氯化血红素的制备及分析
牦牛血液氯化血红素的分离提纯及工艺优化研究
牦牛血液氯化血红素的分离提纯及工艺优化研究杨生忠;韩学燕;李宗文;陈虎;任茜;曹效海【摘要】试验以新鲜牦牛血液为原料,采用血粉法、冰醋酸法及醋酸钠法,探索制备氯化血红素的最优工艺参数,并对不同方法制备的氯化血红素纯度及得量进行对比.结果显示,血粉法的最优工艺是超声处理时间40 min,酸性丙酮添加量为120 mL,抽提时间30 min,乙酸钠添加量为9 mL,氯化血红素纯度达到96%,得量为7.38 g/L.采用冰醋酸法制备氯化血红素,当冰醋酸添加量为红细胞量的3倍时,氯化血红素纯度达到80%,得量为6.10 g/L.采用醋酸钠法制备氯化血红素,当氯仿添加量为红细胞量的2倍时,氯化血红素纯度达到90%,得量为3.44 g/L.通过对比3种制备方法,氯化血红素纯度依次为血粉法>醋酸钠法>冰醋酸法;氯化血红素得量依次为血粉法>冰醋酸法>醋酸钠法,由此可知,3种方法中,选用血粉法制备氯化血红素的量更高且更加有利于工业化生产.%The study was conducted to separate and purify the hemin from yak blood and the optimal process of preparing the hemin was confirmed using blood meal,glacial acetic acid and sodium acetate methods.The purity and the yield of the extracted hemin in different methods were compared.The results showed that the purity of hemin in yak blood was 96% and the yield was 7.38 g/L using blood meal method under the optimal process of 40 min for ultrasonic treatment,30 min for extraction,120 mL acid acetone and 9 mL sodium acetate.The purity of hemin was 80% and the yield was 6.10 g/L when the amount of glacial acetic acid was 3 times as much as blood cells amount using the glacial acetic acid method.The purity of hemin was 90% and the yield was 3.44 g/L when the amount of chloroform was 2 times as much as bloodcells amount using sodium acetate method.The purity of the hemin from high to low was blood meal method,sodium acetate method and glacial acetic acid method,and that of the hemin yield was blood meal method,glacial acetic acid method and sodium acetate method by comparing the three preparation methods.So the blood meal method was more conducive to industrial production.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2017(044)011【总页数】7页(P3163-3169)【关键词】牦牛血液;氯化血红素;牦牛血粉;醋酸钠法;冰醋酸法【作者】杨生忠;韩学燕;李宗文;陈虎;任茜;曹效海【作者单位】乌兰县畜牧兽医工作站,乌兰 817100;大通县畜牧兽医站,大通810100;乌兰县畜牧兽医工作站,乌兰 817100;青海大学农牧学院,西宁 810016;青海大学农牧学院,西宁 810016;青海大学农牧学院,西宁 810016【正文语种】中文【中图分类】S823.8+5牦牛是青藏高原特有的优势畜种,主要分布在中国青海、西藏、四川、甘肃等地区[1-2]。
氯化血红素的配置
氯化血红素的配置氯化血红素是一种常见的生物分子,它在生物体内具有重要的功能和作用。
本文将从氯化血红素的结构、合成和生理功能等方面进行介绍。
一、结构特点氯化血红素是一种由血红素与氯离子结合形成的化合物。
它的分子式为C34H32ClFeN4O4,其中含有一个氯离子。
氯化血红素分子中心是一个四个氮原子配位的铁离子,周围由血红素分子构成。
氯离子与铁离子之间通过离子键相连,稳定了氯化血红素的结构。
二、合成方法氯化血红素可以通过多种方法合成。
其中一种常用的方法是将血红素与氯化铁反应,生成氯化血红素。
合成过程中需要在适当的溶液中进行,通常使用酸性或碱性条件来促进反应的进行。
合成后的氯化血红素可以通过适当的提取和纯化步骤得到纯品。
三、生理功能氯化血红素在生物体内具有重要的生理功能。
首先,它是血红素的一种衍生物,与血红蛋白一起参与了氧气的运输和释放。
氯化血红素的结构特点使其能够与氧气结合,形成氧合血红蛋白,从而将氧气运输到身体各个组织和器官。
其次,氯化血红素还参与了一些氧化还原反应,如电子传递链中的反应过程。
此外,氯化血红素还具有一定的抗氧化作用,可以减少自由基对细胞的损害。
四、与疾病的关系氯化血红素与一些疾病之间存在一定的关系。
例如,在一些遗传性疾病中,由于血红蛋白分子的突变导致了氯化血红素的异常积累,从而引发了相应的疾病。
此外,一些研究还发现,氯化血红素与一些炎症反应和肿瘤的发生发展有关。
通过研究氯化血红素的作用机制,可以为相关疾病的治疗提供一定的参考和依据。
氯化血红素是一种具有重要生理功能的化合物。
它的结构特点和合成方法对于了解其性质和应用具有重要意义。
同时,研究氯化血红素与疾病之间的关系也具有一定的临床意义。
希望通过对氯化血红素的研究,能够进一步揭示其在生物体内的作用机制,为相关疾病的治疗和预防提供新的思路和方法。
氯化血红素的配置
氯化血红素的配置氯化血红素是一种具有重要生物学功能的化合物,它在生物体内发挥着重要的作用。
本文将从氯化血红素的结构、性质、生物学功能以及应用等方面进行介绍。
我们来了解一下氯化血红素的结构。
氯化血红素是一种含有铁离子的血红素衍生物,其分子式为C34H32ClFeN4O4。
它的结构中有一个呈平面四方形的铁离子,周围环绕着一个大的有机分子,形成了一个类似于夹心饼干的结构。
氯化血红素具有一些特殊的性质。
首先,它在溶液中呈现出独特的绿色颜色,这是由于其分子结构中的铁离子所致。
其次,氯化血红素具有较高的稳定性,能够在酸性和碱性条件下保持其完整的结构。
氯化血红素在生物体内发挥着重要的生物学功能。
首先,它是血红蛋白分子的重要组成部分,参与了氧气的运输。
血红蛋白分子中的铁离子与氧气结合形成氧合血红蛋白,能够将氧气从肺部运输到全身各个组织。
此外,氯化血红素还参与了一氧化氮的运输和储存,对维持血管功能和调节血压起着重要作用。
除了在生物体内的功能外,氯化血红素还有一些重要的应用。
首先,氯化血红素被广泛应用于医学领域。
它可以作为一种重要的药物载体,用于输血和治疗贫血等疾病。
此外,由于氯化血红素具有较高的稳定性和良好的光学性质,它还被应用于生物成像和荧光探针等领域。
氯化血红素是一种具有重要生物学功能的化合物。
它的结构独特,具有独特的性质,并在生物体内发挥着重要的作用。
此外,氯化血红素还具有广泛的应用价值。
通过对氯化血红素的研究,可以深入了解生物体内的氧气运输和一氧化氮调节等生理过程,为相关疾病的治疗和药物开发提供重要的理论和实验基础。
牦牛血液氯化血红素的分离提纯及工艺优化研究
and Veterinary Station in WuLan County , WuLan Animal Husbandry Animal Husbandry and Veterinary Station in Datong County ,Datong 810100,China ; College o f Agriculture and Animal Husbandry, Qinghai University ,Xining 810016,China)
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Abstract: The study was conducted to separate and purify the hemin from yak blood and the opti mal process of preparing the hemin was confirmed using blood meal,glacial acetic acid and sodium acetate methods. The purity and the yield of the extracted hemin in different methods were com pared. The results showed that the purity of hemin in yak blood was 9 6 ' and the yield was 7. 38 g/L using blood meal method under the optimal process of 40 min for ultrasonic treatment, 30 min for extraction,120 mL acid acetone and 9 mL sodium acetate. The purity of hemin was 8 0 ' and the yield was 6. 10 g/L when the amount of glacial acetic acid was 3 times as much as blood cells amount using the glacial acetic acid method. The purity of hemin was 9 0 ' and the sing sodium acet at e me thod. The purity of the hemin from high to low was blood mealmethod , sodium acet at e met hod and glacial ace tic c aid met hod,and that of the hemin yield was blood meal method,glacial aceticacidmethodandsodiumacetatemethodbycomparing the threepreparation methods. So t he blood meal met hod was more conducive t o indus trial product ion. Keywords : yakblood ;hemin;yakbloodm eal ;sodiumacetatemethod;glacial aceticacidmethod yield was 3. 44 g/L when the amount of chloroform was 2 times asmuch as blood cells amount uChinBiblioteka Animal Husbandry
氯化高铁血红素的使用工艺与检验方法
4、氯化(高铁)血红素的使用工艺与检验方法
一、氯化(高铁)血红素使用工艺
氯化(高铁)血红素是蓝黑色粉末,作为铁类的营养强化剂,在使用过程中,可直接添加至各类食品中或者与其它原料混合后添加。
二、氯化(高铁)血红素检验方法
1、氯化血红素含量的测定
1.1 标准曲线的制备
精密称取经105℃干燥至恒重的对照品约18mg,置100ml量瓶中0.1mol/L 氢氧化钠溶液适量使完全溶解后,稀释至刻度,摇匀,分别精密吸取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml置100ml量瓶中,用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,以溶剂为空白,在384 nm±1nm波长处测定吸收值A,经线性回归,得回归方程。
1.2 结果计算
取待测定含量的氯化(高铁)血红素,精密称取约200mg,预先置已加入
0.1mol/L氢氧化钠溶液的烧杯中搅拌溶解,并微热,然后将溶液移入100ml
量瓶中,用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,取续滤液5ml置100ml量瓶中,用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,以溶剂为空白,在384 nm±1nm波长处测定吸收值A,代入回归方程,求算氯化血红素含量。
1.3 准确度与精密度
本方法测定浓度1.80µg/ml―9.10µg/ml范围内,线性关系好,相关系数在0.9993以上。
本方法经不同浓度加标回收实验,回收率为96.7%,RSD=1.35(n=5)。
重复性实验批内相对标准差(RSD)为1.93%。
牦牛血液提纯氯化血红素工艺优化及产业化研究
牦牛血液提纯氯化血红素工艺优化及产业化研究牦牛血液提纯氯化血红素工艺优化及产业化研究摘要:牦牛是高原地区重要的家畜之一,牦牛血液中富含氯化血红素。
本研究旨在通过优化工艺,实现牦牛血液中氯化血红素的高效提纯,并探讨其产业化应用前景。
通过实验分析及统计学处理,我们比较了不同提纯方法的优缺点,确定了最佳工艺条件,进而可实现牦牛血液的大规模提纯与产业化应用。
1.绪论1.1 背景氯化血红素作为一种重要的生物活性物质,具有许多功效,如抗氧化、抗炎以及抗癌等。
而牦牛血液中富含氯化血红素,因此具有广泛的研究与应用前景。
1.2 目的本文旨在优化牦牛血液中氯化血红素的提纯工艺,为产业化应用提供可行的方案。
2.方法2.1 实验材料本研究选取了健康牦牛作为实验材料,收集其血液进行后续实验。
2.2 实验设计本研究分为提纯、优化和产业化应用三个阶段。
提纯阶段利用不同的提纯方法进行对比,并采用UV-Vis分光光度计对提纯效果进行评估。
优化阶段通过单因素试验和正交试验,确定最佳提纯工艺条件。
产业化应用阶段则对提纯后的氯化血红素进行了理化性质测定和生物活性评估。
3.结果与讨论3.1 提纯方法比较我们比较了离心沉淀法、凝胶过滤法和溶液交换法三种方法的提纯效果。
结果显示凝胶过滤法得到的氯化血红素含量最高,为X%。
3.2 工艺优化通过单因素试验和正交试验,我们确定了最佳提纯工艺条件为温度xx℃,pH值为x,提纯时间为x h,氯化血红素收率达到了xx%。
3.3 理化性质测定对提纯后的氯化血红素进行了理化性质测定,结果显示其溶解度较好,对光的吸收较强。
3.4 生物活性评估通过细胞实验和动物实验,我们发现牦牛血液中提纯的氯化血红素对抗氧化和抗炎具有较好的效果,这为其进一步的产业化应用提供了可靠的依据。
4.产业化应用前景基于以上研究结果,我们认为牦牛血液提纯的氯化血红素具有广阔的产业化应用前景。
在保健品、药物及化妆品领域,氯化血红素均有广泛的应用空间。
牦牛血液氯化血红素的分离提纯及工艺优化研究
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中国畜牧兽医
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牦牛是青藏高 原 特 有 的 优 势 畜 种!主 要 分 布 在 中国青海&西藏&四川&甘肃等地区 ' )%!0* 青海 牦 牛 数 量 较 多 !牦 牛 肉 和 牦 牛 乳 是 重 要 的 畜 产 品 资 源 !但 由 于牦牛血液腥味 重!不 宜 食 用!利 用 率 极 低!还 可 能 会造成严重环境污染'动物血液中富含多种蛋白质 "包括血浆蛋白&血 红 蛋 白 等#&微 量 矿 物 元 素&维 生 素"烟酸#&激素 和 其 他 生 理 活 性 物 质' 牦 牛 血 液 中 血红蛋白"W2#的含量较高!是制取血红素 类产品 的 优 质 资 源 ' )*!1*
一种氯化血红素的制备方法及其制备得到的组合物[发明专利]
专利名称:一种氯化血红素的制备方法及其制备得到的组合物专利类型:发明专利
发明人:孙印石,刘畅
申请号:CN202011020644.9
申请日:20200925
公开号:CN112094876A
公开日:
20201218
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明涉及氯化血红素制备技术领域,具体而言,涉及一种氯化血红素的制备方法及其制备得到的组合物。
本发明的氯化血红素的制备方法,包括以下步骤:(a)将鹿血和抗凝剂的混合物离心处理,得到沉淀A和上清液A;(b)所述沉淀A与氯化钠、乙醇和水混合后,在冰浴中进行破胞处理,在酶的作用下酶解后,灭酶、离心得到沉淀B和上清液B;(c)向沉淀B中加入氢氧化钠进行离心处理,得到沉淀C和上清液C,沉淀C加入氢氧化钠进行离心处理,得到沉淀C1和上清液C1;(d)上清液C和上清液C1的混合液调节pH后离心处理,得到沉淀D并进行干燥。
该方法得到的氯化血红素具有较高的纯度。
申请人:中国农业科学院特产研究所
地址:130112 吉林省长春市净月经济开发区聚业大街4899号
国籍:CN
代理机构:北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人:王焕
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实验五、超声波酸性丙酮法制备氯化血红素
实验五、超声波酸性丙酮法制备氯化血红素血红素是铁卟啉类化合物,主要存在于动物的血液和肌肉中,是动物血液中的天然色素,在医药、食品、化工、保健品、建筑及化妆品行业中有广泛应用。
在食品行业中,血红素可代替熟肉中的发色剂亚硝酸盐及人工合成色素,避免亚硝酸盐引起的致癌作用;是治疗缺铁性贫血(IDA)疗效较好的补铁剂,具有生物利用度高、无体内铁蓄积中毒及胃肠刺激等不良反应等优点,同时还是抗贫血和抗肿瘤药物的重要原料以及制备各种新型卟啉化合物的重要前体物,我国于1998年正式批准以血红素为基本原料的血卟啉为抗肿瘤新药。
美国FDA 已于1983年7 月正式批准雅培公司的氯化血红素作为药品使用。
在烟草行业中,它可作为烟草生物减害降焦剂,降低焦油和截留NOx 。
血红素存在于红细胞中,红细胞经过破碎才能提取血红素。
目前,提取过程中红细胞的破碎主要采用机械搅拌的方法,细胞破碎的时间较长、血红素的得率不高。
为了缩短细胞破碎的时间并提高含量、得率,将超声波细胞破碎应用于酸性丙酮-乙酸钠法提取血红素中。
一材料、试剂与仪器新鲜猪血、丙酮、盐酸、亚硫酸氢钠、乙酸钠、氢氧化钠、无水乙醇、95%乙醇溶液、柠檬酸三纳、氯化钠。
超声波细胞破碎机、离心机、分析天平二、取样及处理采集新鲜猪血,加入质量浓度0.8g/100mL的柠檬酸三钠溶液作为抗凝剂,然后将猪血放入冷藏箱中,迅速运回实验室,用100目筛子过滤后,将过滤后的抗凝猪血放入0~4℃的冰箱中冷藏备用。
取抗凝猪血,用离心机控温(4℃)以4000r/min离心15min,去掉上层血浆,取下层红细胞,用生理盐水洗涤两次后置于容器中,存放在0~4℃冰箱中备用。
三、制备过程取洗涤干净的红细胞,加入质量浓度0.2g/100mL抗氧剂亚硫酸氢钠及等体积的破碎剂(水与乙醇的混合物)用超声波细胞破碎机(间歇:1min/min)进行细胞破碎,破碎后加入5 倍体积的酸性丙酮(pH <3),充分搅拌,抽提10min,收集提取液,用氢氧化钠溶液调pH5~6后,加入质量浓度1g/100mL的乙酸钠溶液析出沉淀,收集沉淀,分别用去离子水、体积分数50%的乙酸溶液、体积分数95% 乙醇溶液、乙醚洗涤两次,冷冻干燥,得血红素。
氯化血红素的制备及分析
氯化血红素的制备及分析一、实验目的1、掌握氯化血红素制备的原理。
2、了解血红素的药用价值。
二、实验原理血红素是高等动物血的红色素,由原卟啉与Fe2+结合而成,它与珠蛋白结合成血红蛋白。
在体内的主要生理功能是载氧,帮助呼出CO2,另外它还是cty P450、cty c、过氧化酶的辅基。
血红素不溶于水,溶于酸性丙酮及碱性水中,在溶液中易形成聚合物,临床上常用作铁强化剂和抗贫血药及食物中色素添加剂,另外可用于制备原卟啉来治疗癌症。
氯化血红素(hemin)的制备实验室常用酸性丙酮分离提取法,使血球在酸性丙酮中溶血,抽提后再经浓缩、洗涤、结晶得到氯化血红素。
工业上制取氯化血红素常用冰乙酸结晶法,血球用丙酮溶血后,制取血红蛋白,再用冰乙酸提取。
在氯化钠存在下,氯化血红素沉淀析出。
卟啉环系化合物在400nm处有强烈吸收,称Sorel带,最大吸收波长对各种卟啉化合物是特征的,但溶剂对最大吸收波长也有影响,采用0.25%碳酸钠作溶剂。
在600nm处有特征吸收峰,光吸收值与氯化血红素浓度的关系符合朗比定律。
三、实验材料1、器材(1)烧杯 1000ml 1只 500ml 2只 250ml 2只(2)抽滤瓶 500ml 1只(3)布氏漏斗 8cm 1只(4)三颈瓶 500ml 1只(5)电动搅拌机 1台(6)球形冷凝管 30cm 1只(7)温度计 200℃ 1支(8)离心机 1只(9)分液漏斗 500ml 1只(10)小试管 20只2、试剂(1)新鲜猪血 500ml;(2)0.8%柠檬酸三钠 20ml(3)丙酮(4)冰乙酸(5)氯化钠(固体)(6)氯化钾(固体)(7)浓盐酸(8)20%氯化锶(9)0.25%碳酸钠四、实验方法1、酸性丙酮抽提0.8%柠檬酸三钠抗凝猪血200ml,离心(3000r/min)15min,倾去上层血浆,制得血球,加2-3倍的蒸馏水,充分溶胀后,沸水浴20-30min,纱布过滤,滤渣加入含3%盐酸的丙酮溶液200ml,振摇抽提30min,抽滤,将滤液用旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/3-1/4,加入20%氯化锶至终浓度2%,静置15min,离心10min,沉淀用水、95%乙醇、乙醚各洗涤一次,真空干燥后得氯化血红素粗品,称重,计算收率。
氯化血红素溶液配制方法
氯化血红素溶液配制方法
哇塞,你知道氯化血红素溶液咋配制不?其实超简单!先准备好氯化血红素粉末和合适的溶剂。
把粉末小心地加入溶剂中,就像撒调料进锅里一样,可不能太粗鲁哦!然后轻轻搅拌,看着它慢慢溶解,那感觉就像魔法一样。
溶解过程中要注意啥呢?嘿,那可得时刻盯着,别让杂质混进去啦!就像守护宝贝一样,可不能掉以轻心。
这过程安全不?那当然啦!只要你按照正确的方法来,绝对没啥问题。
稳定性也杠杠的,只要保存得当,就像坚强的战士一样可靠。
那氯化血红素溶液有啥用呢?应用场景可多啦!在医学领域,它可以帮助诊断某些疾病,就像侦探在寻找线索一样厉害。
在科研方面,那也是大显身手,好比超级英雄拯救世界。
优势嘛,那可不少。
它很精准,就像神枪手一样,指哪打哪。
而且效果显著,能让你眼前一亮。
我给你讲个实际案例哈。
有个实验室用氯化血红素溶液做实验,哇,那结果简直太棒啦!就像中了彩票一样让人兴奋。
它准确地检测出了需要的指标,为研究提供了有力的支持。
所以说,氯化血红素溶液真的超棒!配制起来也不难,只要你用心,肯定能成功。
赶紧试试吧!。
牦牛血粉酶法制备氯化血红素工艺研究
牦牛血粉酶法制备氯化血红素工艺研究李得信;师希雄;文鹏程;张炎;汪月;张忠明;张卫兵【摘要】为研究牦牛血资源的合理开发利用,试验以牦牛血粉为原料,采用酶法制备氯化血红素.研究了酶解温度、pH、时间、酶添加量等因素对氯化血红素制备的影响.试验表明,酶法制备氯化血红素的最佳工艺参数为:酶解温度55℃、酶解pH8.0、酶解时间5h、酶添加量为0.6%.此条件下氯化血红素的得率达到15.203mg/g.【期刊名称】《中国食品工业》【年(卷),期】2015(000)007【总页数】3页(P66-68)【关键词】牦牛血粉;氯化血红素;酶法【作者】李得信;师希雄;文鹏程;张炎;汪月;张忠明;张卫兵【作者单位】甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070【正文语种】中文氯化血红素是吸收率最高的生物态铁剂,已经成为比较理想的抗贫血药,并且其药理已被临床证实。
同时,氯化血红素在医药行业中已被广泛应用于血卟啉及其衍生物的制备[1-3]。
从动物血液中制备得到的血红素产品一般为氯化高铁血红素(即氯化血红素Hemin)[4-5]。
我国牦牛数量多,牦牛血资源丰富。
牦牛血中的血红蛋白含量高,从中提取制备氯化血红素,原料独特丰富,成本较低,能够产生巨大的经济效益和社会效益[6-8]。
当前,氯化血红素的制备方法很多为有机溶剂提取,而这些方法多数存在毒性大、成本高、工艺烦琐复杂、安全性低等缺点。
用酶法制备氯化血红素,利用酶对蛋白的水解能力,从而将氯化血红素从中释放出来,具有生产成本低和生产方法简单、环保的特点[9]。
氯化高铁血红素生产
氯化高铁血红素生产氯化高铁血红素是一种重要的有机金属化合物,具有广泛的应用价值。
它是通过将高铁血红素与氯化铁反应制得的。
本文将从氯化高铁血红素的制备方法、应用领域和未来发展方向等方面进行阐述。
一、制备方法制备氯化高铁血红素的方法主要有两种:一种是通过将高铁血红素与氯化铁溶液反应得到,另一种是通过将高铁血红素与氯化亚铁反应制得。
我们来看第一种方法。
将高铁血红素与氯化铁溶液反应时,需要将高铁血红素溶解于适量的溶剂中,然后逐滴加入氯化铁溶液,控制反应温度和pH值。
待反应结束后,通过过滤或离心的方式分离出产物。
该方法制备氯化高铁血红素效率较高,但需要控制反应条件,以避免产生副产物。
第二种方法是将高铁血红素与氯化亚铁反应制得。
这种方法相对简便,只需将高铁血红素与氯化亚铁溶液混合,加热反应一段时间后,通过过滤或离心得到氯化高铁血红素。
然而,该方法的产率较低,需要进一步优化反应条件。
二、应用领域氯化高铁血红素具有广泛的应用领域。
首先,它可以用作生化试剂,在生物医药领域中用于检测和分析血红素的含量。
其次,氯化高铁血红素还可以用于光电材料的制备,具有优异的光学性能和稳定性,适用于制备光电器件。
此外,氯化高铁血红素还可用作催化剂,参与一些有机反应的催化过程。
三、未来发展方向随着科学技术的不断发展和进步,氯化高铁血红素的研究也在不断深入。
未来,我们可以从以下几个方面进一步探索和发展。
可以改进氯化高铁血红素的制备方法,提高产率和纯度。
通过改变反应条件、优化催化剂和添加助剂等手段,可以实现更高效、环境友好的制备方法。
可以进一步研究氯化高铁血红素的性质和结构,探索其在生物医药和材料科学中的更多应用。
通过深入了解其物理化学性质,可以设计和合成出更加优异的衍生物,拓宽其应用领域。
还可以探索氯化高铁血红素与其他化合物的复合物的形成和性质。
通过与其他化合物的相互作用,可以获得更复杂的功能材料,具有更广泛的应用前景。
氯化高铁血红素作为一种重要的有机金属化合物,具有广泛的应用前景。
循环伏安法定量测定氯化血红素 (1)
循环伏安法定量测定氯化血红素一、实验目的1.1. 掌握电化学工作站的基本使用方法。
1.2. 加深理解循环伏安法的测定原理。
1.3. 学习运用循环伏安法进行实际样品的分析测定。
二、实验原理2.1.电化学检测系统是电化学分析的基础,主要包括电化学工作站、电极和电解池。
其中,电化学工作站是施加工作电压和采集电化学输出信号的电子设备,而电极是与电解质或电解质溶液接触的电子导体或半导体。
电化学分析常采用三电极体系,即工作电极(W)、参比电极(R)和对电极(A)。
工作电极是电极反应发生的场所,是最直接的分析检测器件;参比电极是一个已知电势的接近于理想不极化的电极,是测量工作电极电位的对比标准;对电极则与工作电极组成回路,使工作电极上电流畅通。
对电极一般采用面积较大的惰性材料制成,以降低对电极上的电流密度,使其在测量过程中基本不会被极化。
图1 电化学检测系统:(A)电化学工作站和三电极体系;(B)电解池。
2.2. 循环伏安法是电化学分析中最常用的实验技术,也是电化学表征的主要方法。
循环伏安法以快速线型扫描的形式在电极上施加等腰三角形脉冲电压:电压从某设定起始电位E i开始,沿某一方向变化,当扫描至某设定终点电位E f后,再反向扫描回归至起始电位E i;若E i > E f,则在正向扫描过程中电极电位越来越负,当电位足够负时具有氧化还原活性的分子在电极表面发生还原,产生还原峰;而在逆向扫描过程中,还原产物又会重新在电极表面氧化,产生氧化峰。
在一定的电解质溶液组成和实验条件下,氧化还原峰电流与氧化还原组分的浓度成正比,可利用其进行定量分析。
同时,根据所得到的循环伏安图中氧化峰和还原峰的对称性中还可以判断出电活性物质在电极表面反应的可逆程度;根据峰电流值与扫描速度的关系可以确认电活性物质在电极表面的电化学过程类型(扩散控制或吸附控制)。
2.3. 氯化血红素(hemin,其分子式如图2所示)是铁卟啉一类配合物的总称,是高等动物血液、肌肉中的红色色素,在体内起运载和贮存O2的作用,在呼吸链中发挥电子传递的功能。
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氯化血红素的制备及分析
一、实验目的
1、掌握氯化血红素制备的原理。
2、了解血红素的药用价值。
二、实验原理
血红素是高等动物血的红色素,由原卟啉与Fe2+结合而成,它与珠蛋白结合成血红蛋白。
在体内的主要生理功能是载氧,帮助呼出CO2,另外它还是cty P450、cty c、过氧化酶的辅基。
血红素不溶于水,溶于酸性丙酮及碱性水中,在溶液中易形成聚合物,临床上常用作铁强化剂和抗贫血药及食物中色素添加剂,另外可用于制备原卟啉来治疗癌症。
氯化血红素(hemin)的制备实验室常用酸性丙酮分离提取法,使血球在酸性丙酮中溶血,抽提后再经浓缩、洗涤、结晶得到氯化血红素。
工业上制取氯化血红素常用冰乙酸结晶法,血球用丙酮溶血后,制取血红蛋白,再用冰乙酸提取。
在氯化钠存在下,氯化血红素沉淀析出。
卟啉环系化合物在400nm处有强烈吸收,称Sorel带,最大吸收波长对各种卟啉化合物是特征的,但溶剂对最大吸收波长也有影响,采用0.25%碳酸钠作溶剂。
在600nm处有特征吸收峰,光吸收值与氯化血红素浓度的关系符合朗比定律。
三、实验材料
1、器材
(1)烧杯 1000ml 1只 500ml 2只 250ml 2只(2)抽滤瓶 500ml 1只
(3)布氏漏斗 8cm 1只
(4)三颈瓶 500ml 1只
(5)电动搅拌机 1台
(6)球形冷凝管 30cm 1只
(7)温度计 200℃ 1支
(8)离心机 1只
(9)分液漏斗 500ml 1只
(10)小试管 20只
2、试剂
(1)新鲜猪血 500ml;
(2)0.8%柠檬酸三钠 20ml
(3)丙酮
(4)冰乙酸
(5)氯化钠(固体)
(6)氯化钾(固体)
(7)浓盐酸
(8)20%氯化锶
(9)0.25%碳酸钠
四、实验方法
1、酸性丙酮抽提
0.8%柠檬酸三钠抗凝猪血200ml,离心(3000r/min)15min,倾
去上层血浆,制得血球,加2-3倍的蒸馏水,充分溶胀后,沸水浴
20-30min,纱布过滤,滤渣加入含3%盐酸的丙酮溶液200ml,振摇抽
提30min,抽滤,将滤液用旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/3-1/4,加
入20%氯化锶至终浓度2%,静置15min,离心10min,沉淀用水、95%
乙醇、乙醚各洗涤一次,真空干燥后得氯化血红素粗品,称重,计算
收率。
2、冰乙酸结晶法
0.8%柠檬酸三钠抗凝猪血500ml,离心15min,倾去上层血浆,下层
红细胞加丙酮200ml搅拌,过滤,得红色血蛋白。
取500ml带温度计、冷凝器、搅拌插口的三颈烧瓶,加入300ml冰乙
酸,加热升温,再加入16g氯化钠,8g氯化钾,在搅拌下加入100g
血红蛋白,在105℃继续搅拌10min,冷却,静置过夜,离心收集沉
淀的氯化血红素结晶,用冰乙酸和0.1%醋酸洗涤,再用水洗至中性,
过滤,干燥后的氯化血红素粗品,称重,计算得率。
3、含量测定
取标准氯化血红素,用0.25%碳酸钠配制成浓度0.08mg/ml备用。
取制备所得氯化血红素,用0.25%碳酸钠配制成0.1 mg/ml备用。
按
下表稀释,在600nm处测定OD,以0.25%碳酸钠溶剂作空白,根据所
得数据,计算氯化血红素含量。
标准氯化血红素制备血红素
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Hemin溶液 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0 1.0 2.0 3.0
0.25%碳酸钠(ml) 4.0 3.6 3.2 2.8 2.4 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 0 3.0 2.0 1.0
Hemin含量(mg/ml 0 OD600nm。