4.小鼠骨髓细胞染色体畸变实验
实验五小鼠骨髓细胞微核试验
小鼠骨髓细胞的采集与处理
小鼠麻醉
将小鼠麻醉,并固定在 操作台上。
暴露骨髓
用消毒手术刀切开小鼠 的腿骨,暴露骨髓腔。
采集骨髓细胞
用注射器吸取生理盐水, 冲洗骨髓腔,收集骨髓
细胞。
细胞处理
将采集的骨髓细胞进行 洗涤、离心、分离等处 理,得到所需的细胞样
本。
骨髓细胞的培养与观察
细胞培养
将处理后的骨髓细胞接种在细胞 培养皿中,加入适量的细胞培养 基,在适宜的温度和湿度条件下 进行培养。
率之间存在正相关关系。
本实验为进一步研究致突变物的 致突变作用提供了有力证据,有 助于深入了解致突变物的致癌机
制。
对实验结果的理解与讨论
本实验结果表明,致突变物能够诱导小 鼠骨髓细胞微核的形成,这可能是致突 变物导致基因突变和细胞恶性转化的重 要机制之一。
实验结果还提示,致突变物的致突变作用可 能与其在体内的代谢活化有关,因此需要进 一步研究致突变物的代谢活化过程及其与微 核形成之间的关系。
实验五小鼠骨髓细胞 微核试验
目录
CONTENTS
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果分析 • 结论与讨论
01 实验目的
了解微核试验的原理
微核试验是一种用于检测染色体畸变和DNA损伤的细胞遗传 学方法。它通过观察细胞中微核(微小的细胞核)的数量, 来评估细胞受到的遗传损伤程度。
染色体结构畸变
分析实验组和对照组的染色体结构畸变类型,如断裂、倒位、重 复等。
染色体数目畸变
观察染色体数目畸变情况,包括非整倍体、多倍体等。
畸变类型与实验条件关系
探讨不同实验条件下染色体畸变类型的差异及其与实验条件的关系。
实验结果与预期结果的比较
小鼠脾脏与骨髓细胞在微核试验和染色体畸变分析中的应用
2 00 10 10
毒效应 表现 无异常 无异常 无异常 无异常 轻微竖毛 竖毛 , 软便 死亡 无
注射前 体重 均数 士标准差
2 9+ 0. 2 0. 8 2 9 10. 4 0. -- 7
注射后 体重 均数 士标准差
2 . 士0 8 0 9 .2 2 . 土0 6 0 5 .9
5 , 0 2 0 3 0 4 0 5 0 / g体 重 6个 0 1 , , , , mg k 0 0 , 0 0 0
1 8
1 )阿克苏市东城医 院。
本文于 18 年 4月 2日收至 97 ‘
下注射 P HA 量取 20 /g 重,MMC 给 0mgk 体 结 果 与 讨 论 药量按标定 的 L si - gk 体重)的 Do . 5 /g (v m 12 14 18 11 取 量, 2 , 5 0 2 , /, , /, /6 / 即 . 1 , 5 5 . . 2 6 ( 一)不同剂盆 P A 刺激小鼠 H 脾脏、骨 0 15 /g体重。考虑到 MMC 诱发 D A 髓细胞的分裂指数 . 2mgk 3 N 损伤通常是在 S 期的特点〔, Hed 推荐的 7按 3 dl e 如表 1 所示,P A 各剂量组脾脏和骨髓 H 一次染毒方案L 待 P A注射4 小时将生理 细胞分裂指数均高于相应对照组,差异非常显 , H 6
分裂相的影响
动物分7 每组 1 只,雌 组, 0
Yn e n a.A ayi o MN d i s X f e l n ls f a C n u u l : s n A
Mo s S le ad o e ar w e l u e en B n M r o C ls p n
雄各半, 逐一称重。P HA 以生理盐水稀释, 按
氨氯吡啶酸对小鼠骨髓细胞微核及CHL细胞染色体畸变的影响
14 1 小 鼠骨 髓 嗜 多 染 红 细 胞 微 核 试 验 依 据 . . OC E D指南 中小 鼠骨 髓 嗜多 染 红 细 胞 微 核 试 验 标
2 结 果
21 小 鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 . 9 %氨氯吡啶酸原药各剂量组的小 鼠骨髓 嗜 5 多染红细胞微核率 , 与阴性对照组 比较差异无统计 学 意义 ( 0 0 ) 阳性对 照 组小 鼠骨髓 嗜 多染 红 P> . 5 ;
细胞微核试验和体外哺乳动物 细胞染色体畸变试 验, 从体 内和体外 2个试验体系检测 9 % 氨氯吡 5 啶酸原药致突变性 , 预测其遗传危害 , 为其安全使 用 提供 科学 依据 。
的生产资料。而农 药的不合理使用可造成急慢性 中毒 、 农产品农药残 留超标 、 生态环境恶化等问题 ,
ma  ̄ o c rm t rtrc t r w pl ho ai ey oy s(P E)mi ou lu etad c ieeh m t n e l y c h e C c n c sts n h s a s rl gcl r e n e u l(C ) HL
a e r t n t s w r s d frt e o s r a in o e mua e i i f 5 b ra i e t e e u e b e v t ft tg n ct o % p co a o o h o h y 9 ilr m.Re u t :T e e w s sl s h r a n in f a tdf r n e o co u lu ae n mo s o e ma r w P E b t e n g o p x o e o o s i c n iee c f g i f mir n ce s rt s i u e b n ro C ew e r u s e p s d t
6.兽药临床前毒理学评价程序试验指导原则
兽药临床前毒理学评价试验指导原则一、概述(一)定义与目的为保障新兽药对使用对象动物(靶动物)的安全,特别是人的食品消费安全,必须对临床前兽药的毒理学(或安全性)进行评价。
目前,对兽药的安全性进行评价一般采取毒理学评价方法,包括三性(急性、亚慢性、慢性毒性)试验和三致(致突变、致畸、致癌)试验,以预测新兽药的安全性。
临床前药物毒理学评价的目的是预测临床用药的安全性,为临床试验提供可靠的参考。
毒理学评价结果不但为最后确定该化合物是否可以作为新兽药使用提供科学依据,还是制订动物性食品中最高残留限量(MRL)的重要依据。
(二)适用范围本指导原则适用于评价兽用化学药品(化学合成药、抗生素、药物饲料添加剂)及消毒剂临床前的安全性。
1.兽用原料药需明确下列信息:①供试药品名称,包括通用名、化学名;②供试药品(必要时包括杂质)的化学结构、纯度、性状及物理、化学性质;③供试药品的质量标准及其说明;④供试药品的质量检验报告及稳定性报告;⑤供试药品的适用范围、使用方法和最低、最高推荐量;⑥供试药品的贮存条件、注意事项及保质期。
2.兽药制剂需明确下列信息:除提供第1条所要求的资料外,还需提供制剂配方和生产工艺。
3.供试药品样品数量要求:需提供每个供试药品同一批号的3份样品及其检验报告;每份样品应为检验需要量的5~10倍。
必要时,还需提供适当的对照品。
评价兽药安全性的毒理学试验必须在农业部认定、并具有GLP试验条件的机构进行。
二、毒理学评价程序及内容兽药毒理学评价试验一般分为五个阶段,具体研究内容如下:(一)第一阶段:急性毒理学试验阶段的测定:所有用途的原料药必做;1.经口LD50的测定:注射用原料药必做,肌注、皮下注射或腹腔注射2.注射途径LD50途径任选一种;的测定:供皮肤给药的原料药必做;3.经皮LD504.皮肤刺激试验:供注射和透皮吸收的制剂必做;5.肌肉刺激试验:供肌内注射的制剂必做;6.眼结膜刺激试验:眼科用、喷雾和易挥发的制剂必做;7.粘膜刺激试验:子宫注入剂、喷雾和易挥发的制剂必做;8.溶血性试验:静脉注射用制剂必做。
我国食品安全性毒理学评价的试验方法
我国食品安全性毒理学评价的试验方法
我国食品安全性毒理学评价的试验方法主要包括以下几个
方面:
1. 急性毒性试验:用于评估食品对动物的急性毒性。
常用
的试验动物包括小鼠、大鼠和小鼠。
常见的急性毒性试验
方法有LD50试验和固定剂量试验。
2. 亚慢性毒性试验:用于评估长期暴露于食品中的低剂量
毒性效应。
常用的试验动物包括大鼠和狗。
试验期一般为
90天,观察动物的生长发育、血液生化指标、内脏器官病
理学变化等。
3. 慢性毒性试验:用于评估长期暴露于食品中的慢性毒性
效应。
常用的试验动物包括大鼠和狗。
试验期一般为2年,观察动物的生长发育、血液生化指标、内脏器官病理学变
化等。
4. 灵敏性试验:用于评估食品对特定人群的敏感性,如孕妇、婴儿等。
常用的试验动物包括小鼠和大鼠。
5. 遗传毒性试验:用于评估食品对遗传物质的影响。
常用
的试验方法包括细菌突变试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变
试验等。
6. 致癌性试验:用于评估食品对动物的致癌作用。
常用的
试验动物包括大鼠和小鼠。
试验期一般为2年,观察动物
是否出现肿瘤等。
在进行食品安全性毒理学评价时,需要严格按照相关的国
家标准和规定进行,确保试验方法的科学性和可靠性。
同时,还需要充分考虑试验动物的选择、试验剂量的确定、
试验期的安排等因素,以保证评价结果的准确性和可靠性。
实验三小鼠骨髓细胞微核试验
实验三小鼠骨髓细胞微核试验实验三:小鼠骨髓细胞微核试验一、实验目的本实验旨在通过观察小鼠骨髓细胞微核率的变化,了解并评估骨髓细胞受到的损伤程度,为进一步研究生物样品中的毒性物质及其潜在危害提供依据。
二、实验原理微核试验是一种检测染色体畸变的快速、敏感的方法,常用于评价各种因素对机体的遗传毒性。
微核是由染色体的片段或整个染色体在细胞分裂后期或末期未能进入子代细胞核而形成的,因此微核率的高低可反映细胞染色体受损的程度。
骨髓细胞微核试验常用于检测体内外接触毒物的程度及检测药物的遗传毒性。
三、实验步骤1.选取健康的成年小鼠,进行试验前处理,包括脱毛、称重等。
2.对小鼠进行腹腔注射或口服给予不同剂量的待测毒物。
3.分别于24小时、48小时和72小时三个时间段采集小鼠骨髓细胞,制备骨髓细胞涂片。
4.对涂片进行染色处理,以便观察和计数。
5.在显微镜下观察每个涂片,记录微核数并计算微核率。
6.统计分析数据,对比不同剂量组与对照组的微核率差异。
7.根据实验结果,评估待测毒物的遗传毒性及对骨髓细胞的损伤程度。
四、实验结果与数据分析经过对小鼠骨髓细胞微核率的观察和计数,我们得到了不同剂量组与对照组的微核率数据。
通过对比分析,我们发现随着待测毒物剂量的增加,小鼠骨髓细胞的微核率也逐渐升高。
这表明待测毒物具有明显的遗传毒性,能够导致骨髓细胞的损伤。
为了更直观地展示实验结果,我们可以使用柱状图或折线图来表示不同剂量组与对照组之间的微核率差异。
通过观察图表,可以清楚地看到随着毒物剂量的增加,微核率也逐渐升高。
这进一步证实了待测毒物的遗传毒性和对骨髓细胞的损伤作用。
五、实验结论通过本实验,我们得出以下结论:1.待测毒物具有明显的遗传毒性,能够导致小鼠骨髓细胞的损伤。
2.随着待测毒物剂量的增加,小鼠骨髓细胞的微核率也逐渐升高。
3.实验结果提示,待测毒物可能对机体产生一定的危害作用,需要进一步研究其对人体健康的潜在影响。
4.微核试验作为一种快速、敏感的检测方法,可用于评估生物样品中的毒性物质及其潜在危害。
2020年公卫执业医师《卫生毒理学》试题及答案(卷五)
2020年公卫执业医师《卫生毒理学》试题及答案(卷五)【A型题】1.危险度是CA.外来化合物损害机体的可能性B.外来化合物损害机体的可能性的定性估计C.外来化合物损害机体的可能性的定量估计D.外来化合物不损害机体的可能性2.危险度评定的核心内容是BA.定性评定B.剂量反应关系确定C.毒性评定D.危害性评定3.安全性毒理学评价程序原则是 DA.按一定顺序进行B.最短的时间C.最经济的办法D.以上都是4.哪种试验组符合我国食品安全性评价程序 CA.Ames试验,大鼠骨髓细胞微核试验,小鼠骨髓细胞染色体畸变试验B.Ames试验,小鼠骨髓细胞微核试验,大鼠骨髓细胞染色体畸变试验C.Ames试验,小鼠骨髓细胞微核试验,大鼠睾丸细胞染色体试验D.SCE试验,微核试验,染色体试验5.对人体有毒的元素或化合物,主要是研究制订 CA.最低需要量B.最高需要量C.最高容许限量E.最低容许限量6.人体必需的元素及化合物,主要是研究制订 DA.最高容许浓度B.最低供给的限量C.最低容许限量D.最高容许浓度及最低供给的限量7.制定化学毒物卫生标准最重要的毒性参考指标是 DA.LD50B.LD0C.LD100D.LOAEL或NOAEL38.化学物质的危险度评价不包括: AA.化学物结构分析B.危害性认定C.剂量-反应关系评价D.接触评定和危险度特征分析9.完整的毒理学评价可划分四个阶段的实验研究,下述哪一项描述是错误的DA.第一阶段进行急性毒性试验B.第二阶段进行亚急性毒性试验和致突变试验C.第三阶段进行亚慢性毒性试验和代谢试验D.第四阶段是进行人群接试验研究10.食品安全性毒理学评价程序第三价段试验内容不包括 CA.遗传毒性试验B.致畸试验C.短期喂养试验D.致癌试验【B 型题】11~13题A 毒理学评价第一阶段B 毒理学评价第二阶段C 毒理学评价第三阶段D 毒理学评价第四阶段E 危险度评价11.致突变试验属于B12.传统致畸试验属于B13.致癌试验属于D。
实验二动物骨髓细胞染色体畸变分析
实验二动物骨髓细胞染色体畸变分析一、实验目的学习动物骨髓细胞染色体标本制作,了解动物体内染毒及染色体畸变类型。
二、实验原理染色体畸变的产生与微核的形成原理相同,观察终点不同,染色体畸变只能在细胞分裂的中期相进行观察和分析。
为收集足够的中期相细胞,在收获细胞前,用秋水仙碱或乙酰甲基秋水仙碱处理,以阻断微管蛋白的聚合,抑制细胞分裂时纺锤体的形成,使分裂间期和前期的细胞停留在中期相。
细胞通过低渗,使染色体均匀散开,然后固定、染色,可在油镜下观察。
三、器材与试剂1、器材小剪刀、镊子、10ml离心管、滴管、载玻片、离心机、水浴箱、生物显微镜(100物镜)、注射器(5ml)2、试剂500mg/L秋水仙素,0.75mol/L KCl液;固定液甲醇3份冰醋酸1份混匀,临用时配;姬姆萨(Giemsa)储备液取Giemsa染料lg,逐渐加入少许甘油在研钵中研细溶解,共加入甘油60ml混匀。
于60℃水浴中保温2h,冷却后再加66ml甲醇混匀,于室温中静置1~2周,过滤置棕色瓶保存备用;pH6.8磷酸盐缓冲液:取甲液49.5m1,乙液50.5ml混匀即可。
甲液1/15mo1/L Na2HPO4:称取Na2HPO49.48g溶于1000ml蒸馏水中。
乙液1/15mo1/L KH2PO4称取KH2PO49.07g溶于1000ml蒸馏水中,若Na2HPO4或KH2PO4含有结晶水,应重新计算称取量;环磷酰胺或丝裂霉素C;PBS Na2HPO4 1.15g、NaH2PO40.2g、KCl0.2g、NaCl8.0g 溶于1000ml蒸馏水中。
四、实验设计1、动物一般选用成年大、小鼠,每组6~10只,最好雌雄各半。
2、染毒与取样时间一般染毒一次或多次,多次更为合理。
研究证明即使损伤的细胞不会积累,化学物质也需在靶器官蓄积至一定的浓度才有诱变作用。
一般在未次染毒后24h 处死动物,收获细胞。
3、剂量选择最高剂量应达最大耐受剂量或毒物的30%~80%LD50剂量,低毒物质应以最大给药量或大于人使用剂量的50~100倍。
食品毒理学练习题库(含参考答案)
食品毒理学练习题库(含参考答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、发生慢性中毒的基本条件是毒物的A、作用时间B、选择作用C、蓄积作用D、剂量正确答案:C2、恶性转化细胞的特征不包括A、细胞生长能力改变B、细胞坏死C、细胞形态改变D、细胞生化表型改变正确答案:B3、关于拟紫外线断裂剂的描述错误的是A、诱发DNA双链断裂B、需经S期复制才看见染色体断裂C、依赖断裂剂D、射性断裂剂不同正确答案:A4、碱基置换的后果是出现A、同义密码B、错义密码C、终止密码D、以上都对正确答案:D5、对阈剂量描述错误二的是A、指毒物引起受试对象中少数个体出现某种最轻微的异常改变所需要的最低剂量B、毒物的急性阈剂量比慢性阈剂量要低C、长期反复多次接触毒物所得的阈剂量为慢性阈剂量D、与毒物一次接触所得的阈剂量为急性阈剂量正确答案:B6、代谢活化是指A、原形不致癌的物质经过生物转化变为致癌物B、减毒或增毒必须经过四种反应C、一相反应可以增毒,二相反应可以减毒D、经结合反应后,水溶性增大,毒性也增大正确答案:A7、毒物排泄的主要途径是A、汗液B、肠道C、肾脏D、唾液正确答案:C8、化学物质的哪些物理性质影响毒效应A、电离度B、熔点C、挥发度D、以上都是正确答案:D9、哪种试验组符合我国食品安全性评价程序A、Ames试验,大鼠骨髓细胞微核试验,小鼠骨髓细胞染色体畸变试验B、Ames试验,小鼠骨髓细胞微核试验,大鼠骨髓细胞染色体畸变试验C、Ames试验,小鼠骨髓细胞微核试验,大鼠辜丸细胞染色体试验D、SCE试验,微核试验,染色体试验正确答案:C10、毒物引起全部受试对象死亡所需要的最低剂量是A、绝对致死剂量(LD100)B、最小致死剂量(LDO1)C、最大耐受剂量(LDO)D、半数致死剂量(LD50)正确答案:A11、下述哪项描述是错误的A、解毒作用是机体防御功能的重要组成部分B、动物的种属、年龄、性别、营养状态及遗传特性,对生物转化的性质与强度均有重大影响C、经过体内的生物转化,所有化学毒物的毒性均降低D、前致癌物可通过生物转化后变成终致癌物正确答案:C12、最小有作用剂量(观察到有害作用的最低水平)是A、一种化合物在一定时间内按一定方式与机体接触,使某项指标开始出现异常变化的最低剂量B、一种化合物按一定方式与人接触,出现了亚临床症状的最小剂量C、一种化合物按一定方式与人接触引起免疫功能减低的最小剂量D、一种化合物按一定方式与人接触造成显微镜下可观察到的损伤的最小剂量正确答案:A13、下述哪项描述是错误的A、化学物的蓄积作用,是慢性中毒的基础B、有效地排除体内毒物,防止或减少毒物的蓄积作用,是预防和减少慢性中毒的重要措施C、在体内检出化学毒物时,机体才可能出现相应的机能改变并表现出中毒的病理征象D、物质蓄积可能引起慢性中毒的急性发作正确答案:C14、慢性毒作用带为A、半数致死剂量/急性阈剂量的比值B、慢性阈剂量/急性阈剂量的比值C、急性阈剂量/慢性阈剂量的比值D、急性阈剂量/半数致死剂量的比值正确答案:C15、亚慢性毒性试验中一般化验指标有A、特异指标的检查B、病理学检查C、血液、肝、肾功能D、灵敏指标的检查正确答案:C16、化学毒物在消化道吸收的主要部位是A、食管B、小肠C、胃正确答案:B17、两种或两种以上化学毒物作用于机体表现出独立作用,主要是由于A、化学毒物在对机体毒作用方面存在竞争作用B、化学毒物在化学结构上为同系物C、化学毒物毒作用的靶器官相同D、化学毒物各自作用的受体、靶不同,出现各自不同的毒效应正确答案:D18、安全性毒理学评价程序原则是A、按一定顺序进行B、最短的时间C、最经济的办法D、以上都是正确答案:D19、危险度评定的核心内容是A、危害性评定B、剂量反应关系确定C、毒性评定D、定性评定正确答案:B20、下列哪种作用是以DNA为靶的化学诱变作用A、对有丝分裂作用的干扰B、对DNA合成酶系的破坏C、对DNA复制酶系的破坏D、以上都不是正确答案:D21、毒理学体外试验常选用A、大鼠和小鼠B、果蝇C、鸟类D、游离器官,细胞,细胞器正确答案:D22、制定化学毒物卫生标准最重要的毒性参考指标是A、LD50C、LD100D、LOAEL或NOAEL正确答案:D23、颠换与转换的不同点主要在于A、碱基置换的类型B、产生的蛋白质C、产生的氨基酸D、导致的后果正确答案:A24、有关嵌入剂的概念正确的是A、以静电吸附形式嵌入B、嵌入多核普酸链之间C、导致移码突变D、以上都对正确答案:D25、慢性毒性试验主要目的是A、确定阈计量B、确定最大无作用计量C、进行该化合物的危险度评价D、以上AB正确正确答案:D26、染色体数目异常出现三体可记为A、2n+3B、2n+1C、2n-3D、2n-1正确答案:B27、化学致癌过程有多个因素参与,下述哪一项除外A、细胞增殖B、细胞程序性死亡C、DNA修复D、代谢酶激活正确答案:D28、描述S-9混合液错误的是A、多氯联苯诱导B、含葡萄糖C、为代谢活化系统D、肝匀浆9000g上清夜正确答案:B29、化学毒物经皮吸收必须具备下述哪项条件A、水溶性B、分子量小于100C、脂溶性D、水溶性和脂溶性正确答案:D30、下列哪些发生断裂与重接的染色体基因不丢失和增加A、易位B、插入C、倒位D、重复正确答案:C31、改进寇氏法要求A、设5-7剂量组B、每个剂量组小鼠不可少于10只C、组距为几何级数D、以上都是正确答案:D32、哺乳动物长期致癌试验结果分析指标是A、肿瘤发生率,肿瘤多发性,肿瘤潜伏期B、肿瘤发生率,肿瘤多发性,肿瘤死亡率C、肿瘤多发性,肿瘤潜伏期,肿瘤死亡率D、肿瘤发生率,肿瘤存活率,肿瘤死亡率正确答案:A33、对于呈气体状态或易挥发的化学毒物的排泄,下列哪一项描述是正确的A、通过主动转运的方式经肺泡壁排出气体B、排出的速度与吸收的速度成正比C、血液中溶解度低可减缓其排除速度D、肺通气量加大可加速其排除速度正确答案:D34、急性毒性是A、一次是指瞬间给予动物快速出现中毒效应B、机体连续多次接触化合物所引起的中毒效应C、机体(人或动物)一次大剂量或24小时多次接触外来化合物后所引起的中毒效应.甚至死亡效应D、机体一次大剂量接融化合物后引起快速而猛烈的中毒效应正确答案:C35、导致染色体结构异常的原因是A、DNA交联B、DNA链的复制错误C、DNA链的断裂与异常重接D、DNA链的断裂与原位正确答案:C36、化学毒物与机体毒作用的剂量一反应(效应)关系最常见的曲线形式是A、非对称S状曲线B、抛物线型曲线C、直线型曲线D、对称S状曲线正确答案:A37、肾脏排泄主要的机理是A、肾小管主动转运B、肾小球简单扩散C、肾小球主动转运D、肾小球滤过正确答案:D38、确证的人类致癌物必须有A、经动物实验及流行病学调查研究,并有一定的线索B、已建立了动物模型C、人类流行病学及动物致癌实验方面充分的证据D、充分流行病学调查研究的结果正确答案:C39、DNA链中减少了一对碱基可导致A、染色体畸变B、移码突变C、碱基置换D、大段损伤正确答案:B40、急性经口染毒为了准确地将受试物染入消化道中,多采用A、饮水B、吞咽胶囊C、灌胃D、喂饲正确答案:C41、对人体有毒的元素或化合物,主要是研究制订A、最高容许限量B、最高需要量C、最低容许限量D、最低需要量正确答案:A42、关于微核的描述不正确的是A、实质是DNAB、是丢失的染色体片段C、存在于细胞核中D、存在于细胞质中正确答案:C43、一致癌物的最终确定应该依据A、构效分析,致突变试验,动物致癌试验B、流行病学调查,计量反应关系,动物致癌试验C、恶性转化试验,动物致癌试验,流行病学调查D、致突变试验,动物致癌试验,流行病学调查正确答案:B44、化学毒物引起突变类型不包括:A、基因突变B、癌变C、染色体数目异常D、染色体畸变正确答案:B45、化学物质的危险度评价不包括:A、危害性认定B、接触评定和危险度特征分析C、剂量一反应关系评价D、化学物结构分析正确答案:D46、有机磷化合物取代基不同其毒性不同,下列哪项正确A、RI. R2同为乙基时毒性比甲基毒性大B、Y基团为0时毒性大于SC、X基团为酸根时,强酸毒性比弱酸毒性大D、以上都对正确答案:D47、人体必需的元素及化合物,主要是研究制订A、最低容许限量B、最高容许浓度及最低供给的限量C、最低供给的限量D、最高容许浓度正确答案:B48、体内消除自由基的酶系统平包括A、GST(谷胧甘肤S一转移酶)B、GSH-Px(谷肌甘肤过氧化物酶)C、G-6-PD(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)正确答案:B49、环状染色体是A、染色体长臂两端连接形成环状B、染色体短臂两端连接形成环状C、染色体两臂断裂重新形成环状D、以上都对正确答案:C50、卫生毒理学和毒理学的主要区别是A、卫生毒理学属于预防医学的范围,毒理学属于边缘学科B、卫生毒理学与毒理学研究的方法有所不同C、毒理学相当于总论.而卫生毒理学是个论D、卫生毒理研究的范围越来越小,毒理学研究的范围越来越大正确答案:A51、化学毒物在体内生物转化的最主要器官是A、肝B、小肠C、肺D、肾正确答案:A52、动式染毒主要优点是A、装置备有新鲜空气补充B、受试化合物保持浓度不变C、保证染毒柜内和二氧化碳分压恒定D、以上都是正确答案:D53、下列哪种类型不属于以DNA为靶的诱变A、烷化剂作用B、碱基类似物取代作用C、嵌入剂作用D、对DNA合成酶系的破坏作用正确答案:D54、能阻止水、电解质和某些水溶性差的物质屏障是A、表皮角质层B、上皮角质层C、真皮角质层D、连接角质层正确答案:D55、化学毒物的蓄积系数为A、多次染毒使全部动物死亡的累积剂量/一次染毒使全部动物死亡的剂量比值B、一次染毒使全部动物死亡的剂量/多数染毒使全部动物死亡的累积剂量比值C、多次染毒使半数动物死亡的累积剂量/一次染毒使半数动物死亡的剂量比值D、一次染毒使半数动物死亡的剂量/多次染毒使半数动物死亡的累积剂量比值正确答案:C56、关于食物利用率,下述哪一项描述是错误的A、其为一般性观察指标B、是指动物食入100克饲料所增长的体重克数C、体重增长减慢,则食物利用率肯定降低D、每日食量减少,食物利用率不一定改变正确答案:C57、血脑及胎盘屏障受以下因素的影响A、动物种属B、年龄C、生理状态D、以上都是正确答案:D58、急性毒作用带为A、半数致死剂量/急性阈剂量的比值B、慢性阈剂量/急性阈剂量的比值C、急性阈剂量/半数致死剂量的比值D、急性阈剂量/漫性阈剂量的比值正确答案:A59、在众多的环境致癌因素中,物理性致癌因素约占A、20%B、10%C、5%D、15%正确答案:C60、关于癌症病因,下述哪一项描述是错误的A、癌症是由多种病因诱变的B、机体发生癌症的内在原因有遗传因素C、人类癌症90%与环境因素有关,其中主要是辐射致癌和病毒致癌D、人类癌症90%与环境因素有关,其中主要是化学因素致癌正确答案:C61、外源化学物的概念A、存在于人类生活和外界环境中B、与人类接触并进入机体C、具有生物活性,并有损害作用D、以上都是正确答案:D62、测定化学物LD50时,常用的观察期限是A、7天B、10天C、14天D、28天正确答案:C63、化学毒物在器官和组织中的分布最主要受哪项因素影响A、化学毒物与器官的亲和力B、特定部位的屏障作用C、血流量D、器官和组织所在部位正确答案:A64、协同致癌作用机理包括A、抑制DNA修复B、选择性增强DNA受损细胞的增殖C、活化作用酶系统活力发生改变D、上述AC正确E、上述AB正确正确答案:E65、判别化学物质致癌性所使用的系统不包括:A、短期试验B、一般毒性试验C、人类流行病学研究D、动物诱癌试验正确答案:B66、最敏感的致死剂量指标是A、绝对致死剂量B、半数致死剂量C、最小致死剂量D、以上都是正确答案:B67、鸟嘌呤N-7位烷化作用的后果有(都是)A、鸟嘌呤脱落B、脱嘌呤C、作用碱基缺失D、移码突变E、以上都是正确答案:E68、关于蓄积系数(K)的评价哪些是对的A、K<3为中毒蓄积B、K--LD50(1)/LD50 (n)C、K>1为明显蓄积D、K>2为轻度蓄积正确答案:C69、慢性毒性试验设有四个计量组(高、中、低、最低)及对照组,哪个计量组为最大无作用计量A、中计量组出现了轻微中毒的症状,与对照相比P<0.05B、最低计量无任何中毒症状,与对照组相比P>0.05C、高计量组出现了明显的中毒症状,与对照组相比P<0.01D、低计量组出现了个别动物极轻微中毒症状,与对照组相比P>0.05正确答案:B70、下列哪组致癌物为非遗传毒性致癌物A、直接致癌物,过氧化物酶体增生剂,细胞毒物B、免疫抑制剂,过氧化物酶体增生剂,促癌剂C、激素,固态物质,无机致癌物D、免疫抑制剂,无机致癌物,促癌剂E、促癌剂,前致癌物,细胞毒物正确答案:B71、影响致癌作用的因素有A、致癌物的相互作用B、维生素C、脂肪D、以上都是正确答案:D72、突变发生在体细胞,结局主要是A、常见病增多B、发生肿瘤C、抵抗力下降D、遗传性疾病正确答案:B73、化学毒物在胃肠道吸收的主要方式为A、易化扩散B、简单扩散C、主动转运D、胞吞正确答案:B74、毒物引起受试对象中的个别成员出现死亡的剂量A、绝对致死剂量(LD100)B、最小致死剂量(LDO1)C、最大耐受剂量(LDO)D、半数致死剂量(LD50)正确答案:B75、下列哪种后果不是生殖细胞突变引起的A、显性致死B、癌症C、隐性遗传病D、显性遗传病正确答案:B76、霍恩法的要求是A、4个染毒剂量组B、每组动物数4只或5只C、组距2.15(或3.16)D、以上都是正确答案:D77、胚胎毒性作用是A、致畸作用,致死作用B、生长迟缓,功能缺陷C、生长迟缓,致畸作用D、功能缺陷,致畸作用正确答案:B78、影响化学毒物毒性大小和毒作用性质的决定因素是化学毒物的A、作用时间B、化学结构和理化性质C、剂量D、吸收途径正确答案:B79、致畸作用的敏感期是A、着床期B、胎儿期C、胚泡形成期D、器官发生期正确答案:D80、微核试验的遗传学终点为A、DNA完整性改变B、染色体完整性改变或染色体分离改变C、染色体交换或重排D、细胞分裂异常正确答案:B81、在染色体畸变试验中,染色体结构的改变不能观察到A、微核B、微小体C、断片D、染色体环正确答案:A82、对于同一种化学物,在相同的条件下,下列哪项毒性指标数值最大DA、LD50B、LDOC、LDO1D、LD100正确答案:D83、亚慢性毒性试验主要目的是A、探讨阈剂量及最大无作用剂量B、探讨剂量反应关系C、预测有无潜在性危害D、为其它试验剂量设计提供数据正确答案:A84、用“阳性或阴性”、“有或无”来表示化学毒物与机体接触后引起的生物学效应,称为A、效应B、反应C、质效应D、量效应正确答案:B85、在众多的环境致癌因素中,化学性致癌因素约占A、70%B、80%C、90%D、60%正确答案:C86、自由基具有下列特性A、奇数电子,低化学活度,生物半减期极长,有顺磁性B、奇数电子,高化学活度,生物半减期极短,有顺磁性C、奇数电子,低化学活度,生物半减期极短,有顺磁性D、奇数电子,高化学活度,生物半减期极长,有顺磁性正确答案:B87、关于亚慢性毒性试验的目的,下列哪一项描述是错误的A、探讨亚慢性毒性的I剂量B、确定受试动物的最低致死剂量C、为慢性毒性试验和致癌试验的剂量设计提供依据D、确定未观察到毒效应的剂量水平正确答案:B88、下列哪些形式不属于基因突变A、大段损伤B、颠换C、移码突变D、倒位正确答案:D89、目前普遍认为下述哪一毒作用没有阈值A、致癌作用B、慢性毒作用C、亚慢性毒作用D、致畸作用正确答案:A90、接触化合物的途径不同,其毒性大小的顺序是A、静脉注射>经呼吸道B、静脉注射>腹腔注射C、腹腔注射>经口D、经口>经皮E、以上都是(添加)正确答案:E91、胎仔检测内容有A、外观检查B、骨骼检查C、称重D、以上都是正确答案:D92、最常受到烷化的是鸟镖吟的A、N-6位B、N-5位C、O-7位D、N-7位正确答案:D93、诱导染色体畸变的主要靶分子为A、DNAB、纺睡丝C、中心粒D、微管蛋白正确答案:A94、化学结构与毒效应A、化合物的化学活性决定理化性质B、理化性质决定化合物的生物活性C、化合物的生物活性决定该化合物的化学活性D、化合物的化学结构决定其化学活性及理化性质正确答案:D95、甲烷(CH4)若用C1取代CH4上H后,其毒性最大的是A、CH3C1B、CH2C12C、CHCBD、CC14E、CC13正确答案:D96、慢性毒性试验结束时,将部分实验动物继续留养I-2个月,其目的不包括A、观察受试化学毒物有无后作用B、补充实验动物数目的不足C、观察受试化学毒物有无迟发作用D、对己显变化的指标进行跟踪观察正确答案:B97、毒物引起一半受试对象死亡所需要的剂量A、绝对致死剂量(LD100)B、最小致死剂量(LDO1)C、最大耐受剂量(LDO)D、半数致死剂量(LD50)正确答案:D98、常见的诱导剂有A、苯巴比妥B、3一甲基胆葱C、六氯联苯D、DDT正确答案:A99、致畸作用的毒理学特点是A、无致畸敏感期,计量反应关系曲线陡峭,物种差异明显B、有致畸敏感期,计量反应关系曲线平缓,物种差异明显C、无致畸敏感期,计量反应关系曲线平缓,物种差异明显D、有致畸敏感期,计量反应关系曲线陡峭,物种差异明显正确答案:D100、毒物是A、对大鼠经口LD50 > 500mglkg体重的物质B、凡引起机体功能或器质性损害的物质C、具有致癌作用的物质D、在一定条件下,较小剂量即能对机体发生损害作用的物质正确答案:D。
中山大学2024《实验室与生物安全》原题
中山大学2024《实验室与生物安全》原题中山大学2024年《实验室与生物安全》试题及答案一、选择题1、下列哪个选项最能描述实验室生物安全的重要性?() A. 它保护了实验室工作人员和社区居民的健康 B. 它促进了实验的重复性和准确性 C. 它减少了实验室污染的风险 D. 它确保了实验的顺利进行答案:A2、哪项措施能有效防止实验室内的气溶胶和液滴扩散?() A. 使用防护服 B. 将废弃物正确分类 C. 保持实验室清洁 D. 使用局部排气设备答案:D3、在实验操作中,以下哪个步骤最有可能导致感染?() A. 洗手B. 使用一次性实验器材C. 佩戴个人防护装备D. 将实验过程记录在实验日记中答案:C二、填空题 4. 请填写以下实验操作的风险评估报告中的空白处。
实验名称:小鼠骨髓细胞染色体畸变分析实验步骤:注射放射性物质到小鼠体内,然后收集骨髓细胞进行染色体畸变分析。
实验风险等级:高级实验风险评估:此实验涉及注射放射性物质,存在可能导致()和()的风险。
另外,收集骨髓细胞的过程中也可能导致()和()。
答案:放射性物质的毒性作用;环境污染;细胞采集不成功;染色体畸变分析出现误差 5. 请根据以下实验操作步骤,填写正确的实验名称。
实验名称:XXXX()实验步骤:将样本加入缓冲液中,然后在高温下加热。
答案:未知DNA序列分析(补充完整)三、简答题 6. 请简述如何正确使用实验室的个人防护装备。
答案:使用实验室的个人防护装备时,应首先确保装备符合安全标准,并且适合所进行的实验操作。
在穿戴个人防护装备时,应注意检查各个部件是否紧固,例如头罩、护目镜、手套等是否牢固。
此外,需要确保防护服足够覆盖身体的所有部位,以避免皮肤直接接触化学试剂或其他危险物质。
在实验过程中,要时刻关注个人防护装备的状态,一旦发现任何问题,应立即停止实验并更换损坏的装备。
7、请阐述如何降低实验室生物安全风险。
答案:降低实验室生物安全风险需要采取多种措施。
小鼠骨髓细胞染色体制备
小鼠骨髓细胞染色体制备染色体制备是生物学研究中常用的实验技术之一,通过染色体制备可以获得染色体的形态和结构信息,从而进一步研究其功能和遗传特性。
本文将介绍小鼠骨髓细胞染色体制备的方法和步骤。
一、材料准备1. 小鼠骨髓细胞2. 10% 碘酒3. 0.075M KCl 溶液4. 甲醛溶液(4%)5. 甲基绿染液6. 预热37°C恒温水浴7. 玻片和载玻片夹二、实验步骤1. 将小鼠安乐死并取出骨髓,将骨髓切碎并转移到15ml离心管中。
2. 加入适量的10%碘酒,使得骨髓完全被浸泡,放置室温下静置15分钟,使细胞均匀染色后固定。
3. 使用离心机以1000rpm离心10分钟,将碘酒倒掉。
4. 加入适量的0.075M KCl 溶液,使骨髓细胞悬浮,用离心机以1000rpm离心10分钟,将上清液倒掉。
5. 再次加入适量的0.075M KCl 溶液,使骨髓细胞悬浮,用离心机以1000rpm离心10分钟,将上清液倒掉。
6. 加入适量的甲醛溶液(4%),使骨髓细胞固定,用离心机以1000rpm离心10分钟,将上清液倒掉。
7. 加入适量的甲醛溶液(4%),使骨髓细胞固定,用离心机以1000rpm离心10分钟,将上清液倒掉。
8. 加入适量的甲醛溶液(4%),使骨髓细胞固定,用离心机以1000rpm离心10分钟,将上清液倒掉。
9. 加入适量的甲基绿染液,使骨髓细胞染色,用离心机以1000rpm离心10分钟,将上清液倒掉。
10. 加入适量的甲基绿染液,使骨髓细胞染色,用离心机以1000rpm离心10分钟,将上清液倒掉。
11. 加入适量的甲基绿染液,使骨髓细胞染色,用离心机以1000rpm离心10分钟,将上清液倒掉。
12. 将悬浮的骨髓细胞滴于预热的玻片上,并用载玻片夹轻轻压平。
13. 将载玻片夹放入预热37°C的恒温水浴中,静置10分钟。
14. 将载玻片夹取出,用甲醛固定液稍微洗净,并用酒精进行脱水。
15. 将载玻片夹放入洗净过的甲醛固定液中浸泡10分钟,然后用酒精进行脱水。
小鼠骨髓细胞染色体制备与观察
细胞培养:在适宜的条件下将细胞从体内分离出来进行体外培养 传代:将培养的细胞按照一定的比例进行分装使细胞能够继续生长
制备前的准备:选 择合适的细胞培养 并维持细胞生长。
细胞固定:使用固 定剂将细胞固定在 一定位置防止细胞 移动。
细胞染色:根据实 验需求选择合适的 染色剂进行染色。
观察与拍照:使用 显微镜观察染色后 的细胞并记录照片 。
小鼠骨髓细胞染色体 制备与观察
汇报人:
目录
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实验准备
染色体制备
观察和分析
实验结论
添加章节标题
实验准备
小鼠骨髓细胞
培养基
胰蛋白酶
秋水仙碱
实验仪器:显微镜、离心机、细胞培养皿、细胞 刮刀等
实验试剂:生理盐水、胰蛋白酶、甲醇、冰醋酸、 Giems染料等
准备实验器材:显微镜、染色剂、 细胞培养皿等
染色体测量:使用显微测微尺等工具测量染色体的长度、宽度、着丝粒位置等特征有助于分析染色体的形态和结 构。
染色体组型分析:根据染色体的数目、形态和结构特征进行染色体组型分析有助于了解小鼠骨髓细胞的遗传特征 和变异情况。
染色体核型分析:通过观察染色体的数目、形态和排列方式分析染色体的核型有助于了解小鼠骨髓细胞的染色体 异常和遗传疾病。
实验前要洗手戴手套避免手上的杂 菌污染细胞。
染色体制备过程中要控制好温度和 时间避免温度过高或时间过长导致 细胞死亡。
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染色体制备过程中要保持细胞活性 避免细胞死亡。
染色体制备过程中要选择适当的染 色剂避免使用过多的染色剂导致细 胞死亡。
观察和分析
观察步骤:将制备好的小鼠骨髓细胞染色体放在显微镜下调整焦距观察染色体的形态和分布
细胞毒理学实验五秋水仙素遗传毒性的检测
预冷的玻片
有丝分裂指数(mitoticindex):某一 分裂组织或细胞群中,处于有丝分裂M 期的细胞数占其总细胞数的百分数。
分裂相细胞数 有丝分裂指数 = ————————
细胞总数
有丝分裂指数
实验组(环磷酰胺)
对照组
平均值
取秋水仙素不同剂量组染色体制片,各随机选取3-5个视 野,统计各视野内的有丝分裂指数,并可对结果进行统计 学分析(独立样本T检验),比较两组数据有无显著性差 异。
制备的细胞悬液经过低渗,使染色体能够均匀散开,然 后固定、染色,油镜下镜检。
1.器材:解剖器具、注射器、离心机、离心管、恒 温水浴箱、载玻片、酒精灯等.
2.试剂 0.1%秋水仙素溶液、Carnoy固定液(甲醇: 冰醋酸=3:1;甲醇:冰醋酸=1:1 )、0.075 mol / L KCI溶液、Giemsa染液等。
引颈处死
吸取腹腔液
分别取实验组和对照组小鼠各1只,同时准备好玻片,做 好标记,分别取材,制备腹腔液涂片。
在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水,向其中滴加一滴 腹腔液,静置10分钟,使腹水细胞贴壁,弃去生理盐水, 待其稍干后,进行瑞氏染色(浓染1-2min,淡染3-5min)。
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
1. 掌握小鼠骨髓细胞染色体的制备方法。 2. 了解小鼠染色体的基本特征。 3. 了解染色体畸变的产生机制。
染色体畸变只能在细胞分裂的中期相进行观察和分析。 为了收集足量的中期相细胞,在收获细胞前用秋水仙碱 或者乙酰甲基秋水仙碱处理,从而阻断微管蛋白的聚合, 抑制细胞分裂时纺锤体的形成,使分裂间期和前期的细 胞停留于中期相。
3.材料:小鼠
将小鼠随机 分成两组
实验组 对照组
毒理习题-含答案
第1题:亚慢性毒性试验中一般化验指标有()。
A.血象、肝肾功能B.病理学检查C.灵敏指标的检查D.特异指标的检查E.特异基因的测试【答案】A第2题:接触化合物的途径不同,其毒性大小的顺序是()。
A.静脉注射>经呼吸道B.静脉注射>腹腔注射C.腹腔注射>经口D.经口>经皮E.以上都是【答案】E第3题:目前常用的化学物质有()。
A.500万种B.300万种C.100万种D.10万种E.6~7万种【答案】E第4题:急性,亚慢性,慢性毒性试验分别选择动物年龄为()。
A.初成年,性刚成熟,初断乳B.初断乳,性刚成熟,初成年C.初断乳,初成年,性刚成熟D.初成年,初断乳,性刚成熟E.性刚成熟,初断乳,初成年【答案】A第5题:急性经口染毒,为了准确地将受试物染入消化道中,多采用()。
A.灌胃B.喂饲C.吞咽胶囊D.鼻饲E.饮水【答案】A第6题:最小有作用剂量是()。
A.一种化合物按一定方式与人接触,出现了亚临床症状的最小剂量B.一种化合物按一定方式与人接触造成显微镜下可观察到的损伤的最小剂量C.一种化合物按一定方式与人接触引起免疫功能减低的最小剂量D.DNA大段损伤的最小剂量E.一种化合物按一定时间内,按一定方式与机体接触,使某项指标开始出现异常变化的最低剂量【答案】E第7题:亚慢性毒性试验对动物的要求是()。
A.成年动物B.大鼠100g左右,小鼠15g左右C.大、小鼠,狗,家兔均可用D.必须为啮齿类或非啮齿类动物E.仅使用单一性别【答案】B第8题:碱基转换的后果是出现()。
A.同义密码B.错义密码C.终止密码D.氨基酸改变E.以上都对【答案】E第9题:苯环上的一个氢被烷基取代,其毒性发生改变()。
A.苯对造血功能主要是抑制作用,而甲苯为麻醉作用B.苯主要从呼吸道排泄,对呼吸系统有毒性作用,而甲苯没有C.苯中毒产生过量的儿茶酚胺刺激心肌细胞发生心室颤动,而甲苯没有D.甲苯的肝脏中氧化,对肝有损害作用,而甲苯没有E.苯为致癌物,甲苯为工业毒物【答案】A第10题:化学结构与毒效应()。
染色体畸变和微核检测标准操作文件
染色体畸变和微核检测标准操作文件
微核试验,简单说,就是看看细胞里的小圈圈。
你知道细胞里的小圈圈吗?它们叫微核,是细胞分裂时形成的小东西。
通过看看这些微核的数量和样子,我们就能知道细胞是不是健康。
小鼠骨髓细胞微核试验,就是拿小鼠做实验,看看某种东西会不会让细胞里的微核变多。
这样,我们就能知道这个东西是不是对细胞有害。
染色体畸变,有时候,我们的遗传密码本会出错,这就是染色体畸变。
想象一下,你的遗传密码本就像一本书,但有时候这本书的页码会乱,或者少了几页,这就是染色体畸变。
它可能会导致一些健康问题。
为了了解这种畸变,科学家们会研究小鼠等动物的染色体。
他们会看看染色体是不是完整,数量对不对。
这样,他们就能找出导
致染色体畸变的原因,并找到解决办法。
预防染色体畸变,就像保护一本书。
我们要尽量避免让书受损,保持它的完整。
这样,我们的遗传密码本就能正常工作,我们也就
更健康啦!。
微核实验
项目名称
微核实验、染色体畸变实验
所属实验课程
医学机能实验学
学年度
2006-2007
学期
02
专业分类
临床医学
关键词
创新研究
实验要求
选修
带课教师
夏蕴秋等
实验目的
学会用化学治疗药(环磷酰胺)制备突变模型;学会观察小鼠骨髓嗜多染红细胞微核,计算微核率。设计并了解未知药物的致突变作用。学习动物骨髓细胞染色体标本制作,学会观察小鼠骨髓细胞正常和异常染色体(断裂、裂隙、缺失、粉碎化等),设计并了解未知药物的抗遗传毒性作用。
基本描述
微核实验1.染毒方法:实验分为5组:高、中、低剂量未知药物组;模型组;阴性对照组。每组动物灌胃染毒,模型组用环磷酰胺40mg/kg灌胃,阴性对照组使用等体积的溶剂,实验组分别用高、中、低剂量未知药物与环磷酰胺灌胃。采用30h两次给药法,即两次给受试物间隔24h,第二次给受试物后6h取材。2.骨髓的制取3.涂片4.固定、染色5.封片6.观察与计数先在低倍镜下进行观察,选择分布均习,染色较好的区域,再在油镜下观察计数。PCE细胞呈灰蓝色,正染红细胞(NCE)呈橘黄色。细胞中含有的微核多数呈圆形,边缘光滑整齐,嗜色性与核质一致,至紫红色或蓝紫色。一个细胞内可出现一个或多个微核。计数1000个PCE中含微核的PCE数,并且计数200个细胞中PCE与NCE的比值。7.设计并证明未知药物的致突变作用染色体畸变实验1.动物处理实验分为5组:高、中、低剂量未知药物组;模型组;阴性对照组。每组动物灌胃染毒,模型组用环磷酰胺40mg/kg灌胃,阴性对照组使用等体积的溶剂,实验组分别用高、中、低剂量未知药物与环磷酰胺灌胃,每日灌胃一次,连续灌胃2~4次。在末次给受试物后18~24h取材。2.取材3.低渗处理4.固定5.制片6.镜检在低倍镜下检查制片质量,制片应为全部染色体较集中,而各个染色体分散、互不重叠、长短收缩适中、两条单体分开、清楚地显示出着丝点位置、染色体呈红紫色。用油镜进行细胞中期染色体分析。7、设计并证明未知药物的致染色体畸变作用
毒力测定的方法
毒力测定的方法毒力测定是一种用于评估物质对生物体的毒性的方法。
它在药物研发、环境监测和食品安全等领域具有重要意义。
下面将介绍常用的毒力测定方法,包括急性毒性测定、慢性毒性测定和基因毒性测定。
1.急性毒性测定:急性毒性测定用于评估物质对生物体在短时间内的毒性影响。
常用的急性毒性测定方法包括LD50(半数致死剂量)测定和急性毒性试验。
LD50测定通过给实验动物以不同剂量的物质,观察半数动物死亡所需的剂量,来评估物质对生物体的毒性程度。
急性毒性试验通常使用小鼠、大鼠或其他实验动物,观察物质在短时间内对生物体的影响,包括行为、致死率、体重变化等。
2.慢性毒性测定:慢性毒性测定用于评估物质对生物体长期暴露后的毒性影响。
常用的慢性毒性测定方法包括慢性毒性试验和生殖毒性试验。
慢性毒性试验通过给实验动物长期饮食或注射物质,观察其对生物体的影响,包括生长发育、行为、器官功能等。
生殖毒性试验主要评估物质对生殖能力和胎儿发育的影响,包括种鼠试验和胚胎毒性试验。
3.基因毒性测定:基因毒性测定用于评估物质对基因组的损伤和突变的影响。
常用的基因毒性测定方法包括细菌突变试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变试验和激光束微单带凝胶电泳(COMET)试验。
细菌突变试验通常使用大肠杆菌或沙门氏菌等细菌,观察物质对细菌基因的突变作用。
小鼠骨髓细胞染色体畸变试验通过观察物质对小鼠骨髓细胞的染色体损伤和畸变,评估其对基因组的影响。
COMET试验则通过电泳法测定细胞DNA的断裂和损伤程度,进一步评估物质对基因组的损伤和突变作用。
毒力测定方法在实验过程中应严格遵守伦理原则和实验操作规范。
同时,需要根据实际需求选择合适的物质浓度和实验动物,确保测定结果准确可靠。
此外,还应结合其他相关的生物学指标和实验数据,综合评估物质的毒性。
总而言之,毒力测定方法是评估物质对生物体毒性的重要手段。
各种毒力测定方法在研究领域和监测实践中得到了广泛应用,对保护人类健康和环境安全具有重要意义。
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7.染色:Giemsa染液染色3分钟。
8.阅片:油镜下计数100个中期相细胞,畸变细胞率
四.注意事项
1.骨骺端
2.滴片:距玻片5-8cm。过低染色体分散不开,过高细胞 破裂 3.低渗:时间过长染色体短胖,不清楚;时间过短染色体 不分开。
Thank You for Your Attention
实验四 小鼠骨髓细胞染色体畸变实验
重庆医科大学实验教学管理中心 公共卫生实验教学中心 汪洋
一、实验目的
1.体畸变测定方法
二、实验原理
同微核
微核在有丝分裂后期滞留在细胞核外的遗传物质 染色体畸变只能在细胞分裂中期相进行观察
三、实验步骤
1.染毒:CP腹腔注射(100mg/kg)一次
2.细胞周期同步化:处死前2-3小时腹腔注射秋水仙碱 400mg/L,4mg/kg 3.取样:双侧股骨→PBS(pH6.8)5ml冲洗骨髓腔→离心 1500rpm/min→弃上清
4.低渗:0.075M KCl6ml,37°c孵育15分钟→加入固定液 1ml预固定1分钟→离心1000rpm/min十分钟,弃上清 5.固定:固定液4ml,37°c孵育20分钟→离心十分钟 (1000rpm/min),弃上清。重复一次步骤5. 6.制片:试管内余下约0.5ml,冰冻玻片滴片,干燥。