大花红景天组织培养试验
大红红景天愈伤组织的诱导及植株再生体系的建立_沙红
Rhod iol a cocci nea ex plants. Result show ed t hat t he inductio n eff ect of leav es is t he best , and t he opt im al medium f or callus inducem ent f rom leaf segm ent s was M S supplement ed w it h 0. 50 m g/ L 6 BA and 2. 00 mg / L IAA, and t he callus inducem ent rat e reached 85 percent. T hree t ypes of callus could be induced fro m leaf seg ment s o f Rh. coccinea, but only am arant h callus belo ng to em bry ogenic callus and co uld be in duced to bud easily. T he MS medium supplem ent ed w it h 0. 05 mg / L 6 BA and 0. 50 mg / L IAA w as favor a ble f or t he diff erent iat ion and prolif erat ion o f buds. A process of plant regenerat ion of R h. cocci nea has been est ablished. Key words: Rh. cocci nea; callus; plant let regenerat ion 的威胁。大红红景天种子体积小, 成熟晚, 多败育, 发芽率低 , 自然繁殖相当困难[ 3] 。加快其人工繁殖, 缓解资源开发与保护的矛盾已成为当务之急。大红 红景天目前除了罗明 等 1996 年进行过组培研究 外, 还未见有人工快繁的研究应用。因此, 采用组织 培养技术 , 快速繁育红景天植株幼苗, 必然是扩大田 间种植、 解决资源短缺的重要途径。本试验以大红 红景天的根、 地上茎和叶片等作外植体 , 探讨不同外 植体的脱分化能力 , 不同种类及浓度的激素对愈伤 组织诱导和分化的影响 , 筛选出愈伤组织诱导频率
红景天实验报告册
实验名称：红景天提取及其活性成分研究一、实验目的1. 了解红景天的药用价值及其活性成分。
2. 掌握红景天提取物的制备方法。
3. 研究红景天活性成分对生物体的影响。
二、实验原理红景天（Rhodiola rosea L.）是一种生长在高山、高寒地区的多年生草本植物，具有抗疲劳、抗缺氧、抗辐射、抗衰老等药理作用。
红景天中含有多种活性成分，如多糖、黄酮类化合物、生物碱等。
本实验旨在通过提取红景天中的活性成分，研究其对生物体的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 红景天干燥根- 甲醇、乙醇、水等溶剂- 无水硫酸钠、氯化钠等试剂- 红细胞、淋巴细胞等生物材料2. 实验仪器：- 热水浴锅- 恒温振荡器- 离心机- 超声波清洗器- 薄层色谱仪- 紫外分光光度计- 电子天平- 显微镜等四、实验方法1. 红景天提取物的制备：（1）称取干燥红景天根粉末，用适量甲醇浸泡过夜。
（2）将浸泡后的红景天根粉末加入一定量的甲醇，在恒温振荡器中振荡提取。
（3）将提取液过滤，滤液在低温下浓缩干燥，得到红景天提取物。
2. 活性成分鉴定：（1）采用薄层色谱法对红景天提取物进行初步鉴定。
（2）利用紫外分光光度计测定提取物中多糖、黄酮类化合物、生物碱等活性成分的含量。
3. 活性成分对生物体的影响：（1）将活性成分与红细胞、淋巴细胞等生物材料混合，观察其作用。
（2）通过显微镜观察细胞形态变化，评估活性成分对生物体的影响。
五、实验结果与分析1. 红景天提取物的制备：通过实验，成功制备了红景天提取物，提取物中多糖、黄酮类化合物、生物碱等活性成分含量较高。
2. 活性成分鉴定：通过薄层色谱法初步鉴定了红景天提取物中的活性成分，并通过紫外分光光度计测定了其含量。
3. 活性成分对生物体的影响：实验结果显示，红景天活性成分对红细胞、淋巴细胞等生物材料具有明显的保护作用，可减轻细胞损伤，提高细胞活力。
六、实验结论1. 红景天提取物中含有多种活性成分，具有显著的药理作用。
藏药大花红景天根茎的形态组织学研究
藏药大花红景天根茎的形态组织学研究
白楠;李涛;张浩
【期刊名称】《华西药学杂志》
【年(卷),期】2007(22)4
【摘要】目的鉴别大花红景天根茎的内部结构,并进行解剖学研究。
方法采用性状和显微鉴定方法。
结果其内部结构除具有双子叶植物的一般特征外,根的薄壁组织还具有发达的空腔隙,并且含有大量着色很深的异细胞。
结论通过对大花红景天的显微特征描述,可防止药材品种混淆。
【总页数】2页(P419-420)
【关键词】大花红景天;根茎;生药鉴定
【作者】白楠;李涛;张浩
【作者单位】四川大学华西药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R282.5
【相关文献】
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高山红景天的耐缺氧作用实验研究
1 3 5 血乳酸测定 于小鼠末次给予样品 30 m in 后采血, 然
中国卫生检验杂志 2007年 8 月 第 17卷 第 8期 C h inese Jou rnal of H ea lth Laboratory Technology, A ug 2007; V o l 17 N o 8
14 94
【卫生与毒理】
中国卫生检验杂志 2007年 8月 第 17卷 第 8期 Ch inese Journal of H ealth Lab oratory T echnology, A ug 2007; V ol 17 N o 8
高山红景天的耐缺氧作用实验研究
陈玉满, 陈江, 毛光明, 傅剑云, 徐彩菊, 孟佳
动物数 (只 ) 10 10 10 10
存活时间 ( s) 16 ! 0 9 17 ! 1 1 18 ! 1 2# 17 ! 1 1
与阴性对照组比较, # P < 0 05
2 4 大花红景 天对小鼠运动后血乳酸的影响 由表 4 可见, 0 45 g /kg 剂量组可明 显降低小 鼠运动后血
乳酸曲线下面积含量 (P < 0 05)。
表 4 大花红景天对小鼠运动后血乳酸的影响 ( x ! s)
浓度 动物数 ( g / kg ) ( 只 )
游泳前
血乳酸值 ( mm o l/L )
游泳后 游泳后休息
0 m in
20 m in
0
10 2 7! 1 0 8 1! 2 1 5 7 ! 1 6
0 22 10 2 6! 0 6 7 1! 2 0 4 6 ! 1 4
西藏大花红景天育苗方法对比试验
西藏大花红景天育苗方法对比试验引言西藏大花红景天是一种高山植物，具有重要的药用和观赏价值。
为了推广种植西藏大花红景天，了解其育苗方法对比试验是非常重要的。
本文将对不同育苗方法进行对比试验，并探讨它们的优缺点。
实验方法本次对比试验采用了以下五种育苗方法：1.普通土壤育苗法2.剪梢插条育苗法3.叶片扦插育苗法4.种子发芽育苗法5.离体组培育苗法每种育苗方法均设有对照组，共计十个处理组。
每个处理组设置五个重复。
实验条件如下：•光照：保持自然光照，遮光率控制在30%。
•温度：保持恒温，控制在25°C。
•湿度：保持相对湿度在65%~75%。
结果与讨论普通土壤育苗方法1.育苗方法：将种子直接撒在普通园土中，保持适当湿润。
2.结果：普通土壤育苗法的发芽率较低，约为40%。
发芽后的幼苗长势较差，生长缓慢。
剪梢插条育苗法1.育苗方法：从成熟植株上剪取茎尖的嫩芽，将其插入预先准备的培养基中。
2.结果：剪梢插条育苗法的成活率较高，约为70%。
幼苗生长良好，能快速发展。
叶片扦插育苗法1.育苗方法：将成熟植株上的叶片切割成适当大小的扦插块，插入培养基中。
2.结果：叶片扦插育苗法的成活率约为60%。
幼苗生长速度中等，需要较长时间才能达到一定高度。
种子发芽育苗法1.育苗方法：将种子播撒在适当的培养基上，保持湿润。
2.结果：种子发芽育苗法的发芽率较高，约为80%。
幼苗生长迅速，但需要精细管理。
离体组培育苗法1.育苗方法：将种子表皮剥离后，将胚芽培养在含有适当营养物质的培养基中。
2.结果：离体组培育苗法的成活率较低，约为30%。
幼苗需要特殊的环境和较长的培养时间。
结论经过对比试验，我们得出以下结论：1.剪梢插条育苗法是育苗效果最好的方法，成活率高且生长迅速。
2.种子发芽育苗法也具有较好的效果，适合大规模育苗。
3.叶片扦插育苗法相对较为困难，需要更精细的管理和较长的时间。
4.普通土壤育苗法和离体组培育苗法的效果较差，不建议广泛应用。
西藏大花红景天育苗方法对比试验
西藏大花红景天育苗方法对比试验西藏大花红景天是一种高山植物，生长在海拔3000-5000米的高寒草甸和岩石缝隙中。
由于其观赏价值和药用价值，越来越多的人开始尝试在家中种植这种植物。
本文将介绍两种西藏大花红景天的育苗方法，并进行对比试验。
方法一：种子发芽法1.准备工作：购买西藏大花红景天种子，准备育苗盘、育苗土、喷壶、保鲜膜等工具。
2.育苗土的制备：将腐叶土、沙子、蛭石粉按照1:1:1的比例混合，加入适量的水搅拌均匀。
3.育苗盘的准备：将育苗土填满育苗盘，用手指压实，表面平整。
4.播种：将西藏大花红景天种子均匀撒在育苗土表面，轻轻按压，不要覆盖土壤。
5.覆盖保鲜膜：用喷壶喷适量的水在种子上，然后用保鲜膜覆盖育苗盘，放在室温下避光处。
6.观察发芽：每天早晚检查育苗盘，保持土壤湿润。
一般情况下，种子发芽需要7-14天。
方法二：插枝繁殖法1.准备工作：选择健康的西藏大花红景天植株，准备剪刀、喷壶、育苗土、育苗盘等工具。
2.插枝：从植株中选择健康的枝条，长度约为10-15厘米，剪去顶端的叶子和花朵，留下2-3片叶子。
将枝条插入育苗土中，深度约为2-3厘米。
3.保持湿润：用喷壶喷适量的水在插枝处，保持土壤湿润。
插枝后的2-3周内，不要暴露在阳光下。
4.观察生长：插枝后，每天早晚检查育苗盘，观察枝条是否生长。
一般情况下，插枝后需要2-3周才能生根。
对比试验：我们在同样的环境下，使用以上两种方法分别育苗，观察了发芽率、生长速度、成活率等指标。
结果显示，种子发芽法的发芽率较高，约为80%，而插枝繁殖法的发芽率约为60%。
但是，插枝繁殖法的成活率较高，约为90%，而种子发芽法的成活率约为70%。
生长速度方面，两种方法差异不大。
综合来看，种子发芽法适合大面积育苗，而插枝繁殖法适合小规模育苗。
在实际种植中，可以根据自己的需求选择不同的育苗方法。
总之，西藏大花红景天是一种珍贵的植物，育苗需要注意保持湿润、避光等条件。
希望本文能够对爱好者们有所帮助。
四川阿坝州大花红景天生境调查与栽培技术研究的开题报告
四川阿坝州大花红景天生境调查与栽培技术研究的开题报告一、研究背景大花红景天是一种高山草本植物，因其鲜艳的花色和独特的神秘韵味而备受青睐。
作为一种具有重要药用和观赏价值的植物，大花红景天具有广阔的市场前景和潜力。
然而，由于其在野外生长环境的限制和过度采摘等因素的影响，大花红景天种群数量急剧减少，已被列为国家二级保护植物。
因此，开展大花红景天生境调查和栽培技术研究，对于保护和利用这一珍稀植物资源，促进大花红景天产业的发展具有重要意义。
二、研究目的和意义1. 对大花红景天生境进行系统调查，了解其地理分布、栖息地特征、主要威胁因素等，为采取有效措施保护和恢复大花红景天种群提供参考。
2. 研究大花红景天的生物学性质，探究其生长发育过程、生理代谢和适应环境的机制，为开展栽培繁育提供理论支持。
3. 研究不同的栽培模式，探索适宜的栽培方法和环境因素，为大花红景天的规模化种植提供技术保障。
4. 研究大花红景天的化学成分和药理作用，探索其药用价值和应用前景。
同时，通过高效经济的利润，带动当地经济发展。
三、研究内容和方法1. 大花红景天生境调查：通过野外考察和调查，明确大花红景天的地理分布和生境特征；采集样本，进行标本鉴定和保存；建立大花红景天的生态位模型，探索其在生态系统中的地位和作用。
2. 大花红景天生物学性质研究：分析大花红景天的形态特征、生长周期、营养物质代谢过程等，了解其生理生态特性和适应环境的机制；通过野外实验和室内局部实验法,研究其早期生长发育，继而探究其他环境因素对于植株形态和生长的影响，从而为其栽培奠定基础。
3. 大花红景天栽培技术研究：选择适宜的种质资源，探究栽培模式和栽培关键技术，包括育苗、播种和移栽等技术，以及适宜的生产模式和减少疾病和虫害侵扰的措施。
4. 大花红景天药物研究：对大花红景天进行药用价值的分析，包括化学成分分析、药效评价、药剂学研究等，探索其在治疗慢性肝炎、肝硬化、神经衰弱等方面的应用前景。
红景天组织培养研究进展
（ ｏ ｉｌ Ｌ ） Ｒｈ ｄｏａ ． 的多年 生草本 或亚 灌 木植 物 ， 属植 物 该 因其 花 、 、 的浸液 为 红 色 ， 又 系景 天 科 植 物而 得 根 茎 且 名 。红景 天不仅 具 有抗 缺 氧 、 寒 冷 、 疲 劳 、 微 波 抗 抗 抗 辐射 等作 用 ， 对延 缓 机体衰 老 、 高脑 力和体 力 劳动机 提
今 后 在红景 天组 织培 养 中有待 解 决的 问题 。 关键 词 ： 红景 天 组 织培养 进展
红 景 天 是 指 景 天 科 （ ａ ｓ ｌｃ ａ ）红 景 天 属 Ｃｒ ｓ ｕａ ｅ ｅ
培 养周 期短 、 材料 均 一 、 复性 好 等 优 点 （ 凯 ， ０ ７ 重 罗 ２０ ； 吕春茂 ，０ ７ 。确 定 适 合悬 浮 培 养 的 愈伤 组 织 ， 以 ２０ ） 并
能 亦 有 辅 助 功 效 （ 海 泉 ， ９ ８ 。 近 年 来 （ ＨＡＯ Ｗ ， 明 １８） Ｚ
系， 对红 景天 次生 代 谢 物 的生 产 有 重要 意 义 。利 用组
织 培养 方法 使外植 体脱 分化 形成 愈伤组 织在很 多红 景
天 中得 以实 现 。 １ １ 外 植 体 的选 择 ．
速度 明显快 于茎 诱导 出 的愈 伤组 织 ， 外 植 体 在愈 伤 茎 组织 诱导过 程 中容 易褐 化 ， 叶 片 诱 导 的愈 伤 组织 经 且 过几 代 的继 代 培养后 ， 生长 较为 稳定 ， 呈松 散 的颗 粒结 构 。沈 梦 圆 等 （ ０ ８ ２ ０ ）以 四 裂 红 景 天 （ ｏ ｉｌ Ｒｈ ｄ ａ ｏ ｑ ａ ｒ ｉａ种 子 和 幼 茎 作 为 外 植 体 进 行 愈 伤 组 织 诱 ｕ ｄｉｄ ） ｆ
大花红景天根颈顶端组织获得再生植株的方法与流程
本发明涉及大花红景天根颈顶端组织获得再生植株的方法，属于植物离体培养技术领域：。
背景技术：：大花红景天(rhodiolacrenulata(hook.f.etthoms.)h.ohba.)是红景天属植物中的珍品，被誉为“高原人参”，为《中国药典》收录的唯一基原植物，野生资源主要生长于川西高原、西藏和滇西北海拔4000m以上高海拔山区的流石滩上或石缝中，其生境特殊、生长缓慢、繁殖困难、更新周期漫长。
近年来，随着国内外市场需求量增加，红景天野生资源遭到掠夺式采挖，资源面临枯竭，大花红景天等红景天属多种植物已被列为国家ⅱ级濒危保护植物，因此，急需开展大花红景天的人工快速繁育工作。
其中，通过愈伤组织诱导再分化可产生大量可分化的愈伤组织，是快速、大量繁育大花红景天的理想方案。
目前，利用愈伤组织途径进行大花红景天的再生，普遍存在愈伤组织诱导率低、培养基成本高等问题，比如申请号为201710671226.8的专利《一种大花红景天的离体培养联合用培养基及离体培养方法》公开了一种采用大花红景天的离体培养方法。
其采用叶片培养愈伤组织，而叶片需要在灭菌后进行培养，从而影响了其愈伤组织的诱导率和增值率，造成愈伤组织诱导率低的问题。
本专利为经过种子培育无菌苗，优化后诱导愈伤组织的外植体为植株根颈顶端组织，不需二次消毒，减少外植体损伤，提高了愈伤组织诱导率、增殖率；本专利优化了愈伤组织诱导、生芽、生根的培养基及激素，形成了大花红景天根颈顶端组织再生植株技术，可快速实现工厂化种苗生产，降低种苗繁育成本。
技术实现要素：针对大花红景天的离体培养方法，本发明解决的第一个技术问题是提供一种愈伤组织诱导率高且分化、增殖率高的离体培养方法。
大花红景天根颈顶端组织获得再生植株的方法，按以下步骤进行：a、取大花红景天种子，经消毒后，接种至无菌苗培养基中进行培养，获得无菌苗；b、选择无菌苗的根颈顶端组织为外植体，接种于愈伤组织诱导培养基中培养，获得愈伤组织，再将愈伤组织转移至增殖培养基中进行继代培养；所述根颈顶端组织为根颈靠近芽端0.5～2cm的组织；c、选取继代培养的愈伤组织在分化培养基中进行诱导分化，获得丛生芽；并进行继代培养；d选取继代培养的丛生芽，将丛生芽从基部切开，将带有芽点的组织转接到生根培养基培养，得到生根无菌苗；e、将生根无菌苗培养至幼苗长出2～4片新叶，进行移栽，得到再生植株。
云南野生大花红景天的组织培养与快速繁殖
云南野生大花红景天的组织培养与快速繁殖王云美1,王元忠1,张仲凯2*(1.云南省农业科学院,云南昆明650231;2.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所,云南昆明650223)摘要 [目的]为掌握云南野生大花红景天的组织培养与快速繁殖技术。
[方法]将叶片接种于培养基M S +BA 2m g/L+IAA 0.2m g/L,花芽接种在培养基M S+K T 2m g/L 上,茎尖接种在培养基M S+BA 2m g/L +IAA 1m g/L 上,幼茎接种在培养基M S+K T 2m g/L +IAA 2m g/L 上,在培养条件下进行培养。
[结果]以叶片为外植体诱导芽效果最好,分化率达100%;幼茎、茎尖与花芽分化时间长,且分化率较低,不宜作为快繁技术的外植体;在培养基M S +N AA0.2m g/L 上,生根率达100%;通过炼苗后,成活率达70%左右。
[结论]为大花红景天的快速繁殖提供了理论依据。
关键词 大花红景天;组织培养;快速繁殖中图分类号 S603.6 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)17-07865-01T is su e Cu ltu re an d R ap id Pro pa g a t ion o f Yun n an W ild R hod io la cr enu lata W ANG Yun -m e i e t a l (Y u nn an A cadem y o f A gr icu ltu ra l S cien ce s ,K u nm in g ,Y un n an 650231)A b s tra c t [O b jectiv e]T h e stu dy a i m ed to resea rchtissu e cu ltu re an d rap i d p ropaga tiontech n iqu e o f Y un n an w il d R hod io la crenu lata .[M e th od]In ocu -la ti n g le ave s w ith cu ltu re m ed ium M S+BA2m g/L +IAA 0.2m g/L,in ocu la tin g blossombu d w ith cu ltu re m ed i um M S +K T 2m g/L,in o cu la ti n g s tem po in t w ith cu ltu re m ed ium M S +B A 2m g/L+IAA 1m g/L ,i n o cu la ti n gi m m a tu re s tem w ith cu ltu re m ed ium M S+K T 2m g/L+I AA 2m g/L,cu ltiva ted th e mun de r th e con d ition.[R e su lt]T h e e ffe ct w a s be st u s i n g leave s as exp lan ts in du ce s tem,indu ction pe rcen tage s reach ed 100%;th e in du ction o f i m -m a tu re ste m,stempo in t ,b lo ssombud n o t on lytook m o re ti m e ,an d th e pe rcen tag es a lso too low,th ey w e re n o t su it to tak e as e xp lan ts fo r rap id p ropa ga-tion;th e sh o o t in du ction pe rcen tage o f cu ltu re m ed i um M S +N AA0.2m g/Lreach ed 100%;a fte r h a v i n g been h a rden ed th e regen e ra tion p la te s cou ld su r-v ive a t 70%.[C on clu s ion]P rov i d in g bas is fo r rap id P ropag a tion o f R hod io la crenulata .K e y w o rd s R hod io la crenu l ata ;T issu e cu ltu re ;R ap id p ropa ga tion基金项目 云南省自然科学基金项目(2008ZC 102M )。
西藏大花红景天育苗方法对比试验
现 代 农业 科技
２ ０ １ ５年 第 ８期
园艺 学
西藏 大 花 红 景 天 育 苗方 法 对 比试 验
白玛玉 珍 刘 正 玉 达瓦 卓玛 李 淑萍 丹增顿 珠
（ ・ 西藏 自治 区农 牧 科 学 院蔬 菜 研究 所 ， 西藏 拉 萨 ８ ５ ０ ０ ３ ２ ； 西 藏 自治 区 农牧 科 学 院农 产 品 质量 监督 与 检 测研 究 所 ； 西藏 奇 正藏 药 股份 有 限 公 司 ）
活体。
１ ． ２ 试 验 方 法
１ ． ２ ． １ 种子育苗方法 。 ①种子采集。 ９ —１ ０月采集种子 ， 将其
放 在 在 阴 凉 通风 处晾 干 ， 经脱粒 、 选 种 后装 入 容 器 ， 放 阴 凉
棚． 以 防阳光 直接 照 射 。
２ 结 果 与 分 析
处， 备用。 ②整地 。 次年 ２ —３月， 温室内整地 、 配土 、 消毒 、 做
长 出的 须根 移 栽时 易 脱落 ， 移栽 成 活 率较低 。 规模 化 生 产该 方法 成本 高 ， 风 险大嗍 。
晾 干 表 面 水分 ， 并以 １ ： １ ０的比例 拌 匀细 沙 待 用 。 ④播种 。 处
理 好 的种 子 均 匀撒 播 于准 备 好 的基 质 中 ， 并 用细 沙 覆盖 （ 厚 ２ ～ ３ ａｍ） ｒ ， 之 后 用喷 雾器 喷水 将基 质 充 分 湿透 并按 席 做塑 料
红景天内生真菌的体外培养技术及抑菌性研究
红景天内生真菌的体外培养技术及抑菌性研究实验以具有极高药用价值的植物一红景天为分离材料，主要使用组织块法和纸片法来勘探其内生真菌体外培养的最佳消毒灭菌方法和抑菌性能，为红景天内生真菌在病原微生物的抑制活性方面提供实验数据，同时也为内生真菌的大规模的培养应用提供研究基础;选择铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、肺炎球菌（diplococcus pneumoniae）、地衣杆菌（Bacillus lichenifprmis）、粪肠球菌（Enterococcusfaecalis）、大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）六种致病菌作为供试菌种，研究红景天其的抑制作用。
通过试验发现750%乙醇三十秒，0.1%氛化汞三分钟来处理红景天使菌落生长最好;选取了三株具有较强活性的内生真菌进行致病菌抑制作用强弱的研究发现红景天内生真菌对某些致病菌具有很强的抑制作用。
标签：红景天;组织块法;纸片法;抑菌性1.材料与方法1.1 试验材料1.1.1 药材红景天茎段干药材（购于阿里巴巴网站）。
1.1.2 供试指示菌铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、肺炎球菌（diplococcuspneumoniae）、地衣杆菌（Bac[J].us licheniformis）、粪肠球菌（Enterococcusfaecalis）、大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus），由西北民族大学医学院提供。
1.1.3 培养基马铃薯葡萄糖液体培养基：削皮土豆20克，薯葡萄克2克，水100m1;马铃薯葡萄糖琼脂培养基：削皮土豆20克，薯葡萄克2克，琼脂1.8克，水100ml;普通培养基（固体）：5克氯化钠，3克牛肉膏，10克蛋白胨，琼脂18克，水1000mL，pH至7.0～7.2。
培养基组分对大花红景天花粉离体萌发的影响
１ ． ２ 试 验 设 计
１ ． ２ ． １ 正交设 计 筛选培养基 采用 四 因子 三水平 正交试 验 ， 正交表 选 用Ｌ 。 （ ３ ） ，
实验设 计探 讨培养 基组 分及 浓度对 花粉 的离体 萌发影
响， 以期 为 大花红 景天花 粉 的生殖生 物学研 究 、 种质库 保存提 供参 考 。
花 粉 离体 萌发 的 影 响 ， 以正 交试 验 最 优 方 案 对 大花 红 景 天 不 同
雄 蕊 发 育 阶段 花粉 离体 萌发 活力 进 行 了测 定 。 初 步 结 果 表 明 ：
第 ３ ４卷
第 １ １ 期
２ ０ １ ５年 １ １ 月
种 子
（ Ｓ ｅ ｅ ｄ ）
Ｖ ｏ １ ３ ４ Ｎｏ ． １ １ Ｎ ｏｖ ． ２ ０１ ５
．
培 养基 组 分 对 大 花 红 景天正军 ， 贾国夫 ， 尼 科
粉期 最强。
以四川省 草原科 学研 究 院红原二农 场试 验地 移栽 的大花 红景天 为试 验材 料 ， 该 大 花 红景 天 野 生植 株 资 源于 ２ ０ １ ２年 ９月采 自四川 省小 金地 区 ， 经过 植株 根茎
分 栽入试 验地 ， 次年 植株 已开花结 实 ， 完成 １个生命 周 期 。室 内试验 于 ２ ０ １ ４年 ５ — ６月在 四川省草 原科 学研 究 院红原 基地试 验 室进 行 ， 试 验 材料 于大 花 红景 天 盛
新缓 慢 。随着红 景天 的 深度 开 发 ， 其 药 材需 求 量 不 断
增大 ， 但依 然采 取整株 刨根 的方式 获取野 生根 茎 ］ ， 因 滥采 滥挖 和生态 环境变 化等 因素使 大花 红景天野 生 资 源遭 到严重破 坏 ， 资源 日趋枯竭 ， 目前 已被 列为 国家 Ⅱ 级重 点保护 野生植 物＿ ３ ］ 。 目前 ， 红 景天 属植 物在药理 作用 、 化学 成分 等方 面
西藏大花红景天栽培技术
一
近年来 ， 国 内 外植 物 组 织培 养 技 术 不断 提 高 。 因此 ， 采
定 要 根据 土 壤 湿 度采 取 带 土移 栽 ， 株行距 ２ ５ ｃ ｍ￣ ８ ０ ｃ ｍ，
取组 培快 繁 与人 Ｉ － ￣ ） ｌ 化技 术 繁殖 红 景天 ， 可 实 现低成 本 、 高
大 花 红景 天 生 命 力 很 强 ， 分 开根 茎 移 栽 即 可 成 活 。 因 此， 在２ — ３月对野 外 或 人 工栽 培 红景 天 进行 根 茎 采 集 。 选 用二 年 生或 以 上 的根茎 切 劈成 长 ３ ～ ４ ｃ ｍ， 带有 １ 个 以上 的 顶 芽根 茎 段 ， 然 后放 在阴 凉通 风处 １ － ２ ｄ ， 使 伤 口愈合 ， 再 用 ５ ０ ％多菌 灵 １ ０ ０ ０倍 液浸 泡消 毒 ２ ０ ｍ ｉ ｎ后 即可 移栽 （ 切劈 种
关 键 词 西 藏 大 花 红 景 天 ； 育苗； 移栽； 田 间 管 理 中 图分类 号 ￥ ５ ６ ７ ． ２ ３ 文献标 识 码 Ｂ 文章编 号 １ ０ ０ ７ — ５ ７ ３ ９ （ ２ ０ １ ６ ） ２ ３ — ０ ０ ８ ７ — ０ １
红景 天 系景 天科 红 景 天 属 多年 生 草 本植 物 。 大 花 红 景 天植株强健 ， 地下茎肥厚 ， 地 上 茎簇 生 、 粗壮而直立 ， 花 期 ９ —１ Ｏ月 ， 伞 房 花序 ， 密 集如 平 头状 ， 花淡 红 色 。 红景 天 是 一 种药 用植 物 ， 红景 天甙 和酪 醇 是该 类植 物 中最 重要 的产 物 。
现代 农 业科技
２ ０ １ ６年 第 ２ ３期
园艺 学
西藏大花红景天栽培技术
大花红景天的组织培养和快速繁殖
大花红景天的组织培养和快速繁殖
尹文兵;李伟;周燕;李颖石;印莉萍;黄勤妮
【期刊名称】《植物生理学通讯》
【年(卷),期】2005(41)4
【总页数】1页(P493-493)
【关键词】大花红景天;快速繁殖;组织培养;植物名称;海拔
【作者】尹文兵;李伟;周燕;李颖石;印莉萍;黄勤妮
【作者单位】首都师范大学遗传与生物工程重点实验室;中国科学院微生物研究所【正文语种】中文
【中图分类】Q943.1;TQ654.2
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1.云南野生大花红景天的组织培养与快速繁殖 [J], 王云美;王元忠;张仲凯
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3.通过组织培养快速繁殖金钱木的研究 [J], 刘雅鑫;葛富月;李婧璐;刘柏玲
4.铁皮石斛的组织培养和快速无性繁殖 [J], 姜燕燕;李建民
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大花红景天组织培养试验西藏自治区农牧科学院中心实验室发布时间：2008-11-06 来源：中国西藏信息中心作者：白玛玉珍李宝海次仁措姆李顺凯达娃[进入论坛][打印本稿][发表评论][关闭窗口][摘要]：通过对大花红景天[Rhodiola crenulata(Hook．f．et Thoms．)S．H．Fu]不同外植体叶、茎、根进行离体培养，结果表明；采用7O%的乙醇消毒材料30s，再用0．1%的升汞消毒5-10min较适合根、茎、叶外植体的消毒，而采用7O%的乙醇消毒材料30s，再用0．1%的升汞消毒20-25min适合红景天种子的消毒，污染率仅8%；不同外植体愈伤组织诱导与分化能力不同，叶片愈伤组织诱导和分化率最高，分别为70%与14.3%；外植体诱导愈伤组织和分化成苗的能力与植物生长调剂、蔗糖浓度等因素有关，最适愈伤组织诱导培养基为附加6-BA0.5mg／L+2,4-D3.0mg／L或6一BA0.5mg／L+NAA 3.0mg／L的1/2Ms，生根培养基为附加IAA的1/2Ms，蔗糖浓度为3%时，愈伤组织结构松散、红或绿色愈伤组织诱芽容易。
[关键词]：大花红景天外植体愈伤诱导分化激素蔗糖A Test for Tissue Culture of Rhodiola CrenulataBaima Yuzhen Li baohai Tsring Tsomo Li sunkai Dawa（The center of quality and safety supervision, inspection and examination for Agricultural products in Lhasa,Ministry of Agriculture,PR.China. 8500032）Abstract:The Different explants(leaf, root and stem) of Rhodiola Crenulata were cultivated and studied in separate culture mediums. The results showed: 70% ethanol 30 seconds with 0.1% HgCl2 5-10 minutes are having a moderate sterilizing effects on root,stem and leaf; 70% ethanol 30 seconds with 0.1% HgCl220-25 minutes present a good sterilizing effects on seeds of Rhodiola Crenulata, which leave only 8% of contamination rate; Different callus of explants demonstrate varying abilities of induction and differentiation, leaf callus shows a high rate of induction and differentiation, they are 70% and 14.3% respectively; It shows that the ability of callus induction and the differentiation ability for a callus successfully turning to shoot have a strong link with the factors of plant’s auxin and sucrose’s concentration etc. The best culture medium for callus induction is 6-BA 0.5mg/L + 2,4-D 3.0mg/L or 6-BA 0.5mg/L + NAA 3.0mg/L, the best one for root is IAA with 3% concentration of sucrose. It is proved red and green callus or callus witha loose structure present a good ability for turning to sprout.Keyword:Callus induction, Rhodiola Crenulata, Hormone, Sucrose, Explant, Differentiation大花红景天Rhodiola crenulata(Hook．f．et Thoms．)S．H．Fu]属景天科多年生草本植物,又称宽瓣红景天、圆齿红景天,藏语称苏罗马保,为2005年版《中国药典》收载品种。
分布在云南西北部、四川西部和西北部、西藏和青海省,多生长在海拔2800~5000米的山坡草地、灌丛及石缝中。
经受长期缺氧、干燥及强紫外线等恶劣环境的影响，形成独特的营养成分，含有丰富的红景天甙、黄酮、多种维生素和微量元素，还含有机体所必需的17种氨基酸。
具有抗缺氧、抗寒冷、抗疲劳、抗辐射、抗病毒、延缓机体衰老、防止老年疾病、抗微波辐射及兴奋大脑和脊髓等多种功能，是一种适用于特殊地区开发、用以增强人体适应能力的药物。
另外，也可以研制成饮料饮用⑴。
近年来，随着人们对大花红景天的不断深入研究与开发利用，自然状态生长的大花红景天资源受到了严重的威胁。
因此．加快其人工繁殖，缓解资源开发与保护的矛盾已成为当务之急,采用试管技术繁殖大花红景天种苗并进行人工栽培有助于解决这一问题。
1、材料与方法1.1 试验材料本试验材料为大花红景天(Rhodiola crenulata)的茎、叶、叶柄、根，来源于西藏自治区拉萨市墨竹工卡县,工卡镇，日土乡，海拔4800米以上。
1.2 试验方法1.2.1 外植体的处理分别选取大花红景天幼嫩的茎、叶、根、种子作为外植体，在超净工作台上，用7O%的乙醇消毒材料30s；用7O%的乙醇消毒材料30s，再用0．1%的升汞消毒5-25min。
然后用灭过菌的无菌水冲洗3-5次，再用无菌滤纸将外植体表面的水吸干，将其切成大小相近的小块(约5mm的叶片)，然后接种到培养基上，每个处理30-50瓶，每瓶1-2个外植体。
培养1周后调查污染情况，污染率（%）=（污染外植体/接种外植体）×100。
1.2.2 愈伤组织的诱导和分化外植体MS基本培养基上生长一周后，将试管苗叶切成小块接种到MS基本培养基和附加不同浓度NAA、2，4-D和6-BA的各种培养基上，用于筛选诱导愈伤组织和分化最佳培养基；蔗糖浓度设为2%、3%、4%，每个处理分别接种茎、叶、根三种外植体，比较蔗糖对其离体培养再生的影响；在1/2MS+6-BA0.5mg/l+2,4-D3.0mg/l+蔗糖3%的培养基上，接种茎、叶、根比较不同外植体离体培养再生效果。
1.2.3 根的诱导和试管苗的移栽切取高2-3cm或2-4片叶的芽体与带茎节切段，接种于附加IAA的1/2Ms培养基上诱导生根，用珍珠岩、砂子、腐植土、园土以一定比列混合的基质进行移栽。
上述试验所采用的基本培养基是MS培养基，附加各种激素，每升培养基加琼脂6g，各种培养基的pH 值均为5.8；光照1O-16h／d，光照强度约为1500-2000Lx，结合自然光照8OOLx左右。
2、结果与分析2.1 不同消毒方法对外植体接种污染的影响从表1可以看出，仅用70%的乙醇消毒的外植体污染率较高，用7O%的乙醇消毒材料30s，再用0．1%的升汞消毒5-10min或用7O%的乙醇消毒材料30s，再用0．1%的升汞消毒20-25min后接种的外植体污染率较低，说明0.1%升汞消毒对红景天外植体接种污染有一定效果.四种外植体用第一种消毒方法污染率最高，第三种消毒方法污染率最低，但第三种消毒方法使茎、叶、根三种外植体褐变率达90%以上，因此，第二种消毒方法较适合茎、叶、根三种外植体的消毒，而第三种方法使用于种子的消毒。
2.2 不同外植体愈伤组织诱导和分化比较试验观察到，大花红景天不同外植体培养过程中愈伤组织诱导与分化十分缓慢。
茎、叶、根三种外植体中,叶片外植体的愈伤组织诱导率和分化率最高，分别为70%与14.3%（表2）2.3 植物生长调节剂对外植体愈伤组织诱导和分化的影响激素是植物组织培养器官分化的关键因素，形成器官的类型由培养基中不同激素的相对浓度控制，而不是这些物质的绝对浓度决定(2)。
将叶片接种于附加2，4-D、AB、NAA的12种培养基，结果（表3）表明，在6-BA0.5mg／L+2,4-D3.0mg／L或6一BA0.5mg／L+NAA 3.0mg／L的1/2Ms培养基对叶片愈伤组织诱导率最高，分别达到70%与72%。
随着BA浓度的升高，外植体愈伤组织诱导能力有所提高，可见，适当的BA浓度与2，4-D、NAA配合有利于叶片外植体的诱导。
2.4 蔗糖浓度对外植体愈伤组织诱导及分化的影响蔗糖浓度为3%时，三种外植体愈伤组织率和分化率均较高，（表4）。
蔗糖浓度为2%、4%时，虽外植体的愈伤组织诱导率高，但分化率很低，其中茎外植体愈伤组织分化成苗率为0，可见诱导愈伤组织培养基适宜的蔗糖浓度为3%。
2.5 根的诱导和试管苗的移栽切取高2—3cm的芽体，接种于生根培养基上，生根培养基以1／2Ms附加0．5mg／mlIAA效果较好，7—10d即可产生根原基突起。
1O～25d后，根长3～5cm，平均每株生根5条，生根率达98％(图E)。
待苗高达4cm以上进行移栽，移栽前将具生根苗的三角瓶盖打开，于实验室温度、散射光下炼苗3-4天；用镊子取出小苗后，洗去根部培养基，移栽于珍珠岩、砂子、腐植土、园土以一定比列混合的基质中，并加盖透光塑料膜，1周后去膜。
移栽成活率达75％以上，如果瓶苗形成木质化根，移栽成活率达95%。
A B CＤＥＦA 刚接种的叶片外肢体；B.8周后基部开始形成愈伤组织；C.16周后叶片外植体分化出芽；D.28周后叶片外植体芽的增殖；E.转入生根培养基2周后生根情况；F.生根培养6周后可移栽的植株。
3、讨论在本研究中，以大花红景天叶片、根、茎作为外植体，全面研究其愈伤诱导形成的适宜条件：在愈伤组织诱导方面，以叶片作为外植体诱导组织效果最好，诱导频率可达70%以上，三种类型的愈伤组织中，结构疏松、呈颗粒状的绿色或红色愈伤组织分化能力最强，不同激素种类和浓度的组合对愈伤组织的诱导效果不同。
本实验采用2，4-D、BA与NAA配合对大花红景天诱导成苗效果较好，得到最佳诱导愈伤组织培养基为1/2Ms+6-BA0.5mg／L+2,4-D3.0mg／L或1/2Ms+6一BA0.5mg／L+NAA 3.0mg／L。