3.微生物计数培养基适用性检查验证方案.
微生物计数培养基适用性验证报告.doc
非无菌产品微生物限度检查用培养基适用性验证目录1.验证目的 (1)2.参照标准 (1)3.验证项目 (1)4.验证工作小组及职责 (1)5.试验材料 (2)6.试验过程 (3)7.验证周期 (4)8.附件 (4)1、验证目的：需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数计数用培养基应进行培养基的适应性检查，本次验证的目的是为了确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基适合需氧菌总数计数、霉菌和酵母菌总数计数的测定。
2、参照标准：《中国药典》2015年版四部3、验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基适用性验证4.验证小组及职责4.1 验证小组4.2 验证职责5.试验材料5.1验证所用培养基：5.2验证用菌株培养5.2. 仪器设备：5.2.1. XXXXX立式压力蒸汽灭菌器5.2.2.XXXX水平流净化工作台5.2.3.XXXXXX干燥箱5.2.4.XXXXX型霉菌培养箱 (20～25℃)5.2.5. XXXXX电热恒温培养箱(30～35℃)5.3. 稀释剂：0.9%无菌氯化钠溶液6.试验过程6.1菌液制备取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物，加入3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。
菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2〜8℃，可在24小时内使用。
6.2、适用性检查培养基适用性检查取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的菌悬液与黑曲霉的孢子悬液（均不大于100cfu），分别注入无菌平皿中，立即倾注适用性检查的胰酪大豆胨琼脂培养基，用于检查胰酪大豆胨琼脂培养基的需氧菌总数计数适用性。
其中，接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的培养皿于30-35℃培养，时间不超过3天。
版药典微生物限度检查方法验证方案
版药典微生物限度检查方法验证方案验证微生物限度检查方法的方案一、实验目的：验证药典中的微生物限度检查方法的准确性、可靠性和可行性。
二、实验材料：1.药典中规定的微生物限度检查方法；2.待验证的药品样品；3.适用的培养基和培养条件；4.培养基的质量控制菌种。
三、实验步骤：1.制备适用的培养基：按照药典中规定的方法和成分制备适用的培养基，并进行批次记录。
2.准备质量控制菌种：3.制备菌液悬液：从购买的质量控制菌种中，挑取一株菌种进行连续传代培养至活性最佳的生长阶段。
然后制备菌液悬液，以备后续试验使用。
4.扩大悬液应用范围：从第3步得到的菌液悬液中，取适量接种于适用培养基上，培养出代表性的细菌菌液悬液。
然后，通过菌液的光学检测、显微镜检查和菌落计数，确定菌液的细菌浓度。
5.验证方法的准确性：将待验证的药品样品加入培养基，根据药典中的方法将培养基分成不少于3组。
每组培养基中分别加入一定量的菌液悬液，并在药典规定的温度和时间下培养。
同时，设置对照组，只加入菌液悬液和培养基。
6.菌落计数：取适量的培养基样品，分别进行菌落计数，并根据培养基的数量、培养基总菌落数、对照组的菌落数等数据，计算菌落形成单位。
7.验证方法的可靠性：将待验证的药品样品按照药典中的方法进行连续验证，至少重复3次。
然后，对比不同验证结果的一致性和稳定性，评估方法的可靠性。
8.验证方法的可行性：根据实际的样品情况和验证结果，评估方法在操作上和技术上的可行性。
如，是否存在样品的特殊要求，检测方法是否能满足检测要求等。
四、数据处理与分析：根据实验结果的菌落计数和验证的次数，进行数据处理和统计分析。
评估验证结果的一致性、可靠性和可行性。
五、结论：根据实验结果和数据分析，得出关于药典中微生物限度检查方法的准确性、可靠性和可行性的结论。
如果验证结果与药典一致，说明方法可靠并可以使用。
如果验证结果与药典不一致，需要进一步分析原因和进行修正或优化。
微生物限度检查方法适用性验证方案
目录1.概述 (2)1.1验证目的 (2)1.2验证频次 (2)1.3适用范围 (2)1.4参照标准 (2)1.5验证小组人员及职责 (2)2.试验前准备 (3)2.1验证所需的文件资料 (3)2.2验证条件 (3)2.3回收试验 (5)2.4结果判断 (7)1.概述1.1验证目的进行产品的微生物计数检查时，应进行方法适用性试验（即微生物回收试验），以确认所采用的方法适合于微生物限度检查。
本次验证的目的就是确认本法适合生产原料、初包装材料、一次性妇用（壳聚糖）生物高分子止血吸附栓的微生物限度检查。
1.2验证频次1.2.1建立生产原料、初包装材料一次性妇用（壳聚糖）生物高分子止血吸附栓的微生物限度检查法时。
1.2.2检验方法更改时。
1.2.3原料、初包装材料、产品发生变化或检验程序发生改变时。
1.3适用范围生产原料、初包装材料、一次性妇用（壳聚糖）生物高分子止血吸附栓的微生物限度检查。
1.4参照标准2015版《中国药典》第四部通则。
2.验证前准备2.1验证所需的文件资料2.2验证条件2.2.1环境要求微生物计数检查在万级洁净区内的百级单向流空气区域内进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。
单向流空气区与工作台面必须进行洁净度验证。
2.2.3验证用培养基所有培养基均采用即用型培养基，临用时按使用说明使用。
2.2.4验证用菌株：菌种来源（）2.2.5菌液制备-表3-接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30〜35℃培养18〜24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基中或沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20〜25℃培养24〜48小时，上述培养物用PH7.0无菌氣化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氣化钠溶液制成每lml含菌数小于l00cfu(菌落形成单位）的菌悬液。
接种黑曲霉的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基上，20〜25℃培养5〜7天，加入3〜5ml含0.05% (ml/ml)聚山梨酯80的pH7无菌氣化钠-蛋白胨缓冲液或0.9% 无菌氣化钠溶液，将孢子洗脱。
培养基适用性检查验证方案
编号: AB/06-31-B培养基适用性验证方案计数培养基****药厂有限公司标题培养基适用性验证方案编号AB/06-31-B页码共5页、第1页执行200 年月日颁发部门GMP综合办公室分发部门行政管理办公室分发数起草人起草日期审核人审核日期批准人批准日期目录1. 概述 (2)2. 验证目的 (2)3. 验证的范围 (2)4. 验证人员及职责 (2)5. 验证程序和方法 (2)6. 验证可接受的标准 (3)7. 验证步骤 (3)8. 结果分析及评价： (4)9. 验证报告 (5)10. 建议 (5)11. 最准批准 (5)12. 所使用的记录 (6)1. 验证目的：细菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。
本次验证的目的是确认营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基适合细菌、霉菌及酵母菌数测定。
2. 参照标准：2010版中国药典二部附录XI J微生物限度检查法。
3. 验证项目：营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基的适用性检查。
4.验证小组人员及职责：4.1验证小组人员:4.2验证人员职责及要求4.2.1按验证方案及相关文件实施验证。
4.2.2认真观察并做好验证原始记录。
4.2.3对实施验证的结果负责。
4.3验证中各部门的职责4.3.1验证领导组职责4.3.1.1制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。
4.3.1.2确定验证项目及验证项目负责人。
4.3.1.3负责验证方案的批准工作。
4.3.1.4负责验证资料及结果的审核工作。
4.3.1.5负责验证报告的批准工作。
4.3.2验证工作小组职责4.3.2.1负责验证方案的起草工作。
4.3.2.2参与验证方案的讨论、确认工作。
4.3.2.3负责验证方案的实施。
4.3.2.4负责验证结果的分析、统计、报告工作。
4.3.2.5参与验证结果的评价工作。
4.3.3质量部职责4.3.3.1负责公司验证日常管理工作。
4.3.3.2负责验证方案的审核工作。
4.3.3.3负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作。
微生物限度检查方法验证方案
微生物实验室检测设备配置方案微生物限度检查方法验证方案1.目的：为确认所采用的方法适合于该药品的微生物限度检查，包括细菌、霉菌及酵母菌计数和控制菌检查，特制定本验证方案，通过比较试验菌的恢复生长结果，来评价整个检验方法的准确性、有效性和重现性，以确认供试品在该实验条件下无抑菌活性或其抑菌活性可忽略不计，所采用的方法适用于该品种的微生物限度检查。
验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案修改申请并报验证领导小组批准2.范围：本验证方案适用于微生物限度检查方法的验证。
3.规范性引用文件：根据《中国药典》2010年版二部附录XI J微生物限度检查法的要求，由于某些供试品具有抗菌活性，在建立微生物检查方法或产品的组分发生改变或原检查法的检验条件发生改变时，可能影响检验结果的准确性，必须对供试品的抑菌活性及测定方法的可靠性进行验证。
4.验证实施：4.1.1试验前的准备：4.1.1.1试验用具的准备：将试验需用的试管、刻度吸管、薄膜过滤器、滤膜（孔径0.22um、直径50mm）、平皿、空三角瓶、称量纸等，用牛皮纸包扎好后，放于湿热灭菌器中，在121℃,灭菌30 min,在3天内使用。
4.1.1.2试验用培养基的制备：取适用性检查合格的营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、营养肉汤培养基、胆盐乳糖培养基（BL）、改良马丁琼脂培养基、4-甲基伞形酮葡糖甘酸培养基（MUG）等脱水培养基，按照相应的配制微生物实验室检测设备配置方案说明，用纯化水配制、分装后，在2小时内，放于湿热灭菌器中，在121℃, 灭菌15 min，在3周内使用。
4.1.1.3试验用稀释剂/缓冲液、冲洗液的制备：取在有效期内的试剂，按照相应的配制方法，配制pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液、0.9%无菌氯化钠溶液、0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液等，用纯化水配制，加热使溶，过滤，分装，在121℃，灭菌15 min，在3周内使用。
微生物限度检查方法适用性试验方案
微生物限度检查方法适用性试验方案一、试验目的本试验旨在验证微生物限度检查方法的适用性，并评估其在实际样品中的准确性、精密度和灵敏度，以确保检测结果的可靠性。
二、试验范围本试验适用于各类药品、食品、环境以及生物制品等样品的微生物限度检查。
三、试验设备与试剂1. 培养基：本试验需使用适当的培养基，如大肠杆菌培养基、沙门氏菌培养基等，以满足特定微生物的培养需求。
2. 灭菌设备：试验中的培养基、工具及试剂需经过灭菌处理，以保证试验环境的无菌状态。
3. 微量移液器：用于准确取样和移液，确保实验的精确性。
4. 微生物培养箱：用于提供适宜的温度和湿度条件来培养微生物样品。
四、试验步骤1. 样品制备：按照相关规定和标准采集样品，并根据不同样品的特性进行适当处理，以便得到具有代表性的样品。
2. 培养基接种：将样品按照试验要求接种到相应的培养基中，并在一定条件下进行培养，以促使微生物生长。
3. 培养基培养：将接种过样品的培养基置于微生物培养箱中，根据微生物的生长特性进行培养，通常包括温度、湿度和培养时间等方面的控制。
4. 结果观察与记录：根据实验要求，观察培养基上是否有微生物的生长，并记录对应的观察结果。
5. 试验数据处理与分析：根据试验结果进行数据处理与分析，并评估微生物限度检查方法的适用性、准确性和灵敏度。
五、试验评价指标1. 准确性：通过与参考方法的比对，评估限度检查方法的准确程度。
2. 精密度：利用不同实验者、设备和试剂的重复试验，评估方法的可重复性和稳定性。
3. 确定度：评估方法的灵敏度和特异性，以确定方法对微生物的检测能力。
4. 可靠性：综合以上评价指标，评估方法在实际应用中的可靠性和适用性。
六、试验结果与分析根据试验评价指标，通过一系列试验和数据分析，我们可以得出以下结论：1. 限度检查方法在各类样品中的准确性良好，能够准确反映样品中微生物的含量。
2. 试验结果表明，方法具有较好的重复性和稳定性，不同实验者、设备和试剂的试验结果相对一致。
版药典培养基适用性验证
培养基验证文件制药有限公司制药有限公司验证立项申请表验证方案的审批验证方案目录1、概述2、验证目的3、验证范围4、验证项目小组成员及职责5、验证合格标准6、试验材料7、菌液制备8、适用性检查9、验证记录10、验证结论及综合评价计数培养基适用性检查的验证方案1. 验证目的：需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。
本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌总数测定。
2. 参照标准：《中国药典》2015年版四部1105非无菌产品微生物限度检查法。
3. 验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。
4.验证小组人员及职责：5. 合格标准：被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5～2范围内，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。
6. 试验材料：6.1. 被验证产品：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基。
6.2. 仪器设备：6.2.1. YXQ-LS-100G型立式压力蒸汽灭菌器6.2.2. GHT-00双人净化工作台6.2.3. BSC-110011A2-X 生物安全柜6.2.4.MJ-250I型霉菌培养箱(20～25℃)6.2.5. LRH-250生化培养箱(30～35℃)6.2.6.电热恒温干燥箱6.2.7微波炉6.4. 验证用菌株：(第代)7. 菌液制备按6.4规定程序培养各试验菌株。
取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50~100cfu∕ml的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将孢子洗脱。
然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50~100cfu∕ml的黑曲霉孢子悬液。
培养基适用性验证方案
培养基适用性验证方案培养基适用性验证是指在培养基的研发过程中，通过实验验证培养基的适用性和质量。
这一过程对于生物学、医学等领域研究以及工业生产来说非常重要。
本文将介绍一个基本的培养基适用性验证方案，以确保培养基的质量和有效性。
一、实验目的1.验证培养基中各种成分的适用性和稳定性；2.测试培养基对细胞或微生物的生长和增殖的支持程度；3.评估培养基对细胞或微生物的表型和基因表达的影响；4.了解培养基的理化指标，如pH值、渗透压等。
二、实验步骤1.准备培养基和试样：根据所研究的生物体或微生物的需要，准备相应的培养基，包括成分和浓度。
同时，准备不同的试样，如细胞或微生物的悬浮液或分离物等，用于验证培养基的适用性。
2.测定培养基理化指标：测定培养基的理化指标，如pH值、渗透压、离子浓度等，确保其在范围内。
3.测定培养基对细胞或微生物的生长和增殖的支持程度：将细胞或微生物接种于培养基中，通过监测生物体的生长曲线、增殖速率等参数来评估培养基对其的支持程度。
可以使用细胞计数仪、显微镜等工具进行观察和计数。
4.评估培养基对细胞或微生物的表型和基因表达的影响：通过观察生物体的形态、结构、活力等方面，了解培养基对其表型的影响。
同时，可以通过转录组分析、蛋白质组分析等手段，评估培养基对基因表达的影响。
5.验证培养基的稳定性：将培养基保存一段时间后，再次进行生物体的培养和生长实验，以验证培养基的稳定性和持久性。
6.数据分析和结果呈现：对实验结果进行统计分析，包括均值、标准差等指标，通过图表、表格等形式呈现实验结果。
三、实验注意事项1.实验室条件要符合要求，包括洁净无菌、合适的温度和湿度等；2.培养基的配制要精确，注意称量和混合时间；3.使用无菌技术和条件进行细胞或微生物的接种和培养；4.实验过程中要使用适当的控制组和重复实验，以确保实验结果的可靠性和准确性；5.实验过程中要严格按照操作规程和实验流程进行，避免误操作和实验结果的偏差。
微生物计数培养基适用性检查验证方案
微生物计数培养基适用性检查验证方案
1、验证目的：
细菌、霉菌及酵母菌计数用培养基应进行培养基的适应性检查，本次验证的目的是为了确证营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基适合细菌、霉菌及酵母菌测定。
2、参照标准：《2010年版中国药典》
3、验证项目：营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基
4、验证所用培养基：
5、菌液制备
接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养琼脂培养基斜面上。
培养24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面，培养24小时，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液逐级稀释制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液。
6、适用性检查
取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾注营养琼脂培养基，混匀，凝固，每株实验菌平行制备2个平皿，另1平皿不接种菌作为空白对照，置35℃培养48小时，计数；
取白色念珠菌50～100cfu，立即倾注玫瑰红钠琼脂培养基，混匀，凝固，每株实验菌平行制备2个平皿，另1平皿不接种菌作为空白对照，置25℃培养72小时，计数。
同时，用相应对照培养基替代被检培养基同步进行上述试验。
7、结果记录
备注：空白皿均未长菌
8、结果判定：若被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平
均数的70%，且菌落形态大小与对照培养基上的一致，判该培养基实用性检查符合规定。
9、结论：本次所检培养基上的菌落平均数对照培养基上的菌落平均数的70%，且菌落形态大小与对照培养基上的一致，该培养基适用性检查规定。
试验人复核者。
微生物限度检查方法适用性试验方案
微生物限度检查方法适用性试验方案微生物限度检查是一种常用的检查方法，用于评估药品、食品和化妆品等产品中微生物的污染程度。
微生物限度检查方法的适用性试验是为了验证检测方法的准确性、可靠性和适用范围。
本文将介绍微生物限度检查方法适用性试验的方案。
一、试验目的验证微生物限度检查方法的适用性，评估方法的准确性、可靠性和适用范围。
二、试验范围该试验适用于药品、食品和化妆品等产品的微生物限度检查方法。
三、试验方法1.试验材料准备a.研究所需的试验材料，包括样品、菌株、培养基等。
b.样品的处理，根据具体要求进行处理，如稀释、过滤等。
2.实验操作a.样品处理：根据样品的特点进行处理。
b.菌株培养：选取试验使用的菌株，按照适当的培养方法进行培养，确保菌株的活力和纯度。
c.培养基准备：根据具体需要，配制适当的培养基，确保培养基的质量。
d.接种和孵育：将处理后的样品接种到培养基中，并根据不同的微生物进行适当的孵育条件，培养出适量的微生物。
e.培养液的传递：取适量的培养液，经过适当的稀释、过滤等处理，得到试验所需要的样品。
f.复苏：对可能受到不利条件或致死处理的微生物进行复苏，以评估方法的准确性和敏感性。
g.灭菌试验：对培养基等试验材料进行灭菌试验，确保试验材料的无菌性。
3.检测方法验证a.准确性验证：通过添加已知数量的微生物到样品中，检测方法应能准确有效地检测出添加的微生物。
b.反应性验证：通过将不同的菌株添加到样品中，检测方法应能对不同菌株有较好的反应性。
c.选择性验证：通过将其他微生物添加到样品中，检测方法应能对目标微生物选择性地进行检测。
d.灵敏度验证：通过不同浓度的微生物添加到样品中，检测方法应能有效地检测出微生物的存在。
四、试验报告要求试验报告应包括以下内容：a.试验目的、试验范围和试验方法的简要介绍。
b.所使用的试验材料和设备的详细说明。
c.试验过程的详细记录，包括样品的处理、菌株的培养、培养基的准备等。
微生物计数培养基适用性检查验证方案
微生物计数培养基适用性检查验证方案微生物计数是一种重要的质量控制方法，用于评估和监控产品或环境中微生物的数量。
微生物计数培养基适用性检查验证方案，是为了确认所使用的培养基是否适合特定的样品类型和目标微生物，并确保结果准确可靠。
本文将详细介绍微生物计数培养基适用性检查验证方案的内容和步骤。
一、背景和目的：在进行微生物计数之前，必须先选择合适的培养基。
不同的微生物对培养基的成分和条件有不同的要求，选择不当的培养基可能导致微生物无法生长或生长受限，从而影响计数结果的准确性。
因此，验证培养基的适用性是确保测试结果可靠的关键步骤。
二、验证方案步骤：1.确定实验目的和验证对象：明确要验证的培养基和目标微生物的种类和数量。
2.设计验证实验方案：选取一批合适的培养基和标准菌株进行验证实验。
可以选择常用的微生物计数培养基，如营养琼脂培养基和肉汤葡萄糖琼脂培养基。
3.校验培养基成分：检查所选培养基是否符合国家或行业标准的要求，包括pH值、含水量、蛋白质含量等。
4.检查培养基适宜性：将所选培养基分别接种种菌株，在适宜的培养条件下观察菌落的生长情况，并与预期结果进行比较。
5.验证培养基选择性：将所选培养基分别接种多种目标微生物和一种非目标微生物，观察是否能明确区分出目标微生物。
6.验证培养基的灵敏度：在适宜的培养条件下，使用一系列稀释液接种目标微生物，观察在各个浓度下生长的情况，确定培养基的最小检出浓度。
7.比对验证实验结果：将验证实验结果与已有的参考数据进行比较，评估培养基的适用性和准确性。
8.结果分析和报告编写：根据实验结果进行统计分析，并编写验证报告，包括验证实验的步骤、结果和结论等。
三、验证结果的解释和处理：验证实验结果可能出现以下情况：-培养基能够支持目标微生物的生长，并与预期结果一致，表明培养基适用性良好；-培养基不能支持目标微生物的生长，可能是培养基成分不合适或有特定成分的抑制作用。
此时，需要进行进一步检查和优化；-培养基能够分辨目标微生物和非目标微生物，表明培养基具有选择性；-培养基的灵敏度和检出限满足要求，表明培养基可以准确检测目标微生物的数量。
3微生物计数培养基适用性检查验证方案
3微生物计数培养基适用性检查验证方案G M P文件湖北******药业有限公司微生物计数培养基 SOP-YZ-6303 题目文件编号适用性试验验证方案B 制订人制定日期年月日版本号16/9 审核人审核日期年月日页码批准人批准日期年月日修改状态 0 颁发部门质量部生效日期年月日分发份数分发部门质量部1.概述:培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。
适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制是提供优质培养基的保证。
供试品微生物限度检查中所使用的培养基应进行适用性检查。
2.验证目的:本次验证的目的是确认需氧菌总数、霉菌及酵母菌总数检查用的胰酪大豆胨琼脂培养基、胰酪大豆胨液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基的质量，以及其制备程序、保存条件等是否满足微生物限度检查用要求。
3.验证依据:《中国药典》2015年版四部“非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法”、“9203 药品微生物实验室质量管理指导原则”。
4.验证项目:胰酪大豆胨琼脂培养基、胰酪大豆胨液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。
5.适用范围:成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
小组人员职务姓名签字所在部门职务组长质量部质量总监组员质量控制实验室 QC主任组员质量控制实验室微生物QC6.验证周期:除另有规定外，在实验室中，若采用已验证的配制和灭菌程序制备培养基且过程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检查试验可以只进行一次。
如果培养基的制备过程未经验证，那么每一灭菌批培养基均要进行适用性检查试验。
7.验证小组人员及职责:7.1验证小组人员:本文件为受控文件，仅限湖北****药业有限公司内部使用。
未经授权，不得使用、泄露或拷贝～ 16G M P文件湖北*****药业有限公司微生物计数培养基 17/9 题目页码适用性试验验证方案SOP-YZ-6303 B 0 版本号修改状态编号验证方案7.2验证人员职责及要求7.2.1按验证方案及相关文件实施验证。
中国药典微生物限度检查方法验证方案
中国药典微生物限度检查方法验证方案一、引言药品的质量与安全性是保障患者用药安全的重要方面。
微生物限度检查是药品质量控制的重要环节，用于评价药品中微生物的污染情况。
为确保检测结果的准确性和可靠性，本文旨在制定中国药典微生物限度检查方法验证方案。
二、背景微生物限度检查方法验证是指确定某一方法在特定条件下的适用性，方法验证的结果直接影响到药品生产和品质控制。
为了保证方法验证的可靠性，必须按照一定的规范和要求进行操作。
三、验证目的验证中国药典中所规定的微生物限度检查方法在实际应用中的准确性和可靠性，以确保药品的微生物限度符合国家及相关法规的要求。
四、验证程序1. 确定验证方法：根据中国药典中规定的微生物限度检查方法，选择合适的验证样品和验证条件。
2. 准备验证样品：从实际生产过程中随机选取药品样品，确保样品的代表性。
3. 执行验证实验：按照中国药典中的方法操作，对验证样品进行微生物限度检查。
4. 数据分析和评估：根据验证实验的结果，进行数据分析和评估，评估方法的准确性和可靠性。
5. 结果判定：根据数据评估结果，对微生物限度检查方法进行判定，判断方法是否适用于实际生产中的微生物限度检查。
6. 验证报告编制：根据验证实验的结果和结论，编制验证报告。
五、验证内容本次验证主要包括如下内容：1. 对选择的验证样品进行微生物限度检查。
2. 对验证样品进行菌落计数。
3. 对验证样品进行培养方法的验证。
4. 对不同微生物种类的检查方法进行验证。
5. 对不同微生物菌株的适应性进行验证。
六、风险评估在验证过程中，存在一定的风险因素，需进行风险评估，确保验证结果的可靠性和准确性。
风险评估主要包括验证样品来源的可靠性、实验操作的准确性、验证条件的合理性等。
七、验证结果与讨论根据验证实验的结果和数据分析，可以得出下列结论：1. 所验证的微生物限度检查方法在实际应用中的准确性和可靠性较高。
2. 所验证的微生物限度检查方法适用于不同药品制剂类型的微生物限度检查。
培养基适用性验证方案-wm
培养基适用性验证方案编制人：________________ 日期：_________________ 审核人：________________ 日期：_________________批准人：________________ 日期：_________________目录1. 概述2. 验证目的3. 验证依据4. 验证项目5. 验证小组成员及职责6. 验证时间7. 验证材料8. 验证内容8.1.无菌检查用培养基适用性验证8.2.计数用培养基适用性验证9. 验证方案的评定与建议10. 验证方案的最终审核意见培养基适用性验证报告1.概述培养基是无菌检查和微生物限度检查的关键物品之一，培养基的是否符合检验要求，影响着检验结果的准确性、有效性。
2.验证目的验证培养基是否符合检验要求3.验证依据《中国药典》2015版通则1101生物检查法4.验证项目无菌检查用培养基：硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基、营养肉汤；计数用培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙式葡萄糖琼脂培养基、R2A琼脂培养基、大豆酪蛋白琼脂培养基5.验证小组成员6.验证时间本次验证于2016年1月18日开始进行，将于2016年1月22日完成7.验证材料7.1.仪器设备手提式压力蒸汽灭菌器、生物安全柜、生化培养箱、霉菌培养箱、电热鼓风干燥箱、净化工作台7.2.对照培养基胰酪大豆胨琼脂对照培养基、沙式葡萄糖琼脂对照培养基、R2A琼脂对照培养基、大豆酪蛋白琼脂对照培养基7.3.其他器具酒精灯、试管、75%乙醇、灭菌刻度吸量管(1ml)、灭菌硼硅酸玻璃培养皿(© 90mr K 15mm)、锥形瓶，移液器，无菌吸头等。
7.4. 菌种金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌、黑曲霉、白色念珠菌；8. 验证内容8.1.无菌检查用培养基适用性验证8.1.1. 无菌性验证随机选取灭菌后硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基各5 瓶，并对培养基分别编号。
新版GMP培养基适用性检查验证方案
新版GMP培养基适用性检查验证方案导言：为了确保药品的安全性和有效性，广泛应用的GMP（Good Manufacturing Practice）准则规定了药品生产过程中的各个环节的要求。
其中，培养基是药品生产过程中重要的组成部分，为菌种的培养提供了必要的营养物质。
因此，对于新版的GMP培养基的适用性进行检查和验证是至关重要的。
本文将针对新版GMP培养基适用性检查验证方案进行详细介绍。
一、目的本方案的目的是确保新版GMP培养基在菌种的培养中具有适用性，并满足GMP准则中对培养基的要求，以确保药品生产过程的安全性、有效性和一致性。
二、检查和验证内容1.培养基的配方和成分检查通过检查新版GMP培养基的配方和成分，确认其是否与GMP准则中的要求相符。
包括但不限于：（1）培养基主要成分是否符合GMP准则的规定；（2）培养基配方中的添加剂的使用是否符合GMP准则的规定；（3）培养基中可能存在的致病菌、毒素或其他有害物质是否符合GMP准则的规定。
2.培养基的物理和化学指标检查通过检查新版GMP培养基的物理和化学指标，确认其是否符合GMP准则中的要求。
包括但不限于：（1）培养基的pH值和渗透压是否符合GMP准则的规定；（2）培养基的可溶性是否符合GMP准则的规定；（3）培养基的凝胶化能力、均匀性和稳定性是否符合GMP准则的规定；（4）培养基的透明度和色泽是否符合GMP准则的规定。
3.培养基的无菌性检查通过对新版GMP培养基进行无菌性检查，确认其是否符合GMP准则中的要求。
包括但不限于：（1）对培养基进行菌检，确认是否存在任何细菌、真菌或其他微生物的污染；（2）对培养基进行代菌试验，确认培养基对于不同种类的菌株是否具有适用性。
4.培养基的性能验证通过对新版GMP培养基进行性能验证，确认其在菌种的培养中的表现是否符合预期。
包括但不限于：（1）通过验证试验确认培养基的培养时间、生长速度和最终菌落数量是否符合预期；（2）通过对不同种类的菌株进行培养，并对培养基的表现进行评估，确认其在不同菌株的培养中的适用性。
微生物的验证方案
3.评价标准：
a.准确性：加标回收率应在95%-105%之间；
b.精密度：日内精密度≤10%，日间精密度≤15%；
c.重复性：相对标准偏差≤15%；
d.线性：相关系数r≥0.990；
e.检测限：信噪比≥3：1；
f.定量限：信噪比≥10：1。
5.审核批准：对验证报告进行内部审核，确保报告内容的科学性和合规性。
七、后续行动
1.验证通过后，将检测方法纳入标准操作流程；
2.对验证中发现的问题，及时进行根本原因分析，实施改进措施；
3.定期进行检测方法的性能监控，确保持续符合验证标准；
4.根据新的科学发展和行业标准，适时更新验证方案。
八、结论
本微生物验证方案为实验室提供了一个系统、严谨的方法来评估微生物检测方法的有效性和可靠性。通过严格的实验设计和数据分析，能够确保实验室结果的准确性和科学性，为微生物检测领域的持续改进和发展奠定基础。
六、实施计划
1.前期准备：收集相关标准、文献，确定验证方案，准备必要的试剂、设备和人员培训；
2.实验操作：按照验证方案进行实验，确保实验条件的一致性和可重复性；
3.数据处理：对收集到的数据进行整理和分析，确保数据的准确性和完整性；
4.报告编制：基于实验结果，编制详细的微生物验证报告，包括实验方法、结果和结论；
e.检测限和定量限验证：通过逐步稀释标准菌株，确定能被可靠检测和定量的最低浓度。有实验数据，包括实验条件、操作步骤和观察结果；
2.数据分析：
a.使用统计软件进行数据处理，计算平均值、标准差、变异系数等统计参数；
b.依据预设的判定标准，评价检测方法的性能指标；
五、数据统计分析及判定标准
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1.概述:培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。
适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制是提供优质培养基的保证。
供试品微生物限度检查中所使用的培养基应进行适用性检查。
2.验证目的：本次验证的目的是确认需氧菌总数、霉菌及酵母菌总数检查用的胰酪大豆胨琼脂培养基、胰酪大豆胨液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基的质量，以及其制备程序、保存条件等是否满足微生物限度检查用要求。
3.验证依据：《中国药典》2015年版四部“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”、“9203 药品微生物实验室质量管理指导原则”。
4.验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基、胰酪大豆胨液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。
5.适用范围：成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。
6.验证周期：除另有规定外，在实验室中，若采用已验证的配制和灭菌程序制备培养基且过程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检查试验可以只进行一次。
如果培养基的制备过程未经验证，那么每一灭菌批培养基均要进行适用性检查试验。
7.验证小组人员及职责：小组人员职务姓名签字所在部门职务质量总组长质量部监组员质量控制实验室QC主任微生物组员质量控制实验室QC7.1验证小组人员:7.2验证人员职责及要求7.2.1按验证方案及相关文件实施验证。
7.2.2认真观察并做好验证原始记录。
7.2.3对实施验证的结果负责。
7.3验证中各部门的职责7.3.1验证领导组职责7.3.1.1制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。
7.3.1.2确定验证项目及验证项目负责人。
7.3.1.3负责验证方案的批准工作。
7.3.1.4负责验证资料及结果的审核工作。
7.3.1.5负责验证报告的批准工作。
7.3.2验证项目小组职责7.3.2.1负责验证方案的起草工作。
7.3.2.2参与验证方案的讨论、确认工作。
7.3.2.3负责验证方案的实施。
7.3.2.4负责验证结果的分析、统计、报告工作。
7.3.2.5参与验证结果的评价工作。
7.3.3质量部职责7.3.3.1负责公司验证日常管理工作。
7.3.3.2负责验证方案的审核工作。
7.3.3.3负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作。
7.3.3.4负责检验仪器及检验方法的验证。
7.3.3.5负责验证中各项检测工作，提供验证的检验记录、检验报告，对验证过程中的各项检验工作负责。
7.3.3.6负责对验证人员的培训、考核工作。
7.3.3.7负责验证资料和报告的审核工作。
7.3.3.8负责验证文件回收、归档管理工作。
8.合格标准：8.1被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5-2范围内，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致；8.2被检液体培养基管与对照培养基管比较，试验菌应生长良好。
9.验证实施条件9.1验证方案培训：在验证实施前，应对参与验证的人员进行验证方案以及与验证相关的文件进行培训，确保相关人员掌握了验证的相关要求与知识。
9.2微生物限度检测室：检验所使用的检测室应经过HVAC系统确认，并符合要求。
9.3检验用水：验证过程使用的纯化水其制备系统应经过确认并符合要求，纯化水质量应经过检验并符合《中国药典》2015年版二部的要求。
9.4检验仪器设备：验证涉及的检验仪器（设备）与检验方法，应经过技术监督局校验合格或者公司确认/验证合格。
9.5验证菌种：验证所使用的菌种，其种类与传代次数应符合《中国药典》的相关要求。
菌种情况见附件2:菌种确认。
10.验证过程10.1菌液制备10.1.1取经30-35℃培养18-24h的铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物1ml加入9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍递增稀释至10-6-10-8，约为≤100cfu/ml的菌悬液备用。
10.1.2取经20-25℃培养2-3天的白色念珠菌、黑曲霉的液体培养物1ml, 加入9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍递增稀释至10-5-10-8，约为≤100cfu/ml的菌悬液备用。
10.2实验操作10.2.1胰酪大豆胨琼脂培养基：取11个无菌平皿，分别接种上述铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉各2皿，每皿接种1ml菌液（接种量≤100cfu），另1平皿不接种菌作为空白对照，倾注对照胰酪大豆胨琼脂培养基，混匀，凝固后于30～35℃倒置培养，培养时间不超过3天（白色念珠菌、黑曲霉培养时间不超过5天），计数；被检培养基同法操作。
10.2.2胰酪大豆胨液体培养基：新鲜配制10ml/支的对照胰酪大豆胨液体培养基7支，121℃灭菌15min，备用。
取6支，分别接种上述铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各2支，每支接种1ml 菌液（接种量≤100cfu），另1支不接种菌作为空白对照；被检培养基同法操作。
置30～35℃培养，培养时间不超过3天，分别观察结果。
10.2.3沙氏葡萄糖琼脂培养基：取5个无菌平皿，分别接种上述白色念珠菌、黑曲霉各2皿，每皿接种1ml菌液（接种量≤100cfu），另1平皿不接种菌作为空白对照，倾注对照沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固后于20～25℃倒置培养培养，培养时间不超过5天，计数；被检培养基同法操作。
10.3.检查结果：见附件5：计数用培养基适用性检查结果11.异常情况与偏差处理：当出现偏差时，应按《偏差处理管理规程》进行处理。
12.验证结果评定、结论与建议验证小组组长负责收集各项验证、试验记录，根据验证、试验结果对验证效果进行综合评审，起草验证报告、做出验证结论。
对验证结果的评审应包括以下内容：12.1验证试验是否有遗漏？12.2验证实施过程中对验证方案有无修改？修改原因、依据以及是否经过批准？12.3验证记录是否完整？12.4验证试验结果是否符合标准要求？偏差及对偏差的说明是否合理？是否需要进一步补充试验？13.附件13.1 附件1:验证实施条件确认13.2 附件2:培养基确认13.3 附件3:菌种确认13.4 附件4:菌液浓度确定13.5 附件5:计数用培养基适用性检查结果13.6 附件6:验证结果审批表附件1：设施设备验证确认验证报告编设施设备名称验证结果号实验室HVAC系统纯化水系统LDZX-40A型立式自控电热压力蒸汽灭菌器PSH-500A型生化培养箱303AS-2型电热恒温隔水式培养箱SW-CJ-1C型双人净化工作台确认结论：确认人：确认日期：附件2：培养基确认培养基名称来源批号有效期至胰酪大豆胨琼脂培养基胰酪大豆胨液体培养基沙氏葡萄糖琼脂培养基胰酪大豆胨琼脂对照培养基胰酪大豆胨液体对照培养基沙氏葡萄糖琼脂对照培养基确认结论：确认人：确认日期：附件3：菌种确认培养基名称来源批号枯草芽孢杆菌CMCC(B 63 501铜绿假单胞菌 CMCC(B10 104金黄色葡萄球菌 CMCC(B 26 003白色念珠菌 CMCC(F 98 001黑曲霉CMCC(F 98 003确认结论：确认人：确认日期：附件4：菌液浓度确定10-3 10-4 10-5 10-6 10-7ΙПШΙПШΙПШΙПШΙПШ铜绿假单胞菌皿1皿2金黄色葡萄球菌皿1皿2大肠埃希菌皿1皿2枯草芽孢杆菌皿1皿2白色念珠菌皿1皿2白色念珠菌（沙氏）皿1皿2黑曲霉皿1皿2黑曲霉（沙氏）皿1皿2结论：根据要求，菌数要控制在每1ml中含菌数在≤100cfu，因此，我们确定菌液制备：铜绿假单胞菌：稀释金黄色葡萄球菌: 稀释大肠埃希菌：稀释枯草芽孢杆菌: 稀释白色念珠菌（胰酪）: 稀释白色念珠菌（沙氏）: 稀释黑曲霉（胰酪）：稀释黑曲霉（沙氏）：稀释检验人检验时间年月日- 年月日复核人复核时间年月日附件5：计数用培养基适用性检查结果培养基验证菌株皿号被检培养基cfu/ml 对照培养基cfu/ml比值0.5-2菌落形态大小生长情况胰酪大豆胨琼脂培养基（30～35℃，≤3天）*白色念珠菌、黑曲霉≤5天铜绿假单胞菌12平均金黄色葡萄球1 2平均枯草芽孢杆菌1 2平均白色念珠菌12平均黑曲霉 12平均空白 1 胰酪大豆胨液体培养基（30～35℃，≤3天）铜绿假单胞菌1 —2金黄色葡萄球1 —2枯草芽孢杆菌1 —2空白 1 —沙氏葡萄糖琼脂培养基白色念珠菌 1（23～28℃，72h）2平均黑曲霉 12平均空白 1检验人检验时间年月日- 年月日复核人复核时间年月日表6:验证结果审批表验证对象验证开始日期验证结束日期评审意见（在方框中打√）1、验证实验有否遗漏□ 遗漏□ 未遗漏2、验证实施过程中对验证方案有无修改□ 有修改□ 无修改3、方案修改的原因□ 经过批准□ 未经批准4、验证记录是否完整□ 完整□ 不完整5、是否出现偏差□ 出现偏差□ 未出现偏差6、对偏差的说明是否合理□ 合理□ 不合理7、是否需要作进一步的试验□ 是□ 否验证项目小组组长：年月日验证领导小组组长：年月日。