实验1 光学显微镜的使用及显微绘图共28页
显微镜的使用方法 ppt课件
亚甲基蓝染色
观察
24
扁平上皮细胞
人口腔上皮细胞
2020/12/27
25
扁平上皮细胞
蟾蜍扁平上皮细胞(HE染色)
2020/12/27
26
柱状上皮细胞
蝾螈小肠切片 (HE染色)
2020/12/27
27
星状细胞
离体培养的新生老鼠脊
髓神经细胞(HE染色)
2020/12/27
28
平滑肌细胞
小鼠平滑肌细胞
2020/12/27
29
小鼠肝细胞切片
小鼠肝细胞内DNA的显示(Feulgen反应)
2020/12/27
30
圆形细胞
人血涂片 (Giemsa染色)
(红色箭头示白细胞,兰色箭头示红细胞)
2020/12/27
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细胞形态和显微测量
实验内容
第二部分
细胞的显微测量
细胞的显微测量需要以目镜测 微尺来进行,但其分度值随着放大 倍数的变化而变化,长度也不一样, 因此需要事先进行标定。而镜台测 微尺的长度是已知的,目镜测微尺 的标定是通过镜台测微尺来进行的。
实验报告
描绘在显微镜下观察到的口腔上皮细胞 记录蛙红细胞显微测量结果
2020/12/27
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细胞膜 细胞质 细胞核
蛙红细胞示意图
2020/12/27
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分别记录5个蛙红细胞的长径和短径,并计算平均值。
蛙红细胞测量结果
单位:m
目镜测微尺标定
(1)标定物镜:40
(2)重合线之间,
目镜测微尺
格,镜台测微
油 镜 (90x,100x):1.25,160/0.17
如何计算显微镜的放大倍数?
光学显微镜的使用方法PPT课件
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13
五、收放
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14
练习 1.写有“上”字的玻片标本,视野中看到 的物像是 字。 2.显微镜的目镜5X,物镜10X,放大倍数 是 50倍 ;目镜10X,物镜10X,放大倍数 是 100倍 ;目镜10X,物镜40X,放大倍数 是 400倍 。
3、显微镜的基本操作步骤是_取__镜_安__放_、 _对_光__、放_置__玻_片_标_ 本、 __观_察____、 _收__放___。
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15
; / 电子游戏 ;
续说道:“鞠言战申の影响历,比混元无上级の强者,差太多了.”“如果鞠言战申加入临高王国,那临高王国给鞠言一个大公爵贵族头衔倒是很可能.”又一人道.“呐样吧!俺们也放出消息,可能会授与鞠言战申荣誉大公爵の头衔.”仲零王尪眼申一闪道.大殿内の众人,都看向仲零王尪. 临高王国人员居住之所.“陛下,你找俺?”盛月大臣来到毕微王尪面前.“嗯,之前你与鞠言战申有过几次接触,与他也算熟悉.现在,俺要你将鞠言战申请到呐里来.”毕微王尪对盛月大臣说道.盛月大臣略微迟疑了一下,而后点头道:“是!微臣,呐就去请鞠言战申.”他并未对毕微王尪询 问,请鞠言战申过来做哪个,他大约也能猜到毕微王尪想要做哪个.盛月大臣去找鞠言战申,告知鞠言战申毕微王尪有请.混元王国の王尪客客气气の相请,鞠言自是不能太过托大,所以当即也就随着盛月大臣到了临高王国一行人の居所.当鞠言见到毕微王尪の事候,呐房间内,临高王国来到法 辰王国の贵族大臣也都到齐了.“见过毕微王尪.”鞠言对毕微王尪躬身见礼.“鞠言战申不必多礼.”毕微王尪很客气の笑着对鞠言说道.“不知毕微王尪召俺前来,有何吩咐?”鞠言直接问道.“是呐样の!鞠言战申,先前盛月大臣也是代表临高王国去见过你,俺临高王国希望你能加入王国. 只要你愿意加入,那王国の各种资源将会不吝于用在你の身上.有俺临高王国の全历支持,对你の修行之路将会提供更大の帮助.”毕微王尪温和の声音说道.“毕微王尪,实在是抱歉,临高王国の好意,俺无法接受.”鞠言摇头,再次明确の拒绝了.对于鞠言の拒绝,毕微王尪并未露出不悦の申 色.他请鞠言过来,主要の目の,并不是为了招揽鞠言加入临高王国.之所以说呐番话,也并未抱着多大の希望.“鞠言战申对龙岩国の感情,确实令人赞叹.”毕微王尪点了点头.“俺以及临高王国,都尊叠鞠言战申你の决定.”毕微王尪继续说道:“鞠言战申不愿意离开龙岩国,也没有关系, 但请鞠言战申,务必接受临高王国名誉大公爵の身份!”毕微王尪,显然是已经有了决定.前几日,他就与王国の一些人员商量过呐件事,当事也没有决定.经过几天の考虑,毕微王尪下了决心.当然了,毕微王尪呐么快就作出决定,也与呐几日外面の传闻有关.有传言,法辰王国也是有意要授与 鞠言战申名誉大公爵の身份.毕微王尪,不想被法辰王国抢了先.鞠言一旦接受一个王国名誉大公爵の身份,那么就不能再接受其他王国名誉大公爵身份了.“毕微王尪,呐……”鞠言也琛感意外.鞠言几乎是足不出户の,所以对外面の一些传闻也没有哪个了解.不过,鞠言对混元王国名誉大公 爵の身份,还是有一定了解の.混元空间の七大王国,每一个王国,都有几个名誉大公爵存在.而呐些名誉大公爵,尽皆是混元无上级强者,实历强绝且影响历恐怖.“鞠言战申,万万不要拒绝啊!你成为俺临高王国の名誉大公爵,也并不需要承担哪个义务.而你享受の待遇,与王国大公爵却是一 样の.比如说,鞠言战申也能够使用王国秘境来修炼.鞠言战申,应该知道七大王国の王国秘境吧?整个混元,怕是找不到哪个地方能够与王国秘境相比の修行之地.”毕微王尪加快了语速说道.王国秘境,能够说是一个王国最为叠要の资源,是核心资源.一般来说,王国内只有大公爵以上身份の 人才能使用王国秘境修炼.普通の公爵,都没有使用王国秘境修行の资格.“毕微王尪,不强行要求俺脱离龙岩国加入临高王国?”鞠言看着毕微王尪道.“如果鞠言战申不愿意离开龙岩国,俺们绝不会强求.”毕微王尪点头.“如此……多谢毕微王尪,多谢临高王国の看叠.”鞠言对毕微王尪 拱了拱手.成为临高王国の名誉大公爵,能够得到很多の好处,对自身の修行有着巨大の帮助.并且,还能让鞠言の信息渠道更为宽广.鞠言觉得,如此一来,自身想要找到平衡明混元黑白河の机会可能也会更大一些.既然如此,自身为哪个要拒绝临高王国名誉大公爵の身份呢?(本章完)第三零 零九章一步登天在场の临高王国人员,都向鞠言战申道贺.名誉大公爵,在王国中,身份地位都是极高.临高王国来到法辰王国の人员,除毕微王尪和国家战申之外,其他人员也就是公爵和叠要の大臣,呐些公爵和大臣在鞠言面前那是要低上一头の.当然了,名誉大公爵の授与仪式是挺复杂の, 并不是王尪一句话の事情.现在,临高王国只是与鞠言战申达成了简单の口头形式.严格来说,鞠言还不是临高王国の名誉大公爵.要真正成为名誉大公爵,还需要等战申榜排位赛结束之后,鞠言战申去一趟临高王国の国都,那事候会在临高王国所有叠要人员见证之下完成相关仪式.“鞠言战 申,其他几个王国若也要授与你名誉大公爵の身份,你可就不能答应了啊!”毕微王尪笑着说道.“毕微王尪放心,规矩俺懂得.”鞠言笑着应道.在临高王国人员居住之所又闲谈了片刻,鞠言便是告辞了.毕微王尪等人也好奇鞠言先前为哪个会在混元空间没任何名气,他们想知道鞠言成为龙 岩战申之前是在哪个地方,他们想了解の信息很多,鞠言基本上是避叠就轻.他来自明混元空间,呐信息是绝对不能泄露出去の.“鞠言战申,毕微王尪请你过去说了一些哪个?”当鞠言回到住处后,纪沄国尪立刻就好奇の问道.“临高王国,准备授与俺名誉大公爵の贵族头衔.”鞠言随
实验一显微镜PPT课件
通过本实验,我们不仅掌握了显微镜的使 用技巧,还培养了细致观察和记录实验结 果的能力。
对显微镜使用的体会与建议
显微镜操作需细心
在实验过程中,我们发现显微镜操作需要非常细心,稍有 不慎就可能导致观察结果不准确或损坏显微镜。因此,建 议在操作显微镜时要特别小心谨慎。
增加实践操作机会
虽然本次实验让我们掌握了显微镜的基本操作,但我们认 为增加实践操作机会,多进行一些实验操作,能够更好地 提高我们的实验技能和观察能力。
学习显微镜的使用方法
总结词
学会正确操作显微镜的步骤和方法。
详细描述
使用显微镜时,需要先打开光源,放置样本,调节焦距,观察并调整亮度、对 比度等参数,以确保观察效果最佳。
掌握显微镜的成像原理
总结词
理解显微镜如何将微小物体放大并清 晰呈现的原理。
详细描述
显微镜利用凸透镜的成像原理,将微 小物体放大并清晰呈现,以便观察者 能够看到样本的细节和特征。
在观察植物和动物组织时,我们可以看到不同组织类型的结构特点。例
如,在植物叶片中,我们可以观察到栅栏组织、海绵组织和叶脉等结构;
在肌肉组织中,可以看到肌纤维的排列和横纹。
与理论知识的对比分析
验证理论知识
通过实验观察,我们可以验证课本上所学的理论知识。例如 ,通过观察细胞结构,我们可以验证细胞理论的基本内容; 通过观察微生物的形态,我们可以了解微生物的分类和鉴别 依据。
3
选择样本
选择需要观察的样本,确保其具有代表性。
处理样本
对样本进行必要的处理,如染色、脱水等,以便更好地观察 其结构。
放置样本
将处理好的样本放置在显微镜的载玻片上,确保其平整、稳 定。
显微镜的使用与观察
最新实验一光学显微镜的构造使用和临时装片制作PPT课件
离析液中(95%酒精:浓HCL=1:1)5~10分钟。
3 材料漂洗和染色:将固定离析好的材料用清水漂 洗3~5次,取1个置载玻片上染色2分钟。
4 压片:用镊子尖轻轻捣碎材料,盖片,用镊子背 轻轻垂直敲盖玻片,再覆上一层吸水纸,用双手 拇指垂直下压盖玻片。
(五)植物绘图方法
1 生物绘图的要求:
科学性、真实感、精细而美观、文字标注清晰。
2 生物绘图的基本步骤:
构图:位置、结构特点、大小、比例等 勾画轮廓 用清晰的线条和圆点完成全图 文字标注:引线、结构名称、图的名称
特别注意:必须使用铅笔进行绘图和文字标注
四 实验作业
➢ 进行第一次植物学实验的感想
➢ 绘图:洋葱鳞叶几个表皮细胞, 示植物细胞的基本结构
3 白色体:取大葱叶鞘表皮细胞制作临时 装片观察。
(三)初生纹孔场
取一小块红辣椒,用镊子固定一侧,用刀片将果 肉刮去,直到半透明,观察表皮细胞的初生纹孔场。
(三)胞间连丝
观察柿胚乳永久装片或枣胚乳装片。
(四)后含物
取马铃薯块茎汁液少许制作临时装片,可用稀碘液 染色。
取花生子叶薄片,置载玻片中央,加1滴苏丹Ⅲ染 液染色10分钟,盖片后观察。
三 实验作业 1 绘制你所观察到的表皮细胞和气孔。 2 绘制你所观察到的有色体。 3 绘制你所观察到的初生纹孔场。 4 绘制你所观察到的胞间连丝。
实验三 顶端分生组织和植物细胞 的有丝分裂
一 目的与要求
1 观察掌握顶端分生组织的细胞特征,了解其生 理功能及在植物体上的分布位置。 2 学会根尖压片技术,观察植物细胞有丝分裂全 过程。
实验七 茎的形态结构及其发育
实验一 普通光学显微镜的使用与生物绘图
实验一普通光学显微镜的使用与生物绘图【目的要求】1. 了解显微镜的构造和各部分的性能,学习并掌握正确的使用技术和保养措施;2. 学会制作临时装片、徒手切片的方法。
3.学会绘制生物图。
【材料和用品】显微镜、微藻培养液【实验内容与方法】(一)普通光学显微镜的基本构造、使用方法及保护1、显微镜的基本结构显微镜构造很复杂,种类很多,但基本结构是由机械和光学两大部分构成,现分述如下:1.1 机械部分它是为光学部分服务的部件,包括以下六部分:(1) 镜座:显微镜最下面呈马蹄形或圆形的部分,起稳定和支持显微镜作用。
(2) 镜柱:直立于镜座上的短柱,支持显微镜的其它部分。
(3) 镜臂:弯曲成马蹄形的部分,便于手持,下端与镜柱相连接的地方有一个倾斜关节,可使镜臂倾斜,便于观察。
(4) 载物台:自镜臂下端向前伸出,放置标本用的平台,其中央有一个园孔,叫通光孔。
台上有一移动器(老式的左右各有一个压片夹),用以固定和移动标本。
(5) 镜筒:和镜臂上方连接的园筒部分。
有的显微镜镜筒内有一抽管,可适当抽长,一般长度是160-170mm。
镜筒上端装有目镜,下端有一个可转动的园盘,叫物镜转换器(或叫物镜旋转盘),其上装有2-4 个物镜。
(6) 调焦器:为镜壁上两种可转动的螺旋,一大一小,能使镜筒上下移动,调节焦距。
大的叫粗调焦器,升降镜筒较快,用于低倍镜对焦;小的叫细调焦器,升降镜筒较慢。
1.2 光学部分由接目镜、接物镜、反光镜、聚光器等四部件组成。
(1) 接目镜:装于镜筒上方,由两组透镜构成,接目镜的作用是把接物镜所形成的倒立实像再放大成为一个虚像。
接目镜上刻有5×,8×,10×,15×,25×等符号,表示放大倍数。
我们所观察到的标本的物像,其放大倍数是接物镜和接目镜放大倍数的乘积。
如接物镜是10×,接目镜是8×,其物像的放大倍数是10×8=80 倍。
光学显微镜的使用和显微绘图
2020/4/1
3
资料仅供参考,不当之处,请联系改正。
二、仪器设备及材料
• 1. 光学显微镜/显微照相系统(带油浸物镜) • 2. 目镜测微尺及镜台测微尺 • 3. 香柏油、二甲苯 • 4. 永久装片、擦镜纸
2020/4/1
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资料仅供参考,不当之处,请联系改正。
普通生物显微镜
2020/4/1
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易出现这种现象,应将光线调暗一些后,再观察。
资料仅供参考,不当之处,请联系改正。
2020/4/1
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高倍镜的使用
(1)依照低倍镜操作步骤,先用低倍镜找到清晰物像。 (2)将需要观察的部分移到视野的中央。 (3)眼睛从侧面注视物镜,用手移动转换器,换高倍镜40X。 (4)眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调节钮,直至视野内看到清晰 的物像为止。此时应把聚光器的孔径光阑适当调大,使之与物镜的镜口率相匹 配。光源的强度也应调高。
如按上述操作仍看不到物像时,可能由下列原因造 成: ①观察的部分不在视野内,应在低倍镜下寻找到后 ,移到视野中央,再换高倍镜观察。 ②标本片放反了,应把标本片放正之后,再按上述 步骤操作。 ③焦距没调好,应仔细调节焦距。 如需要更换标本片时,应该先把载物台下降,然后 把标本片移到载物台前方,再取下。
10 0.28 1μm
4供参考,不当之处,请联系改正。
科勒照明
2020/4/1
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优点:视场照明均匀,样品不受热,不产生耀眼眩光,影像清晰。
1893年德国杰出的学者August Kohler提出柯勒照明法。其具体做法:在光源与聚光器之 间,加放一光源聚光镜和视场光阑,光源聚光镜把光线集成光锥,使光源灯成像于聚光器的 孔径光阑平面处。同时,聚光器又使视场光阑成像在样品平面处。由此充分地利用了照明光 源,使点状的光源达到较大的照明,从而使样品得到均匀的照明,并防止了高温。这对显微 摄影和镜检观察至关重要。
实验一 光学显微镜的使用与微生物观察
实验一光学显微镜的使用与微生物观察第一节普通光学显微镜的使用一、实验目的1、了解普通光学显微镜的基本构造和工作原理。
2、学习并掌握普通光学显微镜,重点是油镜的使用技术和维护知识。
3、在油镜下观察微生物的几种基本形态。
二、基本原理(一)普通光学显微镜的构造普通光学显微镜由机械系统和光学系统两部分组成(图1-1)。
1、机械系统机械系统包括镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调节器等。
(1)镜座:它是显微镜的基座,可使显微镜平稳地放置在平台上。
(2)镜臂:用以支持镜筒,也是移动显微镜时手握的部位。
(3)镜筒:它是连接接目镜(简称目镜)和接物镜(简称物镜)的金属圆筒。
镜筒上端插入目镜,下端与物镜转换器相接。
镜筒长度一般固定,通常是160mm。
有些显微镜的镜筒长度可以调节。
(4)物镜转换器:它是一个用于安装物镜的圆盘,位于镜筒下端,其上装有3~5个不同放大倍数的物镜。
为了使用方便,物镜一般按由低倍到高倍的顺序安装。
转动物镜转换器可以选用合适的物镜。
转换物镜时,必须用手旋转圆盘,切勿用手推动物镜,以免松脱物镜而招致损坏。
(5)载物台:载物台又称镜台,是放置标本的地方,呈方形或圆形。
载物台上装有压片夹,可以固定被检标本;有标本移动器,转动螺旋可以使标本前后和左右移动。
有些标本移动器上刻有标尺,可指示标本的位置,便于重复观察。
(6)调节器:调节器又称调焦装置,由粗调螺旋和细调螺旋组成,用于调节物镜与标本间的距离,使物像更清晰。
粗调螺旋转动一圈可使镜筒升降约10mm,细调螺旋转动一圈可使镜筒升降约0.1mm。
图1-1 普通光学显微镜的构造1. 镜座2. 镜臂3. 镜筒4. 转换器5. 载物台6. 压片夹7. 标本移动器8. 粗调螺旋9. 细调螺旋10. 目镜11. 物镜12. 虹彩光阑(光圈)13. 聚光器14. 反光镜2、光学系统光学系统包括目镜、物镜、聚光器、反光镜等。
(1)目镜:它的功能是把物镜放大的物像再次放大。
实验一 普通光学显微镜的使用ppt课件
7.根据自己的观察或操作按时完成实验报告和作业,不得 抄袭他人作业。绘图要求用HB或2B铅笔,文字描述和列 表字迹要工整。
8.实验结束后,应清理实验台面,认真清点整理好用品, 整齐地放回原处。轮流值日清扫室内卫生,关好门窗水电, 经教师允许后方可离开实验室。
实验一 普通光学显微镜的使用
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一、实验目的
1、掌握普通光学显微镜的构造及原理 2、学习并掌握正确的使用方法 3、通过永久装片及新鲜切片观察,掌握一些细胞结构或
细胞活动的特点
2
二、实验内容
(一)显微镜的使用 (二)永久标本片的观察 (三)制作新鲜标本片 (四)作业
3
(一)显微镜的使用
4
显微镜是观察微小物体的精密仪器
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植物根尖纵切(示成熟区) 38
细胞骨架
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(三)制作新鲜标本片
1、胞间连丝的观察 试材:红椒(青椒)
2、叶绿体的观察 试材:菠菜叶
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(四)作业
1、说明普通光学显微镜的构造 2、试分析提高显微镜分辨力的方法 3、绘图
(1)有丝分裂细胞(前、中、后、末四个时期中的 三个)
(2)玉米根尖纵切(示根尖结构,每个区域绘几个 代表性的细胞。)
• ③_加___大__镜__口__角______来提高分辨力。
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(2)放大率 • 显微镜的放大率(V)等于物镜放大率(V1)
和目镜放大率(V2)的乘积,即: V=V1×V2
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3、显微镜
观察
对光:以视野明亮均匀为宜。 调焦:先在低倍镜下,以粗准焦螺旋调,再以细准焦螺旋调。看清楚物象后再
实验一光学显微镜的使用及植物绘图法
实验一光学显微镜的使用及植物绘图法一、目的与要求1、了解光学显微镜的结构和成像原理2、掌握光学显微镜的使用和保养方法3、学习植物绘图法二、材料和用品绘图用品(绘图纸、橡皮、HB或2H铅笔)显微镜、擦镜纸、纱布、二甲苯、蒸馏水、洋葱鳞叶表皮永久装片三、实验内容1、显微镜的结构与成像原理2、显微镜的使用与保养方法3、植物绘图方法四、实验方法与步骤1、显微镜的结构与成像原理显微镜的结构复式显微镜的结构较复杂,由两组以上的透镜所组成,其类型虽然很多,但基本结构和原理是相同的,在结构上分为机械部分和光学部分。
机械部分:显微镜的金属部分即为其机械部分,用于装置光学部分及其它用途,包括以下几部分:(1)镜座:镜座位于显微镜的最下方,是显微镜的底座,与桌面相接触,支持显微镜的全部重量,并使之平稳。
(2)镜臂:镜臂是搬取显微镜的执手,与镜筒、载物台及镜座相连接,分固定式和可倾斜式两种类型。
(3)镜筒:镜筒是镜臂前方的中空圆筒,呈倾斜状态,上端放置目镜,下端连接物镜转换器。
有的显微镜的镜筒与镜臂连接处有齿刻,通过调焦螺旋可以上下升降镜筒,也就是通过镜筒的升降来调焦的。
(4)物镜转换器:物镜转换器固定在镜筒下端的圆盘状结构,有3—4个物镜螺口,装置不同放大倍数的物镜。
旋转物镜转换器时,物镜可以一个换一个地转到正确的位置使用,转动时当听到一声轻微的响声,表示位置已对好。
(5)载物台:载物台又叫镜台或工作台,是位于镜臂前方的一个方形装置,为安放玻片标本用,其中心有一个通光孔,台上还装有安装玻片的夹。
(6)调焦装置:在镜臂上装有粗调焦螺旋(大的一对齿轮)和细调焦螺旋(小的一对齿轮),转动调焦螺旋可使镜筒或载物台上升或下降,从而调节物镜与标本间的距离,达到调焦的目的,使物像清晰。
粗调焦螺旋调节幅度大,用于低倍镜下调焦,细调焦螺旋调节幅度小,用于高倍镜下调焦。
光学部分:是由几组透镜彼此相隔一定的距离,由机械装置把它们连成一个整体,作用是利用光线使实验物体造成放大像。
实验一、显微镜的使用及植物绘图法.
一、实验目的 • 1、掌握光学显微镜结构和使用方法 • 2、学会绘制植物形态结构图 二、材料与用品 • 洋葱鳞片表皮细胞、柿胚乳细胞永久装片、 梨果肉石细胞装片 • 显微镜、擦镜纸、纱布
三、方法步骤
1、光学显微镜的结构及使用(实验教材p152)
目镜
转换器 镜臂 物镜 压片夹 载物台 准焦螺旋 聚光器 镜座 调光器
பைடு நூலகம்
起稿
起稿是勾画轮廓的过程:注意位置、大小,在图板的中央偏 左,其右侧和下方需注解文字。 将绘图纸放在显微镜的右方,左眼观察显微镜图像,右眼看 绘图纸绘图。 绘图起草时先用较软的铅笔(HB),将所观察对象的整体和主 要部分轻轻描绘在绘图纸上,下笔要轻.尽量少改不擦。
定稿 对照所观察的实物,全面检查起稿的草图,进行修正和补充,
显微镜使用步骤(p154-156)
• (1)取镜和安放
• 取镜:一手镜臂,一手镜座,水平移动 • 安放:放在身体略偏左侧,距实验台边缘5cm左右
• (2)对光
• 转换器 低倍物镜(4X或10X) 通光孔 • 左眼目镜,右眼睁开;调节光亮,使视野白亮 2cm
• (3)装片与调节
• 放载玻片,有盖玻片一侧向上,用压片夹压住,物体正对 通光孔中心 • 转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,接近标本2-3cm;再 反向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物象 • 略微转动细准焦螺旋,使物象更清晰 • 转动高倍物镜(40X),看清物象
再用硬铅笔(2H或3H)将草图画出来,之后可将草图擦去。
线条的要求: 线条要均匀、不可时粗时细;线条边缘要圆润、 光滑,不可有深浅和虚实的区别。 点的要求: “点点衬阴”法可显示图像的立体感,更富有形 象相生动性。粗密点用来表示背光、凹陷或色彩 浓重的部位;细疏点用来表示受光面或色彩淡的 部位。点点要圆,用笔尖垂直向下打点,根据明 暗需要掌握点的疏密变化,切忌采用艺术画的写 生画法,不可用涂抹表示树阴。
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实验 1 光学显微镜的使用
及显微绘图
2019/9/20
一、目的要求
2019/9/20
3
• (1)熟悉显微镜的结构和各部件性能。
• (2)掌握低倍镜/高倍镜的正确使用方法,掌 握油镜的使用方法。
• (3)掌握显微绘图的基本方法
• (4)了解细胞的基本结构,动物、植物和微 生物细胞的基本共性和特性
油镜的使用
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应先调低倍镜、高倍镜找到要观察的物像,然后再用油镜观察,操作如下: (1)先用低倍镜观察标本,然后更换高倍镜,把待观察的部分移到视野中央。 (2)把载物台下降约1.5厘米,再把油镜转到工作位置。 (3)在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油。 (4)细心拧动粗调焦螺旋,使载物台慢慢上升。这时要仔细观察物镜前端与标 本之间的距离,先使物镜前端与油滴接触,然后再慢慢使载物台上升,至物镜前 端接近而没有碰到盖玻片为止。这步操作要特别小心,防止油镜压碎标本或损坏 油镜(油镜的工作距离约0.2mm)。 (5)眼睛要看目镜中,拧动细调焦螺旋,使载物台慢慢下降到能看清标本。这 步操作要特别注意不要把细调焦螺旋的方向拧错,以防压碎标本。 (6)看清标本后,把聚光器下的孔径光阑开到它的口径与视场的直径恰好一样 大,使聚光器的镜口率与物镜的镜口率相配合。如果聚光器的镜口率小于物镜的 镜口率,则物镜的镜口率就不能充分发挥。 (7)观察完毕后,下降载物台,把油镜转离光轴,立即作清洁工作。先用干的 擦镜纸擦一、二次,把大部分油去掉,再用二甲苯滴湿的擦镜纸擦两次,最后再 用干擦镜纸擦一次。擦拭时要顺镜头的直径方向,不要沿镜头的圆周擦。擦拭要 细心,动作要轻,不可用力擦。如果聚光器上有滴油也要同样清洁。载玻片上的 油可用“拉纸法”擦净,即把一小张擦镜纸盖在载玻片油滴上,在纸上滴一些二 甲苯,趁湿把纸往外拉,这样连续作3—4次,即可干净。
表1 几种物质的折射率
介质
空气
水
折射率(n) 1.003
1.33
石蜡油 1.47
香柏油 1.515
加拿大树胶 1.515
光学玻璃 1.54
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五、显微镜的使用方法
•使用显微镜的要领就是从低倍物镜开始观 察,先粗调后细调。
在低倍物镜下找到要观察的东西后, 再逐步加大物镜倍数,仔细观察。
(5)换10 X 物镜观察。此时,只须稍稍调节细调节旋钮即可。
低倍镜的使用
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低倍镜的使用
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如果按上述操作步骤仍看不到物像时,可能由以下原因造成: ① 转动调节钮太快,超过焦点。应按上述步骤重新调节焦距。 ② 物镜没有对正,应对正后再观察。 ③ 标本没有放到视野内,应移动标本片寻找观察对象。 ④ 光线太强,尤其观察比较透明的标本片或没有染色的标本时,
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三、显微镜的构造
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• 2.光学系统
三、显微镜的构造
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• 3.显微镜的能力 显微镜的能力是质量和性能的标志。
能力包括分辨率、放大率、焦点深度和视 场宽度等,其中最重要的是分辨率。
R 0.61
N.A.
R:分辨率(分辨的两个点的最短距离), R值愈小,分辨率越大。
λ:照明光线的波长(可见光平均波长 约550nm)。
N.A. nsin
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N.A.:物镜的镜口率 n:物镜和被检物体之间介质的折射率 α:物镜的镜口角(从物镜光轴上的物点所发出 的光线与物镜前透镜有效直径边缘所张的角度)。
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表1 在550nm光波下不同物镜的分辨距离
放大倍数(×) 镜口率(N.A.) 分辨距离(d)
如按上述操作仍看不到物像时,可能由下列原因造 成: ①观察的部分不在视野内,应在低倍镜下寻找到后 ,移到视野中央,再换高倍镜观察。 ②标本片放反了,应把标本片放正之后,再按上述 步骤操作。 ③焦距没调好,应仔细调节焦距。 如需要更换标本片时,应该先把载物台下降,然后 把标本片移到载物台前方,再取下。
四、油镜的原理
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• 油镜(油浸系物镜,通常有黑圈或Oil的标志),以香 柏油或石蜡油为介质。这类油的折射率与玻璃的折射率 大致相同。光线从被检物体直接射入物镜,其间因折射 或反射而引起的光线损失很小,所以可以充分利用镜口 角,显著提高物镜的分辨率。
• 油镜(镜口率一般在1.25左右)的分辨率在0.2m左右,这就是 光学显微镜的分辨极限。
低倍镜的使用
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(1)检查:各部件有无损坏,如发现问题,立即报告教师请求处理。 (2)准备:将显微镜放于前方略偏左侧以便观察。打开电源开关,观察 底座的光路中是否有光亮。慢慢调节同一旋钮,光线应逐步增强。转动粗调 节钮,将载物台下降使物镜与载物台距离略拉开。再旋转物镜转换器,将低 倍镜4 X对准载物台中央的通光孔(可听到“咔哒”声)。 (3)放标本片:标本片标签面向上,用标本夹夹好,把要观察的部分移 到通光孔的正中央。 (4)调节焦距:边从目镜中观察,边调节粗聚焦旋钮,使载物台缓慢上 升,直至视野中出现物像为止。如物像不太清晰,可转动细调节钮,使物像 更加清晰。
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细胞生物学实验
1 光学显微镜的使用及显微绘图 2 细胞膜的渗透性观察 3 液泡系的超活染色与观察 4 Feulgen反应制作细胞DNA定性、定
量测定样品
5 减数分裂的观察 6 植物染色体标本的制备
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7 动物染色体标本的制备 8 考马斯亮蓝染色显示细胞
骨架 9 细胞凝集反应及细胞吞噬 10 细胞融合 11 染色体分带技术
易出现这种现象,应将光线调暗一些后,再观察。
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高倍镜的使用
(1)依照低倍镜操作步骤,先用低倍镜找到清晰物像。 (2)将需要观察的部分移到视野的中央。 (3)眼睛从侧面注视物镜,用手移动转换器,换高倍镜40X。 (4)眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调节钮,直至视野内看到清晰 的物像为止。此时应把聚光器的孔径光阑适当调大,使之与物镜的镜口率相匹 配。光源的强度也应调高。
二、仪器设备及材料
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• 1. 光学显微镜/显微照相系统(带油浸物镜) • 2. 目镜测微尺及镜台测微尺 • 3. 香柏油、二甲苯 • 4. 永久装片、擦镜纸
普通生物显微镜
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显微照相系统
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三、显微镜的构造
• 1.机械部分
支持和调节光学系统
Charge-coupled Device
10 0.28 1μm
40 0.65 0.42μm
100 1.25 0.22μm
科勒照明
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优点:视场照明均匀,样品不受热,不产生耀眼眩光,影像清晰。
1893年德国杰出的学者August Kohler提出柯勒照明法。其具体做法:在光源与聚光器之 间,加放一光源聚光镜和视场光阑,光源聚光镜把光线集成光锥,使光源灯成像于聚光器的 孔径光阑平面处。同时,聚光器又使视场光阑成像在样品平面处。由此充分地利用了照明光 源,使点状的光源达到较大的照明,从而使样品得到均匀的照明,并防止了高温。这对显微 摄影和镜检观察至关重要。