实验四不规则抗体筛选与鉴定、效价测定

不规则抗体筛查流程步骤

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不规则抗体筛查试验操作规程

不规则抗体筛查试验操作规程(共3页)-本页仅作为预览文档封面，使用时请删除本页-XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作，保证检查结果准确和临床输血安全、有效，依据《输血实验室管理程序》有关条款的要求制定本规程。

2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查。

3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定，但只对所筛选或鉴定的标本负责。

4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清（血浆）与筛选红细胞反应，检测受检者血清（血浆）中是否存在红细胞不规则抗体，红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应，根据反应格局鉴定抗体特异性。

7.仪器设备和检测环境.仪器设备等：玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。

. 检测环境：室温应控制在18~27℃，湿度应保持在30~70%。

8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d），均为有合格证件的正品。

②市售O型筛选红细胞：为三支以上不同人份的3%筛选红细胞，均为有合格证件的正品。

或自制O型筛选红细胞：选择已确认ABO血型为O型的健康者，采集EDTAK抗凝血2标本离心，取少许红细胞置于试管中，用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞[3400转/分钟（1000g），每次离心1分钟，离心后将上清液全部倒出]，再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中，然后加入1ml生理盐水混匀，即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞；依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞。

不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响

不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响1. 引言1.1 背景新生儿溶血病是一种常见的新生儿疾病，主要是由于母体产生的不规则抗体与胎儿红细胞表面抗原结合引起的。

胎儿红细胞与母体不相容的抗原结合后，会引发免疫反应，导致红细胞破裂溶解，造成溶血现象。

此病若不及时诊断和治疗，可导致严重的贫血、黄疸甚至死亡。

随着医学技术的进步，不规则抗体筛查及效价检测方法得到了不断的完善和提升。

通过对孕妇进行不规则抗体筛查，可以及时发现母体携带的不规则抗体，采取相应的措施进行干预，从而避免新生儿溶血病的发生。

对不规则抗体的效价检测也能帮助医生更准确地评估患儿的病情，指导治疗方案的制定。

深入研究不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响，对提高疾病的诊断率和治疗效果具有重要意义。

本文将从不规则抗体筛查方法、不规则抗体效价检测方法、不规则抗体筛查与新生儿溶血病的关联等方面展开讨论，旨在为临床实践提供更为科学的依据。

1.2 目的目的：本文旨在探讨不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响，通过详细分析不规则抗体筛查方法和不规则抗体效价检测方法，揭示不规则抗体与新生儿溶血病之间的关联。

进一步探讨不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响，以期为临床医学提供更为准确、快速、有效的诊断和治疗方法。

通过本文的研究，我们希望能够增进对不规则抗体筛查及效价的了解，深入探讨其在新生儿溶血病中的作用机制，为临床实践提供科学依据，促进新生儿溶血病的预防和治疗，从而减少新生儿患者的发病率和提高其生存质量。

通过本文的研究，我们希望能够为不规则抗体筛查及效价在新生儿溶血病中的应用提供重要的参考依据，并为相关研究和临床实践提供新的思路和途径。

1.3 意义在新生儿溶血病的预防和治疗中，不规则抗体筛查及效价的重要性不可忽视。

不规则抗体筛查是指通过检测母体血清中是否存在针对胎儿红细胞的不规则抗体，从而及时发现患有不规则抗体的孕妇，采取相应的预防措施，避免新生儿溶血病的发生。

不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程

不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程1.检验目的不规则抗体筛选和鉴定可在交叉配合之前进行或一起进行，这样有利于患者抗体的早期确认及鉴定，发现临床上有意义的抗体，避免一些可能的情况而造成病情的延误。

2.检验方法分盐水介质法、抗球蛋白法和微柱凝胶法。

3.检验原理让待检者的血清与已知血型的试剂红细胞即筛选红细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套）起反应，以发现在37℃中有反应活性的抗体。

这种抗体可引起新生儿溶血病、溶血性输血反应、或使输入的红细胞存活期缩短等。

当不规则抗体筛选试验阳性后，再进行不规则抗体鉴定，即利用谱红细胞（11套鉴定细胞）与待检者的血清反应，根据反应结果判断机体所产生的同种抗体类别。

4.标本要求受检者不抗凝静脉血4.0ml，分离血清，48小时内使用5.试剂5.1.筛选红细胞：由2或3人份的O型红细胞组成为一套试剂，每套试剂筛选红细胞中至少有以下常见的抗原：D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Le a、Le b、K、k、Fy a、Fy b、Jk a、Jk b等。

每次用3套试剂（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）进行抗体筛选，见表1005-1。

5.2.鉴定谱细胞：除包括常见的抗原以外还有：C w、Kp a、Kp b、Js a、Js b、Lu a、Lu b、Xr/min a等。

每次用11套试剂进行抗体鉴定，见表1005-2。

5.3.抗球蛋白试剂：多特异性抗球蛋白血清（IgG、C3d）。

5.4.致敏红细胞（质控细胞）。

5.5.0.9%生理盐水。

5.6.Coombs微柱凝胶卡。

6.器材试管、吸管、37℃水浴箱、台式离心机、滤纸、微量加样器等。

7.操作程序7.1.盐水介质法7.1.1．取受检者血清2滴于标记有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3支小试管中。

7.1.2．对应加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套2%～5%筛选红细胞生理盐水悬液1滴，37℃孵育30分钟。

7.1.3.以3000r/min离心10秒，观察凝集和溶血情况，并记录反应情况于表1005-1中。

如果抗体筛选试验阳性，继续做以下试验。

实验四不规则抗体筛选与鉴定、效价测定

2.鉴定 2.鉴定
标管： ⑴标管：11支1-10、自c 加样： ⑵加样：Ps2滴+谱细胞1滴离心、观察结果： ⑶离心、观察结果： ①直接观察 ②4℃10min观察 ③恢复室温观察，有格局为IgM ④37℃观察有无凝集 ⑤凝聚胺法或抗人球法（上谱细胞），观察格局可判断有无IgG抗体测效价： ⑷测效价：若有抗体，测效价
操作
1.筛选 1.筛选
(聚凝胺法聚凝胺法) 聚凝胺法 (抗人球法抗人球法) 抗人球法
⑴标管8支:S1、S2、S3、S1’、S2’、S3’、K、自c 标管8 ⑵加样：受检血清2滴+上述细胞1滴检测加样 ⑶观察结果:阳性进行不规则抗体鉴定观察结果: ⑷测抗体效价（室温、4℃10min、恢复室温测抗体效价 10min、37℃3min ）
注意事项 1.更换滴管， 1.更换滴管，防止干扰更换滴管 2.防止前带现象， 2.防止前带现象，看结果从高稀释度开始防止前带现象 3.试剂细胞 3.试剂细胞 4.稀释液体积越小， 4.稀释液体积越小，产生误差越大稀释液体积越小
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
思考题
1.为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水、 1.为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水、为何不规则抗体筛选与鉴定要在盐水聚凝胺、抗人球介质中进行。聚凝胺、抗人球介质中进行。 2.抗体效价检测的临床应用 2.抗体效价检测的临床应用
目的掌握抗体效价的测定方法原理 Ab经过倍比稀释加入悬浮红细胞，以肉眼可见“±”凝集的最高稀释倍数为抗体效价。器材试剂小试管、记号笔、滴管、离心机悬浮红细胞、血清、生理盐水
实验步骤 1.标记管号标记管号：1、2、4、8、16、32…… 标记管号 2.从2号开始各管分别加生理盐水50ul 从号开始各管分别加生理盐水50ul 3.加血清加血清：1、2管各加血清加血清 4.倍比稀释倍比稀释：将2号管混匀，从中吸出50ul移入倍比稀释第3管，混匀；再从第3管吸出50ul移入第4 管，以此类推，至最后一管，吸出50ul弃去。 5.加悬红加悬红：每管各加50ul ，混匀。加悬红 6.3000r／min离心离心15秒，直接观察结果观察结果、离心观察结果 4℃10min、室温10min、37℃3min观察结果。

不规则抗体筛选操作规程

不规则抗体筛选操作规程一．试剂和仪器1.抗人球蛋白（IgG,C3b/C3d）多特异检测试剂卡或抗人球蛋白（IgG）单特异检测试剂卡。

2.上海血液生物医药有限公司3%抗筛试剂红细胞悬液3.离心机和孵育器二．标本收集与处理1．血清或血浆都可以使用。

2．如果在直接抗人球蛋白实验中加入了血浆标本，因为钙离子的失活，补体依赖的抗体可能无法检测出来，所以建议使用血清标本。

三．操作步骤1．取出试剂卡，平衡至室温；使用前离心确保无气泡和断层。

2．观察卡的反应液面高度，确保试剂液面高于凝胶平面3mm左右，否则请勿使用；撕开试剂卡上的锡纸，撕开后的微柱请于1小时内进行下面操作。

3. 分别向反应柱内加入50 ul患者血清或血浆。

注意，加样时，吸头请勿触及微柱管壁。

4．再分别向反应柱内加入10ul 3%红细胞悬液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(抗筛红细胞)。

5．观察柱中的反应物各组分是否混匀，必要时轻弹几下微柱充分，使反应物混匀。

6．在孵育仓中37℃孵育15分钟。

7．用离心机离心5分钟，离心必须在加样后30分钟内进行。

8. 从微柱正反两面判读并记录结果。

四．结果判读阳性结果（＋）：红细胞凝集为阳性结果。

阴性结果（－）：无溶血及红细胞未凝集为阴性结果。

溶血会导致玻璃珠上方呈粉红色或红色。

如果发现溶血现象，则应先将血清或血浆置于56℃水浴30min以灭活补体，然后再重复试验，观察红细胞凝集现象。

4 + 反应：红细胞在柱中玻璃珠上面凝集，并形成一个环形带。

3 + 反应：发生凝集的大部分红细胞停留在玻璃珠的上半部分。

2 + 反应：发生凝集的红细胞分布于整个玻璃珠床，柱的底部有少量细胞。

1 + 反应：大部分凝集的红细胞停留在玻璃珠床的下半部分，柱的底部有少量红细胞。

阴性反应：所有红细胞均穿过玻璃珠床，在柱的底部形成一个平整的红细胞聚集带。

五.注意事项1. 试剂卡应保存在2～25℃，请勿冷冻保存；请勿将试剂卡放入自动除霜的冰柜中，也不要放在离热源很近或阳光直射的地方。

不规则抗体筛查与血型抗体效价

不规则抗体筛查与血型抗体效价不规则抗体筛查? 申请单项目：不规则抗体筛查 ? 标本要求：EDTA抗凝管抽取2ml，标本不得有溶血、脂血及凝块，否则视为不合格标本给予退回。

? 检测时间：每次收取标本，当天发出报告。

? 费用：50元/次? 临床意义：不规则抗体是指抗-A、抗-B或抗AB以外的其他抗体。

目前不规则抗体的筛查方法是采用O型试剂红细胞检测被检者的血清中的不规则抗体。

由于有临床意义的不规则抗体会导致溶血性输血反应，破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命，产生溶血性输血反应，轻则影响治疗效果，重则危及病人生命；此外，对孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器的发育，并使其智力发育受到伤害，严重者则会危及新生儿的生命安全。

因此，抗筛选择是很必要而且必须的。

? 其筛选的意义主要在三个方面:1.献血者的血清或血浆进行抗体筛查，可以防止有不规则抗体的血液输注给病人，避免由于献血者血液中的不规则抗体引起病人红细胞的破坏二引起的溶血性输血反应，同时可以减少血液浪费，可将有不规则抗体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。

2.对需要输血治疗的患者，进行不规则抗体筛查，可以有助于血液的选择，从而有充分的时间来选择不含有针对某抗体的影响抗原的血液，从而防止因为输注含有某种抗体相应抗原的血液而引起溶血性输血反应，保证输血安全。

3.孕妇进行不规则抗体筛查，可以尽早发现不规则抗体，可以在孕期进行新生儿溶血病的预防和防治，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤害，减少新生儿溶血病的程度，提高胎儿或新生儿的身体素质。

反复输血或多次妊娠可以使患者受到免疫刺激而产生不规则抗体。

因此，输血前对有输血史，人生史的患者进行不规则抗体筛查非常必要，有利于早起发现和确认具体有临床意义的抗体并可以在配血前鉴定此抗体，已获得充足的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的供者，确保输血安全。

? 临床意义：1.孕妇及产妇必查此项目。

2.有输血史者（血制品），输血前必查此项目。

不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响

不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响随着医学技术的不断发展，对于新生儿溶血病的防治工作也日益得到加强。

而不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响尤为重要。

本文将从不规则抗体的概念和筛查方法、新生儿溶血病的相关知识以及不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响等方面进行论述。

一、不规则抗体的概念和筛查方法不规则抗体是指存在于个体血清中的一种特异性抗体，其抗原通常不是细菌、病毒或真菌，而是体内产生的抗原。

不规则抗体可以引起机体免疫反应，导致溶血性贫血等疾病。

不规则抗体的筛查方法通常包括直接抗人球蛋白试验和间接抗人球蛋白试验。

直接抗人球蛋白试验用于筛查已知的抗体，而间接抗人球蛋白试验则用于筛查不明确的抗体。

二、新生儿溶血病的相关知识新生儿溶血病是由于母亲产生的免疫球蛋白G（IgG）类不规则抗体通过胎盘进入胎儿体内，攻击胎儿红细胞而引起的溶血病。

新生儿溶血病可分为两种类型：Rh血型不合（Rh 阴性母亲和Rh阳性父亲所生的Rh阳性胎儿）和非Rh血型不合（其他不同的血型不合）。

新生儿溶血病的临床表现主要包括贫血、黄疸、肝脾肿大等症状，严重者可导致脑损伤甚至死亡。

及时发现和有效防治新生儿溶血病对保护婴儿的生命和健康至关重要。

1. 提前发现和诊断新生儿溶血病通过对孕期母亲进行不规则抗体的筛查，能够及早发现母体血清中的不规则抗体，通过监测抗体效价变化来判断新生儿是否会患有溶血病。

一旦发现存在不规则抗体，可以及时采取针对性的治疗措施，减少新生儿溶血病的发生率。

2. 预防新生儿溶血病的发生对于筛查出存在不规则抗体的孕妇，可以采取积极的预防措施，如输注相关免疫球蛋白、手术干预等，以减少胎儿受到不规则抗体的影响。

对于已知存在风险的孕妇可以采用产前诊断技术，如羊水穿刺或绒毛取样等进行胎儿Rh血型鉴定，从而采取精准的治疗措施。

3. 提高新生儿溶血病的治疗效果对于患有溶血病的新生儿，通过检测母体不规则抗体的效价，可以更加精确地了解抗体的影响程度，从而制定更加有效的治疗方案。

不规则抗体筛选操作规程

不规则抗体筛选操作规程一.试剂和仪器1.抗人球蛋白（IgG,C3b/C3d）多特异检测试剂卡或抗人球蛋白(IgG)单特异检测试剂卡。

2.上:海血液生物医药有限公同3%抗筛试剂红细胞悬液3.离心机和孵育器二.标本收集与处理1.血清或血浆都可以使用。

2.如果在直接抗人球蛋白实验中加入了血浆标本，因为钙离子的失活，补体依赖的抗体可能无法检测出来，所以建议使用血清标本。

操作步骤1.取出试剂卡，平衡至室温:使用前离心确保无气泡和断层。

2.观察卡的反应液面高度,确保试剂液面高于凝胶平面3cm左右，否则请勿使用；撕开试剂卡上的锡纸，撕开后的微柱请子1小时内进行下面操作。

3.分别向反应柱内加入50 ul患者血清或血浆。

注意，加样时，吸头请勿触及微柱管壁。

4.再分别向反应柱内加入10u1 3%红细胞悬液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(抗筛红细胞)。

5.观察柱中的反应物各组分是否混匀，必要时轻弹儿下微柱充分，使反应物混匀。

6.在孵育仓中37℃孵育15分钟。

7.用离心机离心5分钟，离心必须在加样后30分钟内进行。

8.从微柱正反两面判读并记录结果。

四.结果判读阳性结果（＋）红细胞凝集为阳性结果。

阴性结果(-):无溶血及红细胞未凝集为阴性结果。

溶血会导致玻璃珠上:方呈粉红色或红色。

如果发现溶血现象，则应先将血清或血浆置于56C水济30min以灭活补体，然后再重复试验，观察红细胞凝集现象。

4 +反应:红细胞在柱中玻璃珠上:面凝集，并形成一个环形带。

3+反应:发生凝集的大部分红细胞停留在玻璃珠的上半部分。

2 +反应:发生凝集的红细胞分布于整个玻璃珠床，柱的底部有少量细胞。

1+反应:大部分凝集的红细胞停留在玻璃珠床的下半部分，柱的底部有少量红细胞。

阴性反应:所有红细胞均穿过玻璃珠床，在柱的底部形成一个平整的红细胞聚集带。

五.注意事项1.试剂卡应保存在2-25C，请勿冷冻保存:请勿将试剂卡放入自动除霜的冰柜中，也不变放在离热源很近或阳光直射的地方。

不规则抗体筛查试验操作规程

XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作,保证检查结果准确和临床输血安全、有效,依据输血实验室管理程序有关条款的要求制定本规程;2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查;3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定,但只对所筛选或鉴定的标本负责;4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清血浆与筛选红细胞反应,检测受检者血清血浆中是否存在红细胞不规则抗体,红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应,根据反应格局鉴定抗体特异性;7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等：玻璃试管75X12mm、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱;7.2. 检测环境：室温应控制在18~27℃,湿度应保持在30~70%;8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂抗IgG,C3d,均为有合格证件的正品;②市售O型筛选红细胞：为三支以上不同人份的3%筛选红细胞,均为有合格证件的正品;抗凝血标或自制O型筛选红细胞：选择已确认ABO血型为O型的健康者,采集EDTAK2本离心,取少许红细胞置于试管中,用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞3400转/分钟1000g,每次离心1分钟,离心后将上清液全部倒出,再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中,然后加入1ml生理盐水混匀,即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞；依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞;9.血标本的处理将受检者血标本离心分离出血清血浆和压积红细胞,血清血浆备用；再吸取30µl压积红细胞中的游离红细胞,加入1ml生理盐水中,混匀配成3%的自身对照红细胞悬液备用;10.实验方法与步骤10.1.盐水介质法①取4支干净试管,分别标记为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和自身对照；②每管中先各加入2滴受检者血清血浆；③再分别加入1滴对应的3%的Ⅰ号、Ⅱ号、Ⅲ号筛选红细胞和自身对照红细胞悬液；④混匀后,用交叉配血专用离心机120 g离心1分钟；⑤先肉眼观察溶血情况,再轻轻充分混匀后,用肉眼或光学显微镜观察凝集情况,并记录;⑥结果判读：自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均无凝集者,为不规则抗体筛查阴性,表明未检出红细胞不规则抗体；自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均凝集者,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含冷自身抗体或同时伴有同种免疫性红细胞不规则抗体；自身对照管无凝集,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管中至少有1管出现凝集,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含IgM同种免疫性红细胞不规则抗体;10.2.凝聚胺法①盐水介质法筛选红细胞不规则抗体试验结束后转做凝聚胺法试验,具体执行凝聚胺法交叉配血试验操作规程;②结果判读：自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均无凝集者,为不规则抗体筛查阴性,表明未检出红细胞不规则抗体；自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均凝集者,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含IgG自身抗体或同时伴有IgG同种免疫性红细胞不规则抗体；自身对照管无凝集,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管中至少有1管出现凝集,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含IgG同种免疫性红细胞不规则抗体;10.3.直接抗人球蛋白法①盐水介质法筛选红细胞不规则抗体试验结束后转做直接抗人球蛋白试验,具体执行直接抗人球蛋白试验操作规程;②结果判读：同10.2. ②;10.4.红细胞不规则抗体特异性鉴定对红细胞不规则抗体筛选试验阳性的血标本,建议受检者到省级以上三甲医院作进一步的红细胞不规则抗体特异性鉴定;11.质量控制11.1.进行红细胞不规则抗体筛选试验时,应至少选择1种可检出IgG抗体的方法;11.2.所有试剂均应在有效期内使用,每批试剂使用前均应对试剂进行质量控制,以确保质量符合要求;11.3.操作时,应同步设置必要的阴性、阳性和自身对照;12.注意事项12.1.多数IgG类红细胞不规则抗体比IgM类红细胞不规则抗体更有临床意义,盐水介质法通常只能检出IgM类红细胞不规则抗体,不宜单独采用盐水介质法检测红细胞不规则抗体,可结合凝聚胺法或抗球蛋白法;12.2.理论上,凝聚胺法除不能检出抗-K外,其它红细胞血型抗体均可检出,但实际工作中许多红细胞血型弱抗体包括IgM和IgG类不能被凝聚胺法检出,对部分IgM类血型抗体的检测,凝聚胺法甚至没有盐水介质法敏感;12.3.抗球蛋白法对有临床意义的IgG类抗体检测敏感,且可鉴别多数无临床意义的抗体,但本方法操作复杂、费时,目前尚不能实现自动化,不适合批量血标本的检测;12.4.红细胞不规则抗体筛选试验检出自身抗体时,应采用自身吸收试验后,再检测血清血浆中是否还有同种不规则抗体;12.5.用于红细胞不规则抗体筛选试验的筛选细胞,应尽可能多地表达有临床意义的抗体对应的抗原,而且纯合子基因所表达的抗原更有利于相应抗体的检出;要求筛选细胞必须表达D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Le a、Le b、K、k、Fy a、Fy b、Jk a和Jk b18种抗原;12.6.由于用于红细胞不规则抗体筛选试验的筛选细胞很难表达所有有临床意义的抗体对应的抗原,以往免疫所产生的抗体也可降至难以检出的水平,故无论采用何种方法进行红细胞不规则抗体筛选试验,都有漏检由临床意义抗体的可能;12.7.自身抗体和同种抗体可同时存在,也可能有多种同种抗体同时存在,还可能有联合抗体存在,故实际工作中常会遇到难以鉴定红细胞不规则抗体特异性,可送有条件的实验室进行鉴定;。

不规则抗体筛查试验操作规程

XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作，保证检查结果准确和临床输血安全、有效，依据《输血实验室管理程序》有关条款的要求制定本规程。

2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查。

3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定，但只对所筛选或鉴定的标本负责。

4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清（血浆）与筛选红细胞反应，检测受检者血清（血浆）中是否存在红细胞不规则抗体，红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应，根据反应格局鉴定抗体特异性。

7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等：玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。

7.2. 检测环境：室温应控制在18~27℃，湿度应保持在30~70%。

8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d），均为有合格证件的正品。

②市售O型筛选红细胞：为三支以上不同人份的3%筛选红细胞，均为有合格证件的正品。

或自制O型筛选红细胞：选择已确认ABO血型为O型的健康者，采集EDTAK抗凝血2标本离心，取少许红细胞置于试管中，用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞[3400转/分钟（1000g），每次离心1分钟，离心后将上清液全部倒出]，再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中，然后加入1ml生理盐水混匀，即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞；依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞。

《不规则抗体筛选》课件

பைடு நூலகம்
需要不断改进和创新不规则抗体筛选技术，以适应不同的研究需求和应用场景。
希望本课件能够为不规则抗体筛选领域的研究者提供参考和思路，推动该领域的进一步发展。
参考文献
- 引用的文献列表
当前的研究现状
不规则抗体筛选技术在科学研究和工业应用中取得了显著的进展和创新。
未来的发展方向
加强对不规则抗体筛选技术的研究，进一步完善技术方法，推动其在更多领域的应用。
结论
1 不规则抗体筛选的重 2 筛选技术的进一步完 3 期望对不规则抗体筛
要性
善和创新的必要性
选研究的贡献
不规则抗体筛选在生物医学领域和生物技术领域具有重要的理论意义和实际应用价值。
《不规则抗体筛选》PPT 课件
本课件介绍了不规则抗体筛选的重要性和筛选技术的发展。通过丰富的内容和精美的布局，旨在提供易于理解和引人入胜的知识。
不规则抗体筛选介绍
不规则抗体是指形态、结构、性质上与普通抗体不完全一致的抗体，有着独特的特征和优势。了解不规则抗体及筛选意义。
不规则抗体筛选的基本原理
不规则抗体筛选的基本原理是通过特定的方法，从混合溶液或反应体系中筛选出目标抗体，以获得纯化和高亲和力的抗体。
直接筛选法
1 亲和层析法
利用不规则抗体与目标分子的特异性相互作用进行层析分离。
2 免疫法
通过不规则抗体与目标分子的特异性反应来检测和筛选抗体。
间接筛选法
吸附剂法
通过将目标抗原吸附在固相载体上，间接筛选出与抗原特异结合的不规则抗体。
非吸附剂法
利用可溶性载体或晶体结合剂介导的间接筛选方法，实现不规则抗体的高效筛选。
应用举例
1

不规则抗体筛查操作方法

不规则抗体筛查操作方法抗体筛查是一种常用的实验技术，用于检测人体中是否存在某种特定的抗体。

不规则抗体指的是那些不符合正常免疫反应模式的抗体，其产生可能与某些疾病或异常情况相关。

本文将介绍一种不规则抗体筛查的操作方法，包括前处理、抗原标记、试剂制备、试管操作等环节。

1. 前处理：首先，需要准备样本，通常是血液或血浆样本。

将样本离心分离血细胞和血浆，取出血浆备用。

如果需要检测特定器官或组织的抗原，还需进行相应的前处理，如组织细胞抗原的制备。

2. 抗原标记：将待检测的抗原标记。

标记可采用放射性同位素、酶标记、荧光标记、金标记等方法。

标记时需要注意选择合适的标记物，以确保标记效果稳定和信号强度足够。

3. 试剂制备：制备抗体和其他试剂。

抗体可通过动物免疫、杂交瘤细胞技术等方法获得，然后纯化和浓缩。

其他试剂包括缓冲液、辅助试剂等。

制备试剂时需要严格控制操作条件，避免交叉污染和分装误差。

4. 试管操作：a. 将样本和标记的抗原加入试管中，混匀，使抗原与抗体充分结合。

b. 对于各类试管进行不同的操作，如剥夺试验、沉淀试验、凝集试验、间接荧光试验等。

具体操作时需要根据试管类型选择合适的剂量和条件。

c. 通过观察试管内的反应情况，判断是否存在不规则抗体。

不规则抗体的存在可通过沉淀、荧光、凝集等形式观察到，如试管内有沉淀物形成、荧光强度异常高或低、凝集抗体间距不均匀等。

5. 结果分析：根据试管内的反应结果，可判断是否存在不规则抗体。

如果需要进一步确认，还可进行其他检测方法，如免疫组织化学、免疫电镜等。

同时，还需要将结果与临床资料结合，分析不规则抗体是否与某种疾病或异常情况相关。

总结：不规则抗体筛查操作方法主要包括前处理、抗原标记、试剂制备和试管操作等环节。

通过对样本和标记抗原进行混合、加热、冷却等处理，观察试管内的反应情况，可以判断是否存在不规则抗体。

这项技术在疾病诊断和研究中具有重要意义，能够帮助医生确定病情和制定合适的治疗方案。

不规则抗体筛选试验标准操作规程(sop)

不规则抗体筛选试验标准操作规程一、目的为规范微柱凝胶抗球蛋白检测卡在红细胞不规则抗体筛选试验中的应用，保证实验结果的准确性和有效性。

二、适用范围输血科进行的微柱凝胶卡式不规则抗体试验。

三、原理红细胞血型抗原—抗体反应体系在微柱凝胶卡微孔上端反应室反应后，如红细胞血型抗原与相应特异性抗体发生凝集反应后，离心后被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或者颗粒间隙之中，不能通过凝胶筛网，而未发生抗原—特异性抗体凝集的红细胞则可以通过凝胶筛网沉降至微柱凝胶底部。

四、步骤和方法1、取微柱凝胶抗球蛋白检测卡放入专用离心机，3000r/min离心1min后撕开锡纸膜，正立放置待用。

2、在标记为I、II、III的各反应腔中分别加入对应的I、II、III号筛选红细胞稀释液（1滴细胞+3滴lis液）50微升，再在标记为I，II，III的各反应腔中分别加入对应的受检者血清（血浆）20微升，加入后轻轻震荡3次使其充分混合。

3、将检测卡在微柱凝胶专用孵育器中37℃孵育15min后，用专用离心机以1800r/min·2min，2500r/min·1min离心后取出判断结果。

5、结果判读：I、II、III型红细胞任何一种出现阳性反应，表明该血清（血浆）不规则抗体筛选阳性。

五、质量控制微柱凝胶试剂卡，试剂筛选红细胞在有效期内使用。

六、注意事项1、检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室5—10min平衡至室温。

2、撕开微柱凝胶卡锡纸膜时，注意避免各微柱间特异性抗体试剂的交叉污染。

3、细菌污染，纤维蛋白析出及抗凝不佳的血，可产生假阳性结果，建议使用血清。

4、严格遵循离心力，离心时间要求，离心速度过快，离心时间过长均易产生假阴性结果。

5、由于试剂生产厂家，批号不同等因素，红细胞浓度，吸取样品的量及离心条件等环节要求有所差异，以试剂说明书为准。

不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响

不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响产前不规则抗体筛查是预防新生儿溶血病的重要手段。

然而，对于高危孕妇，仅进行抗体筛查可能不足以及时发现溶血危险，因此必须进行进一步的血清学测试以确定抗体的特异性和效价。

本文旨在探讨不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响。

在胎儿溶血病中，母体与胎儿之间的Rh血型差异是导致危险的最常见原因。

血型不合，如Rh阴性母亲与Rh阳性胎儿，则母体可能会产生抗Rh-D不规则抗体，这些抗体可穿过胎盘，在胎儿红细胞表面结合并诱导免疫反应。

如果胎儿红细胞破坏过于严重，可能会导致黄疸、贫血、肝脾大、死亡等不良后果。

一般来说，不规则抗体筛查应在产前进行，以检测母亲体内的不规则抗体。

考虑到母亲身体内可能存在多种不同的不规则抗体，应尽可能筛查出所有可能的不规则抗体，并确定各个抗体的特异性和效价。

这样可以更好地了解母亲胎儿间溶血危险的评估。

抗体效价可用于评估溶血危险，大多数情况下准确预测了新生儿的黄疸和需要输血的风险。

当母亲体内不规则抗体存在时，抗体效价对于安排产前防护性治疗和产后监测非常有用。

在高效价抗体（>16）存在的情况下，更容易发生严重的胎儿红细胞破坏，因此，这是进行胎儿治疗或引产的指征。

在筛查和监测期间，进行不规则抗体效价的测试具有相当的重要性。

与临床检测相关的因素，例如涉及诊断和疾病预后的敏感性和特异性，均可能影响效价的测量。

因此，应使用高度规范化和准确的试剂和测量方法，以保证结果的准确性和再现性。

总之，产前不规则抗体筛查和效价检测是评估母婴溶血危险及制定预防措施的重要措施。

对于在危险范围内的孕妇，及时进行有效评估和治疗，可以降低新生儿溶血病的风险，保障母婴健康。

不规则抗体筛查试验操作规程

XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作，保证检查结果准确和临床输血安全、有效，依据《输血实验室管理程序》有关条款的要求制定本规程。

2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查。

3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定，但只对所筛选或鉴定的标本负责。

4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清（血浆）与筛选红细胞反应，检测受检者血清（血浆）中是否存在红细胞不规则抗体，红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应，根据反应格局鉴定抗体特异性。

7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等：玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。

7.2. 检测环境：室温应控制在18~27℃，湿度应保持在30~70%。

8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d），均为有合格证件的正品。

②市售O型筛选红细胞：为三支以上不同人份的3%筛选红细胞，均为有合格证件的正品。

或自制O型筛选红细胞：选择已确认ABO血型为O型的健康者，采集EDTAK抗凝血2标本离心，取少许红细胞置于试管中，用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞[3400转/分钟（1000g），每次离心1分钟，离心后将上清液全部倒出]，再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中，然后加入1ml生理盐水混匀，即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞；依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞。