PCR试题答案版
pcr上岗试题及答案

pcr上岗试题及答案一、单选题(每题2分,共10题,满分20分)1. PCR技术中,引物的作用是什么?A. 提供DNA聚合酶的结合位点B. 作为DNA模板C. 促进DNA链的延伸D. 稳定DNA双链结构答案:A2. 在PCR反应中,变性步骤的目的是?A. 使DNA聚合酶失活B. 破坏DNA双链结构C. 促进引物与模板DNA结合D. 增加DNA聚合酶的活性答案:B3. PCR反应中,延伸温度的设定主要取决于什么?A. 引物的序列B. 模板DNA的长度C. DNA聚合酶的来源D. 反应体系的pH值答案:C4. 以下哪个不是PCR反应体系中的成分?A. 模板DNAB. 引物C. 限制性内切酶D. DNA聚合酶答案:C5. 进行PCR反应时,通常需要设置多少个循环?A. 1-5个B. 10-20个C. 25-30个D. 40-50个答案:D6. 在PCR反应中,TaqMan探针的作用是什么?A. 检测PCR产物B. 扩增DNAC. 稳定DNA双链结构D. 提供DNA聚合酶的结合位点答案:A7. 以下哪种PCR技术可以用于定量分析?A. 常规PCRB. 实时定量PCRC. 反转录PCRD. 多重PCR答案:B8. 在PCR反应中,Mg2+离子的作用是什么?A. 作为DNA聚合酶的辅助因子B. 提供DNA聚合酶的结合位点C. 促进DNA链的延伸D. 稳定DNA双链结构答案:A9. 以下哪个不是PCR反应的常见问题?A. 非特异性扩增B. 引物二聚体C. 模板DNA的降解D. 反应体系的pH值过高答案:D10. 进行PCR反应时,通常使用的DNA聚合酶是?A. E. coli DNA聚合酶B. Taq DNA聚合酶C. T4 DNA聚合酶D. 反转录酶答案:B二、判断题(每题1分,共5题,满分5分)1. PCR反应中,变性步骤的温度通常在94-98℃之间。
(对)2. PCR反应中,退火步骤的温度通常高于延伸步骤的温度。
pcr上岗证考试题及答案

pcr上岗证考试题及答案一、选择题1. PCR技术的原理是基于()。
A. 核酸杂交B. DNA复制C. RNA转录D. 蛋白质翻译答案:B2. 在PCR反应中,常用的引物设计软件是()。
A. Primer5B. OligoC. Primer3D.以上都是答案:D3. PCR扩增过程中,变性步骤的温度和时间通常设置为()。
A. 94℃,1分钟B. 94℃,30秒C. 98℃,1分钟D. 98℃,30秒答案:B4. 用于检测PCR产物的常用方法是()。
A. 凝胶电泳B. 南方杂交C. 西方杂交D. 质谱分析答案:A5. PCR反应体系中,下列哪种成分不是必须添加的?()。
A. 模板DNAB. 四种脱氧核苷酸C. 引物D. 氯化钠答案:D二、填空题1. PCR技术是由生物化学家________和Kary Mullis共同发明的。
答案:Taq聚合酶2. 在PCR反应中,退火步骤的温度通常设置在50-60℃之间,其目的是为了使________。
答案:引物与模板DNA互补序列结合3. PCR产物的纯化可以通过多种方法实现,其中一种常用的方法是________。
答案:凝胶提取4. 为了提高PCR扩增的特异性,可以在反应体系中添加一种名为________的酶。
答案:热启动酶5. PCR技术的应用非常广泛,除了基础研究外,它还可以用于疾病的诊断、遗传病的筛查以及________。
答案:法医学证据的分析三、简答题1. 请简述PCR技术的基本步骤。
答:PCR技术的基本步骤包括:1) 变性,即将双链DNA加热至94℃左右使其变性成单链;2) 退火,将温度降至50-60℃,使引物与模板DNA结合;3) 延伸,将温度升至72℃,DNA聚合酶开始从引物处延伸合成新的DNA链。
这三个步骤循环进行,以达到指数级扩增特定DNA 片段的目的。
2. 为什么在PCR反应中需要使用热启动酶?答:热启动酶的使用是为了提高PCR反应的特异性和效率。
pcr生物安全试题及答案
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pcr生物安全试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. PCR技术中,以下哪个不是PCR反应体系的基本组成部分?A. 模板DNAB. 引物C. Taq酶D. 缓冲液答案:D2. 在PCR扩增过程中,以下哪个阶段是DNA链的合成阶段?A. 变性B. 退火C. 延伸D. 终止答案:C3. 以下哪个不是PCR技术的优点?A. 灵敏度高B. 特异性强C. 操作复杂D. 速度快答案:C4. 以下哪个是PCR技术中常用的DNA聚合酶?A. E.coli DNA聚合酶B. Taq DNA聚合酶C. RNA聚合酶D. 逆转录酶答案:B5. 以下哪个不是PCR扩增中常用的引物设计原则?A. 避免引物二聚体B. 引物长度一致C. 避免引物内部发夹结构D. 避免引物间的互补答案:B6. 凝胶电泳是PCR产物分析常用的方法,以下哪个不是凝胶电泳的组成部分?A. 凝胶B. 电场C. 缓冲液D. 离心机答案:D7. 以下哪个不是PCR产物纯化的方法?A. 柱层析B. 凝胶回收C. 离心沉淀D. 酶切答案:D8. 实验中,PCR反应体系的设置需要考虑以下哪个因素?A. 反应体积B. 反应温度C. 反应时间D. 所有上述因素答案:D9. 以下哪个不是PCR污染的来源?A. 操作人员B. 实验室环境C. 反应试剂D. 离心机答案:D10. 以下哪个不是PCR技术的应用领域?A. 遗传病诊断B. 法医学C. 食品检测D. 汽车制造答案:D二、简答题(每题10分,共30分)1. 简述PCR技术的定义及其基本原理。
答案:PCR(聚合酶链反应)是一种分子生物学技术,用于快速复制特定DNA序列。
基本原理是利用DNA聚合酶在体外条件下反复进行DNA的合成,通过变性、退火和延伸三个步骤循环进行,实现目标DNA序列的指数级扩增。
2. 描述PCR产物的检测方法有哪些?答案:PCR产物的检测方法主要包括凝胶电泳、实时定量PCR (qPCR)、酶联免疫吸附测定(ELISA)等。
PCR试题答案版
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PCR培训班考试试题一、选择题(共20题,每题2分)1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A )①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为( D )A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物对为( D)A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为( B)A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子5、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C )A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高6、PCR技术的发明人是(A )A、MullisB、史蒂文.沙夫C、兰德尔.才木7、PCR产物短期存放可在( A )保存。
A、4℃B、常温C、-80℃D、高温8、PCR产物长期储存最好置于( D )。
A、4℃B、常温C、16℃D、-20℃9、PCR的基本反应过程包括(A )A、变性、退火、延伸B、变性、延伸C、变性、退火10、在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括( D )A、扩增产物的污染B、天然基因组DNA的污染C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年发明( A )A、1983B、1971C、 1987D、199312、Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为(C )A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃13、以下哪种物质在PCR反应中不需要( D )A、Taq DNA聚合酶B、dNTPsC、镁离子D、RNA酶14、PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加( C )A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因扩增仪最关键的部分是( A )A、温度控制系统B、荧光检测系统C、软件系统D、热盖16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则( A )A、各区合并B、注意风向C、因地制宜D、方便工作17、PCR实验室一般包括( D )A、试剂准备区B、标本制备区C、扩增区和产物分析区D、A、B、C都含18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。
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PCR试题答案版一、选择题(共20题,每题2分)1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为(D )A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物对为(D)A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为(B)A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子5、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C )A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高6、PCR技术的发明人是(A )A、MullisB、史蒂文.沙夫C、兰德尔.才木7、PCR产物短期存放可在(A )保存。
A、4℃B、常温C、-80℃D、高温8、PCR产物长期储存最好置于(D )。
A、4℃B、常温C、16℃D、-20℃9、PCR的基本反应过程包括(A )A、变性、退火、延伸B、变性、延伸C、变性、退火10、在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括( D )A、扩增产物的污染B、天然基因组DNA的污染C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年发明(A )A、1983B、1971C、1987D、199312、Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为(C )A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃13、以下哪种物质在PCR反应中不需要(D )A、Taq DNA聚合酶B、dNTPsC、镁离子D、RNA酶14、PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加(C )A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因扩增仪最关键的部分是(A )A、温度控制系统B、荧光检测系统C、软件系统D、热盖16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则(A )A、各区合并B、注意风向C、因地制宜D、方便工作17、PCR实验室一般包括( D )A、试剂准备区B、标本制备区C、扩增区和产物分析区D、A、B、C都含18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。
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完整版)PCR试题答案版PCR培训班考试试题一、选择题(共20题,每题2分)1.PCR技术扩增DNA需要的条件是(A):①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等。
2.镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为(D):0.5-2mmol/L。
3.多重PCR需要的引物对为(D):多对引物。
4.PCR是在引物、模板和四种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为(B):引物。
5.在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增(C):TaqDNA聚合酶加量过多和引物加量过多。
6.PCR技术的发明人是(A):Mullis。
7.PCR产物短期存放可在(A)保存:4℃。
8.PCR产物长期储存最好置于(D):-20℃。
9.PCR的基本反应过程包括(A):变性、退火、延伸。
10.在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括(D):扩增产物的污染、天然基因组DNA的污染、试剂污染和标本间交叉污染。
11.PCR技术于哪一年发明(A):1983.12.Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为(C):70-75℃。
13.以下哪种物质在PCR反应中不需要(D):RNA酶。
14.PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加(C):2n。
15.PCR基因扩增仪最关键的部分是(A):温度控制系统。
16.以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则(A):各区合并。
17、PCR实验室一般包括试剂准备区、标本制备区、扩增区和产物分析区。
18、PCR技术可以用来检测血液中的病毒核酸,而不是白细胞DNA、病毒蛋白质或血浆抗体。
19、如果反应体系中加入模板DNA分子100个,则经过30个循环后,DNA分子的数量将达到100×230个。
20、PCR扩增产物的分析方法主要有凝胶电泳分析法、点杂交法和荧光探针定量PCR法。
判断题:1、√2、√3、√(应为加解旋酶)4、√5、√6、√7、×(应为体外)8、√9、√10、√11、√12、√13、√14、√15、√16、×答:定量PCR检测操作的全过程包括以下几个步骤:首先,需要设计引物和荧光探针(要点1:2分),并进行实验前的准备工作,如制备反应体系和标准曲线(要点2:3分)。
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1.有关PCR技术的说法,不正确的是()A.PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术B.PCR技术的原理是DNA双链复制C.PCR的主要过程包括变性、退火、延伸D.PCR扩增中不需要使用热稳定DNA聚合酶【答案】D【解析】试题分析:PCR技术扩增DNA时,热稳定DNA聚合酶是必须的。
考点:本题考查PCR技术知识,意在考查知识的识记。
2.用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时,得到以下电泳图谱,其中1号为DNA标准样液(Marker),10号为蒸馏水。
PCR时加入的模板DNA如图所示。
据此做出分析不合理的是A.PCR产物的分子大小在250至500bp之间B.3号样品为不含目的基因的载体DNAC.9号样品对应植株不是所需的转基因植株D.10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰【答案】B【解析】【分析】PCR过程中,可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段。
4~9号是转基因植株,理论上应包含目的基因。
9号PCR结果不包含250~500bp片段,所以不是所需转基因植株。
【详解】A、PCR过程中,可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段。
4~9号是转基因植株,理论上应包含目的基因,结合2号野生型和10号蒸馏水组的结果,推测包含目的基因的片段大小应为250~500bp,A正确;B、3号PCR结果包含250~500bp片段,应包含目的基因,B错误;C、9号PCR结果不包含250~500bp片段,所以不是所需转基因植株,C正确;D、10号放入蒸馏水,可排除反应体系等对结果的干扰,由图可知,10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰,D正确。
故选B。
3.PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,如图表示合成过程。
下列说法错误的是( )A.甲过程高温使DNA变性解旋,该过程不需要解旋酶的作用B.丙过程用到的酶在高温下失活,因此在PCR扩增时需要再添加C.如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,循环3次后,在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%D.PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变【答案】B【解析】PCR中解旋是通过高温进行的,故甲过程高温使DNA变性解旋,该过程不需要解旋酶的作用,A正确;丙过程用到的酶为耐高温的DNA聚合酶,在高温下不会失活,因此在PCR扩增时不需要再添加,B错误;如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,循环3次后,形成的DNA分子为8个,而含有15N标记的DNA分子为2个,故在形成的子代DNA 中含有15N标记的DNA占25%,C正确;PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变,D正确。
(完整版)PCR试题答案版
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PCR培训班考试试题一、选择题(共20题,每题2分)1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A )①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为(D)A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物对为(D)A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为(B)A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子5、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C )A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高6、PCR技术的发明人是(A)A、MullisB、史蒂文.沙夫C、兰德尔.才木7、PCR产物短期存放可在(A)保存。
A、4℃B、常温C、-80℃D、高温8、PCR产物长期储存最好置于(D)。
A、4℃B、常温C、16℃D、-20℃9、PCR的基本反应过程包括(A)A、变性、退火、延伸B、变性、延伸C、变性、退火10、在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括(D)A、扩增产物的污染B、天然基因组DNA的污染C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年发明(A)A、1983B、1971C、1987D、199312、Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为(C)A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃13、以下哪种物质在PCR反应中不需要(D)A、Taq DNA聚合酶B、dNTPsC、镁离子D、RNA酶14、PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加(C)A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因扩增仪最关键的部分是(A)A、温度控制系统B、荧光检测系统C、软件系统D、热盖16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则(A)A、各区合并B、注意风向C、因地制宜D、方便工作17、PCR实验室一般包括( D )A、试剂准备区B、标本制备区C、扩增区和产物分析区D、A、B、C都含18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。
完整版)PCR试题答案版-pcr的判断题答案
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完整版)PCR试题答案版-pcr的判断题答案A、样品制备区B、扩增区C、检测区D、以上都是18、PCR扩增反应的最佳温度是(C)A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃19、PCR扩增反应的最佳pH值是(B)A、5.0B、8.3C、9.5D、10.020、PCR扩增反应的最佳时间是(C)A、30minB、1hC、2minD、10min二、问答题(共5题,每题10分)1、PCR技术的原理是什么?请简要说明PCR技术的基本步骤。
(10分)PCR技术是一种体外扩增DNA的技术,其基本原理是利用DNA聚合酶在引物的引导下,将DNA模板的目的区段反复扩增,从而获得大量的目的DNA产物。
其基本步骤包括变性、退火和延伸三个阶段。
在变性阶段,将DNA双链分离为单链;在退火阶段,引物与单链DNA结合形成双链;在延伸阶段,DNA聚合酶在引物的引导下合成新的DNA链,最终得到两个DNA分子,重复以上步骤可扩增出大量的目的DNA 产物。
2、PCR技术在哪些领域得到了广泛应用?请列举至少三个领域。
(10分)PCR技术在医学、生物学和法医学等领域得到了广泛应用。
在医学领域,PCR技术可用于病原体检测、基因诊断、药物代谢分析等方面;在生物学领域,PCR技术可用于基因克隆、基因表达分析、基因组测序等方面;在法医学领域,PCR技术可用于鉴定个体身份、鉴定亲子关系、鉴定遗传病等方面。
3、PCR反应中,引物的选择和设计对扩增结果有重要影响,请简要说明。
(10分)引物是PCR反应中的重要组成部分,其选择和设计对扩增结果有重要影响。
引物的选择应基于目的基因序列,需要确保引物与目的序列的互补性,同时避免引物间的互补性,以避免非特异性扩增。
引物的长度、Tm值和GC含量也会影响PCR反应的效率和特异性。
引物的设计应尽量避免引物与非特异性序列的结合,同时确保引物的长度和Tm值的一致性,以提高PCR反应的特异性和效率。
4、PCR反应中,如何避免污染?请列举至少三种方法。
pcr上岗证考试题及答案
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pcr上岗证考试题及答案一、选择题1. PCR的全称是什么?A. Polymerase Chain ReactionB. Polymerase Chain ResistanceC. Polymerase Chain ResearchD. Polymerase Chain Replication答案:A. Polymerase Chain Reaction2. PCR被广泛应用于以下哪个领域?A. 食品安全检测B. 疾病诊断C. 法医学鉴定D. 所有以上都是答案:D. 所有以上都是3. PCR技术主要包括哪几个步骤?A. 反应体系的制备B. DNA模板的变性C. 短序列引物的合成D. 扩增反应的循环答案:A、B、C、D4. PCR扩增反应中,引物的作用是什么?A. 指导DNA复制起始点B. 保护DNA模板不被降解C. 指示PCR反应的终止点D. 促进DNA片段的连接答案:A. 指导DNA复制起始点5. PCR扩增反应的温度变化有哪几个阶段?A. 变性、退火、延伸B. 变性、合成、退火C. 变性、扩增、退火D. 变性、退火、连接答案:A. 变性、退火、延伸二、判断题1. PCR扩增反应的核心酶是DNA聚合酶。
答案:正确2. PCR技术可以在短时间内扩增大量的DNA片段。
答案:正确3. PCR扩增反应的主要作用是对DNA进行定序。
答案:错误4. PCR扩增反应的扩增效果受引物浓度的影响。
答案:正确5. PCR可以从单一DNA分子开始扩增,得到大量相同的DNA片段。
答案:正确三、简答题1. 请简要解释PCR扩增反应的基本原理。
答:PCR扩增反应通过反复进行温度变化,使得DNA模板的双链解开,引物与目标序列结合并通过DNA聚合酶的作用进行DNA复制,最终得到目标DNA片段的扩增。
基本步骤包括变性、退火和延伸。
2. PCR技术在食品安全检测中的应用是什么?答:PCR技术在食品安全检测中可以用于检测食品中是否存在有害微生物、致病菌或转基因成分,以保障食品的安全和质量。
pcr上岗证考试题及答案
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pcr上岗证考试题及答案一、单选题(每题1分,共10分)1. PCR技术中的“P”代表什么?A. PolymeraseB. PolymerizationC. PolymorphismD. Polyethylene2. 以下哪种酶是PCR反应中必需的?A. 逆转录酶B. 限制性内切酶C. DNA聚合酶D. 连接酶3. PCR反应中,以下哪个步骤是扩增DNA的?A. 变性B. 退火C. 延伸D. 终止4. 以下哪个因素会影响PCR扩增效率?A. 引物浓度B. 反应温度C. 反应时间D. 所有以上5. PCR产物的检测通常使用哪种方法?A. 凝胶电泳B. 质谱分析C. 色谱分析D. 光谱分析6. 以下哪个不是PCR反应的组成部分?A. 模板DNAB. 引物C. 缓冲液D. 抗生素7. 热循环仪在PCR中的作用是什么?A. 维持反应温度B. 提供DNA模板C. 合成DNA链D. 净化反应体系8. 以下哪个是PCR技术的应用领域?A. 基因克隆B. 基因测序C. 蛋白质纯化D. 细胞培养9. 什么是PCR反应中的“退火”?A. DNA链的合成B. 引物与模板DNA的结合C. 双链DNA的分离D. 反应的终止10. 以下哪个是PCR反应的常见问题?A. 引物二聚体形成B. 反应体系污染C. 酶活性不足D. 所有以上二、多选题(每题2分,共10分)11. PCR反应中,哪些因素可以影响引物的结合效率?A. 引物的序列B. 引物的浓度C. 反应的温度D. 反应的时间12. 以下哪些是PCR技术的优点?A. 高灵敏度B. 高特异性C. 高效率D. 低成本13. 以下哪些是PCR技术的常见问题?A. 非特异性扩增B. 引物二聚体C. 产物降解D. 酶失活14. 以下哪些是PCR产物的纯化方法?A. 凝胶电泳纯化B. 柱层析纯化C. 离心纯化D. 沉淀纯化15. 以下哪些是PCR技术的应用?A. 病原体检测B. 遗传病诊断C. 法医学分析D. 环境监测三、判断题(每题1分,共10分)16. PCR技术只能用于扩增DNA。
pcr相关问答试题及答案
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pcr相关问答试题及答案PCR(聚合酶链反应)是一种分子生物学中用于快速复制大量特定DNA 片段的技术。
以下是一份关于PCR的问答试题及答案:一、选择题1. PCR技术中,哪个组分负责合成新的DNA链?A. DNA聚合酶B. 引物C. 核苷酸D. Taq聚合酶答案:A2. 在PCR过程中,哪个阶段DNA双链会解开?A. 变性阶段B. 退火阶段C. 延伸阶段D. 稳定阶段答案:A3. PCR反应中,引物的作用是什么?A. 提供DNA合成的起始点B. 稳定DNA双螺旋结构C. 作为DNA聚合酶的催化剂D. 提供核苷酸答案:A二、填空题4. PCR反应通常包括三个主要阶段:________、________和________。
答案:变性、退火、延伸5. 在PCR反应中,________是用来识别和结合到目标DNA序列上的短片段。
答案:引物三、简答题6. 描述PCR反应中的变性阶段发生了什么?答案:在变性阶段,PCR反应管中的DNA双链被加热至高温,导致氢键断裂,从而使DNA双链解开成为单链。
7. 解释为什么PCR技术在分子生物学中如此重要?答案:PCR技术在分子生物学中非常重要,因为它能够在短时间内从极少量的DNA模板中快速复制出大量的特定DNA片段,这在基因克隆、遗传指纹分析、病原体检测和诊断等领域有着广泛的应用。
四、计算题8. 如果一个PCR反应的效率是100%,并且进行了30个循环,那么理论上起始DNA模板的数量将增加到多少倍?答案:理论上,每个循环都会使DNA数量翻倍,所以30个循环后,DNA的数量将增加到2^30倍。
五、论述题9. 讨论PCR技术在医学诊断中的应用,并举例说明。
答案:PCR技术在医学诊断中应用广泛,例如在传染病的诊断中,可以通过检测特定的病原体DNA来快速确诊。
再比如,在遗传疾病的筛查中,PCR可以用来检测特定的基因突变。
此外,PCR还可以用于肿瘤的早期诊断,通过检测肿瘤相关基因的表达情况,有助于早期发现和治疗。
PCR上岗证考试题及答案(全)
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理论考试卷一,填空(每题2分,共20分)1.DNA双螺旋中两条链走向是反向平行的,即一股链是5’→3’走向,另一股链为3’→5’走向;生物合成方向是5’→3’。
2.在极端的PH值或受热条件下,核酸分子中的氢键断裂,双螺旋结构解开,即为核酸变性。
3.核酸分子的杂交其实就是DNA 变性、复性原理的应用。
4.PCR扩增的三个基本阶段是变性、退火、延伸,引物与模板的结合发生在退火阶段5.反转录酶催化的DNA合成反应按5’→3’方向进行,在DNA合成时也需要引物,引物为病毒颗粒中的mRNA 。
6.PCR测定中的“假阳性”的最主要的来源是PCR产物的污染。
7.请填出以下各种微量移液器可取溶液的体积范围P10 P20 2-20ul P100 20-100ul P200 50-200ul如需吸取100ul液体,则最好使用P100 加样器。
8.在基因扩增检验中,使用的带滤塞吸头吸加液体,只要是为了防止标本间交叉污染。
9.TapMan荧光PCR测定原理中的关键点在于利用了Tap酶的5’→3’的外切酶活性,Ct值指的是每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。
10.个体化医学的全面定义:分为疾病风险预测(基因检测)和个体化治疗(基因检测)两个方面,基因预测疾病风险是指根据每个人的疾病基因组信息预测疾病的发生风险。
个体化治疗是指根据每个人的疾病基因组信息对已发生的疾病进行治疗。
二,是非题(正确的后面打√,错误的后面打×,并将错误处划线并改正,每题两分,未改正得1分,共20分)1.DNA双链中,碱基对总是A-T ,C-G配伍,其间以两个氢键相连。
(×)G-C间以三个氢键相连2.使用有防“污染”作用的UNG的PCR试剂盒,PCR实验室就不必严格分区。
(×)UNG酶只对低浓度的产物污染有效3.在全血、骨髓标本的采集时,可使用EDTA、枸缘酸钠或肝素抗凝。
(×)不能使用肝素抗凝4.血清HBeAg的存在是HBV感染及感染程度的确证标志。
pcr考试试题及答案
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pcr考试试题及答案1、PCR(聚合酶链式反应)是一种什么样的技术?PCR(聚合酶链反应)是一种用于扩增特定的DNA片段的分子生物技术。
它允许科学家在仅仅几小时内生产出大量目标序列的 DNA,而不需要大量的钱和时间。
PCR 的基本原理是使用一种叫做 DNA 聚合酶的特殊酶,将少量的 DNA 光谱(称为模板)重复地裂变成大量的重复片段,并在模板和重复片段之间形成特定的引物位点。
2、PCR有几个步骤?PCR 的步骤一般分为以下 4 个:(1)起始温度:检测下温度,以确定 DNA 酶活性。
(2)去除模板:通过释放引物、琹酶等使模板 DNA 解偶联,以便逐渐增加反应物中的 DNA。
(3)增殖:用 DNA 聚合酶将去除模板后的 DNA 复制N遍,利于增加 DNA 模板的数量。
(4)完成:使模板光谱复制的 DNA 迅速地涵盖到数据,达到正常的反应温度。
3、PCR是如何运作的?PCR 是一种准确到碱基放大的反应,它根据 DNA 片段所给定的引物进行分子复制。
在 PCR 的反应盒中,具有扩增序列特异性的引物和DNA 聚合酶应在适当温度下被放置,以利于耦合模板序列和复制位点的结合。
它的特殊原理是全序列仅需进行重复的三个步骤——“引物耦合”、“复制”和“完成”,便可以完成目标序列的复制,使 DNA 模板呈现出指数增殖的趋势,最后部分DNA 将从模板淀粉样DNA 中被拆解、收集和分析,从而获得特定序列的 DNA。
4、PCR技术有哪些应用?PCR 技术与其它分子生物技术一样,在科学研究和医学诊断领域都有广泛的应用。
PCR 在分子生物学和遗传学研究中的应用主要有:(1)物种特异性标记:通过物种特异性DNA 序列的 PCR 扩增,可以用以鉴别物种。
(2)基因突变原位分析:可以用 PCR 的方式快速检测基因组上特定位点的 DNA 突变。
(3)抗性鉴定:可以用 PCR 技术快速检测出抗生素抗性基因。
(4)药代动力学研究:通过 PCR 的方式,可以快速、准确检测出某种药物在体内代谢后的产物,从而更好地探讨药物的代谢机制。
pcr引物设计试题及答案
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pcr引物设计试题及答案一、选择题(每题2分,共10分)1. PCR反应中,引物的主要作用是什么?A. 提供DNA聚合酶的催化位点B. 稳定DNA双链结构C. 引导DNA聚合酶合成新的DNA链D. 提供DNA模板答案:C2. 在设计PCR引物时,下列哪项不是考虑的因素?A. 引物的长度B. 引物的GC含量C. 引物的溶解温度(Tm)D. 引物的分子量答案:D3. PCR引物的Tm值过高或过低会导致什么后果?A. 提高特异性B. 降低非特异性扩增C. 增加非特异性扩增D. 减少引物二聚体形成答案:C4. 下列哪项不是PCR引物设计中常用的软件?A. Primer3B. OligoC. GeneToolD. Photoshop答案:D5. 在PCR反应中,引物二聚体的形成通常是由于什么原因?A. 引物浓度过高B. 引物长度过短C. 引物Tm值差异过大D. 所有以上因素答案:D二、填空题(每题2分,共10分)6. PCR引物设计时,通常推荐的引物长度为______。
答案:15-30个核苷酸7. 引物的GC含量一般推荐在________范围内。
答案:40%-60%8. 在PCR引物设计中,避免在引物的3'端出现超过______个连续的G 或C。
答案:39. 为了避免非特异性扩增,PCR反应中的退火温度通常设定在比引物Tm值低______度左右。
答案:510. 引物设计时,应避免_________的出现,因为这可能导致引物内部或引物之间形成稳定的二级结构。
答案:二聚体或发夹结构三、简答题(每题10分,共20分)11. 描述PCR引物设计的基本步骤。
答案:PCR引物设计的基本步骤包括:- 确定目标序列:根据研究目的选择合适的DNA片段。
- 引物长度确定:选择合适长度的引物,通常为15-30个核苷酸。
- 引物Tm值计算:确保引物具有相近的Tm值,以保证同步扩增。
- 避免二聚体和发夹结构:设计引物时,避免可能导致引物自身或相互之间形成稳定二级结构的序列。
pcr岗前培训考试题库及答案
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pcr岗前培训考试题库及答案一、单项选择题1. PCR技术中,DNA聚合酶的作用是:A. 提供引物B. 合成互补链C. 提供模板DNAD. 提供反应缓冲液答案:B2. 在PCR反应中,变性步骤的主要目的是:A. 提高酶的活性B. 使DNA双链分离C. 增加引物的结合效率D. 降低反应体系的温度答案:B3. 以下哪个不是PCR反应体系中必需的成分?A. 模板DNAB. 引物C. 热稳定DNA聚合酶D. 氯化钠答案:D4. PCR产物的电泳分析中,DNA条带的迁移速度主要取决于:A. DNA片段的长度B. DNA片段的浓度C. DNA片段的碱基组成D. DNA片段的分子量答案:A5. 实时定量PCR技术中,荧光信号的检测是在:A. 每个循环的起始阶段B. 每个循环的结束阶段C. 每个循环的中间阶段D. 反应结束后答案:B二、多项选择题1. PCR技术可以用于以下哪些目的?A. DNA序列分析B. 基因克隆C. 病原体检测D. 基因表达分析答案:A, B, C, D2. 实时定量PCR中,以下哪些因素会影响荧光信号的强度?A. 模板DNA的初始量B. 引物的浓度C. 反应体系的体积D. 荧光染料的类型答案:A, B, D三、判断题1. PCR技术中,引物的浓度过高会导致非特异性扩增。
(正确)2. PCR产物的纯化是不必要的,可以直接用于测序。
(错误)3. 实时定量PCR技术可以用于绝对定量和相对定量。
(正确)4. PCR反应中,镁离子的浓度对反应没有影响。
(错误)四、简答题1. 描述PCR反应的基本步骤。
答案:PCR反应的基本步骤包括:变性(高温使DNA双链分离)、退火(低温使引物与模板DNA结合)、延伸(中温使DNA聚合酶合成互补链)。
2. 什么是实时定量PCR技术?它与传统PCR有何不同?答案:实时定量PCR技术是一种在PCR反应过程中实时监测荧光信号强度变化的方法,可以用于定量分析模板DNA的初始量。
医院PCR考核试题与答案
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医院PCR考核试题与答案1、实验室中的废弃物主要为()废弃物。
A、损伤性B、感染性(正确答案)C、病理性D、药物性2、盛装的医疗废物达到包装或者容器的()时,应当使用有效的风口方式。
A、1/4B、1/2C、3/4(正确答案)D、3/53、以下属于感染性废弃物的是()A、在标本采集时与感染病人有接触的组织(棉签)等物品B、实验室培养物、可能为污染源的送检标本C、沾有人的组织或液体的锐器D、以上都是(正确答案)4、下列最有效的灭菌消毒方式()A、干热B、高压湿热(正确答案)C、焚烧D、填埋5、离心可能产生的危害是()A、气溶胶(正确答案)B、刺伤C、喷溅D、火灾6、生物污染的传播途径是()A、呼吸道B、经口腔-肠道C、经皮肤破损处D、以上都是(正确答案)7、生物安全二级实验室在一级实验室基础上增加的设施不包括()A、双门进入系统(正确答案)B、生物安全柜(容易产生气溶胶、飞溅及病原体培养)C、灭菌锅D、洗眼器8、二级生物安全实验室必须配备的设备是()A、生物安全柜、高压灭菌器(正确答案)B、生物安全柜、水浴箱C、生物安全柜、培养箱D、离心机、高压灭菌器9、生物安全柜内物品摆放原则不正确的是()A、按照从洁净区到污染区的方向摆放B、所有物品尽可能放在工台前部(正确答案)C、前进气格栅不能被纸、仪器设备或者其他物品阻挡D、可产生气溶胶的设备(例如混合器)应靠近安全柜的后部放置10、生物安全柜的操作规范及注意事项说法错误的是()A、尽量避免污染的物品进入洁净区B、所有操作应在离前窗10cm以内的工作区进行(正确答案)C、废弃物应丢弃在生物安全柜内的处理容器中D、避免胳膊在前开口处快速移动和频繁进出11、生物安全柜的意义是()A、阻止工作中所产生的气溶胶对外界坏境产生危害B、阻止工作中所产生的气溶胶对操作者坏境产生危害C、减少样本之间由于气溶胶产生的交叉污染D、以上都是(正确答案)12、以下关于N95口罩的使用方法错误的是()A、佩戴时选择合适和合格的N95口罩B、遮盖住鼻子、口和下颚C、吸气时口罩不应该有塌陷状(正确答案)D、调整在合适的面部位置并进行气密性检查13、不会产生气溶胶的实验室活动是()A、样本的分装保存B、移液操作C、电器的使用(正确答案)D、离心14、下列温度对移液的影响说法错误的是()A、液体温度>吸头温度时,移取得液体体积偏小(正确答案)B、移液器温度偏低时,其实际量取液体体积偏低C、液体温度<吸头温度时,移取得液体体积偏小D、样品应提前从冰箱中拿出,室温放置30min15、生物安全柜工作前的准备不正确的是()A、紫外灯照射5min(正确答案)B、关紫外灯,打开安全柜日光灯和风机,用消毒剂对内表面进行消毒擦拭C、将实验中需要用到的物品集中用消毒剂擦拭后放在台面相应位置D、等待5min,净化工作区的空气污染物16、1ml移液器使用完毕后将量程调整到A、1000ul(正确答案)B、1020ul17、严格校准时,选取移液器量程范围为(多选题)A、最小体积量B、最大体积量10%(正确答案)C、中间体积(正确答案)D、最大体积量(正确答案)18、移液器调节体积时需要快速旋转旋钮以达到我们需要的数值对错(正确答案)19、移液器从小体积到大体积时,可先调至超过设定体积的刻度再回调至设定体积,以保证最佳的精确度。
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PCR培训班考试试题
一、选择题(共20题,每题2分)
1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A )
①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体
A、①②③④
B、②③④⑤
C、①③④⑤
D、①②③⑥
2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为( D )
A、0.3-1mmol/L
B、0.5-1mmol/L
C、0.3-2mmol/L
D、0.5-2mmol/L
3、多重PCR需要的引物对为( D)
A、一对引物
B、半对引物
C、两对引物
D、多对引物
4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为( B)
A、模板
B、引物
C、dNTP
D、镁离子
5、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C )
A、TaqDNA聚合酶加量过多
B、引物加量过多
C、A、B都可
D、缓冲液中镁离子含量过高
6、PCR技术的发明人是(A )
A、Mullis
B、史蒂文.沙夫
C、兰德尔.才木
7、PCR产物短期存放可在( A )保存。
A、4℃
B、常温
C、-80℃
D、高温
8、PCR产物长期储存最好置于( D )。
A、4℃
B、常温
C、16℃
D、-20℃
9、PCR的基本反应过程包括(A )
A、变性、退火、延伸
B、变性、延伸
C、变性、退火
10、在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括( D )
A、扩增产物的污染
B、天然基因组DNA的污染
C、试剂污染和标本间交叉污染
D、A、B、C都可能
11、PCR技术于哪一年发明( A )
A、1983
B、1971
C、 1987
D、1993
12、Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为(C )
A、37℃
B、50-55℃
C、70-75℃
D、80-85℃
13、以下哪种物质在PCR反应中不需要( D )
A、Taq DNA聚合酶
B、dNTPs
C、镁离子
D、RNA酶
14、PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加( C )
A、n
B、2n
C、2n
D、n2
15、PCR基因扩增仪最关键的部分是( A )
A、温度控制系统
B、荧光检测系统
C、软件系统
D、热盖
16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则( A )
A、各区合并
B、注意风向
C、因地制宜
D、方便工作
17、PCR实验室一般包括( D )
A、试剂准备区
B、标本制备区
C、扩增区和产物分析区
D、A、B、C都含
18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方
法。
若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的(D)。
A、白细胞DNA
B、病毒蛋白质
C、血浆抗体
D、病毒核酸
19、如果反应体系中加入模板DNA分子100个,则经过30个循环后,DNA分子
的数量将达到( D )个。
A、100×30
B、100×30×2
C、100×302
D、100×230
20、PCR扩增产物的分析方法主要有( D )
A、凝胶电泳分析法
B、点杂交法
C、荧光探针定量PCR法
D、A、B、C都是
二、判断题(共20题,每题2分)
1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。
(√)
2、在PCR反应中,dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作为DNA合成的原料。
(√)
3、DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA
解旋。
(√)
4、PCR反应中,复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则
完成。
(√)
5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。
(√)
6、PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等。
(√)
7、PCR技术需在体内进行。
(×)
8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。
(√)
9、核酸的复制是由5'——→ 3'方向进行的。
(√)
10、配对的碱基总是A与T和G与C。
(√)
11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb,此段间隔期称之为“窗
口期”。
(√)
12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR
的探针。
(√)
13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进Taq DNA聚合酶活性。
(√)
14、若标本中含有蛋白变性剂(如甲醛),PH、离子强度、Mg2+等有
较大改变都会影响Taq酶活性。
(√)
15、每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链,这种复制方式称之为半保留复制。
(√)
16、发生溶血的标本对PCR结果没影响。
(×)
17、“平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。
(√)
18、逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)就是在应用PCR方法检测RNA病毒时,以RNA为模板,在逆转录酶的作用下形成cDNA 链,然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。
(√)
19、在定量PCR中,72℃这一步对荧光探针的结合有影响,故去除,实际上55℃仍可充分延伸,完成扩增复制。
(√)
20、PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面(√)
三、简答(共两题,每题10分)
1、PCR技术
答:PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物(要点1:2分),通过高温变性、低温退火、中温延伸(要点2:5分)这一周期的多次循环,使特异的DNA片段数量指数倍数增加(要点3:3分)。
2、简述定量PCR检测操作的全过程。
答:标本的采集,保存(2分)——→样品前处理(2分)——→待样品充分裂解后点样上机反应(2分)——→反应结束后观察结果(2分)——→发报告(2分)。