液相色谱柱使用注意事项

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液相色谱柱使用问题解析

液相色谱柱使用问题解析

液相色谱柱使用问题解析液相色谱柱使用疑难问题解析就液相色谱柱的安装,使用和维护知识,以及各种柱压、峰形和色谱柱寿命等问题前来提问,也欢迎液相色谱方面的高手前来交流切磋。

内容提纲:一、液相色谱柱的安装、启用和维护中的重点注意事项1、柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配2、溶剂的匹配转换3、新柱使用前的平衡和老化4、pH使用范围5、色谱柱的保存二、柱压问题1、填料破碎和使用后,有填料粉末生成2、颗粒物堵塞引起柱压上升和对策1)预防措施2)故障排除3、化学污染物引起柱压上升和对策1)预防措施2)故障排除三、峰形问题1、峰后拖2、峰前延3、其他峰形问题四、保留时间问题1、保留时间的重现性2、保留时间漂移3、柱与柱之间的重现性4、批与批之间的重现性五、寿命问题六、其他疑难的色谱技术问题一.安装、启用和维护中重点注意事项色谱柱既是液相色谱仪的最核心部件,价格相对昂贵,请牢记它是高档仪器中的高档部件,给它以足够的尊重和关怀。

如避免强烈的碰撞和震动,尽管色谱柱从1米高的实验台掉落到水泥地上不至于100%会损坏,但50%的可能损坏你也承受不起。

另外不要让柱床变干,避免在严寒环境受冻等。

1. 柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配色谱柱是消耗品,不是仪器原配的情况很多。

上图表明柱连接的6种不同方式(数字单位是英寸),如果两者类型不匹配将会产生漏液或者死体积过大的现象。

接头比柱头深度长,不易拧紧而漏液;接头比柱头深度短,柱头内留有空隙而产生死体积,使谱带展宽和峰拖尾。

2. 溶剂的匹配转换色谱柱内保存溶剂和仪器系统内存留溶剂,如果和流动相不匹配,使用前需进行转换。

特别是流动相含缓冲盐时,如保存溶剂是纯有机相或有机相比例高,直接将新柱接入使用,会导致缓冲盐在柱内结晶析出,最严重会将新柱永久不可逆地损坏。

正相柱保存溶剂一般为正己烷,如果要转换成HILIC柱模式使用,由于正己烷和甲醇乙腈的互溶性不好,转换中间需用二氯甲烷或乙酸乙酯过渡。

液相色谱仪色谱柱使用时需要注意哪些细节 液相色谱如何做好保养

液相色谱仪色谱柱使用时需要注意哪些细节 液相色谱如何做好保养

液相色谱仪色谱柱使用时需要注意哪些细节液相色谱如何做好保养在液相色谱仪的日常分别分析工作中,其色谱柱的正确使用和维护特别紧要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命及液相色谱仪的使用效果,在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护仪器。

1、柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。

必需防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。

2、假如仪器用来做常规分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置一根柱,这样有助于延长柱子的寿命。

3、避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。

温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形;柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料,因此在调整流速时应当缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。

4、应渐渐更改溶剂的构成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂更改为全部是水,反之亦然。

5、如使用柱温掌控装置时,应注意在通人流动相后才能升温。

6、一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。

否则反冲会快速降低柱效。

7、选择使用适合的流动相,以避开固定相被破坏。

有时可以在进样器前面连接一个预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避开分析柱中的硅胶基质被溶解。

8、避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。

保护柱一般是填有相像固定相的短柱。

保护柱可以而且应当常常更换。

9、保存液相色谱仪的色谱柱时应将柱内充分乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。

禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

安捷伦液相色谱仪的日常维护及保养1、手动进样器:平常应当注意使用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状态清洗;假如显现漏液现象,原因极可能为转子密封垫磨损或污染,一般要申请维护和修理或更换配件。

2、排液阀:此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损,可卸下后取出其垫片用异丙醇超声波清洗或更换垫圈。

液相色谱柱的使用

液相色谱柱的使用

液相色谱柱的使用1、Hamilton离子排斥色谱柱中应封存淋洗液保管,保管温度4—10摄氏度,使用温度20—60摄氏度。

2、Hamilton离子排斥色谱柱应在pH2—12范围内使用,淋洗液及样品浓度均不能超出此范围。

进口ShodexIC色谱柱应在pH3—12范围内使用,淋洗液及样品浓度均不能超出此范围。

3、Hamilton离子排斥色谱柱大使用压力不能超出15MPa。

4、拆下Hamilton离子排斥色谱柱时,应在色谱柱温度降至室温后拆下,拆下后立刻以堵头密封。

5、含有重金属的样品,应以阳离子交换树脂处置后,去除重金属才略进样。

6、含有有机物的样品,应过C18固相萃取柱后进样。

7、样品硬度较高时,应先去除样品中的钙镁离子。

8、样品进样前必须以0.22m微孔滤膜过滤或一次性针头过滤器过滤。

9、室温保管色谱柱时,应每周通淋洗液一次。

10、杭州亚莱博为您供给Hamilton离子色谱柱的售前售后服务。

液相色谱柱的使用色谱柱在使用前,可以进行柱的性能测试,并将结果保管起来,作为今后评价柱性能变更的参考。

但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是依照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是较佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。

1、样品的前处置:a、可以使用流动相溶解样品。

b、使用予处置柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。

c、使用0.45?m的过滤膜过滤除去微粒杂质。

2、流动相的配制:液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而实现分别的目的,因此要求流动相具备以下的特点:a、流动相对样品具有肯定的溶解本领,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保管在柱中)。

b、流动相具有肯定惰性,与样品不产生化学反应(特别情况除外)。

c、流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分别效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。

常用液相色谱柱使用与保养

常用液相色谱柱使用与保养

常用液相色谱柱使用与保养液相色谱(Liquid Chromatography,简称LC)是一种分离和分析物质的方法,广泛应用于化学、生物化学、环境科学、食品科学等各个领域。

在液相色谱系统中,色谱柱是其中最为重要的组成部分之一,对色谱分离的效果和分析结果有着重要影响。

因此,正确的使用和保养色谱柱是保证色谱实验质量和延长色谱柱寿命的关键。

一、色谱柱的选择1.根据分析需要选择合适的色谱柱类型,如反相、离子交换、凝胶、手性等。

选用的色谱柱应能实现样品分离的目标。

2.考虑色谱柱尺寸,如柱径和柱长。

柱径越小,理论板高度越高,分离效果越好,但同时也容易增大柱后压力。

柱长则决定了分离时间,通常根据样品的复杂程度和实验要求进行选择。

3.考虑色谱柱填充物,如C18、C8、C4等反相填料。

填充物的理化性质不同,会对分离效果产生影响。

根据样品性质和分离目标选择填料。

二、使用色谱柱的注意事项1.在使用前检查色谱柱外观,确保柱壁完好无损,无裂缝或损坏。

同时检查柱头端口是否干净,无污物残留。

2.进行柱前的处理,如样品预处理和溶剂预处理,保证样品的稳定性和纯度,避免对色谱柱产生不利影响。

3.操作时避免剧烈振荡、震动或摇晃色谱柱,以免对柱填料产生机械损伤。

4.在柱温控制装置的帮助下,保持色谱柱运行温度的稳定,以确保分离结果的重复性和再现性。

三、色谱柱的保养1.使用前、使用后和中间暂停使用时需正确保管色谱柱。

使用前,色谱柱应存放在干燥、阴凉的地方,避免阳光直射。

使用后,将色谱柱用保护帽覆盖,防止灰尘、气体和湿气进入柱内。

中间暂停使用时,用适当的主流溶液保养柱床,避免干燥。

保养柱床时需将色谱柱倒放,使柱床保持湿润状态。

2.避免在色谱柱上溢液,以免引起柱床断裂或填料活化。

使用前,尽量将样品溶液过滤或超声处理,避免样品中存在大颗粒杂质。

3.保证洗涤液和贮存液的纯度和质量,避免因杂质和离子引起色谱柱填料的损坏。

对于需要多次使用的色谱柱,洗涤液需要选择与柱填料相容的溶剂进行洗脱。

液相色谱柱的使用和维护保养

液相色谱柱的使用和维护保养

液相色谱柱的使用和维护保养液相色谱柱是一种广泛使用的分离技术,可用于分离和测定复杂混合物中的组分。

由于液相色谱柱具有精确分离、操作简便、分离效率高等特点,因此,越来越多的实验室都开始使用该技术。

在使用液相色谱柱时,正确的维护保养非常关键。

本文将介绍液相色谱柱的使用方法和维护保养技巧,以便确保您的分离实验能够得到最佳的结果。

一、液相色谱柱的使用1. 准备工作使用液相色谱柱之前,必须先进行预备工作。

这包括:清洗和准备液相色谱柱以免携带有污染物。

准备需要分离和测定的样品。

准备适当的流动相。

流动相必须符合样品的性质。

液相色谱柱的流动相应该是无色的,纯净的水或相应的缓冲液,并具有必要的缓冲能力。

根据柱的尺寸来选择适当的样品注射量。

2. 柱的装配通常情况下,液相色谱的柱是由管状的柱壳、填充柱节、柱端固定件和柱段之间的密封件组成。

在对柱进行装配的时候,对组件应该加强检查以保证每一个元件的质量。

柱被放置在可控压力的色谱装置中,直到达到设定的温度,流动相通过柱床高度。

在样品通过柱床的过程中,要确保流动相的速度恰好足够将所有的组分都分开并在规定的时间内溶出。

3. 分析过程准备工作完成后,可以开始进行样品的分离实验。

在整个过程中,以下措施应予以注意:在样品从样品室进入色谱柱之前,流动相必须在柱中流动。

否则,在注入样品时,将有空气囤积在柱床中,会在透射检测器处产生噪音。

更换液相色谱柱的流动相时需要小心,因为对于一些化学品来说,即使是微量的杂质也会对结果产生影响。

如果发现柱床粘住或困住,不应使用力量来拉动柱子,而应该使用相反方向的流动相,以使样品回到某一个位置,并反向流动一会,这样可以避免样品损坏柱子床。

二、液相色谱柱的维护保养液相色谱分析的成功与否,除了预备工作和分析过程外,还与样品的制备、取样位置以及样品进入液相色谱柱中的流动相的条件等因素有关。

因此,经常做好液相色谱柱的保养工作,可以有效防止柱子损坏,延长其寿命并保证实验结果的准确。

液相色谱柱使用说明

液相色谱柱使用说明

液相色谱柱使用说明液相色谱柱是一种常见的色谱技术应用于分离和分析化合物的工具。

本文将为您详细介绍液相色谱柱的使用说明,包括如何选择合适的柱子、柱子的安装步骤、样品的准备和加载、柱子的使用注意事项以及柱子的保养和储存方法。

1.选择合适的液相色谱柱在选择液相色谱柱之前,需要考虑以下几个因素:-样品的性质和分离要求:不同的柱子对不同性质的化合物有着不同的分离效果。

根据样品的极性、大小和稳定性等因素,选择合适的柱子(例如反相柱、正相柱、离子交换柱等)。

-流动相的选择:根据样品溶解度和分离要求,选择合适的流动相(溶剂、缓冲液等)。

2.液相色谱柱的安装步骤-将柱床冲洗干净:使用纯溶剂(如甲醇、乙醇等)反复冲洗柱床,直至流出的溶液无色透明。

-将液相色谱柱连接至色谱仪:在连接针嘴前,先用一根塑料贴纸封住柱子的两端,然后将针嘴旋入液相色谱柱的出口。

-将柱子连接到色谱仪:将柱子放入色谱仪的支架上,并确保柱子的连接口与色谱仪的进样器连接正确。

3.样品的准备和加载-样品的准备:将样品溶解在适当的溶剂中,使其达到合适的浓度,并在必要时进行过滤或稀释。

-样品的加载:使用自动进样器或手动进样器,将样品加载到液相色谱柱中。

避免过量的样品装载和过高的进样速度。

确保样品溶液完全进入柱子,并记录样品加载的详细信息。

4.液相色谱柱的使用注意事项-避免干涸:始终保持柱子中的液相色谱柱湿润,避免出现干涸和损坏的情况。

在使用完毕后,必要时用合适的溶剂进行洗脱,然后用空气或氮气进行保护。

-遵循柱子的使用范围:柱子通常有推荐的温度和压力范围。

超出这些范围可能会导致柱子性能下降或甚至损坏。

-避免高浓度的盐类溶液:高浓度的盐类溶液可能对柱子产生不良影响,导致柱子的损坏或压力升高。

5.液相色谱柱的保养和储存方法-定期清洗:根据使用频率,定期清洗液相色谱柱。

使用纯溶剂进行冲洗,以去除残留的样品和杂质。

-保持柱子湿润:柱子在存储期间应保持湿润。

用合适的溶剂进行洗脱,并用盖子密封柱子的两端,以避免柱床干燥。

液相色谱柱使用注意事项

液相色谱柱使用注意事项

液相色谱柱使用注意事项在使用液相色谱柱时,需要注意以下事项以保证柱子的性能和使用寿命。

1.流动相流动相是液相色谱分离的基础,应选择与样品相容、纯度高、稳定性好的流动相。

在使用前,应进行过滤和脱气处理,以避免对柱子造成损害。

2.柱子选择根据不同的样品和分离要求,应选择合适的液相色谱柱。

选择时需要考虑柱子的类型、粒径、孔径、填料等参数。

对于复杂的样品,建议使用具有更强分离能力的反相柱。

3.柱子清洁在使用前,应对液相色谱柱进行清洁,以去除柱子内部的杂质和污染物。

清洁时应使用温和的清洁剂,如甲醇、乙醇等,并避免使用强烈的清洁剂或酸碱溶液。

4.操作温度液相色谱柱应在规定的操作温度下使用。

过高的温度可能导致柱子的性能下降或损坏,而过低的温度则可能导致样品分离效果不佳。

在使用过程中,应密切关注柱温的变化。

5.压力变化压力变化是液相色谱分离的关键参数之一。

在使用过程中,应密切关注压力的变化情况。

若出现压力波动或异常升高,应立即采取措施解决问题,以免对柱子造成损害。

6.流动相流速流动相流速是影响液相色谱分离效果的重要因素之一。

应根据分离要求和样品性质选择合适的流速。

过快的流速可能导致柱子的性能下降或损坏,而过慢的流速则可能导致样品分离效果不佳。

7.样品处理在进样前,应对样品进行处理,以去除杂质和干扰物质。

处理方法包括样品萃取、净化、浓缩等。

处理时应避免对样品造成污染或损失。

8.柱子储存在使用完毕后,应对液相色谱柱进行妥善的储存。

储存时应避免阳光直射、高温、潮湿等不利环境条件。

同时,应定期对柱子进行检查和维护,以保证其性能和使用寿命。

月旭液相色谱柱安全操作及保养规程

月旭液相色谱柱安全操作及保养规程

月旭液相色谱柱安全操作及保养规程月旭液相色谱柱是一种常见的实验室仪器,它广泛应用于药物分析、生命科学和环境保护等领域。

在使用月旭液相色谱柱时,正确的操作和保养至关重要,这不仅可以提高实验结果的准确性和可靠性,还可以延长液相色谱柱的使用寿命。

本文将介绍月旭液相色谱柱的安全操作和保养规程。

安全操作1. 压力限制液相色谱柱在操作时会产生高压,因此必须确保操作过程中压力始终处于安全范围内。

不同型号的液相色谱柱压力限制不同,应严格按照仪器使用说明书上的指示进行操作,不得超过压力限制值。

此外,当压力突然升高时,应立即停止操作并进行检查。

2. 操作前检查在操作前,应检查柱子和接头的密封性。

如果柱子和接头的密封不良,将导致流体泄漏和柱子的破裂,从而对操作人员和仪器造成伤害。

因此,应定期检查柱子和接头的密封性,并在发现问题时及时更换。

3. 操作时的防护措施在使用月旭液相色谱柱时,应遵守实验室的安全操作规程。

操作人员应正确穿戴实验室安全防护用品,如实验室大衣、护目镜、手套等。

4. 操作结束后的处理操作结束后,应按照实验室的废物处理规程处理废液和废料。

同时,应关闭色谱柱,并按照操作手册上的指示进行保养。

保养规程1. 柱子储存月旭液相色谱柱应在常温下储存,并保存在干燥通风的地方。

柱子不得存放在高温和高湿的环境中。

2. 定期检查和保养在使用液相色谱柱过程中,应定期进行检查和保养。

首先,检查并清洗柱子表面,以确保表面的洁净和光滑。

其次,检查紫外可见检测器和泵的运行情况,确认设备的正常运行。

如果发现设备不正常,则应立即停止使用并进行维护。

3. 液相色谱柱的清洗清洗液相色谱柱的方法主要包括用纯水冲洗、以及使用醇、甲醛等溶液进行反向冲洗。

清洗时应避免使用强酸或强碱。

清洗后,应将色谱柱空转数小时,以便将水分和其他残留物完全清除。

4. 更换液相色谱柱液相色谱柱随着使用时间的增加和寿命的结束,应定期更换。

在更换柱子时,应按照操作手册上的指示进行操作。

高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养

高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养

高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养一、高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养1. 注意安全在进行高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养时,应注意安全,不要将手放在柱子上或柱子的内部,以免受到电击。

同时,也要注意防止外界的杂质进入柱内,避免影响柱子的性能。

2. 清洁色谱柱首先,使用湿抹布将色谱柱表面清洁干净,然后使用笔刷和溶剂将柱子内壁清洁干净。

清洁完毕后,需要将柱子放置在洁净的空气中,以便完全自然晾干。

3. 保养色谱柱在保养色谱柱时,需要注意柱子的密封,定期检查柱子的密封情况,如果发现柱子有渗漏现象,及时采取措施进行修理。

另外,还需要定期检查柱子的耐压强度,以免因耐压强度不足而造成柱子的破裂。

4. 定期更换色谱柱定期更换色谱柱是高效液相色谱仪色谱柱的保养工作之一。

色谱柱的使用寿命一般为2-3年,随着使用时间的延长,色谱柱的性能会发生变化,从而影响测试结果的准确性。

因此,需要定期更换色谱柱,以保证测试结果的可靠性。

二、色谱柱的存储1. 色谱柱应存放在干燥、无污染的环境中,避免阳光直射,以免受到湿气和污染物的侵害。

2. 色谱柱应放置在室温下,避免高温环境,以免影响色谱柱的性能。

3. 色谱柱应存放在通风良好的环境中,避免过多的湿气,以免影响色谱柱的密封性能。

4. 色谱柱应存放在有足够空间的地方,以免柱子撞击,造成损坏。

5. 色谱柱应存放在牢固的架子上,以免柱子受到重力的影响,造成损坏。

6. 色谱柱应存放在有足够防护措施的地方,以免受到杂质的污染,影响柱子的性能。

三、总结高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养是高效液相色谱仪色谱柱使用的必要措施,既要注意安全,又要注意清洁和保养,定期更换柱子,并且要认真维护存储环境,以确保高效液相色谱仪色谱柱的正常使用。

高效液相色谱仪与色谱柱使用中应注意的事项

高效液相色谱仪与色谱柱使用中应注意的事项

高效液相色谱仪与色谱柱使用中应注意的事项答案:色谱柱是高效液相色谱仪的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透粉性,延长柱子的使用寿命非常重要。

因此对高效液相色谱仪色谱柱的维护是关键。

高效液相色谱仪色谱柱是消耗品,因此尽可能地仔细使用会延长色谱柱的寿命。

1、色谱柱使用前注意事项色谱柱的储存液无特殊说明均为评价报告所示的流动相。

在使用前一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

如胺基(NH2)氰基(CN)柱均为正相条件下评价,所以如果使用条件为反相条件时,请用一中介流动相(如异丙醇)。

先置换掉柱内的储存液,然后再应用反相条件对于C18固定相采用的是甲醇-水为评价流动相,若要使用含盐浓度较高的流动相,使用前请用超纯水或甲醇含量相对较低的甲醇-水顶替掉原来的评价流动相,否则会对色谱柱造成极大的伤害,将会明显地减少色谱柱使用寿命。

2、色谱的使用方向高效液相色谱仪色谱柱标签上的箭头所示方向是评价时流动相流动的方向,使用过程相流动的方向也按此方向。

3、流动相流动相中所用的各种有机溶剂要尽可能地使用色谱,或至是分析纯试剂配流动相水Z好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

如果将所配得流动相再经过0.45或0.22m的滤膜过滤一次则更好,这一点对含盐的流动相尤为重要。

另外装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

总之,必须保证所使用的流动相和色谱系统是足够的清洁。

4、样品样品也要尽可能的清洁,同样可选用样品过滤器或样品预处理(SPE柱)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。

在用正相色谱法分析样品时,如无特殊要求,所有的溶剂和样品应严格脱水。

5、PH值以常规硅胶为基质的键合相填料高效液相色谱柱通常的PH值适用范围是2.0-10.0。

当必须要在PH值适用范围的边界(特别是在8.0≤PH≤10.0时)条件下使用高效液相色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于高效液相色谱仪色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并*置换掉原来所使用的流动相。

液相色谱柱的使用注意事项流动相和样品处理 液相色谱操作规程

液相色谱柱的使用注意事项流动相和样品处理 液相色谱操作规程

液相色谱柱的使用注意事项流动相和样品处理液相色谱操作规程液相色谱柱的使用注意事项:流动相和样品处理 1. 色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特别说明,均为评价报告所示的流动相。

在使用前,确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是液相色谱柱的使用注意事项:流动相和样品处理 1. 色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特别说明,均为评价报告所示的流动相。

在使用前,确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很简单析出,堵塞色谱柱。

2. 流动相:1)在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。

流动相确定要使用色谱级别的溶剂。

如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避开细菌产生。

2)流动相使用前需用微孔滤膜过滤,除去流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。

缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避开溶解度变化造成产生新的沉淀。

不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱,以免柱性能损坏(添加5%的有机溶剂冲洗色谱柱,同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。

还可以使色谱柱更简单平衡)。

3)流动相需脱气后使用,可避开因气泡导致的泵和检测器的工作不正常。

假如测试时使用的流动相与色谱柱保存使用的流动相有较大区分,应当使用过度分布的形式进行平衡。

避开由于流动相的蓦地变化造成柱压加添过大或流动相缓冲盐结晶造成对色谱柱和仪器系统的损坏。

正相色谱柱比反相色谱柱需要更长的平衡时间。

4)流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水*好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

假如将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。

另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应当定期清洗或更换。

5)以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0—8.0,BDSC18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0—10.0、当必需要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立刻用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。

高效液相色谱柱注意事项

高效液相色谱柱注意事项

高效液相色谱柱注意事项高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分构成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的调配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附—解吸的调配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分别成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。

高效液相色谱柱注意事项:1、柱效和保护柱拿到一根新柱时,肯定要先看其使说明,然后测柱效,定期检测柱效,保存在新色谱柱上得到的色谱图,并记录条件,定期检测仪器的谱带展宽。

若应用于在线监测,应对色谱柱供应在线的物理保护和化学保护,例如采取安装在线过滤器,自装填料保护柱和预装保护柱等。

在线过滤器的作用是防止颗粒在柱头累计,优点是基本不影响柱效,在需要高柱效的时候常用,常更换的消耗品是滤芯和垫圈保护柱的作用是防止柱子被化学污染。

缺点是多数保护柱影响色谱柱的柱效,特别是在用微柱时,常用的是普通自装填料的保护柱。

近新出的一些保护柱例如Sentry—guard保护柱,它的特点是高质量、高效填料、加添分析柱效、对脏样品载荷本领大,能延长保护柱的寿命,手可拧紧接头,安装时不需要工具,省时省,可换芯式设计,能采用各种不同的填料,重要适用于特别脏特别多而杂的样品本底,例如生化样品,环境样品和食品等,或者不想做太多的圃相萃取,不想降低柱效果等情况。

2、清洗对所做的样品要有充分的了解,用对该样品洗脱本领强的流动相清洗,对于硅胶柱,先用甲醇洗去极性杂质,然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100—20OraL依次活化,对于键和相柱,一般用甲醇一氯仿一甲醇一水依次冲洗,每种色谱柱有特定的清洗方法,肯定要看其使用说明。

3、存放存放前除掉杂质和盐,采用合适的存放溶剂,避开色谱柱床的干枯,避开机械振动,防止细菌生长,注意存放的温度。

HILIC色谱柱使用注意事项

HILIC色谱柱使用注意事项

HILIC色谱柱使用注意事项HILIC(Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography)色谱柱是一种水合作用液相色谱技术,适用于极性化合物的分离和分析。

使用HILIC色谱柱需要注意以下几个方面:1.样品准备:在使用HILIC柱之前,需要确保样品是水溶性的或能够在水溶剂中溶解。

对于非极性或溶解度低的化合物,可以选择在HILIC之前进行样品前处理,如使用极性溶剂预溶解。

2.流动相选择:HILIC色谱柱适用于极性溶剂,如甲醇、乙腈等。

常见的HILIC流动相为水-有机溶剂的混合物。

选择合适的流动相组成对于有效分离是至关重要的。

一般来说,水的含量越高,极性化合物的保留时间越长。

3.pH控制:HILIC色谱柱在分析过程中可能受到溶剂pH的影响,因此对于一些对pH敏感的化合物,需要进行pH调供更好的保留和分离效果。

4.柱温控制:HILIC柱的温度会影响保留时间和分离效果。

在使用HILIC柱的过程中,需要控制柱温,一般常见的温度范围为20-40℃。

不同样品性质和分析需求可能需要不同的柱温设置。

5.柱平衡:新购买的HILIC柱在使用前需要进行柱平衡,这可以提供更稳定的保留时间和重复性。

常见的柱平衡方法是使用几个体积的流动相进行洗脱,直到保留时间稳定。

6.注样量控制:合适的注样量可以确保信号的线性范围和峰形状的良好。

通常推荐的注样量为柱的最大负载能力的5-10倍。

如果注样量过多,可能会导致峰形变宽或峰形不对称。

7.柱清洗和保养:使用HILIC柱后,及时进行柱的清洗和保养是重要的。

一般来说,可以使用合适的洗脱剂进行柱的冲洗,以去除残留的样品和杂质。

柱的保养包括存放在干燥、封闭的环境中,避免与相干混。

总而言之,HILIC色谱柱的使用需要注意合适的样品准备、流动相选择、pH控制、柱温控制、柱平衡、注样量控制以及柱的清洗和保养。

只有在正确的操作下,才能获得准确、可靠、重复性好的分析结果。

液相色谱柱的使用注意事项及再生

液相色谱柱的使用注意事项及再生

液相色谱柱的使用注意事项及再生1、色谱柱的使用说明:(1)、色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。

在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。

(2)、流动相:流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。

另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0,BDS C18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0-10.0。

当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。

(3)、样品:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。

在用正相色谱法分析样品时,所有的溶剂和样品应严格脱水。

2、色谱柱的保存(1)、反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。

注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。

(2)、长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。

储存的温度最好是室温。

3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。

液相色谱柱的使用注意事项及再生

液相色谱柱的使用注意事项及再生

液相色谱柱的使用注意事项及再生注意事项:1.柱子的贮存:液相色谱柱在非使用状态下应尽量避免暴露在空气中,空气中的灰尘和湿气会影响柱子的性能和寿命。

因此,柱子应存放在其原始包装中,并防止受潮。

2.近似与探头:在使用之前,必须对柱子和探头进行连接和融合。

在操作中,要确保柱子和探头之间无泄漏,否则会影响分析的准确性。

3.流速控制:流速是液相色谱分析中很关键的一点。

流速过高会导致柱子产生过高的压力,甚至超过其承载能力,从而导致柱子破裂。

因此,在进行液相色谱分析时必须要控制好流速。

4.保持温度稳定:液相色谱柱对温度敏感,温度的变化会影响分离效果。

因此,在液相色谱分析中必须保持柱子的温度稳定。

5.避免样品堵塞:柱子中的微孔会很容易受到样品的堵塞,导致柱子无法正常使用。

因此,必须确保样品中无固体杂质,并且在注射之前先过滤样品,以避免样品堵塞柱子。

柱子再生方法:1.水洗法:将柱子安装在逆相液相色谱系统中,用纯水进行洗脱,如果必要可以加入少量的乙酸、甲酸或其他有机溶剂进行洗脱。

该方法适用于非极性化合物的柱子。

2.有机溶剂洗脱法:将柱子连同柱底栓安装在逆相液相色谱系统中,用纯有机溶剂或者含有有机溶剂的溶液进行洗脱。

该方法适用于极性化合物的柱子。

3.极性液洗法:将柱子置于极性液相溶剂中,如醇类、酸类或含有酸性成分的有机溶剂中进行洗脱。

该方法适用于阴离子柱等需要去除离子物质的柱子。

4.特殊洗脱法:对于一些具有独特功能的柱子,如固体相萃取柱、色譜柱等,可以根据其特殊性质采用相应的洗脱方法。

除了以上的再生方法,还有一些更加复杂的再生方法,如使用酸碱溶液、有机溶剂进行再生等。

用户在使用液相色谱柱时,应根据柱子的具体情况及实际分析样品的特性选择合适的再生方法。

总之,液相色谱柱的正确使用和再生对于高效可靠地进行液相色谱分析具有重要影响。

使用者应严格按照操作规范进行操作,并根据不同柱子的特性进行合适的柱子再生方法,以延长柱子的使用寿命和保证分析的准确性。

色谱柱的安装,设置,老化和维护

色谱柱的安装,设置,老化和维护

色谱柱的安装,设置,老化和维护液相色谱柱的使用方法:1、色谱柱的使用说明:(1)、色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。

在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。

(2)、流动相:流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。

另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0,BDS C18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0-10.0。

当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。

(3)、样品:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。

在用正相色谱法分析样品时,所有的溶剂和样品应严格脱水。

2、色谱柱的保存(1)、反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。

注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。

(2)、长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。

储存的温度最好是室温。

3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。

简述色谱柱的使用注意事项

简述色谱柱的使用注意事项

简述色谱柱的使用注意事项色谱柱是色谱实验中最重要的部分,它的质量和正确使用对实验结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用。

下面是色谱柱使用的一些注意事项:1.储存条件:色谱柱应储存在干燥、阴凉和避光的地方,远离酸、碱、有机溶剂和氧化剂。

避免温度过高或过低,以防止柱体损坏或性能下降。

柱体不能长时间处于干燥状态,以免介质中的水分流失。

在存放时,柱体要由塑料袋或者塞子封口,以防止灰尘和杂质进入。

2.洗脱剂的选择:根据实验需要和待分离物质的性质,选择合适的洗脱剂。

洗脱剂的选择应考虑到洗脱剂的溶解力、缩短洗脱时间的能力、可用于检测的波长等因素。

根据实验需要,可以选择无机盐溶液、有机溶剂、酸或碱溶液等作为洗脱剂。

3.柱温的控制:对于一些需要控制温度的色谱实验,应使用恒温槽或恒温箱来控制柱温。

柱温的控制需要考虑柱子的温度稳定性和色谱介质的特性。

4.流速的控制:流速是影响色谱分离效果的重要因素之一、流速过快可能导致分离不彻底,流速过慢则会影响分析时间。

因此,根据待测物质的性质和实验要求,要选择合适的流速进行实验。

5.工作压力的控制:在液相色谱实验中,应注意控制适当的工作压力。

过高的工作压力可能导致填充物受损,严重时甚至会破损柱壁。

过低的工作压力会导致流速减慢,从而影响实验结果。

6.保护色谱柱:为了延长色谱柱的使用寿命和保持其分离能力,应在样品进样前使用预柱保护色谱柱。

预柱是一种具有相同或相似填充物的小柱,在进样前,样品会先流过预柱,可以去除样品中的杂质和保护色谱柱。

7.避免混合使用:为了保证实验结果的准确性,避免不同种类的色谱柱混合使用。

不同种类的色谱柱填充物对待测物质的选择性和分离效果可能存在差异,混用可能导致分离不完全或无法分离。

8.柱后的处理:实验结束后,应及时清洗色谱柱,防止残留物堵塞填充物。

柱后处理的方法可以根据填充物的不同,选择适当的处理液进行后处理。

9.柱的流向:根据色谱柱的设计和厂家提供的说明,正确安装柱子的流向。

常用液相色谱柱使用与维护保养

常用液相色谱柱使用与维护保养

常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是一种重要的分析仪器,在化学、药物研发、环境科学等领域广泛应用。

正确的使用和维护保养可以延长色谱柱的寿命,提高色谱分离的效果。

一、使用液相色谱柱的注意事项1.选择合适的柱使用液相色谱柱前,需要根据分析目标和样品性质选择适合的柱型和填料。

常用的柱型有反相柱、离子交换柱、正相柱等。

不同的柱具有不同的分离机理和性能,选择合适的柱可以提高分离效果。

2.准备好适当的溶剂系统液相色谱的溶剂系统通常由溶剂A和溶剂B构成。

在使用液相色谱柱之前,需要准备好适当的溶剂系统,并将溶剂通过泵送到色谱柱中。

溶剂的选择应根据柱和样品性质来确定,通常要尽量避免对柱产生腐蚀或损害的溶剂。

3.校准柱的流速在使用液相色谱柱之前,需要对柱进行流速校准。

根据柱的规格和品牌,确定适当的流速范围。

过高或过低的流速都会影响分离效果和柱的寿命。

通常,可以通过控制泵的流速和封堵时间来调整柱的流速。

4.准备样品在使用液相色谱柱进行分析之前,需要准备好样品。

样品可以是纯净物质,也可以是复杂的混合物。

样品的准备和预处理会影响分离效果和柱的寿命。

合适的样品准备方法包括稀释、过滤、目标成分的预处理等。

5.正确设置色谱仪的条件在使用液相色谱柱之前,需要根据柱的特性和样品的性质,正确设置色谱仪的条件。

包括流速、柱温、检测器、梯度和等时并行等。

设置合适的条件可以提高柱的寿命和分离效果。

二、液相色谱柱维护保养1.定期保养色谱柱为了保证液相色谱柱的寿命和分离效果,需要定期进行柱的保养。

在每次使用完柱后,需要冲洗柱,将样品和残留物彻底清除。

冲洗柱时可以使用适当的溶剂或清洗液,根据需要选择正向或反向洗涤。

一般推荐用高纯度的有机溶剂冲洗柱。

2.避免柱的过载和超压过载和超压是液相色谱柱常见的问题。

过高的样品浓度或过高的流速都可能导致浓度过载,产生色谱峰畸变或柱堵塞。

超压则会导致柱的损坏或泄漏。

需要根据柱的规格和样品的性质,控制样品浓度和流速,避免过载和超压。

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色谱柱使用注意事项
一、色谱柱有方向:
柱子标签上箭头指示方向为,流动相溶液流动方向。

若方向
反,会影响柱效和使用寿命。

二、新柱子使用:
新柱子使用前,先要活化,具体方法:
1、把柱子接在泵上,检测器一端不接(注意)。

废液直接从
柱子另一端流出。

2、用纯甲醇溶液,以1ml/min,流速冲洗20—30分钟,即
可。

三、日常保养及维护(柱子连接色谱系统)
要根据不同的情况对色谱柱进行保养:
①反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,
实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30min,洗掉色谱柱中的
盐,再用色谱甲醇冲洗30min。

注意:不能用纯水冲洗柱子,
应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。

②长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的
溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,并将购买
新色谱柱时附送的堵头堵上。

储存温度: 室温。

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