(最新)液相色谱使用注意事项
液相色谱使用注意事项及操作流程
液相色谱使用注意事项及操作流程英文回答：Precautions for HPLC Use.1. Ensure instrument stability: The HPLC system should be equilibrated to the desired operating temperature before use. Avoid sudden temperature changes, as these can damage the column and other components.2. Use high-quality solvents: HPLC solvents should be of analytical grade or higher to minimize impurities that can interfere with the analysis. Degassing solvents before use is recommended to remove dissolved gases that can cause bubbles in the system.3. Choose the appropriate column: The column should be selected based on the analytes of interest, the sample matrix, and the desired separation. Consider factors such as column length, particle size, and stationary phasechemistry.4. Optimize the mobile phase: The mobile phase composition and flow rate should be optimized to achieve the desired separation. Factors to consider include the solvent strength, pH, and ionic strength.5. Use appropriate sample preparation: Samples should be properly prepared to minimize matrix effects and ensure accurate quantification. This may involve filtration, dilution, or extraction.HPLC Operation Procedure.1. Prepare the HPLC system: Equilibrate the system to the desired temperature, degas the solvents, and install the appropriate column.2. Prepare the sample: Prepare the sample according to the established protocol, ensuring proper dilution and filtration if necessary.3. Inject the sample: Inject the sample into the HPLC system using an autosampler or manual injection.4. Run the analysis: Start the HPLC analysis andmonitor the chromatogram. Adjust the mobile phase composition or flow rate if necessary to optimize the separation.5. Collect and analyze data: Collect the chromatogram data and perform data analysis to identify and quantify the analytes of interest.中文回答：液相色谱使用注意事项。
液相色谱流动相的选择依据及使用注意事项
液相色谱（Liquid Chromatography, LC）是一种常用的分离和分析方法，它使用液体作为流动相，在不同组分之间进行分配和分离。
在液相色谱分析中，流动相是至关重要的，它直接影响分离效果、分析速度和结果准确度。
合理选择液相色谱流动相并注意使用时的一些问题是非常重要的。
一、液相色谱流动相的选择依据1. 样品的性质液相色谱中流动相的选择应考虑样品的性质，包括溶解性、稳定性、挥发性等。
对于极性样品，常使用极性溶剂作为流动相；对于不容易溶解的非极性样品，可以选择非极性溶剂作为流动相。
2. 柱子的选择不同的柱子需要选择不同的流动相，以保证分离效果。
对于反相色谱柱，一般使用的是乙腈或甲醇和水的混合物作为流动相；对于正相色谱柱，则需要选用不同的极性溶剂作为流动相。
3. 分离效果流动相的选择应考虑到所需的分离效果。
对于需要高分离效果的分析，流动相的组成和流速需要进行精细调控；对于一些不需要高分离效果的分析，可以适当简化流动相的组成，提高分析效率。
4. 色谱柱的保护对于某些对色谱柱有损害的物质，可以考虑在流动相中添加一些保护剂，以延长柱子的使用寿命。
二、使用注意事项1. 流动相的配制在使用液相色谱分析时，需要注意流动相的配制。
流动相的配制应准确、稳定，避免在实验中因流动相的质量问题导致结果失真。
2. 流速的控制流速的控制对于分析结果的准确性和重现性有着重要影响。
在选择流速时，需要根据分离效果的要求以及柱子的性能来进行合理的设定。
3. 流动相的贮存流动相在储存和使用过程中需要注意避免受到污染和氧化。
定期更换和清洗流动相的储存容器，保持流动相的纯净度和稳定性。
4. 流动相的回收在实验结束后，应注意对流动相进行回收和处理，避免对环境造成污染。
总结回顾：液相色谱分析中流动相的选择和使用是至关重要的。
合理选择流动相，可以提高分析的准确性和重现性；注意使用时的一些问题，可以延长柱子的使用寿命并保护环境。
需要根据样品的性质、柱子的选择以及分离效果来综合考虑流动相的配制和使用。
液相色谱使用注意事项及操作流程
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1. 样品前处理，样品应进行适当的前处理，以除去杂质和干扰物质，确保分析结果的准确性。
实验室高效液相色谱安全使用及注意事项
实验室高效液相色谱安全使用及注意事项高效液相色谱是一种非常常用的分析技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。
在实验室中使用高效液相色谱需要注意一些安全问题，本文将介绍高效液相色谱的使用方法以及注意事项，以帮助实验室工作者更好地使用高效液相色谱。
一、高效液相色谱的使用方法1. 实验前准备在进行高效液相色谱实验前，需要进行一些准备工作。
首先，要检查设备是否正常工作，包括系统的泵、检测器、进样器、柱等是否工作正常。
其次，要检查试剂的浓度和纯度是否符合要求。
最后，要准备好实验所需的溶液和样品，并按照实验要求进行处理和标记。
2. 操作步骤高效液相色谱的操作步骤包括：样品进样、柱温控制、流动相控制、检测器设置等。
具体步骤如下：（1）样品进样将样品注入进样器中，注意不要超出进样器的容积范围。
（2）柱温控制根据实验要求设置柱温，通常情况下柱温为室温或略高于室温。
（3）流动相控制设置合适的流动相组合和流速，以达到最佳分离效果。
（4）检测器设置根据实验要求选择合适的检测器，比如紫外检测器、荧光检测器等，并设置检测器的参数，如波长、灵敏度等。
3. 实验后处理实验结束后，需要对设备和试剂进行清洗和储存。
首先，要将进样器和柱进行清洗，以避免残留样品和流动相对下一次实验的影响。
其次，要将检测器进行清洗和维护，以保证检测器的正常工作。
最后，要妥善储存试剂和设备，以便下一次实验使用。
二、高效液相色谱的注意事项1. 实验室安全在使用高效液相色谱时，需要注意实验室的安全问题。
首先，要穿戴好实验室所需的防护设备，如实验服、手套、护目镜等。
其次，要保持实验室的整洁和干净，避免化学品的混合和交叉污染。
最后，要遵守实验室的规定和操作程序，以确保实验室的安全。
2. 操作注意事项在进行高效液相色谱实验时，需要注意以下几个方面：（1）样品的选择和准备在选择样品时，要注意样品的性质和纯度，以避免对实验结果的影响。
同时，要进行适当的样品处理和标记，以确保样品的准确性和可靠性。
液相实验室操作要点及注意事项
液相实验室操作要点及注意事项液相实验室操作要点及注意事项1.液相色谱仪应臵于稳定的工作台上，避免震动、阳光直射和气流。
环境温度为10-30℃(应恒定)，相对湿度25%-75%。
电源电压220±20V。
应保持仪器放臵房间的清洁、卫生，每天打扫房间、擦洗操作台和仪器外壁。
2.流动相使用前必须经过0.45μm的滤膜，有机相的流动相必须为色谱纯，水相必须为新鲜制备的纯化水，并规定使用有效期，以防止长菌或长藻类。
3. Agilent HPLC色谱仪用于清洗用的10%异丙醇每15天更换一次，Waters HPLC色谱仪用于清洗密封垫和进样针的10%甲醇每15天更换一次。
4.色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死（如ACN适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相）。
5.对于手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。
6.AgilentHPLC色谱仪每3个月或当玻璃滤头发黑时，用30%硝酸浸泡玻璃滤头30min(禁止超声) ， WatersHPLC色谱仪每3个月用纯化水超声金属滤头30min。
7.Agilent HPLC色谱仪使用5ml/min的流速排气时，如果压力大于10bar，更换过滤用白色滤头; Waters HPLC色谱仪应定期（说明）清洗在线过滤器。
8.紫外检测器的氘灯有一定的寿命，进样前一小时左右打开即可。
实验完成冲洗柱子时即关闭以延长使用时间。
每3个月用色谱纯的异丙醇（或甲醇）冲洗检测池。
9.仪器如较长时间不用应使高效液相色谱仪处于所有电源开启、检测器紫外灯关闭的待机状态，不能频繁的开启/关闭电源。
10.发现泵漏液、紫外灯能量不足或损坏、仪器无法启动等等较严重的情况，应报告室主任，室主任安排进行检查，维修，并做好记录。
11.进入计算机上的色谱工作站应设臵密码。
如工作站上不能设臵密码，则应在装有该色谱工作站的计算机上设臵密码，防止未经许可授权的人员进入该工作站系统。
高效液相色谱仪使用注意事
高效液相色谱仪使用注意事项
（1）流动相放置时间超过三天的不要继续使用，应重新配制，需要调PH的千万不能遗忘！！！
（2）配制好的流动相应过滤，并超声15分钟！
（3）换流动相时候，应停泵，换好流动相后，先将流速调为0.8，运行10分钟后将流速重新调回标准要求的
流速。
（4）实验过程中，注意观察压力的变化，并注意流动相是否充足，否则应该及时补充。
（5）实验前和实验后都应清洗进样阀，定量环，并将基线走平，用滤纸把进样口擦干！
（6）进样的时候，应该将进样针完全插入进样口，若进样针还有部分留在外面，说明没有进到位，样品不
会完全打进去！！！
（7）实验完成后，应尽快关闭检测器，因为紫外灯的寿命只有2000小时，而且更换紫外灯的费用比较高！（8）冲柱子的冲柱水和甲醇都应该过滤和超声，且在换冲柱水和甲醇的时候都要调流速。
参照第（3）条！（9）经常注意观察桌面上和地上的废液缸，及时倒掉废液！。
液相色谱柱的使用注意事项流动相和样品处理 液相色谱操作规程
液相色谱柱的使用注意事项流动相和样品处理液相色谱操作规程液相色谱柱的使用注意事项：流动相和样品处理 1. 色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特别说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是液相色谱柱的使用注意事项：流动相和样品处理 1. 色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特别说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很简单析出，堵塞色谱柱。
2. 流动相：1）在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。
流动相确定要使用色谱级别的溶剂。
如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避开细菌产生。
2）流动相使用前需用微孔滤膜过滤,除去流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。
缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避开溶解度变化造成产生新的沉淀。
不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱，以免柱性能损坏（添加5％的有机溶剂冲洗色谱柱，同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。
还可以使色谱柱更简单平衡）。
3）流动相需脱气后使用，可避开因气泡导致的泵和检测器的工作不正常。
假如测试时使用的流动相与色谱柱保存使用的流动相有较大区分，应当使用过度分布的形式进行平衡。
避开由于流动相的蓦地变化造成柱压加添过大或流动相缓冲盐结晶造成对色谱柱和仪器系统的损坏。
正相色谱柱比反相色谱柱需要更长的平衡时间。
4）流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水*好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
假如将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。
另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应当定期清洗或更换。
5）以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0—8.0，BDSC18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0—10.0、当必需要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立刻用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。
液相色谱注意事项
液相色谱（HPLC）是一种广泛应用的分离和定量分析技术，用于检测复杂混合物中的各种化合物。
以下是进行液相色谱实验时需要注意的一些事项：
1. 流动相选择：
- 选择合适的流动相对于实验结果至关重要。
要根据待测物质的性质、固定相类型以及所需保留时间来确定。
- 流动相需要过滤脱气，以去除其中的微粒和气体，确保系统稳定。
2. 样品处理：
- 样品必须充分溶解，并且尽量减少杂质的引入。
- 对于不稳定的化合物，可能需要添加保护剂或在低温下操作。
3. 色谱柱使用：
- 色谱柱应妥善保存，避免长时间暴露在空气中或光照条件下。
- 使用前确保色谱柱平衡至所需的流动相条件。
4. 进样：
- 进样量应适当，过大的进样量可能导致峰形变差或拖尾现象。
- 注意保持进样器清洁，定期清洗和维护。
5. 压力控制：
- 操作过程中要注意系统的压力变化，过高或过低的压力都可能是问题的信号。
- 如遇到异常情况，应立即停机检查。
6. 梯度洗脱：
- 如果使用梯度洗脱，要确保程序设置正确，并对梯度曲线进行测试。
- 在梯度结束时，要有一个适当的平衡段，以便色谱柱回到初始条件。
7. 数据处理：
- 确保采集到的数据是准确可靠的，并及时进行处理和解读。
- 记录所有的实验参数，包括仪器设置、流动相组成等，便于后续分析和重现实验。
8. 安全措施：
- 注意化学品的安全操作，遵守实验室安全规定。
- 对于有毒有害的溶剂和样品，要采取相应的防护措施。
液相色谱使用注意及保养
高效液相色谱(HPLC)使用中常见故障及解决方法（一）峰型异常问题峰型问题是液相的主要问题，在做液相过程中，我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型，对于各种各样的异常峰，要区别对待，从主要问题出发，一个一个加以解决。
1、色谱图中未出峰。
解决方法：系统未进样或样品分解；泵未输液或流动相使用不正确；检测器设置不正确；针对以上情况成因作相应调整即可。
2、一个峰或几个峰是负峰。
解决方法：流动相吸收本底高；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。
3、所有峰均为负峰。
解决方法：信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；光学装置尚未达到平衡。
4、所有峰均为宽峰。
解决方法：系统未达到平衡；溶解样品的溶剂极性比流动相差很多；色谱柱尺寸及类型选择不正确；色谱柱或保护柱被污染或柱效降低；温度变化造成的影响。
、5、所出峰比预想的小。
解决方法：样品黏度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确．定量环体积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。
6、出现双峰或肩峰。
解决方法：进样量过大；样品浓度过高；保护柱或色谱柱柱头堵塞；保护拄或色谱柱污染或失效；柱塌陷或形成短通道。
7、前伸峰。
解决方法：进样量或样品浓度高；溶解样品的溶剂较流动相极性强；保护柱或色谱柱污染或失效。
8、。
解决方法：柱超载，降低样品量；增加柱直径采用较高容量的固定相；峰干扰，对样品进行清洁过滤；调整流动相；硅羟基作用，加入三乙胺，用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相pH值；柱内烧结不锈钢失效，更换烧结不锈钢；加在线过滤器，对样品进行过滤；死体积或柱外体积过大，将连接点降至最低；尽可能使用内径较细的连接管；柱效下降，更换柱子；采用保护柱，对柱子进行再生。
9、出现平头峰。
解决方法：检测器设置不正确；进样体积太大或样品浓度太高。
10、出现鬼峰。
解决方法：进样阀残余峰，在每次进完样后用充足的时间来平衡和清洗系统；样品中存在未知物，改进样品的预处理；流动相污染，更换新流动相，尽可能现配现用，隔夜的流动相再次使用时要过滤；尽可能使用HPLC级试剂；流路中有小的气泡，打开Purge阀，加大流速排除。
高效液相色谱仪操作注意事项
高效液相色谱仪操作注意事项
流动相：
1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和有机系膜的使用范围，并进行超声除气处理。
2、水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质。
样品：
1、采用过滤或离心方法处理样品，确保样品中不含固体颗粒；
2、用流动相或比流动相弱（若为反相柱，则极性比流动相大；若为正相柱，则极性比流动相小）的溶剂制备样品溶液，尽量用流动相制备样品液；
泵：
1、泵在使用过程中不能把气泡泵进入仪器。
2、泵自清洗液体应该应经常更换（一般为一周）。
3、仪器在长期不使用时应把泵、流动相过滤器及管路保存在有机相溶剂条件下。
进样阀：
1、使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针针，洗针液一般选择与样品液一
致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上，并排除针筒中的气泡；
2、手动进样时，进样量尽量小，使用定量管定量时，进样体积应为定量管的2倍以上；
色谱柱：
1、使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书，注意适用范围，如pH值范围、流动相类型等；
2、使用符合要求的流动相；
3、使用保护柱；
4、如所用流动相为含盐流动相，必须先用水与有机相相同比例流动相冲洗20分钟以上再换上含盐流动相反相色谱柱使用后，使用后，先用水与有机相相同比例的流动相冲洗，再用纯有机相冲洗。
5、色谱柱在不使用时，应用有机相冲洗，取下后紧密封闭两端保存；
6、不要高压冲洗柱子；
7、不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱；
8、使用过程中注意轻拿轻放。
高效液相色谱仪使用注意事项
高效液相色谱仪使用注意事项1、使用者上机前首先须经过管理老师的同意，须认真履行仪器使用登记制度，出现问题应及时向老师报告。
2、须自备分析柱和流动相溶剂。
3、流动相：须使用色谱纯级溶剂，样品溶液和流动相需用0.45µm 滤膜过滤。
若是使用V ARIAN色谱仪，流动相须首先赶气40～60分钟。
4、进样：一定要使用平头微量进样针进样。
对一般样品而言，进样体积需大于定量环的2.5倍～4 倍则更加保险。
5、请正确开关机，顺序如下：打开计算机（Agilent 1100还须先运行Bootp Server程序）→打开HPLC 各模块电源→待各模块自检完成后，打开化学工作站→打开Purge阀，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止→关上Purge阀→进行数据分析方法编辑和数据采集方法编辑→用流动相冲洗和平衡系统和分析柱（更换溶剂后应以较长时间平衡系统）→关机时，先关闭化学工作站，再关HPLC 各模块电源和计算机。
6、使用双泵时，A、B、C、D四相中，若所用流动相中有含盐流动相，则A、D（进液口位于混合器下方）放置含盐流动相，B、C（进液口位于混合器上方）放置不含盐流动相。
7、请在每次分析时检查并记录压力是否在正常范围；每次使用完毕后请清洗系统：先以适当比例水和ACN 或MeOH混合溶液清洗20～30分钟，再以100％ACN 或MeOH 清洗10～20分钟，最后应将有机溶剂保留在系统中。
当流动相中使用了无机盐、酸等缓冲盐物质，在分析结束后，应先用纯水“purge”脱气机管路冲洗5分钟，再用95％水和5％ACN 或MeOH清洗色谱柱30～40分钟后，再以100％ACN 或MeOH 清洗10～20分钟，最后应将有机溶剂保留在系统中。
冲洗过程中关闭D灯、W灯。
8、为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次分析结束后应冲洗进样阀。
通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。
液相色谱使用注意事项
HPLC用水来源1 专门的纯水机或超纯水机；2 去离子水重蒸；3 二次或三次重蒸水；4 采用类似家用的纯水机；5 市场上瓶装的纯净水或蒸馏水；6 其它途径以上的水除第1项的水能用于梯度淋洗外，其余的水均难用于梯度淋洗。
不管采用何种途径，配制流动相应用新鲜水，水质越高放置时间越短。
理想的HPLC用水应为18.2MΩ的超纯水，并通过0.22um的滤膜，除去热源、有机物、无机离子及空气等。
最小检测限的计算方法（以N2000色谱工作站为例）CL=2*Nd*c*20/HV注：Nd 基线噪声，单位：mVc 样品浓度H 峰高，单位：mV（或AU）V 进样体积例：如基线噪声为20微伏即0.02mV，萘的甲醇标样溶液浓度为0.0001g/L，峰高145000微伏即145mV，进样体积为20微升，即得：CL=2*0.02*0.0001*20/145*20=2.76e-8即10的负8次方对仪器进行维护时应该遵循的几条基本规则1. 一次规则当系统出了故障，你可以试探性地改变某些状态，一次可以改变一个参数。
例如，限制色谱峰脱维的问题，可以依次改变流动相，换保护柱，换分析柱等。
做一些简单的改变步骤，也许就能解决问题。
2. 二次比较规则在动手检修之前已经明确了故障所在，或者已经确定了解决故障的方案。
换句话说，动手之前已经找对了解决办法。
例如，在进样过程中发现内标物的峰值变低了，可以重复进样看看重复性如何，如果是偶然变低，是否是定量管里进了气泡。
这个规则可用于考察系统改变后的情况。
更换了流动向后在正式进样前可以进两次标准品以检查保留时间的稳定情况和色谱峰的稳定性。
在梯度洗脱中如果出现了多余的峰，可以空载梯度洗脱一次（真的有问题吗？），用此规则可以避免不必要的改变，尽快确定纠正措施。
3. 取代规则用好的部件换下可疑的部件，是查找故障的最好方法。
如果你怀疑检测器引起了噪音，就换一个性能好的检测器。
如果故障被排除了，就说明换下的检测器有问题。
液相色谱仪使用注意事项
液相色谱仪使用注意事项1.实验前的准备：在进行液相色谱分析之前，需要对设备进行检查和维护，确保其正常运行。
检查各种管道、阀门是否漏气、漏液，确认药品、试剂和溶剂的质量是否符合要求。
2.样品的准备：样品的制备和处理对液相色谱分析的结果至关重要。
样品应进行合适的前处理，如滤过、稀释等。
对于复杂的样品，可以采用样品预处理或样品提取等方法，以提高分析效果。
3.柱的选择：不同的分析目的需要选择不同的柱。
根据样品的性质和分离效果要求，选择合适的色谱柱。
也要注意柱的选购途径，避免购买到质量不过关的产品。
4.流动相的选择：流动相的选择应根据分析目标来确定。
需要根据样品的性质、分离要求、仪器的特征等因素来选择合适的流动相组合。
同时，应保证流动相的纯度、稳定性和可靠性，防止污染样品和柱。
5.示峰的优化：在进行液相色谱分析时，要对峰形进行优化，以提高分离效果。
可以调整流速、溶剂组成、柱温等参数，使峰形对称、峰高充分、基线稳定。
6.方法的优化：制定液相色谱分析方法时，要充分考虑分离、灵敏度、分辨等方面的要求，并根据不同样品的特点和分析目标进行调整。
方法的优化对于提高分析效果和准确性非常重要。
7.正确的进样方式：进样的方式和体积直接影响分析的灵敏度和分离效果。
采用适当的进样体积和进样方法，确保样品的充分分离，避免交叉干扰。
8.数据的处理和解释：对于液相色谱分析的结果，要进行合理的数据处理和解释。
可以采用峰面积、峰高、峰宽等参数进行数据分析，并结合标准曲线或其他定量方法，得出最终的分析结果。
9.设备的维护和清洁：定期对液相色谱仪进行维护和清洁，保证其正常运行。
及时更换柱、滤芯等易损件，清洗或更换阀门、管道等部件。
同时要保持仪器周围的清洁，避免灰尘和杂质的进入。
10.安全操作：操作液相色谱仪时要注意安全，避免药品和试剂的接触皮肤和口腔，尽量避免吸入有害气体和液滴。
使用化学品时应佩戴适当的防护设备，注意实验室安全事项。
总之，液相色谱仪作为一种复杂的实验仪器，使用时需要严格按照操作规程进行操作，注意仪器的维护和安全，才能得到准确、可靠的分析结果。
液相色谱仪操作注意事项
液相色谱仪操作注意事项1.实验前准备：-检查液相色谱仪的仪器和设备是否正常运行，并及时维护和保养。
-确保所使用的溶剂和试剂是纯净的，避免杂质对实验结果的干扰。
-根据实验需要准备样品，并对样品进行适当的预处理。
2.样品注射：-在注射样品之前，应使用适当的过滤器或离心管对样品进行净化和处理，以去除固体颗粒和未溶解的物质。
-控制样品的浓度，并确保注射量合适，避免样品浓度过高或过低。
-注意避免在采样时引入气泡，以免影响分析的准确性。
3.溶剂系统和柱箱：-检查溶剂系统的压力是否稳定，并确保溶剂的流动速度和比例准确。
-定期检查柱箱的温度控制系统，以确保温度控制的准确性和稳定性。
-避免溶剂泄漏和混合，定期清洁和更换系统中的管路和连接件。
4.柱子选择：-根据样品的性质和要求选择适当的柱子材料和分离模式（正相、反相等）。
-注重柱子的使用寿命和保养，定期进行柱子的清洗和再生。
5.检测器设置：-根据样品的性质和测定要求选择适当的检测器（紫外可见、荧光、电化学等）。
-根据检测器的灵敏度和响应范围调整检测器的参数，以获得最佳的测定结果。
6.数据处理：-定期校准仪器，包括检测器的灵敏度和漂移。
-使用适当的软件进行数据采集和分析，确保数据的准确和可靠。
-定期备份所得到的数据，以防止数据丢失和损坏。
7.安全操作：-液相色谱仪使用大量的有机溶剂和化学试剂，应注意防止溶剂的泄漏、挥发和接触皮肤和眼睛。
-在操作前佩戴个人防护装备，包括实验手套、护目镜和实验衣。
-控制溶剂的使用量和浓度，避免使用过多的溶剂，同时避免溶剂的浓度过高。
以上是使用液相色谱仪时需要注意的一些操作事项，通过正确的操作和维护，可以获得准确、可靠的分析结果，并确保实验的安全性。
液相色谱使用注意事项
液相色谱使用注意事项
1所有液体使用前应过滤超声（15-20min），防止液体中气泡进入仪器影响实验数据（有机膜为通用膜）
2超压警报响（一般设置20-25）或输入条件错误时，应先按清除在重设，否则无法重设
3外控开启时，键盘无效
4高压恒流泵，B上A下，一般B通有机相（有机水相）A通水（盐水相）
5取样时慢吸快推，进样时在LOAD位置缓缓推进，完毕右旋
6清洗时用10%—30%硝酸水溶液超声15min，置于滤纸之上（口向上），洗耳球吹尽其中液体，用纯水清洗5次，每次吹尽液体
7换于不同流动相中时，震动，否则易产生气泡
8管道内有气体时，冲洗至气泡冲出，冲不出时用注射器吸出（稳定后压力不断改变或无压力说明有气泡），开机后直接冲洗
9泵头冲洗随时可以进行，用10%—30%甲醇水溶液
10进样口的清洗10%-30%甲醇水溶液，后用纯甲醇（乙腈）清洗
11柱子使用前需读说明书，有些药品会损坏柱子
12柱子不可按反，不可反冲
13每天用完柱子后，流量1ml/min纯甲醇(乙腈)冲洗30min以上,含盐类液体使用后先用10%-30%甲醇水(乙腈水)冲洗20-30min,后用纯甲醇冲洗30min
14正向与反向溶液换液时应先通过度液异丙醇
15柱子长期不用时,避光保存
16工作站基线突升或突降为检测池进气泡,应冲洗
17短时间离开不用关闭仪器,每开一次相当于氘灯开启三小时。
高效液相色谱仪操作使用过程中的注意事项
高效液相色谱仪操作使用过程中的注意事项一，高效液相色谱仪操作过程：1、开机操作：（1）、打开电源，用Harb相连接时，注意Harb电源，打开计算机，打开Bootp Server（一般启动时已打开）；（2）、自上而下打开个组件电源，Bootp Server里显示有信号时（有六行字符），打开工作站（先打开On line）；（3）、打开冲洗泵头的10％异丙醇溶液的开关（需用针捅抽），控制流量大小，以能流出的最小流量为准；（4）、注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于最低限会自动停泵，注意洗泵溶液的体积，及时加液；（5）、使用过程中要经常观察仪器工作状态，及时正确处理各种突发事件。
2、先以所用流动相冲洗系统一定时间（如所用流动相为含盐流动相，必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相），正式进样分析前30min 左右开启D灯或W灯，以延长灯的使用寿命；3、建立色谱操作方法，注意保存为自己命名的Method，勿覆盖或删除他人的方法及实验结果；4、使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒，洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上，并排除针筒中的气泡；5、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤；6、实验结束后，一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上，再用甲醇冲洗。
冲洗过程中关闭D灯、W灯；7、关机时，先关闭泵、检测器等，再关闭工作站，然后关机，最后自下而上关闭色谱仪各组件，关闭洗泵溶液的开关；8、使用者须认真履行仪器使用登记制度，出现问题及时向老师报告，不要擅自拆卸仪器。
（续）1、操作过程若发现压力很小，则可能管件连接有漏，注意检查。
当出现错误警告（各组件指示灯均为红色），一般为漏液，其中一个感应器中已有溶剂，漏液故障排除后，擦干，点击On line操作界面中的Instrument/System Off，然后再点击操作界面中的Instrument/System On即可。
液相色谱使用注意事项整理
液相色谱使用注意事项重点1：大容量瓶中的管不能长时间浸泡在水或者缓冲盐中，易产生微生物使头堵塞，并且浓度达不到所设定的要求，易产生拖尾现象。
包括其他瓶中装有酸碱盐时，需用水大量冲洗，再放入有机溶剂中。
只要换个流动相就需将头都清洗一遍，并保存。
正确使用方法：用15%-20%硝酸，浸泡2小时，取出，完全用水置换再进行超声（10-30分钟），再用100%有机溶剂（例甲醇）再超声10-20 min，最后将头浸入有机溶剂中。
重点2：在流动相中预先加入酸（甲酸、乙酸）或碱，以消除氢键的作用。
酸中的COO-和OH-愈合，先产生氢键导致样品本身没有产生氢键的途径。
流动相中pH约为2.8。
因此加碱时需注意，一般加三乙胺。
磷酸较好，他在紫外区超低吸收。
流动相要现用现配。
娃哈哈虽干净，但内部含有颗粒，建议过滤。
如果检测波长在210-220 nm时用娃哈哈可以，但检测波长在254 nm或280 nm时，用一次蒸馏水过滤没问题。
低波长容易引起基线不稳。
越干净的水意外峰出现的情况越少。
重点3：实验后用洗瓶连续洗头儿，再在烧杯水中晃动清洗多次，将头中的磷酸清洗干净，90-95%的水+10%的甲醇。
实验数据不好可能就是头被污染了。
重点4：设定梯度洗脱程序时，最后浓度要回到原始浓度，再继续保持10-15 min。
针与针之间保持10-15 min。
多查国外核心期刊。
建议：20 min, 10%-40%;30 min,40%;35 min,10%;50 min,10%。
重点5：假如最近样品做的较多（无论什么样品），用甲醇60%-70%，四氢呋喃或乙酸乙酯冲洗柱子，因为天然物中的弱极性组分还会残留在柱子中，用100%的乙腈冲洗不掉，冲洗不超过30 min。
建议不要用三氯甲烷。
比例建议50：50或60：40。
二种试剂要混合（不能单独用三氯甲烷）超声处理，再进行冲洗柱子，30min。
重点6：单一溶剂不需要超声，混合溶剂需要超声。
水最好是现蒸，开盖就用。
高效液相色谱仪使用注意事项 液相色谱如何操作
高效液相色谱仪使用注意事项液相色谱如何操作液相色谱仪在高效使用中需注意以下几个问题：1、色谱柱中的流动相是否会会排干的问题：不少做色谱分别试验的人碰到过这样的情形：不慎未适时补充流动相，泵将溶剂液相色谱仪在高效使用中需注意以下几个问题：1、色谱柱中的流动相是否会会排干的问题：不少做色谱分别试验的人碰到过这样的情形：不慎未适时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。
如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中全部流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，假如泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。
即使泵中充分了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。
由于泵只能输送液体，而不能输送空气。
2、色谱柱变干的问题：另一个更可能发生的情况是忘掉盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。
同样，整个色谱柱干枯的情况不太简单发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉全部溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。
即使色谱柱真的变干了，也不愿定就不可救药了。
可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂（如经氦气脱气的甲醇）冲洗色谱柱以除去气体。
较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应当能够溶解并去除滞留在填料中的气体。
色谱柱大约需要（以1mL/min的流速）冲一个小时或更多的时间被彻底浸润，恢复到正常状态。
3、使用PEEK（polyetheretherketone）管路和接头需要注意以下问题：假如常常需要更改流路或更换不同品牌的色谱柱，使用PEEK材料制成的管路和接头会特别便利。
PEEK管路简单连接；PEEK接头不仅无需工具，手拧即可固定，而且简单调整锥箍之外的管路长度，便利与不同品牌或规格的色谱柱相连接。
使用此类材料的管路需要注意的是：PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。
虽然未察看到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象，但PEEK碰到上述溶剂会变脆。
另一个西药考虑的因素是压力限。
液相色谱仪使用注意事项
1岛津液相色谱仪使用注意事项1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。
2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。
3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。
对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。
5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。
6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
7.C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。
8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。
清洗方法；①以异丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清洗；⑧用10％稀硝酸清洗。
9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相的清洗。
11.要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的流动相中。
更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
液相色谱柱使用经验谈色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。
1、样品的前处理：a、最好使用流动相溶解样品。
b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45µm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
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流动相：
1. 流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。
2. 流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。
3. 含水流动相最好在临实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。
最好
加入叠氮化钠，防止细菌生长。
4. 流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。
流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
5. 流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。
如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较
低的溶剂配制。
色谱柱:
1. 要注意柱子的pH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
2. 长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该
用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。
3. C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。
4. 一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头
的杂质。
否则反冲会迅速降低柱效。
5. 经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。
在进行清洗时，对流路系统中流动
相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规
分析需要50~75ml。
6. 保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。
绝对禁止
将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
使用注意事项：
1. 使用中避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的突然变化或者使色谱柱从高
处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流
速时应该缓慢进行。
2. 平衡过程中，将流速缓慢地提高用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离
子对试剂度如果较低，则需要较长的时间来平衡）。
3. 如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存于甲
醇/乙腈中。