白介素12的抗肿瘤机

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环磷酰胺加白介素是否对所有肿瘤有效？
有效肿瘤模型:
C57B/6: MC203, MCA205, MCA207, FBL-3
BALB/c: CT26, CSA1M, OV-HM
A/J: Sa1 无效肿瘤模型:
C57BL/6: MCA101,B16, LLC, Pan02, EL-4
C57BL/6: autochthonous primary tumors
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4
如何做肿瘤治疗效果试验
0-30 天
肿瘤细胞
治疗
能发表的疗效
1) 抑制性作用 (>90%)
2) 肿瘤体积减小（少见)
3) 治愈 （罕见)
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5
白介素１２单独使用的最佳治疗效果实例
• 白介素１２单独治疗一般只对某些初期建立的小 肿瘤（<１０毫米直径）有效
• 除了手术切除，常规以及以前开发的免疫治疗对 于长期建立（>3周）的大肿瘤负担（>15毫米直 径，５%体重）一般无法治愈
• 白介素１２配合化疗在某些肿瘤模型有出奇的疗 效
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白介素12 结合化疗治疗 32天小鼠MCA207肿瘤模型：治疗前
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环磷酰胺加白介素12（Cy+IL-12)治疗一周
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环磷酰胺加白介素12治疗2周
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环磷酰胺加白介素12治疗3周
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环磷酰胺加白介素12治疗4周
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11
环磷酰胺加白介素12治疗5周
白细胞介素12的抗肿瘤机理研究
斯坦福大学医学院外科 宗康拉
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1
内容提要
• 白介素12的抗肿瘤效果 • 白介素12的抗肿瘤机理 • 白介素12可能的临床应用 • 白介素12的历史 • 白介素12在国外的现状 • 白介素12申报国内肿瘤治疗的可行性
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2
白介素12的抗肿瘤效果
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3
Interleukin 12 (IL-12) 白介素12
免疫型肿瘤就是能够在接种后不久自动 诱发宿主免疫识别的肿瘤
识别的结果＝肿瘤生长与抗肿瘤免疫共存
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什么是共存（预存）免疫？
肿瘤与抗肿瘤免疫之间的平衡 • 宿主免疫系统对肿瘤抗原有特异性识别 • 肿瘤通过提供抗原维持这个免疫应答 • 这个免疫应答对肿瘤有遏制作用 • 应答的性质属于Th1型细胞应答
0%
0
10
20
30
40
接种
治疗
天数
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白介素12的抗肿瘤机理研究
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Cy+IL-12的抗肿瘤作用是Th1型T免疫应答
宿主
正常 裸鼠 （T和B细胞缺失）
T细胞受体敲除鼠
（T细胞缺失）
咖玛干扰素敲除鼠 （Th 1型缺失）
白介素-4敲除鼠 （Th 2型缺失）
治愈率
10/10 0/5 0/20 0/20 10/10
治疗（起始天数）
对照
Cy+IL-12 (18)
对照
Cy+IL-12 (14)
治愈率（存活天）
0/5 (20-27) 5/5 (>90) 0/5 (21-31) 8/8 (>90)
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IL-12和Cy+IL-12在Sa1腹水肿瘤模型中的治疗效果
100% 50%
对照
IL-12
Cy+IL-12 Cy
存活率
7-15 mm (10-14) 4-13 mm (7-14) 5-14 mm (7-14)
6-10 mm (14) 5-17 mm (7-12)
cure rate
5/5 4/5
4/5 12/15 6/10
0/10 0/10 0/10 0/5 0/10
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免疫型肿瘤 与
共存(预存)免疫的概念
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由抗原呈递细胞在受到外源物质（包括内毒素）刺 激时分泌
属于“危险信号”之一：和外源侵入相关 修饰T细胞或者NK细胞，决定后天免疫走向 先天免疫与后天获得性免疫之间的衔接因子 刺激靶细胞g-干扰素分泌（Th1型免疫应答） 至今发现的最有效的抗肿瘤单因子 作用与范围与内毒素十分相似 单独用药可以治愈小肿瘤（<1cm)
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30
预存免疫的状态决定IL-12或Cy+IL-12疗效
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wenku.baidu.com31
免疫细胞转导试验步骤
正常供体小鼠
肿瘤疫苗
T细胞缺失受体小鼠
肿瘤接种
14 day
肿瘤接种 排斥接种
T cell
输入T细胞
2 day
IL-12/Cy+IL-12 治疗
治疗效果?
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预存免疫在白介素12治疗中的关键作用
输入细胞
无 未分化T细胞 未分化T细胞 未分化T细胞 肿瘤特异T细胞 肿瘤特异T细胞 肿瘤特异T细胞
0/5
荷瘤10天脾脏T cell
生理盐水
0/5
荷瘤10天脾脏T cell
IL-12
3/5
荷瘤10天脾脏T cell
BALB/c: 4T1, S180
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为什么白介素12在有的肿瘤治疗模型里如此 有效，但在其他肿瘤治疗模型几乎无效？
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对白介素12有无应答的肿瘤模型对比
tumor/strain immunogenic
MCA105/B6
yes
MCA203/B6
yes
MCA205/B6
yes
Sa1/AB6F1
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12
环磷酰胺加白介素12治疗6周
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通过白介素12提高化疗的抗肿瘤效果
no Rx IL-12 alone
Cy alone
Cy+IL-12
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18天腹腔实体MCA207肿瘤
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14天静脉注射建立的肺扩散肿瘤模型
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Cy+IL-12在腹腔及肺扩散肿瘤模型中的治疗效果
接瘤途径
i.p.腹腔 i.p.腹腔 i.v.肺扩散 i.v.肺扩散
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与肿瘤排斥所对应的强免疫反应
治疗之前
治疗之后
CD4
CD8
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白介素12启动的抗肿瘤免疫细胞分布
T细胞
巨嗜细胞
例子1
例子2
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巨噬细胞可能是靶效应细胞的证据
H&E组织学染色
巨嗜细胞染色
T 细胞染色
TUNEL自杀细胞染色
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白介素12启动的抗肿瘤免疫应答对肿瘤增生的抑制
对照 溴嘧啶标记肿瘤增生 治疗
治疗
IL-12 生理盐水
IL-12 Cy+IL-12 生理盐水
IL-12 Cy+IL-12
治愈率
0/10 0/8 0/8 0/5 1/10 9/12 10/10
受体：带MCA207肿瘤14天的T细胞缺失小鼠
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荷瘤鼠作为T细胞供体（预存免疫）的试验
供体细胞
治疗手段
治愈率
荷瘤0天脾脏T cell
Cy+IL-12
yes
CT-26/CB6F1 yes
MCA101/B6
no
B16/B6
no
Lewis lung/B6 no
Pan02/B 6
no
4T1/CB6F1
no
tumor size (day)
13-17 mm(14) 10-14 mm(14)
9-15 mm (14) 12-22 mm(10-14)
10-13 mm(14)