佐剂的分类及作用
兽用疫苗保护剂和佐剂
兽医生物制品常用的保护剂
1．5%蔗糖（乳糖）脱脂乳保护剂
蔗糖（或乳糖） 5g，加脱脂乳至 100ml，充分溶解后，110~116℃高压灭菌 30~40 min。
2．明胶蔗糖保护剂
明胶 2%~3%（g/m1）、蔗糖5%（g/m1）、硫脲 1%~2%（g/m1）。先 将 12%~18%明胶液、 30%蔗糖液和 6%~12%硫脲液加热溶解， 116℃高压 灭菌30~40min；
1. 营养液： • 可修复因冻干而受损的细胞，使冻干制品含有一定量水分；
• 可促进高分子物质形成骨架，使冻干制品呈多孔的海绵状，
增加溶解度 2. 赋形剂： • 防止低分子物质的碳化和氧化，保护活性物质不受加热影响 • 使冻干制品形成多孔性、疏松的海绵状物，增加溶解度 3. 抗氧化剂： • 抑制冻干制品中的酶作用，增加生物活性物质在冻干后贮存
7．脂质分子类佐剂：脂多糖、Vit A和Vit E等脂溶性维生素
8．其他：霍乱毒素（CT）、百日咳毒素（PT）和破伤风类 毒素（TT）等；脂磷壁酸（LTA）；维生素B12等。
氢氧化铝胶 (铝胶）
合成方法:
（1）用铝粉加烧碱合成法
2Al(OH)3+12H2O+3H2SO4→Al2(SO4)3· 18H2O
兽用疫苗冻干保护剂 和佐剂
冻干保护剂（稳定剂）
保护剂：又称稳定剂（stabilizer） ，是指一类能防止生 物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。（指对疫 苗生产、血清制备等） 保护剂用途（不同用途加不同保护剂, 主要针对活的微生 物或细胞） ① 菌种或毒种保存：常用甘油作保护剂 ② 细胞株保存：常用二甲基亚砜(DMSO) DMSO:二甲基亚砜，一种细胞的保护剂 ③ 疫苗冷冻真空干燥制备时：加脱脂乳（或二甲基亚 砜）和蔗糖等（不同国家有不同配方） ④ 干扰素类生物活性物质的保存：加葡聚糖
动物免疫佐剂分类
动物免疫佐剂分类
动物免疫佐剂是一种辅助免疫的药品，可以提高疫苗的免疫效果，并保持免疫效果的
持久性。
根据其化学和生物学特性，它可分为多种类型。
以下是动物免疫佐剂的分类。
1. 矿物油佐剂：矿物油佐剂是一种乳化剂，通常用于禽流感等疫苗中，以增强疫苗
的免疫原性。
它需要用稳定剂进行稳定，常常添加到禽流感疫苗的水相中，使其产生一个
小小的油水乳液。
2. 乳化剂：乳化剂可以将疫苗中的蛋白质颗粒分散并提高稳定性，增强疫苗的免疫
原性。
有些乳化剂还具有免疫刺激作用，例如FCA（不完全佐剂化强琥珀酰化）和FIA（较弱的佐剂化强琥珀酰化）。
3. 多糖类佐剂：多糖类佐剂包括糖基脂质、宿主细胞壁多糖、多糖磷酸酯、菌体多
糖等。
它们可以通过增强抗原递呈细胞的吞噬作用或与T细胞的亲和力，从而增强疫苗的
免疫原性。
4. 蛋白质佐剂：蛋白质佐剂可以与疫苗中的蛋白质结合，从而增强其免疫原性。
蛋
白质佐剂可以是胶体铝、氢氧化铝、植物蛋白等。
这种类型的佐剂也需要用稳定剂进行稳定。
5. 脂质体佐剂：脂质体佐剂是一种与疫苗成分相似的微纳米颗粒，可以帮助疫苗通
过细胞膜进入到细胞内。
脂质体佐剂可以通过提高抗原递呈细胞的吞噬作用，增强T细胞
的亲和力，从而增强疫苗的免疫原性。
6. 其他佐剂：还有一些其他类型的佐剂，例如微粒佐剂、聚合物佐剂、树脂佐剂等。
这些佐剂通常具有增加疫苗免疫原性的能力。
总之，动物免疫佐剂可以增强疫苗的免疫原性，保持免疫效果的持久性。
不同类型的
佐剂具有不同的作用机制，应根据需要选择合适的佐剂。
佐剂的分类及作用
佐剂的分类及作用佐剂是草药的一个分类。
它们是与其他草药或药物一起使用来增强其功效的植物，也称为植物性协同药物。
佐剂被广泛用于中草药的配方中，并且可以根据其作用分类如下：1."增强作用"佐剂：增强作用佐剂可以增强其他草药或药物的功效。
例如，黄连是一种增强作用佐剂，能增加槐角的抗菌作用。
2."抵抗作用"佐剂：抵抗作用佐剂可以帮助身体抵抗疾病。
例如，银杏叶富含抗氧化物质，可以增强体内抗氧化能力，减少自由基的损伤。
3."代谢作用"佐剂：代谢作用佐剂可以促进身体的代谢过程，包括新陈代谢、消化和排泄。
例如，山楂可以帮助消化和降低胆固醇。
4."保护作用"佐剂：保护作用佐剂可以保护身体免受损害。
例如，乌梅富含抗氧化物质，可以保护肝脏免受损伤。
5."兴奋作用"佐剂：兴奋作用佐剂可以增加身体机能的活动水平。
例如，蛇胆可以增强心脏的收缩力。
6."镇静作用"佐剂：镇静作用佐剂可以减轻身体的紧张和焦虑。
例如，熟地黄具有镇静作用，可以帮助缓解焦虑和失眠。
7."解毒作用"佐剂：解毒作用佐剂可以帮助身体排出毒素。
例如，蒲公英可以促进尿液的排出，从而有助于排毒。
8."抗炎作用"佐剂：抗炎作用佐剂可以减轻炎症反应。
例如，木瓜可以减轻风湿病的炎症和疼痛。
9."抗凝作用"佐剂：抗凝作用佐剂可以减少血液凝结的风险。
例如，红花可以减缓血液凝结，并且适用于心血管疾病的治疗。
10."抗癌作用"佐剂：抗癌作用佐剂可以帮助抑制癌细胞的生长和转移。
例如，青蒿素是一种常用的抗癌佐剂。
总结而言，佐剂能够对草药或药物的功效进行增强、抵抗疾病、促进代谢、保护身体、兴奋活动、镇静心情、解毒排毒、抗炎止痛、抗凝血、抗癌等。
不同的佐剂具有不同的作用，可以在中草药的配方中根据需要进行选择和搭配，以达到更好的疗效。
05生物制品的佐剂保护剂灭活剂
B细胞的作用 某些佐剂可以直接作用于B细胞，如细菌脂多糖，以B细胞为主要靶细
胞，使之多克隆增殖，并诱导B细胞对T细胞的敏感性，从而增强对TD抗 原的免疫应答，提高抗体水平。
非特异性免疫增强作用 佐剂效应，除加强抗原引起免疫应答能力以外，还能对各种感染和
肿瘤具有非特异性免疫增强作用，主要是加强NK细胞和K细胞的活性。 这种非特异性的免疫作用，至少有一部分是通过诱导干扰素生成而造成 的。香菇多糖、葡聚糖、云芝多糖、果聚糖等多糖在体内都能诱生干扰 素。
广义的讲，凡是可以增强抗原特异性免疫应答的物质均 可称为佐剂。
对佐剂的基本要求
因为几乎所有畜禽及其产品都是直接或间 接人类食品，所以佐剂作为一些生物制品的 成分，必须考虑其安全性和副作用，既要考 虑对动物的安全性，也必须考虑对人的安全 性。
世界卫生组织及一些专家认为：生物制品的佐剂， 在考虑其免疫增强效应的同时，必须具有以下条件
存
化十八烷基三甲铵。
型
胺及其类似物：癸胺、癸胍及其他。
核酸及类似物：DNA、RNA、低核苷酸、多聚核苷
酸、环磷酸腺苷等。
药物：左旋咪唑及蜂胶等
佐剂的作用机理
各种佐剂的作用机理不尽相同，但概括起来有如下方面
1．对抗原的作用
(1) 增加抗原分子的表面积 某些佐剂颗粒表面可以吸附许多抗原，使抗原表面积明显
增加，特别是可溶性抗原或半抗原，经胶体颗粒吸附后，抗 原性增强，抗体滴度明显提高。
(2) 延长抗原在体内的存留时间 抗原与某些佐剂混合后形成凝胶状，延长抗原在体内的
贮存时间，使其徐徐释放，因而提高抗原物质的免疫原性。
2．对机体的作用
对单核巨噬细胞的作用 佐剂能引起细胞浸润，出现巨噬细胞、淋巴细胞及浆细胞聚集，促进
免疫佐剂的概念
免疫佐剂的概念
免疫佐剂（Immunoadjuvant）是指能够增强免疫反应的物质或药物。
它们被添加到疫苗或其他免疫制剂中，以提高其免疫原性和效力。
免疫佐剂的主要作用包括以下几个方面：
1. 增强免疫应答：免疫佐剂可以刺激免疫系统，增强对疫苗或抗原的免疫应答，从而提高疫苗的保护效果。
2. 诱导细胞免疫：一些免疫佐剂可以诱导更强的细胞免疫应答，包括 T 细胞的活化和增殖，从而增强对病原体的清除能力。
3. 延长免疫记忆：免疫佐剂可以促进免疫记忆细胞的形成和维持，从而提供长期的免疫保护。
4. 提高疫苗的稳定性和效力：免疫佐剂可以改善疫苗的稳定性和抗原递呈，使其更有效地诱导免疫应答。
免疫佐剂的种类很多，包括无机化合物（如铝盐）、微生物成分（如卡介苗）、脂质体、细胞因子、 toll 样受体激动剂等。
不同类型的免疫佐剂具有不同的作用机制和特点。
需要注意的是，免疫佐剂的使用需要谨慎，因为它们可能引起不良反应，如局部炎症、过敏反应等。
因此，在疫苗的研发和应用中，需要对免疫佐剂进行安全性评估和优化选择。
总之，免疫佐剂是一种重要的免疫调节物质，它们在疫苗和其他免疫治疗中发挥着关键作用，有助于提高免疫效果和保护机体免受病原体的侵害。
疫苗佐剂的研究进展
疫苗佐剂的研究进展一、佐剂的定义佐剂（Adjuvant）又称免疫调节剂（Immunomodulator）或免疫增强剂（Immunomodulator），是指先于抗原或与抗原混合或同时注入动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用的一类物质。
佐剂的英文名adjuvant来源于拉丁文“adjuvare”,意思为“帮助”。
药物佐剂，即某种可以加强药物疗效的物质。
二、佐剂的作用佐剂可增强抗原的免疫原性、免疫应答速度及耐受性，可调节抗体对抗原的亲和性与专一性，可刺激细胞介导的免疫，可促进肠胃粘膜对疫苗的吸收。
佐剂的作用机制当前了解的很少，阻碍了设计新的佐剂化合物，佐剂常激活多个免疫链，其中只有少数与抗原特异应答相关，要想确切地知道佐剂的作用很困难。
佐剂能增加对细胞的渗入性，防止抗原降解，能将抗原运输到特异的抗原呈递细(APC5)，增强抗原的呈递或诱导细胞因子的释放。
在注射抗原后，抗原可直接被APC5吸收，与B细胞表面抗体结合或发生降解，抗原的吸收途径主要取决于抗原的特征，但也受佐剂影响。
被APC5吸收的抗原通过两种途径MHCI或MHCII而呈递于CD8+或CD4+T细胞上。
根据注射疫苗后分泌细胞因子方式的不同，可分为Th1应答与Th2应答。
Th1应答主要通过诱导分泌IFN-γ, IL-2和IL-12，而Th2应答是通过诱导分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-12，不同的细胞因子分泌模式是相互拈抗的，促进一种应答形式常会抑制另一种应答形式，产生I g G2a抗体被认为是Th1应答，然而诱导产生I g G1常与Th2应答有关。
不同的佐剂虽然可诱导相似的抗体水平，但是细胞因子应答的方式可能不同，Th1或Th2应答方式对于疫苗的功效有显著的影响。
评价佐剂质量的优劣或能否适用于人用疫苗疫苗的主要因素为：①能使弱抗原产生满意的免疫效果；②不得引起中等强度以上的全身反应和严重的局部反应，在局部贮留的硬结必须逐渐被吸收；③不得因其对佐剂本身的超敏反应，不应与自然发生的血清抗体结合而形成有害的免疫复合物；④不得引起自身免疫性疾病；⑤既不能有致癌性，也不得有致畸型性；⑥佐剂的化学组成应明确，物理和化学性质稳定；⑦在一定的保存期内的疫苗佐剂,应该稳定有效。
皂苷免疫佐剂的研究进展
皂苷免疫佐剂的研究进展皂苷免疫佐剂是一种新型的免疫增强剂，近年来受到广泛关注。
它主要通过增强机体免疫功能，提高疫苗的免疫原性和免疫效果，从而在预防和治疗传染病、肿瘤、自身免疫性疾病等方面发挥着重要作用。
目前，关于皂苷免疫佐剂的研究已经取得了一些进展，但仍有许多问题亟待解决。
本文将从皂苷免疫佐剂的定义、分类、作用机制、研究进展以及存在的问题等方面进行讨论。
一、皂苷免疫佐剂的定义皂苷免疫佐剂是指一类天然或合成的化合物，能够作为疫苗佐剂，增强机体对疫苗的免疫反应，提高疫苗的免疫原性和免疫效果，从而加强对疾病的预防和治疗作用。
目前，已经发现的皂苷免疫佐剂主要包括植物源皂苷、合成皂苷和动物源皂苷等多种类型。
根据其来源和结构特点，皂苷免疫佐剂可分为不同的类别。
常见的分类方法包括：根据来源可分为植物源皂苷、动物源皂苷和合成皂苷；根据结构可分为二萜皂苷、倍半萜皂苷和三萜皂苷等。
皂苷免疫佐剂的作用机制非常复杂，主要包括：刺激抗原递呈细胞和淋巴细胞，促进抗原特异性免疫应答；增加炎症因子和细胞因子的产生，激活天然免疫和适应性免疫系统；调节免疫应答的平衡，提高免疫记忆效应等。
皂苷免疫佐剂还可能通过激发T细胞的活化和分化、促进B细胞的分泌抗体等途径，发挥其免疫增强作用。
近年来，关于皂苷免疫佐剂的研究取得了一些进展。
目前，已经开展了大量的体外细胞实验和动物实验，证实了皂苷免疫佐剂在增强疫苗免疫原性方面的显著作用。
研究发现，植物源皂苷可通过刺激T细胞和B细胞的活化，增强宿主的抗体反应和细胞免疫应答，提高疫苗的免疫效果。
还有研究表明，合成皂苷在促进免疫细胞的浸润和活化、增强抗原特异性T细胞的反应等方面具有独特的免疫增强作用。
皂苷免疫佐剂在临床应用方面也取得了一些进展。
已经有一些皂苷免疫佐剂被应用于人类疫苗的临床试验中，并取得了一定的疗效。
皂苷免疫佐剂可以加强流感疫苗对于老年人和免疫低下个体的免疫应答，提高其保护效果。
还有部分研究表明，皂苷免疫佐剂能够增强肿瘤疫苗和艾滋病疫苗的免疫原性和免疫效果，为相关疾病的预防和治疗提供新的思路。
弗氏佐剂使用方法
弗氏佐剂使用方法弗氏佐剂是一种广泛应用于实验动物免疫接种的添加剂，能够增强疫苗的免疫原性，提高疫苗的效果。
在使用弗氏佐剂时，需要注意以下使用方法：一、弗氏佐剂的分类与选择1. 根据成分可分为油剂弗氏佐剂和水剂弗氏佐剂。
油剂弗氏佐剂主要包括油酸钠和胆固醇等，适用于油溶性抗原；水剂弗氏佐剂主要包括氢氧化铝和磷酸铝等，适用于水溶性抗原。
2. 根据剂型可分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。
不完全弗氏佐剂主要适用于初次免疫，添加比例一般为0.5%-5%；完全弗氏佐剂适用于加强免疫，添加比例一般为1%-5%。
二、弗氏佐剂的使用步骤1.准备抗原：根据实验需要，制备相应浓度和纯度的抗原溶液。
2.配制弗氏佐剂：根据实验需求，将弗氏佐剂与抗原溶液混合，充分搅拌，确保抗原充分吸附。
3.免疫接种：将配制好的弗氏佐剂-抗原混合物接种到实验动物体内，如小鼠、大鼠等。
接种部位可选择腹腔、皮下、肌肉等。
4.观察与监测：在免疫过程中，定期观察实验动物的生长状况、疫苗反应等，以评估疫苗效果。
三、弗氏佐剂的注意事项1.严格无菌操作：弗氏佐剂在使用过程中，应确保无菌操作，避免细菌污染。
2.适量使用：根据实验动物的体重、年龄等因素，合理控制弗氏佐剂的用量，避免过量导致不良反应。
3.观察动物反应：在免疫过程中，密切观察实验动物的反应，如食欲、精神状态等。
一旦发现异常，应及时处理。
4.储存条件：弗氏佐剂应存放在密封容器中，置于阴凉、干燥处，避免高温、潮湿。
总之，弗氏佐剂在实验动物免疫接种中发挥着重要作用。
正确选用和使用弗氏佐剂，可以提高疫苗的免疫效果，为实验研究奠定基础。
在使用过程中，要严格遵循使用方法，注意观察实验动物的反应，确保实验安全顺利进行。
疫苗佐剂综述
疫苗佐剂综述近三十年来，人用疫苗佐剂发展迅速，已经研发出了能诱发更强，更持久的人用疫苗佐剂。
但是还存在一些不足之处，理想的疫苗佐剂应该更适于临床应用，毒副作用更小。
本文总结了当前疫苗佐剂的发展状况，其中包括疫苗佐剂的监管建议，理想佐剂的标准，以及详细介绍了诸如矿物盐类佐剂，毒素类佐剂，微生物衍生物类佐剂，油乳剂，细胞因子佐剂，多糖类佐剂，以及核酸佐剂。
同时本文还讨论了最近新发现的Toll样受体的生物学作用以及在免疫激活中发挥的作用。
关键词：疫苗；佐剂；Toll样受体；1 引言免疫接种的目的就是要获得对疾病持久的免疫保护反应。
与弱毒疫苗不同，灭活疫苗或亚单位疫苗通需要疫苗佐剂的参与才能更好的发挥作用【1】。
“佐剂”一次来自于拉丁语“Adjuvare”一词，为“帮助”或“辅助”之意【2】。
免疫佐剂的生物作用包括：（1）抗原物质混合佐剂注入机体后，改变了抗原的物理性状，可使抗原物质缓慢地释放，延长了抗原的作用时间；（2）佐剂吸附了抗原后，增加了抗原的表面积，使抗原易于被巨噬细胞吞噬；（3）佐剂能刺激吞噬细胞对抗原的处理；（4）佐剂可促进淋巴细胞之间的接触，增强辅助T细胞的作用；（5）可刺激致敏淋巴细胞的分裂和浆细胞产生抗体。
故免疫佐剂的作用可使无免疫原性物质变成有效的免疫原；（6）可提高机体初次和再次免疫应答的抗体滴变；（7）改变抗体的产生类型以及产生迟发型变态反应，并使其增强。
人们正是因为观察到疫苗接种位点处形成的脓肿协助机体产生了针对特异性抗原更强的免疫反应，从而形成了疫苗佐剂的理念。
更有甚，与接种抗原不相关的物质形成的脓肿坏死也能增强疫苗的特异性免疫反应【3,4】。
1926年，通过吸附于铝盐类化合物的白喉类毒素首次证明了铝盐类佐剂的免疫增强作用。
至今，铝盐类佐剂（主要指氢氧化铝和磷酸铝）依然是唯一人用疫苗佐剂。
其原因是什么呢？尽管大量事实证明，弗氏完全佐剂和脂多糖类佐剂具有更强的佐剂活性，但由于其能引发局部和全身性的毒副作用而不适于人用。
佐剂的研究进展
佐剂的研究进展“Adjuvant”,即佐剂,最早来源于希腊语“adjuvare”,也就是帮助的意思[1]。
随着DNA重组疫苗、合成肽疫苗等新型疫苗不断涌现,免疫佐剂研究越来越受到人们的关注.近年来佐剂的发展迅猛,多种新型佐剂层出不穷,人们对佐剂的作用机理亦有更深入的认识.佐剂的概念及发展简史佐剂（Adjuvants）是先于抗原或与抗原同时应用，能非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答，能增强相应抗原的免疫原性或改变免疫反应类型，而本身并无抗原性的物质，又称免疫佐剂或抗原佐剂。
佐剂被用来增强疫苗的免疫反应已有近80年的历史，1925年，法国兽医免疫学家Ranmon发现疫苗中某些物质的佐剂作用，1926年Glenny证明明矾具有佐剂作用，1951年Freund研制成弗氏佐剂。
目前我国对蜂胶佐剂、油乳佐剂、核酸佐剂、细胞因子佐剂等新型佐剂的研究也有迅速发展。
1免疫佐剂的功能佐剂可选择性地改变免疫应答的类型，产生体液和\或细胞免疫。
如：弗氏完全佐剂（FCA）是细胞免疫的强刺激剂，也能刺激体液免疫；弗氏不完全佐剂（FIA）仅能刺激体液免疫。
改变体液抗体的种类IgG 亚类和抗体的亲和性，如壳聚糖、氧化甘露聚糖。
佐剂还可改变抗原的构型，使疫苗诱导T辅助细胞和细胞毒T淋巴细胞(CHL)反应。
如免疫刺激复合物。
佐剂可改变免疫反应为MHCⅠ型或MHCⅡ型。
如：白细胞介素4（IL-4）能上调MHCⅠ类抗原,IL-1可诱导MHCⅡ类反应。
佐剂还能改变T辅助细胞(Th1和Th2)的免疫反应。
FCA可诱导Th1型细胞因子，IL-18、IL-12也可强烈诱导Th1型细胞因子产生;FIA则是典型的只诱导Th2型细胞因子。
2免疫佐剂的分类目前,经动物实验证实有佐剂作用的物质多达百种以上,按佐剂作用可将其分为2类:①贮存型佐剂,即能以吸附成其他方式粘着抗原物质,注入机体后,可使抗原存留在一定的接种部位,并逐渐往周围释放,以延长抗原的作用时间,如铝佐剂。
免疫佐剂及其应用
配制时注意事项：
①氢氧化铝具有较强的吸附力，所以，制胶过 程中一般用软化水或去离子水洗涤。 ②氢氧化铝胶为两性化合物，过酸或过碱都会 失去胶态。故要掌握好化合时的pH值。 ③贮存铝胶应放在耐酸搪瓷缸或耐酸池中，并 严密封盖，贮放期不超过3个月。 ④铝胶室温保存，以免破坏胶态。
2．明矾（Alum）
制成什么样的乳剂型，与乳化剂及乳化 方法密切相关。 通常W/O型乳剂较粘稠，在机体内不易 分散，佐剂活性较好，为生物制品所采 用的主要剂型； O/W型乳剂较稀薄，注入机体后易于分 散，但其佐剂活性很低，生物制品一般 不采用这种剂型。
2．乳化剂
（1）乳化剂的种类 天然乳化剂：来自动植物，如阿拉伯胶、 海藻酸钠、蛋黄以及炼乳等。 人工合成乳化剂，再分为离子型和非离 子型。
（一）颗粒性佐剂
1．盐类佐剂：包括氢氧化铝胶、各种明矾、 磷酸铝等。 2．油水乳剂佐剂 ：如弗氏完全佐剂 （Freund’s complete adjuvant, FCA）、弗氏 不完全佐剂（Freund’s incomplete adjuvant, FIA）和矿物油白油佐剂。 3．免疫刺激复合物（ISCOM）佐剂。
4、作用机理
①抗原递呈（antigen presentation） 指抗原分子递呈给T细胞的方法。 抗原递呈的方法对免疫应答的实质和强 度有重要影响。佐剂与疫苗的联合使用， 有助于抗原性物质在胞内被加工，被 MHC分子特异性的结合、保护、运输并 递呈给效应细胞。
②抗原寻的（antigen targeting）
（二）油乳佐剂
指一类由油类物质和乳化剂按一定比例混合形 成的佐剂，如弗氏佐剂。 该类佐剂主要在抗原寻的过程中起作用，使抗 原在注射部位保持稳定，为抗原在淋巴系统中 转运提供载体，增加单核细胞的形成和积聚。 油乳剂疫苗的免疫效力高低，直接与乳化作用 的好坏和乳剂成分的质量等有关。 一种好的乳剂疫苗应是油包水（水/油或W/O） 或水包油（油/水或O/W）型，粘度低，颗粒均 匀，稳定性良好，呈乳白色。
兽用疫苗保护剂和佐剂讲解
②抗原寻的（antigen targeting）
指抗原传递给免疫系统中适当效应细胞的效率。包括 吸引巨噬细胞到达组织部位、活化吞噬细胞、促进抗原 与细胞受体的结合等有重要作用。
③免疫调节（immune modulation） 是指任何可以修饰的免疫效应细
（二）病毒的保护剂 ① 5%蔗糖 脱脂乳； ② 马立克814活细胞疫苗:保存液氮.稳定剂为10%二 甲基亚砜和50%犊牛血清的199液。 注意: 微生物保护剂缓冲液的组成比例，不同厂家有 不同的配方。
兽医生物制品常用的保护剂
1．5%蔗糖（乳糖）脱脂乳保护剂
蔗糖（或乳糖）5g，加脱脂乳至100ml，充分溶解后，110~116℃高压灭菌 30~40 min。
一些常用的冷冻干燥保护剂
分类
保护剂
复合物 糖类 盐类 醇类 酸类 聚合物
脱脂乳、明胶、蛋白质、蛋白胨、糊精、血清、甲基纤维素等 蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖等 乳酸钙、谷氨酸钠、氯化钠、氯化钾、醋酸铵、硫代硫酸钠等 山梨醇、甘油、甘露醇、肌醇、木糖醇等 柠檬酸、酒石酸、氨基酸等 葡聚糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等
• 注意:佐剂和免疫增强剂的关系?
•
有时佐剂也是免疫增强剂.
作用特点：
① 明显增强抗原性微弱的物质诱导机体产生 特异性免疫应答。
② 用最少的抗原和最少的接种次数，产生足 够的免疫应答。
免疫佐剂作用机理
作用方式
① 改变正常免疫机能，吸引大量巨噬细胞以吞噬抗原； ② 改变抗原的构型，使抗原物质降解，并加强其免疫原性； ③ 延长抗原在组织内的贮存时间，使抗原缓慢降解和缓释，
佐剂的分类及作用
佐剂的作用机理
改变抗原物理性状，延缓抗原降解和排除，延长体内 存留的时间，从而更有效的刺激免疫系统；
刺激单核巨噬细胞增强其对抗原的处理和递呈能力；
刺激淋巴细胞增生和分化，从而增强和扩大免疫应答 的效应。
佐剂的分类
颗粒性佐剂 非颗粒性佐剂
一、颗粒性佐剂
不溶性铝盐胶体
这是一类在疫苗上应用很广泛的佐剂,通常使用的主要有氢氧化 铝明胶、明矾、磷酸三钙等。铝盐是当前唯一允许用于人的佐剂。 价廉，易制备。
油乳乳剂
油乳佐剂是用矿物油、乳化剂(如span280 ,Tween280) 及稳定 剂(如硬脂酸铝) 按一定比例混合作为油相,然后与抗原混合制成 各种类型的油水乳剂,其中最著名的是弗氏佐剂(FA) 。该佐剂是 用矿物油(石蜡油) 、乳化剂(羊毛脂) 和杀死的分枝杆菌组成的 油包水乳化佐剂,这3 种成分俱全的佐剂称为弗氏完全佐剂 ( FCA) ,不含分枝杆菌的佐剂是弗氏不完全佐剂( FIA) 。
理想佐剂应该具备以下特点
安全，且无短期及长期的毒副作用。 佐剂的化学成分和生物学形状清楚，制备批间差异小
且易于生产。 与单独使用抗原相比，佐剂与抗原联用能刺激机体产
生较强的免疫反应。 用较少的免疫剂量即可产生效力。 保证液体剂型疫苗在较低的浓度下即可刺激机体产生
较强的免疫应答。进入体内的佐剂可自行降解且易于 从体内清除。 价格低廉。
FIA可引起持续性肉芽肿，FCA中的BCG可引起结合菌素过敏反应， 不能用于人类。
脂质体
脂质体是由磷脂和其他极性分子以双层脂质膜构型形成的封闭的 向心性囊泡,对与其结合或偶联的蛋白抗原具有免疫佐剂作用。
脂质体可储存抗原,缓慢释放可溶性抗原,并能将抗原导向巨噬细 胞或树突状细胞, 还可将抗原直接递送至胞质并通过MHC Ⅰ类分 子诱导CTL 应答。
佐剂的类型
佐剂的类型
佐剂是指在化学合成或某些化学过程中用于改善反应速率、提高产率、改善产物品质等目的的辅助剂。
佐剂的类型很多，主要有以下几种：
1. 溶剂型佐剂：溶剂型佐剂是指能够溶解反应物或产物，从而促进反应或提高产率的佐剂。
常见的溶剂型佐剂包括水、乙醇、二甲基亚砜等。
2. 离子型佐剂：离子型佐剂是指能够改变反应机理或提高反应速率的佐剂。
常见的离子型佐剂包括盐酸、硫酸、碳酸氢根等。
3. 催化剂型佐剂：催化剂型佐剂是指能够改变反应物的化学性质，从而提高反应速率或改善产物品质的佐剂。
常见的催化剂型佐剂包括酸、碱、金属催化剂等。
4. 聚合物型佐剂：聚合物型佐剂是指通过改变反应物或产物的溶解性、表面性质等，从而提高反应速率或改善产物品质的佐剂。
常见的聚合物型佐剂包括聚乙烯醇、羧甲基纤维素等。
总而言之，佐剂的类型因具体应用领域、反应物种类、反应条件等多种因素而异。
在实际应用中，需要根据具体情况选择合适的佐剂，以达到最佳的反应效果。
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弗氏完全佐剂制备
弗氏完全佐剂制备摘要：1.弗氏完全佐剂的定义与分类2.弗氏完全佐剂的主要成分3.弗氏完全佐剂的制备方法4.弗氏完全佐剂的作用与应用5.弗氏完全佐剂的注意事项正文：一、弗氏完全佐剂的定义与分类弗氏完全佐剂是一种油包水的乳浊液，能够非常有效地诱导产生高滴度的抗体。
它含有结核分枝杆菌的细胞壁成分，可以加强对抗原的抗体反应。
根据成分的不同，弗氏佐剂分为完全弗氏佐剂和不完全弗氏佐剂。
完全弗氏佐剂含有杀死的结核分枝杆菌，而不完全弗氏佐剂则不含细菌。
二、弗氏完全佐剂的主要成分弗氏完全佐剂的主要成分包括不可代谢的油（石蜡油和甘露醇单油酸酯）以及杀死的结核分枝杆菌。
其中，油滴中免疫原的持续释放是佐剂活性的来源，能够刺激局部免疫反应。
三、弗氏完全佐剂的制备方法弗氏完全佐剂的制备过程较为简单。
首先，将石蜡油和甘露醇单油酸酯混合，形成油包水的乳浊液。
然后，将杀死的结核分枝杆菌加入乳浊液中，即可得到完全弗氏佐剂。
四、弗氏完全佐剂的作用与应用弗氏完全佐剂的作用主要是通过刺激局部免疫反应，增强抗原的免疫效果。
它被广泛应用于疫苗制备和免疫学研究中，尤其是结核病疫苗的制备。
五、弗氏完全佐剂的注意事项1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗和食品及药品行业。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴手套操作。
在使用过程中，应注意避免吸入或接触到眼睛和皮肤。
3.实验动物应按照相关规定进行饲养和操作，确保实验结果的可靠性。
总之，弗氏完全佐剂是一种具有良好免疫效果且制备简单的佐剂，广泛应用于疫苗制备和免疫学研究领域。
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2-2 副作用
皮下注射时，可在注射部位引起强烈的炎症和溃疡
2-3其他油性佐剂
佐剂-65 在体内可被代谢或分泌,用于人的流感疫苗,证明
安全有效.
白油Span佐剂
是用轻质矿物油(白油)作油相,用Span-80 或Span-85及Tween-80作为乳化剂制成的油乳佐剂,是当前 兽用生物品中最常用最有效的佐剂之一。
1-2 铝盐佐剂的种类
铝化合物沉淀疫苗
铝化合物吸附疫苗
1-3铝盐佐剂存在的缺点
1 主要刺激 Th2 相关抗体的产生，不能刺激 Th1 的细胞活性, 也不加强 CD8+细胞毒性 T 淋巴细胞（CTL）的活性,即只能增 强体液免疫，不能增强细胞免疫。 2 会诱导产生 IgE 抗体，增加发生超敏反应的危险
免疫佐剂
一 佐剂的发现及其概念
1926年，Glenny 等发现明矾沉淀白喉毒素能产生 一种微粒，极大地增强机体对抗原的特异性免疫应 答，从而拉开了佐剂使用的序幕。
与抗原同时或预先应用，能够增强机体针 对抗原的免疫应答能力，或改变免疫反 应类型的制剂
1 为什么要使用佐剂？
可溶性纯化蛋白质疫苗或蛋白质 亚单位疫苗的免疫激活作用通常 较弱，不足以刺激机体产生足够 的抗体，因此通常在疫苗制剂中 加入佐剂
位暴露于免疫细胞，将抗原有效地递呈给抗原提呈细胞，由于抗原递 呈细胞的内体小泡和胞质溶胶的双重作用，含 ISCOM 的疫苗可以通 过 MHC-Ⅰ和 MHC-Ⅱ两种途径将抗原递呈给免疫系统，同时激活 CD4+T细胞和CD8+T细胞
3 作用特点
ISCOM 可以显著提高 T 细胞的增殖、分化，并诱导多种亚
与单独应用抗原相比，抗原与佐 剂联合应用所需的抗原量较少， 机体产生的抗体量较多，并且还 可以减轻免疫耐受
二 佐剂的作用机理
1 改变抗原物理性状，延缓抗原降解和排除，延
长体内存留的时间，从而更有效的刺激免疫系统。
刺激单核巨噬细胞增强其对抗原的处理和递呈能 力。
2
3 刺激淋巴细胞增生和分化，从而增强和扩大免疫
3 铝化合物的佐剂作用在超过一定剂量以后逐渐下降，其原因可 能是铝化合物在一定程度上对巨噬细胞有毒害作用
4 以铝化合物为佐剂的疫苗不能采用低温冻干技术生产，也不能 冷冻保存，这两点限制了以铝化合物为佐剂的疫苗的保质期。
2 油性佐剂
弗氏佐剂( FA) 分为 弗氏完全佐剂(FCA) 弗氏不完全佐剂( FIA) 组成 弗氏不完全佐剂是由低引力和低粘度的矿物油及乳化剂组成 的一种贮藏性佐剂。 弗氏完全佐剂是在不完全佐剂的基础上加一定量的分枝杆菌 而成。
进入体内的佐剂可自行降解且易于从体内清除。
价格低廉。
四 佐剂的分类
颗粒性佐剂 如氢氧化铝佐剂
非颗粒性佐剂 如细胞因子 本身具有免疫原性 如如百日咳杆菌、抗酸杆菌（结核
分枝杆菌）以及革兰阴性杆菌等 本身不具有免疫原性 如氢氧化铝、磷酸钙、矿物油乳 剂、表面活性剂等 来源于植物的佐剂，如皂甙和多糖类提取物等 来源于病原微生物的佐剂单磷脂、霍乱毒素以及CpG 寡聚脱氧核苷酸等
5-2 CpG序列(CpG）
CpG序列 一类其序列大部分以非甲基化的胞嘧啶核苷酸 和鸟嘌呤核苷酸(CpG)为基元的寡聚体,由于这种特征性序 列可激活多种免疫效应细胞,故又被称作免疫刺激DNA序列
作用特点 可激活T细胞、B细胞、NK细胞等免疫活性细胞,
产生大量的多种细胞因子, 增强机体的特异性和非特异性 免疫效应。
五 常用佐剂
1 铝盐佐剂
铝盐佐剂是一类含Al离子的无机盐佐剂，主要有 氢氧化铝胶和明矾。氢氧化铝胶，又称为铝胶，由于 其生产成本低廉，使用方便，毒性极低。铝盐佐剂是 第一个被批准可用于人的佐剂。
1-1 作用原理
铝盐佐剂是将佐剂与抗原混合,形成凝胶状态,注入 动物体内后形成“贮存库”,这些不溶性颗粒能吸 附、分散抗原物质,增加抗原表面积,在组织中形成 一个富含巨噬细胞的肉芽肿,延缓吸收。肉芽肿中 的抗原缓慢地渗透到组织中,这样就延长了抗原的 刺激时间,使在正常情况下只能存留数日的抗原保 持达数周之久。
2-1 作用特点
对体液和细胞免疫系统具有很强的激活作用。
FCA 只用于初始免疫,在以后的加强免疫中只用 FIA。 佐剂与抗原的体积一般各占 50 %。 最终所形成的抗原佐 剂混合物是典型的“油包水”乳胶混合体。
FCA 能够刺激机体产生很强的体液免疫和细胞免疫应答。
铝盐佐剂和油包水乳剂是典型的短期贮存库,这种类型的抗原包裹于注射 部位,因此不会由于肝脏的清除作用而丢失。
3ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ微生物佐剂
短小棒状杆菌(CP)
由CP经加热或甲醛灭活制成,为非特异性免疫增强 剂,对机体毒性低,没有明显的副作用。 卡介苗(BCG) 最常用的微生物佐剂之一原是用来预防结核病的疫苗,在 预防儿童结核病方面功效显著。 胞壁酰二酞(MDP)及其衍生物 MDP的成分是N-乙酰胞壁酸-L-丙氨酸-D异谷氨酰胺,有很强的佐剂活性。被认为是最有发展前途的佐剂之一。 细菌脂多糖(LPS) LPS可起到多克隆B细胞有丝分裂原的作用,也可促进 巨噬细胞分泌单核因子。LPS由于具有毒性,所以不能直接成为人用疫苗 的佐剂 单磷酰脂质A(MLA) MLA是一种毒性较低的具有佐剂活性的脂多糖衍生 物。 霍乱毒素(CT) 霍乱毒素是由霍乱弧菌分泌的分子量为84KD的一种不耐 热肠毒素,增强弱免疫原的免疫原性。
4 表面活性剂类佐剂
4-1免疫刺激复合物（ISCOM）
1 组成
抗原物质与由皂树皮提取的一种糖苷Quil A及胆固醇按 1：1： 1 混合后自发形成的一种具有较高免疫活性的脂质小泡。每个小泡直 径40 nm，约含10～12个分子的蛋白质
2 作用方式 ISCOM 能够与抗原的疏水部分结合，从而将其亲水部
应答的效应。
4 改变抗体的产生类型以及产生迟发型变态反应。
三 理想佐剂的必备条件
安全，且无短期及长期的毒副作用。 佐剂的化学成分和生物学形状清楚，制备批间差异小且易于生产。 与单独使用抗原相比，佐剂与抗原联用能刺激机体产生较强的免疫反
应。
用较少的免疫剂量即可产生效力。 保证液体剂型疫苗在较低的浓度下即可刺激机体产生较强的免疫应答。
5 分子佐剂
5-1 细胞因子
化学组成
多属小分子多肽或糖蛋白，是由免疫细胞和某 些非免疫细胞经刺激而合成、分泌的一类生物活性物质。 对Th细胞的分化起重要作用,能增强自然杀伤细胞 细胞毒性T淋巴细胞的功能,还有诱导其它细胞因子的产生, 对机体的免疫应答具有广泛的上调作用。
特点
IL-2与外壳蛋白的共表达形式至少使疫苗效率升高
优点 CpG引起的免疫反应以Th1型为主,因此可以很好的
激发粘膜免疫反应虽然CpG-DNA具有安全、有效等优点。
CpG序列作为免疫佐剂有如下特点
与常用的氢氧化铝佐剂具有协同作用
一些不能与铝混合的减毒活疫苗或多价疫苗则可单独
使用CpG–DNA增强其免疫原性
应用范围广
6 化学物质
左旋咪唑
主要作用于T淋巴细胞。此外它还有恢复 周围效应细胞的功能,既是免疫扶正剂又是免疫调节剂
六 佐剂研究的新趋向
抗原递呈细胞佐剂
通过刺激抗原递呈细胞影响抗原的识别、 加工及处理过程,从而增强免疫原性的佐剂。如树突状细胞、 脂质体等。 T细胞佐剂 能够选择性增强T细胞介导的免疫应答的物质。 通过改变抗原的物理性状、表位外显、空间限构等作用,加 强抗原识别、吞噬和递呈, 从而激发机体产生保护作用的细 胞免疫应答。 黏膜佐剂 一类供黏膜疫苗使用的佐剂。内毒素和霍乱毒素 是目前最为有效的黏膜佐剂。 结合物型佐剂（分子内佐剂）人工合成的多肽绝大多数为小 分子,免疫原性较差,与较大分子结合可提高其免疫原性。
有那些含有很多疏水基团的抗原或免疫原才能与 ISCOM 形成复合体，含亲水基团多的抗原不适合与 ISCOM 佐剂 混合制备疫苗。
4-2 脂质体
1 结构 ：类似生物膜，一般由磷脂和胆固醇形成的双分
子层包被目标物形成的超微球状制剂。 2 特点： 脂质体注入体内后能自然聚集到某些组织； 脂质体可以通过接触、吸附、吞噬、融合和脂质交换等方 式与细胞相互作用； 脂质体可以增加所携带药物对淋巴系统的指向性和靶组织 的滞留性，延缓药物释放，提高疗效； 无毒并且还可以降低药物对正常细胞的毒性
型 IgG 及特异性抗体的生，引起动物对多种抗原产生高滴 度的抗体应答。
具有佐剂和抗原递呈的双重功能。应用于多种细菌、病毒
和寄生虫病的疫苗，具有产生“ 全面” 免疫应答的效力， 可长期增强特异性抗体应答。
ISCOM能有效地通过粘膜给药，从而可以用于抗呼吸道感
染。
4 存在的不足
它并不是一种可以和任何抗原都能形成复合体的佐剂，只
100倍
5-1-1 细胞因子种类
IL-2
一种重要的T细胞生长因子
IL-12
由单核细胞和B细胞产生,具有多种生物活性, 是 迄今所知诱导Th1型免疫应答的最主要的细胞因子。 IL-18 是最近发现的鼠和人的细胞因子,可诱导Th1细胞 和NK细胞高效分泌IFN-γ ,促进T细胞增生,与IL-12产生协 同作用等。 IL-15 主要由单核—巨噬细胞产生,在哺乳动物一个主要 的功能为调节NK细胞的发育与增殖,通过NK细胞产生IL-15 共刺激细胞因子从而调节巨噬细胞和NK细胞间的相互作用。 IFN-γ 是一种有效的免疫佐剂,它能协同IL-2诱导LAK活 性、增强抗原呈递