化学发光法定量检测抗双链DNA+抗体的临床应用
抗ds-DNA定量检测在系统性红斑狼疮诊断和治疗中的应用观察
抗ds-DNA定量检测在系统性红斑狼疮诊断和治疗中的应用观察何准发;郭旺源;曾光萍;杨喜【摘要】目的探讨定量检测抗双链脱氧核糖核酸(ds-DNA)在系统性红斑狼疮(SLE)诊断和治疗中的应用价值.方法77例SLE患者(活动期37例、缓解期40例)、74例其他结缔组织病患者和68例体检健康者血清用间接酶联免疫吸附试验定量检测抗ds-DNA,以观察比较各组差异;另对其中36例接受免疫治疗的活动期SLE住院治疗患者于治疗前和治疗后第3、7、14、20天各抽血检测抗ds-DNA、补体C3、C4、红细胞沉降率(ESR)等,以比较各指标的变化敏感性.结果活动期和缓解期SLE患者抗ds-DNA浓度与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),其他结缔组织病患者与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);36例活动期SLE患者接受免疫治疗后的第3天抗ds-DNA含量较治疗前明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),C3和ESR治疗后第14天较治疗前有明显差别,差异有统计学意义(P<0.05),C4在治疗前后差异无统计学意义(P>0.05).结论抗ds-DNA对SLE的诊断具有较高的敏感性和特异性,有效治疗时其下降比C3、C4和ESR等非特异性炎性指标恢复快而明显,定量检测抗ds-DNA更能显示其临床应用价值.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2011(008)010【总页数】3页(P1153-1154,1156)【关键词】系统性红斑狼疮;红细胞沉降率;补体C3;补体C4【作者】何准发;郭旺源;曾光萍;杨喜【作者单位】湖南省郴州市第一人民医院中心医院检验科,423000;湖南省郴州市第一人民医院中心医院检验科,423000;湖南省郴州市第一人民医院中心医院检验科,423000;湖南省郴州市第一人民医院中心医院检验科,423000【正文语种】中文系统性红斑狼疮(SLE)被称为“不是癌症的癌症”,严重危害青年女性健康,主要损害肾脏、皮肤、关节、中枢神经系统和血液系统等,可累及全身各个器官,病情严重时危及生命,我国患病率约70/10万[1]。
抗dsDNA抗体临床应用
第二型
以SLE为最常见
第三型
只与ssDNA起反应，称为抗变性DNA（ssDNA）抗体
也以SLE为多见，其他风湿 性疾病也可检测出，但阳性 率比SLE低的多
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抗双链DNA抗体
1957年Ceppelini等首先描述了SLE患者血清中存在同脱氧核糖核酸(DNA)反 应的成分。 1975年Stollar等报告了抗DNA抗体与SLE有密切关系，并认识到抗DNA抗体 检查对SLE的诊断价值。 70年代中后期，数种定性、定量的抗dsDNA抗体检测方法被应用于临床。
实验室检测抗dsDNA抗体应首选敏感性高的检测方法（如ELISA）筛查。对疑 似患者可以使用特异性最高的检测方法（如IIF法）辅助确认。
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抗dsDNA抗体联检指标—抗ssDNA抗体
提高SLE诊断率与准确率
检测抗ssDNA抗体有助于减少仅有抗ssDNA抗体阳性而临床表现符合SLE的漏诊，提 高SLE的诊断率。
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SLE患者体内抗DNA抗体的分类
SLE患者体内有三种类型的抗DNA抗体，其中抗dsDNA抗体和抗 ssDNA抗体的检测与监测临床最为常用。
分型 第一型 抗原抗体反应 与dsDNA起反应而不与ssDNA起交叉反应 与dsDNA和ssDNA起反应，其交叉反应可以是部分的 或完全的。此型抗体称为抗天然DNA（dsDNA）抗体 结果与应用 此型抗体罕见，仅见于SLE
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全身症状 眼
发热, 乏力、 疲倦、 消瘦
皮肤粘膜
干燥 综合征
肌肉骨骼
血液系统
SLE
肾脏
消化系统 神经系统
心血管
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新型磁分离直接化学发光方法的建立及其临床应用
·论著·中国当代医药2020年12月第27卷第35期新型磁分离直接化学发光方法的建立及其临床应用宋宇1刘鹏1李武2袁锦云2丛海燕1鞠毅1姚继承3王明义1▲1.威海市立医院中心实验室,山东威海264200;2.深圳市新产业生物医学工程股份有限公司,广东深圳518052;3.威海威高生物科技有限公司,山东威海264200[摘要]目的建立新型磁分离直接化学发光的方法及探讨其临床应用。
方法新型磁分离直接化学发光方法中发光标志物采用高灵敏度的异鲁米诺衍生物,分离试剂采用高特异性的羊抗异硫氰酸荧光素(FITC)多克隆抗体包被的免疫纳米磁性微珠,发光底物采用简便的NaOH 和H 2O 2。
新型磁分离直接化学发光方法的临床应用性能评估以血清促甲状腺激素(TSH)为例,选取2019年8月~2020年8月威海市立医院初诊的104例甲状腺功能亢进症患者血清作为甲亢组;121例甲状腺功能减退患者血清作为甲减组;以同期来体检的134例健康成年人血清作为对照组。
标本采用新型磁分离直接化学发光方法及ADVIA Centaur XP 同时检测,将此两种方法所得结果进行比对,评价其临床符合性。
再通过对高、中、低三种浓度标准液的重复检测,评价其灵敏度、精密度和稀释回收率。
结果实现了新型磁分离直接化学发光方法的建立,并通过了临床验证,以TSH 为例的临床应用结果显示,建立的新型磁分离直接化学发光方法的检测灵敏度为0.01μIU/mL,批内和批间变异系数(CV)均<5%,稀释回收率>80%。
本研究建立的新型磁分离直接化学发光方法与ADVIA Centaur XP 的直接化学发光法对TSH 的检测结果进行对比,相关系数为0.9874。
结论成功建立一种新型磁分离直接化学发光方法,该方法具有高灵敏度、高精密度和很好的临床相符性,具有较好的临床应用价值。
[关键词]促甲状腺激素;微量活性物质;新型磁分离直接化学发光方法;定量检测[中图分类号]R446.6[文献标识码]A[文章编号]1674-4721(2020)12(b)-0008-05Establishment of a new direct chemiluminescence method for magnetic separation and its clinical applicationSONG Yu 1LIU Peng 1LI Wu 2YUAN Jin-yun 2CONG Hai-yan 1JU Yi 1YAO Ji-cheng 3WANG Ming-yi 1▲1.Central laboratory,Weihai Municipal Hospital,Shandong Province,Weihai 264200,China;2.Shenzhen New In⁃dustry Biomedical Engineering Co.,Ltd.,Guangdong Province,Shenzhen 518052,China;3.Weihai Weigao Biotech⁃nology Co.,Ltd.,Shandong Province,Weihai 264200,China[Abstract]Objective To establish a new direct chemiluminescence method for magnetic separation and explore theclinical application.Methods A new direct chemiluminescence method for magnetic separation was developed using isoluminol derivatives with high sensitivity as luminescent markers,immunomagnetic nanoparticles coated with goat an⁃ti-fluorescein isothiocyanate (FITC)polyclonal antibody with high specificity as separation reagents,NaOH and H 2O 2as luminescent substrates.To evaluate the clinical application performance of this method,taking serum thyroid stimulat⁃ing hormone (TSH)as an example,104patients with hyperthyroidism who were newly diagnosed in Weihai Municipal Hospital from August 2019to August 2020were selected as hyperthyroidism group;121patients with hypothyroidismwere selected as hypothyroidism group;134serum samples of healthy adults at the same period were taken as control group.The samples were detected by the method established in this study and ADVIA Centaur XP at the same time.The two results were compared to evaluate the clinical compliance.The sensitivity,precision and dilution recovery were evaluated by repeated detection of high,medium and low concentrations of standard solution.Results A new direct chemiluminescence method for magnetic separation was established.The sensitivity of the method was 0.01μIU/mL.The intra and inter coefficient of variation (CV)was less than 5%,and the dilution recovery was more than 80%.The new direct chemiluminescence method for magnetic separation established in this study was compared with the directchemiluminescence method of ADVIA Centaur XP for the TSH detection results,and the correlation coefficient was0.9874.Conclusion A new magnetic separation direct chemiluminescence method has been successfully established,which has high sensitivity,high precision and good clini⁃cal compatibility,and has good clinical application value.[Key words]Thyroid stimulating hormone;Trace activesubstances;New direct chemiluminescence method formagnetic separation;Quantitative detection[基金项目]国家科技重大专项(2009ZX10004-719);国家战略性新兴产业发展专项资金计划2013年高性能医学诊疗设备专项(发改办高技[2013]2598号)▲通讯作者中国当代医药2020年12月第27卷第35期·论著·随着医疗技术水平不断提高,对微量物质的定量检测有了更高的要求,许多免疫检测方法也得到了不断的改进和完善。
纳米磁微粒化学发光法定量检测抗核抗体谱的临床应用
纳米磁微粒化学发光法定量检测抗核抗体谱的临床应用罗宇维;全树绿;张明娇【摘要】目的研究全自动、定量纳米磁微粒化学发光法(NM-CLIA)检测抗核抗体谱中10种自身抗体的临床应用价值,为抗核抗体谱检测方法的选择提供参考.方法收集2016年10月至2018年2月南方医科大学第三附属医院自身免疫性疾病患者血清1037例,健康体检者血清200例,用NM-CLIA检测血清抗干燥综合征抗原A60(SSA/Ro60)抗体、抗干燥综合征抗原A 52(SSA/Ro52)抗体、抗干燥综合征抗原B(SSB/La)抗体、抗双链DNA(ds-DNA)抗体、抗核糖核蛋白(RNP)抗体、抗史密斯(Sm)抗体、抗着丝点蛋白B(CENP-B)抗体、抗核糖体P蛋白(Rib-P)抗体、抗核糖体(Nuc)抗体、抗组蛋白(His)抗体,同时应用线性免疫印迹法(LIA)平行检测以上抗核抗体谱,对检测结果进行统计学分析.结果NM-CLIA在检测血清中10个常见自身抗体时具有较高特异性,均达95%以上;NM-CLIA与LIA对10个自身抗体具有相当的检出率,与文献报道的疾病抗体发生率一致;两种方法在检测抗SSA60抗体、抗SSA52抗体、抗SSB抗体、抗RNP抗体、抗CENPB抗体、抗Nuc抗体和抗His抗体时,表现出良好的一致性(Kappa>0.75,P<0.05),而在检测抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体、抗Rib-p抗体时一致性一般(0.4<Kappa<0.75,P<0.05);抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体、抗Rib-p抗体在两种方法检测中结果不一致的样本经第三方试剂验证结果显示,NM-CLIA与第三方试剂在检测抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体、抗Rib-p抗体时,差异无统计学意义(P>0.05);LIA与第三方试剂检测结果比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 NM-CLIA检测特定抗核抗体谱时具有良好的特异性及检出率,两种方法在检测抗SSA60抗体、抗SSA52抗体、抗SSB抗体、抗RNP抗体、抗CENPB抗体、抗Nuc抗体和抗His抗体时具有良好的一致性,而在检测抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体、抗Rib-p抗体时一致性一般,NM-CLIA与第三方试剂的检测结果更吻合.由于NM-CLIA具有全自动、简单、快速、定量、特异性好以及随机组合检测项目等优点,更值得临床推广应用.%Objective To evaluate the clinical performance of an automated, quantitative magnetic nanoparti-cle chemiluminescence immunoassay (NM-CLIA) on detecting ten antinuclear antibodies profile. Methods A total of 1037 sera samples with autoimmune diseases and 200 healthy subjects were collected from the Third Affiliated Hospital of Southern Medical University during the period of October 2016 to February 2018. The antibodies to SSA/60, SSA/52, SSB/La, double-stranded DNA (ds-DNA), ribonucleoprotein (rRNP), smith antigen (Sm), centromereprotein B (CENP-B), ribosome P protein (Rib-p), nucleosome (Nuc) and histone (His) were detected by NM-CLIA and line immu-noassay (LIA) in parallel. Results The specificity of NM-CLIA to ten autoanbodies was all above 95%. NM-CLIA and LIA have a comparable positive detection rate for 10 autoantibodies, which is consistent with the incidences of positive antibodies of autoimmune diseases from reported data. NM-CLIA and LIA showed excellent qualitative coincidence rate in the detection of analyzing anti-SSA/60 antibodies, anti-SSA/52 antibodies, anti-SSB/La antibodies, anti-rRNP antibod-ies, anti-CENPB antibodies, anti-Nuc antibodies and anti-His antibodies (kappa>0.75, P<0.05), but the coincidence rate was generally normal when detecting anti-ds-DNA antibodies, anti-Sm antibodies, and anti-Rib-p antibodies (0.4<Kap-pa<0.75, P<0.05). All the discrepant samples of the two methods were confirmed with the reagents from other manufac-turer. The results showed that there was no significant differencein the detection of anti-ds-DNA antibodies, anti-Sm an-tibodies, and anti-Rib-p antibodies between NM-CLIA and the validation reagent (P>0.05), but there was significant dif-ference between LIA and the validation reagent (P<0.05). Conclusion NM-CLIA showed excellent positive rate and specificity when detecting ten antinuclear antibodies profile. The two methods show the excellent qualitative coincidence rate in the detection of anti-SSA/60 antibodies, anti-SSA/52 antibodies, anti-SSB/La antibodies, anti-rRNP antibodies, anti-CENPB antibodies, anti-Nuc antibodies and anti-His antibodies, but the coincidence rate is generally ordinary when detecting anti-ds-DNA antibodies, anti-Sm antibodies, and anti-Rib-p antibodie. NM-CLIA test results have better consis-tency with the validation reagent among all discrepant samples. NM-CLIA has the advantages of full automatic, simple, fast, quantitative, high specificity and random combination detection items, which is more worthy of clinical application to to detect antinuclear antibodies profile.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2018(029)011【总页数】4页(P1527-1530)【关键词】纳米磁微粒化学发光法;抗核抗体谱;线性免疫印迹法【作者】罗宇维;全树绿;张明娇【作者单位】南方医科大学第三附属医院风湿免疫科,广东广州 510630;南方医科大学第三附属医院风湿免疫科,广东广州 510630;南方医科大学第三附属医院风湿免疫科,广东广州 510630【正文语种】中文【中图分类】R446.1抗核抗体(antinuclear antibody，ANA)是以真核细胞各种细胞成分为靶抗原的器官非特异性自身抗体的总称，抗核内多种物质的特异性抗体谱即为ANA谱[1]。
生物薄片技术检测抗双链DNA抗体的临床应用
生 物 薄 片技 术 为 近 年 国 内发 展 的新 技 术 ， 是 显 示 电脑 系 统 。
一
． 种滴 定平 板 技 术 ，载 片与 样本 所 在 加 样 板 表 面 １６ 操 作步 骤 ① 准 备 ：当生 物 薄 片达 到 室 温 时方 可 打 开包 凹槽 构成 的 一封 闭 空 间 ，达 到 充 分接 触 及 保 湿 等
荧 光 抗 体 和 清 洗 ） ⑥ 封 片介 质 （ 酸 盐 缓 冲 甘 油 槽 里 。 加甘 油／ Ｂ ； 磷 滴 Ｐ Ｓ至 盖玻 片反 应 区约 １ ｌ 从 Ｏ 。
免疫 荧 光 显微 镜 系 统 ：利 用 强 烈 的结 果 滤 光 物 薄 片朝 下 放 在 已准 备 好 的 盖玻 片上 ，立 即查 看 器 过 滤 的激 发光 线 ， 发 标 本 产生 荧 光 ， 上 图文 并 调整 使 盖玻 片嵌 入 载 片 的凹槽 里 。 激 加
加 ２ Ｉ ， 成 Ｐ Ｓ Ｔ ｅｎ缓 冲液 ， 于稀 释 血 清 、 ｎ 配 ｌ Ｂ －ｗ ｅ 用 ８ ） ④ 盖玻 片 。 ． ； ４
１５ ． 仪 器
⑨ 封 片 ：将 盖 玻 片直 接 放 在 泡 沫 塑料 板 的 凹
Ｐ Ｓ Ｔ ｅｎ缓 冲液 中取 出 生 物 薄 片载 片 ，用 纸 巾 Ｂ —ｗｅ 擦 干背 面 和边 缘 ， 不要 擦拭 反 应 区间 隙 。将 载 片生
本 院 门诊及 住 院 的有 一定 临 床症 状 但 缺 乏 实 次 实验 均需 做 阳性 、 阴性对 照 ， 用前 要 混匀 。 使
验 证据 的病人 ８ ９例 ， 中包 含 ２例复 诊 病人 。 其
１２ ． 标 本 采 集 １３ 方 法 学 原 理 ．
血清 （ 可重 复多 次 实验 ） 起 始稀 释度 为 １１ 。 育 ３ ｎ ， ： ０ ０ ｍｉ。
自身免疫病的检验新.
检测抗ENA抗体的最常用方法是免疫印迹技术 （IBT）和斑点酶免疫（dot-ELISA）技术
免疫印迹技术（Immunoblotting,IBT）检测 ENA抗体的原理和流程 ENA经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，各种抗原多 肽按分子量大小分离，电转移至硝酸纤维膜固 定后，患者血清中的自身抗体即可通过酶联免 疫反应与相应的蛋白多肽结合，在硝酸纤维膜 上呈现特异性显色条带，参照各种已知阳性血 清在膜上留下的显色区带的位置特征及显色区 带对应的蛋白多肽抗原的分子特征，即可检测 和识别多种自身抗体。
类风湿因子（RF）
是抗变性IgG的自身抗体，主要为IgM，也可见 IgG,IgA。 考点 检测方法： 考点
胶乳颗粒凝集实验：只能定性或半定量，灵敏度和 特异性不高，只能检出IgM类RF 速率散射比浊法：快速、准确、能定量分析，但仍 然只能测出IgM类RF ELISA法：根据酶标记抗体的特异性不同可以测定 不同Ig类型的RF。 IgM、 IgG、 IgA均可测出
ITP（免疫性血小板减少性紫癜）：
多发生于儿童和青少年，女性较多。 血中存在抗血小板抗体。 根据病因和临床表现分为特发性和继发性。 前者无明显诱因，后者有明显诱因，或在一 些原发病基础上发生血小板减少。 选择题
Ⅲ型超敏反应引起的自身免疫性疾病
系统性红斑狼疮（SLE） 是一种累及多器官、多系统的小血管及结缔组 织疾病，好发女性，疾病呈渐进性，缓解与复 发交替，体内存在多种自身抗体。 类风湿关节炎（RA） 本病特征以手脚小关节发病，向心对称性发展， 血清和关节滑膜液中出现抗变性IgG抗体，即 类风湿因子（rheumatoid factor，RF） 以上两种疾病发病机制属III型超敏反应。
抗核抗体和抗双链DNA检测在系统性红斑狼疮诊断中的意义_刘鸿林
２００８年１月第５卷第１期・交流园地・ＣＨＩＮＡＭＥＤＩＣＡＬＨＥＲＡＬＤ中国医药导报同、无血缘关系、预处理强度加强、具妊娠史的女性做供者以及ＣｓＡ及ＭＴＸ用量不足等均为急性ＧＶＨＤ的高危因素［２］。
观察２１例不全相合移植的患者，Ｃ０组和Ｃ２组急性ＧＨＶＤ的发生率分别为２５．００％和５７．１４％，Ｃ０组比文献报道小［３］。
３．３肝肾毒性发生情况ＣｓＡ有肝、肾、神经系统及心血管系统不良反应，尤其以肝、肾毒性最为常见。
我们发现ＣｓＡ肝、肾损害的发生率随ＣｓＡ浓度的升高而增加，经减量或停药后，肝、肾功能均可恢复。
Ｃ０组和Ｃ２组肝、肾毒性发生率比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。
３．４Ｃ０、Ｃ２监测法对比Ｃ０监测法由于取血方便，临床沿用至今。
近期研究表明，服药后２ｈ血药浓度能够较好地反映ＣｓＡ体内药物暴露情况。
有学者提出采用Ｃ２监测法，即监测服药后２ｈＣｓＡ峰血药浓度［４］。
但由于有效血药浓度范围和疗效、毒性等方面的评价仍在探讨中。
根据对我院进行不全相合移植患者监测Ｃ０、Ｃ２的情况，我们认为监测ＣｓＡ的Ｃ０、Ｃ２都能预测不良反应和急性排斥的发生，但Ｃ２监测比Ｃ０监测更为有效。
但由于我们观察的病例数不多，观察的时间有限，且病人的情况存在个体差异，因此Ｃ２的临床特点还需进一步的研究。
［参考文献］［１］李金恒．临床治疗药物监测的方法和应用［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２００３．１０２．［２］ＲｉｃｈａｒｄＡＮ，ＭａｒｇｒｅｔＳＰ，ＲａｉｎｅｒＳ，ｅｔａｌ．Ａｃｕｔｅｇｒａｆｔ－ｖｅｒｓｕｓ－ｈｏｓｔｄｉｓｅａｓｅ：ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｒｉｓｋｆａｃｔｏｒｓａｆｔｅｒａｌｌｏｇｅｎｅｉｃｍａｒｒｏｗｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓｗｉｔｈｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅａｎｄｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅｄ［Ｊ］．Ｂｌｏｏｄ，１９９２，８０（１２）：１８３８－１８４５．［３］钱雅静，章卫平，王建民，等．异基因外周造血干细胞移植术后监测环孢素Ａ血药浓度的临床意义［Ｊ］．第二军医大学学报，２００２，２３（９）：１０３７．［４］范芳，谢瑞祥，吴国森．改良反相高效液相色谱法测定非清髓性异基因干细胞移植患者全血中环孢素Ａ的Ｃ２浓度［Ｊ］．中国医院药学杂志，２００４，２４（５）：２８２．（收稿日期：２００７－０９－１７）系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）是一种多系统受损的自身免疫性疾病，其显著临床特点之一是血清中出现多器官非特异性抗体，如ＡＮＡ（抗核抗体）、抗ｄｓ－ＤＮＡ、抗Ｓｍ抗体、抗ＳＳＡ、抗ＰＴ抗体等。
两种抗双链DNA抗体检测方法的比较
重 要 诊 断 依 据 。抗 ｄ— ＮＡ 抗 体 不 仅 在 自身 免 疫 性 疾 病 中 发 ｓＤ 挥 重 要 作 用 ， 可 能 在 免 疫 应 答 的调 节 、 瘤 的 发 生 和 发 展 中 也 肿
扮 演 一 定 角 色 ］ 。
收 集 ２０ ０ ９年 １月 至 ２ １ ０ ０年 １月本 院住 院 确 诊 为 Ｓ Ｅ患 者 ７ Ｌ ９
抗 双链 Ｄ ＮＡ（ｓＤ ｄ— ＮＡ） 体 是 系 统 性 红 斑 狼 疮 （ Ｉ ） 抗 Ｓ 的 Ｅ 标 志性 抗 体 之 一 ， 诊 断 Ｓ Ｅ 具 有 较 高 的 特 异 性 ， 抗 ｄ 对 Ｌ 且 ｓ Ｄ ＮＡ 抗 体 滴 度 与 Ｓ Ｅ病 情 的 进 展 相 关 。本 实 验 室 以 纯 化 的 Ｌ
察 或 非 特 异性 的条 带 出 现导 致 假 阳性 结 果 的 出现 ， 造 成 临床 易 的误 诊 和 漏诊 ［ ； Ｌ Ｓ 可 用 于 定 量 检 测 ， 由 于 ｄ— ＮＡ 难 ４ Ｅ ＩＡ 但 ｓ Ｄ 于包 被在 固相 载体 上 ， 响 了 检 测 的 灵 敏 度 和 特 异 性 ， 且 影 ５而 ］ 目前 该 试 剂 主 要 依 靠 进 口 ， 测 成 本 较 高 。 检
ｔ ｒａｆ ｒｔ ｅｃａ ｓｆ ａ ｉ ｎ ｏ ｙ ｔ ｍｉ ｕ ｕ ｒ ｔ ｅ ｔ ｓ ｓ ｅ ｉ ｏ ｈ ｌｓ ｉ ｃ ｔ ｆｓ ｓ ｅ ｃｌ ｐ ｓｅ ｙ ｈ ｍａ ｏ ｕ ｉ ｏ
中 常 见 问 题 及 注 意 事 项 ［］ 中 国 误 诊 学 杂 志 ， ０ ３ ３ Ｊ． ２ ０ ，
纯双链 Ｄ ＮＡ 抗 原 ， 大 消 除 了假 阳性 ， 且 本 法 具 有 简 便 、 大 而 快 速 、 果 可 靠 、 需 特 殊 设 备 的 特 点 ， 个 检 测 过 程 仅 需 数 分 结 不 整 钟 ， 本 低 等 特 点 ；Ｂ 中 虽 是 天 然 双链 Ｄ 成 ＩＴ ＮＡ 抗 原 ， 在 转 印 但
化学发光法定量检测抗双链DNA抗体的临床应用
【 要】 目 的 探 讨 定 量 检 测 抗 双 链 ＤＮ ｄ ＤＮＡ） 体 对 系 统 性 红 斑 狼 疮 （ Ｉ 疾 病 诊 疗 的 摘 Ａ（ ｓ 抗 Ｓ Ｅ）
价 值 。方 法
将 ｓ Ｉ Ｅ疾 病 患 者 ６ ８例 分 为 ｓ Ｉ Ｅ疾 病 活 动 组 ４ ３例 和 ｓ Ｉ Ｅ无 明显 疾 病 活动 组 ２ ５例 ； 非
论
抗 ｄＤ ｓ ＮＡ抗 体 定 量 检 测 对 于 Ｓ Ｅ疾 病 活 动 性 判 断 具 有 良好 的 应 用 价 值 ， 不 适 合 临 床 病 程 监 Ｌ 但
【 键 词】 红 斑 狼 疮 ， 统 性 ； 化 学 发 光 测定 法 ； 抗 体 关 系 中图分类号 ：４６６ ； ５３２１ Ｒ ４ ． １ Ｒ ９ ． ４ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ６ ３４ ３ （ ０ ９ ０ ０ 卜Ｏ １ ７ — １ ０ ２ ０ ） １０ ４ ３
［ ｓｒｃ］ Ｏ ｅ ｔ ｅ Ｔｏ ｅ ｐｏ ｅ ｔｅ ｃｉｉａ ａｕ ｆａ ｔ ｄ ＤＮＡ ｎ ｉｏ ｙｑ ａ ｔｔｔ ｅｄ ｔｃ Ａｂ ｔａ ｔ ｃｉ ｖ ｘ ｌｒ ｈ ｌｎｃ ｌｖ ｌ ｅｏ ｎ ｉ ｓ — ａ ｔ ｄ ｕ ｎｉａｉ ｅｅ ｂ ｖ
ｔ ｎ ｉ ｉｇ ｏ ｉ ｎ ｒ ａ ｍ ｅ ｔｏ ｙ ｔ ｍｉ ｌ ｐ ｓ ｅ ｙ ｈ ｍａ ｏ ｕ Ｓ ｉ ｎ ｄ ａ ｎ ｓｓａ ｄ ｔ ｅ ｔ ｎ ｆｓ ｓ ｅ ｃ ｕ ｕ ｒ ｔ ｅ ｔ ｓ ｓ（ ＬＥ） Ｍ ｅｈ ｄ Ｓ ｘ ｙ ｅｇ ｔＳ ａ ｏ ． ｔｏｓ ｉｔ—ｉｈ Ｉ ｐ — Ｅ
化学发光法在感染性指标定量检测中的应用
化学发光法在感染性指标定量检测中的应用目的探究化学发光法在感染性指标定量检测中应用。
方法选择2012年3月～2014年8月我院在术前或需要输血治疗的患者253例，在输血前对所有患者进行感染性指标定量检测，主要包括乙型肝炎表面抗原、抗丙型肝炎病毒抗体、抗梅毒螺旋体抗体以及抗人类免疫缺陷病毒抗体等，通过酶联免疫吸附法定性检测所有的阳性标本。
结果乙型肝炎表面抗原、抗丙型肝炎病毒抗体、抗梅毒螺旋体抗体以及抗人类免疫缺陷病毒抗体这几项指标分别检出阳性定量标本33例（约13.04%，33/253）、3例（约占1.19%，，3/253）、3例（约占1.19%，3/253）、1例（约占0.40%，1/253），定量阳性标本的ELISA检测结果显示，各指标定性检测为阴性分别为5例（约占15.15%，5/33）、1例（约占33.33%，1/3）、1例（约占33.33%，1/3），0例。
基于乙肝表面抗原阳性检出率，两种方法结果差异比较明显，具有统计学意义，（χ2=4.43，P＜0.05）。
结论输血感染性指标通过定量检测可以明显提高阳性检出率，不仅能够使受到感染的”窗口期”患者更早被发现，还能从一定程度上加强对医护人员自身的防护，降低临床医疗纠纷发生率。
标签：化学发光法；乙型肝炎表面抗原；丙型肝炎抗体；HIV抗体；梅毒临床上，每年因为手术或各种治疗措施需要输血治疗的人数在逐年上升，如何在输血前规避感染性风险也就成了医学研究的热点，同时也是难点。
通常情况下，在手术前、分娩前或输血治疗前均需要通过酶联免疫吸附法进行感染性指标检测，主要包括乙肝表面抗原、抗丙型肝炎病毒抗体、抗梅毒螺旋体媒体抗体、抗人类免疫缺陷病毒抗体共四种指标检测[1]。
化学发光法是近几年以来在临床新兴的检测方法，具有高度敏感性、较强特异性、较宽的线性范围等优点。
本次研究选择2012年3月～2014年8月在我院需要接受输血的患者253例，在输血前通过化学发光法对所有患者进行感染性指标定量检测，现报道如下。
抗核抗体检测的临床应用
三、ANA检测方法
ANA特异性自身抗体可采用多种免疫学方法检测，不同的检测方法具有 不同的临床应用优缺点。
ELISA具有高敏感性、定量及易自动化的优点，但需对每个自身抗体进 行逐项检测。
线性免疫印迹法(line immunoassay, LIA)具有高敏感性、易操作、易自动 化及一次实验操作可同时检测多种自身抗体的优点，但其检测结果为半 定量，某些自身抗体的特异性偏低。
二、ANA检测的临床应用范围
ANA作为AID重要的生物学标志，常见于SLE、干燥综合征(Sjögren′s syndrome，SS)、系统性硬化症(systemic sclerosis，SSc)、混合性结缔组织 病(mixed connective tissue disease，MCTD)及多发性肌炎(polymyositis， PM)/皮肌炎(dermatomyositis，DM)等系统性(非器官特异性)AID患者。
IIF-ANA检测结果判读及报告人员应有培训、考核及定期进行结果判读比 对。
采用ELISA等其他检测方法的ANA检测结果应包括检测结果的定量数值 和单位、参考区间及必要的临床建议。
ANA针对靶抗原的特异性自身抗体检测结果报告应包括检测方法、定性 结果(若为定量检测方法应包含定量数值和单位)及参考区间，同时应包括 必要的临床建议。
自身抗体检测实验室的ANA结果报告形式基于ANA的最新定义，将HEp2细胞胞浆荧光模型及细胞有丝分裂期荧光模型纳入ANA阳性结果。其报 告格式范例见表1。
五、ANA检测结果报告
六、临床意义及解读
IIF-ANA检测结果报告应包括：检测方法、定性结果(阳性/阴性)、荧光模 型、滴度及必要的临床建议。对于混合荧光模型，荧光模型的报告优先 级顺序为细胞核荧光模型、细胞浆荧光模型、细胞有丝分裂期荧光模型。 相同优先级的荧光模型，建议按滴度高低顺序依次报告。
抗双链DNA抗体(dsDNA抗体)检测及临床应用
抗双链DNA抗体（dsDNA抗体）检测及临床应用目的探讨抗双链DNA抗体（dsDNA抗体）检测在系统性红斑狼疮（SLE）诊断中的意义。
方法酶联免疫吸附法联合间接免疫荧光发检测抗双链DNA抗体（dsDNA抗体）。
结果SLE组、其他风湿病组和健康对照组抗双链DNA抗体水平比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。
抗双链DNA抗体（dsDNA抗体）ELISA方法检测灵敏度为88.5%，特异性为96.6%；抗双链DNA抗体（dsDNA 抗体）ELISA方法检测灵敏度为89.6%，特异性为97.7%。
结论两种实验方法检测抗双链DNA抗体，有利于诊断和治疗SLE。
标签：SLE dsDNA抗体系统性红斑狼疮（SLE）：是一种自身免疫性疾病，它的发病与家族遗传、紫外线照射、体内雌激素水平、某些药物、食物及感染有关[2～10]。
我们分析96例SLE患者抗双链DNA抗体（dsDNA抗体）检测结果，以探讨抗双链DNA 抗体（dsDNA抗体）在SLE诊断治疗中的临床应用1资料与方法1.1一般资料我院2011年10月～2014年3月风湿免疫科门诊及病房SLE 患者96例（SLE组），SLE诊断标准符合美国风湿病学会SLE分类标准（2009年），年龄45～72岁，平均年龄（55±8）岁，其中男25例，女71例；其他风湿疾病对照组40例，年龄40～65岁，平均年龄（45±8）岁，其中男15例，女25例；健康对照组为100名健康体检者，年龄40～70岁，平均年龄（50±10）岁，其中男25例，女75例。
1.2方法和试剂采用酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测抗双链DNA抗体（dsDNA抗体），采用间接免疫荧光法检测抗双链DNA抗体（dsDNA抗体）。
试剂盒由欧蒙公司提供。
测定严格按试剂说明书操作。
酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测抗双链DNA抗体步骤：取5μl血清用1.0ml样本缓冲液稀释并混匀，1：201倍稀释。
自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议
自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议自身抗体检测是自身免疫性疾病诊治中的重要工具，随着早期诊断、规化治疗的开展，自身抗体检测在疾病诊断、监测及预后评估中发挥的作用也日益受到重视。
但是，由于目前自身抗体检测缺乏统一的标准化检验方法，加上工作条件、传统诊疗习惯、结果判读以及医疗保险限制等方面的因素影响，导致自身抗体检测在临床应用上存在着不统一、不规现象。
因此，制定适合我国国情的自身抗体临床应用建议十分必要，可为广大临床医生和检验医师提供参考。
《自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议》（以下简称为《建议》）形成分3步进行。
首先由来自全国大型教学医院风湿免疫科医师通过检索国外文献并结合中国实际情况起草《建议》草案，然后将该草案提交由风湿免疫科、检验科、消化科、血液科、神经科等组成的专家组讨论，补充和提出修改意见，修改后的草案再次由起草成员讨论，形成初步建议，并对每项建议条目进行解读。
最后提交由中国免疫学会临床免疫分会专家进行投票评分（Delphi评分，分值从0分到10分，0分表示完全不赞同，10分表示完全赞同），计算所有专家打分的（平均值±标准差）作为每条建议的专家认可度。
《建议》包括13条，每一条都附有基于GRADE 法[1]的证据分级、证据质量和专家认可度及其95%的可信区间。
一、自身免疫性疾病概述自身免疫性疾病是由于免疫功能紊乱，机体产生针对自身抗原的病理性免疫应答反应而引起器官或系统损伤的一类疾病。
根据临床表现和病变累及的围，自身免疫性疾病可以分为系统性和器官特异性，前者以系统性红斑狼疮（SLE）、系统性硬化症（SSc）、类风湿关节炎（RA）、抗磷脂综合征（APS）等为代表；后者包括自身免疫性肝炎（AIH）、原发性胆汁性肝硬化（PBC）、自身免疫性甲状腺炎（AIT）、胰岛素依赖性糖尿病（IDDM）等。
自身免疫性疾病的发病机制尚不完全清楚，目前认为是遗传易感个体在环境因素如感染、紫外线及肿瘤、药物等多种因素共同作用下发生。
免疫荧光技术的临床应用
免疫荧光技术的临床应用
第31页
(三)皮肌炎/多发性肌炎（PM/DM）
免疫学检验
• ANA • ENA——抗Jo-1阳性
其它检验——肌酶谱
• 肌酸磷酸激酶（CPK）: MM-心肌和骨骼肌
免疫荧光技术的临床Байду номын сангаас用
第16页
抗核抗体（ANA）
方法——间接免疫荧光法 结果判断:
①滴度〉1：100为阳性 ②常见核型——5种
不一样核型临床意义不一样
免疫荧光技术的临床应用
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ANA常见五种核型及临床意义
核膜型——与抗ds-DNA相关， 多见于SLE，尤其是有肾炎者
均质型——与AHA、抗DNA相关，引发LE形成 主要见于SLE、药品性狼疮
免疫荧光技术的临床应用
第24页
免疫荧光技术的临床应用
第25页
抗ds-DNA抗体
临床意义
①对SLE诊疗有较高特异性 ②滴度与SLE活动相关，可作为病情监测及疗效观察指标 ③与SLE肾损害相关
检测方法
①放免法（Farr)——敏感，有利于早期预测 检测高亲协力抗ds-DNA
②间接免疫荧光法(IF)——特异 ③ELISA——可检测低亲协力抗ds-DNA
斑点型——与抗ENA相关，应深入查特异性抗体 核仁型——多见于硬皮病 着丝点型——多见于CREST综合征
免疫荧光技术的临床应用
第18页
均质型
与AHA（抗组蛋白抗体）、抗DNA相关， 引发LE形成主要见于SLE、药品性狼疮
核膜型
与抗ds-DNA相关， 多见于SLE，尤其是有肾炎者
免疫荧光技术的临床应用
免疫荧光技术的临床应用
第8页
间接免疫荧光法检测特点
自身抗体的检测
荧光模式： 大鼠食管，仅限于上皮角质层的较强的线性分层的均质荧光。
STEP1
STEP2
自身抗原：丝聚蛋白（filaggrin）为AKA的靶抗原。
临床意义：见于RA，阳性率36~59%，特异性95~99%。还是一个潜在的预后标志，高抗体滴度可能预示着较严重的RA类型。
抗角蛋白抗体（AKA）
抗肝肾微粒体抗体（LKM）
01
临床意义：高滴度的抗RNP抗体为 混合结缔组织病（MCTD）的特征，发生率为95~100%。也可出现于SLE，但总是与抗Sm抗体同时出现。抗Sm抗体对SLE具有高度特异性，发生率为20~40%。
02
抗RNP/Sm抗体
抗SSA／SSB抗体
荧光模式 Hep-2片：细胞核呈细颗粒荧光，核仁不发光。 肝组织片：细颗粒荧光。
自身抗原：为丝氨酸蛋白酶-蛋白酶3（PR3）。该靶抗原为可溶性蛋白，存在于正常中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒中。
01
临床意义：cANCA可见于多种系统性血管炎。主要见于Wengener’s肉芽肿，约占ANCA阳性率的80~95%。cANCA被认为是活动性Wengener’s肉芽肿和微多动脉炎的特异和敏感的标志性抗体。还见于Churg-Strauss综合征。
02
抗中性粒细胞胞浆抗体（胞浆型）
抗中性粒细胞胞浆抗体（核周型）pANCA 荧光模式： 乙醇固定的中性粒细胞：细胞核周围平滑的带状荧光，细胞核阴性。 猴肝：肝血窦区粒细胞强荧光，而肝细胞阴性。
自身抗原：主要抗原为髓过氧化物酶（MPO），其他抗原还有白细胞弹性蛋白酶，组织蛋白酶G、溶菌酶及乳铁蛋白等。
分裂期细胞阳性
荧光模式：
抗着丝点抗体(ACA)
Hep-2：细胞核细的、相同大小的颗粒荧光，分裂期颗粒荧光带状位于细胞中间。 肝组织片：分布于细胞核的10~20个颗粒，荧光弱，易被忽略。
类风湿因子引起抗双链DNA IgG抗体水平假性升高的探讨
类风湿因子引起抗双链ＤＮＡＩｇＧ抗体水平假性升高的探讨潘晶晶，任春锋，明 亮（郑州大学第一附属医院检验科，河南郑州４５００５２）ＤＯＩ：１０．１１７４８／ｂｊｍｙ．ｉｓｓｎ．１００６－１７０３．２０２０．１２．０１２收稿日期：２０２０ ０６ ２８；修回日期：２０２０ ０８ １４基金项目：河南省医学科技攻关计划项目（编号：２０１８０２００３３）作者简介：潘晶晶（１９８７—），女，博士，主管技师。
主要研究方向为自身免疫疾病和肿瘤的机制研究。
摘要：目的 探讨３例患者血清中类风湿因子（ＲＦ）对酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测抗双链ＤＮＡＩｇＧ抗体的干扰。
方法 采用ＥＬＩＳＡ法检测ＲＦ和抗双链ＤＮＡＩｇＧ抗体；通过连续稀释法证实干扰的存在，利用包被人ＩｇＧ的ＲＦ乳胶颗粒，胎牛血清和聚乙二醇６０００（ＰＥＧ６０００）去除ＲＦ对抗双链ＤＮＡＩｇＧ抗体的干扰。
结果 患者血清中均检测出高滴度的ＲＦ。
经ＲＦ乳胶颗粒，胎牛血清和ＰＥＧ６０００处理后，患者血清的抗双链ＤＮＡＩｇＧ抗体水平均降至正常参考范围。
结论 ＲＦ或将引起ＥＬＩＳＡ法检测抗双链ＤＮＡＩｇＧ抗体的假阳性结果。
关键词：抗双链ＤＮＡＩｇＧ抗体； 类风湿因子； 干扰； ＥＬＩＳＡ中图分类号：Ｒ５９３．２２ 文献标识码：ＡＡＳｔｕｄｙｏｎＦａｌｓｅＩｎｃｒｅａｓｅｓｉｎＡｎｔｉ Ｄｏｕｂｌｅ ＳｔｒａｎｄｅｄＤＮＡＩｇＧＡｎｔｉｂｏｄｙＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓＤｕｅｔｏＲｈｅｕｍａｔｏｉｄＦａｃｔｏｒＰＡＮＪｉｎｇｊｉｎｇ，ＲＥＮＣｈｕｎｆｅｎｇ，ＭＩＮＧＬｉａｎｇ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＺｈｅｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００５２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅｏｆＲＦｉｎｔｈｅｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆａｎｔｉ ｄｓＤＮＡＩｇＧａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｂｙｅｎｚｙｍｅ ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）ｉｎｔｈｒｅｅｃａｓｅｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＡｎｔｉ ｄｓＤＮＡＩｇＧａｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｎｄｒｈｅｕｍａｔｏｉｄｆａｃｔｏｒ（ＲＦ）ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＥＬＩＳＡ．Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｒｏｌｅｏｆｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅｉｎａｎｔｉ ｄｓＤＮＡＩｇＧａｎｔｉｂｏｄｙｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ，ｓｅｖｅｒａｌｓｔｅｐｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｓｅｒｉａｌｄｉｌｕｔｉｏｎｓ，ＲＦｌａｔｅｘｐａｒｔｉｃｌｅｓｃｏａｔｅｄｗｉｔｈｈｕｍａｎＩｇＧ，ｆｅｔａｌｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍ，ａｎｄｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ（ＰＥＧ）６０００ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｗｅｒｅｃｏｎｄｕｃｔｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＨｉｇｈｌｅｖｅｌｓｏｆＲＦｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．Ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆａｎｔｉ ｄｓＤＮＡＩｇＧａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｉｎｐｌａｓｍａｆｒｏｍｔｈｒｅｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｒｅｄｕｃｅｄｔｏｔｈｅｎｏｒｍａｌｒｅｆｅｒｅｎｃｅｒａｎｇｅｗｈｅｎＲＦｗａｓｒｅｍｏｖｅｄｂｙｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈＲＦｌａｔｅｘｐａｒｔｉｃｌｅｓ，ＦＣＳ，ａｎｄＰＥＧ６０００．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＲＦｍａｙｃａｕｓｅｆａｌｓｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｔｈｅｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆａｎｔｉ ｄｓＤＮＡＩｇＧａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＥＬＩＳＡ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ； Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄｆａｃｔｏｒ； Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ； ＥＬＩＳＡ 抗双链ＤＮＡ抗体是系统性红斑狼疮最常见和最重要的自身抗体之一。
临床医学检验士技术模拟试卷含答案(六)
临床医学检验士技术模拟试卷含答案(六)单选题（总共题）1.与过敏症和寄生虫感染有关的Ig是(1分)A、IgAB、IgDC、IgMD、IgGE、IgE答案：E解析： IgE是一种亲细胞抗体，能与肥大细胞和嗜碱性粒细胞结合导致Ⅰ型变态反应的发生，在过敏和寄生虫感染时增高。
2.传统的胶乳凝集试验所用的载体为(1分)A、聚苯乙烯胶乳B、明胶颗粒C、活性炭D、胶乳颗粒E、醛化红细胞答案：A解析：本题备选答案均为间接凝集试验常用的载体，但传统的胶乳凝集试验所用的载体颗粒为聚苯乙烯胶乳。
3.关于抗双链DNA抗体不正确的是(1分)A、是SLE活动期的重要指标B、是SLE的特征性标记抗体C、用绿蝇短膜虫试验最特异、敏感D、SLE患者血清抗ds-DNA抗体均阳性E、ANA周边型主要为抗ds-DNA抗体答案：D解析：不是所有的SLE患者抗ds-DNA抗体均呈阳性，有相当一部分的患者此抗体呈阴性反应。
4.关于超敏反应下列解释正确的是(1分)A、是指机体对某些抗原的刺激产生过强的反应B、是指机体对某些抗原进行初次应答后，再次接受同种抗原刺激时，产生的正常生理反应C、是指机体对某些抗原进行初次应答后，再次接受同种抗原刺激时，发生的特异性免疫应答D、是指机体对某些抗原进行初次应答后，再次接受同种抗原刺激时，发生的一种以生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答E、是指机体对某些抗原进行初次应答后，再次接受同种抗原刺激时，发生的以生理功能变化为主要表现的过敏反应答案：D解析：超敏反应是机体对某些抗原进行初次应答后，再次接受同种抗原刺激时，发生的一种以生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。
5.以红细咆或明胶颗粒致敏抗原检测血清中相应抗体的试验属于(1分)A、正向间接凝集反应B、反向间接凝集反应C、间接凝集抑制反应D、协同凝集反应E、直接凝集反应答案：A解析：间接凝集反应分正向和反向，用致敏粒子包被抗原来检测抗体为正向；而用包被的抗体来检测抗原为反向。
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垦堕坌堕堕堂壅查垫塑生！旦釜塑鲞箜！塑坠』！生！丛型：』塑些翌塑！：ｙ丛翌：№！·临床研究·化学发光法定量检测抗双链ＤＮＡ抗体的临床应用凡瞿明刘炳张国元程吉兵卢晓岚李薇【摘要】目的探讨定量枪测抗双链ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）抗体对系统性红斑狼疮（ＳＩ。
Ｅ）疾病诊疗的价值。
方法将ＳＬＥ疾病患者６８例分为Ｓｕ！疾病活动组４３例和ＳＬＥ无明显疾病活动组２５例；非ＳＬＥ的其他自身免疫性疾病３３例，健康对照组２６例。
采用化学发光法检测各组血清中抗ｄｓＤＮＡ抗体，比较该抗体在４组研究对象血清中的差异，探讨抗ｄｓＤＮＡ抗体定量检测在ＳＬＥ疾病活动组与ＳＩ，Ｅ无明显疾病活动组问的应用。
结果抗ｄｓＤＮＡ抗体在ＳＬＥ疾病活动组、ＳＬＥ无明显疾病活动组、非ｓＩ。
Ｅ的其他自身免疫性疾病组和健康对照组间均值分别为１２６．４１±９９．６２，３６．５７士６５．１０、１０．８７±２２．３７和６．８２士１１．０９ＩＵ／ｍＬ；疾病活动组抗ｄｓＤＮＡ抗体水平与其他组之间差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１）；该抗体在ＳＬＥ中与血沉，疾病活动指数晕正相关，与补体ｃ。
、Ｃ。
水平呈负相关。
结论抗ｄｓＤＮＡ抗体定量检测对于ＳＩ，Ｅ疾病活动性判断具有良好的应用价值，但不适合临床病程监测，即诊断的价值大于其监测价值。
【关键词】红斑狼疮，系统性；化学发光测定法；抗体中图分类号：Ｒ４４６．６１；Ｒ５９３．２４１文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－４１３０（２００９）０卜００４卜０３Ｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｉｎｔｈｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｎｔｉ－ｄｓＤＮＡａｎ。
ｔｉｂｏｄｙＦＡＮＱ“一ｍｉｎ９１，ＬＩＵＢｉｎｇ２，ＺＨＡＮＧＧｕｏ－ｙｕａｎｌ，ｅｔａｌ．１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａ—ｔｏｒｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡ｛｛ｔｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＮｏｒｔｈＳｉｃｈｕａｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｄｇｅ，Ｎａｎｃｈｏｎｇ６３７０００，Ｃｈｉｎａ、２．Ｇｒａｄｅ２００２，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｅｄｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＮｏｒｔｈＳｉｃｈｕａｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｄｇｅ，Ｎａｎｃｈｏｎｇ６３７０００，Ｃ＾ｉｎａ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｖａｌｕｅｏｆａｎｔｉ—－ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃ‘。
ｔｉｏｎｉｎｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｓｙｓｔｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ（ＳＬＥ）．ＭｅｔｈｏｄｓＳｉｘｔｙ－ｅｉｇｈｔＳＬＥｐａ—ｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｈｅａｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐ（ｎ＝４３）ａｎｄｔｈｅｓｔａｂｌｅｇｒｏｕｐ（ｎ＝２５）；ｂｅｓｉｄｅｓ，３３ｐａｔｉｅｎｔｓｓｕｆｆｅｒｅｄｆｒｏｍｏｔｈｅｒａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｄｉｓｅａｓｅ。
ａｎｄ２６ｈｅａｌｔｈｙｂｌｏｏｄｄｏｎｏｒｓｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙ．Ａｎｔｉ－ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｉｎｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ（ＣＬＩＡ）．Ｔｈｅｎｔｈｅｑｕａｎｔｉｔｙｏｆａｎｔｉ—ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｗａｓｃｏｍｐａｒｅｄｉｎ４ｇｒｏｕｐｓａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｂｌｅｖａｌｕｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅａｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐａｎｄｔｈｅｓｔａｂｌｅｇｒｏｕｐｗａｓａｎａｌｙｚｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆａｎｔｉ—ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｉｎＳＩ，Ｅａｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐ，ＳＩ。
Ｅｓｔａｂｌｅｇｒｏｕｐ，ｏｔｈｅｒａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｄｉｓｅａｓｅｇｒｏｕｐａｎｄｈｅａｌｔｈｙｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅ１２６．４１士９９．６２，３６．５７土６５．１０，１０．８７士２２．３，６．８２±１１．０９ＩＵ／ｍＩ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｒｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｂｅｔｗｅｅｎＳＩ。
Ｅａｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐａｎｄｏｔｈｅｒｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜Ｏ．０１）．Ａｎｔｉ—ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａ—ｔｅｄｗｉｔｈＥＳＲａｎｄＳＬＥｄｉｓｅａｓｅａｃｔｉｖｅｉｎｄｅｘ（ＤＡＩ），ｗｈｉｌｅｎｅｇａｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈＣ３ａｎｄＣ４．Ｃｏｎｃｌｕ－ｓｉｏｎＴｈｅｑｕａｎｔｉｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｌａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉ－ｄｓＤＮＡａｎｔｉｂｏｄｙｈａｓｇｒｅａｔｖａｌｕｅｉｎｅｓｔｉｍａｔｉｏｎｏｆＳＬＥａｃｔｉｖｉ—ｔｙ，ｂｕｔｎｏｔｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｏｆｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｃｏｕｒｓｅ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｉｔｓｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｖａｌｕｅｅｘｃｅｅｄｓｍｏｎｉ—ｔｏｒｉｎｇｖａｌｕｅ．［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］Ｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ，ｓｙｓｔｅｍｉｃ；Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ；ＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓＳＵＳ’系统性红斑狼疮（ｓｙｓｔｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｈｏ—ＳＩ。
Ｅ）是一种常见的累及全身多系统的自身免疫性疾病，正确判断ＳＩ。
Ｅ疾病活动性对治疗有重要意义。
迄今，与疾病活动有关的指标达６０余种，常用的ＤＯＩ：１０．３７６０／ｅｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３０．２００９．０１．０１６作者单位：６３７０００四川南充。
四川省川ｉ北医学院附属医院检验科（凡瞿明、张国元、程吉兵、卢晓岚、李薇）；６３７０００四ＪＩＩ南充，ＪＩＩ北医学院医学检验系２００２级（刘炳）有抗双链ＤＮＡ（ｄｅｕｂｌｅｓｔｒａｎｄＤＮＡ，ｄｓＤＮＡ）抗体、补体Ｃ。
、Ｃ。
等。
其与ＳＩ。
Ｅ疾病活动的相关性也有不同的报道ｎ｛］，可能与其检测方法和试剂的不同有关。
本组采用全自动化学发光法（ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔｉｍ—ｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＣＩ。
ＩＡ）定量检测抗ｄｓＤＮＡ抗体，探讨其对系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）疾病诊疗的价值。
资料与方法１．一般资料６８例ＳＬＥ患者来自该院风湿科４２旦堕丝堕堡堂垄查塑！圭！旦箜翌鲞箜！塑！坐！！生！坚鱼：』竺！型！塑：ｙ些翌：№！表ｌ抗ｄｓＤＮＡ抗体及其他实验检测指标注：抗ｄｓＤＮＡ、Ｃ３、Ｃ｝、ＥＳＲ在４组问差异有统计学意义（Ｐ（Ｏ．０１），ＣＲＰ在４组问差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。
表２各组问的阳性频率分布住院和门诊患者，符合１９９７年美国风湿学会（ＡＣＲ）分类标准∞Ｊ。
收集患者早晨空腹静脉血，离心分离血清，一２０℃冻存备检。
疾病活动指数推算根据２０００年修订的ＳＬＥ疾病活动指数（ＳＬＥｄｉｓｅａｓｅａｃｔｉｖｅｉｎ—ｄｅｘ，ＳＩ．ＥＤＡＩ）［４一计算。
０～４分为无明显疾病活动，＞４分为疾病活动。
６８例患者中男４例，女６４例，年龄１４～７０岁，病程１０～１４年。
４３例患者ＳＬＥＤＡＩ＞４分，处于疾病活动期；２５例患者ＳＩ，ＥＤＡＩ≤４分，无明显疾病活动。
３３例非ＳＩ。
Ｅ其他自身免疫疾病患者，分别是类风湿关节炎、ＳＳ等，男１３例，女２０例，年龄１４～８２岁。
２６例健康对照组来自健康体检群体，男１６例，女１０例；年龄２２～５０岁。
全部资料分为４组：ＳＩ。
Ｅ疾病活动组；ＳＩ。
Ｅ无明显疾病活动组；非ＳＬＥ自身免疫性疾病组和健康对照组。
２．器材ＬＡＩＳＩＯＮ化学发光分析仪及原装配套抗ｄｓＤＮＡ抗体试剂盒（意大利Ｄｉａｓｏｒｉｎ公司）；ＩＭＭＡＧＥ免疫散射比浊分析仪及原装配套Ｃ－反应蛋白（Ｃ—ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＲＰ）、补体Ｃ３、Ｃ４试剂盒（美国Ｂｅｃｋｍａｎ－Ｃｏｕｌｔｅｒ公司）；ＥＳＲ－３０血沉仪（上海迅达医疗仪器公司）。
３．方法抗ｄｓＤＮＡ检测采用化学发光法（ＣＩ。
ＩＡ）；ＣＲＰ、补体Ｃ。
、Ｃ。
的检测采用免疫散射比浊法；血沉（ＥＳＲ）的检测基于魏氏法原理。
所有检测均在仪器校正后进行，并严格按照说明书进行操作。
４．统计学方法数据采用ＳＰＳＳｌ２．０统计软件包处理。
均数比较采用方差分析，组间频数比较采用卡方检验，相关性分析用Ｋｅｎｄａｌｌ’ｓ相关分析。
结果１．血清抗ｄｓＤＮＡ抗体及其他实验检测指标的结果见表１（以ｉ±ｓ表示）。
２．实验指标在各组间的阳性频率分布见表２。
以上血清学实验指标阳性或异常分界均来源于试剂说明书并以此进行分类。
经统计抗ｄｓＤＮＡ抗体、补体Ｃ。
、Ｃ。
在ＳＬＥ活动组与其他３组间差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；ＣＲＰ在ＳＬＥ活动组与ＳＬＥ无明显疾病活动组及非ＳＬＥ自身免疫疾病组之间比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），而与健康对照组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；ＥＳＲ在ＳＩ，Ｅ活动组与ＳＩ。
Ｅ无明显疾病活动组及健康对照组之间比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１），而与非ＳＩ。
Ｅ自身免疫疾病组之间比较差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）。
３．抗ｄｓＤＮＡ抗体与ＳＩ。
ＥＤＡＩ及其他实验指标在ＳＩ。
Ｅ疾病中的相关性。
表３抗ｄｓＤＮＡ抗体与ＳＩ。
ＥＤＡＩ及其他实验指标的相关性讨论ＳＩ，Ｅ是一种累及多系统、多器官的自身免疫性疾病，其临床表现复杂多样。
正确判断ＳＩ。
Ｅ及其疾病的活动情况对临床治疗具有莺要意义。
仅根据临床表现难以对ＳＩ。
Ｅ进行特异性诊断及其活动性判断，常须借助相关的实验室检查，故实验室检查在诊断ＳＬＥ及判断其活动性方面显得尤为重要。
有学者认为高滴度抗ｄｓＤＮＡ抗体和低补体血症是ＳＩ。
Ｅ较为特异的指标¨１，但也有不少临床研究者提出异议㈨。
垦匿坌堕堡堂壅查垫塑生！旦箜翌鲞簦！塑垫！』堕！丛鱼：』竺坚型垫塑：ｙ丛翌：№！一方面有研究发现部分患者临床表现明显活动，病情危重，而抗ｄｓＤＮＡ抗体和补体水平反而正常；另一方面，也有部分患者有持续高滴度抗ｄｓＤＮＡ抗体和低补体，而病情稳定。
为此，本组就抗ｄｓＤＮＡ抗体定量结果对于ｓＩ。
Ｅ疾病活动性的判断价值进行了相关的研究。
研究发现抗ｄｓＤＮＡ抗体升高而补体正常者很少，且多数为Ｓｌ。
Ｅ疾病稳定的情况，大多数时候都伴有至少一项补体的下降，这与公认的免疫复合物激活补体的发病机制相符。
但也有部分患者抗ｄｓＤＮＡ抗体正常而补体低下，这有可能是形成抗原、抗体免疫复合物沉积于组织中，致使血循环中抗体浓度不高¨１或与其他因素有关。
本研究中仅有７例ＳＬＥ患者抗ｄｓＤＮＡ抗体水平正常，补体Ｃ。
、Ｃ。
均低下，但这７例患者均处于疾病活动状态，从整体结果看，抗ｄｓＤＮＡ抗体升高（＞２５ＩＵ／ｍＬ）、补体Ｃ。
、Ｃ。
下降有助于ＳＬＥ疾病活动情况的判断。