重组水蛭素口服给药的抗凝血效应
水蛭素
水蛭素
水蛭素对凝血酶有高亲和性，可与凝血酶形成极稳定的复合物，在低浓度下即有抑制凝血酶活性的作用，是天然的凝血酶特效抑制剂。
药理作用：
①抗凝血及抗血栓：水蛭素可延长或抑制凝血过程。
由于水蛭素直接靶向凝血酶，可有效地防止纤维蛋白和血细胞结合形成血凝块，因此可防止各类血栓的形成及延伸。
②水蛭素可降低血小板表面活性，抑制血小板聚集，降低血小板粘附性。
③对血液变流的影响：水蛭煎剂可降低血液粘稠度，减少血浆中纤维蛋白原的含量。
④降低血脂：灌胃给予实验动物水蛭水煎剂可降低大鼠血液中甘油三酯及脂蛋白的含量，亦可降低食饵高脂血症家兔血液中胆固醇及甘油三酯的含量，使实验动物的主动脉及冠状动脉粥样硬化斑块消失，胆固醇结晶减少。
⑤水蛭素可增加脑血流量，促进大鼠实验性脑血肿的吸收，减轻血肿周围炎性反应性水肿，缓解颅内高压，改善局部血液循环，保护脑组织。
水蛭素对血液的作用主要体现在以下几个方面。
1.抗凝血作用，阻碍血液凝固；
2.抑制血小板凝聚，防止血栓的形成；
3.溶解血栓作用，对于已经形成的血栓，水蛭素能显著的对其进
行溶解；
4.降低血液的全血粘度和血浆粘度，改善血液的流动性和粘稠度；
5.增加心肌的供氧，对缺氧缺血具有保护作用，防止心肌缺氧缺血；。
水蛭素作用
水蛭素作用水蛭素是一种由水蛭分泌的物质，具有多种功效和作用。
下面将详细介绍水蛭素的作用。
首先，水蛭素具有抗凝血作用。
水蛭素中的一种酶，即血凝酶酶，可以与人体血液中的凝血酶进行竞争结合，从而抑制了凝血酶的产生。
这样一方面可以预防和治疗血栓形成，另一方面也可以防止血液凝结引起的心肌梗死、中风等疾病。
其次，水蛭素还具有抗炎作用。
水蛭素中含有多种具有抗炎活性的成分，能够抑制炎症反应的发生和发展。
例如，水蛭素中的一种活性多肽可以抑制炎症因子的产生，减轻炎症反应引起的组织损伤。
因此，水蛭素常常被用于治疗炎症性疾病，如风湿性关节炎、肺炎等。
此外，水蛭素还具有止痛作用。
水蛭素中的一种成分可以激活人体的内源性镇痛系统，从而减轻疼痛感。
研究还发现，水蛭素中的一种活性肽能够抑制炎症介质的释放，减少组织损伤引起的疼痛。
因此，水蛭素被广泛用于治疗各种疼痛疾病，如关节炎、腰痛等。
此外，水蛭素还具有抗肿瘤作用。
研究发现，水蛭素中的一种酶可以通过促进肿瘤细胞的凋亡和抑制肿瘤细胞的增殖，抑制肿瘤的生长和扩散。
此外，水蛭素还可以增强人体免疫系统的功能，提高机体对肿瘤的抵抗力。
因此，水蛭素常常被用于辅助治疗肿瘤。
最后，水蛭素还具有降压作用。
水蛭素中的一种活性多肽可以抑制血管紧张素转化酶的活性，从而减少血管紧张素的生成，降低血压。
此外，水蛭素还可以抑制一氧化氮合酶的活性，减少一氧化氮的合成，从而扩张血管，降低血管阻力，降低血压。
因此，水蛭素被广泛应用于治疗高血压等心血管疾病。
综上所述，水蛭素具有抗凝血、抗炎、止痛、抗肿瘤和降压等多种作用。
这些作用使得水蛭素成为一种重要的药用物质，在临床上有广泛的应用前景。
然而，由于水蛭素的提取和纯化困难，目前尚未开发出水蛭素的纯合物作为药物使用。
因此，进一步的研究和开发水蛭素的相关物质，将对临床医学的发展起到重要的推动作用。
北京大学科技成果——重组水蛭素
北京大学科技成果——重组水蛭素成果简介水蛭是我国传统中药，1800年前《神农本草经》中就有记载。
中医认为它有破血、逐瘀、通经的疗效，主要用于治疗瘕症、痞块、血瘀、闭经和跌打损伤。
西方也常用水蛭吸血以治疗某些疾病。
从水蛭及其唾液腺中已提取出多种活性成分，水蛭素是其中活性最显著并且研究最多的一种成分，它是由65-66个氨基酸组成的小分子蛋白质（多肽）。
水蛭素对凝血酶有极强的抑制作用，是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂。
动物试验与临床研究表明，水蛭素能高效抗凝血、抗血栓形成，以及阻止凝血酶催化的凝血因子活化和血小板反应等进一步血瘀现象。
此外，它还能抑制凝血酶诱导的成纤维细胞的增殖和凝血酶对内皮细胞的刺激。
与肝素相比，它不仅用量少，不会引起出血，也不依赖于内源性辅助因子；而肝素则有引起出血的危险，在弥漫性血管内凝血的发病过程中抗凝血酶III往往减少，这将限制肝素的疗效，采用水蛭会有较好的效果。
水蛭素是一类很有前途的抗凝化瘀药物，它可用于治疗各种血栓疾病，尤其是静脉血栓和弥漫性血管凝血的治疗；也可用于外科手术后预防动脉血栓的形成，预防溶解血栓后或血管再造后血栓的形成；改善体外血液循环和血液透析过程。
在显微外科手术中常因为吻合处血管栓塞而导致失败，采用水蛭素可促进伤口愈合。
研究还表明，水蛭素在肿瘤治疗中也能发挥作用。
它能阻止肿瘤细胞的转移，已证明有疗效的肿瘤如纤维肉瘤、骨肉瘤、血管肉瘤、黑素瘤和白血病等。
水蛭素还可配合化学治疗和放射治疗，由于促进肿瘤中的血流而增强疗效。
动物试验和临床研究表明，静脉或皮下注射水蛭素均无明显毒副作用，无论急性、亚急性的毒性试验，对血压、心率、血相、出血时间和血液化学成分均不受影响，呼吸系统也没有影响，无过敏反应，一般无特异抗体发现。
半致死剂量LD50>50mg/kg，远大于治疗所用的剂量（1mg/kg）。
尤其值得指出的是，水蛭素可以口服，这给用药带来很大方便。
水蛭素比较稳定，胰蛋白酶和糜蛋白酶并不破坏其活性，而且水蛭素的某些水解片段仍有抑制凝血酶的作用，这就可以解释为何口服中药水蛭提取液仍然有疗效的原理。
水蛭素剂型研究进展
水蛭素剂型研究进展毛全高【摘要】Hirudin is the active ingredient of leeches,which has good anticoagulant and antithrombotic function.But because of its short half-life and bleeding risk in clinics, its application effect is not ideal, so some researches in new dosage forms of hirudin have been made.This article reviewed the ways of drug delivery and dosage forms of hirudin based on its pharmacological effects and clinical application,so as to provide a reference for further research and clinical application.%水蛭素是水蛭的活性成分，具有良好的抗凝血和抗血栓作用。
但由于临床应用中存在半衰期短、出血危险等不足，实际应用效果并不理想，因此一些水蛭素新剂型的研究也在不断进行。
现结合水蛭素的不同药理作用和临床应用对其给药途径及给药剂型进行综述，以期为水蛭素以后的研究和应用提供参考依据。
【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2015(000)012【总页数】5页(P2250-2254)【关键词】水蛭素;药理作用;临床应用;给药途径;给药剂型【作者】毛全高【作者单位】如皋市人民医院药剂科，江苏如皋 226500【正文语种】中文水蛭是我国传统中药中常用的活血化瘀通经的良药，始载于东汉时期的药物学专著《神农本草经》。
水蛭素(hirudin)是存在于水蛭唾液腺里的一种重要活性成分，是由65～66个氨基酸残基组成的小分子单链环肽化合物，相对分子质量为7 000。
水蛭素的作用与功能主治副作用
水蛭素的作用与功能主治副作用1. 水蛭素的作用水蛭素，也称为水蛭酸，是由水蛭体内分泌腺分泌的一种物质，主要由活血酶和酶抑制剂组成。
水蛭素具有以下几种主要的作用： - 抗凝血作用：水蛭素中的活血酶可以抑制血液凝结过程中血小板的聚集，从而防止血液凝结，起到抗凝血的作用。
- 溶栓作用：水蛭素中的活血酶可以溶解已经形成的血栓，促进血栓溶解，恢复血管的通畅。
- 消炎作用：水蛭素具有一定的抗菌消炎作用，可以抑制一些病原微生物的生长和繁殖，减轻炎症反应。
- 镇痛作用：水蛭素可以刺激血管扩张，增加微循环，改善疼痛局部的血液供应，并通过调节神经递质的释放，减轻疼痛感。
- 促进组织修复：水蛭素可以刺激新血管的生长，促进血管再生和组织修复。
2. 水蛭素的功能主治根据水蛭素的作用，它在临床上具有多种功能，可以用于治疗和预防一些疾病，其中常见的主治如下： - 治疗心脑血管疾病：水蛭素具有抗凝血和溶栓作用，可用于预防和治疗心脑血管疾病，如心肌梗塞、脑梗塞等疾病，帮助恢复血管通畅。
- 改善微循环：水蛭素可以通过改善微循环，调节血液流通，促进血管扩张和组织修复，用于治疗糖尿病、静脉曲张等疾病。
- 减轻炎症反应：水蛭素的消炎作用可以减轻局部炎症反应，用于治疗皮肤炎症、痤疮等皮肤疾病。
同时，它还具有一定的抗菌作用，可用于预防感染。
- 镇痛和缓解疲劳：水蛭素的镇痛作用可以缓解各种疼痛，如头痛、腰痛、关节炎等疼痛。
此外，它还可以改善人体的血液循环，缓解疲劳。
- 促进伤口愈合：水蛭素可以促进新血管的生长，加速伤口的愈合，防止伤口感染，有助于创面的修复。
3. 水蛭素的副作用虽然水蛭素具有多种功效，但在使用时也需要注意一些可能出现的副作用，包括：- 过敏反应：个别人对水蛭素过敏，可能会出现皮肤红肿、瘙痒等过敏症状。
若出现过敏反应，应及时停药并咨询医生。
- 出血风险：水蛭素具有抗凝血作用，长期使用或使用过量可能增加出血的风险，容易导致出血性疾病如鼻出血、消化道出血等。
水蛭的药用作用
水蛭的药用作用抗凝作用水蛭中发现了多种物质，它们在凝血机制的不同环节节起抑制作用。
如凝血酶抑制剂水蛭素变异体家族，凝血因子Xa抑制剂antistasin. ghilanten;凝血因子X III抑制剂tridigen ;血小板糖蛋白抑制剂decorsin、 omatin;胶原诱导血小板聚集抑制剂Calm、Lapp等。
水蛭素是世界公认的最强的凝血酶特异性抑制剂，它对凝血酶的抑制具有选择性和特异性，它仅抑制止血系统中的凝血酶，并不干扰体液或细胞因子，其抑制作用也不需其他凝血因子或血浆成分参加;它与凝血酶的亲和力极强.在很低的浓度下即可中和凝血酶。
水蛭素与凝血酶以1:1的比例结合后形成一种非共价复合物，这种复合物极其稳定，解离常数为10〜12数量级，而且反应速度极快。
它能阻止凝血酶对纤维蛋白原的作用，从而阻碍血液凝固。
同时，水蛭素还抑制了凝血酶与血栓调节蛋白TM的结合.从而阻断了凝血酶一TM 介导的蛋白C活化，进而发挥了水蛭素的抗凝血作用。
水蛭素的抗凝血作用与肝素不同，它不依赖于其他内源性抗凝因子，也不受血小板第4因子和富组氨酸糖蛋白的影响。
抗血栓作用血管内血栓的形成，最根本的过程是由凝血酶引起的凝血作用。
水蛭有直接溶解血栓的作用，它不仅可以与血浆中游离的凝血酶结合，还可中和与纤维蛋白结合的凝血酶，故水蛭素对各种血栓病均有效，尤其对弥漫性血管内凝血作用显著。
水蛭的抗血栓作用是多方面的、多环节的、多途径的。
目前公认血管内皮损伤如动脉粥样硬化斑块溃疡、破裂，高血压动脉硬化是诱发血栓形成的主要原因。
其机制是：导致局部血管舒缩功能障碍，合成与分泌缩血管物质增多，如内皮素，血管紧张素转换酶.舒血管物质减少。
如一氧化碳、前列环素：导致血液凝溶机制障碍，合成与分泌促凝血因子，还使纤溶酶原激活物及其抑制代谢失衡:促进血管平滑肌增殖，通透性增加，分泌白介素-1，促进炎症反应。
经研究，水蛭能使高脂动物动脉粥样硬化病变明显减轻，内皮损伤基本恢复.半滑肌细胞增殖不明显，降低了过氧化脂质对内皮的损伤，抑制了诱导的动脉内皮素基因的表达。
水蛭素的作用
水蛭素的作用水蛭素，又称医用水蛭唾液素，是一种由水蛭唾液分泌物提取和提纯的生物活性物质。
水蛭素具有广泛的药理学活性，被广泛用于医学和药物研究中。
下面将介绍水蛭素在不同领域的作用。
首先，水蛭素具有很强的抗凝血活性。
水蛭素可以抑制人体内血栓形成的过程，阻断血栓的发生和扩散，从而预防和治疗心脑血管疾病。
研究表明，水蛭素能够抑制血小板聚集和血液高黏度的增加，帮助降低心脑血管疾病的发生风险。
其次，水蛭素具有很强的抗炎和抗肿瘤活性。
水蛭素能够抑制炎症反应的发生和发展，减轻炎症症状，并且能够降低白细胞和中性粒细胞的浸润。
此外，水蛭素还可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散，诱导肿瘤细胞凋亡，增强放疗和化疗的疗效。
因此，水蛭素被广泛应用于治疗肿瘤和炎症性疾病。
再次，水蛭素具有良好的降血脂和降血压作用。
水蛭素可以抑制脂肪的合成和吸收，促进脂肪的分解和代谢，从而降低血浆中的甘油三酯和胆固醇水平，减少血管壁的脂质沉积，改善血液循环。
同时，水蛭素还能够扩张小血管，减少血管阻力，降低血压。
因此，水蛭素对高血脂和高血压的患者具有较好的治疗效果。
此外，水蛭素还具有很强的抗微生物活性。
水蛭素可以杀灭多种致病微生物，如细菌、真菌和寄生虫等。
研究表明，水蛭素通过破坏微生物细胞壁和细胞膜，阻断细胞呼吸和代谢，抑制细菌的繁殖和扩散，从而起到抗菌的作用。
因此，水蛭素被广泛应用于治疗各种感染性疾病，如皮肤炎、湿疹和疖等。
综上所述，水蛭素是一种具有多种生理活性的生物活性物质。
它具有抗凝血、抗炎、抗肿瘤、降血脂、降血压和抗微生物等活性。
因此，水蛭素在医学和药物研究中有着广泛的应用前景。
但是需要注意的是，水蛭素的研究和开发还处于初级阶段，其安全性和副作用仍需要进一步的研究和验证。
水蛭素的作用
水蛭素的作用水蛭素是水蛭及其唾液腺中已提取出多种活性成分中活性最显著并且研究得最多的一种成分，它是由65—66个氨基酸组成的小分子蛋白质(多肽)。
水蛭含有丰富的水蛭素，水蛭素对凝血酶有极强的抑制作用，是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂。
那么，今天我们就来给大家介绍下水蛭素的作用都有哪些。
抗凝作用水蛭素不仅能阻止纤维蛋白原的凝固,亦可阻止凝血酶催化的进一步血瘀反应,如对凝血因子Ⅴ、Ⅷ的活化及凝血诱导的血小板反应等的抑制。
血液凝固的被推迟或完全被阻止取决于水蛭素的浓度。
水蛭素可抑制凝血酶诱导的成纤维细胞的增殖和凝血酶对内皮细胞的刺激,亦可抑制凝血酶同血小板的结合及血小板受凝血酶刺激的释放,并可使两者解离。
抗栓作用水蛭素能中和游离的和与纤维蛋白结合的凝血酶,抑制血小板沉淀。
由凝血酶诱发的血液凝固是诱导血管血栓形成的重要因素,故水蛭素对各种血栓病均有效,尤其是对静脉血栓和弥漫性血管内凝血(DIC)。
大鼠实验结果表明,水蛭素的抗凝抗栓效果取决于其血药浓度,静脉血栓和DIC所需有效血药浓度最低,治疗静脉血栓所需浓度是肝素的1/20,而治疗DIC仅为1/50。
给大鼠按40AT-μ/kg静滴,血药浓度达4.3AT-μ/ml,则完全抑制静脉血栓的形成;按200AT-μ/kg/min给药60min可完全抑制动脉血栓形成,后者剂量高出前者5倍。
它完全抑制动脉血栓的浓度下,只引起出血时间延长50%~60%,而肝素则有引起出血的严重副作用。
当抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)的血浆浓度低于正常值70%~80%则有形成血栓的危险,在DIC发病过程中,AT-Ⅲ要减少,可影响肝素的疗效,而水蛭素与辅因子无关,在抗栓治疗中不增加AT-Ⅲ的消耗是其显著的优点。
水蛭素静注给药符合二房室模型方程。
水蛭素分布于细胞外的空间,未经代谢不与机体结合,以活性形成通过肾小球过滤排出。
消除半衰期约1h,静脉或皮下注射纯水蛭素,没有明显的副作用。
重组水蛭素的抗血栓形成作用及其机制
重组水蛭素的抗血栓形成作用及其机制曹文理;李菁【摘要】目的:研究重组水蛭素抗血栓形成的作用及机制.方法:将60只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组、阿司匹林组和重组水蛭素低、中、高剂量组(n=10).除对照组外,其余各组小鼠分别腹腔注射角叉菜胶2.5mg/kg,诱发小鼠尾部血栓形成.注射角叉菜胶前24 h、0.5h和注射后24h,阿司匹林组小鼠分别腹腔注射阿司匹林25 mg/kg,重组水蛭素低、中、高剂量组小鼠分别腹腔注射0.05、0.1、0.2 mg/kg重组水蛭素,对照组和模型组小鼠分别腹腔注射等体积生理盐水.注射角叉菜胶后48 h,观察小鼠黑尾长度并计算黑尾发生率;检测血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTr)、组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)、6-酮-前列腺素F1α (6-keto-PGF1 α)、血栓恶烷B2 (TXB2)水平.结果:与对照组比较,模型组小鼠尾部形成血栓;血浆PT明显缩短(P＜0.01),PAI-1、TXB2水平明显升高(P＜0.01),t-PA、6-keto-PGF1 α水平明显降低(P＜0.01).与模型组比较,重组水蛭素低、中、高剂量组和阿司匹林组小鼠尾部血栓长度明显缩短(P＜0.05或P＜0.01),PT明显延长(P＜0.01),PAI-1、TXB2水平明显降低(P＜0.01),t-PA、6-keto-PGF1 α水平明显升高(P＜0.01).与阿司匹林组比较,重组水蛭素低剂量组小鼠尾部血栓长度明显增加(P＜0.05),PT明显缩短(P＜0.01),PAI-1、TXB2水平明显升高(P＜0.01);重组水蛭素低、中剂量组6-keto-PGF1 α水平明显降低(P＜0.01,P＜0.05);重组水蛭素中剂量组PAI-1、TXB2水平明显升高(P＜0.01,P＜0.05).结论:重组水蛭素有明显抗血栓形成作用,其机制可能与影响外源性凝血系统、促进纤溶功能有关.【期刊名称】《中国应用生理学杂志》【年(卷),期】2018(034)004【总页数】4页(P371-374)【关键词】重组水蛭素;角叉菜胶;血栓;凝血;小鼠【作者】曹文理;李菁【作者单位】武警后勤学院附属医院呼吸和重症医学科,天津300162;武警后勤学院附属医院预防保健科,天津300162【正文语种】中文【中图分类】R285.5目前公认的血栓形成条件是由Vichow提出的三个条件：即血管内皮细胞损伤、血流状态的改变以及血液凝固性的增加。
水蛭素的作用与功能主治
水蛭素的作用与功能主治1. 水蛭素的概述水蛭素是水蛭的一种活性物质，具有多种医药应用价值。
水蛭是一种水生动物，广泛分布于全世界各地的淡水和南部温带海水中。
水蛭素主要由水蛭唾液中分泌的多种酶类和生物活性物质组成，具有抗凝血、消炎、镇痛等作用。
2. 水蛭素的主要作用•抗凝血作用：水蛭素中含有的血栓酶抑制物质可以抑制凝血酶的活性，阻止血液过度凝结，从而促进血液循环，预防血栓形成。
•抗炎作用：水蛭素中的多种酶类和抗菌物质能够有效抑制炎症反应，减轻炎症症状，促进伤口愈合。
•镇痛作用：水蛭素可以抑制疼痛传导物质的释放，减轻疼痛感受，对于缓解关节炎、风湿病等疼痛症状有一定的效果。
•促进组织修复作用：水蛭素可以促进血管生成和修复受损组织，促进伤口愈合，对于各种创伤和溃疡有辅助治疗作用。
•免疫调节作用：水蛭素具有免疫调节作用，可以刺激机体免疫系统，提高机体的抗病能力。
3. 水蛭素的功能主治根据水蛭素的主要作用，它在临床医学领域有着广泛的应用。
3.1 深静脉血栓水蛭素作为抗凝血物质，被广泛应用于深静脉血栓的治疗和预防。
水蛭素可以有效地抑制血栓的形成，降低血栓风险，对于静脉血栓栓塞症等疾病的治疗有一定的效果。
3.2 风湿病水蛭素的镇痛作用可以缓解风湿性关节炎等疼痛症状，同时水蛭素的抗炎作用可以减轻关节炎的炎症反应，降低关节疼痛和肿胀。
3.3 皮肤疾病水蛭素可以促进血管生成和组织修复，对于创伤、溃疡、疮疡等皮肤疾病有一定的辅助治疗效果。
水蛭素常被用于治疗糖尿病足溃疡、褥疮等难以治愈的皮肤病。
3.4 消化系统疾病水蛭素可以促进消化系统的血液循环，增加消化腺的分泌，改善消化功能，对于胃炎、胃溃疡等消化系统疾病有一定的辅助治疗作用。
3.5 其他疾病除了上述列举的几种疾病，水蛭素还被用于治疗多种疾病，例如高血压、心脏病、肝炎等。
水蛭素的抗凝血、抗炎、镇痛等作用能够改善这些疾病的症状和减轻疼痛。
结论水蛭素作为一种具有抗凝血、抗炎、镇痛等多种功能的物质，在临床医学中具有广泛的应用价值。
抗凝药原理
肝素间接在体内和体外均有强大的抗凝作用。
静脉注射后，抗凝作用立即发生。
增强抗凝血酶3的活性激活肝素辅助因子2,抑制凝血酶的活性促进纤溶系统激活【不良反应】肝素应用过量易引起自发性出血。
一旦发生，停用肝素，注射带有阳电荷的鱼精蛋白(protamine)，每1mg鱼精蛋白可中和100U肝素。
部分病人应用肝素2~14天期间可出现血小板缺乏，与肝素引起血小板聚集作用有关。
肝素不易通过胎盘屏障，但妊娠妇女应用可引起早产及胎儿死亡。
连续应用肝素3〜6月，可引起骨质疏松，产生自发性骨折。
肝素也可引起皮疹、药热等过敏反应。
肝、肾功能不全，有出血素质、消化性溃疡、严重高血压患者、孕妇都禁用。
重组水蛭素直接口服不被吸收，静脉注射进入细胞间隙，不易通过血脑屏障。
对凝血酶高度亲和力，是目前所知最强的凝血酶特异性抑制剂，可以抑制凝血酶所有的蛋白水解作用。
不仅阻断纤维蛋白原转化为纤维蛋白凝块，而且对激活凝血酶的因子V,VIII,XII ，以及凝血酶诱导的血小板聚集均有抑制作用，强大而持久的抗血栓作用。
它与凝血酶按1:1的比例非共价结合形成一种稳定的复合物，抑制了凝血酶的活性，从而阻止了纤维蛋白原凝固及凝血酶对血小板的作用，达到抗凝的目的［7］。
水蛭素在常温干燥状态下比较稳定，其作用不依赖于AT-皿等血浆辅助因子，其抑制血栓形成的浓度远小于其引起出血的浓度，无明显毒副作用。
间接与直接的区别间接凝血酶抑制剂通过与抗凝血酶结合而使凝血酶灭活或抑制凝血酶的生成，其依赖抗凝血酶来发挥作用。
直接凝血酶抑制剂能够直接抑制凝血酶而不需要抗凝血酶辅助，其作用不依赖抗凝血酶间接凝血酶抑制剂可导致凝血酶不可逆性灭活，半衰期长，其作用受多种因素影响，且可产生药物间相互作用。
直接凝血酶抑制剂与凝血酶可逆性结合，且结合速度很快，半衰期短，作用不受患者年龄、性别和肾功能影响，无药物间相互作用。
而且通过抗凝试验可以很容易地监测直接凝血酶抑制剂的疗效。
枸橼酸钠为体外抗凝剂。
抗凝良药水蛭素的研究进展
抗凝良药水蛭素的研究进展摘要从水蛭素的分子生物学性质、克隆表达研究，以及临床应用研究等主要方面论述抗凝防栓良药水蛭素的研究进展。
并对水蛭的临床应用价值，开发研究成为抗栓领域的一大热点进行了论述。
关键词水蛭素大肠杆菌表达系统枯草杆菌当今心血管疾病已成为危害人类健康的头号大敌．水蛭素自古以来就是防栓抗凝逐瘀之良药，首载于《神农本草经》、后在《本筝纲目》和《巾国动物药》等专著中均有收载，但天然水蛭素来源有限，使其不能广泛应用。
自从1986年重组水蛭素问世以来．开始丁大规模的临床应用研究．可用于抗凝抗栓．治疗不稳定性心绞痛，急性心肌梗塞，血管成形术后血栓形成，血液透析．体外循环，弥散性血管内凝血等等，其效果明显优于肝素等．而又无肝素诱导的血小板减小症和血栓复形成、肾衰等后遗症。
水蛭索叉无毒性．无明显抗原性，在合理剂量内，没有引起出血的危险，因此它将成为防治血栓类疾病的新一类药物，具有很大的杜会效益和经济效益。
车文主要从水蛭索的分子生物学性质、克隆研究进展以及临床应用研究等方面进行综述。
l水蛭素分早生桕学性质研究l 954年，Markward从水蛭头部唾液腺中分离出水蛭素纯品．开始对其组成结构和理化性质进行研究。
化技术．得出水蛭索由65个氨基酸残基组成，分子量为7 000 D。
20世纪70年代确证了肽链的组成和一级结构。
20世纪80年代完成了二级和三级结构分析。
N端有3个二硫桥，使N端肽链绕迭成密集形核心环肤结构。
c端富古酸性氯基酸残基，具亲水忖；，游离在分子表面。
肽链中部还有一个由pfo—Iys旷pro组成的特殊序列，不被一般蛋白酶所降解。
水蛭素是现在知道的最强的凝血酶特异性抑制剂，带负电的【：端结合在凝血酶的带正电的纤维蛋白原识别位点，摄小保持抗凝活性的片段为酸性c端的lo～1 2个肽段，c端12具有最大活性的最小肽段。
N端密集链段则同凝血酶催化位点结合，抑制凝血酶的催化作用。
1’yr 63的硫酸化可提高抗凝活性，The”，(爿u”．11e”是抗凝中必不可少的．水蛭素4 7位赖氯酸残基同靠近凝血酶催化位点附近的精氨酸侧链(Argside chaln Pocket)带负电荷的碱基．起着促进N 端与活性位点结合等重要作用．1y“7也通过氢键和静电两种作用力同时影响水蛭素的三维结构。
水蛭素的功效与作用及副作用
水蛭素的功效与作用及副作用
水蛭素是一种来源于水蛭体内的一种生物活性物质，具有多种功效和作用。
以下介绍水蛭素的功效、作用以及可能的副作用。
1. 抗凝血作用：水蛭素能够抑制血液凝固，防止血块形成，从而具有一定的抗凝血作用。
这一作用使得水蛭素被广泛应用于治疗血栓性疾病、心血管疾病等。
2. 促进血液循环：水蛭素能够扩张血管，降低微血管阻力，促进血液循环，改善组织血液供应。
这对于一些循环系统疾病的治疗具有积极意义。
3. 消肿止痛：水蛭素具有一定的消肿止痛作用，可以减轻炎症引起的肿胀和疼痛。
这使其在一些炎症性疾病的治疗中得到应用。
4. 解痉作用：水蛭素还具有一定的解痉作用，能够缓解肌肉痉挛和抽搐等症状。
因此，它常被用于治疗一些神经系统疾病、肌肉痉挛等方面。
此外，水蛭素还具有调节免疫系统、抗氧化、抗炎症、改善器官功能等效果，并且在一些抗癌研究中也显示出一定的潜力。
然而，水蛭素的使用也存在一些可能的副作用和不良反应。
常见的副作用包括恶心、呕吐、头晕等消化道和神经系统反应。
长期或过量使用水蛭素还可能引起出血、出血时间延长、过敏
反应等不良反应。
因此，使用水蛭素时应注意剂量和使用时间，并遵循医生的指导。
重组水蛭素
重组水蛭素水蛭素是由65 ～66个氨基酸组成的小分子单链蛋白，分子量为7000左右。
水蛭素肽链中部有一个Pro-Lys-Pro 组成的特殊序列，使其不被一般蛋白酶降解。
水蛭素能高效抗凝血、抗血栓形成，并能阻止凝血酶催化的凝血因子活化和血小板反应等瘀血现象，能抑制凝血酶诱导的成纤维细胞的增殖和凝血酶对内皮细胞的刺激。
重组水蛭素HVZ与天然的HVZ仅63位的酪氨酸有所不同（天然的水蛭素的63位磺酸化形成Tyr-50）,但在决定活性蛋白生理效能的的蛋白二级结构层面，重组水蛭素与天然的水蛭素主要的二级结构完全相同,因此功效没有明显差别。
1. 医学结构功效解析水蛭素是凝血酶的特异性抑制剂,最初从水蛭的唾液腺中提取,极其微量；我们运用生物工程重组DNA技术,可产业化制备重组水蛭素。
水蛭素分子呈蝌蚪状,包括两个功能区:含3个二硫键结构紧密的N 端核心区域和无规则的C端尾部。
N端的核心区域结合于凝血酶的活性位点,而C端尾部则结合于酶对纤维蛋白原的识别位点,它们共同作用,使水蛭素对凝血酶有高度的亲合性和抑制作用,并且两种功能区的片段均有活性。
它是迄今为止,世界上最强的凝血酶特效抑制剂。
药理学及临床研究表明,水蛭素在防治血栓形成较之肝素钠及其它抗凝剂,有其独特的优点和效果,且无明显副作用。
凝血酶是一种在血栓形成过程中起非常关键作用的丝氨酸蛋白酶。
水蛭素不仅可以与血浆中游离的凝血酶结合，还能中和与纤维蛋白结合的凝血酶，进而抑制凝血酶上凝血因子I的结合位点，使凝血酶不能和凝血因子I结合，从而抑制凝血酶的促凝作用，使凝血过程减慢，并且其过程中不需抗凝血酶Ⅲ或其它辅助因子的协助。
2. 重组水蛭素稳定性水蛭素是由65个氨基酸残基组成的单链多肽,成蝌蚪状,包括N端核心区域和无规则的C端尾部。
水蛭素的稳定性,首先应因于结构紧密的N端核心区,它依靠3个二硫键和反平行的俘折叠形成疏水的蝌蚪头部,高温处理以及pH的变化都不影响其活力。
重组水蛭素抗弥散性血管内凝血的药效学实验研究
重组水蛭素抗弥散性血管内凝血的药效学实验研究王艳春;吕莉;韩国柱【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2005(027)010【摘要】目的:研究重组水蛭素(recombinant hirudin,rH)的抗弥散性血管内凝血(DIC)的作用.方法:♂大耳白兔,采用凝血酶(100 U·kg-1·1 h)和氨基已酸(50 mg·kg-1·h-1×1 h)静脉滴注造成急性DIC模型,观察rH对凝血酶原时间(PT)、血小板计数(PLT)、纤维蛋白原(FIB)含量和血浆鱼精蛋白副凝固(3P)试验以及肺、肾微血栓形成的影响.结果:4个剂量的rH(125、62.5、31.25和15.625μg·kg-1)对于DIC 的抑制率:用PT表示分别为89.38%、52.60%、49.71%和25.58%;用PLT表示分别为100.01%、61.86%、58.40%和32.68%;用FIB表示分别为85.22%、73.01%、33.60%和14.86%.各剂量组的肺、肾病理切片均未见微血栓形成.当rH 剂量为125μg·kg-1时,试验中各项指标均与生理盐水空白对照组一致.结论:国产rH具有强大的抗DIC作用,其作用强度与已被欧共体批准上市的产品重组水蛭素Reflu-dan相同.【总页数】5页(P1182-1186)【作者】王艳春;吕莉;韩国柱【作者单位】吉林医药学院药理教研室,辽宁,吉林,132013;大连医科大学药理教研室,辽宁,大连,116023;大连医科大学药理教研室,辽宁,大连,116023【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.国产基因重组水蛭素抗家兔急性弥漫性血管内凝血作用的实验研究 [J], 韩国柱;吕莉;等2.重组水蛭素抗家兔体外血栓形成作用的实验研究 [J], 徐红;吕莉;韩国柱;王春富3.重组水蛭素与弥散性血管内凝血 [J], 王艳春;吕莉;沈楠4.重组水蛭素与弥散性血管内凝血 [J], 王艳春;吕莉;沈楠5.三种藏药成分复方抗ORFV体内外药效学实验研究 [J], 鲁志平;董禄德;吴金措姆;杨德全;巴桑次仁;次央;姚海潮;色珠;拉巴次旦;曾江勇;四郎玉珍;次仁多吉;夏晨阳;刘建枝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
水蛭素的抗凝抗血栓形成作用
水蛭素的抗凝抗血栓形成作用
范亚明;申同健
【期刊名称】《心肺血管学报》
【年(卷),期】1992(011)001
【摘要】水蛭素是从医用水蛭(蚂螨)的唾液腺中分离纯化的一种多肽物质。
通过家兔的体内急性实验,即耳静脉注射230ATU/kg,观察到水蛭素明显地延长凝血酶原时间和凝血酶凝结时间。
耳静脉注射后二小时,其作用效果达到高峰。
且水蛭素具有明显的抑制血栓形成作用。
【总页数】3页(P37-39)
【作者】范亚明;申同健
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R282.740.5
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重组水蛭素口服给药的抗凝血效应阎雪莹1，唐晓飞2，张学农3，张强41黑龙江中医药大学药学院，哈尔滨 (150040)2黑龙江省哈尔滨市香坊区疾病预防控制中心，哈尔滨 (150031)3苏州大学药学系，浙江苏州 (215007)4北京大学药学院药剂系，北京 (100083)E-mail：yanxuey@摘要：目的：考察不同剂量重组水蛭素-2（rHV2）口服给药后的抗凝血效应。
方法：以凝血时间（CT－Clotting Time）和凝血酶时间（TT-Thrombin Time）为指标，测定大鼠口服不同剂量的rHV2的抗凝血效应。
结果：rHV2口服给药后，凝血时间及凝血酶时间试验均表现出显著的抗凝血效果。
而且从给药后1h到4h抗凝效应一直延续。
并且还可以说明这种抗凝血效应是有剂量依赖性的。
当剂量范围在50 mg·kg-1~100 mg·kg-1之间，抗凝血效应随着剂量的增加而加强。
结论：rHV2经大鼠口服后能够产生抗凝血效应，说明rHV2的口服是可行的。
关键词：重组水蛭素-2；口服；抗凝血；药效学中图分类号：R969.1 文献标示码：A1. 引言水蛭素是一种由65个氨基酸残基组成的多肽，是目前已知的作用最强的天然凝血酶抑制剂[1,2]。
由于多肽类药物易被消化道中的酶降解而失去活性，因此这类药物的给药途径以注射为主。
但频繁注射给病人带来很大的不适，因此开发水蛭素的口服给药制剂具有很大的价值。
韩玉珉等[3]证明重组水蛭素-2(rHV2)经十二指肠给药后表现出明显的抗凝血作用，但作用弱于注射给药。
本研究考察了rHV2口服给药后的抗凝血作用，进一步验证完整的胃肠道环境对于rHV2活性的影响。
从而为开发水蛭素口服给药制剂奠定了理论基础。
2. 实验材料2. 1 试剂与药品rHV2（4067 ATU·mg-1，北京大学生命科学院）。
凝血酶（54 U·mg-1，Sigma 公司）。
Tris HCl (Sigma 公司)。
2.2 主要仪器电热恒温水浴锅（北京医疗设备厂）。
精密电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）。
秒表（上海手表厂）。
2.3 实验动物SD大鼠（♂，200g），维通利华实验动物中心。
3 实验方法3.1凝血时间（CT）测定方法称量rHV2，加生理盐水配成溶液。
大鼠随机分组，每组5只，分别按50 mg·kg-1，75 mg·kg-1，100 mg·kg-1的剂量灌胃给药。
灌胃体积2 ml。
给药前的凝血时间测定值设为对照。
在选定的时间点用毛细管从眼眶静脉丛取5cm长的血柱。
每隔20s折断毛细管一小截，检查有无凝血丝。
记录从毛细管采血至出现凝血丝的时间，即为凝血时间[3]。
3.2 凝血酶时间（TT）测定方法3.2.1 溶液的配制100U·ml-1凝血酶储备液：取一小瓶内含5000U的牛凝血酶，加入生理盐水5 ml使溶解，再加入硫酸钡100 mg，于37℃下温育20 min，将上清液移至0.85%生理盐水20 ml内，再加甘油25 ml，混合。
-20℃保存。
pH 3.5 Tris缓冲液：取Tris（一级生化试剂）6.0 g，氯化钠6.6 g，0.1mol·L-1盐酸440.0 ml，蒸馏水加至1000 ml，4℃下保存。
凝血酶工作液：取凝血酶储备液0.1 ml，加pH 3.5 Tris缓冲液0.6 ml混合，于37℃下温育20 min。
即为凝血酶工作液[4]。
3.2.2 测定步骤大鼠随机分组，每组5只，按50 mg·kg-1的剂量灌胃给药，在选定的时间点用毛细管从眼眶静脉丛取血。
血液用3.8%的柠檬酸钠溶液抗凝，血液与柠檬酸钠溶液的比例是8.75：1.25。
血液3000 rpm离心10min，吸取上层血浆。
取0.1 ml血浆于1.5 ml塑料离心管内，加0.1 ml37℃温育的Tris缓冲液，混合，37℃温育1 min。
在1 min末向离心管内加0.1 ml凝血酶工作液，同时启动秒表。
用注射器针头以每秒2次的频率在混合液内挑动，至形成凝块，停表，记录时间，即为凝血酶时间。
给药前的凝血酶时间测定值设为对照。
4 实验结果rHV2大鼠口服给药CT及TT测定结果见表1和表2。
表1 不同剂量rHV2大鼠口服给药CT测定结果(n = 5)Tab. 1 Results of CT at different time after p.o. administration of rHV2 at different dose (n = 5) 剂量(mg·kg-1) 对照组 (s) 给药1h (s) 给药2h (s) 给药3h (s)79.19±19.96**65.90±19.76*52.02±27.4250.0 51.99±13.04107.11±40.99**74.98±24.15*82.38±59.0575.0 31.64±8.4986.20±14.25**99.91±44.44*100.0 47.73±10.6673.55±23.20**与对照组相比，* p < 0.05，** p < 0.01表2 rHV2以50.0 mg·kg-1体重剂量大鼠口服给药CT 和TT测定结果(n = 5)Tab. 2 Results of CT and TT at different time after p.o. administration of rHV2 at a dose of 50.0 mg·kg-1 (n = 5)对照组（s）给药1.5h(s)给药4.0h(s)CT (s) 121.40±13.52 132.39±7.14* -TT (s) 22.02±3.13 35.77±16.18**26.26±7.23*与对照组相比，* p < 0.05，** p < 0.01表1为大鼠口服不同剂量的rHV2在不同时间点CT的测定。
可见三个剂量组都表现出显著的抗凝血效应。
当剂量为50.0 mg·kg-1，给药后1 h没有抗凝血效应。
但在2 h出现了显著的抗凝血效应(p < 0.01)。
3 h 时抗凝血效应减弱，但仍保持着显著性（p < 0.05）。
当剂量为75.0 mg·kg-1时，虽然给药1 h凝血时间延长，但是没有统计学意义。
在2、3 h出现了显著的抗凝血效应。
当给药剂量为100 mg·kg-1时，给药后1、2、3 h均出现显著的抗凝血效应。
而且1 h的抗凝血效应就特别显著（p < 0.01），这种显著性一直延续到3 h。
另一项实验是以50 mg·kg-1的剂量灌胃，在1.5 h同时测定CT和TT。
可见在给药后1.5 h凝血时间和凝血酶时间均有所延长（p < 0.05，p < 0.01）。
在给药后4 h测定TT，发现抗凝效应依然存在（p < 0.05）。
5 讨论韩玉珉等[3]曾做过经十二指肠给药后的抗凝血及抗血栓效应研究，所用的重组水蛭素比活为4000-5000AT-U·mg-1，与本研究所用的重组水蛭素活性相近。
结果表明，当给药剂量为50 mg·kg-1、71 mg·kg-1、100 mg·kg-1、141 mg·kg-1、200 mg·kg-1时均有明显的抗凝血作用。
而且抗凝强度随剂量的增加而增加。
给药剂量为50 mg·kg-1、100 mg·kg-1、200 mg·kg-1时，抗静脉血栓形成作用明显，且随剂量的加大其抗栓作用增强，对全血栓形成的影响尤其明显。
这个实验说明重组水蛭素是可以通过肠道吸收并起到抗凝血作用的。
有报道[4]称水蛭素可以被胃蛋白酶水解，丧失活性，因此胃部的生理环境对水蛭素的存活是个挑战。
十二指肠给药避过了胃蛋白酶的降解，使重组水蛭素得以存活，并进一步被吸收进入系统循环。
但是口服给药后会是什么样的情况还是个未知数。
目前尚没有水蛭素口服给药药效学方面的报道。
从本实验的结果来看，rHV2口服给药无论从凝血时间还是凝血酶时间都体现出显著的抗凝血效果。
而且从给药后1h到4h抗凝效应一直延续。
并且还可以说明这种抗凝血效应是有剂量依赖性的。
当剂量范围在50 mg·kg-1~100 mg·kg-1之间，抗凝血效应随着剂量的增加而加强。
这一点与韩的结论是一致的。
本实验没有给药4 h后的测定结果。
Bichler[5]报道水蛭素皮下（剂量分别为600 AT-U·kg-1、800 ATU·kg-1、1000 ATU·kg-1）及静脉注射（1000 ATU·kg-1）后TT时间明显延长，直到给药后7小时，仍然能检测到它的抗凝血作用。
说明rHV2的作用是持久的。
总之，以上的数据表明rHV2经大鼠口服后能被吸收入血，并能够产生抗凝血效应。
这说明rHV2的口服是可行的。
参考文献[1] Markwardt, F. Hirudin as an inhibitor of thrombin [M]. In: GE Perlmann and L Lorand, eds. MethodsEnzymol.19: Proteolytic Enzyme. New York-London: Academic Press, 1970. 924-932[2] Chang JY. The functional domain of hirudin, a thrombin-specific inhibitor [J]. FEBS Lett, 1983, 164: 307-313[3] 韩玉珉，陆峪峰，王朝晖，等. 重组水蛭素十二指肠给药后的抗凝血和抗血栓作用实验研究 [J].中华血液学杂志, 1999, 20: 483-484[4] 王朝晖，鹿峪峰，韩玉珉. 重组水蛭素HV2的稳定性[J]. 生物化学杂志，1995，11(3): 321-327[5] Bichler J, Fichtl B, Siebeck M, and Fritz H. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of hirudin in man aftersingle subcutaneous and intravenous bolus administration [J]. Drug Res., 1988, 38(1): 704-710The anticoagulant effect of recombinant hirudin 2 afterorally administrated to ratsYan Xueying1，Tang Xiaofei2，Zhang Xuenong3，Zhang Qiang41 Pharmaceutical College，Heilongjiang University of Chinese Medicine，Harbin (150040)2 Xiangfang District Center for Disease Control and Prevention of Harbin city of Heilongjiangprovince，Harbin (150031)3 Pharmaceutical College，Suzhou University，Suzhou，Jiangsu (215007)4 Pharmaceutical College，Peking University，Beijing (100083)AbstractThe clotting time (CT) and thrombosis time (TT) were measured to assess the anticoagulant effect of recombinant hirudin 2 (rHV2) after orally administrated to rats. Both CT and TT showed the remarkably effects and the effects continued to 4h after administration. The effect is dose dependent at the dose of 50 mg·kg-1~100 mg·kg-1. These data showed that rHV2 has anticoagulant effect after oral administration; it could be administrated by oral route.Keywords：recombinant hirudin 2，oral administration，anticoagulant，pharmacodynamics作者简介：阎雪莹，女，1971-，硕士导师，主要研究方向是靶向制剂及天然药效成分的体内代谢。