苹果转基因研究-文档资料
苹果转基因四倍体株系问世
苹果转基因四倍体株系问世
佚名
【期刊名称】《作物育种信息》
【年(卷),期】2005(000)009
【摘要】山东省泰安市果树育苗专业户韩勇的苗圃里，生长着两畦世界上仅有的
苹果苗——载有3种抗病基因的苹果植株。
初冬的阳光下，幼苗的绿装尚未褪掉，一畦转基因植株与普通苹果苗没有区别。
而另一畦四倍体转基因植株叶片厚实、枝条粗壮。
专家鉴定认为，山东果树研究所完成的这项研究在苹果抗病遗传转化体系上居国际领先水平。
【总页数】2页(P7-8)
【正文语种】中文
【中图分类】S511
【相关文献】
1.抗玉米丝黑穗病转基因株系的分子检测及抗病株系选育 [J], 杜建中;孙毅;郝曜山;刘俊玲
2.苹果转基因四倍体株系问世 [J],
3.采取4x-2x杂交从二倍体中把Bacillus thuringiensis cry 3Aa转基因导入四倍
体马铃薯：倍数增加对转基因表达的影响和TPS杂种生产的意义 [J], A．A．T．Johnson;谢国禄
4.四倍体野菊与露地菊'紫秋裳'种间杂交\rF1代3个株系倍性鉴定 [J], 何敬峰;李
春峰;丁美娟;刘筱玮;张睿
5.抗火疫病的转基因苹果问世 [J],
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园艺专业论文苹果叶片转基因体系探索
目录摘要Abstract引言1 材料和方法1.1 材料1.1.1主要的生化试剂1.1.2供试农杆菌菌株和质粒1.1.3转化实验所用植物细胞培养基配方1.2 根癌农杆菌介导的苹果遗传转化1.2. 1 苹果外植体材料的准备1.2. 2 农杆菌侵染液的制备1.2. 3 侵染1.2. 4 转化子的筛选再生2 结果和分析2．1 M7无菌苗的扩繁2．2 M7砧木的叶片再生2.3 农杆菌划线接种与单克隆繁殖2.4 叶片的转化再生3讨论3.1 M7再生的影响因素3.2共培养条件对转基因的影响致谢参考文献苹果叶片转基因体系探索园艺专业胡翔宇指导老师段艳欣摘要：近年来，苹果遗传转化研究取得了较大的进展，已有多种标记基因和目的基因成功转入苹果中并且得到稳定表达和遗传。
农杆菌介导法是苹果上应用的主要转化方法，叶片再生不定芽途径是被广泛应用的受体系统。
影响农杆菌介导成功与否的因素很多，文章从转化方法、叶片再生能力、菌株类型以及农杆菌侵染条件等方面综述了目前有关研究成果，指出目前依然存在转化效率不高、外源基因表达强度不够、对转化植株的选择不够重视等诸多问题。
关键词：苹果；遗传转化；农杆菌介导；叶片再生Apples leaves gm systemStudent majoring in Horticulture Hu XiangyuTutor Duan YanxinAbstract:in recent years, apple genetic research has made great progress, various marker genes and gene into apple and successful expression and genetic stability. Agrobacterium-mediated technique was applied into the main apple, leaf regeneration in vitro shoot is widely applied receptor system. Affect the success of agrobacterium mediated many factors, this article from the transformation method, leaf regeneration, strains of bacteria infection type and reviewed the current conditions of relevant research results are pointed out, still exists transformation efficiency is not high, the exogenous gene expression of strength, selection of plant many problems, such as insufficient attention.Keywords: apple,Genetic transformation, Agrobacterium mediated, Leaf regeneration 引言随着转基因技术的发展，用于苹果遗传转化研究的受体基因型越来越多，除了绿袖，主要还有红元帅（RedDelicious）[4]、新乔纳金[5]、嘎拉（Gala）、金（GoldenDelicious）、Elstar [6]、Braeburn[7]、Merlijin [8]、乔纳金（Jonagold）、富士（Fuji）王林（Orion）[9]、金矮生（Jonagored）[10]、皇家嘎拉（Royal Gala）、辽伏（Liaofu）[11]、元帅（Delicious）、粉红佳人（Pinklady）、M7和八楞海棠[12]等。
一个苹果山梨醇转运子基因家族新成员的克隆及其表达分析
一个苹果山梨醇转运子基因家族新成员的克隆及其表达分析李换桃;梁东;马锋旺【摘要】[目的]克隆一个苹果山梨醇转运子基因(命名为ST)的全长cDNA,为进一步研究该基因的功能奠定基础.[方法]利用RT-PCR法从苹果叶片中克隆ST基因,应用相关软件对其进行生物信息学分析;并采用实时荧光定量RT-PCR(Real-time RT-PCR)法,分析ST在苹果不同组织中以及在果实发育过程中的表达情况.[结果]获得了1个包含全长开放阅读框的ST基因,该基因cDNA全长1 767 bp,包含长达1 617 bp的完整开放阅读框,该基因所编码的蛋白与GenBank中已登录的其他植物山梨醇转运子的同源性均在72%以上,其中与苹果山梨醇转运子MdSOT5的同源性较高,为81%.Real-time RT-PCR结果表明,在不同组织中,ST在韧皮部的相对表达量最高,其次在衰老叶、成熟叶、叶柄中较高,在库器官花、幼叶、果实,果柄、根中表达较低;在果实不同发育时期,ST基因表达量在果实发育早期很低.花后30 d快速升高并达到峰值,在发育中期保持一个较高的表达水平,在果实发育后期相对表达量又降低,之后略呈递增趋势.[结论]从苹果叶片中克隆了ST基因,生物信息学分析可知ST具有糖转运功能;ST在韧皮部的表达量最高,说明其负责长距离运输;ST在果实发育过程中的表达量与山梨醇的含量变化相一致.【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(038)009【总页数】8页(P73-80)【关键词】苹果;山梨醇转运子;基因克隆;表达分析【作者】李换桃;梁东;马锋旺【作者单位】西北农林科技大学,园艺学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,园艺学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,园艺学院,陕西,杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】S661.1;Q78山梨醇是大多数蔷薇科植物主要的光合产物、同化运输物质和贮藏物质，不仅参与各种生理代谢，而且与果实的风味有很大关系，起着其他植物中蔗糖的作用。
苹果分子育种研究进展
苹果分子育种研究进展作者：李红光刘俊灵勾真真韩立新瞿振芳郝贝贝来源：《果树资源学报》2021年第01期摘要：苹果是一种具有重要经济意义的水果，世界各地的育种家都在不断地培育新品种。
但苹果漫长的童期很大程度限制了苹果育种的进程。
近年来，各种分子生物技术的发展被应用在苹果育种上，有力地加快了苹果育种进程。
该研究结合以往研究进展，阐述了转基因技术在苹果育种中的作用，以期为现代苹果育种提供理论参考。
关键词：苹果;转基因技术;DNA标记;育种文章编号：2096-8108（2021）01-0070-03中图分类号：S661.1文献标识码：AAbstract：Apple is a fruit of great economic significance， breeders around the world are constantly cultivating new varieties. However，apple’s juvenile phase greatly limited the process of apple breeding. In recent years， the development of various molecular biology techniques has been applied to apple breeding， which has greatly accelerated the process of apple breeding. Based on the previous research progress，the role of transgenic technology in apple breeding was expounded， in order to provide theoretical reference for modern apple breeding.Keywords：apple;transgenic technology;DNA Marker;breeding水果富含纖维、抗氧化剂和植物化学物质，有利于人类健康。
果树转基因成功的例子
果树转基因成功的例子果树转基因是指通过人工手段将外源基因导入果树的基因组中，以改变其特性或增强其抗性。
转基因技术在果树育种中具有重要的应用价值，可以提高果树的产量、品质和抗病能力。
以下是一些成功的果树转基因案例：1. 转基因苹果：通过转基因技术，科学家成功地改变了苹果的抗病性。
例如，加拿大农业与食品研究中心的科学家利用基因工程技术，将一种产生抗病毒蛋白的基因导入苹果树中，使其具有抗病毒的能力。
这种转基因苹果可以抵抗多种病毒感染，提高果树的生长和产量。
2. 转基因柑橘：柑橘是一种重要的水果作物，但常常受到多种病毒的侵袭。
科学家利用转基因技术，将一种产生抗病毒蛋白的基因导入柑橘树中，使其具有抗病毒的能力。
这种转基因柑橘可以减少病毒感染，提高果树的产量和品质。
3. 转基因葡萄：葡萄是一种重要的经济作物，但常常受到真菌病害的侵袭。
科学家利用转基因技术，将一种产生抗真菌蛋白的基因导入葡萄树中，使其具有抗真菌的能力。
这种转基因葡萄可以减少真菌感染，提高果实的品质和市场竞争力。
4. 转基因樱桃：樱桃是一种受欢迎的水果，但常常受到昆虫害虫的侵袭。
科学家利用转基因技术，将一种产生杀虫蛋白的基因导入樱高果实的产量和品质。
5. 转基因草莓：草莓是一种常见的水果，但常常受到病毒和真菌的侵袭。
科学家利用转基因技术，将一种产生抗病毒和抗真菌蛋白的基因导入草莓树中，使其具有抗病毒和抗真菌的能力。
这种转基因草莓可以减少病毒和真菌感染，提高果实的产量和品质。
6. 转基因橙子：橙子是一种重要的柑橘类水果，但常常受到黄龙病的侵袭。
科学家利用转基因技术，将一种产生抗黄龙病蛋白的基因导入橙子树中，使其具有抗病的能力。
这种转基因橙子可以减少黄龙病感染，提高果实的产量和品质。
7. 转基因香蕉：香蕉是一种重要的热带水果，但常常受到真菌病害的侵袭。
科学家利用转基因技术，将一种产生抗真菌蛋白的基因导入香蕉树中，使其具有抗真菌的能力。
这种转基因香蕉可以减少真菌感染，提高果实的产量和品质。
转基因技术在苹果育种中应用
转基因技术在苹果育种中应用简介苹果是世界上广泛种植的水果之一，其丰富的营养价值和多样的口感使其备受欢迎。
然而，苹果种植过程中常常会受到病虫害的困扰，这给苹果产量和品质带来了挑战。
为了解决这些问题，转基因技术被引入到苹果育种中。
本文将探讨转基因技术在苹果育种中的应用。
转基因苹果的病虫害抗性苹果常见的病虫害包括苹果腐病、苹果蚜虫和苹果蛀虫等。
转基因技术可以通过引入特定的基因来增强苹果对这些病虫害的抵抗能力。
苹果腐病抗性苹果腐病是由真菌引起的，会导致苹果腐烂和变质。
转基因技术可以通过引入抗真菌基因，如产生抗真菌蛋白的基因，提高苹果对腐病的抵抗能力。
苹果蚜虫抗性苹果蚜虫是苹果园常见的害虫，会导致苹果叶片变黄和凋落。
转基因技术可以通过引入产生杀虫蛋白的基因，如Bt基因，使转基因苹果对蚜虫具有抗性。
苹果蛀虫抗性苹果蛀虫是苹果树幼果常被侵害的害虫，会导致果实受损。
转基因技术可以通过引入产生抗虫蛋白的基因，如甜菜碱基因，提高苹果对蛀虫的抵抗能力。
转基因苹果的营养改良除了提高抗病虫能力外，转基因技术还可以用于改良苹果的营养成分，使其更加健康和营养丰富。
增加维生素含量通过转基因技术，科学家可以向苹果中引入产生维生素的基因，如维生素C、维生素A等。
这可以增加苹果的营养价值并提供更多的维生素给消费者。
提高抗氧化能力苹果富含抗氧化物质，可以帮助预防慢性疾病。
通过转基因技术，可以向苹果中引入抗氧化基因，如花青素合成基因，提高苹果的抗氧化能力。
降低有害物质含量苹果中可能存在一些有害物质，如残留农药等。
通过转基因技术，可以向苹果中引入代谢有害物质的基因，降低苹果中有害物质的含量，提高其安全性和健康价值。
转基因苹果的品质改良转基因技术还可以用于改良苹果的口感、外观和保鲜性，提高其市场竞争力。
改善口感苹果的口感对消费者来说非常重要。
通过转基因技术，可以引入调节果胶合成和分解的基因，如果胶酶基因和果胶酯酶基因，以改善苹果的口感和口感持久性。
苹果转CpTI基因株系花粉特性研究
园艺学报 Acta Horticulturae Sinica 2015，42 (1)：1–9.doi：10.16420/j.issn.0513-353x.2014-0804；http：// 1苹果转CpTI基因株系花粉特性研究师校欣1，周瑞金1,2，王倩倩1，常腾飞1，冯莎莎1,3，杜国强1,*（1河北农业大学园艺学院，河北保定 071001；2河南科技学院园艺园林学院，河南新乡 453003；3河北北方学院园艺系，河北张家口 075000）摘 要：转基因植物的花粉特性研究是进行遗传改良和转基因生态风险评价的一项基础工作。
对7 ~ 8年生转CpTI基因‘嘎拉’苹果花粉特性进行了研究，结果表明：转基因苹果花粉在大小、形态和表面纹饰等方面与对照花粉没有明显差别；转基因苹果花粉中畸形花粉多；供试的13个株系中12个株系的花药中花粉量显著低于对照，6个株系的花粉离体萌发率显著降低；测定了3个转基因株系的花粉生活力，其中2个株系显著低于对照。
转基因‘嘎拉’苹果花粉人工授粉至普通‘富士’苹果柱头上能正常萌发，但中后期花粉管伸长较慢，花粉管到达胚珠的时间比对照延后约8 h。
花器不同发育阶段内源激素测定表明，转基因株系各时期GA3含量均低于对照，而ABA含量在花蕾期低于对照，在气球期和平展期高于对照。
对花药和花粉发育过程显微观察发现，转基因株系花药的结构及其发育正常，而花粉囊壁绒毡层的延迟分解影响了花粉发育可能是其花粉数量少、育性低的原因。
关键词：苹果；外源基因；花粉；育性；绒毡层中图分类号：S 661.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2015）01-0001-09 Characteristics of Pollen from Transgenic Lines of Apple Carrying Exogenous CpTI GeneSHI Xiao-xin1，ZHOU Rui-jin1,2，WANG Qian-qian1，CHANG Teng-fei1，FENG Sha-sha1,3，and DU Guo-qiang1,*（1College of Horticulture，Agricultural University of Hebei，Baoding，Hebei 071001，China；2College of Landscape Architecture，Henan Institute of Science and Technology，Xinxiang，Henan 453003，China；3Department of Horticulture，Hebei North University，Zhangjiakou，Hebei 075000，China）Abstract：It is one of the fundamental works for gene transformation and its ecosystem hazard evaluation to study the pollen characteristics of transgenic plants. In this research，some characteristics of pollen from seven- or eight-year-old transgenic plants of apple that carried exogenous CpTI gene were analyzed. The results showed that no signi ficant difference was found in terms of size，morphology，and exine ornamentation of the pollen in the transgenic plants compared to those in the non-transgenic control. It was found that transgenic plants had more abnormal pollen grains. Of the thirteen transgenic lines tested，12 lines had significant lower amount of pollen，and six exhibited significantly lower germination rate when cultured in vitro. The pollen viability of three transgenic lines was determined，of which two was收稿日期：2014–09–16；修回日期：2014–12–08基金项目：河北省自然科学基金项目（C2012204091，C2014204115）* 通信作者Author for correspondence（E-mail：gdu@）Shi Xiao-xin，Zhou Rui-jin，Wang Qian-qian，Chang Teng-fei，Feng Sha-sha，Du Guo-qiang.Characteristics of pollen from transgenic lines of apple carrying exogenous CpTI gene.2 Acta Horticulturae Sinica，2015，42 (1)：1–9.significantly lower than that of the control. The transgenic Gala apple pollen grains germinated normally via controlled pollination on Fuji apple stigma. But the pollen tubes extended relatively slow during the middle and late developing stages，and another eight hours was needed to reach the ovules compared to the control. The concentration of gibberellic acid of the flower from transgenic Gala apple was lower than that of the non-transgenic control during all development stages tested. The concentration of abscisic acid in transgenic ones was lower during the pink stage and higher during the ball stage and full open stage. Microscopic observation of the anther structure showed no difference. The tapetum of the pollen sac wall in transgenic plants decomposed late，and affected the pollen grain development，which could be one of the reasons leading to the less of the pollen grain and the poor viability in transgenic plants.Key words：apple；exogenous gene；pollen；viability；tapetum基因漂流是转基因植物可能引起的主要生态风险之一（樊龙江等，2001）。
苹果中乙烯响应转录因子基因的克隆及序列分析
苹果中乙烯响应转录因子基因的克隆及序列分析蔡玉迎1，宫 钰1，王 娟2，于立帅2，陈广艳2，成妮妮1（1.临沂大学 生命科学学院，山东 临沂 276005；2.临沂大学 农林学院，山东 临沂 276005）摘 要：乙烯响应因子(AP2/ERF)转录因子家族是植物中广泛存在的一类转录因子，它们对植物的生长发育、次生代谢过程和植物的抗胁迫能力具有重要的调控作用。
通过对苹果中响应乙烯的转录因子(ERF)家族进行分析，选择具有代表性的转录因子基因进行设计引物。
以苹果果皮为试验材料，从中分离出响应乙烯的转录因子1、2、3、5的基因，并对其进行序列比对分析，发现这4个基因序列差别较大，但具有很保守的共同序列，初步确定其功能上有一定的相关性。
关键词：AP2/ERF；苹果；转录因子；乙烯疾病、高温、干旱、盐碱等环境胁迫对植物的生长发育、器官形成等过程具有不利的影响。
研究发现，当植物在生长过程中被环境胁迫刺激后，就会激活植物中含有的气体激素信号途径，像植物激素脱落酸、赤霉素、细胞分裂素、乙烯等，它们在植物体内的含量虽然不高，但却在植物的生长发育和环境适应中起着至关重要的作用[1,2]。
近年来，随着测序技术的发展和研究的深入，许多物种的基因组已经完成测序，例如拟南芥等模式生物，在基因组序列测定中发现了大量的转录因子编码基因，如AP2/ERF是植物中特有的转录因子，属于超家族因子，参与花[3]、果实[4]和种子发育[5]等植物生长发育的多种生物学过程，在植物抵抗干旱[2]、高盐[6]、低温[1]等非生物胁迫和真菌、细菌、病原体等生物胁迫方面有重要作用[7,8]，是目前研究的热点之一。
它们对植物的生长发育、次生代谢过程和植物的抗胁迫能力具有重要的调控作用。
乙烯作为一种激素能促进植物的成熟，乙烯响应因子在生长发育、器官形成、抗病虫害以及对胁迫环境的响应等方面具有重要作用[9,10]。
近年来，乙烯的研究已经延伸到下游转录因子的调控机制，转录因子在植物的次生代谢过程中参与多步反应，因而也具有重要的调控作用。
苹果MYB12基因的克隆及生物信息学分析
ＬＩ Ｕ Ｂｉ ｎｇ ｙａ ｎ ， ＬＩ Ｕ Ｂｉ ｎ ｇｙ ａ ｎ
（ １ ． Ｙ ａ ｎ ｂ ｉ ａ ｎ Ｋｏ ｒ ｅ ａ ｎ Ａｕ ｔ ｏ ｎ ｏ ｍｏ ｕ ｓ Ｐｒ ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ｕ ｒ ｅ Ａｃ ａ ｄ ｅ ｍｙ ０ ｌ ，Ａｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ，Ｌｏ ｎ ｇ ｊ ｉ ｎ ｇ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ １ ３ ３ ４ ０ ０，Ｃｈ ｉ ｎ ａ；
第 ３ ９卷
第 ２期
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Ｖｏ１ ．３ ９ Ｎｏ ．２
２ ０ １ ７年 ６月
Ａｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｙａ ｎ ｂ ｉ ａ ｎ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ
Ｊ ｕ ｎ ． ２ ０ １ ７
ｄ ｅ ｄ ｂｙ Ｍ ｄＭ ＹＢ １ ２ ｇｅ ｎｅ ａ ｎｄ １ ２ ７ Ａｒ ａｂ ｉ ｄｏ ｐｓ ｉ ｓ Ｍ Ｙ Ｂ ｇｅ ｎｅ ｆ ａ ｍｉ ｌ ｙ ｒ ｅ ｖ ｅ ａ ｌ ｅ ｄ ｔ ｈａ ｔ Ｍ ｄＭ ＹＢ １ ２ ｇ ｅ ｎｅ ａ ｎ ｄ Ａｒ ａ ｂ ｉ —
转基因技术在苹果育种中的应用
转基因技术在苹果育种中的应用引言苹果是全球种植面积和产量均位居前列的水果之一，也是人们生活中常见的水果之一。
随着人们对食品安全和营养价值的重视，苹果育种也逐渐引起了人们的关注。
转基因技术作为一种重要的遗传改良手段，被越来越多的科学家应用在苹果育种中。
本文将介绍转基因技术在苹果育种中的应用现状和发展趋势。
转基因技术概述转基因技术是人类在基因工程领域中的一种新技术，它是通过改变或添加生物体中的基因来获取新的性状、提高生产效率或改善生物体的品质。
转基因技术的主要过程包括：基因克隆、基因载体构建、基因注入、基因表达、筛选和鉴定等步骤。
转基因技术在苹果育种中的应用苹果营养成分改良苹果作为人们生活中常见的水果之一，其中富含丰富的营养成分。
转基因技术可用于改良苹果营养成分，比如使得苹果中维生素C的含量更高，同时减少苹果中有害的化学成分含量。
这将有助于提高苹果的营养价值、食品安全度和公共健康度，并促进苹果的市场竞争力。
苹果贮藏期延长苹果在采摘后的几天内，贮藏期较短，而且难以保持质量和营养成分。
转基因技术可以抑制水果老化和腐烂，延长苹果的贮藏期，改善苹果的品质和口感。
这将有助于提高苹果的竞争力和销售价值。
抗病虫害育种苹果是一种容易受到病虫害侵袭的作物，这会给苹果种植者带来很大的经济损失。
转基因技术可以让苹果变得更加抗病虫害，减少农药的使用量，提高生产效率和经济效益。
增强苹果抗逆性苹果在生长过程中遭遇极端天气和环境条件的压力，这会对苹果的生长和发展产生负面影响。
转基因技术可以增强苹果的抗逆性，让苹果能够更好地适应不同的环境条件，保持生长稳定和营养丰富。
转基因技术在苹果育种中的发展趋势目前，转基因技术在苹果育种中的应用仍处于初级阶段。
随着社会科技水平的不断提高和人们对苹果品质、营养价值和食品安全的不断追求，转基因技术在苹果育种中将继续得到广泛应用。
未来，转基因技术在苹果育种中的发展趋势将朝着以下方向发展：更高效、更安全的基因点编辑技术基因点编辑技术是一种新兴的基因工程技术，它可以精准地编辑基因组中的某些基因，从而快速改善作物的性状和品质。
果树转基因应用研究
粒 的野生型发根农杆菌 （ ｇ ｏａｔ ｉ ｒｉ ｇ ｎｓ 的毒 Ａ ｒｂｃ ｒ ｍ ｚ ｅｅ） ｅｕ ｈ ｏ
性 菌 株 Ｒ１ ０ 、 ５ ３ ０ ０ １８ ４和 Ａ４感 染 实 美 橙 （ ｉ ｕ ｉｅｓｓ Ｃ ｔ ｓｓ ｎｉ ｒ ｎ
Ｌ ｓｅ Ｋ） ．Ｏ ｂＣ 子叶外植体得 到 了发根能力增 强 的转化植 株 ， 中李名扬试验证 明 Ａ 其 ４的感染能力最强 ， 且对外植 体预培养可提高转化率 。Ｚ ａｇｚｅ ［等将 ３ ｈｎ ｈｎ ４ 种改造 的
株， 转化植株具有明显 的矮化效果 ， 并表 明质粒 Ｉ 的转 Ｉ Ｉ
化效果最佳 ， 但转化预培养外植体效率差于直接感染 。
１２ 缩短 果 树 童期 ．
因直接导人 到受体的细胞 中去 ， 以原生质体 为受体 的 如 Ｐ Ｇ法 ， Ｅ 电激法和不 依赖原生 质体 的基因枪转 移法 、 显 微注射法 、 激光微束 穿刺法 、 农杆微 弹 法等。另一类 是
浓度及共培养 时间等 因素对苹果遗传转化 的影响 ， 通过
分析 ＧＵ Ｓ瞬时表 达率 ， 并对 侵染后 的抗 性芽进 行继代
种基因转化 方法 中， 农杆 菌基 因转 化法是研 究最 清楚 、
使 用 最 多 的 一 种 。现 针 对 转 基 因 技 术 在 果 树 上 的 具 ］
筛选 ， 获得 了转 入 Ｌ Ｙ基 因的 嘎拉 苹果 早 熟新 种 质。 Ｆ
技 术 的应 用现 状 ， 响 果树 基 因转 化 效 率 的 因素 ， 化 植 株 的 筛选 及 转 基 因安 全 问题 等 方 面 对果 影 转
树 转 基 因应 用的研 究进中 图分 类 号 ： ６ Ｓ６ ３６ 文 献 标识 码 ： 文章 编号 ：０ １ ００ （０ ０１ 一ＯＯ 一Ｏ Ｓ６ ； ０． Ａ １０ － ０ ９２ １ ）２ ２６ ４
根癌农杆菌介导苹果遗传转化研究进展
要 因素之一 。 １ １ ２ 外 植 体 生 理 状 态 ．．
个 共 同 问题 —— 基 因转 化 频 率 极 低 。这 主 要 是 由于 缺 乏 对 影 响 离 体 再 生 频 率 和基 因 转 化 频 率 内外 因子
高 效 离 体 再 生 技 术 是 苹 果遗 传 转 化 研 究 中 的重 点 内容 ， 传 转 化 的 成 功 首 先 依 赖 于 良好 的 高 效 离 遗 体 再 生 系统 的 建 立 ［ 。目前 ， 用 苹 果 茎 段 、 片 、 ２ ］ 利 叶 叶 柄 、 段 、 叶 等 外 植 体 均 离 体 培 养 获 得 了 再 生 植 根 子 株［ ］ 在根癌农 杆菌介导的遗传转化体 系 中， ３ 。 主要 是 用 试 管 苗 幼 嫩 叶片 作 为 基 因转 化 的 受 体 材 料 。另 外 ， 有 用 白化 茎 段 作 为 受 体 材 料 获 得 转 基 因 植 株 也 的 报 道 ［ 。 苹 果 试 管 苗 幼 嫩 叶 片 有 多 种 离 体 再 生 途 ５ ］
１ １ 内转 化研 究 的发 展 极 为迅 速 。 与 其 他 植 物 遗 传 转 化 方 法 相 比 ， 癌 农 杆 菌 介导 法 具 有 根
转 化 频 率 高 、 作 简 单 、 本 低 、 生基 因沉 默 率 低 、 操 成 发
导人 ＤＮＡ 片段 较 大 等 优 点 ［ 。而 且 ， 果 试 管 苗 幼 ２ ］ 苹
嫩 叶 片 或 茎 段 取 材 容 易 ， 于 离 体 再 生 ， 将再 生 不 易 可
定 芽转化为单细胞 起源纯合体等［。 ３ 因此 ， 用 根 癌 ］ 利
农 杆菌介 导 法进行遗 传转 化 ， 已经 成 为 苹 果 最 为 重 要 的 一 种 遗 传 转 化 方 法 。 目前 有 关 苹果 品 种及 其 砧 木 的遗 传 转 化 研 究 报 道 已有 很 多 ， 是 他 们 面 临 一 但
转基因苹果切开三周不变色
转基因苹果切开三周不变色作者：来源：《发明与创新·大科技》2017年第11期切开的苹果如果在空气中放置一段时间，将会出现“生锈”即褐变的现象。
今年上市的一种叫“北极苹果”的转基因苹果将解决这一问题。
“北极苹果是2017年2月在美国中西部少数几个州销售的，10月开始在加州销售，可能是切成片装袋销售，预计2017年底会在美国其他区域开始销售。
”美国北卡罗来纳大学医学院药理系博士后任金琪介绍。
“基因沉默”让苹果切开三周不变色“苹果细胞的叶泡中含有一些不寻常的有机物——多酚类，细胞器叶绿体和线粒体中则含有多酚氧化酶（PPO）。
正常情况下两者分处不同场所，不会相遇。
”中科院遗传与发育研究所生物学研究中心高级工程师姜韬介绍，当苹果被切开或细胞受损，多酚氧化酶与多酚类就会相遇，这时前者就利用空气中的氧气，把多酚类氧化生成醌类物质，然后经过一系列反应，颜色变得越来越重，由浅褐变为棕色。
基因苹果的生产商、加拿大Okanagan Specialty Fruits（下称“Okanagan”）的研究人员通过一种叫“基因沉默”的技术，让多酚氧化酶处于关闭状态，以极低量缓慢释放出来，因此也就延长了保鲜时间。
“基因沉默”技术是科学家探索的一种分子生物学技术，并成功在调整基因表达的相关基础研究中得到广泛应用，应用到社会消费的食品方面则为首次。
不贴转基因商标由于“基因沉默”技术没有涉及苹果体外的基因重组，根据美国在 2016 年颁布的法案规定，这类转基因食品可以不贴上转基因标志，但是需要贴上二维码，消费者扫描后就能查阅关于这种苹果的信息。
Okanagan 的创立者尼尔·卡特在许多年前就有了研究这种转基因苹果的想法。
他在 1997 年开始种植这种苹果，2001 年他的研究团队研发出了可以阻止多酚氧化酶释放的技术，2004 年他亲自尝了第一口这种不会褐化的苹果。
根据《麻省理工科技评论》提供的一份 2011 年的报告估算，一种转基因食品从研发到上市，整个过程大约要花费 1.3 亿美元，而卡特说他们的苹果成本只有500万到1000万美元，因为它们的整个研发都很节省，比如没有购买转基因食品工厂需要的昂贵设备，而是把相关技术外包出去。
转基因技术在苹果育种中的应用
转基因技术在苹果育种中的应用1培育抗病虫害品种目前，在苹果上已经获得了抗虫转基因植株，所使用的抗虫基因主要有Bt(Bacillusthypsininhibitor)和CpTI基因。
Bt基因是从苏云金杆菌分别出来的杀虫结晶蛋白(ICP)基因。
国外早在1991年就胜利应用ICP基因转化苹果，1992美国批准将携带由ICP基因的转基因苹果植株进行田间试验；国内程家胜等也应用Bt基因胜利获得了转基因苹果植株，并进行了抗虫试验。
CpTI对很多害虫都具有抗性，广谱性是其*主要的优点。
国外利用CpTI基因于1992年胜利转化了绿袖苹果；国内达克东等也应用CpTI基因转化了皇家嘎拉，Southem杂交证明目的基因存在于苹果基因组中。
苹果抗病转基因讨论集中在抗火疫病(Erwinaamylovoea)方面，主要应用有attacinE、cecropinSB-37、cecropmShiva-1等基因。
Norelli 等用编码裂解细菌细胞的4种基因(attacinE、SB-37、Shiva-1和henwhitelysozyme)用农杆菌介导法转化砧木M7和皇家嘎拉获得了250个转化体系，温室和田间鉴定表明携带有attacinE的转化植株对疫病有极大抗性；用attacinE基因转化M7，获得的转化植株对火疫病抗性大大提高，有的甚至能降低病害50％。
还有报道将Shiva-1、attacinE导入皇家嘎拉，但温室检测转基因植株对火疫病抗性不稳定。
2选育矮化品种目前已从病原农杆菌中鉴定和克隆出一些与植物激素合成和代谢有关的基因，其中主要由ipt基因和rolA、rolB、rolC、rolD基因等，这几种基因在植物体内表达可表现出植株的矮化性状。
Trifonova等利用农杆菌介导法将ipt基因导入澳洲青苹，获得的转基因植株除了有两个株系表现"灌中状'外，其余形态均表现正常。
Holefors等用rolA基因转化砧木M26，获得的转基因植株树体矮小，其中3个株系节间明显缩短，3个株系的叶、根干重均降低。
转基因产品研究报告模板
转基因产品研究报告模板转基因产品研究报告模板一、研究目的：本次研究旨在探讨转基因产品对人类健康和环境的潜在风险，以及其对农业生产的影响。
二、研究方法：1. 收集转基因产品的相关文献资料，包括各项实验研究和安全评估报告。
2. 分析转基因产品的构建原理和转入的基因，以及其可能引发的风险。
3. 研究转基因产品在农业生产中的应用情况，比较其与传统农业产品的差异。
4. 探讨转基因产品的安全性和潜在危害，并进行评估。
三、研究结果：1. 转基因产品在农业生产中具有改善作物抗病虫害、提高产量和延长保鲜期的潜力。
2. 一些转基因产品可能引发新的过敏反应和毒性反应，但目前尚无明确证据表明其对人类健康有直接危害。
3. 转基因产品可能对生态环境产生潜在影响，例如对非目标生物种群和生态系统的影响。
4. 转基因产品的安全性评估和监管体系需要不断完善，加强对转基因产品的风险管理和监测。
四、研究结论：1. 转基因产品在农业生产中具有潜在的经济和环境效益，但其潜在风险需要认真评估和监管。
2. 目前对转基因产品的研究还存在一定的不确定性，需要进一步的科学研究和长期监测。
3. 公众对转基因产品的安全性和风险担忧需要得到重视，并加强科学解释和公众参与。
五、研究建议：1. 加强转基因产品的安全性评估和监管，确保其不会对人类健康和环境产生直接危害。
2. 强化对转基因产品的风险沟通和科学解释，提高公众对转基因产品的科学认知和理解。
3. 鼓励多学科合作，加强对转基因产品的长期监测和评估研究，及时掌握其影响和风险。
4. 推动转基因产品的标志和追溯体系建设，加强对转基因产品的管理和追踪。
六、研究局限：1. 本研究仅从科学角度出发，对转基因产品的风险进行了初步评估，结论可能存在一定的主观性和不确定性。
2. 由于转基因产品研究仍处于不断发展的初级阶段，目前有关转基因产品的研究资料尚不充分，研究结果可能需要进一步验证和补充。
3. 本研究仅涉及了转基因产品对人类健康和环境的潜在风险，对经济效益、社会影响等方面的研究还需进一步深入。
苹果转基因研究进展
苹果转基因研究进展
周瑞金;张传来
【期刊名称】《南方农业学报》
【年(卷),期】2009(040)001
【摘要】近年来,苹果遗传转化研究取得了较大的进展,已有多种标记基因和目的基因成功转入苹果中并且得到稳定表达和遗传.农杆菌介导法是苹果上应用的主要转化方法.叶片再生不定芽途径是被广泛应用的受体系统.影响农杆菌介导成功与否的因素很多,文章从转化方法、叶片再生能力、菌株类型以及农杆菌侵染条件等方面综述了目前有关研究成果,指出目前依然存在转化效率不高、外源基因表达强度不够、对转化植株的选择不够重视等诸多问题.
【总页数】5页(P71-75)
【作者】周瑞金;张传来
【作者单位】河南科技学院固林学院,河南新乡,453003;河南科技学院固林学院,河南新乡,453003
【正文语种】中文
【中图分类】S661.1
【相关文献】
1.苹果树上结的是苹果吗？——话说转基因食品 [J], 王延清
2.转基因苹果研究进展 [J], 邵建柱;马宝焜
3.动物转基因技术在转基因牛中的研究进展 [J], 张兆顺;成功;昝林森
4.一种转基因苹果和一种转基因土豆可安全食用 [J],
5.加拿大:水果种植者协会要求暂停转基因苹果“北极苹果”的种植 [J], 童彤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
苹果转基因研究
2021/3/21
3
转基因苹果
究竟怎样定义转基因苹果？ 转基因苹果研究进展如何？
它存在哪些问题？
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主要内容
❖定义 ❖发展历史 ❖研究现状 ❖研究进展 ❖存在问题
苹果转基因研究
1
转基因苹果
❖ 苹果为世界四大水果之一，是我国的第一大水果， 在国民经济中占有重要地位。
❖ 但是，由于果树育种周期长、遗传背景复杂，传
统的杂交育种方式很难选育出集各种优良品质于 一身的品种
❖ 近年来随着社会的发展和进步，培育优质的苹果 新品种成为民众的迫切要求。
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2
转基因苹果
❖ 目前使用的转基因植物的鉴定方法有 :分子检测、免疫 技术、利用生理生化指标、标记基因和生物鉴定法
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3 研究现状
3.4 转基因苹果的鉴定
全面检测需要：
❖ 1 检测插入外源基因：先做个普通PCR检测，传统的要 southern杂交检测插入几个拷贝，现在可以用Real-Time 检测拷贝数；
5 存在问题
❖ 所以，苹果想要成功的进行转基因，必须根据自身 品种的遗传性状，借鉴其他类似植物成功的经验和 方法，探索适用于苹果遗传转化的新方法和提高转 化效率的办法。
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Thank you for your
attention O(∩_∩)O
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5 存在问题
❖ 首先，因为离体材料再生体系的不完善，苹果转基因技 术尽管发展的很迅速，但是有些品种由于基因型不同， 再生率不高，因此不能进行遗传转化
苹果纯合基因型株系再生转化研究及MYB10表达载体构建
激素对纯合基因型株系再生有很大影响,纯合株系在不同激素水 平再生率不同,不同株系最适再生培养激素条件有差异。纯合基 因型株系40d叶龄的叶片再生能力更好,暗培养可以促进纯合基 因型株系的再生,接种密度对再生没有影响。
双单倍体DH2-10在培养基MS+0.5mg/L IBA+5 mg/L 6-BA上可以 获得100%的再生率。四倍体纯合株系在培养基MS+0.5mg/L IBA+6 mg/L 6-BA上获得93.33%的再生率。
苹果纯合基因型株系再生转化研究及 MYB10表达载体构建
花药培养获得的纯合基因型株系扩大了苹果种质资源,是苹果育 种的创新型材料。纯合株系结合基因工程技术手段可以加速育 种进程,纯合基因型株系是进行遗传学研究的理想材料。
本研究以‘嘎啦’花药培养获得的小孢子来源的40个纯合基因 型株系为试验材料进行叶片离体再生培养,筛选挖掘高频再生基 因型,并对激素浓度、叶龄、暗培养、接种密度等条件进行了摸 索,建立叶片离体培养高效再生体系。基于建立的再生体系,以 高频再生基因型DH2-10为转化受体材料,对叶片进行抗生素敏感 性测试,筛选材料适宜的抗生素浓度,对转化中菌液浓度、浸染 时间、共培养天数和筛选培养时间等条件进行探索,建立农杆菌 介导的纯合基因型遗传转化体系,以期为之后的苹果育种及遗传 学研究奠定基础。
另外Cef与特美汀的协同使用对农杆菌LAB4404有更好的抑制效 果,宜使用Cef 600 mg/L+Tim 200mg/L进行转化的脱菌培养。转 化试验结果表明,农杆菌介导纯合基因型株系转化时,农杆菌浸 染浓度范围宜为0.3~0.7,浸染时间以5~10min为佳,共培养时间 不超过3天为宜。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
以Kan100mg/L的选择压进行筛选培养获得了两株抗性芽。另外, 从‘舞美’的红色叶片及果皮中提取RNA进行反转录,设计MYB10 基因的特异性引物进行PCR扩增,构建了苹果MYB10基因表达载体 pEZR(k)-LNY-MYB10。
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2019/8/23
“转基因技术” （ Genetically Modified Technology）
2019/8/23
3 研究现状
3.2 导入的外源基因
目前为止，导入的外源基因有GUS基因、 GFP基因、 Bt 基因、 LFY基因、 nptⅡ基因、CpTI基因、杀菌肽基因、 抗菌肽MB39基因、FT基因、硫堇蛋白Rs-afpl基因、 ALS基因(抗除草剂)、rol基因(生长素合成酶基因)、光 敏色素B基因、LeIRT、Ferrition等
其中抗性基因分别提高了苹果的抗虫性、抗病性和抗除 草剂的能力；rol基因的导入使苹果苗在田间表现矮化； 光敏色素B基因使苹果的生长量和干重不同程度减少
2019/8/23
3 研究现状
同时，对转化材料的选择不再停留在最初的抗性材料 筛选上，GUS组织化学检测及分子水平的检测(PCR 或Southern杂交)技术被普遍采用。由于GUS基因 可以在农杆菌中表达，而农杆菌在转化后的离体培养 中至少能存活12个月而不表现生长，所以GUS阳性 结果不能准确反映初步转化频率
2019/8/23
3 研究现状
3.1 苹果转基因的受体基因型
近年来，在全世界果树研究者的努力下，转基因苹果 已取得不小的成就，用于苹果遗传转化研究的受体基因 型越来越多，除了绿袖，主要还有
红元帅、新乔纳金、嘎拉、金冠、 M26 、皇家嘎拉、 Elstar、Braeburn、Merlijin、乔纳金、富士、王林、 金矮生、辽伏、元帅、粉红佳人以及M7和八楞海棠等
于是，另外一种报道基因——绿色荧光蛋白(GFP)被 用于苹果的遗传转化
2019/8/23
2019/8/23
3 研究现状
作为荧光标记分子，GFP既具有敏感的标 记检测率，又没有放射性的危害。GFP检 测方便，荧光稳定，易于构建载体且对活 细胞无毒害，对目的基因的功能也没有影 响，转化后细胞可以继续传代。目前， GFP被改造作为转基因植物的遗传标记， 成为监测生物体内基因表达的的十分重要 的报告因子
1992年程家胜等在国内报道了获得转基因的 苹果试管苗，与James等一样，用绿袖作为受 体植株，农杆菌介导法，不同的是抗卡那霉素的 标记基因为氨基葡糖磷酸转移酶[APH(3)I]基 因，报道基因为葡萄糖苷酸酶基因
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2 发展历史
植物转基因的方法主要有农杆菌介导法、基因枪 法、激光法、花粉管通道法等。在植物上转化成 功的例子中，80%22是发发由展展历历农史史杆菌介导转化的 。
的最多。
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4 研究进展
4.1 农杆菌介导法
现在，农杆菌介导法的发展潮流是提高转化效率和扩大 转化范围。
常见的影响农杆菌转化频率的因素有三大类：侵染力,抗
生素,基因型。
2019/8/23
4 研究进展
另外，许多实验研究表明甘露糖/PMI筛 选体系以pmi为安全标记基因，可以实现 对转化细胞安全、高效的正向选择。
3 研究现状
3.3 外源基因导入的方法
1 直接导入法 化学物质导入法、电穿孔发、脂质体法、微注射 法、基因枪法（微弹轰击法）和花粉管通道法等
2 间接导入法 土壤农杆菌转化系统和植物病毒载体系统
转基因苹果
基因工程的发展为苹果品种的遗传改良提供了新的技术方法， 缩短育种周期，提高育种效率，为苹果遗传育种研究、利用 各种遗传种质资源开辟了一条新的技术途径
2019/8/23
转基因苹果
究竟怎样定义转基因苹果？ 转基因苹果研究进展如何？
它存在哪些问题？
2019/8/23
主要内容
定义 发展历史 研究现状 研究进展 存在问题
3 蛋白水平检测：western杂交 4 报告基因检测：Gus，GFP/YFP/RFP等
2019/8/23
4 研究进展
苹果转基因的方法主要有: 农杆菌介导法、基因枪法、激光法、花粉 管通道法、脂质体法、微注射法、电穿孔
法等。
现在，在经常使用的苹果转基因技术中， 电穿孔法、基因枪法和农杆菌介导法使用
2019/8/23
3 研究现状
3.4 转基因苹果的鉴定
全面检测需要：
1 检测插入外源基因：先做个普通PCR检测，传统的要 southern杂交检测插入几个拷贝，现在可以用Real-Time 检测拷贝数；
2 表达量检测：RT-PCR， northern杂交，Real-Time RT-PCR；
苹果转基因研究
田爽
转基因苹果
苹果为世界四大水果之一，是我国的第一大水果， 在国民经济中占有重要地位。
但是，由于果树育种周期长、遗传背景复杂，传 统的杂交育种方式很难选育出集各种优良品质于 一身的品种
近年来随着社会的发展和进步，培育优质的苹果 新品种成为民众的迫切要求。
2019/8/23
2019/8/23
3 研究现状
3.3 外源基因导入的方法 在苹果基因转化中主要应用电穿孔法、基因枪 法和农杆菌介导法。农杆菌介导法以其简便、 高效成为应用最广泛的转化方法 。
2019/8/23
3 研究现状
3.4 转基因苹果的鉴定 遗传转化的最终目的是获得能稳定表达且遗传外源目的
基因的转化植株，这就需要不断观察和检测转基因植株 在田间的表现 目前使用的转基因植物的鉴定方法有 :分子检测、免疫 技术、利用生理生化指标、标记基因和生物鉴定法
是指使用基因工程或分子生物学技术(不包 括传统育种、细胞及原生质体融合、杂交、 诱变、体外受精、体细胞变迁及多倍体诱 导等技术)，将遗传物质导入活细胞或生物 体中，产生基因重组现象，并使之表达并 遗传的相关技术
2019/8/23
2 发展历史
自1988年首例使用农杆菌转化成的转基因 果树－核桃诞生以来，随后，1989年James等 采用农杆菌介导的叶盘共培养法获得了转基因绿 袖(Greensleeves)苹果，报告基因新霉素磷 酸转移酶基因和胭脂碱合成酶基因