土壤全氮测定(半微量开氏法)

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土壤全氮测定法半微量开氏法

V0── 滴定空白时所用酸标准溶液的体积， ml；
CH── 酸标准溶液的浓度，mol/L； 0.014── 氮原子的毫摩质量； m── 烘干土样质量，g。
• 6.2 平行测定结果，用算术平均值表示，保留小数点后三位。 6.3 平行测定结果的相差：土壤含氮量大于0.1％时，不得超过0.005％；含氮 0.1～0.06％时，不得超过0.004％；含氮小于0.06％时，不得超过0.003％。
• 5.3.3 或0.01mol/L盐酸标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为红紫色。
• 记录所用酸标准溶液的体积（ml）。
• 空白测定所用酸标准溶液的体积，一般不得超过0.4ml。
• 6 测定结果的计算
6.1 计算公式
土壤全氮（％）＝〔（V－V0） ×CH×0.014/m〕×100
式中：V──滴定试液时所用酸标准溶液的体积，ml；
• 3 试剂
3.1 硫酸（GB 625—77）：化学纯； 3.2 硫酸（GB 625—77）或盐酸（GB 622—77）：分析纯，0.005mol/L硫酸或 0.01mol/L盐酸标准溶液； 3.3 氢氧化钠（GB 629—81）：工业用或化学纯，10mol/L氢氧化钠溶液；
• 3.4 硼酸-指示剂混合液； 3.4.1 硼酸（GB 628—78）：分析纯，2％
• 5.2 土样消煮 5.2.1 不包括硝态和亚硝态氮的消煮：将土样送入干燥的开氏瓶底部，加少量无
离子水（约0.5～1ml）湿润土样后，加入2g加速剂和5ml浓硫酸，摇匀。将开氏瓶置于消煮炉上消煮2h。消煮完毕，冷却，待蒸馏。在消煮土样的同时，做两份空白测定，除不加土样
外，其他操作皆与测定土样时相同。
• 5.3 氨的蒸馏 5.3.1 蒸馏前先检查蒸馏装置是否漏气，并

土壤全氮磷钾快速测定实验方法

土壤全氮磷钾快速测定实验方法土壤全氮磷钾快速测定实验方法一般测定土壤全氮、磷、钾都是分开测定的，但是我们可以通过统一消煮、定容，然后再从定容液中分别取出一部分分别测定全氮、全磷、全钾，这样的话我们就节约了大量的时间。

而且消煮好的消煮液可以放两三天而不会影响测定结果。

消化：称量0.25mm 土样1.0000g 于消化管中，加少量蒸馏水湿润，加5ml 浓硫酸，再加6~8滴高氯酸，消化至消化液呈亮蓝色，定容至100ml ，待用。

一、全N(半微量开氏法)1 蒸馏定氮将消化液定量转入蒸馏瓶中，加水至约200ml 。

沿瓶内壁加30ml 浓碱，蒸馏20min ，以25mlH 3BO 3 溶液吸收(其中加2滴定氮混合指示剂)。

用硫酸标准溶液滴定。

同时做空白实验。

2 结果计算))(21(00.1400.14))(21(/)(0420421V V SO H c m V V SO H c kg g N -=?-=?-ω 二、全P1.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml 容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。

轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸(定量试纸)将溶液滤入干燥的100ml 三角瓶中。

同时做空白试验。

2.吸取滤液2—10ml 于50ml 容量瓶中，用水稀释至30ml ，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H 2SO 4)溶液调节pH 至溶液刚呈微黄色。

3.加入钼锑抗显色剂5ml ，摇匀，用水定容至刻度。

4.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm 的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P —mg/L 数。

5.工作曲线的绘制。

分别吸取5mg/L 标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml 于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml ，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。

即得0，0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,mg/LP 标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。

土壤全氮、全磷测定

土壤全氮的测定（半微量开氏法）一、方法及原理开氏法分为样品的消煮和消煮液中铵态氮的定量两个步骤。

（1）样品的消煮样品用浓硫酸高温消煮时，各种含氮有机化合物经过复杂的高温分解反应转化为铵态氮（硫酸铵），这个复杂的反应，总称为开氏反应。

上述消煮不包括全部硝态氮，若需包括硝态氮和亚硝氮的全部测定，应在样品消煮前，先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮，再用还原铁粉使全部硝态氮还原而转化成铵态氮。

由于土壤中硝态氮一般情况下含量极少，故可忽略不计。

（2）消煮液中铵的定量消煮液中的铵态氮可根据要求和实验室条件选用蒸馏法，扩散法或比色法等测定。

常用的蒸馏法是将含(NH4)2SO4 的土壤消煮液碱化，使氨逸出，用硼酸溶液吸收，然后用标准酸溶液滴定硼酸中吸收的氨。

计算土样中全氮的含量。

硼酸吸收NH3 的量，大致可按每ml 1%H3BO3 最多能吸收0.46mgN 计算。

如1ml 2%的H3BO3 最多可吸收1×2×0.46 ≈1mgN。

三、试剂配制（1）浓H2SO4 （分析纯、比重1.84）（2）10molL-1 NaOH 210g 分析纯分析纯NaOH 放入研质烧杯中加水约200ml，搅动，溶解后转入硬质剂瓶中，加塞，防止吸收空气中的CO2。

放置几天，待Na2CO3 沉降后，将清液虹吸到盛有约80ml 无CO2 的水的硬质瓶中，加水至500ml。

瓶口装一碱石棉管，以防吸收空气中的CO2。

（3）0.01molL-1HCl 标准溶液先将8.5ml 浓HCl 加水至1 升，用硼砂（Na2B4O7 ⋅10H2O）或160℃烘干的Na2CO3 标定其浓度（约0.1molL-1HCl）。

然后用水准确稀释10 倍后使用。

（4）溴甲酚绿—甲基红混合指示剂0.5g（或0.099g）溴甲酚绿、0.1g（或0.066g）甲基红于玛瑙研钵中，加入少量95%乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95%乙醇至100ml。

总氮测定

中华人民共和国国家标准土壤全氮测定法（半微量开氏法）中华人民共和国国家标准土壤全氮测定法（半微量开氏法）Method for the determinationof soil total nitrogen(Semi-micro Kjeldahl method)UDC 631.423GB 7173－87本标准适用于测定土壤全氮含量。

1 适用范围样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为铵态氮。

碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括全部硝态氮）。

包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化成铵态氮。

2 仪器、设备2.1 土壤样品粉碎机；2.2 玛瑙研钵；2.3 土壤筛：孔径1.0mm（18目）；0.25mm（60目）；2.4 分析天平：感量为0.0001g。

2.5 硬质并氏烧瓶：容积50ml，100ml；2.6 半微量定氮蒸馏装置；2.7 半微量一管：容积10ml、25ml；2.8 锥形瓶：容积150ml；2.9 电炉：300W变温电炉。

3 试剂3.1 硫酸（GB 625－77）：化学纯；3.2 硫酸（GB 625－77）或盐酸（GB 622－77）：分析纯，0.005mol/L硫酸或0.01mol/L盐酸标准溶液；3.3 氢氧化钠（GB 629－81）：工业用或化学纯，10mol/L氢氧化钠溶液；3.4 硼酸－指示剂混合液；3.4.1 硼酸（GB 628－78）：分析纯，2%溶液（W/V）；3.4.2 混合指示剂：0.5g溴甲酚绿（HG3－1220－79）和0.1g甲基红（HG3－958－76）于玛瑙研钵中，加入少量95%乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95%乙醇至100ml。

使用前，每升硼酸溶液中加入20ml混合指示剂，并用稀碱调节至红紫色（pH值约4.5）。

土壤全氮的测定-开氏法

土壤全氮测定 ——半微量开氏法【方法原理】样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机物，经过复杂的高温分解反应，转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。

碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出土壤全氮量（不包括全部硝态氮）。

在高温下硫酸是一种强氧化剂，能氧化有机化合物中的碳，生成CO 2，从而分解有机质。

↑+↑+−−→−+22242222CO SO O H C SO H 高温样品中的含氮有机化合物，如蛋白质在浓H 2SO 4的作用下，水解成为氨基酸，氨基酸又在H 2SO 4的脱氨作用下，还原成氨，氨与H 2SO 4结合成为硫酸铵留在溶液中。

Se 的催化过程如下：O H SO SeO H Se SO H 22324222+↑+−→−+O H SeO SeO H 2232++−→−↑+−→−+22CO Se C SeO由于Se 的催化效能高，一般常量法Se 粉用量不超过0.1～0.2g ，如用量过多则将引起氮的损失。

4232432424)()(SO H SeO NH SeO H SO NH +−→−+↑+++−→−223324292)(3N O H Se NH SeO NH以Se 作催化剂的消煮液，也不能用于氮磷联合测定。

硒是一种有毒元素，在消化过程中，放出H 2Se 。

H 2Se 的毒性较H 2S 更大，易引起人中毒。

所以，实验室要有良好的通风设备，方可使用这种催化剂。

↑+↑+↑+−→−++∆O H CO SO SO Cu SO H C CuSO 222424242342234↑+↑+−→−+2244242222SO O H CuSO SO H SO Cu褐红色蓝绿色当土壤中有机质分解完毕，碳质被氧化后，消煮液则呈现清澈的蓝绿色即“清亮”，因此硫酸铜不仅起催化作用，也起指示作用。

土壤全氮有机碳的测定

土壤全氮的侧定-半微量开式法试剂（1）硫酸。

p =1.84g-mL-i,化学纯；（2）10moi-L-i NaOH溶液。

称取工业用固体NaOH420g,于硬质玻璃烧杯中，加蒸馏400mL溶解，不断搅拌，以防止烧杯底角固结，冷却后倒入塑料试剂瓶，加塞，防止吸收空气中的CO2,放置几天待Na2cO3沉降后，将清液虹吸入盛有约160mL无CO2的水中，并以去CO2的蒸馏水定容1L加盖橡皮塞。

（3）甲基红一澳甲酚绿混合指示剂。

0.5g澳甲酚绿和0.1g甲基红溶于100mL乙醇中。

（4）20g.L-1 H2BO3一指示剂。

20g H2BO3（化学纯）溶于1L水中，每升H2BO3溶液中加入甲基红一澳甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，此时该溶液的pH为4.8。

指示剂用前与硼酸混合，此试剂宜现配，不宜久放。

（5）混合加速剂。

K2sO4：CuSO4：Se=100:10:1 即100g K2sO4（化学纯）、10g CuSO4 -5H2O （化学纯）、和1g Se粉混合研磨，通过80 号筛充分混匀（注意戴口罩），贮于具塞瓶中。

消煮时每毫升H2sO4 加0.37g混合加速剂。

（6）0.02 mol-L-1（1/2 H2sO/ 标准溶液。

量取H2SO4 （化学纯、无氮、p =1.84g-mL-1）2.83mL，加水稀释至5000mL，然后用标准碱或硼砂标定之。

（7）0.01 mol-L-1（1/2 H2sO4）标准液。

将0.02 mol-L-1（1/2 H2SO4）标准溶液用水准确稀释一倍。

（8）高镒酸钾溶液。

25g高镒酸钾（分析纯）溶于500mL无离子水，贮于棕色瓶中。

（9）1:1硫酸（化学纯、无氮、p=1.84g-mL-i）。

硫酸与等体积水混合。

（10）还原铁粉。

磨细通过孔径0.15mm（100号）筛。

（11）辛醇。

测定步骤（1）称取风干垃圾（通过孔径0.149mm筛）1.0000g［含氮约1mg］，同时测定土样水分含量。

土壤全氮测定-半微量凯氏定氮法

土壤全氮测定（半微量凯氏定氮法）1. 试剂配制：○1混合加速剂：K 2SO 4 CuSO 4 硒粉以100:10:1混合研细，过80网筛 ○2浓H 2SO 4 ○340%NaOH 溶液：400g NaOH 溶于1L 水中 ○4甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：0.5g 溴甲酚绿和0.1g 甲基红溶于100ml 乙醇 ○5硼酸溶液：20g 硼酸溶于1L 水中，使用前没1000ml 硼酸加10ml 甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，以稀NaOH 或者HCl 调成红色，PH=4.8，即为硼酸指示剂混合溶液。

○61mol/L 的HCl 溶液：量取84ml 的浓盐酸，用水定容至1L 。

○70.02mol/L 的盐酸标准溶液：吸取20ml 1mol/L HCl 溶液于1L 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，用0.02mol/L （1/2Na 2B 4O 7）标准溶液滴定。

0.02mol/L （1/2的Na 2B 4O 7）标准溶液：1.9068g 硼砂(Na 2B 4O 7 ·H 2O)溶于水中，至500ml 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。

吸取20ml 0.02mol/L （1/2Na 2B 4O 7）硼砂于100ml 锥形瓶中，加一滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，用掉标定的HCl 溶液滴定，溶液由蓝变红为终点，同时做3个重复。

盐酸标准溶液浓度C=02102.0V V V -⨯ 0.02为硼砂标准溶液浓度V 2为滴定硼砂用去HCl 标准溶液体积V 1为标准硼砂溶液体积2. 操作步骤○1称量2g 土放入100ml 凯氏瓶，加入混合加速剂2g ，加水润湿，在家5ml 浓H 2SO 4○2消煮： 380℃ 2.5h ○3蒸馏：稀释水15ml ，硼酸20ml ，NaOH 30ml 5mins ○4滴定：蓝绿→紫红3. 计算 N(%)=100014.0)(0⨯⨯⨯-烘干土重C V V（C 为HCl 标准溶液浓度）。

土壤农化实验：土壤总氮测定——半微量凯氏法

土壤总氮测定——半微量凯氏法
目的和要求
❖ 1.学习凯氏定氮法的原理。 ❖ 2.掌握微量凯氏定氮法的操作技术，包括标
准硫酸铵含氮量的测定、未知样品的消化蒸馏、滴定及其含氮量的计算等。
实验原理
❖ 土壤、天然有机物（如蛋白质、核酸及氨其酸等）等的含氮量用凯氏定氮法来测定。
❖ 当天然含氮有机物与浓硫酸共热时，分解出氮、二氧化碳及水。氮转变出的氨与硫酸化合生成硫酸铵。分解反应进行得很慢，可加入硫酸铜及硫酸钾或硫酸钠促进之，其中硫酸铜为催化剂，硫酸钾或硫酸钠可提高消化液的沸点。氧化剂过氧化氢也能加速反应。
实验流程
样品消化蒸馏吸收滴定
实验流程
1.样品消化
(1)准确称取1g左右的干燥土样作为本实验的样品。
(2)准备2个50ml的凯氏烧瓶，并标号，向第1号烧瓶内各加入土样1g，1ml蒸馏水湿润土样后，加入催化剂（K2SO4CuSO4·5H2O-Se）2g，浓硫酸5mL。注意加样品时应直接送入烧瓶底部，切勿沾于瓶口及瓶颈上。向2号烧瓶加入 1ml蒸馏水和与1及2号瓶相同的催化剂和浓硫酸，作为空白对照，测量试剂中可能含有的微量含氮物质，以对样品进行校正。
❖ 消化完了后，在凯氏定氮仪中加入强碱碱化消化液，使硫酸铵分解，放出氨。用水蒸汽蒸馏法，将氨蒸入过量标准无机酸溶液中，然后用标准碱溶液进行滴定，准确测定氨量，从而折算出含氮量。
❖ 以甘氨酸为例，该过程的化学反应如下：
❖ 测定时常用硼酸溶液收集氨，氨与溶液中的氢离子结全，生成铵离子，使溶液中氢离子浓离降低。然后再用标准强酸滴定，直至恢复溶液中原来氢离子浓度为止。所用的强酸的当量数即相当于被测样品中氨的当量数。
2蒸馏、吸收
(1)于150ml锥形瓶中，加入20g.L-1硼酸-指示剂混合液5ml，放在冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上3-4cm处。然后向蒸馏室内缓缓加入10mol.L-1NaOH溶液20ml，通入蒸汽蒸馏，待馏出液体积பைடு நூலகம்50ml时。即蒸馏完毕。

半微量凯氏【土壤总氮测定】

水中，摇匀备用。
⑥ HCl标准溶液：0.01000mol/L。 ⑦甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：0.5g溴甲酚绿和
0.1g甲基红溶于100ml乙醇中。
主要仪器：
如图，凯氏定氮蒸馏装置。 50mL消化管 50mL容量瓶分析天平电炉小玻璃珠 3mL微量滴定管烘箱 1000mL蒸馏烧瓶远红外消煮炉
(3)小心摇匀后，按图安装消化装置，置于电炉上，加曲颈漏斗，在通风橱内加热消化。
(4)消化时先以小火缓慢加热，待内容物完全炭化、泡沫消失后，加大火力保持瓶内液体微沸，消化至溶液呈蓝绿色透明后，再继续加热微沸1h，取下冷却，用少量无离子将消煮液全部转入蒸馏器内，并用水洗涤开氏瓶4-5次，并入蒸馏器中，混匀备用。同时做试剂空白试验。
消化完了后，在凯氏定氮仪中加入强碱碱化消化液，使硫酸铵分解，放出氨。用水蒸汽蒸馏法，将氨蒸入过量标准无机酸溶液中，然后用标准碱溶液进行滴定，准确测定氨量，从而折算出含氮量。
以甘氨酸为例，该过程的化学反应如下：
测定时常用硼酸溶液收集氨，氨与溶液中的氢离子结全，生成铵离子，使溶液中氢离子浓离降低。然后再用标准强酸滴定，直至恢复溶液中原来氢离子浓度为止。所用的强酸的当量数即相当于被测样品中氨的当量数。
本法适用的范围为0.2-1.0mg氮。相对误差应小于±2%。
试剂
①浓硫酸
②混合加速剂：K2SO4：CuSO4:Se=100：10；1 。即磨1，0存0g于K具2S塞O瓶4,,1中0，g C消u煮SO时4每.5H毫2O升和H21SgOS4e加粉0混.3合7g研加速剂
④氢氧化钠溶液：400g/L ⑤硼酸吸收液：20g/L，称取20g硼酸溶解于1L热
此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写）； 14—氮原子的摩尔质量(g.mol-1)； 10-3 —将ml换算为L； m—烘干土样的质量（g)

土壤全氮测定

土壤全氮测定法方法一：半微量开氏法1 测定原理样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为铵态氮。

碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括全部硝态氮）。

2 仪器、设备2.1 土壤样品粉碎机；2.2 玛瑙研钵；2.3 土壤筛：孔径1.0mm（18目）；0.25mm（60目）；2.4 分析天平：感量为0.0001g；2.5 硬质开氏烧瓶：容积50ml，100ml；2.6 半微量定氮蒸馏装置；2.7 半微量滴定管：容积10ml，25ml；2.8 锥形瓶：容积150ml；2.9 电炉：300W变温电炉。

3 试剂3.1 硫酸（GB 625—77）：化学纯；3.2 硫酸（GB 625—77）或盐酸（GB 622—77）：分析纯，0.005mol/L硫酸或0.01mol/L 盐酸标准溶液；3.3 氢氧化钠（GB 629—81）：工业用或化学纯，10mol/L氢氧化钠溶液；3.4 硼酸-指示剂混合液；3.4.1 硼酸（GB 628—78）：分析纯，2％溶液（W/V）；3.4.2 混合指示剂：0.5g溴甲酚绿（HG3—1220—79）和0.1g甲基红（HG3—958 —76）于玛瑙研钵中，加入少量95％乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95％乙醇至100ml。

使用前，每升硼酸溶液中加20ml混合指示剂，并用稀碱调节至红紫色（pH值约4.5）。

此液放置时间不宜过长，如在使用过程中pH值有变化，需随时用稀酸或稀碱调节之。

3.5 加速剂：100g硫酸钾（HG 3—920—76，化学纯），10g五水合硫酸铜（GB 665 —78，化学纯），1g硒粉（HG3—926—76）于研钵中研细，必须充分混合均匀。

3.6 高锰酸钾溶液：25g高锰酸钾（GB 643—77）溶于500ml无离子水，贮于棕色瓶中；3.7 1∶1 硫酸；3.8 还原铁粉：磨细通过孔径0.15mm（100目）筛；3.9 辛醇。

半微量凯氏【土壤总氮测定】

此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写）； 14—氮原子的摩尔质量(g.mol-1)； 10-3 —将ml换算为L； m—烘干土样的质量（g)
注意：
蒸馏时实验室中切忌有碱性雾气（如氨），否则将严重地影响实验结果的准确度。
一般应使样品中含氮量为1.0-2.0mg。如果土壤含氮量在2g.kg-1以下，应称土样1g；含氮量在2.04.0g.kg-1 ，应称0.5-1.0g；含氮量在4.0 g.kg-1应称土样0.5g 。
本法适用的范围为0.2-1.0mg氮。相对误差应小于±2%。
试剂
①浓硫酸
②混合加速剂：K2SO4：CuSO4:Se=100：10；1 。即磨1，0存0g于K具2S塞O瓶4,,1中0，g C消u煮SO时4每.5H毫2O升和H21SgOS4e加粉0混.3合7g研加速剂
④氢氧化钠溶液：400g/L ⑤硼酸吸收液：20g/L，称取20g硼酸溶解于1L热
2蒸馏、吸收
(1)于150ml锥形瓶中，加入20g.L-1硼酸-指示剂混合液5ml，放在冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上3-4cm处。然后向蒸馏室内缓缓加入10mol.L-1NaOH溶液20ml，通入蒸汽蒸馏，待馏出液体积约50ml时。即蒸馏完毕。
(2)待样品和空白消化液均蒸馏完毕后，同时进行滴定。
消化完了后，在凯氏定氮仪中加入强碱碱化消化液，使硫酸铵分解，放出氨。用水蒸汽蒸馏法，将氨蒸入过量标准无机酸溶液中，然后用标准碱溶液进行滴定，准确测定氨量，从而折算出含氮量。
以甘氨酸为例，该过程的化学反应如下：
测定时常用硼酸溶液收集氨，氨与溶液中的氢离子结全，生成铵离子，使溶液中氢离子浓离降低。然后再用标准强酸滴定，直至恢复溶液中原来氢离子浓度为止。所用的强酸的当量数即相当于被测样品中氨的当量数。

土壤主要养分测定

土壤全氮(半微量开氏法)1、仪器、设备土壤样品粉碎机；玛瑙研钵；土壤筛：孔径1.0mm（18目）；0.25mm（60目）；分析天平：感量为0.0001g。

硬质并氏烧瓶：容积50ml，100ml；半微量定氮仪；半微量一管：容积10ml、25ml；锥形瓶：容积150ml；电炉：300W变温电炉。

2、试剂硫酸（GB 625－77）：化学纯；0.005mol/L硫酸标准溶液；10mol/L氢氧化钠溶液；2%硼酸溶液（W/V）；混合指示剂：0.5g溴甲酚绿（HG3－1220－79）和0.1g甲基红（HG3－958－76）于玛瑙研钵中，加入少量95%乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95%乙醇至100ml。

使用前，每升硼酸溶液中加入20ml混合指示剂，并用稀碱调节至红紫色（pH值约4.5）。

此液放置时间不宜过长，如在使用过程中pH值有变化，需随时用稀酸或稀碱调节之。

加速剂：100g硫酸钾（HG3－920－76，化学纯），10g五水合硫酸铅（GB 665－78，化学纯），1g硒粉（HG3－926－76）于研钵中研细，必须充分混合均匀。

高锰酸钾溶液：25g高锰酸钾（GB 643－77）溶于500ml无离子水，贮于棕色瓶中；还原铁粉：磨细通过孔径0.15mm（100目）筛；辛醇。

3、土壤样品的制备将通过孔径1mm（18目）筛的土样，在牛皮纸上铺成薄层，划分成多个小方格。

用小勺于每个方格中，取等量的土样（总量不得少于20g）于玛瑙研钵中研磨，使之全部通过0.25mm筛。

混合均匀后备用。

4、测定步骤4.1 称取风干土样（通过0.25mm筛）1.0g（含氮约1mg）。

4.2 土样消煮4.2.1 不包括硝态和亚硝态氮的消煮：将土样送入干燥的开氏瓶底部，加少量无离子水（约0.5～1ml）湿润土样后，加入2g加速剂和5ml浓硫酸，摇匀。

将开氏瓶倾斜置于300W变温电炉上，用小火加热，待瓶内反应缓和时（约10～15min），加强火力使消煮的土裘保持微沸，加热的部位不超过瓶中的液面，以防瓶壁温度过高而使铵盐受热分解，导致氮素损失。

土壤全氮测定方法

标准号：GB 7173—87标准名称：土壤全氮测‎定法（半微量开氏‎法）*标准分类：农业土壤化‎肥标准本标准适用‎于测定土壤‎全氮含量。

1 测定原理样品在加速‎剂的参与下‎，用浓硫酸消‎煮时，各种含氮有‎机化合物，经过复杂的‎高温分解反‎应，转化为铵态‎氮。

碱化后蒸馏‎出来的氨用‎硼酸吸收，以酸标准溶‎液滴定，求出土壤全‎氮含量（不包括全部‎硝态氮）。

包括硝态和‎亚硝态氮的‎全氮测定，在样品消煮‎前，需先用高锰‎酸钾将样品‎中的亚硝态‎氮氧化为硝‎态氮后，再用还原铁‎粉使全部硝‎态氮还原，转化成铵态‎氮。

2 仪器、设备2.1 土壤样品粉‎碎机；2.2 玛瑙研钵；2.3 土壤筛：孔径1.0mm（18目）；0.25mm（60目）；2.4 分析天平：感量为0.0001g‎；2.5 硬质开氏烧‎瓶：容积50ml，100ml‎；2.6 半微量定氮‎蒸馏装置；2.7 半微量滴定‎管：容积10ml，25ml；2.8 锥形瓶：容积 150ml‎；2.9 电炉：300W变‎温电炉。

3 试剂3.1 硫酸（GB625‎—77）：化学纯；3.2 硫酸（GB625‎—77）或盐酸（GB622‎—77）：分析纯，0.005mo‎l/L硫酸或0‎.01mol‎/L盐酸标准‎溶液；3.3 氢氧化钠（GB629‎—81）：工业用或化‎学纯，10mol‎/L氢氧化钠‎溶液；3.4 硼酸-指示剂混合‎液；3.4.1 硼酸（GB628‎—78）：分析纯，2%溶液（W/V）；3.4.2 混合指示剂‎：0 5g溴甲酚‎绿（HG3—1220—79）和0.1g甲基红‎（HG3—958—76）于玛瑙研钵‎中，加入少量9‎5%乙醇，研磨至指示‎剂全部溶解‎后，加95% 乙醇至10‎0ml。

使用前，每升硼酸溶‎液中加20ml混‎合指示剂，并用稀碱调‎节至红紫色‎（pH值约4‎.5）。

此液放置时‎间不宜过长‎，如在使用过‎程中pH值‎有变化，需随时用稀‎酸或稀碱调‎节之。

土壤农化实验：土壤总氮测定——半微量凯氏法

2蒸馏、吸收
(1)于150ml锥形瓶中，加入20g.L-1硼酸-指示剂混合液5ml，放在冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上3-4cm处。然后向蒸馏室内缓缓加入10mol.L-1NaOH溶液20ml，通入蒸汽蒸馏，待馏出液体积约50ml时。即蒸馏完毕。
(2)待样品和空白消化液均蒸馏完毕后，同时进行滴定。
3.滴定
❖ 全部蒸馏完毕后，用0.0100N标准盐酸溶液滴定各锥形瓶中收集的氨量，直至硼酸-指示剂混合液由绿色变回淡紫色，即为滴定终点。记录所用酸标准溶液的体积。
结果计算
（）土壤全氮(N)量（g.kg-1)= V -V0 ×C（HCl）×14.0 ×10-3 ×103
m
式中： V—滴定样品所用盐酸标准溶液体积（ml） V0—滴定空白所用盐酸标准溶液体积（ml) C—0.0100 mol.L-1(HCl)标准溶液浓度。实际上，
❖ 硼酸的浓度和用量以能满足吸收NH3为宜，大致可按每毫升 10g.L-1H3BO3能吸收氮（N)量0.46计算。可根据消煮液中含氮量估计硼酸的用量，适当多加。
实验流程
样品消化蒸馏吸收滴定
实验流程
1.样品消化
(1)准确称取1g左右的干燥土样作为本实验的样品。
(2)准备2个50ml的凯氏烧瓶，并标号，向第1号烧瓶内各加入土样1g，1ml蒸馏水湿润土样后，加入催化剂（K2SO4CuSO4·5H2O-Se）2g，浓硫酸5mL。注意加样品时应直接送入烧瓶底部，切勿沾于瓶口及瓶颈上。向2号烧瓶加入 1ml蒸馏水和与1及2号瓶相同的催化剂和浓硫酸，作为空白对照，测量试剂中可能含有的微量含氮物质，以对样品进行校正。
❖ “空白”滴定值包括水及氢氧化钠溶液中含有的微量的氨。因些，水质对“空白”滴定值的影响甚大。 “消化样品”最后用“消化空白”进行校正计算， “不消化的样品”最后用“不消化的空白”进行校正计算。而且，在实验中，稀释样品的水与“空白” 的水应当取自于同一瓶中。

土壤中全氮的测定

4.1.2.2 土壤全氮测定—半微量开氏法4.1.2.2.1 方法原理样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化成铵态氮氨与硫酸结合成硫酸铵。

碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括全部硝态氮）包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮。

在高温下硫酸是一种强氧化剂，能氧化有机化合物中的碳，生成CO2，从而分解有机质。

2H2SO4＋C→H2O＋2SO2↑＋CO2↑高温样品中的含氮有机化合物，如蛋白质在浓H2SO4的作用下，水解成为氨基酸，氨基酸又在H2SO4的脱氨作用下，还原成氨，氨与硫酸结合成为硫酸铵留在溶液中。

Se的催化过程如下：2H2SO4+Se→H2SeO3+2SO2↑+H2O(亚硒酸)2SeO3→SeO2+H2OSeO2+C→Se+CO2由于Se的催化效能高，一般常量法Se粉用量不超过0.1-0.2g，如用量过多则将引起氮的损失。

(NH4) 2SO4 + H2SeO3→(NH4) 2SeO3 + H2SO43(NH4) 2SeO3→2NH3 + 3Se + 9H2O + 2N2↑以Se作催化剂的消煮液，也不能用于氮磷联合测定。

硒是一种有毒元素，在消化过程中，放出H2Se，H2Se的毒性较H2S更大，易引起人中毒，所以实验室要有良好的通风设备，方可使用这种催化剂。

当土壤中有机质分解完毕，碳质被氧化后，消煮液则呈现清澈的蓝绿色即“清亮”，因此硫酸铜不仅起催化作用，也起指示作用。

同时应该注意开氏法刚刚清亮并不表示所有的氮均已转化为铵，有机杂环态氮还未完全转化为铵态氮，因此消煮液清亮后仍需消煮一段时间，这个过程叫“后煮”。

消化液中硫酸铵加碱蒸馏，使氨逸出，以硼酸吸收之，然后用标准酸液滴定之。

蒸馏过程的反应：(NH4) 2SO4+ 2NaOH→Na2SO4 + 2NH3 +2H2ONH3 +H2O→NH4OHNH4OH+H3BO3→NH4·H2BO3+H2O滴定过程的反应：2NH4·H2BO3+H2SO4→(NH4) 2SO4+2H3BO34.1.2.2.2 主要仪器消煮炉；半微量定氮蒸馏装置(图4-2)；半微量滴定 1.蒸馏瓶 2.冷凝器 3.承受瓶 4.分水筒5.蒸汽发生器6.加碱小漏斗7、8、9.螺旋夹子10.开关4.1.2.2.3 试剂(1)硫酸：ρ=1.84g·mL-1，化学纯；(2)10 mol·L-1NaOH溶液：称取工业用固体NaOH 420g，于硬质玻璃烧杯中，加蒸馏水400mL溶解，不断搅拌，以防止烧杯底角固结，冷却后倒入塑料试剂瓶，加塞，防止吸收空气中的CO2，放置几天待Na2CO3沉降后，将清液虹吸入盛有约160mL无CO2的水中，并以去CO2的蒸馏水定容1L加盖橡皮塞。

土壤全氮测定半微量凯氏法

操作步骤
2、土壤样品的蒸馏与滴定
查漏
蒸馏
滴定
蒸馏装置（漏气）
加热
冷凝
半微量滴定管（漏液）收集
滴定至渐变色显色Biblioteka 数蒸馏仪的组成：“一器四瓶”
分液瓶调压器蒸汽发生瓶
仪器组成
加样漏斗
防溅球冷凝瓶蒸馏瓶
滴定管漏液排查
加液口
涂抹少许凡士林防止漏液
滴定管
实验操作
滴定终点储液管
第四部分：结果计算
土壤全氮的测定-半微量凯氏法
目录
第一部分：方法原理第二部分：仪器、器皿与试剂题第三部分：操作步骤第四部分：结果计算
第一部分：方法原理
方法原理
土壤中的氮绝大部分为有机氮，有机氮通过微生物的矿化作用转变成无机态的氮才能被植物吸收利用。半微量凯氏法的主要原理是在高温条件下土壤中的有机氮在浓硫酸和催化剂的作用下分解为氨，氨与硫酸结合形成硫酸铵，碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收、然后用标准酸滴定蒸馏出的氨，通过消耗标准酸的量计算出土壤全氮含量。
第二部分：仪器、器皿与试剂题
仪器、器皿与试剂
仪器：万分之一天平、称量勺、消化炉、100mL消煮管、弯颈小漏斗、半微量蒸馏仪、半微量滴定管；器皿：三角烧瓶、胶头滴管、移液管、吸水纸、量筒等。试剂：浓H2SO4、混合加速剂（K2SO4：CuSO4：Se=10:1:1）、蒸馏水等。 10mol L-1 NaOH、硼酸指示剂、 0.01mol L-1 1/2H2SO4 或标准酸。
第三部分：操作步骤
操作步骤
1、土壤样品的消化精确称取过100目的土壤1.0000g,再称1.84g 混合
加速剂放入消煮管底部，加几滴蒸馏水润湿，小心加入5mL浓硫酸，盖上弯颈小漏斗,先低温加热保持微沸约20分钟，待白烟散出后再高温煮沸约40分钟直至土壤消解为灰白色，拔下消化炉电源，等消煮管稍冷却后小心取出，冷却至室温以后进行蒸馏。

土壤全氮有机碳的测定

土壤全氮的侧定-半微量开式法试剂（1）硫酸。

ρ=1.84g·mL-1，化学纯；（2）10mol·L-1NaOH溶液。

称取工业用固体NaOH420g，于硬质玻璃烧杯中，加蒸馏400mL溶解，不断搅拌，以防止烧杯底角固结，冷却后倒入塑料试剂瓶，加塞，防止吸收空气中的CO2，放置几天待Na2CO3沉降后，将清液虹吸入盛有约160mL无CO2的水中，并以去CO2的蒸馏水定容1L加盖橡皮塞。

（3）甲基红—溴甲酚绿混合指示剂。

0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶于100mL乙醇中。

（4）20g·L-1 H2BO3—指示剂。

20g H2BO3（化学纯）溶于1L水中，每升H2BO3溶液中加入甲基红—溴甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，此时该溶液的pH为4.8。

指示剂用前与硼酸混合，此试剂宜现配，不宜久放。

（5）混合加速剂。

K2SO4:CuSO4:Se=100:10:1即100g K2SO4（化学纯）、10g CuSO4 ·5H2O（化学纯）、和1g Se粉混合研磨，通过80号筛充分混匀（注意戴口罩），贮于具塞瓶中。

消煮时每毫升H2SO4加0.37g混合加速剂。

（6）0.02 mol·L-1（1/2 H2SO4）标准溶液。

量取H2SO4（化学纯、无氮、ρ=1.84g·mL-1）2.83mL，加水稀释至5000mL，然后用标准碱或硼砂标定之。

（7）0.01 mol·L-1（1/2 H2SO4）标准液。

将0.02 mol·L-1（1/2 H2SO4）标准溶液用水准确稀释一倍。

（8）高锰酸钾溶液。

25g高锰酸钾（分析纯）溶于500mL无离子水，贮于棕色瓶中。

（9）1:1硫酸（化学纯、无氮、ρ=1.84g·mL-1）。

硫酸与等体积水混合。

（10）还原铁粉。

磨细通过孔径0.15mm（100号）筛。

（11）辛醇。

测定步骤（1）称取风干垃圾（通过孔径0.149mm筛）1.0000g[含氮约1mg]，同时测定土样水分含量。