实验 MS培养基母液和常用试剂的配制学习资料

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实验一MS培养基的配制

实验一MS培养基的配制一、实验目的：了解MS培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程和分装方法。

二、实验材料与仪器：电子天平、量筒、烧杯、玻璃棒、组培瓶、移液器、6种母液、白沙糖、琼脂、氢氧化钠、盐酸、酸度计或pH试纸。

三、实验方法与步骤1、母液配制（1）大量元素(母液Ⅰ) (2) 微量元素(母液Ⅱ) (3) 铁盐(母液Ⅲ) (4) 有机成分(母液Ⅳ) ⅣA 和ⅣB (5) 植物生长调节物质(6－BA，NAA)以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为100倍浓缩液。

2、1 L固体MS培养基配制（1）用电子天平称出8 g琼脂粉和 30 g蔗糖放在烧杯中，加入少量的蒸馏水在微波炉中加热使之溶解。

（2）用量筒从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 ml，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB 各10ml。

（3）最后用蒸馏水定容到1 L；用 2 mol/L NaOH 或 2 mol/LHCL 溶液调节培养基的 pH 值至 5.8～6.0。

（4）用量筒量取100ml液体培养基分装在组培瓶里，再用移液器取适量的6－BA和NAA放入组培瓶里。

（5）在 1.1kg/cm2 压力（约 121℃）高压灭菌锅中灭菌 15～20 min；灭菌后，放置于室温自然冷却凝固待用。

3、实验分组本实验分五组，每组负责配制一组培养基组合：（1）MS+0.1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA（2）MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA（3）MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA（4）MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA（5）MS+3mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA4、其他需要灭菌的实验材料剪刀、镊子、蒸馏水、滤纸、培养皿、组培瓶。

四、分析1.MS母液分得更加细，一般实验室只分大量元素、微量元素、铁盐、有机成分四大类。

这里将大量元素中钙离子与硫酸根离子分开配，避免产生不溶物，将硼酸也单独列出来。

组织培养实验MS培养基及配制注意事项

一、MS培养基母液的配制注意：1．除CaCl2·2H2O单独配制外，大量元素按照使用时高10倍的数值称取，将各种化合物称量后，分别用少量水在不同的容器内充分溶解，然后在500ml烧杯中按顺序加入各溶液，加适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

A.制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

B.称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

二、培养基配制和灭菌一．养培养基配制程序(一).母液吸取量的计算配制培养基的升数母液吸取量= 母液体积（CC）×——————————母液浓缩倍数（二）各种母液按顺序编号排列A.大量元素；B.CaCl2.2H2O；C.微量元素；D.铁盐；E.有机物；F．生长素萘乙酸（NAA）：配制0.5mg/ml的NAA称取50mg ， NAA用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml；G..细胞分裂素、激动素（KT）配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT 用少量1N HCL溶解后,加蒸馏水定容至100ml。

实验1-1MS培养基母液和常用试剂的配制

根据实验需求，将其他试剂溶解于相应的溶剂中，如水、有机溶剂等。按照所需的浓度进行配制，并充分摇匀。
其他常用试剂的保存
配制好的其他试剂应保存在密封的玻璃瓶中，并放置在阴凉干燥处。避免阳光直射和高温环境，以防变质。对于一些易挥发或易氧化的试剂，应特别注意密封保存和使用。
04
实验操作流程与注意事项
03
04
配制好的培养基应尽快使用，避免长时间存放。
实验安全须知
避免直接接触培养基和化学试剂，如不慎接触，应立即用大量清水冲洗。
对于有毒有害的化学试剂，应遵循相关规定进行操作和处理，不得随意倾倒或排放。
在实验过程中，应注意防范火灾、爆炸等安全事故，遵循实验室安全规定。
05
实验结果与数据分析
03
常用试剂的配制与保存
植物生长调节剂的配制与保存
植物生长调节剂的配制
根据实验需求，将植物生长调节剂溶解于相应的溶剂中，如水、乙醇等。按照所需的浓度进行配制，并充分摇匀。
植物生长调节剂的保存
配制好的植物生长调节剂应保存在低温、避光、干燥的环境中，避免长时间暴露在空气中，以防氧化失效。
无机盐与微量元素的配制与保存
实验过程中严格控制了操作步骤和试剂质量，确保了实验结果的准确性和可靠性。
实验结果符合预期，证明了实验方案的有效性和可行性。
实验中存在的问题与改进建议
实验中存在试剂配制误差和操作不规范的问题，可能导致实
验结果的不准确。
建议加强实验操作规范性培训，提高实验人员的操作水平，确保试剂配制的准确性
熟悉实验操作流程与注意事项
实验操作流程
准备所需试剂和器材→按照配方配制母液和常用试剂→过滤除菌→分装→ 储存。

MS培养基及配制注意事项

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。
2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。．生长调节剂母液配制：
为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。
不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。激动素（KT）和6-苄基嘌呤（BA）可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸需用少量稀氨水溶解。称取50mg生长调节物质，溶解后，在100ml的容量瓶中定容，配制的母液每毫升则含有生长调节物质0.5mg，配制后一般要求在低温（0~4℃）保存，配制培养基时如每升（1000ml）需添加的生长调节剂物质为 0.5mg时，则取1ml母液即可。
2.无菌操作可按以下步骤进行：
（1）在接种3天前用甲醛熏蒸接种室，并于接种前3小时打开其内紫外线灯进行杀菌；（2）在接种前20分钟，打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯；（3）接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿拖鞋等；（4）上工作台后，用酒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。然后搽拭工作台面；（5）先用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干；（6）接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等；材料吸干后，一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切割。（如叶片切成0.5cm2的小块；茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含1-2片叶原基）在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交叉污染。

MS培养基的配制

MS 培养基的配制1、配制几种母液（1）配制MS 大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。

倍。

分别称取分别称取名称名称重量重量名称名称重量重量 NH 4NO 3 165g 82.5 KH 2PO4 17g 8.5 KNO 3 190g 95 CaCl 2·2H 2O 44g 22 MgSO 4·7H 2O37g18.5各自配成1L 1L（（500ml 500ml）的母液。

各自倒入）的母液。

各自倒入1L 1L（（500ml 500ml）试剂瓶中，存放于冰箱中。

）试剂瓶中，存放于冰箱中。

（2）配制MS 微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。

倍母液。

依次称取（注：溶好一个后，再加下一个）依次称取（注：溶好一个后，再加下一个）名称名称重量重量名称名称重量重量 KI 0.083g Na 2MoO 4·2H 2O 0.025gH 3BO 3 0.62g CuSO 4·5H 2O 0.0025g MnSO 4·H 2O 1.69g CoCl 2·6H 2O 0.0025g ZnSO 4·7H 2O0.86g配成配成1L 母液，倒入1L 试剂瓶中，存放于冰箱中。

试剂瓶中，存放于冰箱中。

注：注：CuSO CuSO 4·5H 2O 和CoCl 2·6H 2O O 由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。

可先配成调整液。

分别称取CuSO 4·5H 2O 0.05g O 0.05g，，CoCl 2·6H2O ·6H2O 0.05g 0.05g各自配成100ml 的调整液，然后取5ml 就还有0.0025g 的量。

的量。

（3）配制MS 有机母液一般配制成100倍MS 有机母液。

MS培养基的配制

一、MS培养基的配制1. 培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的10倍或100倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。

2. 按配方表配制MS培养基母液：大量元素50×，微量元素配100×，铁盐、有机成分配制成100×，母液贮存于4℃的冰箱中。

激素配成浓度为0.1mg/mL.3. 配制各种母液是，成分顺序加入，上一成分溶解后再加下一成分。

钙液和铁盐都单独配制。

生长素配制时，先用微量1MNaOH溶解，再以蒸馏水定容；细胞分裂素配制时，先用微量0.1MHCl溶解，再以蒸馏水定容。

二、MS母液配制取作表序号药品名称MS量(mg/L）扩大倍数母液量(g)定容取作量(mg/L)甲液NH4NO3KNO3MgSO4.7H20KH2PO41650190037017050×41.2547.59.254.25500ml 20钙液无水CaCl2440 100×11 500ml 20乙液MnSO4.4H2O或MnSO4. H2OZnSO4.7H2OH3BO3KI22.316.98.66.20.83100× 1.120.850.430.310.0415500ml 10铁盐Na2.EDTA.2H2OFeSO4.7H2037.227.8100× 1.861.39500ml 10有机成分盐酸吡哆醇(VB6)烟酸甘氨酸0.50.52100×0.0050.0050.02100ml 10丙液ⅠNa2MoO4.2H2O.2H2OCuSO4.5H2OCoCl2.6H2O0.250.0250.025100×0.01250.001250.00125500ml 10丙液Ⅱ肌醇100 100× 2 200ml 10丙液Ⅲ盐酸硫胺素(VB1) 0.4 50×0.02 100ml 2附注琼脂5.5-6.5g/L 蔗糖30g/LpH5.8-6.2备注：1钙液的母液量由于易沉淀所以取11g2丙液Ⅰ由于取的量太少所以先去12.5mg,溶于10mL水，再取1mL溶液稀释三、注意事项1、药品的质量问题：为了避免杂质及有害物质对组织培养的影响，必须注意药品质量，国内药品采用国际上通用标准，分为：一级，即保证试剂、优质纯试剂Guaranteed Reagent, GR级；二级，即分析纯试剂，Analytical Reagent, AR级；三级，即化学纯试剂，Chemical Pure, CP级；四级，即实验试剂，Laboratory Reagent, LR级。

MS培养基及常用试剂的配制

一、MS培养基母液的配制注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称〔或编号〕，浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐〔FeSO4·7H2O和Na22O〕作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na22O分别溶于450mlml，置于小口瓶中，贴上标签。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的〔分析纯〕。

2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

．生长调节剂母液配制：为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。

不同药品在配制时假设不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸〔NAA〕，吲哚乙酸〔IAA〕,赤霉素〔GA3〕，2，4-D等生长素和玉米素〔ZT〕可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。

冲动素〔KT〕和6-苄基嘌呤〔BA〕可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸需用少量稀氨水溶解。

称取50mg生长调节物质，溶解后，在100ml的容量瓶中定容，配制的母液每毫升那么含有生长调节物质，配制后一般要求在低温〔0~4℃〕保存，配制培养基时如每升〔1000ml〕需添加的生长调节剂物质为时，那么取1ml母液即可。

MS培养基配制方法-new

MS 培养基一、大量元素母液1：大量A母液2：大量B母液3：Fe盐注：配制顺序如下1。

称取3。

73 g Na2—EDTA•2H2O溶解于200 ml去离子水中,并置于70℃预热(A）；2. 称取2.78 g FeSO4•7H2O溶解于200 ml去离子水中（B）;3. 将B缓慢倒入A中混合，边倒边搅动,置于70 ℃水浴锅中螯合2 h；4. 冷却后定容至1 L。

二、微量元素母液4：微量三、有机物质母液5：有机（不含肌醇）℃注:配固体培养基可在调pH后加适量Agar或Phytagel；肌醇也可加入有机母液。

四、抗生素和激素母液试剂名称配制方法母液浓度Amp（氨苄青霉素) 双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Km(卡那霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Str（链霉素）双蒸水溶解,定容，过滤灭菌50 mg/ ml Cb（羧苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌250 mg/ ml 6-BA (6-苄基嘌呤) 1M NaOH或盐酸溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml NAA（萘乙酸) 1M NaOH溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml IAA 95% 乙醇溶解,双蒸水定容，过滤灭菌 1 mg/ ml五、乙酰丁香酮(Acetone—syringone，AS）称取196。

2 mg AS用10 ml DMSO溶解，母液浓度100 mM，-20℃避光保存,工作浓度100 ～200 μM六、MS溶液的混合5种母液分别依次加入到800 ml蒸馏水中,混匀后加入肌醇、蔗糖和能高压灭菌的激素（6-BA和NAA）,定溶至1000 ml，用1M NaOH调pH至5.8。

最后加Phytagel （Sigma)4.4g或Agar 10g。

灭菌完后，在培养基凝固前加入AS或抗生素及不能高压灭菌的激素(IAA）.。

母液的配制实训报告

一、实验目的1. 掌握母液配制的基本原理和操作流程。

2. 熟悉MS培养基母液、微量元素母液等不同类型母液的配制方法。

3. 了解母液在植物组织培养中的重要作用。

4. 培养实验操作技能和严谨的科学态度。

二、实验原理母液是植物组织培养中常用的一种浓缩溶液，将培养基中的各种成分按照一定比例配制成高浓度的储备液。

在配制培养基时，只需按比例稀释母液即可，这样可以简化操作、减少误差，提高实验效率。

三、实验材料与仪器1. 材料：MS培养基各成分试剂、植物生长调节剂（如2，4-D、6-BA、IAA、NAA 等）、洗涤剂、蒸馏水等。

2. 仪器：电子天平、药匙、玻璃棒、称量纸、吸水纸、滴管、洗瓶、标签纸、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量杯、量筒、移液管、移液枪、洗耳球、电炉、冰箱等。

四、实验步骤1. 大量元素母液的配制（1）按照MS培养基配方的需要量，将各种化合物称量扩大10倍。

（2）用电子天平称取，并分别用少量蒸馏水溶解，如溶解速度慢，可稍加热。

（3）完全溶解后，按表4-1顺序依次混合已溶解的化合物。

（4）将混合液转移至容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

（5）将配制好的大量元素母液转移至棕色试剂瓶中，贴上标签，置于冰箱中保存。

2. 微量元素母液的配制（1）按照微量元素母液的配方，将各种化合物称量扩大10倍。

（2）用电子天平称取，并分别用少量蒸馏水溶解，如溶解速度慢，可稍加热。

（3）完全溶解后，将混合液转移至容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

（4）将配制好的微量元素母液转移至棕色试剂瓶中，贴上标签，置于冰箱中保存。

3. 生长调节物质母液的配制（1）按照生长调节物质母液的配方，将各种化合物称量扩大10倍。

（2）用电子天平称取，并分别用少量蒸馏水溶解，如溶解速度慢，可稍加热。

（3）完全溶解后，将混合液转移至容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

（4）将配制好的生长调节物质母液转移至棕色试剂瓶中，贴上标签，置于冰箱中保存。

五、实验结果与分析1. 本实验成功配制了MS培养基的大量元素母液、微量元素母液和生长调节物质母液。

MS培养基的配制-母液法

• 在过滤灭菌加入激素和抗生素等时,应避免产生气泡,或尽快去除气泡
• 配好的培养基一般放置1-2条观察无菌落后方可使用
• 配好的培养基在15-20℃存放,并尽快在一个月内使用
组培室的卫生?
• 定期消毒,熏蒸 • 组培污染物的处理 • 污染的培养材料或培
养瓶,灭菌后洗涤 • 升汞等,回收后集中
灭菌温度与灭菌时间和培养基体积的关系
培养基的配制（母液法）
• 培养基配制过程 • /v_show/id_XMTE2Nzg
3MjA=.html • /player.php/sid/XM
TE2Nzg3MjA=/v.swf
0.025
25
铁盐
Na2-EDTA
37.3
3730
FeSO4˙4H2O
27.8
100
2780
1000
10
微生素等
Gly VB1 VB2 VB6 肌醇
2.0
100
0. 1
5
0.5
525
100
5000
母液的配制
• 以MS培养基为例，其母液如下： • MS大量组份（扩大20倍）； • MS微量（扩大1000倍）； • MS有机组分（扩大50倍）； • MS铁盐（扩大100倍）；
2，配制分工：
• 1.配制母液 • MS大量------第1组 • MS微量------第2组 • MS有机------第3组 • MS铁盐------第4组 • 6-BA母液（50mL;1mg/ml） ------第5组 • NAA母液（50mL;1mg/ml） ------第6组 • 2,4-D母液（50mL,1mg/,mL)---第7组 • 0.1% 溶液升汞，2000mL ---第8组 • 来苏尔液—1000MmL-----第9组 • 75%酒精 ------------1000mL---第10组

MS培养基配制流程

MS培养基配制流程母液1母液2 氯化钙母液3先分别溶解（每个试剂溶于120ml水，需微波炉加热）再混合定容（棕色瓶）注意：1) Na2MoO4·2H2O可按10倍量（62.5 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml（即含6.25 mg的量），加入到母液4中; 2) CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按100倍量（62.5 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取1ml，（即含0．625 mg 的量），加入到母液中。

母液6肌醇四、MS溶液的混合：配制MS培养基时，每1000ml培养基取：分别依次加入到800ml蒸馏水中，20g蔗糖定溶至1000ml，用5N NaOH调PH到5.8。

用500ml的锥形瓶分装（琼脂粉为0.8%，即每个锥形瓶内加2.4g琼脂粉，然后装入300ml MS溶液）。

附：NaOH、HCl溶液的配置：另配100ml 5N NaOH，4N HCl用于调节PH值。

（20g NaOH 定容至100ml的蒸馏水中。

34.48ml HCl定容至100ml的蒸馏水中。

MS培养基广泛用于植物组织培养。

除基本的化学药品配制要领外，MS培养基的配制还有一定的特殊要求，笔者试将其总结为“ 五点注意”，描述如下。

1 母液配制必须严格分类配制高浓度的母液是植物组织培养的基本功。

配制母液的目的，除了多次取用、节省实验准备的时间外，还有抑制杂菌生长的作用。

高浓度的母液能够有效地抑制细菌与霉菌的生长，加上低温环境( 4℃) ，能够大大增加培养基的存放时间( 一年左右) 。

一般而言，培养基中的各个成分可以按照表1的分类方式配成母液。

母液分类的依据，是要避免MS培养基中某些成分发生沉淀反应。

例如，如果将全部的大量元素混合在一起配制，则KH2PO4和CaCl2易产生Ca3( PO4)2沉淀，而CaC12和 MgSO4将生成CaSO4沉淀。

除上述成分外，还必须加上蔗糖、琼脂以及激素，才构成用于组织培养的MS培养基。

MS培养基的配制,灭菌等注意事项

一、MS培养基母液注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml 烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。

MS培养基母液配制

10
素
烟酸
0.025
肌醇
5
BA
0．1
激
IAA、NAA、GA3
0．1
素
IBA
0．1
0．5
10
注：BA 用 1N 的 HCI （约 10ml）溶解。 IAA、NAA、GA3 用酒精 95%（约 10ml）溶解。
常用试剂药剂：
药品名称盐酸（36.5%）硫酸（98%）甲醛高锰酸钾氢氧化钠乙醇氯化汞（剧毒）次氯酸钠
规格 500ml 500ml 500ml 500g 500g （酒精 95%） 100g 500g
500g 500g 500g 500g 500g 500g 500g 500g 500g 500g 500g 500g 500g 500g 25g 100mg/ml(200 mg/2ml) 100mg/ml(200 mg/2ml) 25g 25g 1g 1g 1g
0.083 100
1
NaMoO4·2H2O CuSO4·5H2O CoCl2·6H2O Na2-EDTA FeSO4·7H2O
甘氨酸
0.025
0.0025
0.0025
3.73
100
1
2.78
0.1
吸取量 ml/配 1L
100
10
10
盐酸吡多醇（B1）
0.005
维
生
盐酸硫胺2·6H2O ZnSO4·7H2O CuSO4·5H2O
H3BO3 Na2MoO4·2H2O
肌醇烟酸 VB3 盐酸硫胺素 VB1 盐酸吡哆醇 VB6
B5(1966) 250 150 150 2500 134 27.8 37.3 10 0.75 0.025 2 0.025 3 0.25 100 1 10 1

MS固体培养基的配制

MS固体培养基的配制一、实验目的通过实验实训，掌握MS固体培养基的配制技术及操作技能。

二、材料与用具配制MS培养基的各种母液、生长调节物质母液、琼脂、蔗糖、蒸馏水、移液管、量筒、电饭煲、全自动高压灭菌器、pH试纸、0.1mol/L 的NaOH、0.1mol/L的HCl、培养瓶、标签、铅笔等。

三、方法与步骤（一）按母液顺序和规定量，用吸管提取母液，放入盛有一定量（150-200ml）纯净水的量筒中。

母液一 30ml/L母液二 15ml/L母液三15ml/L母液四 15ml/L母液五30ml/L母液六7.5ml/L1-8组4人配1L，9-10组3人配1L。

（二）加入植物生长调节物质加入的具体调节物质与量视培养物不同而异（本次实验不加生长调节剂）。

（三）定容加纯净水定容至1000ml。

（四）倒入预先用铅笔标好刻度的电饭煲中。

（五）加糖、加热：加入蔗糖20g/L并开始加热。

（六）加琼脂粉12g/L：在电饭煲中给培养基加温至冒热气时均匀缓慢地加入琼脂粉，用玻璃棒不断搅拌至全部熔解并煮沸。

（七）调节pH值：煮沸后，用试纸测试pH值，用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl把培养基的pH调整到5.6—5.8；加水至预先标注的刻度处，煮沸1-2分钟。

（八）培养基分注把配置好的培养基用烧杯分注到培养瓶中，分注前用量筒量取30ml水倒入培养瓶测试，每瓶装30ml（3瓶/100 ml）左右。

分注后立即加盖，贴上标签，注明培养基的名称、配制时间、配制人姓名。

（九）培养基灭菌，无菌水、无菌瓶、无菌纸片制作。

1.将蒸馏水注入灭菌腔，直至水流进入水位板中间的水位指示器。

2.将待灭菌的物品放入提篮中，将提篮放入灭菌腔中。

3.插上电源，打开开关。

4.旋紧“排汽旋钮”，关闭灭菌腔盖，直至指示灯“LOCKED”亮起。

5.选择灭菌程序，按“SET/ENT”键设置温度为121℃，保温时间20min。

6.长按“START”键开始灭菌。

ms基本培养基母液的配制方法

ms基本培养基母液的配制方法一、准备所需材料1. 酸性植物激素溶液：包括吲哚乙酸（IAA）、纯度较高的激素（如6-苄基腺嘌呤，BA）等。

2. 碱性植物激素溶液：如生长素（GA3）等。

3. 无机盐溶液：包括硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸钾、硼酸、锌硫酸、硼酸等。

4. 维生素溶液：如次黄嘌呤核苷酸（NAA）等。

5. 蔗糖溶液：用于提供能量和碳源。

6. 琼脂：用于凝固培养基。

二、配制步骤1. 称取适量的无机盐溶液成分，按照MS基本培养基的配方比例将各种盐溶解在蒸馏水中，常用的浓度为1/2或1/4的MS培养基。

2. 将酸性植物激素溶液和碱性植物激素溶液分别加入到溶液中，注意控制激素的浓度。

3. 加入维生素溶液，按照配方比例加入到溶液中。

4. 加入适量的蔗糖溶液，用来提供能量和碳源。

5. 最后将琼脂加入到溶液中，搅拌均匀。

6. 调节溶液的pH值，通常为5.8左右。

7. 用蒸馏水补充溶液至总体积，并充分搅拌均匀。

8. 将配制好的培养基溶液进行高温高压灭菌处理，一般条件下为121摄氏度，压力为0.1MPa，持续20分钟。

三、注意事项1. 在配制过程中，要保持实验室卫生，使用无菌操作。

2. 使用高质量的试剂和蒸馏水，避免杂质的干扰。

3. 激素的浓度要根据实验需要进行调整。

4. 配制过程中要注意酸碱度的调节，尽量控制在5.8左右。

5. 琼脂的加入要充分搅拌均匀，避免结块。

6. 灭菌处理要按照规定的条件进行，确保培养基的无菌性。

通过以上步骤，我们可以成功地配制出MS基本培养基的母液。

这种培养基在植物组织培养、植物细胞和胚胎发生研究中起着重要的作用。

根据实验的需要，可以在母液的基础上进一步调整培养基的成分和浓度，以满足不同植物材料的培养要求。

希望以上内容对您有所帮助。

MS培养基的配置

MS培养基的配置一、母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。

优点：（1）保证各物质成分的准确性；（2）便于配置时快速移取；（3）便于低温保藏。

1、MS大量元素母液（50X）称10升量溶解在200 ml蒸馏水中。

配1升培养基取20 ml。

化学药品1升量10升量①NH4NO31650 mg/L 16．5g②KNO31900 mg/L 19．0g③CaCl2·2H2O440 mg/L 4．4g④MgSO4·7H2O370 mg/L 3．7g⑤KH2PO4170 mg/L 1．7g注：CaCl2·2H2O单独配置2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

化学药品1升量10升量①MnSO4·4H2O（MnSO4·H2O）22．3 mg/L（21．4 mg/L）223mg②ZnSO4·7H2O8．6 mg/L 86mg③CoCl2·6H2O0．025mg/L 0．25mg④CuSO4·5H2O0．025 mg/L 0．25mg⑤Na2MoO4·2H2O0．25 mg/L 2．5mg⑥KI 0．83 mg/L 8．3 mg⑦H3BO36．2 mg/L 62 mg注：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0．25 mg的量。

3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

化学药品1升量10升量Na2·EDTA37．3 mg/L 373 mgFeSO4·7H2O27．8 mg/L 278 mg注：配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。