支原体肺炎血清学试验被动凝集法作业指导书
被动凝集法检测肺炎支原体
被动凝集法检测肺炎支原体
肺炎支原体抗体检测
人体感染肺炎支原体后, 首先出现 IgM 类抗体，IgM 类抗体一般在感染后1 周出现,2~4周达高峰, 后逐渐降低，可持 续数月。IgG类抗体于感染后20天左右 出现，感染一个月左右达高峰，在体内 可维持1.5~2年。
肺炎支原体抗体检测
MP感染判断标准：
被动凝集法
原理： 是用表面吸附了MP抗原的明胶 颗粒代替动物红细胞制成致敏人工 明胶颗粒，再与人血清中存在的MP 抗体产生凝集反应。
被动凝集法
优点：
1.操作简单快速，设备要求低，结果判读容 易，过夜后再判读不发生显著变化。 2.消除红细胞载体引起的非特异性凝集。 3.特异性、灵敏性较高。 4.血清MP抗体滴度与MP感染者病情的严重 程度呈正相关。
被动凝集法
被动凝集法
被动凝集法
被动凝集法
被动凝集法
阳性对照：MP抗体滴度为1:320
被动凝集法
被动凝集法
缺点：
1.检测总抗体。 2.该试验仅用于检测MP抗体，而非 直接检测MP，因而阳性结果并不能确诊 是MP感染。 3.假阴性。
被动凝集法
被动凝集法
Байду номын сангаас
被动凝集法
判定：
滑的圆形。→（-）
肺炎支原体抗体检测(被动凝集法)
肺炎支原体抗体检测（被动凝集法）1.目的：规范实验室肺炎支原体抗体检测操作。
2.范围： xxxx院xxxx科3.测定原理：将肺炎支原体（Mac株）的细胞膜成分致敏人工载体明胶粒子制造而成。
这种致敏粒子和样本中的肺炎支原体抗体进行反应发生凝集，由此可以检测出血清和血浆中的肺炎支原体抗体，并且用来测定抗体的效价。
4.标本：4.1采用正确医用技术收集血清/血浆样本，血浆样本推荐使用肝素钠抗凝血浆，枸橼酸钠和EDTA抗凝剂。
4.2样本中的沉淀物和悬浮物，红细胞等其它有形成分可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。
4.3严重溶血或脂血的样本不能用于测定。
4.4样本收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本放置在2~8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。
使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。
5.试剂：珠海丽珠试剂股份有限公司提供的试剂。
5.1试剂盒在2℃—10℃储存，防止冷冻，避免强光照射，有效期12个月。
5.2 试剂盒开启使用后，冷冻干燥品配好后，2℃—10℃保存可使用7日，使用前必须做对照试验。
5.3试剂组成5.3.1血清稀释液（液体）：用于稀释样品和复溶致敏粒子和未致敏粒子。
5.3.2致敏粒子（冷冻干燥）：肺炎支原体（Mac株）抗原致敏的明胶粒子。
使用时加入规定量的血清稀释液。
复溶后的试剂含有0.9%的致敏粒子。
5.3.3未致敏粒子（冷冻干燥）鞣化的明胶粒子冻干制品。
使用时加入规定量的血清稀释液。
5.3.4阳性对照血清（液体）肺炎支原体（Mac株）抗体阳性的兔血清用血清稀释液1:10稀释后的制品。
6.临床标本测定6.1试剂的准备6.1.1溶解液（液体）：按照测定操作规则使用。
6.1.2血清稀释液（液体）：按照测定操作规则使用。
6.1.3致敏粒子（冷冻干燥）：加入一定量的溶解液进行调制。
请在使用前30分钟于室温（15~30℃）下进行调制。
日本富士试剂盒被动凝集法检测肺炎支原体讲义课件
实验结果可以帮助医生选择合适的 抗生素，指导用药。
实验中遇到的问题
06
及解决方案
实验失败的原因及解决方法
原因一
实验操作不当。解决方法：仔细 阅读实验操作步骤，确保每一步
都正确无误。
原因二
试剂盒过期或失效。解决方法： 检查试剂盒的生产日期和保质期 ，确保试剂盒在有效期内使用。
原因三
样本采集不规范。解决方法：确 保样本采集严格按照规定进行，
结果观察
观察反应过程中溶液的颜色变化和沉淀情况，根据说明书判 断结果。
实验结果分析
04
结果判读及注意事项
实验结果判读
根据试剂盒的说明书，结合肺炎支原体 的特异性抗体滴度，判断实验结果是否 阳性或阴性。
VS
注意事项
实验过程中需注意试剂盒的有效期、储存 条件、操作方法等，确保实验结果的准确 性。
阳性结果的确认及处理
样本的处理和加样
样本收集
按照试剂盒说明书的要求 收集样本，如血清、血浆 等。
样本处理
将样本进行离心、分离等 处理，以去除杂质和干扰 因素。
加样
将处理后的样本加入试剂 盒中的相应孔位，加入适 量的试剂，并轻轻摇动混 匀。
孵育和结果观察
孵育
将加样后的试剂盒放置在适宜的温度下孵育一定时间，以促 进反应进行。
如果复查结果仍为阴性，则可排除肺炎支原 体感染的可能性。医生应根据患者的病情进 行对症治疗。
实验结论及数据分
05
析
数据记录及处理
记录每组实验数据
包括阴性和阳性对照孔的数据，以及待测样本孔的数据。
处理数据
计算出阴性和阳性对照孔的平均值，再根据公式计算出待测样本孔的OD值。
被动凝集法检测肺炎支原体抗体在小儿肺炎支原体感染诊断中的应用
成血栓预防工作 好・
质量督导检查是保证各项措施 有效落实的重要手段 ， 质
控组定期对科 室预 防措 施进行督导检查 ， 并走 访每一位全髋
干预组 Ｄ Ｖ Ｔ发生 率和死 亡率 均显 著低于 对照 组 ， 取得 了良
被动凝集法检测肺炎支原体抗体在ｓ ｂ Ｊ Ｌ 肺炎支原体感染诊断 中的 应 用
叶 秀仪 （ 东莞市桥头镇桥头人民医院检验科 ， 广东 东莞 ５ ２ ３ ０ ０ ０ ）
摘要 ： 选 取我 院收治的 ９ Ｏ例 疑似 肺炎支原体感 染的患儿 ， 采用被 动凝集法 检测肺炎 支原体抗体 ， 分 析 比较不 同性 别、 年龄 、 季节 的阳性率 。９ Ｏ例 患儿 中 ， 总阳性率 ３ ５ ． ６ ％。其 中 ， 男性 抗体 阳性率 为 ３ ２ ． １ ％， 女性 中抗体 阳性 率为 ４ ２ ． ５ ％， 男女 比例差异 明显 ＜ ０ ． ０ ５ ） ； 夏季肺炎支原体抗体 阳性率 为 ２ １ ． ７ ％， 冬季 为 ５ Ｏ ． １ ％， 两者差异 明显０ Ｐ ＜ Ｏ ． ０ ５ ） ， 春、
秋季为 ３ ３ １ ３ ％ 及３ ５ ． １ ％． 差异不明显 尸 ＞ ０ ． ０ ５ ） ； ３ 岁以下组的 阳性率为 ２ ３ ． ８ ％， ３ ５ 岁 阳性率为 ５ ０ ． ０ ％。 ５ 岁 以上组 阳性
率６ ６ ． ７ ％。 可见年龄不同阳性率有所差异 ） ＜ Ｏ ． ０ ５ ） 。运用被动凝集法对肺炎支原体抗体进行检测 ， 对ｄ ， Ｊ Ｌ 肺炎支原体 感染具有重要的诊断意义。 ’
炎支原体引起呼吸道感染 的同时 ． 还易并发其他 的肺 外系统
肺炎支原体抗体明胶凝集试验标准操作程序
肺炎支原体抗体明胶凝集试验标准操作程序肺炎支原体抗体明胶凝集试验标准操作细则1、目的对肺炎支原体抗体明胶凝集试剂使用进行必要的细化和补充，以规范本试剂的操作程序，正确使用本试剂,保证检测结果准确。
2、适用范围操作适用于采用肺炎支原体抗体明胶凝集试剂的所有操作。
3、试剂厂家日本富士公司4、工作程序（一）、原理利用纯化的肺炎支原体抗原包被明胶颗粒，此致敏的明胶颗粒将与人血清或血浆中的肺炎支原体抗体结合产生可见的凝集反应。
本试剂有如下优点：（1）操作简便，无需特殊设备。
即可对单个标本进行检测，也可用于大规模普查。
（2）反应时间短：孵育时间仅3小时，随后肉眼观察结果。
（3）高度特异性：本试验中所用的载体为人工制造的明胶颗粒，由富士公司独创。
与其它同类试剂中所用的生物载体相比（如TPHA 中的红细胞），最大限度地降低了非特异凝集反应。
（二）、试剂盒内容“A”稀释液（Sample Diluent）用于溶解致敏颗粒“B”和非致敏颗粒“C”及标本的稀释。
“B”致敏颗粒（Sensitized Particles）：为冻干粉，用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀。
是包被有肺炎支原体抗原的明胶颗粒。
“C”非致敏颗粒（Unsensitized Particles）：为冻干粉，用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀。
“D”阳性对照（Positive Control）：为含肺炎支原体抗体的兔血清制成，最终滴度1:320。
其试验方法与定量试验同，可稀释至第7或第8孔则可。
必要时才做此对照试验。
滴管（25μl /滴）：1个，分别用于致敏颗粒（“B”液）或非致敏颗粒（“C”液）的吸取，请勿混用。
U型微孔板2块需自备的材料：刻度吸管，微量移液器及吸头，托盘式混匀器（注：不可用涡旋式振荡器）（三）、试验方法：用U形反应板1、定性试验孔序 1 2 3 4加血清稀释液“A”（μl）100 25 25 25血清标本（μl）25 →25 → 25 → 25 →弃去25μl标本稀释度 1:5 1:10 1:20 1:40加非致敏颗粒“C”（μl） 25致敏颗粒“B”（μl）25血清终滴度1:40 1:80置微型振荡器振摇1分钟，置有盖湿盒内，室温静置3小时后观察结果。
被动凝集法
被动凝集法
被动凝集法是一种用于检测抗体或抗原的间接凝集反应，此方法中，可溶性抗原（或抗体）被吸附在载体微粒的表面，然后与相应的抗体（或抗原）发生作用，在适宜的电解质存在的条件下，出现特异性的凝集现象。
以肺炎支原体MP的检测为例，被动凝集法主要用于检测肺炎支原体感染。
灵敏度很高，而且简便、快捷、价格便宜，它用于临床常规的检测和筛查。
目前的正常值是1:40，如果大于1:40就存在弱阳性，如果大于1:80，就是肺炎支原体抗体检测阳性。
但请注意，如果肺炎支原体检测是阳性的，并不能说明就是肺炎支原体的急性感染。
因为肺炎支原体抗体感染一般是7-10天就可以出现，20天左右就能出现长期的抗体，而7-10天出现的是短期的IgM 抗体。
这种IgM抗体最长可以持续一年，甚至有达到两年的记录。
因此，我们判断这个患者是不是有肺炎支原体急性的感染，要根据他的临床症状来加以分析和判断。
被动凝集法检测肺炎支原体ppt课件
样本保存
将采集的样本放入无菌试 管中，加入适量的运输培 养基或生理盐水，密封后 冷藏保存。
样本处理
将采集的样本在实验室内 进行离心、分离、稀释等 处理，以备后续实验使用 。
实验操作步骤及判读结果
实验操作步骤 1. 将处理后的样本与特异性抗体致敏的载体颗粒混合。
2. 在适宜温度下孵育一定时间，使抗体与抗原充分反应。
05
被动凝集法检测肺炎支原 体的实验结果分析
实验结果的判读与分析方法
定量结果分析
根据被动凝集法测得的OD值进行定量结果分析，判断肺炎支原体 抗体滴度。
阳性判断标准
根据OD值和阳性判断标准，确定血清中是否含有肺炎支原体抗体 。
抗体滴度与感染程度关系
根据抗体滴度判断感染程度，并确定相应的治疗措施。
实验结果异常情况的处理与解释
被动凝集法是血清学检测中的一 种方法，具有快速、简便、灵敏
度高等优点。
02
被动凝集法检测肺炎支原 体原理
被动凝集法的定义和原理
被动凝集法是一种基于抗原抗体结合 的检测方法，通过将特异性抗体与可 溶性抗原结合，形成可见的凝集反应 ，从而实现对目标病原体的检测。
在被动凝集法中，使用已知的特异性 抗体与可溶性抗原进行反应，如果存 在目标病原体，抗体将与抗原结合并 形成可见的凝集反应。
根据凝集反应结果，可以判断是否存在肺炎支原体感染。
如果出现凝集反应阳性，提示可能存在肺炎支原体感染，需要进一步进行其他实验室检查以 确诊。
被动凝集法检测肺炎支原体具有快速、简便、灵敏度高等优点，是临床常用的诊断方法之一 。
03
被动凝集法检测肺炎支原 体的应用
在临床上的应一种快速、简便的 检测肺炎支原体的方法，常用于 临床诊断和疗效监测。
被动凝集法检测肺炎支原体
缺点：
一．检测总抗体。
二．该试验仅用于检测MP 抗体，而非直接检测MP， 因而阳性结果并不能确 诊是MP感染。
三．假阴性。
被动凝集法
被动凝集法
被动凝集法
判定：
1.颗粒呈纽扣状聚集，呈现出外周边缘均
匀且平滑的圆形。→（-）
2.粒子形成小环状，呈现出外周边缘均匀且平 滑的圆形。→（±）
单/击/此/处/添/加/副/标/题/内/容
被动凝集法检测肺炎支原体
汇报人姓名
汇报日期
肺炎支原 体抗体检 测
人体感染肺炎支原体后, 首先出现IgM 类 抗体，IgM 类抗体一般在感染后1 周出 现,2~4周达高峰, 后逐渐降低，可持续数 月。IgG类抗体于感染后20天左右出现， 感染一个月左右达高峰，在体内可维持 1.5~2年。
被 动 凝 集 法
被 动 凝 集 法
被动凝集 法
被动凝集 法
被动凝集法
阳性对照：MP抗体滴度为1:320
被动凝集法
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3.粒子环明显变大，其外周边缘不均匀且杂乱 地凝集在周围。→（+）
4.产生均一的凝集，凝集粒子在底部整体上呈 膜状延展。→（++）
1.
2.
3.
被动凝集法
一．判定标准： 二．阳性：样品与未致敏粒子（最终稀释倍数1:20）的反应图像判定为（-）；而与致敏粒子（最终稀释倍 数1:40）的反应图像判定为（+）或（++），则结果判定为阳性。将显示出反应图像为（+）时的最终稀 释倍数作为抗体滴度。 三．阴性：不论样品与未致敏粒子呈现何种反应图像，只要与致敏粒子（最终稀释倍数1:40）的反应图像 显示为（-），则结果判定为阴性。 四．保留（-）；（±）
肺炎支原体抗体明胶凝集试验标准操作程序
肺炎支原体抗体明胶凝集试验标准操作细则1、目的对肺炎支原体抗体明胶凝集试剂使用进行必要的细化和补充，以规范本试剂的操作程序，正确使用本试剂,保证检测结果准确。
2、适用范围操作适用于采用肺炎支原体抗体明胶凝集试剂的所有操作。
3、试剂厂家日本富士公司4、工作程序（一）、原理利用纯化的肺炎支原体抗原包被明胶颗粒，此致敏的明胶颗粒将与人血清或血浆中的肺炎支原体抗体结合产生可见的凝集反应。
本试剂有如下优点：（1）操作简便，无需特殊设备。
即可对单个标本进行检测，也可用于大规模普查。
（2）反应时间短：孵育时间仅3小时，随后肉眼观察结果。
（3）高度特异性：本试验中所用的载体为人工制造的明胶颗粒，由富士公司独创。
与其它同类试剂中所用的生物载体相比（如TPHA 中的红细胞），最大限度地降低了非特异凝集反应。
（二）、试剂盒内容“A”稀释液（Sample Diluent）用于溶解致敏颗粒“B”和非致敏颗粒“C”及标本的稀释。
“B”致敏颗粒（Sensitized Particles）：为冻干粉，用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀。
是包被有肺炎支原体抗原的明胶颗粒。
“C”非致敏颗粒（Unsensitized Particles）：为冻干粉，用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀。
“D”阳性对照（Positive Control）：为含肺炎支原体抗体的兔血清制成，最终滴度1:320。
其试验方法与定量试验同，可稀释至第7或第8孔则可。
必要时才做此对照试验。
滴管（25µl /滴）：1个，分别用于致敏颗粒（“B”液）或非致敏颗粒（“C”液）的吸取，请勿混用。
U型微孔板2块需自备的材料：刻度吸管，微量移液器及吸头，托盘式混匀器（注：不可用涡旋式振荡器）（三）、试验方法：用U形反应板1、定性试验孔序 1 2 3 4加血清稀释液“A”（μl）100 25 25 25血清标本（µl）25 →25 → 25 → 25 →弃去25μl标本稀释度 1:5 1:10 1:20 1:40加非致敏颗粒“C”（µl） 25致敏颗粒“B”（µl）25血清终滴度1:40 1:80置微型振荡器振摇1分钟，置有盖湿盒内，室温静置3小时后观察结果。
血清抗MP-IgM检测法和被动凝集法对小儿肺炎支原体感染检验的准确性分析
血清抗MP-IgM检测法和被动凝集法对小儿肺炎支原体感染检验的准确性分析发布时间：2023-06-07T11:11:42.163Z 来源：《医师在线》2023年2月3期作者：张倩云[导读]血清抗MP-IgM检测法和被动凝集法对小儿肺炎支原体感染检验的准确性分析张倩云（常州市儿童医院；江苏常州213000）【摘要】目的：对比分析小儿肺炎患儿在支原体感染检验中使用血清抗MP-IgM检测法、被动凝集法的准确性。
方法：选择60例小儿肺炎患儿，存在支原体感染，选择病例的时间是2022年1-12月，随机数字表法分组后，每组患者例数相同，在观察组30例患儿的支原体感染检验中使用被动凝集法，而对照组患儿30例使用血清抗MP-IgM检测法，对比两组患儿的组间数据，主要是阳性率。
结果：在观察组患儿中，男女阳性率的差异性不大，无统计学意义P＞0.05；对比6岁以上患儿，3岁以内、3-6岁患儿的阳性率均明显更低，有统计学意义（P＜0.05）。
对比对照组患儿，观察组患儿的阳性率明显更高，有统计学意义，P＜0.05。
结论：小儿肺炎患儿在支原体感染检验中使用血清抗MP-IgM检测法、被动凝集法的准确性不同，后者明显更高，临床应用价值明显更高，患儿可以及时获得对症治疗，避免对病情治疗造成延误。
【关键词】血清抗MP-IgM检测法；被动凝集法；小儿肺炎；支原体感染检验；准确性临床常见小儿肺炎患儿，为了有效提升患儿的治疗效果，应对如何检验患儿的支原体感染进行探讨。
目前来说，临床在支原体感染检验中使用血清抗MP-IgM检测法、被动凝集法[1]。
本组实验选择60例患儿，对比分析小儿肺炎患儿在支原体感染检验中使用血清抗MP-IgM检测法、被动凝集法的准确性。
1 资料和方法1.1资料从我院选择60例小儿肺炎患儿进行数据研究，选择病例的时间是2022年1-12月，随机数字表法分组后，n=30，在观察组患儿中，男女是16/14，年龄11个月到8岁，均（5.2±1.4）岁，其中3岁以内、3-6岁、6岁以上患儿的例数是14例、12例、4例，在对照组患儿中，男女是15/15，年龄10个月到7岁，均（5.1±1.3）岁，其中3岁以内、3-6岁、6岁以上患儿的例数是13例、11例、6例。
被动凝集法检测肺炎支原体ppt课件
对实验数据进行统计和分析，以评估实验结 果的可靠性和准确性。
重复实验
对于关键实验结果，应进行重复实验以验证 结果的稳定性。
方法学评价
定期对实验方法进行评价，以发现潜在问题 并不断完善实验方法。
避免误差和干扰因素
减少操作误差
通过培训和实践提高实验人员的操作 技能，减少操作误差。
控制环境因素
该方法操作简便，结果易 于判断，适用于临床快速 检测。
灵敏度和特异性
被动凝集法具有较高的灵 敏度和特异性，能够准确 检测肺炎支原体感染。
02
实验准备
实验材料准备
血清样本
来自待检患者，需分离血清， 避免溶血、污染和脂血等干扰 因素。
阳性对照血清
来自已确诊肺炎支原体感染的 患者，用于验证实验的准确性 和可靠性。
被动凝集法检测肺炎支原体ppt课件
汇报人： 日期:
目 录
• 引言 • 实验准备 • 实验步骤与操作 • 结果判定与解读 • 临床意义与应用价值 • 注意事项与质量控制
01
引言
肺炎支原体概述
01
02
03
肺炎支原体
一种常见的呼吸道病原体 ，可引起肺炎等呼吸道感 染疾病。
传染途径
主要通过飞沫传播，也可 通过接触传播。
临床症状
包括咳嗽、发热、头痛、 乏力等。
检测方法及原理
检测方法
常用的检测方法包括培养法、 PCR法、血清学方法等。
原理
通过检测肺炎支原体的特异性抗 原或抗体，判断是否感染肺炎支 原体。
被动凝集法简介
被动凝集法
一种血清学检测方法，利 用特异性抗体与肺炎支原 体抗原结合形成凝集物的 原理进行检测。
肺炎支原体抗体检测(被动凝集法)
肺炎支原体抗体检测（被动凝集法）1.目的：规范实验室肺炎支原体抗体检测操作。
2.范围： xxxx院xxxx科3.测定原理：将肺炎支原体（Mac株）的细胞膜成分致敏人工载体明胶粒子制造而成。
这种致敏粒子和样本中的肺炎支原体抗体进行反应发生凝集，由此可以检测出血清和血浆中的肺炎支原体抗体，并且用来测定抗体的效价。
4.标本：4.1采用正确医用技术收集血清/血浆样本，血浆样本推荐使用肝素钠抗凝血浆，枸橼酸钠和EDTA抗凝剂。
4.2样本中的沉淀物和悬浮物，红细胞等其它有形成分可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。
4.3严重溶血或脂血的样本不能用于测定。
4.4样本收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本放置在2~8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。
使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。
5.试剂：珠海丽珠试剂股份有限公司提供的试剂。
5.1试剂盒在2℃—10℃储存，防止冷冻，避免强光照射，有效期12个月。
5.2 试剂盒开启使用后，冷冻干燥品配好后，2℃—10℃保存可使用7日，使用前必须做对照试验。
5.3试剂组成5.3.1血清稀释液（液体）：用于稀释样品和复溶致敏粒子和未致敏粒子。
5.3.2致敏粒子（冷冻干燥）：肺炎支原体（Mac株）抗原致敏的明胶粒子。
使用时加入规定量的血清稀释液。
复溶后的试剂含有0.9%的致敏粒子。
5.3.3未致敏粒子（冷冻干燥）鞣化的明胶粒子冻干制品。
使用时加入规定量的血清稀释液。
5.3.4阳性对照血清（液体）肺炎支原体（Mac株）抗体阳性的兔血清用血清稀释液1:10稀释后的制品。
6.临床标本测定6.1试剂的准备6.1.1溶解液（液体）：按照测定操作规则使用。
6.1.2血清稀释液（液体）：按照测定操作规则使用。
6.1.3致敏粒子（冷冻干燥）：加入一定量的溶解液进行调制。
请在使用前30分钟于室温（15~30℃）下进行调制。
最新 肺炎支原体
肺炎支原体抗体检测（被动凝集法）1 目的熟悉肺炎支原体检测（被动凝集法）标准操作规程，以便于更加规范化的操作，提高免疫检验质量，保证结果的准确性。
2 适用范围适用于免疫室内肺炎支原体检测（被动凝集法）检测3 职责检验科主任负责组织人员制定肺炎支原体检测（被动凝集法）标准操作程序，免疫室组长负责组织人员具体实施。
4 该SOP变动程序本标准程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，，并报经下述人员批准签字：专业组长、科主任。
5 测定原理：本试剂是一种检测肺炎支原体抗体的体外诊断试验，它用肺炎支原体（Mac 株）细胞膜成分致敏人工明胶粒子制造而成。
本试剂试验是基于以下原理：致敏粒子与人血清中存在的肺炎支原体抗体发生凝集反应。
2标本采集：随机静脉血2mL，分离血清备用。
也可使用血浆标本进行检测。
标本宜新鲜，无污染，避免无溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。
3标本存放：室温放置不超过8小时，2-8℃不超过72小时，-20℃可长期保存(应伟血清或血浆)，应避免反复冻融。
4标本运输： 2-8℃密闭运输。
5标本拒收条件：蛋白变性标本，标本中含有颗粒物质，细菌污染、严重溶血或止血标本不能作测定。
6试剂6.1试剂名称：肺炎支原体抗体检测试剂盒（被动凝集法）6.2试剂生产厂家：FUJIREBIO INC(富士瑞必欧株式会社)6.3包装规格：5次定量测试×5（25人份）6.4试剂盒组成：完整的试剂盒提供下列试剂和附带器具血清稀释液（液体）致敏粒子（冻干）未致敏粒子（冻干）阳性对照（液体） 5次定量测试×530ml×１瓶 1.5ml×５瓶0.5ml×３瓶0.5ml×１瓶6.4.1血清稀释液（液体）用于稀释样品盒复溶致敏粒子及未致敏粒子6.4.2 致敏粒子（冻干）肺炎支原体（Mac株）抗原致敏的明胶粒子冻干制品。
使用时加入规定量的血清稀释液。
复溶后的试剂含0.9%致敏粒子。
被动凝集法检测肺炎支原体
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判定标准与方法
采用间接血凝法（IHA）进行检测， 将肺炎支原体抗原致敏的红细胞与待 测血清混合，观察红细胞凝集情况。
根据红细胞凝集程度判断抗体滴度， 进而判定是否感染肺炎支原体。
结果记录与分析
01
02
03
04
记录每份血清的检测结果，包 括滴度值和凝集程度。
对阳性结果进行分析，结合临 床其他检查结果，判断是否确
被动凝集法检测原理
抗体与抗原的结合
01
02
03
抗体
是免疫球蛋白，能够识别 并特可以是一种微生物、毒素 、蛋白质等
抗体与抗原的结合
是特异性的结合，只有当 抗体与抗原相对应时才会 发生结合
凝集反应的原理
凝集反应
是一种通过观察颗粒性抗原或抗 体凝集成肉眼可见的颗粒来判断 抗原-抗体结合的反应
被动凝集法检测肺炎 支原体
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目录
• 肺炎支原体简介 • 被动凝集法检测原理 • 实验操作流程 • 结果解读与判定 • 被动凝集法的优缺点 • 应用与展望
01
肺炎支原体简介
肺炎支原体的特性
一种常见的肺炎支原 体，属于细菌领域。
高度多态性，存在多 种血清型。
无细胞壁，革兰染色 阴性。
诊为肺炎支原体感染。
对阴性结果进行分析，排除肺 炎支原体感染的可能性。
对临界值结果进行分析，结合 临床其他检查结果，判断是否 存在肺炎支原体感染的可能性
。
05
被动凝集法的优缺点
优点：简便、快速、经济、有效
简便
快速
被动凝集法是一种简便快捷的检测方法， 操作相对简单，不需要复杂的仪器设备， 方便在基层医疗单位或实验室内进行。
被动凝集法检测肺炎支原体抗体的临床应用及流行病学分析
被动凝集法检测肺炎支原体抗体的临床应用及流行病学分析目的：探讨被动凝集法检测肺炎支原体抗体的临床应用及流行病学分析。
方法对2012年11月～2013年10月在我院2038份疑似肺炎支原体感染者进行SERODIA-MYCO Ⅱ被动凝集法检测血清抗体，判断肺炎支原体感染者并分析其流行病学资料，包括总阳性率、年龄组差异、季节阳性率差异及不同标本来源阳性率差异等。
结果2038份临床疑似肺炎支原体感染者中，MP阳性405例，总阳性率19.9%，其中0～2岁，2～4岁，4～6岁，6～8岁，8～14岁，14～60岁，>60岁的各年龄段的阳性率分别为17.9%，28.2%，31.7%，37.7%，15.5%，15.1%，7.3%，其中6～8岁组阳性率最高；不同季度MP阳性率分别为第一季度（1～3月），第二季度（4～6月），第三季度（7～9月），第四季度（10～12月）分别为23.9%，14.7%，14.5%，25.1%，第一、四季度总阳性率为24.5%，第二、三季度总阳性率为14.6%感染率，两者之间差异有统计学意义（X2=4.382，P＜0.05）。
结论第一、四季度和6～8岁学龄儿童分别是MP感染的最高季节和高峰年龄组；儿科门诊是MP感染者来源最高的科室。
标签：肺炎支原体；抗体；被动凝集法；临床应用；流行病学分析肺炎支原体（mycoplasma pneumoniao，MP），是引起呼吸道感染的一种病原体，所引起的人类支原体肺炎病理变化以间质性肺炎为主，平时散在发病，主要经飞沫传染，在幼儿园、学校、家庭等流行。
首先引起上呼吸道感染，然后下行引起气管炎、支气管炎、毛细支气管炎和肺炎，同时也可引起肺外并发症，如脑膜炎、脑干炎、脊髓炎等[1]。
MP培养所需营养比一般细菌高，生长缓慢，培养时间长。
而用SERODIA-MYCO Ⅱ被动凝集法检测血清肺炎支原体抗体，操作简单，3个小时就可以报告结果，为临床提供信息，及时治疗。
肺炎支原体核酸荧光PCR法与血清 被动凝集法的比对分析
肺炎支原体核酸荧光PCR法与血清被动凝集法的比对分析目的：探讨肺炎支原体核酸荧光PCR法与血清学抗体检测—被动凝集法的比对关系。
方法：将有咳嗽、低热、X线胸片检查有肺纹理增粗的急性上呼吸道感染的0—12岁的患儿700例分别获取咽拭子进行核酸荧光PCR法检测和静脉抽血进行血清学抗体检测。
结果：上述700例患儿中，肺炎支原体核酸荧光PCR 法阳性率和灵敏度在0—4岁阶段明显高于血清学检验，4—12岁阶段阳性率低于血清学检验但特异性明显高于血清学检验。
结论：核酸荧光PCR法具有早期、快速、特异等优点，血清被动凝聚法灵敏度和特异性都较低，特别是婴幼儿免疫系统还未发育完善，产生抗体的速度较慢，抗体量不够，易产生假阴性。
标签：肺炎支原体荧光PCR检测血清学抗体检测被动凝聚Comparative Analysis OfMycoplasma PneumoniaeNucleic Acid Fluore-scentPCRAnd SerumPassive AgglutinationShu MeilianDepartment OfHunanProvinceYuanling County Hospital Of Traditional Chinese MedicineAbstract:Objective: Discussion oninspection/Mycoplasma pneumoniaenucleic acid fluorescentPCRandserum antibody ofPassive AgglutinationMethod relations.Method: There are 700cases of cough,fever,chest X-rayexamination isthe lung texture increasesacute upper respiratory tractInfectionofcoarseaged 0 to12years oldchildren,who got thepharynx swabs ofnucleic acidfluorescent PCR detectionandvenous bloodserumanti-body detection.Results: The above 700cases,Mycoplasma pneumoniae?DNAby fluorescent PCRpositive rate andsensitivity in0to 4 years oldstagewas higher than that ofserological test, 4to 12 years oldstagepositive rate of less thanserological testsbutthe specificity was higher thanseroLogiCaltest.Conclusions: Nucleic acid fluorescentPCR methodwith early,rapid,specific advantages. Serum passivecoacervationsensitivity and specificityare low,especially theinfantimmune systemdevelopment has not been perfect,antibody producingslower,antibodyis not enough,easy to producefalse negative.Key words:Mycoplasma pneumoniae Fluorescent PCR detectionSerumantibody detectionPassivecondensation支原体是1898年Nocard等发现的一种类似细菌，但不具有细胞壁的原核微生物[I]，肺炎支原体是人类支原体肺炎的病原体。
被动明胶颗粒凝集法检测血清中肺炎支原体结果分析
被动明胶颗粒凝集法检测血清中肺炎支原体结果分析
张艳
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2012(033)019
【摘要】目的分析该院2011年肺炎支原体(MP)检测情况.方法采用被动明胶颗粒凝集法对2011年该院疑为MP感染的患者进行血清MP抗体检测,并将结果根据季节、性别、年龄分别进行统计学分析.结果 2011年检出MP阳性者631例,阳性率15.99%.春季MP阳性检出率高于其他季节,差异有统计学意义(P<0.01).女性共检出MP阳性者291例,阳性率19.36%,男性共检出MP阳性者340例,阳性率13.92%,差异有统计学意义(P<0.01).青少年组(7～17岁)的阳性检出率高于其他年龄组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 MP感染的发病与季节、性别、年龄有密切关系,成年人的发病率日益增高,应考虑将MP检测列为呼吸道感染性疾病的常规检测项目.
【总页数】2页(P2402-2403)
【作者】张艳
【作者单位】中国人民解放军第252医院检验科,河北保定,071000
【正文语种】中文
【相关文献】
1.被动颗粒凝集法检测1890例儿童肺炎支原体抗体分析 [J], 欧静德;邓国生;何江
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3.酶联免疫吸附法、甲苯胺红不加热血清试验、明胶颗粒凝集法检测梅毒血清抗体
比较 [J], 王娴;黄潇苇;曾着黎;牟皎;程莉惠
4.被动颗粒凝集法检测1890例儿童肺炎支原体抗体分析 [J], 欧静德;
5.胶体金法和被动颗粒凝集法在儿童肺炎支原体感染检测中的应用比较 [J], 宋秦伟;葛梦蕾;王娅琳;崔菲菲;马丽娟
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被动凝集法实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 理解被动凝集反应的原理和过程。
2. 掌握被动凝集法的操作步骤。
3. 学会观察和分析实验结果。
4. 提高免疫学实验技能。
二、实验原理被动凝集反应是一种抗原抗体反应，当可溶性抗原与相应的抗体结合时，在适当条件下（如电解质存在），会出现凝集现象。
本实验采用被动凝集法检测肺炎支原体抗体。
三、实验材料1. 实验试剂：肺炎支原体抗体检测试剂盒（被动凝集法）、0.85%生理盐水、蒸馏水、待测血清。
2. 实验仪器：微量移液器、微量反应板、试管、振荡器、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备试剂：将肺炎支原体抗体检测试剂盒中的试剂按照说明书要求配置成工作液。
2. 标本采集：取待测血清2mL，分离血清备用。
3. 加样：将待测血清加入微量反应板孔中，每孔加入50μL。
4. 加入抗原：向每孔中加入50μL肺炎支原体抗原。
5. 混匀：轻轻振荡反应板，使血清和抗原充分混合。
6. 观察结果：在室温下放置30分钟，观察并记录结果。
7. 结果判定：根据凝集程度判断结果。
凝集程度分为4级：- 阳性（++）：出现明显的颗粒状凝集。
- 阳性（+）：出现轻微的颗粒状凝集。
- 阴性（-）：无凝集现象。
- 不确定：凝集程度介于+和-之间。
五、实验结果与分析1. 阳性结果：实验结果显示待测血清中出现明显的颗粒状凝集，说明患者体内存在肺炎支原体抗体，可能感染了肺炎支原体。
2. 阴性结果：实验结果显示待测血清中没有出现凝集现象，说明患者体内不存在肺炎支原体抗体，未感染肺炎支原体。
3. 不确定结果：实验结果显示凝集程度介于+和-之间，需要重复实验或进行其他检测方法进行确认。
六、实验讨论1. 本实验采用被动凝集法检测肺炎支原体抗体，该方法具有简便、快速、灵敏等优点。
2. 实验过程中，应注意以下几点：- 试剂和标本应新鲜，避免反复冻融。
- 操作过程应规范，避免污染。
- 观察结果时，应仔细分析，避免误判。
3. 本实验结果与临床诊断结果一致，说明被动凝集法在肺炎支原体检测中具有较高的准确性。
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支原体肺炎血清学试验被动凝集法作业指导书
1.原理
本试剂是一种检测肺炎支原体抗体的体外诊断试验，它用肺炎支原体细胞膜成分致敏人工明胶粒子制造而成。
本试剂试验室基于如下原理：致敏粒子与人血清中存在的肺炎支原体抗体发生凝集反应。
2.标本采集
2.1标本种类：血清
2.2标本要求：新鲜，无溶血，无脂血。
2.3标本存放：室温﹤8小时，4℃—8℃存﹤48小
时。
3.试剂组合
3.1U型微量反应板：FASTEC。
3.2血清稀释液（液体）：30ml*1瓶。
3.3致敏粒子（冻干）：1.5ml*5瓶。
3.4未致敏粒子（冻干）：1.5ml*5瓶。
3.5阳性对照（液体）：0.5ml*1瓶。
4.操作方法
4.1用一支校准的滴管，向第1孔加100ul，向第
2-第8孔各加25ul血清稀释液。
4.2用微量移液管向第1孔中滴加25ul样品。
4.3用加样器或移液管，从第1孔至第8孔进行对倍
稀释。
4.4用试剂盒中提供的一支滴管向第2孔中滴加
25ul未致敏粒子，用试剂盒中提供的另一支滴管向第3孔至第8孔各滴加25ul致敏粒子。
4.5用平板混合器混合各孔中内容物约30秒，以便
充分混匀。
给反应物加盖。
5.结果判断：在室温下静置3小时，然后在平板观测
器上读取凝集图像。
6.操作性能：特异性，灵敏度，重复性，相关性。
7.结果处理
7.1若结果失败，则重复测试，并作质控校正。
7.2若失控，则重检试剂盒。
8.方法局限性
8.1溶血、脂血结果有影响。
8.2观察结果对弱阳性存在差异。
9.临床意义：肺炎支原体（MP）是引起呼吸道感染的
常见病原微生
物，它除可引起非典型肺炎外，常可引起呼吸道感染、气管炎、支气管炎、淋巴结炎，也可引起肺大泡、肺脓肿，另外，它还可引起其他系统并发症，如心肌炎、心包炎、脑膜炎、关节炎、胃炎、溶血性贫血等，由于MP对一般治疗肺炎的药物有耐药性，因此，及时进行检查有助于诊断及治疗。