愈伤组织诱导培养

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实验一植物愈伤组织诱导培养
一、实验名称
植物愈伤组织诱导培养
二、实验目的
1、掌握MS培养基的配制方法 2、初步掌握植物外植体无菌操作的基本步骤
三、实验材料
1、芦荟 2、月季
四、主要实验器材
1、剪刀 2、解剖刀 3、长角镊子 4、超净工作台 5、9cm培养皿 6、封口膜 7、烧杯 8、吸管 9、废液缸 10、橡皮筋
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月季
1、枝条切去叶,再剥去附在茎上的叶柄及皮刺。 2、清水清洗、擦干 3、2~3厘米一段,每段至少一个侧芽。 4、装入消毒过的培养皿,紫外灯灭菌30分钟。 5、用饱和漂白粉上清液作表面灭菌25~30分钟 (也可使用乙醇;升汞) 6、无菌水涮洗数次,无菌纱布吸干水分 7、接种到培养基上: MS+(0.3一10mg/ L)BA 8、培养条件:光照 10-12h,光照度为 800一 1200Lx,温度21-25℃。
五、实验步骤
芦荟 1、将准备好的芦荟幼苗在无菌中冲洗数次。 2、取茎尖部分,再冲洗1-2次,淋干,紫外灭菌30分钟 3、在超净台上,用75%的乙醇将茎尖浸泡30-60s 4、再用升汞(0.01%)浸5-l0min,最后用无菌水冲洗数 次。无菌纱布吸干水份 5、用解剖刀取出茎尖生长点的组织切块,接种到愈伤组 织诱导培养基上。 MS+(1一6mg/ L)BA+(0.1一0.5mg/L)NAA 苄基嘌呤(BA);萘乙酸(NAA) 6、培养条件:光照 10-12h,光照度为 1000一2000Lx, 温度(25士)2℃。
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