液相色谱串联质谱的小知识
液相色谱-质谱联用技术简介
中国科学院烟台海岸带研究所分析测试中心刘莺主要内容液相色谱-质谱联用技术简介 我们的仪器测试准备阶段的注意事项结果的解读第一章液相色谱-质谱联用技术简介 质谱基本原理质谱分析法是通过对被测样品离子质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。
电离装置把样品电离为离子质量分析器把不同质荷比的离子分开检测器检测色谱-质谱联用技术体现了色谱和质谱优势的互补,它将色谱对复杂样品的高分离能力与质谱的高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来,实现对复杂混合物更准确的定量和定性分析。
气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)以液相色谱作为分离系统,质谱为检测系统。
样品在质谱部分和流动相分离,被离子化后,经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开,经检测器得到质谱图。
液相色谱-质谱联用仪LC-MS, LC-ITMS, LC-TOF, LC-QqQ, LC-Q-TOF,LC-IT-TOF, LC-Q-IT等适用于不挥发性化合物、极性化合物、热不稳定化合物、大分子量化合物(包括蛋白、多肽、多聚物等)的分析测定液相色谱-质谱联用仪LC离子源离子传输系统质量分析器检测器数据系统真空系统大气与质谱联用的液相色谱液相色谱柱●规格:50×2.1mm、100×2.1mm、150×2.1mm、150×4.6mm,250×4.6mm●填料粒径:亚二微米(1.7-1.9μm)、2.5 μm 、3μm、3.5μm、5μm●填料类型:C18、C8、-NH2、-CN等与质谱联用的液相色谱流动相◆溶剂◆推荐使用水、甲醇、乙腈、异丙醇◆不能使用四氢呋喃、二氯甲烷、正己烷、氯仿◆酸◆不能使用无机酸(可能会导致腐蚀)◆推荐使用醋酸和甲酸◆三氟乙酸(TFA)会产生离子抑制作用与质谱联用的液相色谱流动相◆碱◆不要使用碱金属碱(可能会导致腐蚀)◆推荐使用氨水◆三乙胺/三甲胺(TEA/TMA)有助于形成负离子◆表面活性剂不能使用◆清洁剂和其他表面活性剂会产生离子抑制◆缓冲盐◆避免使用非挥发性盐,特别是碱金属磷酸盐、硼酸盐、柠檬酸盐等。
液相色谱串联质谱
液相色谱串联质谱液相色谱串联质谱技术:一、什么是液相色谱串联质谱?液相色谱串联质谱(Liquid Chromatography/Mass Spectrometry,LC/MS)是一种由液相色谱和质谱相结合的分析检测技术,它的原理是将待测样品通过液相色谱分离,应用质谱法对分离出的测试物质进行结构分析,来实现对低级别有机物、中级别有机物、高分子量物质及混合物的快速分离和精确定性/定量,所以它具有分离效率高、多重检测能力强以及定量准确度高等优点。
二、液相色谱串联质谱的原理液相色谱串联质谱(LC/MS)原理是利用液相色谱实现分析样品的分离,然后利用质谱对其进行结构分析的技术,该技术将实验室中广泛使用的液相色谱(LC)与质谱(MS)有机地结合在一起,继而利用潜在的质谱的优势解决了液相色谱的空分析问题。
液相色谱串联质谱技术可以检测出有机物,无机物,高分子量物质及混合物,同时可以得到分子结构和定量分析,其具有高分离系数、多重检测能力、定量准确度和高灵敏度等特点,因此被广泛应用于环境、有机合成、制药等领域。
三、液相色谱串联质谱的优势(1)高分离系数。
液相色谱实现样品的分离,具有分离系数高、精细度高的优点,结合质谱的原理可以实现同类物质不同种类、结构不同的定性分析。
(2)多重检测能力。
利用液相色谱串联质谱(LC/MS),可以在同一分析样品中检测多种有机物种类,同时可以给出其结构,实现定性分析,而且可以安全、准确快速的实现检测。
(3)定量准确度高(比如灵敏度高)。
这也是使用液相色谱串联质谱的一大优势,它可以检测出极低浓度的物质,有助于完成定量分析,可以有效的探测样品中的低浓度物质,从而提高检出率,实现检出极低浓度的有机物。
四、液相色谱串联质谱的检测范围液相色谱串联质谱(LC/MS)被广泛应用于环境、有机合成分析、化学分析、制药及检测等多种领域,这两个技术的综合应用可以检测出中级元素、有机及无机化合物,特别是大分子量有机物和混合物,还可以实现定性和定量分析,对有机物实现精细分析、检测和结构鉴定等,有着广阔的应用前景。
液相色谱——串联质谱法
液相色谱——串联质谱法液相色谱——串联质谱法1. 概述液相色谱——串联质谱法(LC-MS)是一种用于快速鉴定和定量分析大量小分子物质和链状有机化合物的一种惰性重排技术。
这种技术通过将液相色谱和质谱两大仪器技术的优越性能有机结合,实现了液体中微量物质的快速鉴定、分离和测定。
这套技术比单独使用液相色谱成像分析,可以提高检测限下限,解决液相色谱分离后质谱加速定性分析的问题,因而更加实用。
2. 技术原理LC-MS系统由液相色谱分离柱,检测装置,与两个机构负责操纵液相色谱组分提取等主要部件组成。
样品分离和分析步骤就是将样品溶解在适当的溶剂中,经液相色谱-质谱就可以分析出单分子组分的物化性质和表观分子量,以及细微程度的组成差别。
检测装置实现了LC-MS连续启动程序,得到样品组分的全谱图谱,获取检测信息,实现LS-MS技术的数据处理,实现样品鉴别,定量计算,同时获取实时的检测数据,保证检测的准确性和准确度。
3. 优势(1)具备高敏感性和低检出限,可以检测非常稀少的物质,提高检测的灵敏度。
(2)可以实现快速和自动化操作,大大提高测定速度。
(3)LC-MS能实现样品分离前质谱加速定性分析、消除高纯度物质混杂分离困难、采样测定对比分析等特点,从而提高检索精确度和结果准确度。
(4)结合液相色谱分离和双离子检测质谱技术,可以自动化连续运行,来自动调整参数实现高灵敏度测定和高分辨率分离。
4. 应用领域LC-MS主要用于有机物、抗生素、毒素、毒物、化合物的研究以及在生物信息学和医学方面的研究等。
当前有机物、抗生素、毒素、毒物在药物研究、毒理、环境污染检测和药物开发等领域都有广泛的应用,以及药剂学、兽医学、分子毒理学和菌类学领域的研究。
5. 结论液相色谱——串联质谱法(LC-MS)是一种结合液相色谱和质谱技术,可以用于鉴定薄分子物质和链状有机化合物的惰性重排技术。
该技术可以飞快地连续运行,自动调整参数,从而实现了高灵敏度测定和高分辨率分离,同时也可以检测非常稀少的物质,具有广泛的应用领域。
液相色谱质谱联用的原理
液相色谱质谱联用的原理液相色谱质谱联用(LC-MS)是一种结合了液相色谱(LC)和质谱(MS)两种分析技术的技术手段。
它能够对化合物进行separation和identification,具有高灵敏度、高选择性、高分辨率等优点。
液相色谱质谱联用的原理主要包括样品制备、样品注射、液相色谱分离、质谱分析和结果解释等几个步骤。
首先,在液相色谱质谱联用分析中,样品需要经过适当的制备处理。
这种样品制备方法通常有固相萃取、液液萃取、固相微萃取等。
它的目的是将样品中的有机物净化、富集,以便提高LC-MS的灵敏度和准确度。
接下来,经过样品制备的样品被注入到液相色谱装置中。
在液相色谱分离过程中,样品中的化合物根据它们在不同移动相中的亲和性和分配系数的差异而分离。
这种分离是根据各个组分在色谱柱中的保留时间来进行的。
然后,液相色谱分离后的化合物进入质谱进行分析。
质谱分析通常包括质谱的离子化、质量分离和质量检测三个步骤。
在质谱的离子化过程中,分离出的化合物通过加热或溅射等方法使其变为气态,然后被电子轰击、电喷雾或化学离子化等方法使其带电。
然后,离子化的化合物根据其质量/荷质比(m/z)比值被分离。
这是通过质谱仪中的一系列离子分离设备(如质量过滤器、离子荧光板等)来实现的。
这些设备通过改变电场、磁场或质量过滤器的压力等参数来选择特定质荷比的离子。
最后,被分离的离子在质谱仪的质量检测器中被检测到。
质谱检测器根据离子的质量和电荷量来测量它们的信号强度,并将其转换为光电信号电压输出。
这些信号通过电子学系统分析和处理后,可以得到离子的丰度和相对浓度等信息。
在结果解释方面,液相色谱质谱联用通常通过比对已知化合物的质谱数据库来确定待测化合物的身份。
这可以通过比较实验得到的质谱图与数据库中的已知质谱图进行比对来实现。
得到身份的确认后,可以进一步分析定量和定性等信息。
总而言之,液相色谱质谱联用技术利用液相色谱的分离能力和质谱的分析能力,在化合物分离和鉴定方面具有很高的灵敏度和选择性。
液相色谱串联四极杆质谱技术
液相色谱串联四极杆质谱技术一、概述液相色谱串联四极杆质谱技术(LC-MS/MS)是一种广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域的高效分离分析方法。
该技术结合了液相色谱的高分离能力和质谱的高灵敏度与特异性,能够同时实现复杂混合物中目标化合物的分离与鉴定。
本文将详细介绍液相色谱串联四极杆质谱技术的原理、实验流程及其在各领域的应用。
二、液相色谱串联四极杆质谱技术原理液相色谱法是一种以液体为流动相的分离分析技术,通过不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异实现分离。
四极杆质谱仪则利用射频电场对离子进行筛选,只有满足特定条件的离子才能通过四极杆并进入检测器,实现对目标化合物的选择性检测。
在液相色谱串联四极杆质谱技术中,液相色谱作为分离系统,将复杂的混合物分离成单一组分,随后进入质谱系统。
在质谱系统中,每个组分经过离子源被电离成离子,接着通过四极杆筛选器筛选出目标离子,最后由检测器检测并记录信号。
通过对不同组分的离子进行定性和定量分析,实现对复杂混合物中目标化合物的快速、准确检测。
三、液相色谱串联四极杆质谱实验流程1. 样品前处理:根据目标化合物性质和实验要求,选择适当的溶剂进行样品溶解或进行复杂样品的前处理,如萃取、浓缩等。
2. 液相色谱分离:将处理后的样品注入液相色谱系统,通过设置合适的流动相组成和梯度洗脱程序,使目标化合物与其他干扰物分离。
3. 质谱检测:经过液相色谱分离后的组分依次进入质谱系统,通过离子源被电离成离子,然后通过四极杆筛选器选出目标离子,最后由检测器检测并记录信号。
4. 结果解析:对实验数据进行处理和解析,获得目标化合物的定性结果和定量数据。
四、液相色谱串联四极杆质谱技术的应用1. 生物医药领域:在生物医药领域,液相色谱串联四极杆质谱技术广泛应用于药物代谢、药效研究、毒理学研究等方面。
通过对药物及其代谢产物的分离与鉴定,有助于深入理解药物的作用机制和代谢途径。
2. 环境监测领域:在环境监测领域,该技术用于检测水体、土壤、大气等环境样品中污染物和有害物质的含量。
液相色谱串联质谱的小知识
一、开机water 2695/micromass zq4000:开机步骤1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源,此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系,这个时间大约需要1至2分钟。
2. 等液相色谱通过自检后,进入Idle状态,依照液相色谱操作程序,依次进行操作。
(具体根据液相色谱不同型号来执行,下面以2695为例)。
a.打开脱气机(Degasser On)。
b.湿灌注(Wet Prime)。
c.Purge Injector。
d.平衡色谱柱。
3.双击桌面上的MassLynx4.0图标进入质谱软件。
4.检查机械泵的油的状态(每星期),如果发现浑浊、缺油等状况,或者已经累积运行超过3000小时,请及时更换机械泵油。
5.点击质谱调谐图标(MS T une)进入质谱调谐窗口。
6.选择菜单“Options –Pump”,这时机械泵将开始工作,同时分子涡轮泵会开始抽真空。
几分钟后,ZQ就会达到真空要求,ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。
7.点击真空状态图标,检查真空规的状态,以确认真空达到要求。
8. 确认氮气气源输出已经打开,气体输出压力为90 psi。
9.设置源温度(Source T emp)到目标温度。
关机1.点击质谱调谐图标进入调谐窗口。
2.点击Standby 让MS 进入待机状态时,这时状态灯会由绿变红,这一过程是关质谱高电压的过程。
3.停止液相色谱流速,如果还需要冲洗色谱柱,可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。
4.等脱溶剂气温度(ESI)或APCI探头温度降到常温,点击气体图标关闭氮气。
5.逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀,运行20分钟后关闭(镇气)。
a) 对于ESI源,至少每星期做一次。
b) 对于APCI源,每天做一次。
6.再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。
7.选择Option / Vent,这时质谱开始泄真空,ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁,几分钟后机械泵会停止运行,这时可以关闭质谱电源。
液相色谱串联三重四级杆质谱基础知识
数据处理系统 液相色谱
质谱
一 液质联用
液质联用仪的组成
大气 真空系统
液相色 谱
样品入 口
离子化 (离子源 )
质量分析 器
检测器
数据系 统
质谱部分
一 液质联用
离子源
最常用的离子源-电喷雾离子源(ESI)
干燥 气 四极预 杆
喷雾针装置
喷雾室
毛细 管
一 液质联用
质量分离器
兽药残留最常用的是三重串联四级杆(QqQ)
我们所做的已知化合物,并且有现成 的方法
整个质谱仪的模式图
电喷雾离子源 Q1 q2 Q1 检测器
二 质谱基本原理
质谱:称量离子质量的工具
12 units 0 m/e
二 质谱基本原理
质谱:称量离子质量的工具
12 units 12 m/e
二 质谱基本原理
质谱:称量离子质量的工具
12 units 12 m/e
选择离子流图(SIM):选取其中几个 特征离子扫描,对保留时间作图,即 得到选择离子色谱图。
三 质谱基本概念
选择离子流图(SIM):
SIM通过去除本底和其 他无关离子的干扰, 降低噪声,提高选择 性、分辨率和灵敏度, 可使复杂的TIC简化, 对特定化合物的分析 或化合物的分类十分 有用。
三 质谱基本概念
8
9
10 11 12 13 14 15 16
二 质谱基本原理
质谱:称量离子质量的工具
12 units 14 m/e
8
9
10 11 12 13 14 15 16
液相色谱-质谱联用技术及使用注意事项
流量。
高流速需进行分流
需要提高毛细管温度
第一章 LC-MS技术简 介
电喷雾电离源(ESI)
第一章 LC-MS技术简 介
电喷雾电离源(ESI)
第一章 LC-MS技术简 介
大气压化学电离源(APCI)
第一章 LC-MS技术简 介
液质联用仪的离子源
• ESI
• 离子在液态产生 • 有益于热不稳定化合物的分
ionization,APCI)
第一章 LC-MS技术简 介
液质联用仪的离子源
正离子模式:ESI(+)或APCI(+)
适合于碱性样品,可用乙酸或甲酸对样品加以酸化。样品中含有仲氨 或叔氨时可优先考虑使用正离子模式。
负离子模式:ESI(-)或APCI(-)
适合于酸性样品,可用氨水或三乙胺对样品进行碱化。样品中含有较 多的强负电性基团,如含氯、含溴和多个羟基时可尝试使用负离子模 式。
大气
第一章 LC-MS技术简 介
液质联用仪的离子源
• 离子源的作用
去溶剂 离子化 液相色谱与质谱的接口
真空过渡
去除干扰
• 大气压电离源(Atmosphere pressure ionization,API)
电喷雾电离源(Electrospray ionization,ESI) 大气压化学电离源(Atmosphere pressure chemicel
推荐使用水、甲醇、乙腈、异丙醇 不能使用四氢呋喃、二氯甲烷、正己烷、氯仿
酸
不能使用无机酸(可能会导致腐蚀) 推荐使用醋酸和甲酸
三氟乙酸(TFA)会产生离子抑制作用
串联质谱知识点总结
串联质谱知识点总结一、基本原理串联质谱(tandem mass spectrometry,简称MS/MS)是将两台质谱仪串联使用的一种质谱分析技朧。
它能够在脱去离子源产生的离子束后,利用探测器对该束进行进一步分析和加速。
在串联质谱中,两台质谱仪被设置为串行,第一台质谱仪(MS1)用于进行离子的选择、聚焦和加速,第二台质谱仪(MS2)则用于对第一台仪器所产生的离子进行进一步分析。
通过多级串联质谱技术的应用,不仅能够提高分析的灵敏度和准确性,同时也可以获得更加详尽的结果。
二、仪器构成串联质谱由离子源、质谱仪、质谱分析器和数据处理系统构成。
离子源主要用于产生样品分子的离子,质谱仪用于分离和加速这些离子,质谱分析器则用于对这些离子进行进一步的分析和检测,数据处理系统则用于对产生的离子进行数据分析和处理。
三、工作流程1. 样品预处理:样品预处理是串联质谱分析的第一步,它包括离子化、离子传输和质子化等过程。
在这一阶段,样品需要经过一系列的处理步骤,以便使之能够最终形成质质子。
通常情况下,常见的样品预处理方式包括电喷雾离子源、化学离子化和电子轰击离子化等。
2. 离子传输:样品在经过离子化后,会通过一个称为离子传输设备的设备,这个设备通常包括一个离子传输管和一个离子导引系统。
在传输过程中,样品的离子会被加速和分离,并最终被送入到质谱分析器中进行进一步的分析。
3. 质谱分析:在质谱分析阶段,样品的离子会被送入到负责进行质谱分析的质谱仪中,这台质谱仪通常包括一个离子阱和一个质谱分析器。
在这一阶段,样品的离子会被进一步分离并进行质谱分析,以获得更加准确和详尽的质谱数据。
4. 数据处理:在数据处理阶段,获得的质谱数据会被送到一个数据处理系统中进行处理和分析。
在这个系统中,获得的质谱数据会被处理并转化成可视化的结果,以便用户可以更加直观地理解和分析获得的数据。
四、数据分析数据分析是串联质谱分析的重要一环,它包括对获得的质谱数据进行处理、分析和解释等一系列步骤。
液相色谱-质谱联用技术
液相色谱-质谱联用技术液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)是一种结合了液相色谱和质谱两种技术的分析方法。
它通过液相色谱的分离能力和质谱的物质鉴定能力,可以同时获得化合物的分离和结构信息,适用于复杂样品的定性和定量分析。
液相色谱(LC)是一种基于不同化合物在液相中的分离速度差异来分离化合物的方法。
它具有高分离能力、高选择性和易于操作等特点,广泛应用于生物、制药、环境和食品等领域。
液相色谱的核心是通过固定相和流动相之间的相互作用来实现化合物的分离。
而质谱(MS)则是一种基于化合物的质量与电荷比(m/z)来确定化合物结构和组成的方法。
质谱利用化合物在质谱仪内的质荷比来生成化合物的质谱图谱,从而实现化合物的鉴定和定量分析。
LC-MS联用技术的基本原理是将液相色谱与质谱相连接,通过在液相色谱柱出口处将待分析的化合物分子引入质谱仪中进行分析。
这样一来,通过液相色谱对样品进行分离,可以避免复杂样品矩阵的干扰,并使待分析化合物逐一进入质谱仪进行离子化和探测。
质谱仪将产生的质谱信号转化为质谱图谱,进而进行化合物的鉴定和定量分析。
整个过程中,液相色谱和质谱的运行参数需要相互匹配和优化,以保证良好的分离效果和质谱信号。
LC-MS联用技术具有许多优点。
首先,它能够提供化合物的分离和结构信息,有效地应对样品复杂性的挑战。
其次,它能够对目标化合物进行快速定性和定量分析,为化合物的鉴定和生物活性评估提供支持。
此外,LC-MS联用技术还具有高灵敏度、高选择性和高分辨率的特点,可以检测并鉴定一些浓度较低的化合物,如药物代谢产物和生物标志物。
此外,LC-MS联用技术还适用于多种化合物类别的分析,如有机物、无机物、生物大分子和药物等。
在实际应用中,LC-MS联用技术被广泛用于药物研究和开发、环境监测、食品安全和生物科学等领域。
例如,在药物研究中,LC-MS联用技术可以用于药物的代谢研究、药物动力学研究、药物质量控制和药物残留分析等。
液相色谱串联质谱的小知识知识讲解
液相色谱串联质谱的小知识一、开机water 2695/micromass zq4000:开机步骤1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源,此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系,这个时间大约需要1至2分钟。
2. 等液相色谱通过自检后,进入Idle状态,依照液相色谱操作程序,依次进行操作。
(具体根据液相色谱不同型号来执行,下面以2695为例)。
a.打开脱气机 (Degasser On)。
b.湿灌注(Wet Prime)。
c.Purge Injector。
d.平衡色谱柱。
3.双击桌面上的 MassLynx4.0图标进入质谱软件。
4.检查机械泵的油的状态(每星期),如果发现浑浊、缺油等状况,或者已经累积运行超过3000小时,请及时更换机械泵油。
5.点击质谱调谐图标(MS Tune)进入质谱调谐窗口。
6.选择菜单“Options –Pump”,这时机械泵将开始工作,同时分子涡轮泵会开始抽真空。
几分钟后,ZQ就会达到真空要求,ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。
7.点击真空状态图标,检查真空规的状态,以确认真空达到要求。
8. 确认氮气气源输出已经打开,气体输出压力为90 psi。
9.设置源温度(Source Temp)到目标温度。
关机1.点击质谱调谐图标进入调谐窗口。
2.点击Standby 让MS 进入待机状态时,这时状态灯会由绿变红,这一过程是关质谱高电压的过程。
3.停止液相色谱流速,如果还需要冲洗色谱柱,可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。
4.等脱溶剂气温度(ESI)或APCI探头温度降到常温,点击气体图标关闭氮气。
5.逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀,运行20分钟后关闭(镇气)。
a) 对于ESI源,至少每星期做一次。
b) 对于APCI源,每天做一次。
6.再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。
7.选择Option / Vent,这时质谱开始泄真空,ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁,几分钟后机械泵会停止运行,这时可以关闭质谱电源。
液相色谱质谱联用仪的工作原理及主要应用途径
液相色谱质谱联用仪的工作原理及重要应用途径液相色谱质谱联用仪(LC—MS)是一种结合了液相色谱(LC)和质谱(MS)两种分析技术的仪器。
它可以实现对多而杂样品的高效分别和精准检测,广泛应用于药物研发、环境监测、食品安全等领域。
液相色谱质谱联用仪的工作原理基于两个重要步骤:样品的分别和质谱分析。
1.液相色谱分别:样品在液相色谱柱中进行分别,依据各组分在固定相上的亲疏水性、极性差异等性质,通过掌控流动相的构成、流速等参数,使各组分依次在柱上分别出来。
2.质谱分析:溶出的化合物进入质谱部分,通过电离源产生带电离子,然后通过质谱仪的离子光学系统进行质量分析。
常见的离子化方式包含电喷雾离子源(ESI)和大气压化学电离源(APCI),质谱分析可以供给化合物的分子质量、结构信息和相对丰度等数据。
LC—MS联用仪在科学讨论和工业应用中有着广泛的应用。
1.药物研发:LC—MS联用仪可以用于药物的新药研发、代谢产物分析、药代动力学讨论等。
通过对多而杂的药物样品进行高效分别和精准检测,可以确定药物的构成、结构和代谢途径,为药物的设计和优化供给紧要信息。
2.环境监测:LC—MS联用仪在环境监测领域起侧紧要作用。
例如,可以用于水质、土壤和空气中有机污染物的检测和分析,如农药残留、有机物污染等。
通过对环境样品进行分别和质谱分析,可以快速、精准地确定污染物的种类和浓度,为环境保护和整治供给依据。
3.食品安全:LC—MS联用仪在食品安全领域也具有紧要应用价值。
它可以用于检测食品中的农药残留、毒素、添加剂等有害物质。
通过分别和质谱分析,可以精准判定食品中的化合物是否合规,并确定其含量。
这对于确保食品安全、追溯食品来源具有紧要意义。
4.分子生物学讨论:LC—MS联用仪在生物医学和分子生物学讨论中也有广泛应用。
例如,可以用于蛋白质组学讨论,通过对多而杂蛋白样品的分别和质谱分析,确定蛋白质的氨基酸序列、修饰情况等;还可以用于代谢组学讨论,探究生物体内代谢产物的种类和变更。
超高效液相色谱串联三重四级杆质谱
超高效液相色谱串联三重四级杆质谱超高效液相色谱串联三重四级杆质谱技术:有效解析复杂样品中的分子特征,极大地提高了样品分析的效率和精准度。
超高效液相色谱串联三重四级杆质谱(HPLC-MS/MS-MS/MS)是一种新的分析方法,它被用来精确地测量大量复杂样品中的有机和无机物质。
在这种方法中,液相色谱与质谱技术有效地结合在一起,可以提供准确、快速、可靠的分析结果。
一、超高效液相色谱串联三重四级杆质谱(HPLC-MS/MS-MS/MS)工作原理超高效液相色谱串联三重四级杆质谱(HPLC-MS/MS-MS/MS)是一种多级前后级质谱分析技术,具有“三重四级”的结构:第一级是液相色谱分离(LC),第二级是首次离子化产生的离子(MS1),第三级是针对特定物质的再离子化产生的离子(MS/MS),第四级则是用于确定结构特征的三重再离子化(MS/MS-MS/MS)。
1、液相色谱分离液相色谱(LC)分离的首先是样品中的考虑了表面张力和曲折射率的溶剂和分子组成环境,或者采用纯化分子结构或小分子,如HPLC等技术进行色谱分离。
流动相包括酸性、碱性、乙腈、石油醚等物质,其中乙腈可以帮助改进溶解度。
2、首次离子化产生的离子(MS1)首次离子化产生的离子也称为首次质谱,是指在由液相色谱(LC)分离出的个体离子流动通过��仪密封的质谱头部时,每个个体离子的电离结果的分子质量测量。
3、针对特定物质的再离子化产生的离子(MS/MS)在首次离子化产生的离子(MS1)中,我们可以针对特定成分进行高灵敏度再离子化,用于了解样品中特定成分的更多信息,以及它们的结构、活性和功能。
4、三重再离子化(MS/MS-MS/MS)三重再离子化(MS/MS-MS/MS)是一种复杂的质谱分析方法,它在反应和检测后离子,体现了质谱分析的高灵敏度和高精确度,可以解析大量的复杂多重结构的有机物的组合,从而达到全面而精确的分析,从而能够准确深入地分离,定性和定量样品中的特定成分。
液相色谱质谱联用的原理及应用
液相色谱质谱联用的原理及应用液相色谱质谱联用(LC-MS)是一种结合液相色谱(LC)和质谱(MS)技术的分析方法。
它利用液相色谱将复杂的混合物分离成个别的成分,然后使用质谱进行分析和鉴定。
LC-MS可以同时提供分离和鉴定的信息,具有高灵敏度、高选择性、高分辨率和广泛的应用领域。
LC-MS联用的原理是将液相色谱前端的洗脱液(溶液)经过柱前分离和富集后,进入质谱仪进行质谱分析。
首先,液相色谱通过柱前分离,将混合物中的不同成分分离开来。
分离过程以物理、化学或生物学特性差异为基础,例如分子大小、极性、电荷、亲合性和结构等。
然后,分离后的化合物进入质谱仪进行鉴定和定量分析。
质谱通过提供化合物的质量-荷质比(m/z)来确定其分子质量,并通过质谱图谱进行分析和鉴定。
LC-MS联用广泛应用于药物分析、环境分析、食品检测、生化分析、病理学研究等领域。
以下是一些常见的应用:1.药物代谢和药物动力学研究:LC-MS联用用于研究药物在体内的代谢途径、药代动力学和生物利用度。
它可以帮助科研人员理解药物的药效和安全性。
2.生物大分子分析:LC-MS联用可用于分析蛋白质、多肽和核酸等生物大分子。
通过质谱提供的分子质量信息,可以进行蛋白质识别、多肽结构鉴定和核酸序列分析等研究。
3.环境监测:LC-MS联用可应用于环境样品的分析和监测。
例如,它可以用于检测水中的有机污染物、土壤中的农药残留和空气中的挥发性有机物。
4.食品安全和质量控制:LC-MS联用可用于食品中残留农药、添加剂和毒素的检测。
它可以提供高灵敏度和高选择性,对食品中微量有害物质的检测非常有用。
5.临床分析:LC-MS联用在临床分析中广泛应用于药物浓度测定、代谢物鉴定和生化标志物测定等方面。
它可以提供快速、准确和灵敏的结果,有助于临床医生做出诊断和治疗决策。
总之,LC-MS联用是一种强大的分析技术,可以在分离和鉴定方面提供详细的信息。
它在各个领域的应用不断扩大,为科学研究和工业生产提供了有力的支持。
液相色谱串联质谱原理
液相色谱串联质谱原理液相色谱串联质谱(LC-MS)是一种常用的分析技术,它将液相色谱和质谱联用,能够对复杂混合物中的化合物进行高效、灵敏的分析和鉴定。
液相色谱是一种在液相中进行分离的技术,而质谱则是一种通过分析化合物的质荷比来鉴定其结构和组成的技术。
液相色谱串联质谱将这两种技术结合起来,可以充分发挥它们各自的优势,提高分析的准确性和灵敏度。
首先,液相色谱的原理是基于化合物在不同固定相上的分配系数不同而实现分离的。
在液相色谱中,样品首先被注入到流动相中,然后通过固定相的柱子,不同化合物在固定相上的分配系数不同,从而实现了它们的分离。
而质谱则是一种通过分析化合物的质荷比来鉴定其结构和组成的技术。
质谱通过将化合物转化为离子,并对这些离子进行加速、分离和检测,从而得到化合物的质荷比,进而鉴定其结构和组成。
液相色谱串联质谱的原理是将液相色谱和质谱联用,首先通过液相色谱将复杂混合物中的化合物分离出来,然后再通过质谱对这些化合物进行分析和鉴定。
这种联用技术能够充分发挥液相色谱和质谱各自的优势,提高分析的准确性和灵敏度。
在液相色谱串联质谱中,样品首先被注入到流动相中,然后通过固定相的柱子,不同化合物在固定相上的分配系数不同,从而实现了它们的分离。
分离后的化合物进入质谱进行分析和鉴定,质谱通过将化合物转化为离子,并对这些离子进行加速、分离和检测,从而得到化合物的质荷比,进而鉴定其结构和组成。
总的来说,液相色谱串联质谱原理是将液相色谱和质谱联用,充分发挥它们各自的优势,提高分析的准确性和灵敏度。
液相色谱通过分离样品中的化合物,而质谱通过分析和鉴定这些化合物。
两者结合起来,可以对复杂混合物中的化合物进行高效、灵敏的分析和鉴定。
这种技术在生物、药物、环境等领域有着广泛的应用,为科学研究和工业生产提供了有力的分析手段。
高效液相色谱-串联质谱法
高效液相色谱-串联质谱法高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)是一种现代化分析技术。
它结合了高效液相色谱(HPLC)和串联质谱(MS/MS)两种分析方法,能够快速、准确、灵敏地分析复杂的混合样品中的多种化合物。
HPLC-MS/MS技术的基本原理是将样品通过高效液相色谱进行分离,然后以极高的分辨率将分离后的化合物导入串联质谱分析仪中进行质谱检测和分析。
HPLC部分能够通过改变流速、温度、化合物间隔、载气、反应物、固相分离等方法来分离样品中的成分。
MS/MS 部分则能够通过改变离子源、离子传输、离子选择和离子检测等方式检测化合物。
具体来说,HPLC-MS/MS技术的实现过程如下:需要准备一定量的样品。
样品通常是一种混合物,需要进行分离和净化。
这可以通过一系列的化学方法和生物技术实现。
将样品注入到高效液相色谱仪中进行分离。
高效液相色谱仪通过改变环境条件可以分离出复杂混合物中的单个分量,比如改变洗脱剂的浓度、PH值、离子强度来调整样品中化合物的排列顺序。
高效液相色谱仪具有高速分离和高效洗脱的特点,具有处理大量和复杂样品的能力。
接着,通过HPLC输出的流缓和制备离子源,离子源生成的离子对化合物分子进行离子化。
这个过程利用化合物分子上的R基或者H+来形成游离气态的化合物离子。
然后,将产生的离子通过串接质谱进行分析。
在离子进入串联质谱仪的离子源之前,需要将它们选择性的分离为固定质量和电荷比的离子,这可以通过一系列的电子和电场进行控制来实现。
所得到的离子被送至陷入式离子阱,通过对离子的激发和断裂等过程,形成包含多种离子片段的离子质谱图谱。
这些离子片段遵循一定的质量电荷比的规律,可以通过特征峰和离子质量比等独特的质谱性质来鉴别。
将这些片段的数据输入到质谱数据库中,与已知化合物的质谱数据进行比对。
这样,就能够得到混合物中的每个化合物的特定质谱图谱,从而通过质量分析进行结构确认和鉴定。
HPLC-MS/MS技术的优点是明显的,该技术具有高效和灵敏的特点,能够分析非常低的浓度样品成分。
液相色谱-质谱联用技术及使用注意事项
m/z 271
66.71
69.88 NL: 8.56E5 TNILC: 5F.:6+4Ec 6ESI Full pTrIC27F1: .+00c0ESI Full [p1r0208.070.000-10000.000] [M10S0.000-1000.000] 1M11S229GZY-LJJ3-4 111229GZY-LJJ3-4
– 四极杆分析器(Quadrupole)
灵敏度
– 离子阱分析器(Ion trap)
– 扇形磁分析器
在全扫描模式下仍然具有较高灵
– 飞行时间分析器(TOF)
敏度;可实现多级质谱(MSn)的
– 傅里叶离子回旋共振变换分析器
功能
单级质谱和串联质谱
第一章 LC-MS技术简 介
单级质谱:LC-MS, LC-TOF 串联质谱
检测器检测
色谱-质谱联用技术
第一章 LC-MS技术简 介
体现了色谱和质谱优势的互补,它将色谱对复杂样品的高分离 能力与质谱的高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构 信息的优点结合起来,实现对复杂混合物更准确的定量和定性分析。
• 气相色谱-质谱联用技术(GC-MS) • 液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)
200
368.94 400
653.08
993.61
结构。
750.50
975.69
1179.86 1293.87 1499.66 1650.79 1840.49
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
2000
m /z
质谱扫描类型
第一章 LC-MS技术简 介
RT: 0.00 - 50.00 SM: 7B 100
液相色谱质谱联用的原理
多电荷:APCI源不能生成一系列多电荷离子
质量分析器
◆ 质量分析器是质谱仪旳关键, 质量分析器旳作用 是将离子源产生旳离子按m/z顺序分开并排列。
◆ 不同类型旳质量分析器构成不同类型旳质谱仪。
13
单双聚焦质谱仪体积大; 色谱-质谱联用仪器旳发展及仪器小型化(台式)需要 体积小旳质量分析器:
四极杆质量分析器 飞行时间质量分析器 离子阱质量分析器
体积小,操作简朴; 辨别率中档;
1 4
四极杆质量分析器
Electron Beam Sample in
Ion Beam
A
C
+
B
四极杆质谱构造简朴,价廉,体积小,易操作,扫描速
1 7
离子阱质量分析器
特定m/z离子在阱内一 定轨道上稳定旋转,变化 端电极电压,不同m/z离子 飞出阱到达检测器;
1 8
检测系统
质量分析器分离并加以聚焦旳离子束, 按m/z旳大小依次经过狭缝,到达搜集器, 经接受放大后被统计。
1 9
质谱仪旳检测主要使用电子倍增器,也有旳使用光 电倍增管。由倍增器出来旳电信号被送入计算机储存, 这些信号经计算机处理后能够得到色谱图,质谱图及其 他多种信息。
正离子模式:适合于碱性样品,可用乙酸或甲 酸对样品加以酸化。样品中具有仲氨或叔氨时 可优先考虑使用正离子模式。
负离子模式:适合于酸性样品,可用氨水或三 乙胺对样品进行碱化。样品中具有较多旳强伏 电性基团,如含氯、含溴和多种羟基时可尝试 使用负离子模式。
3.流动相旳选择
常用旳流动相为甲醇、乙腈、水和它们不同百分 比旳混合物以及某些易挥发盐旳缓冲液,如甲酸 铵、乙酸铵等,还能够加入易挥发酸碱如甲酸、 乙酸和氨水等调整pH值。
液相色谱质谱联用原理
液相色谱质谱联用原理液相色谱质谱联用是一种分析方法,旨在将液相色谱(Liquid Chromatography, LC)和质谱(Mass Spectrometry, MS)两种技术结合起来,以增强样品的分析能力和准确性。
液相色谱质谱联用的基本原理是将液相色谱仪和质谱仪通过一根称为接口的管道连接起来。
接口的作用是将液相色谱柱出口的溶液引入质谱仪中进行分析。
液相色谱质谱联用中的关键步骤包括样品的进样、分离、挥发和离子化。
首先,样品通过进样装置被引入液相色谱柱中进行分离。
液相色谱柱利用不同物质在固定相上的相互分配差异,将样品中的化合物逐个分离出来。
然后,分离后的化合物在离开液相色谱柱时会进入接口。
接口的作用是将液相色谱柱出口的溶液转化为质谱仪可以接受的气相状态。
在这个过程中,溶液中的溶剂会被挥发掉,只剩下化合物分子进入质谱仪。
接下来,挥发得到的化合物分子会被离子化。
质谱仪利用离子化源将分子转化为离子,一般常用的离子化方法有电子轰击离子化(Electron Ionization, EI)和电喷雾离子化(Electrospray Ionization, ESI)等。
最后,离子化的化合物分子会进入质谱仪中进行质谱分析。
质谱仪利用其独特的性能,根据离子的质荷比(Mass-to-Charge Ratio, m/z)进行分析,获得化合物的质谱图谱。
质谱图谱提供了化合物的分子量、结构和相对丰度等信息,对化合物的鉴定非常有帮助。
总结来说,液相色谱质谱联用的原理是将液相色谱和质谱这两种技术结合起来,通过进样、分离、挥发和离子化等步骤,最终得到化合物的质谱图谱。
这种联用技术在分析复杂样品中具有很大的优势,可以提高分析的选择性、灵敏度和准确性。
液相色谱串联质谱的小知识
一、开机water 2695/micromass zq4000:开机步骤1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源,此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系,这个时间大约需要1至2分钟。
2. 等液相色谱通过自检后,进入Idle状态,依照液相色谱操作程序,依次进行操作。
(具体根据液相色谱不同型号来执行,下面以2695为例)。
a.打开脱气机 (Degasser On)。
b.湿灌注(Wet Prime)。
c.Purge Injector。
d.平衡色谱柱。
3.双击桌面上的 MassLynx4.0图标进入质谱软件。
4.检查机械泵的油的状态(每星期),如果发现浑浊、缺油等状况,或者已经累积运行超过3000小时,请及时更换机械泵油。
5.点击质谱调谐图标(MS Tune)进入质谱调谐窗口。
6.选择菜单“Options –Pump”,这时机械泵将开始工作,同时分子涡轮泵会开始抽真空。
几分钟后,ZQ就会达到真空要求,ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。
7.点击真空状态图标,检查真空规的状态,以确认真空达到要求。
8. 确认氮气气源输出已经打开,气体输出压力为90 psi。
9.设置源温度(Source Temp)到目标温度。
关机1.点击质谱调谐图标进入调谐窗口。
2.点击Standby 让MS 进入待机状态时,这时状态灯会由绿变红,这一过程是关质谱高电压的过程。
3.停止液相色谱流速,如果还需要冲洗色谱柱,可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。
4.等脱溶剂气温度(ESI)或APCI探头温度降到常温,点击气体图标关闭氮气。
5.逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀,运行20分钟后关闭(镇气)。
a) 对于ESI源,至少每星期做一次。
b) 对于APCI源,每天做一次。
6.再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。
7.选择Option / Vent,这时质谱开始泄真空,ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁,几分钟后机械泵会停止运行,这时可以关闭质谱电源。
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一、开机water 2695/micromass zq4000:开机步骤1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源,此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系,这个时间大约需要1至2分钟。
2. 等液相色谱通过自检后,进入Idle状态,依照液相色谱操作程序,依次进行操作。
(具体根据液相色谱不同型号来执行,下面以2695为例)。
a.打开脱气机 (Degasser On)。
b.湿灌注(Wet Prime)。
c.Purge Injector。
d.平衡色谱柱。
3.双击桌面上的 MassLynx4.0图标进入质谱软件。
4.检查机械泵的油的状态(每星期),如果发现浑浊、缺油等状况,或者已经累积运行超过3000小时,请及时更换机械泵油。
5.点击质谱调谐图标(MS Tune)进入质谱调谐窗口。
6.选择菜单“Options –Pump”,这时机械泵将开始工作,同时分子涡轮泵会开始抽真空。
几分钟后,ZQ就会达到真空要求,ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。
7.点击真空状态图标,检查真空规的状态,以确认真空达到要求。
8. 确认氮气气源输出已经打开,气体输出压力为90 psi。
9.设置源温度(Source Temp)到目标温度。
关机1.点击质谱调谐图标进入调谐窗口。
2.点击Standby 让MS 进入待机状态时,这时状态灯会由绿变红,这一过程是关质谱高电压的过程。
3.停止液相色谱流速,如果还需要冲洗色谱柱,可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。
4.等脱溶剂气温度(ESI)或APCI探头温度降到常温,点击气体图标关闭氮气。
5.逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀,运行20分钟后关闭(镇气)。
a) 对于ESI源,至少每星期做一次。
b) 对于APCI源,每天做一次。
6.再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。
7.选择Option / Vent,这时质谱开始泄真空,ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁,几分钟后机械泵会停止运行,这时可以关闭质谱电源。
FINNIGEN DECA 开关机及校正流程——1开机前准备事项(1)确保质谱总电源开关(白色开关)及主板电源开关(黑色开关)处于关闭状态(O);(2)检查真空泵油液面,确保泵内油页面处于标定的上下两线之间;(3)查看离子源洁净程度,ESI源查看喷口是否有固体析出,毛细管口是否完好;APCI喷口是否有积液;(4)气体压力,打开高纯氮气钢瓶总阀,调节出口压力调至0.65MPa,打开高纯氦气钢瓶总阀,调节出口压力调至0.25Mpa;(5)检查壳气及辅助气接口连接紧固,松开液相管路与离子源的接口;(6)开启动力电源,电压稳定,正常;(7)确保室内温度在18~25度。
二找方法a、其实做方法不是很难的,先找MS的条件,然后建立MRM连上液相找液质方法就可以了,然后在优化离子源气体流量,以及温度就可以了。
b、首先,我们应该知道被测化合物的结构式,pKa,溶解度等理化性质。
1,根据化合物极性和分子量大小选择离子源,非极性强的化合物可用APCI源,非极性弱的用ESI,此外ESI可形成多电荷离子,适合检测多肽等分子量大的化合物(APCI则不行)。
2,根据化合物的酸碱性选择用正离子或负离子:一般碱性化合物用正离子,酸性或中性化合物选择负离子。
正离子条件下:流动相一般加0.01-0.1%的甲酸,负离子条件下:流动相一般加0.01-0.1%的甲酸铵。
3,离子源和正负条件确定好后即可优化化合物的质谱参数:建议先搞清楚各个参数是与流速相关还是与分子量相关,与TSQ Quantumn为例:与流速相关的参数有:Spray voltage,Sheath gas, Aux gas,Capillary temperature 等参数,如果流速在较低范围内变动,这些参数就不用优化,使用厂家的推荐值即可。
与分子量相关的参数有Tube lens offset等参数,这个一般也不建议优化。
使用校正表上的值即可。
所以这一步最关键的是找到母离子,如有加合离子建议加大Source CID试试,给一定能量,看看打碎的主要子离子。
注意:如让仪器自动找子离子也能找到,但其优化的碰撞能量一般偏高,一般需要在其基础上减去Source CID的值大小即可C、如果是简单的定性,对于锥孔电压没什么太苛刻的要求。
但是如果是要对样品进行定量,特别是低含量的,要讲究灵敏度,那就我对单个样品直接进样,分别优化毛细管电压和锥孔电压。
三质谱仪按质量分析器(或者磁场种类)可分为静态仪器和动态仪器,即稳定磁场(单聚焦及双聚焦质谱仪)和变化磁场(飞行时间和四极杆质谱仪)。
MS仪器一般由进样系统、电离源、质量分析器、真空系统和检测系统构成。
1、真空系统质谱仪中所有部分均要处高度真空的条件下(10-4-10-6Torr或mmHg), 其作用是减少离子碰撞损失。
真空度过低,将会引起:a) 大量氧会烧坏离子源灯丝;b) 引起其它分子离子反应,使质谱图复杂化;c) 干扰离子源正常调节;d) 用作加速离子的几千伏高压会引起放电。
2、进样系统对进样系统的要求:重复性、不引起真空度降低。
进样方式:a) 间歇式进样:适于气体、沸点低且易挥发的液体、中等蒸汽压固体。
如图所示注入样品(10-100g)---贮样器(0.5L-3L)---抽真空(10-2 Torr)并加热---样品蒸分子(压力陡度)---漏隙---高真空离子源。
b) 直接探针进样:高沸点液体及固体探针杆通常是一根规格为25cm6mm i.d.,末端有一装样品的黄金杯(坩埚),将探针杆通过真空闭锁系统引入样品,如图所示。
我们试验室用的是ABI 3000质谱仪,主要定量分析生物样品。
LC-MS/MS方法学开发的一般步骤是首先通过微量注射泵获得母离子和子离子以及DP CE这四个主要参数然后利用梯度程序考察流动相组成(包括有机相的比例,甲酸或缓冲盐的加入量)对质谱响应的影响。
流动相的组成确定后利用FIA优化确定其他参数,主要是气体参数和TEM IS。
一台LC/MS由以下几部分组成:HPLC、离子源接口、离子束聚焦、质量分析器、离子检测器、数据处理、化学工作站。
HPLC就不说了,先说离子源,目前比较好的离子源设计为Agilent的直角喷雾技术,好处:1。
去溶剂效果好,耐受液相高流速;2。
雾化针零电位,位置免调整,操作安全简便,重现性好;3。
离子截取面积大,灵敏度高;4。
反吹干燥氮气,有效阻挡中性分子,减少污染并保护真空;5。
大口径非加热石英毛细管,离子传输效率高,有利于高灵敏度检测;有效防止样品热降解;调谐稳定,碰撞诱导解离(CID)谱图重现性好;6。
铰链设计,不同离子源的切换,简单方便,易于操作。
下面说质量分析器:没有一种质量分析器可以适用于所有领域,目前的质量分析器有:单四极杆质谱、三级串联质谱、离子阱质谱、飞行时间质谱、四极-飞行时间质谱。
离子检测器:电子倍增管(EMT):经质量分析器分离出来的离子首先撞击高能转换打拿极发射二次粒子,正、负离子转换的二次粒子最终均为电子;随后发射的电子进入电子倍增器的弯曲形内壁,撞击管壁涂层,产生更多的二次电子;最后以电信号输出。
电子倍增管的放大倍数约为107。
光电倍增管(PMT):经质量分析器分离出来的离子首先撞击倍增管最前端的闪烁晶体发射光子,光子照射光阴极射线管而发射电子,随后发射的电子进入电子倍增管进行信号放大,最终同样以电信号输出。
微通道板(MCP):由一组圆柱形微通道管组成,每个微通道管的作用与电子倍增管类似。
当离子进入微通道管时,产生二次电子,反射通过这些微通道管时,不断产生更多的电子。
MCP的最大优点在于具有超快的时间响应。
如果将几块微通道板用适当的方法叠在一起,放大倍数将达108。
ESI是气相离子化过程,主要包括三个步骤:1、在喷雾毛细管尖端产生带电液滴;2、通过溶剂蒸发和雾滴分裂使带电液滴变小,这个过程反复进行;3、由很小的带电雾滴产生气相离子。
一般情况下,甲醇-水系统已能满足多数样品的分离要求,且流动相粘度小、价格低,是反相色谱最常用的流动相。
但Snyder则推荐采用乙腈-水系统做初始实验,因为与甲醇相比,乙腈的溶剂强度较高且粘度较小,并可满足在紫外185~205nm处检测的要求,因此,综合来看,乙腈-水系统要优于甲醇-水系统。
四液质经验我认为要维护好仪器,首先流速不能过大,液质是不能承载过大流速的;其次电压不要加到极限,尤其是正负离子转换时要适当调整;最后是做完样一定要及时冲洗和吹扫管路。
做液质时跑一针的时间最好不要超过45分钟,否则仪器会很累。
另外我认为API4000定量很准,但是打多级碎片时最好用的是离子阱,因为它能够在一次进样后同时分析多个离子,很方便,而不像四级杆一次只能进行一种离子的多级研究。
1、由于液质的流速较小(ESI一般为0.2ml/min),所以配置样品的溶剂强度不能太大,尽量小于起始比例,否则,会出现保留时间偏移等问题。
2、如果在液相上摸好的条件,注意尤其是流动相的组成要转化成合适LCMS分析的。
3、磷酸盐及其他不挥发缓冲盐在离子源会沉淀并堵塞毛细管等,要更换成可挥发的有机缓冲盐。
4、缓冲盐会导致离子抑制,因此要控制缓冲液的强度,<10mM。
5、去污剂、表面活性剂会有离子抑制现象发生,表面活性剂产生的加合物和离子簇会干扰质谱数据,因此作液质联用仪时,不要使用洗涤剂清洗玻璃器皿等容器,如果一定要用,建议超声清洗多次。
比如分析的样品必须要干净,这样既可以保护色谱柱,也可以防止污染质谱;分析了大量的生物样品后,冲洗系统时,先用高比例的水相冲洗,把源也给洗一下,然后再换用高比例的有机相,这时要把柱后管路从源上拿下来,避免柱中的杂质给冲进质谱1.前处理:样品一定要干净,不管是为了质谱还是为了保护柱子,生物样品提取的好些,如果直接沉淀,一定要注意,尽量高转速12000rpm以上,低温离心,最好离2次(保险一点),转移样品也要仔细,从中间慢慢吸,有时会有漂浮物,岛津的质谱好像做直接沉淀的源比较容易堵,Waters的好些。
2.样品浓度:质谱是灵敏度很高的仪器,进样浓度一定不能太高,1-2ug/ml已经可以啦,太高的浓度对仪器来说比较容易造成残留,而且定量也会不准啦。
3.流动相:流动相中尽量加易挥发的盐,尽量不要加表面活性剂之类的,容易离子抑制,如果遇到离子抑制,可以试试把你的样品峰往后推推或者改变提取方法,也可以试试用APCI 源。
如果你的液相是低压混合的,尽量不要跑梯度,那样很费时间,如果没办法,一针又要走很长时间的话,可以考虑切换,只测样品出峰前后的那段时间,这样可以保护质谱。
但是如果你用粗柱子,较高流速的也可以考虑跑梯度,如API4000,但要尽量减小死体积。