Bio-Rad糖化分析仪的色谱原理
biorad有机酸柱氨基酸
biorad有机酸柱氨基酸Bio-Rad有机酸柱是一种用于氨基酸分析的柱子，它可以帮助科学家们在研究和分析中准确测量和分离氨基酸。
本文将介绍Bio-Rad 有机酸柱的工作原理、特点以及在氨基酸分析中的应用。
让我们来了解一下Bio-Rad有机酸柱的工作原理。
这种柱子采用了离子交换色谱（Ion Exchange Chromatography）的原理，通过样品中氨基酸的带电官能团与柱子上的固定带电官能团之间的静电相互作用来分离和测量氨基酸。
具体来说，柱子上的固定带电官能团通常是阴离子交换剂，而样品中的氨基酸则是带正电荷的离子。
当样品通过柱子时，氨基酸离子会与固定带电官能团发生相互作用，从而使氨基酸分离出来。
通过调整样品中的离子浓度、pH值等条件，可以进一步调控氨基酸在柱子上的分离程度。
Bio-Rad有机酸柱具有以下特点：首先，它具有较高的分离效率和选择性，能够有效地分离和测量样品中的氨基酸。
其次，它具有较好的重现性和稳定性，可以重复使用多次而不会影响分离效果。
此外，该柱子还具有较长的使用寿命，可以满足科学家们的长期实验需求。
最后，Bio-Rad有机酸柱还具有较宽的应用范围，不仅可以用于氨基酸分析，还可以用于其他生化分析领域。
在氨基酸分析中，Bio-Rad有机酸柱被广泛应用于生命科学、生物医学和食品科学等领域。
例如，在生命科学研究中，科学家们可以利用该柱子来分析细胞中的氨基酸组成，从而了解细胞的代谢状态以及相关生物过程。
在生物医学研究中，该柱子可以用于检测血液和尿液中的氨基酸含量，从而帮助医生诊断疾病和评估患者的营养状况。
在食品科学中，科学家们可以利用该柱子来分析食品中的氨基酸含量，从而评估食品的品质和营养价值。
Bio-Rad有机酸柱是一种用于氨基酸分析的重要工具。
它通过离子交换色谱的原理，可以准确测量和分离样品中的氨基酸。
该柱子具有较高的分离效率和选择性，具有较好的重现性和稳定性，并且具有较宽的应用范围。
色谱分析仪工作原理其特点
色谱分析仪工作原理其特点
色谱分析仪是一种常用的分析仪器，可以用于分离、鉴定、测定化合物。
其工作原理主要基于样品在固定相（色谱柱）和流动相之间的相互作用。
工作原理：
1. 采样：待测样品通过各种样品处理方式后进入色谱分析仪中，如蒸馏、萃取等。
2. 注射：样品被注射到色谱柱中，通常使用注射器将样品精确地注入进去。
3. 分离：样品在色谱柱中分离出各种成分。
通常色谱柱包含固定相（吸附剂）和流动相（溶液）。
样品组分根据其在固定相和流动相之间相互作用的差异进行分离。
常用的色谱方法包括气相色谱、液相色谱等。
4. 检测：经过分离的化合物，通过检测器检测，检测器可以根据样品的不同性质选择不同的方法进行检测，如紫外-可见吸
收检测器、荧光检测器、质谱仪等。
5. 分析与数据处理：通过检测器测得的信号，得到各组分的峰形、强度等数据，再通过计算机进行数据处理，如定量分析、峰识别等。
特点：
1. 高灵敏度：色谱分析仪具有高灵敏度，可以检测到极低浓度的化合物。
2. 高分辨率：色谱分析仪可以实现对复杂混合物的高效分离，分辨率高。
3. 快速分析：色谱分析仪分离、检测速度快，可以快速分析大
量样品。
4. 定量分析：通过色谱分析仪可以进行定量分析，可以确定样品中化合物的含量。
5. 广泛适应性：色谱分析仪适用于各种类型的化合物，包括气体、液体和固体等。
6. 可靠性：色谱分析仪具有较高的稳定性和可靠性，可以长时间稳定运行。
这些是色谱分析仪的工作原理及特点，它们使得色谱分析在现代科学研究和实际应用中具有广泛的用途。
糖化血红蛋白高效液相色谱法和金标法的区别
糖化血红蛋白高效液相色谱法和金标法是两种常用的检测糖尿病患者血糖控制情况的方法，它们在原理、操作流程、应用范围等方面存在着一定的差异。
本文将从这些方面对这两种方法进行比较，帮助读者更好地理解它们的异同。
一、原理1. 糖化血红蛋白高效液相色谱法（HPLC）糖化血红蛋白高效液相色谱法是利用高效液相色谱仪对血液中的糖化血红蛋白进行检测的方法。
其原理是利用高效液相色谱柱对血浆样品中的糖化血红蛋白和非糖化血红蛋白进行分离，并通过检测器检测各组分的信号强度，从而 quantitatively 测定血浆中糖化血红蛋白的浓度。
2. 金标法金标法是一种基于化学发光原理的糖化血红蛋白检测方法，其原理是将血浆样品中的糖化血红蛋白与金标记的抗糖化血红蛋白抗体结合，形成复合物，然后通过化学发光仪测定复合物的发光强度，根据发光强度来确定糖化血红蛋白的浓度。
二、操作流程1. 糖化血红蛋白高效液相色谱法（HPLC）（1）取血浆样品，处理样品使之具备色谱法测定的条件。
（2）注射样品至高效液相色谱仪中，经过柱分离和检测器检测。
（3）根据检测结果计算糖化血红蛋白的浓度。
2. 金标法（1）取血浆样品，加入金标记的抗糖化血红蛋白抗体，形成糖化血红蛋白-抗体复合物。
（2）加入化学底物，产生化学发光反应。
（3）用化学发光仪测定发光强度，根据发光强度计算糖化血红蛋白的浓度。
三、应用范围1. 糖化血红蛋白高效液相色谱法（HPLC）HPLC法需要专门的设备和技术人员进行操作，适用于临床检测中心或大型医院。
2. 金标法金标法操作简便，不需要复杂的设备，可以在医院的常规化验室中进行。
金标法更适用于基层医疗机构和社区诊所等地方。
四、总结糖化血红蛋白高效液相色谱法和金标法是两种常用的检测糖尿病患者血糖控制情况的方法，它们在原理、操作流程、应用范围等方面存在着一定的差异。
熟悉这些差异，有助于临床医生根据实际情况选择合适的方法进行检测，以更好地指导糖尿病患者的治疗和管理。
Bio-Rad DiaSTAT糖化血红蛋白A1c测定仪SOP文件
Bio-Rad DiaSTAT糖化血红蛋白A1c测定仪SOP文件1．目的：Bio-Rad DiaSTAT糖化血红蛋白A1c测定仪可体外测定正常人和糖尿病人的糖化血红蛋白，用于糖尿病的辅助诊断和诊疗监控。
2．原理：DiaSTAT 使用低压离子交换液相色谱法，在梯度洗涤液的作用下，从人全血中分离出各种血红蛋白成分，分离出的血红蛋白经415 nm光谱吸收分析后，结果记录和存储在计算机上。
DiaSTAT软件随后对结果进行分析并打印结果报告。
DIASTAT血红蛋白A1c测定仪可从样品管中自动吸取标本，随后进行稀释和分析，每个样本在10分钟内即可完成测定。
3．仪器使用环境：1．无尘、换气良好的环境。
2．避免阳光直接照射。
3．室内相对湿度20~80%4．电源电压变动在220V±10V之内5．有保护性接地4．安全条款：1．使用对人体有危险或发生感染的样品时，请使用橡胶手套，不要直接接触。
如操作人员直接被污染时，用大量的水冲洗、消毒，必要时应及时看医生。
仪器污染时应随时清洗干净且消毒。
2．仪器上面和周围不要放置或使用易燃、易爆物品，避免引起火灾、爆炸。
3．仪器的操作、保养按规定程序进行。
5．标准操作过程5.1开机程序：1)确认试剂量和打印纸充足，废液桶倒空2)打开仪器后侧左下部的电源开关仪器自检后自动进入主菜单5.2关机程序如系统处于主菜单时，可直接关掉电源开关注: 尽量避免在Running状态突然关机5.3常规样本实验5.3.1 样本准备1）全血样本准备（EDTA抗凝全血）a. 将Diastat Dispenser 打开，预热15分钟以上。
b.注意溶血试剂是否用完。
c.将Dispenser对准溶血试剂瓶（注意防止污染），按住拇指开关，喷射四次，使管路通畅。
无气泡。
d.三灯齐亮状态下，可以吸取样本。
e.将Dispenser加样尖置入混匀好的样本管中，没入血样中一些，按住拇指开关一次，自动吸取20 ul样本。
biorad梯度pcr仪 工作原理
biorad梯度pcr仪工作原理Biorad梯度PCR仪是用于PCR反应的一种仪器。
它的工作原理是利用热循环反应，通过温度控制的方式使DNA模板、引物和酶的结合和分离，从而实现DNA复制的扩增。
与传统PCR反应不同的是，Biorad梯度PCR仪可以产生不同温度区域的梯度，使反应更加精确和高效，且可以处理多个样本同时反应。
具体地说，Biorad梯度PCR仪通过向样品反应体系中加入热稳定酶，例如Taq酶，来发挥其催化能力。
反应体系中还需加入DNA模板、引物、dNTPs和缓冲液等。
Biorad梯度PCR仪的温控系统会对样品反应管进行加热和降温，以使样品反应体系在不同温度下完成不同的反应步骤。
在反应的扩增阶段，Biorad梯度PCR仪的温控系统会使反应体系以固定的高温进行DNA变性，即将双链DNA分开成单链。
接下来，它会使反应体系降温以便引物可以结合到目标DNA的两端。
最后，温控系统会升温以使Taq酶能够在引物的帮助下往目标DNA链的3'端延伸，合成新的DNA链。
Biorad梯度PCR仪的优点是能够控制反应的温度梯度，使不同温度下扩增体系的反应完全不同。
例如，在反应的初始阶段，下端的管子温度较低，只有适当的热稳定酶才能在引物上进行配对，从而避免了非特异性底物的扩增。
在反应的扩增阶段，较高温度下的反应管能够扩增更多的DNA模板，从而提高扩增的特异性和产量。
因此，Biorad 梯度PCR仪是一种可靠的DNA扩增工具。
总之，Biorad梯度PCR仪的工作原理是基于PCR反应原理，通过温度梯度控制反应体系的不同反应步骤，从而实现DNA扩增的高效和精确。
它具有快速、灵敏、特异性高且操作简便等优点，因此被广泛应用于生物医学科研、基因检测等领域。
糖化血红蛋白仪使用手册
血红仪HbA1c1海奥生物独家代理糖化血红蛋白仪使用手册血红仪HbA1c2海奥生物独家代理目录概述翻开糖化血红蛋白仪的包装储存要求特征显示糖化血红蛋白仪测试系统原理糖化血红蛋白仪质控杯的操作糖化血红蛋白检测显示储存结果校正10µl 微量加样器的使用性能特征疑难处理技术支持平安关机信息耗材处理性能参数质量保证联系我们参考文献血红仪HbA1c3海奥生物独家代理概述使用X围糖化血红蛋白仪是一种小型便携式产品，与糖化血红蛋白检测试剂同时使用，进展指血或全血〔肝素或EDTA 抗凝〕体外血红蛋白A1c〔HbA1c〕定量检测。
每次实验前，糖化血红蛋白仪可进展自检，使用糖化血红蛋白仪质控杯和质控试剂对仪器性能进展检验。
本公司建议质控杯应在每次检测前使用。
糖化血红蛋白仪由12V 直流电供电，变压设备随机提供。
请不要使用其它电源以免导致结果错误或机器损坏。
本手册介绍了糖化血红蛋白仪的使用，您在使用前还应详细参阅糖化血红蛋白检测试剂的使用说明。
请保管本手册以备后用。
翻开糖化血红蛋白仪的包装仔细观察外包装有无破损，如有任何损坏请联系我们。
组成：1 糖化血红蛋白仪〔DCCT 版P901036D〕1 标准电源插头和变压器1 使用手册1 快速指导1 糖化血红蛋白仪质控杯〔单独包装〕储存要求糖化血红蛋白仪应储存于10~35℃。
储存时请务必盖好，以防止灰尘进入。
确保糖化血红蛋白仪质控杯不受阳光直射，储存湿度应小于60%特征血红仪HbA1c4海奥生物独家代理显示杯子符Cartridge这个图标配以“上〞“下〞箭头以提示插入或拔出测试杯。
沙漏符Hourglass提示您应等待，有时候旁边还有倒计时数字显示。
杯子旋转符Rotate Cartridge提示旋转杯子，同时杯子周边部位的信号灯会闪烁，指示应将杯子旋至此处。
错误信息Error Message显示一个数字表示出错代码。
倾倒溶液符Pour Solution提示将测试杯试管中的液体倒入漏斗中。
色谱法BIO-RAD D-10型全自动糖化血红蛋白分析仪应用40例
５ ０ 、９ ５ 、１． ％血样 ３份 ，重 复测 定 ３次 ，取 其平 ．％ ．％ ３８
均值来评估仪器 的回收情况 。
广
州
医
药
２１ ０ ２年第 ４ ３卷第 ２期
・
６ ・ ３
１４ 统计 学处理 ：所有 数据 均采 用 Ｓ Ｓ ￣ ． ． Ｐ Ｓ０ ０软件 进行 统 计分析 ，用 ｔ 检验 ，Ｐ＜ ． ５为差异有统计学 意义。 ００
２ 结 果
方法 ，但测试成本较 高而且较 费时 ］ 。全 自动糖化 血红蛋
白分析仪 ＢＯ Ｒ ＤＤ Ｏ Ｉ．Ａ Ｉ 采用 的是 离子交换液 相色谱法 ， 用
两个不 同批号质控物做 批 内及批 间精 密度试 验和低 中高三 个不 同糖化血红蛋 白含量 的样本做 回收试 验 ，实验 证 明其 测试结果准确 、可靠 ，可 以满足 临床测 试糖化 血红 蛋 白的
临 床 ，２ １ ，７ （４ ：１ １ — １． ００ １ ） ４ １１ ３ ４
定结果 的偏倚评估 与可 比性研 究 ［ ］．中华检 验 医 Ｊ
学 杂 志 ，２ ０ ０６，２ （ ） ４ ．４ ． ９ ４ ：３６３９
［５］张时 民 ．配对 ｔ 验和 相关 分析 中 的误 区 ［ ］．江 检 Ｊ 西医学检验 ，２０ ，１ （ ） ０ ． ５ ０ １ ０ ９ ：３ ３３ ． ０ （ 收稿 日期 ：２ １ ０ ０ ２— ２—１ ） ０
和 异 常 浓 度 的 ＢＯ Ｒ Ｄ 未 定 值 质 控 物 （ 号 分 别 为 Ｉ－Ａ 批
应用 会越 来 越广 泛 。为全 面 了解 色 谱法 ＢＯ． Ａ １ Ｉ Ｒ ＤＤ０
全 自动糖化 血 红蛋 白分 析仪 检 测结 果 的准 确性 、可 靠性 ，
最全糖化血红蛋白测定的原理与仪器解析
糖化血红蛋白（HbA1c）测定的原理方法与仪器解析及临床意义糖尿病目前在世界上发病率很高，占免疫病的比率，在发达国家高达2-5%，而我国糖尿病的发病率亦达2-3%，并且每年还以1‰的速度增长。
糖尿病是一种终生性疾病，其并发症是至残至死的主要原因，所以人们希望能尽早发现和治疗糖尿病。
临床上广泛采用血糖参数来判定糖尿病，而血糖参数只代表抽血时的血糖水平，对确诊有局限性。
近年来的医学研究证明：血液中的糖化血红蛋白（HbA1c）浓度相对稳定，其浓度值能准确反映最近1-3个月期间的血糖水平，便于医生对糖尿病进行早期诊断；也可用于糖尿病人的血糖监控及慢性并发症的判断等，受到临床的广泛重视，目前我国各大、中型医院正逐渐开展糖化血红蛋白（HbA1c）占总血红蛋白（Hb）的百分含量的测定项目。
有些发达国家已将HbA1c的测定列入中老年人的常规体检项目。
测定HbA1c比较常用的方法，目前有乳胶凝集反应法和离子交换高压液相色谱法两种，分别用生化分析仪和糖化血红蛋白自动分析仪进行测定。
1HbA1c的临床意义糖化血红蛋白是一项说服力较强、数据较客观、稳定性较好的生化检查，不受偶尔一次血糖升高或降低的影响。
能反应糖尿病患者2-3个月以内的糖代谢状况，同时与糖尿病并发症尤其是微血管病变关系密切，在糖尿病学上有重要的临床参考价值。
1．1增高：测定HbA1c可以了解糖尿病人在2～3个月的血糖控制情况。
此外，用含葡萄糖的透析液作血透的慢性肾衰病人，地中海贫血和白血病病人亦增高。
1．2降低：溶血性及失血性贫血，慢性肾衰，慢性持续性低血糖症等。
1．3作为糖尿病的病情监测指标1．3．1作为轻症、Ⅱ型、“隐性”糖尿病的早期诊断指标。
1．3．2不是诊断糖尿病的敏感指标，不能取代现行的糖耐量试验。
1．3．3可以列为糖尿病的普查和健康检查的项目。
1．4当HbA1c＞9％时，说明患者存在着持续性高血糖，可以出现糖尿病肾病、动脉硬化、白内障等并发症。
糖化血红蛋白分析仪
糖化血红蛋白分析仪糖化血红蛋白分析仪是一种高精度、高灵敏度的仪器，可实现对血液中糖化血红蛋白水平的准确测量。
它主要通过光学或化学方法进行测定，具有样本消耗少、操作简便、结果快速、准确可靠等特点。
下面将详细介绍糖化血红蛋白分析仪的原理、应用及发展趋势。
离子交换色谱法通过离子交换树脂将血液中的糖化血红蛋白与其他成分分离，然后用吸收光谱法测量血红蛋白的吸收强度来计算糖化血红蛋白的含量。
这种方法准确性高，但操作复杂，检测时间较长。
免疫测定法则是通过特异性抗体与糖化血红蛋白结合来实现检测。
常用的方法有免疫比浊法、免疫荧光法和免疫发光法等。
免疫测定法操作简单、灵敏度高，但可能受到其他成分的干扰，需要校正以提高准确性。
糖化血红蛋白分析仪在糖尿病的诊断和治疗中有着广泛的应用。
首先，它可用于糖尿病的初次诊断和筛查，通过测量患者的糖化血红蛋白水平，可以准确判断是否为糖尿病患者。
其次，它还用于血糖控制的监测，通过定期检测糖化血红蛋白水平，可以及时调整治疗方案，防止并发症的发生。
此外，糖化血红蛋白分析仪还常用于评估糖尿病治疗效果的临床研究中。
首先，随着技术的不断发展，糖化血红蛋白分析仪的准确性和稳定性得到了显著提高。
新的仪器采用更先进的光学、电化学和生物技术，使得测量结果更加精确可靠。
因此，糖尿病患者可以更加准确地评估自己的血糖控制情况。
其次，糖化血红蛋白分析仪的样本处理和操作流程也得到了优化。
新的仪器可以自动完成样本加标、混匀、进样等操作，大大简化了操作流程，提高了工作效率。
此外，一些仪器还具备数据存储和传输功能，可以方便地进行数据管理和分析。
此外，糖化血红蛋白分析仪的便携性也得到了改善。
传统的糖化血红蛋白分析仪体积较大，不易携带，限制了其在临床检测和家庭自测中的应用。
而现在一些小型便携式糖化血红蛋白分析仪的出现，解决了这个问题。
这些仪器体积小巧，重量轻，方便携带和操作，可以随时随地进行检测。
总之，糖化血红蛋白分析仪在糖尿病的诊断和治疗中发挥着重要作用。
Bio-Rad色谱柱说明书(DOC)
胺基树脂柱使用维护指南手册目录1树脂色谱柱的介绍2柱子结构2.1拆箱2.2 清洗液的制备3 柱子的保护3.1安装指南3.2 清洗指南4 固定相5 操作参数5.1 流速5.2 样品分离5.3 压力控制5.4 测试6 再生步骤6.1树脂床蓬松6.2清洗污染的柱子6.3 柱子恢复到原始离子状态6.46.5仪器调整/ 连接管道问题7 加热柱关闭8柱子保存8.1 长期保存8.2 短期保存9 故障检修第一部分：树脂基HPLC（高效液相色谱）色谱柱介绍树脂基HPLC色谱柱依据离子排斥、离子交换、配体交换、粒度排斥、反相和正相分配原理。
多重模式和交互作用提供了分离物质的独特的能力。
树脂的装填使柱子有离子交换的能力。
聚苯乙烯的骨架提供了疏水的相互作用。
相互作用的程度取决于待分析的化合物和要求的选择性程度。
要达到有效分离，反相和离子对HPLC技术要求复合洗脱剂条件。
这些方法建立在待分析化合物的改性上，直到对柱子适合为止。
对于树脂基的HPLC柱，可以通过改变填充的材料及优化色谱条件实现化合物的分析。
因此，树脂基柱也可用于异构体的HPLC体系，简化样品的制备方法，同时要求样品没有衍生作用。
通过缩短样品的制备时间，树脂基柱大大缩短了总的分析时间，但是对于大部分的分离，样品制备时必须进行过滤。
柱子是高效液相色谱的核心。
分析的成功与否取决于合适的操作条件选择及柱子的维护保养，不管HPLC系统及样品的制备多么好，如果柱子的使用不当，也得不到好的分离结果。
第二部分：色谱柱结构2.1拆包拆包取色谱柱时，仔细检查是否有运输过程中的损害，粗处理或者溶剂泄漏。
使用运输过程中的箱子存放柱子。
如果发现柱子被损坏的迹象，立即通知运输方，并且联系Bio-Rad公司技术服务部或直接去Bio-Rad公司在当地的办事处。
2.2 准备洗脱液（也就是流动相）只有新的去离子水、分析纯试剂和高纯度有机溶剂可以用来制备洗脱液。
制备好的流动相在使用之前需用0.45μm的过滤器进行过滤以除去可以堵塞系统进口的不溶性微粒。
BIO-RADD10糖化血红蛋白检测系统标准操作规程
BIO-RAD D-10糖化血红蛋白检测系统标准操作规程（一）BIO-RAD D-10糖化血红蛋白检测系统开/关机程序1 开机前准备1.1 检查并打开电源开关。
1.2 检查室温是否在15到30摄氏度之间。
1.3 检查外部废物罐水平1.3.1保证废物罐有充足的空间容纳下一次运行所产生的废物。
1.4检查压力。
1.4.1 从MAINTAIN界面,选择50%缓冲液2并设定流速为1.5ML/min;按开始泵按钮。
1.4.2 监测系统压力3到4分钟.假如压力波动不超过5%,记录系统压力在日期日志上。
1.5 检查泄漏情况:当泵在运行时,打开前下部棉班并用眼观察隔舱是否有液体漏出。
1.6 检查打印纸张的供应。
1.7 检查缓冲液和清洗/稀释溶液水平。
1.8 在LOTINFO界面检查剩余的管注射数,假如注射数剩余不足要更换管。
2 开机2.1检查并打开电源开关。
3 分析前准备3.1在启动程序过程中,操作人员检查:缓冲液1水平充足?缓冲液2水平充足?清洗/稀释溶剂水平充足?废物水平,是否要处理?是否要校正?管支持器温度设定?内部废物环路被封?3.2 在开始运行之前,系统必须处于等待状态.选择运行界面标签来接触运行界面.按启动按纽来初始化启动程序.在进行另外别的操作之前允许系统完成5分钟的启动程序.当启动程序完成系统打印一个日期报告。
3.3在开始启动程序时,一声滴答声被听到.状态栏提示系统正处于运行状态并显示当前操作所剩余时间。
3.4 一旦启动程序完成系统会进入等待状。
4 关机4.1 关闭系统电源4.2 紧急关机在系统必须立即被关闭的事件中,操作者必须评估迫切性并执行以下操作之一:4.2.1停止当前运行,允许系统去完成当前操作,按关闭按钮并等信息提示可以安全地去关系统.关上电源并拔掉电源线.本方法应只用于必要时。
4.3 长时间关机4.3.1 假如D-10将要被长时间关闭超过2星期,依照以下程序来保证系统仍旧处于最佳操作状态。
三种检测系统测定糖化血红蛋白相关性分析及偏倚评估
三种检测系统测定糖化血红蛋白相关性分析及偏倚评估童华诚;刘慧;张美;马敏敏【摘要】目的比较三种检测系统测定糖化血红蛋白(HbA1c)结果的差异并评价其偏倚度.方法分别使用Bio-Rad D-10糖化血红蛋白分析仪应用高压液相层析法(HPLC)、Roche Cobas全自动生化分析仪以免疫法、Afinion AS100分析仪以亲和色谱法测定HbA1c,对64例血液样本作比对测定,评估各检测系统之间测定结果的相关性和偏倚;应用高低两个水平质控品分别测定三种检测系统的不精密度.结果三种不同检测系统测定糖化血红蛋白的结果有良好的相关性(P<0.01),HPLC和亲和色谱法的总不精密度<2.0%,免疫法总不精密度接近4.0%,符合临床测定的性能要求.以D-10 HPLC为参考检测系统,Afinion亲和色谱法和Roche免疫法测定结果的相对偏倚分别为0.17%和0.13%.结论 D-10 HPLC法、Afinion亲和色谱法和Roche免疫法测定糖化血红蛋白的准确度、精密度和偏倚符合临床要求,Roche免疫法测定HbA1c结果变异系数较大,应以HPLC法作为参考检测系统定期作比对分析.%Objective To discuss the comparability of HbA1c results among three kinds of different assay systems .Methods The CLSI protocol EP-9 was applied to investigate imprecision ，accuracy ，and bias .64 whole blood specimens were measured for HbA1c with HPLC method on Bio-Rad D-10 automated analyzer ，with immunoassay method on the Roche Modular automated biochemicalanalyzer ；and with affinity chromatography method on A finion A S100 analyzer .Two different level control samples were measured to evaluate their analyticalvariances .Results The results of HbA1c were analyzed with the three kinds of assay systems showed that the correlation between D-10 HPLCand A finion A S100 analyzer was excellent (Y =1.032X-0 .061，r＝ 0 .996 ，P ＜ 0 .01) ；meanwhile the correlation between D-10 HPLC and Roche immunoassay method was excellent ( Y = 0 .9704X + 0 .3545 ，r= 0 .992 ，P ＜ 0 .01) .The total CV s for the different detection systems were ：D -10 HPLC 2 .0％ and 1.6％，A finion HbA1c assay 1.7％ and 1.3％，and Roche Modular HbA1c assay 4 .1％，3 .7％ .Conclusion The analytic bias ，imprecision and accuracy on HbA1c measurement with the three kinds of assay systems met the acceptance criteria in the clinically relevantrange .Roche immunoassay was proved larger variance on HbA1c assay ，which should be performed regularly comparison tests with reference method .【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2011(015)007【总页数】3页(P1156-1158)【关键词】高压液相层析法;亲和色谱法;免疫抑制比浊法;糖化血红蛋白【作者】童华诚;刘慧;张美;马敏敏【作者单位】南京同仁医院,医学检验科,江苏,南京,211101;南京同仁医院,医学检验科,江苏,南京,211101;南京同仁医院,医学检验科,江苏,南京,211101;南京同仁医院,医学检验科,江苏,南京,211101【正文语种】中文【中图分类】R466.1糖化血红蛋白是血红蛋白与糖类经非酶促反应结合而成的.它的合成过程是缓慢且不可逆的,其血液浓度反映测定前2-3个月机体平均血糖水平。
Bio-Rad色谱柱说明书
只有新的去离子水、分析纯试剂和高纯度有机溶剂可以用来制备洗脱液。制备好的流动相在使用之前需用0.45μm的过滤器进行过滤以除去可以堵塞系统进口的不溶性微粒。而基线不稳常常是由于流动相不干净引起的。使用前对洗脱液进行充分的脱气处理。
使用真空和超声处理是对流动相进行脱气的最好的方法。仅使用真空脱气也可以，但需要的时间较长。在真空瓶内装有搅拌棒对于溶剂中气体的脱除很有帮助。单纯的过滤并不能除去所有的气体。用来对溶剂进行脱气的瓶子也可用存放溶剂。使用1升的吸滤瓶就可以了。将脱气后的溶剂倒入另一个容器的过程中会使洗脱液中再次混入气体。更换水溶液和有机溶剂过程中进行也可能引起除气。操作前一定要确定两种溶剂均进行了充分的脱气处理。
高效液相色谱柱保护系统包括可处理的安装在标准保护架上的保护室，或者双重的去灰支架的阴离子或阳离子小室。去灰支架在HPX-42A银铵基柱上使用。去灰形式可以在其他使用水为流动相的柱子上使用。
保护柱必须在污染物扩展到分析柱上之前更换。更换频率并没有规定，因为这依赖于样品制备条件。一般的，柱子应该定期用标准样进行检查。发现分析数据发生变化时应更换保护柱。
注意柱中不能进入空气。如果确定柱中已经混入空气，降低柱温，反方向旋转柱子，使得溶剂缓慢流过柱子直到空气完全除去。确定系统所有管路的空气被排净后重新正确的连接柱子。
需注意的一点是所有金属管连接均用压紧螺钉（反相螺母）。金属垫圈被永久的逆着管子压紧。确保系统的死体积最小，拧紧装配管、垫圈和nut finger tight。向里推动管子直到末端固定。用1/4’’扳手拧紧1/4转。零件只有密封时需要拧的足够紧；若拧的过紧则会减少零件的使用寿命。
色谱柱和监测池之间的连接管尽可能短这一点是很重要的。注射器和色谱柱、色谱柱和检测池之间的连接管内径（直径）应为0.01英寸。确保正确的提供、收集以及处理废弃的溶剂。检查保护柱和分析柱连接处无泄漏后，将填充物正确的安装后，将色谱柱放到Bio-Rad柱预热器（目录号：125-0425）。打开色谱加热器开关调节到合适的温度。无流动相流动时不要开色谱加热。只要达到设定的温度后就可以提高流速了。用洗脱液平衡柱子，用开始的洗脱液倾斜柱子。
biorad梯度pcr仪 工作原理
Biorad梯度PCR仪的工作原理梯度PCR（Gradient PCR）是一种聚合酶链反应（PCR）的变种，可以通过优化反应条件，如温度梯度或镁离子浓度梯度，来优化PCR反应的效果。
Biorad梯度PCR 仪是一种用于梯度PCR的专用仪器，通过在PCR反应过程中控制温度梯度，从而获得更优秀的PCR结果。
下面将详细解释Biorad梯度PCR仪的工作原理，包括仪器的组成和操作步骤。
一、仪器组成Biorad梯度PCR仪主要由以下几个组件组成：1.加热系统：包括加热块和Peltier冷却装置。
加热块通过加热元件将PCR反应管中的反应体系升温到所设定的温度。
Peltier冷却装置则可以快速降温，并保持恒定的温度。
2.电子控制单元：该单元用于接收和处理用户对仪器的设定参数，并控制加热系统完成相应的温度控制操作。
3.电源：通过提供电源电压，驱动仪器中的所有电子元件工作。
4.控制面板：包括显示屏和按钮，用于用户对仪器进行参数设置和监控。
二、操作步骤使用Biorad梯度PCR仪进行PCR实验的基本步骤如下：1.样品制备：根据实验需要，提供待扩增的DNA模板和适当的引物，以及其他PCR反应所需的试剂。
2.PCR反应体系组装：根据实验需要，选取适当的PCR体系组分（如Taq聚合酶、dNTPs、缓冲液等）和反应管。
根据实验目的和梯度PCR的需求，选择合适的模板DNA浓度、引物浓度和反应体积。
3.反应管放置：将组装好的PCR体系均匀分配到PCR反应管中。
4.温度程序设定：通过控制面板设置温度梯度。
对于Biorad梯度PCR仪，用户可以通过选择上层和下层温度限制，并设定温度梯度范围和步长。
5.PCR反应设定：通过控制面板选择适当的扩增循环次数，并设置其他相关参数，如退火温度、延伸温度和退火时间等。
6.温度控制：启动PCR设备，仪器将根据用户设定的参数控制加热系统和温度梯度，实现PCR反应的温度变化。
7.PCR反应：加热到退火温度时，引物与模板DNA序列互补结合。
色谱分析仪的工作原理
色谱分析仪的工作原理
色谱分析仪是应用色谱法对物质进行定性、定量分析，及研究物质的物理、化学特性的仪器。
包括进样系统、检测系统、记录和数据处理系统、温控系
统以及流动相控制系统等。
现代的色谱仪具有稳定性、灵敏性、多用性和自
动化程度高等特点。
有气相色谱仪、液相色谱仪和凝胶色谱仪等。
这些色谱仪广泛地用于化学产品，高分子材料的某种含量的分析，凝胶色
谱还可以测定高分子材料的分子量及其分布。
色谱分析仪工作原理：
色谱法也叫层析法，它是一种能的物理分离技术，将它用于分析化学并配
合适当的检测手段，就成为色谱分析法。
色谱法早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入
碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。
此时，玻
璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。
然后用纯石油醚冲洗，随着石油
醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续
冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。
色谱法也由此而得名。
现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。
我们仍然叫它色谱分析。
其它产品有，，精品资料欢迎下载。
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Variant II A1c Chromatogram
D10 A1c Chromatogram
Variant A1c Chromatogram
Variant 结果计算
• A1c % 通过反应因子(response factor， rf)的调整计算
• variant 使用一个定值的calibrator (数值 标示在瓶标签上)
• rf 是校正品的测量值与标示值相除得出
Variant结果计算
• 校正后的所有A1c结果通过rf计算 • Variant每个运行均需要校正
Variant II/D10结果计算
• Variant II/D10有2 个水平的calibrator, • 计算斜率和截距 • 校正后所以A1c结果通过斜率和截距的修正 • variant II/D10 的分析柱一般仅本的分析中通过加大B 缓冲液的百分比，即增加盐浓度来洗脱 分析柱上的一些成分
VariantII A1c 缓冲液梯度
A1c 缓冲液
• B 缓冲液为高盐浓度缓冲液 • 缓冲液中盐浓度的增加可将分析柱上的
Ao 血红蛋白成分洗脱下来
A1c方法
洗脱下来的血红蛋白成分包括: • A1a • A1b • F (胎儿血红蛋白) • 可变 A1c • A1c • P3 • Ao
A1c方法
• A1a, A1b, A1c 和可变 A1c 成分是有糖成 分结合的糖化血红蛋白
• Ao, P3 和 F成分是没有糖成分结合的血 红蛋白
• Ao, P3 和 F成分大概占正常人红细胞内 血红蛋白的90%
A1c方法
• A1a, A1b, A1c 为糖与血红蛋白牢固结合 的成分
• 可变A1c：血红蛋白可失去其上结合的糖 ，即再变成糖化血红蛋白之前的不稳定 中间产物
• 流速增加，保留时间缩短
缓冲液
• 原理上仅使用一种缓冲液和一个分析柱 也能分离各个组分。
• 但是大部分厂家均采用多种缓冲液的方 法已获得更好和更快的分离效果
缓冲液
• D10/VariantII A1c方法使用 bis/tris缓冲 液，其对血红蛋白的分离效果很好
• 这与采用磷酸盐缓冲液的Variant仪器有 所不同
糖化血红蛋白分析仪色谱原理
Bio-Rad公司 孙玉茹
色谱的介绍
• 色谱:将混合物分离成各个成分的一种分 离和鉴定技术
HPLC
• HPLC： High Performance Liquid Chromatography ，色谱的一种
• Variant /Variant II/D10 使用高效液相色 谱法原理
分离
• 不同血红蛋白成分的分离基于它们与缓 冲液和分析柱的亲和力的大小不同
• 与缓冲液的亲和力越大，越快被洗脱下 来，保留时间（Retention time）越短； 相反，与分析柱的亲和力越大，越慢被 洗脱下来，保留时间越长。
Retention Time
• Retention time ：各组分未被缓冲液洗脱 下来前在分析柱上保留的时间
正
谢谢！
• 分离的依据是离子交换，即各组分与分 析柱内表面或者缓冲液的亲和力的大小 不同
贮液瓶 计算机
色谱仪组成
泵
进样器
色 谱 柱
记录仪
检测器
组分收集
由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、 记录系统五大部分组成。
分析柱
• 分析柱内填充一种填料，在填料分子的 内表面偶联了带负电荷的集团
分析柱
• 血红蛋白分子分裂形成带正电荷的分子 ，可与分析柱上的 COO- 结合
结果
• 分析柱内洗脱下来的每一个成分先后通 过检测器
• 血红蛋白在415nm有吸收峰 • 检测 415nm 处的吸光度值 • 检测690nm 处的吸光度值作为背景吸收
结果
• 电脑接收检测器内的电压信号，以电压时间为坐标轴绘出色谱图
• 分离出来每一个成分在色谱图上表现为 一个吸收峰，计算各个吸收峰的面积与 总面积的百分比
• 可变A1c需参与 A1c 的计算
可变A1c
• 在variant仪器，它在分析前需被溶血素 移除
• 样本用溶血素稀释后，必须至少放置15 分钟
• 在 variant II/D10仪器， 可变 A1c 运行中 可被分析柱和缓冲液分离出来
A1c
• 人体内的血红蛋白的寿命平均为3个月， 所以检测A1c可以评估人体内3个月之内 的血糖控制情况
• 相同组分的retention time在相同的条件 下、不同的运行中应当是相同的
Retention Time
• 影响保留时间的因素: 1) 缓冲液 2) 分析柱 3) 温度 4) 流速 5) 样本内的其它组分
Retention Time
• 温度升高，保留时间缩短 -由于各组分更快的被从分析柱上洗脱下来