(胶体金免疫层析法)适用范围:该产品用于体外定性检测人血清中针对蒿属花粉/豚草花粉、户尘螨/粉尘螨、猫毛皮屑、狗毛皮屑、大豆、鸡蛋、牛奶、杨树/柳树/榆树花粉变应原的特异性IgE抗体。

1.1 包装规格:25人份/盒。

1.2 主要组成成分:2.1 外观检查外观应符合如下要求:2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整,密封包装无漏气、破损;2.1.2包装、标签无破损,文字清晰。

2.1.3铝箔袋内检测卡外观平整,物料贴附牢固,内容齐全。

2.2 物理检查试纸条的宽度应不低于4mm;液体移行速度应不低于5mm/min。

2.3 阴性符合率应为(-/-)20/20。

2.4 阳性符合率每个过敏原检测项阳性符合率均应为(+/+)5/5。

2.5 最低检测限每个过敏原检测项对应最低检测限质控品L1和L2的检测结果均应为阳性,L3应为阴性。

2.6 精密度每个过敏原检测项10个测试之间反应结果一致,显色度均一。

2.7 稳定性2.7.1热稳定性试验:试剂盒于37±1℃放置6天,检测2.1~2.6各项,结果应符合2.1~2.6各项目要求。

2.7.2效期稳定性试验:试剂盒在2℃~30℃保存,取到效期后的试剂盒,检测2.1~2.6各项,结果应符合2.1~2.6各项目要求。

2.8 批间差三批每个过敏原检测项各10个精密度质控品测试之间反应结果应一致,显色度均一。

2.9 特异性测10份特异性质控品血清(S1~S10),其结果为阴性。

豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)酶联免疫分析(ELISA)

豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)酶联免疫分析(ELISA)

豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测豚鼠血清,血浆及相关液体样本中卵清蛋白特异性IgE(OV AsIgE)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)水平。

用纯化的豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入卵清蛋白特异性IgE(OV A sIgE),再与HRP标记的卵清蛋白特异性IgE(OV A sIgE)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的卵清蛋白特异性IgE(OV A sIgE)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)浓度。

试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品:2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

总IgE检测试剂盒(酶联免疫法)说明书

总IgE检测试剂盒(酶联免疫法)说明书

总IgE检测试剂盒(酶联免疫法)说明书[产品名称][通用名称] 总IgE检测试剂盒(酶联免疫法)[英文名称] Total IgE ELISA适应症:过敏性疾病、蠕虫病、湿疹性或非湿疹性皮炎、IgE骨髓瘤等。

临床意义:1)>100 IU/ml水肿Churg-2)IgE ∙∙∙∙∙T∙2∙∙∙在下列疾病中可有IgE缺陷:∙X-染色体相关低丙种球蛋白血症;∙严重的联合免疫缺陷(SCID);∙毛细管扩张性运动失调;∙肺纤维化疾病;∙极少数的健康人。

[检验原理] 试剂盒中每个微孔板条有8个可拆分的包被有抗人IgE多克隆抗体的微孔。

第一次温育时,稀释后的样本在微孔中反应。

如果样本阳性,特异性IgE与抗体结合。

为了检测结合的IgE,加入能发生颜色反应的酶标抗人IgE抗体(酶结合物)进行第二次温育。

然后加入酶底物,发生颜色反应。

通过标准品1-4绘制的标准曲线来确定IgE浓度。

效。

1.包被有抗原的微孔板:自第一次开封后,抗原包被的微孔板在干燥的2-8?C的环境中保存4个月。

2.清洗缓冲液:稀释后的缓冲液于2-8?C最多可稳定4周。

[样本要求]样本:人血清或EDTA、肝素、柠檬酸盐抗凝的血浆。

稳定性:待测患者样本于2-8?C可储存14天,稀释后的样本需在同一个工作日检测。

样本稀释:患者样本用样本缓冲液1:10稀释。

例如,可取100μl血清用900μl样本缓冲液稀释并使用混匀器混匀(加样枪不适合于混匀)。

注意:标准品和对照品已经稀释,直接使用,勿需再稀释![检验方法]试剂的准备和稳定性注意:所有试剂在使用前均应在室温(18-25?C)平衡约30分钟。

试剂首次开封后,在无污染的情况下,于2-8?C保存,可稳定至所标示的有效期。

- 抗原包被的微孔:直接使用。

在外包装密封线咬合部的上端剪开保护袋,为防止板条受潮,只有当微孔板平衡到室温后才可打开包装。

剩余板孔应立即放回保护袋并封好(保留干燥剂)。

从第一次打开保护袋起,抗原包被的微孔可在干燥的2-8?C的环境中保存4个月。

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种常用的免疫学实验方法,用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。

它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势,被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。

本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南,包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。

一、实验准备1.阅读检测项目的说明书:在使用试剂盒前,仔细阅读说明书,了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。

2.样本准备:根据实验要求,准备样本。

如果需要检测血清中的抗体水平,可以采集血液样本,离心分离血清;如果需要检测细胞培养上清中的分子,将上清收集,并使其清晰,避免细胞或杂质的污染。

3.样本预处理:根据实验需求,对样本进行必要的预处理。

例如,可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本,以改变样本组分和浓度。

4.准备品质控制样品:制备阳性和阴性控制样品,用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。

5.实验器材准备:准备所需实验器材,如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。

确保器材的干净和完整,并按照说明书要求对其进行预处理。

二、试剂使用步骤1.试剂准备:根据说明书要求,将试剂从冰箱中取出,并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。

确保试剂瓶盖紧闭,并避免暴露在直接阳光下。

2.实验操作:按照说明书的要求,将试剂加入到酶标板中,并根据实验设计进行标准曲线的设置。

标准曲线用于测量未知样品的数量,并计算出浓度。

3.孵育:根据试剂盒的要求,将酶标板放入孵育箱中进行孵育。

孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。

4.洗涤:使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。

洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。

5.补液:在洗涤完成后,加入辣根过氧化物酶标况稀释液,促进酶标物与特异性结合物的反应。

6.孵育:根据试剂盒的要求,将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。

7.反应停止:根据试剂盒的要求,加入相应的停止液,停止酶反应。

人免疫球蛋白GIgG酶联免疫分析

人免疫球蛋白GIgG酶联免疫分析

人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T2.5μg/ml -80μg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G(IgG)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白G(IgG)水平。

用纯化的抗-IgG抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G(IgG),再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G(IgG)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人免疫球蛋白G(IgG)浓度。

试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl (样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

人免疫球蛋白E_IgE_说明书

人免疫球蛋白E_IgE_说明书

人免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫酶联免疫分析分析分析试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围检测范围:: 96T7.5µg/ml -240µg/ml使用目的使用目的::本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白E(IgE)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人免疫球蛋白E(IgE)水平。

用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE),再与HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人免疫球蛋白E(IgE)浓度。

试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品(480µg/ml ) 0.5ml ×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶 4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6显色剂B 液6ml ×1/瓶12密封袋1个标本标本要求要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP )活性。

操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

240µg/ml 5号标准品 150µl 的原倍标准品加入150µl 标准品稀释液 120µg/ml 4号标准品 150µl 的5号标准品加入150µl 标准品稀释液 60µg/ml 3号标准品 150µl 的4号标准品加入150µl 标准品稀释液 30µg/ml 2号标准品 150µl 的3号标准品加入150µl 标准品稀释液 15µg/ml1号标准品150µl 的2号标准品加入150µl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

小鼠卵清蛋白特异性IgEOVA-sIgE试剂盒使用方法

小鼠卵清蛋白特异性IgEOVA-sIgE试剂盒使用方法

小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)试剂盒使用方法检测范围:96T0.8μg/ml -24μg/ml使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中卵清蛋白特异性IgE(OV A-sIgE)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠卵清蛋白特异性IgE(OV A-sIgE)水平。

用纯化的小鼠卵清蛋白特异性IgE(OV A-sIgE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入OV A-sIgE,再与HRP标记的OVA-sIgE抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的OV A-sIgE呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠卵清蛋白特异性IgE(OV A-sIgE)浓度。

试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品(48μg/ml)0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

24μg/ml 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液12μg/ml 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液6μg/ml 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液3μg/ml 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液1.5μg/ml 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

豚鼠卵清蛋白特异性iggovasiggelisa试剂盒使用说明书.doc

豚鼠卵清蛋白特异性iggovasiggelisa试剂盒使用说明书.doc

豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)elisa试剂盒使用说明书Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置标准品稀释液:1.5ml×1瓶酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)【豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)试剂盒】本试剂仅供研究使用计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

试剂盒组成:封板膜:2片(48)/2片(96)说明书:1份密封袋:1个标准品:2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)水平。

用纯化的豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OV A sIgG)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入卵清蛋白特异性IgG(OV A sIgG),再与HRP标记的卵清蛋白特异性IgG(OV A sIgG)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

小鼠卵清蛋白特异性IgGOVAsIgG试剂盒使用方法

小鼠卵清蛋白特异性IgGOVAsIgG试剂盒使用方法

小鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA-sIgG)试剂盒使用方法检测范围:96T1μg/L -70μg/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中卵清蛋白特异性IgG(OV A-sIgG)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠卵清蛋白特异性IgG(OV A-sIgG)水平。

用纯化的小鼠卵清蛋白特异性IgG(OV A-sIgG)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入OV A-sIgG,再与HRP标记的OV A-sIgG抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的OV A-sIgG呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠卵清蛋白特异性IgG(OV A-sIgG)浓度。

试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品(120μg/L)0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

60μg/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液30μg/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液15μg/L 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液7.5μg/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液3.75μg/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

人分泌型免疫球蛋白ASIgA酶联免疫分析试剂盒使用方法

人分泌型免疫球蛋白ASIgA酶联免疫分析试剂盒使用方法

人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T0.3μg/ ml -16μg/ ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)水平。

用纯化的人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入分泌型免疫球蛋白A(SIgA),再与HRP标记的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)浓度。

标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

小鼠卵清蛋白特异性IgEOVAsIgE试剂盒使用方法

小鼠卵清蛋白特异性IgEOVAsIgE试剂盒使用方法

小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)试剂盒使用方法检测范围:96T0.8μg/ml -24μg/ml使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中卵清蛋白特异性IgE(OV A-sIgE)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠卵清蛋白特异性IgE(OV A-sIgE)水平。

用纯化的小鼠卵清蛋白特异性IgE(OV A-sIgE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入OV A-sIgE,再与HRP标记的OVA-sIgE抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的OV A-sIgE呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠卵清蛋白特异性IgE(OV A-sIgE)浓度。

试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品(48μg/ml)0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

24μg/ml 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液12μg/ml 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液6μg/ml 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液3μg/ml 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液1.5μg/ml 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

人卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用
特异性:本试剂盒可同时检测人OVA sIgE,且与其他抗体无交叉反应。

有效期:6个月
预期应用:ELISA法半定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中OVA sIgE含量。

说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。

2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

实验原理
用OVA包被酶标板,制成固相载体。

向微孔中先加入待测样品进行反应,然后再加入辣根过氧化物酶标记抗人IgE抗体进行反应,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的OVA sIgE呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品中OVA sIgE的效价(抗血清最终能显色的最高稀释倍数记为效价)。

试剂盒组成及试剂配制
1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。

2.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

3.辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgE抗体稀释液(HRP-anti-guinea IgE Diluent):1×10ml/瓶。

4.辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgE抗体(HRP-anti-guinea IgE):1×120μl/瓶(1:100)。

5.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

6.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

7.终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

需要而未提供的试剂和器材
1.标准规格酶标仪
2.高速离心机
3.电热恒温培养箱
4.干净的试管和Eppendof管
5.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器
6.蒸馏水,容量瓶等
标本的采集及保存
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或室温过夜后于1000x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

标本的稀释原则:
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。

稀释的过程中,应做好详细的记录。

最后计算抗体效价时,稀释了“N”倍,标本中抗体的效价为“N”。

辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgE抗体的稀释原则:
临用前以辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgE抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

如10μl辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgE抗体加990μl 辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgE抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。

操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。

如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

1.加样:分别设空白孔、待测样品孔。

空白孔加样品稀释液100μl,余孔加待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。

2.弃去液体,甩干,不用洗涤。

每孔加辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgE抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。

3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,250μl/每孔,甩干。

4.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见孔内有明显蓝色,即可终止)。

5.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

6.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

在加终止液后15分钟以内进行检测。

注:
1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。

测量时先用此孔调OD值至零。

3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。

辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgE抗体工作液请依据所需的量配置使用。

请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgE抗体工作液。

5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。

洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。

根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

计算
为检测样品中小鼠OVA sIgE效价,客户可以采取样品2倍倍比稀释样品计算抗体效价,一般采取以1:40为起始稀释倍数(使用样品稀释液进行稀释)。

最大稀释倍数根据客户自身试验要求而定,最终显色与阴
性对照孔进行比较,有明显差异的最大稀释度定为抗体的最终效价。

注意事项
1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。

2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。

3.一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。

5.在配制检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。

6.底物请避光保存。

7.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。

相关文档
最新文档