苏云金芽孢杆菌四个亚种对温度和pH值的耐受性
苏云金芽孢杆菌特性
苏云金芽孢杆菌特性
苏云金芽孢杆菌是一种有芽胞的杆菌，可以分离出苏云金菌株。
苏云金芽孢杆菌在培养基上呈现出较为复杂的生长特征，包括芽胞的形成和分裂、细胞壁的生成等。
苏云金芽孢杆菌具有较强的耐热性和抗药性，能在高温条件下存活并繁殖。
此外，苏云金芽孢杆菌还具有较高的生物转化能力，能够利用多种有机物作为碳源进行生长。
苏云金芽孢杆菌在自然界中广泛分布，常见于土壤、水体和动植物体内。
它对人体健康无直接威胁，但可能造成食物污染，因此需要注意防控。
苏云金芽孢杆菌菌剂培养条件的优化及毒力测定
现代农业研究Modern Agriculture Research第26卷在农作物生产中，经常会发生虫害，与化学农药相比，微生物杀虫剂已成为全球农药产业发展的重点[1-2]。
其中苏云金芽孢杆菌为革兰氏阳性菌，其生长繁殖快，具有较强的适应性，易于人工培养，对直翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目、鳞翅目等多种农业害虫有很强毒杀作用，是目前世界上应用最广的细菌性杀虫剂。
本试验对苏云金芽孢杆菌产芽孢的培养配方和培养条件进行优化，旨在为苏云金芽孢杆菌菌剂的生产提供理论依据。
1材料和方法1.1试验材料苏云金芽孢杆菌WY-197菌株，为吉林农业科技学院生物与制药工程学院微生物实验室保藏菌种；牛肉膏蛋白胨斜面试管培养基：牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 5g/L，琼脂20g/L，分装试管，常规灭菌后备用；液体菌种培养基：不加琼脂，装入250mL 三角瓶中，每瓶装入量100mL，常规灭菌后备用；碳源基础培养基：蛋白胨10g/L，NaCl 5g/L；氮源基础培养基：葡萄糖10g/L，NaCl 5g/L；无机盐基础培养基：葡萄糖10g/L，牛肉膏5g/L，NaCl 5g/L。
以上培养基调pH 值为7.4-7.6。
1.2培养条件的优化培养温度设25、30、35、37、40℃五个水平，培养72h；培养时间设24h、36h、48h、60h、72h 五个水平；培养基初始pH 值设6.5、7.0、7.5、8.0、8.5五个水平。
对芽孢进行染色显微观察，对菌剂进行毒力测定，考查芽孢释放的最适培养温度、时间、pH 值。
1.3培养基质及配方的优化碳源、氮源、无机盐的单因素比较：在供试碳源基础培养基中，分别加入葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、马铃薯粉、玉米淀粉各10g/L；在供试氮源基础培养基中，分别加入酵母膏、蛋白胨、大豆（煮熟粉碎）、鱼粉（粉碎）、麦麸（粉碎）各10g/L；在供试无机盐基础培养基中，分别添加FeSO 4、KH 2PO 4、MgSO 4各4g/L，以及FeSO 42g/L+KH 2PO 42g/L、Fe-SO 42g/L+MgSO 42g/L、KH 2PO 42g/L+MgSO 42g/L。
苏云金芽孢杆菌的缺点
苏云金芽孢杆菌存在的问题及发展方向与化学农药相比，苏云金杆菌制剂安全性强，但产品的稳定性差，残效期短，杀虫速度慢，而且受施用环境影响大。
苏云金杆菌制剂作为微生物农药，要取代化学农药，除了依*人们生态意识的提高，更要从技术上达到高效价、低成本、规模化，从选育菌种、降低培养基成本、提高发酵控制水平、减少后处理过程中毒效损失等各环节优化。
寻找新的高活性菌株近30年来人们已分离出大量苏云金杆菌的菌种。
现在大约已知有69个血清型，82个血清亚种。
大多数生产厂家主要使用血清III型、V型、VII型菌株,包括HD−1, Bt−K, 8010等。
针对苏云金杆菌菌种发酵效价低、杀虫谱窄、见效慢、菌种退化等问题，可以采用诱变的方法筛选高毒力的菌株，选择合适的诱变剂量，将化学诱变和物理诱变结合能显著提高突变率。
丁学知等将菌株7012C经紫外线和两次亚硝基胍的交替复合诱变，菌株的毒力与原始菌株相比提高了7.5倍。
目前许多科学家致力于采用遗传工程的办法，对原有的ICP基因重组改造，构建成杂种基因或工程菌，以提高杀虫效率，扩大杀虫谱，延长有效期或改进制剂效能。
除了广谱杀虫工程菌，提高杀虫活性的工程菌、延缓抗性的工程菌、延长持效期的工程菌等也已研制成功。
走复配农药增效之路农药合理复配，能克服单个农药制剂本身存在的不足，同时取长补短发挥各自所长。
进行农药复配使用，是一项行之有效的措施。
二种杀虫剂混用时产生的毒效、防治范围，超过各自单独使用时的毒效和防治范围的总和，即１＋１>2。
农药复配有很多优点：１. 延缓和治理抗药性２. 拓宽农药防治谱３. 增效作用４. 降低使用时的毒性、药害或残留５. 节约药剂用量，降低防治成本６. 方便使用，省工省力省时武大绿洲的产品就是采用的这种方式，从大面积的田间试验表明，病毒杀虫剂和苏云金杆菌合理复配后，毒力、杀虫谱都大大提高，许多品种的杀虫剂杀虫效果已经超过了化学农药，而且用量更少，用药次数更少。
苏云金芽孢杆菌杀虫剂作用机理及应用
苏云金芽孢杆菌杀虫剂作用机理及应用一、苏云金芽孢杆菌杀虫作用机理1、苏云金杆菌致病机理苏云金杆菌对昆虫的致病作用是通过它所产生的毒素和芽孢而引起的。
一般是伴孢晶体的毒素使昆虫发生毒血症而死亡，由于晶体毒素对昆虫中肠上皮有破坏作用，使肠壁受损，中肠的碱性、高渗内含物进入昆虫血腔，使血液pH升高导致染病幼虫麻痹而死亡。
而芽孢是在肠道中萌发为菌体通过由晶体毒素破坏的中肠肠壁进入血腔，菌体在血腔中进行繁殖从而引起昆虫败血症的发生，造成染病昆虫的死亡。
而β-外毒素是RNA聚合酶的竞争抑制剂，可干扰昆虫有关激素的合成，从而导致幼虫发育畸形或不能正常化蛹。
苏云金芽孢杆菌虽然有较强的杀虫能力，但它必须经吞食过程进入体内才能杀死昆虫。
因此，在实际应用中，将其与吸引昆虫的物质一起喷洒，可以增加昆虫吞食的可能性。
二、苏云金芽孢杆菌在害虫防治上的应用苏云金芽孢杆菌类的各变种对鳞翅目、膜翅目、直翅目、双翅目、鞘翅目等350余种昆虫有不同程度的防治效果，但主要应用于防治下列害虫。
1、经济作物类棉铃虫，红铃虫，造桥虫，烟青虫。
2、蔬菜类菜青虫，小菜蛾，菜螟。
3、粮食作物类二化螟，三化螟，稻苞虫，稻纵卷叶螟，玉米螟等。
4、果树类松毛虫，桃小食心虫，尺蠖，大袋蛾，卷叶蛾等。
三、苏云金芽孢杆菌的使用方法苏云金芽孢杆菌杀虫剂效果对虫龄越小防治效果越好，使用时必须掌握好时机和用量。
苏云金芽孢杆菌农药药效较慢，一般害虫进食30min后停止为害作物，24h开始死亡，48h达到死亡高峰，72h死亡率达95%以上。
1、单用喷粉，喷雾均可。
2、混用为提高药剂的防治效果，特别是在害虫大发生和多种害虫混合发生时，可与非碱性的杀虫双、杀虫单、甲胺磷、三唑磷等常用化学杀虫剂混用，作用互补，效果更佳。
但必须现配现用，最好不和其他杀菌剂混用，以免影响防治效果。
3、与其他生物农药混用可与白僵菌，小菜蛾GV等混用。
四、苏云金芽泡杆菌使用注意事项：1、温度使用苏云金芽孢杆菌制剂的适宜温度在25℃以上，温度过低完全失去杀虫作用：在25～30℃时使用，其防治效果比10～15℃时高出1～2倍，温度低于20℃时最好不使用。
微生物农药苏云金杆菌G033A
微生物农药苏云金杆菌G033A
刘华梅;许国建
【期刊名称】《农药科学与管理》
【年(卷),期】2018(039)004
【摘要】中文通用名称：苏云金杆菌G033A英文名称：Bacillus thuringiensis G033A理化性质：苏云金杆菌（简称Bt）G033A为芽孢杆菌属,苏云金芽孢杆菌种,kurstaki亚种,微生物类杀虫剂。
CAS RN.：68038-71-1。
不溶于水和有机溶剂,紫外线可杀灭。
pH4～7时稳定,pH11～12时1h内完全水解。
干粉40℃内稳定,水浓缩液保存0.5年,21～25℃1年.
【总页数】2页(P59-60)
【作者】刘华梅;许国建
【作者单位】
【正文语种】中文
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种植技术-苏云金芽孢杆菌是什么？
种植技术-苏云金芽孢杆菌是什么？苏云金芽孢杆菌又叫苏云金杆菌(简称Bt)是目前产量最大、使用最广的生物杀虫剂。
苏云金芽孢杆菌杀虫剂具有专一、高效和对人畜安全等优点目前苏云金杆菌商品制剂已达100多种，是世界上应用最为广泛、用量最大、效果最好的微生物杀虫剂，因而倍受人们关注。
因此种地网整理了苏云金芽孢杆菌的杀虫原理及防治对象与注意事项，以下详细列举出来供网友们参考。
苏云金芽孢杆菌可以防治的害虫：苏云金芽孢杆菌对鳞翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目、同翅目等害虫效果突出，如菜青虫、小菜蛾、甜蛾、斜纹夜蛾、甘蓝夜蛾、烟青虫、玉米螟、稻纵卷叶螟、二化螟、茶毛虫、茶黑毒蛾、食心虫、尺蠖、稻苞虫等。
苏云金芽孢杆菌的杀虫原理：苏云金芽孢杆菌是一种微生物低毒杀虫剂，一般以胃毒为主。
苏云金芽孢杆菌主要成分是细菌毒素和芽孢，作用方式为胃毒。
苏云金芽孢杆菌可产生两大类毒素，即内毒素和外毒素，在害虫吞食菌粉后，由于毒素的作用下，害虫很快就停止取食，不再继续危害，最后害虫因饥饿和死亡而外毒素作用缓慢，在蜕皮和变态时作用明显，这两个时期是RNA合成的高峰期，外毒素能抑制依赖于DNA的RNA聚合酶。
苏云金芽孢杆菌在害虫吞食菌粉后1~2小时即中毒停食，同时菌粉在虫体内萌发，大量繁殖，使害虫死亡。
整个过程一般在1~2天，因此使用时应比常规化学药剂提前2～3天，且在害虫低龄期使用效果较好。
苏云金芽孢杆菌的药剂残留期约为10天。
苏云金芽孢杆菌注意事项：注意一、苏云金芽孢杆菌在气温较高时（一般在20度以上）才能充分发挥作用，因此在7~9月份施用效果最好；在施用苏云金芽孢杆菌时应该比使用化学农药提前2~3天为好。
注意二、苏云金芽孢杆菌对蜜蜂、鱼类无毒，但对蚕类有剧毒作用，因此在养蚕地使用应该谨慎使用。
注意三、苏云金芽孢杆菌在施用过程不不可以与杀菌剂混用。
苏云金芽孢杆菌生物杀虫剂概述
苏云金芽孢杆菌生物杀虫剂概述[摘要]苏云金杆菌是一种在自然界中广泛分布的好气芽孢杆菌，它能产生特异性的杀虫结晶蛋白, 对鳞翅目、双翅目、鞘翅目、膜翅目、螨类和线虫等许多有害的昆虫有毒杀作用。
[关键词]苏云金芽孢杆菌历史杀虫机理苏云金杆菌(Bacillus.thuringiensis.简称Bt)从自然界分离出来的昆虫病原细菌，革兰氏染色阳性，在芽孢形成期间能产生伴胞晶体。
它是一类发展时间最早的生物杀虫剂，在害虫的综合防治中已经成为一种占主导地位的生物农药。
自商品化以来，Bt 产品就以其高效安全、对目标害虫的特异性、生物降解无残毒等优点而倍受亲睐，并逐渐成为研究最深入、应用最广泛的生物杀虫剂。
然而Bt 目前仍然不能完全替代化学农药，因为它在具有绿色、环保等优势的同时也具有一些重大缺陷，主要是产品的稳定性较差、残效期短、杀虫速度慢等，另外货架寿命短也是限制其发展的重要因素。
为此人们不断地对它进行改造。
一、苏云金芽孢杆菌的研究历史1901年，日本学者石渡繁胤(S.Ishiwata)从虫尸体液中分离出一所谓的猝倒细菌(Sott bacteria)。
按现在的分类系统，该菌就是现在苏云金杆菌猝倒变种(Bacillus.thuringiensis var.sott)。
石渡繁胤的发现，成为苏云金杆菌研究的起点[6]。
1911年，Berliner分离出一种杆菌，他详细描述了该菌的形态和培养特征，并定名为苏云金杆菌(Bacillus.thuringiensis)。
他指明苏云金杆菌含伴孢晶体(Paraspora crystl)，但不曾说明伴孢晶体有杀虫的作用。
Berliner所定名的苏云金杆菌按现在的分类系统，应该是苏云金杆菌苏云金变种(Bacillus thuringiensis var. thuringiensis)。
1938年，第一个苏云金杆菌商品制剂Sporeine，在法国问世，并用于防治地中海粉螟。
1953年，Hannay第一次发现苏云金杆菌的杀虫活性与伴孢晶体有关。
微生物实验
题目苏云金芽孢杆菌的培养林方波20085808（食品科学与工程08-2班）摘要: 本实验采用发酵培养基和肉汤培养基在不同的pH值下对苏云金进行培养，通过蒽酮硫酸法、芽孢染色法、平板计数法分别对苏云金芽孢杆菌的总糖含量、芽孢产率和菌种数来观察苏云金芽孢杆菌培养状况。
实验结果表明苏云金芽孢杆菌在Ph=7（中性）时生长最好、菌种数最多、总糖含量最高，在弱酸性和微碱性环境中生长其次，在酸性条件下生长较差。
Summary：This experiment used fermentation and gravy in different medium under the pH value of some cultivated through anthracene ketone hydrate-sulfuric dyeing method, spores, plate counting method for some respectively the bacillus total sugar content, spores strains of production rate and the number of observation some bacillus cultivation status. Experimental results show that some bacillus in Ph = 7 (neutral) growth is best, in weak acid and micro alkaline environment growth next, in acid conditions poor growth.关键词：苏云金芽孢杆菌pH值培养keyword：Bacillus thuringiensis pH value cultivation前言：苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis简称BT)是一种革兰氏阳性细菌．其特征是在形成芽孢的同时，可以形成一种杀虫晶体蛋白组成的伴胞晶体，这种晶体对多种农业害虫具有杀虫活性．苏云金杆菌目前主要用于防治直翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目，特别是鳞翅目的多种害虫，苏云金杆菌杀虫剂属无公害生物农药，有杀虫效果良好、且对人畜安全、不伤害害虫天敌等特点…，然而目前我国每年生物农药用量仅8000t，在农药总量中不到1％，离生产需要相差甚远．由此可见，生物农药具有很好的发展前景．20世纪80年代以来，世界各国都在研究将苏云金杆菌抗虫特性转移到植物上，让植物直接对抗害虫．我国已通过遗传工程手段将苏云金杆菌抗虫基因成功导入棉花、水稻、烟草上，培育出抗虫棉、抗虫水稻和抗虫烟草；美国、英国、法国、德国、俄罗斯和日本等国都已通过原生质体融合、基因转导等基因操作培育出许多抗虫作物，并已应用于生产中。
苏云金芽孢杆菌简介
一、概述
4、菌株用途
随着人们的环保意识不断增强，生物农药正在 引起越来越多的关注. 苏云金杆菌制剂克服了 传统化学农药污染环境、危害人畜、易产生抗 性等缺点，具有选择性强、安全、原料简单等 优点，在生物杀虫剂市场中所占份额也日益增 加。
体积比一般 病源菌分子 大四倍数， 占据空间优 势，抑制有 害菌的生长 繁殖。
二、生殖特点
活化、萌发
休眠芽孢
脱出
营养体细胞
二分裂 增殖
芽孢
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三、分离培养基
三、分离培养基
应用值 牛肉膏 蛋白胨 氯化钠 琼脂 水 醋酸钠
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苏云金芽孢杆菌
目录
概述 菌株特点 分离培养基 纯化培养基 菌株其他特征
菌株应用性
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一、概述
一、概述
1、文章名称《生物农药苏云金芽孢杆菌的研究 进展》
文献来自过程工程学报第4卷 第3期 《生物农药苏云金芽孢杆菌的研究进展》
二、形态特点
形态特点
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其菌体为短杆状， 生鞭毛，单生或 形成短链
二、生理特点
1. 繁殖快速：
2. 生命力强：
3.体积大：
代谢快、繁 殖快。
可耐低温－ 60℃、耐高温 +280℃，耐 强酸、强碱、 抗菌消毒、耐 高氧、低氧。
PH
作用 提供碳源、氮源 提供碳源、氮源 提供钠离子，维持钠钾平衡 凝固作用 溶剂作用 筛除杂菌 最适PH
5g 10g 5g 20g 1000mg 34g/L 7.0-7.2
三、分离培养基
醋酸钠作用原理
加入醋酸钠的培养基可以选择性的抑制苏云金芽孢杆 菌的芽孢萌发，经热处理而不被杀死，而其他种类的 芽孢杆菌的芽孢不被抑制萌发，经热处理而被杀死。 从而消除干扰菌已达到高效分离筛选菌的目的。使得 菌落与苏云金芽孢杆菌类似的干扰菌大大减少。
苏云金芽孢杆菌
苏云金芽孢杆菌前言化学杀虫剂的长期使用对生态环境产生了严重的破坏，而害虫种群的抗药性也日益提高，因此生物杀虫剂因为其“绿色环保”的特点日益引起人们的广泛关注。
其中以自1901年日本学者从家蚕体内分离到以来的被广泛应用到植物病虫害的生物防治的苏云金芽孢杆菌最为有名。
苏云金芽孢杆菌是目前世界上产量最大、应用最广的生物杀虫剂。
其形成的蛋白晶毒素能够对鳞翅目、膜翅目、双翅目、鞘翅目、食毛目、直翅目等9个目500多种害虫具有毒杀作用，同时还对线虫、瞒虫、原生动物等害虫有特异的杀虫活性。
并且科学家关于苏云金芽孢杆菌的科学研究已经有很长的历史，自二次世界大战后，苏云金芽孢杆菌被广泛使用，至今已有60多年。
1、苏云金芽孢杆菌杀虫剂历史研究以及其应用苏云金芽孢杆菌最初是日本人石渡繁胤于1901年首次从有病的家蚕虫体内分离，并且证明其对一些鳞翅目的昆虫具有杀虫活性。
1911年，德国人恩斯特·贝尔林纳从德国苏云金省的地中海粉螟虫体内又重新分离出一种高效杀虫的细菌，并正式定名为苏云金芽孢杆菌(Bacillusthutingiensis n.sp.)。
[5]至今为止，苏云金芽孢杆菌杀虫剂是世界上应用最成功的生物杀虫剂。
并且，科学家对于苏云金芽孢杆菌的研究已经有100a的历史。
自二次世界大战后，苏云金芽孢杆菌被广泛使用，至今已有60多年。
而且以苏云金芽孢杆菌杀虫毒蛋白为活性的生物杀虫剂年销售额占全球生物杀虫剂的95%以上。
但是因为其推广力度以及人们的农药使用意识的传统观念，目前生物农药仅占全部农药市场5%～8%，从此可看出，苏云金芽孢杆菌杀虫剂任然有具有较大的发展潜力。
同时，苏云金芽孢杆菌被认为是对环境安全友好的生物杀虫剂，生产过程符合环境安全保护的要求，喷撒杀虫剂后在野--外残留少。
苏云金芽孢杆菌农药生产成本较低，主要原料为淀粉、蛋白胨和豆粕粉等。
生产和使用苏云金芽孢杆菌杀虫剂具有如下优点：(1)大罐液体发酵生产，生产工艺简单，设备投资少，生产成本低；(2)原材料来源广泛，均为农、副产品，价格比较便宜；(3)建厂周期短；(4)产品杀虫谱广，对鳞翅目的200多种害虫均有毒杀作用；(5)使用Bt杀虫剂对环境和水源无污染，对人畜无害。
苏云金芽孢杆菌的研究——综述
苏云金芽孢杆菌的研究摘要苏云金芽孢杆菌是目前应用最广泛、研究最深入、生产量最大的微生物杀虫剂。
目前已发现多种Bt亚种或血清型对害虫具有杀虫活性,同时也发现了一些新的杀虫晶体蛋白，通过纯化得到高效的杀虫晶体蛋白也是目前研究热点之一。
本文简要介绍了Bt的发展历史、晶体蛋白的纯化及在杀虫方面的一些应用。
关键词苏云金芽孢杆菌、历史、伴孢晶体、杀虫苏云金杆菌(Bacillu .thuringiensis，简称Bt)是一种革兰氏阳性芽孢杆菌，为昆虫病原细菌，其菌体为短杆状、有鞭毛，一般单生或形成短链。
在芽孢形成期可产生具有杀虫活性的伴孢晶体,且伴孢晶体(原毒素)对鳞翅目或双翅目等多种昆虫具有毒杀活性[15]。
苏云金杆菌是一种应用广泛的绿色环保型微生物杀虫剂，全世界年产值已突破1亿美元[1]。
自20世纪60年代实现工业化生产以来,已成为世界上用途最广、商业开发最成功、产量最大的微生物杀虫剂,每年以20%的速度增长[2,3]。
苏云金杆菌杀虫剂的稳定性较差、残效期短、杀虫速度慢等问题都待解决，关于苏云金芽孢杆菌的研究都将继续进行。
1Bt的发展历史1901年，日本学者石渡繁胤(Ishiwata)从虫尸体液中分离出苏云金杆菌猝倒变种(Bacillus.thuringiensis var.sott) 成为苏云金杆菌研究的起点[4]。
1911年，Berliner 发现一杆菌，并详细描述了该菌的形态和培养特征，定名为苏云金杆菌(Bacil-lus.thuringiensis)，指明苏云金杆菌含伴孢晶体(Paraspora crystl) 。
1938年，苏云金杆菌商品化，用于防治地中海粉螟。
20世纪50年代许多国家进行了商业性生产。
从发现该菌至今已有整整105年历史,世界上有超过万篇的研究报道,涉及生物学、分类命名、有效成分、杀虫机理、分子生物学、遗传学、产品化和安全性,包括近年来的转基因植物等诸多方面[5]。
1953年，Hannay第一次发现苏云金杆菌的杀虫活性与伴孢晶体有关，并和Fitz-James于1955年证实，伴孢晶体是一种蛋白质。
苏云金杆菌杀虫剂
苏云金杆菌杀虫剂的特点及应用苏云金杆菌是目前世界上研究最深入, 应用最广泛的微生物杀虫剂, 对人畜安全, 不伤害控制害虫群体的天敌, 不污染环境, 是生物防治害虫的重要组成部分, 更适合农作物虫害的综合防治。
1.苏云金杆菌杀虫剂有利于虫害的生物控制研究,防治后调查生防田主要捕食性昆虫天敌比化, 主要捕食性1∶200 以上水平, 可将防治伏蚜时间推迟10～15d, 减少防治1～2 次。
2.苏云金杆菌杀虫剂控制虫害的后效作用以低剂量苏云金杆菌饲喂棉铃虫3 龄幼虫和成虫, 结果发现Bt. 对幼虫及成虫存在明显的后效作用, 即幼虫和成虫的生长、发育、繁殖受到明显抑制。
1985 年在广西隆安县从未施过Bt 菌剂的柑桔园中喷洒Bt 菌剂Bt5a5b。
1986 年对该园的土壤和柑桔叶片取样分析, 结果表明, 施菌区土壤及叶片的Bt5a5b检出率均高于不施菌剂的对照区。
1987 年检测果园的鳞翅目害虫, 施菌区活虫的Bt 检出率为51.4%,其中Bt5a5b 占60.2%; 死虫的Bt 检出率为81.3%, 其中Bt5a5b 占67.1%。
对照区活虫Bt 检出率为20.5%, 其中Bt5a5b 占34.3%; 死虫的Bt 检出率为35.7%,仍残留一定量的Bt,3.性据冯夏等报道,基因控制,生物测定发现: 用)2 龄幼虫和取食人工饲料正, 毒效高2 倍多。
在大田试验示范中, 用苏云金杆菌制剂在棉铃虫卵孵高峰期防治1 次,3d 后,根据田间幼虫实际残留量, 再用化学杀虫剂防治, 可提高防效15%～25%。
福建农林大学植保系吴刚等人对苏云金杆菌预处理小菜蛾对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的增效作用的研究结果表明, 苏云金杆菌预处理抗性小菜蛾幼虫后, 其对甲胺磷、水胺硫磷和克百威的敏感性分别为未处理组的6.74、8.83 和8.5 倍。
4 .苏云金杆菌杀虫剂可用于防治多种鳞翅目农业害虫不同害虫在自然界的生活习性千差万别, 有的食叶, 有的蛀茎, 其习性是影响害虫摄药量的一个重要因素。
苏云金杆菌
苏云金杆菌： 一种能产生伴孢晶体和芽孢的革兰氏阳性细菌，有些亚种还能产生α和β外 毒素。 苏云金杆菌简称Bt,是包括许多变种的一类产晶体芽孢杆菌。可用于防治直 翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目，特别是鳞翅目的多种害虫。
病原形态特征：
在牛肉膏蛋白胨固体培养基上30℃条件下培养，不同时间取样，染色后显微镜下 观察。B-Hm-16营养体细胞为杆状，较为粗壮，大小为1. 2Байду номын сангаас1. 5μm×3. 6～4. 5μm；培养30h可形成较营养体更为粗壮的芽孢囊，染色后可以看到一端着深红色， 另一端不着色；培养36～38h芽孢囊破裂，释放出卵圆形的孢和钝菱形的晶体， 晶体大小为1. 0～1. 2μm×1～2. 0μm。[ 生理生化特征： 苏云金芽孢杆菌WY-197在LB液体培养基中生长良好，可正常产生芽孢和伴孢晶体， 平均生长周期为24 h。其中1～8 h为潜伏期，pH值基本不变；8～12 h为对数生长 期，pH值迅速下降、到对数末期又迅速回升；12～18 h为孢子囊发育期，pH缓慢 上升;18～24 h为芽孢形成期，随着芽孢和晶体逐渐脱落，pH值上升至最高，但在 伴孢晶体完全脱落后，pH值略有下降。[
苏云金杆菌杀虫剂的简介及研究应用情况
苏云金杆菌杀虫剂的简介及研究应用情况作者：魏云阶来源：《卷宗》2016年第02期摘要：微生物防治是目前指防治或者减少害虫的最有效手段之一，其中，苏云金杆菌由于其自身没有毒害作用、不污染环境等特点，在生物防治中占有重要地位，目前在整个生物杀虫剂中占95%，备受世界各国科学家的关注。
本文介绍了苏云金杆菌的特点，并对其在生物防治中的应用情况进行论述。
关键词：苏云金杆菌；微生物防治；生态环境苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）是一种微生物杀虫剂，对人、畜及害虫天敌极少或完全没有毒害作用，不污染环境，保持生态平衡，在农业、林业、卫生害虫的生物防治中占有重要地位。
1 苏云金芽孢杆菌简介苏云金芽孢杆菌是一种革兰氏阳性、杆状、能形成内生芽孢的土壤细菌，其营养体细胞具有周生鞭毛或无鞭毛。
鞭毛是细菌的一种运动器官，因此，具有鞭毛的菌株能运动，而不具鞭毛的菌株不能运动养体在形成芽孢的同时，在细胞的另一端形成不同形态、具蛋白性质的伴孢晶体，它可以是一个、两个或多个。
苏云金芽孢杆菌分类上属于原核生物界，细菌纲，芽孢杆菌科（Bacillaceae），芽孢杆菌属（Bacillus）的一种，在《伯杰氏细菌鉴定手册》第九版中被列为第二类第十八群。
1901年，日本细菌学家石渡从患病的家蚕幼虫上得到了一种杆状芽孢菌，并在1905年发表的另一报告中称之为“碎倒芽孢杆菌”。
但直到1911年Berliner从德国苏云金地区谷仓中患病的地中海粉螟幼虫体内分离到另一株类似的细菌之后，1915年才正式将此昆虫病原细菌命名为苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis， Bt）.1938年，第一个苏云金芽孢杆菌商品制剂Sporeine在法国问世，并在地中海粉螟的防治中得到了应用（戴莲韵等，1997）。
苏云金芽孢杆菌广泛分布于世界各地，从热带雨林到北极冻土带，从土壤、昆虫尸体、植物体表面、贮藏物或仓库灰尘、污水等基质上均可分离到该菌，而土壤为微生物的大本营，是其分布最为丰富的生境。
生物农药苏云金芽孢杆菌的研究进展----朱玮
2004 年 6 月 The Chinese Journal of Process Engineering June 2004生物农药苏云金芽孢杆菌的研究进展 朱 玮， 赵 兵， 王晓东， 王玉春 (中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室，北京 100080)摘要：苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)制剂是目前应用广泛而有效的一种微生物杀虫剂.本文介绍了苏云金芽孢杆菌的菌种优选、发酵过程及剂型研究进展，具体阐述了发酵过程中培养基和发酵条件的优化、各种发酵方式和发酵设备等. 指出了目前发酵生产苏云金芽孢杆菌中存在的问题，提出了解决问题的建议并展望了其发展前景.关键词：苏云金芽孢杆菌；杀虫晶体蛋白；微生物杀虫剂中图分类号：S476+.11 文献标识码：A 文章编号：1009−606X(2004)03−0282−07 １ 前 言 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)于1901年在日本被发现，1911年由柏林纳从地中海粉螟的患病幼虫中分离出来，并依其发现地点德国苏云金省而命名. 苏云金芽孢杆菌简称苏云金杆菌，是内生芽孢的革兰氏阳性土壤细菌，在芽孢形成初期会形成杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal protein)，对敏感昆虫有特异性的防治作用. 1956年前苏联发表了用液体培养基摇瓶培养苏云金杆菌并用于防治菜青虫的报道，从而揭开了苏云金杆菌大规模培养的序幕. 中国从上世纪60年代也开始了规模化生产. 同苏云金杆菌有关的研究，特别是有关分子生物学方面的研究正在持续展开，但在发酵工艺方面还需进一步加强.随着人们的环保意识不断增强，生物农药正在引起越来越多的关注. 苏云金杆菌制剂克服了传统化学农药污染环境、危害人畜、易产生抗性等缺点，具有选择性强、安全、原料简单等优点，在生物杀虫剂市场中所占份额也日益增加[1−3].２ 苏云金杆菌的优选 近30年来已从世界各地的土壤、昆虫及其接触物中分离出大量苏云金杆菌的菌种. 现在大约已知有69个血清型，82个血清亚种[4]. 大多数生产厂家主要使用血清III型、V型、VII型菌株,包括HD−1, Bt−K, 8010等. 在连续的人工转接和生产中，苏云金杆菌会出现芽孢和晶体变小和数量减少、生长速度缓慢等退化性状，一般采用虫体复壮的方法重新得到高毒力的菌株.针对苏云金杆菌菌种发酵效价低、杀虫谱窄、见效慢、菌种退化等问题，可以采用诱变的方法筛选高毒力的菌株. 选择合适的诱变剂量，将化学诱变和物理诱变结合能显著提高突变率. 丁学知等[5]将菌株7012C经紫外线和两次亚硝基胍的交替复合诱变，菌株的毒力与原始菌株相比提高了7.5倍.目前许多科学家致力于采用遗传工程的办法，对原有的ICP基因重组改造，构建成杂种基因或工程菌，以提高杀虫效率，扩大杀虫谱，延长有效期或改进制剂效能. 商品化的苏云金杆菌杀虫剂主要源自库斯塔克亚种，如HD−1及类似菌株. 将cry1C基因导入这类菌株后，可扩充其对甜菜收稿日期：2003−07−28，修回日期：2003−10−23作者简介：朱玮(1979−)，女，安徽省芜湖市人，硕士研究生，生化工程专业，Tel: 010−82627059, E-mail: sesamin@.夜蛾等灰翅夜蛾属昆虫的活性，开发出的产品或制剂有美国的Cutlass和我国的WG系列和BtTnY. 国内一些实验也证明，表达后对夜蛾科昆虫有毒效的cry1E、对双翅目昆虫有效的cry11A及对蚊子有毒效的cryt1A等基因，均可在构建菌株中有效表达，为进一步建立广谱的工程菌打下了基础. 除了广谱杀虫工程菌，提高杀虫活性的工程菌、延缓抗性的工程菌、延长持效期的工程菌等也已研制成功[6−8]. 此外，还可以在体外操作ICP基因后插入新载体，其中包括将cry基因转入假单孢菌以增加持效期、转入植物内生菌防治玉米螟、转入蓝细菌以增强水体中防蚊功能、转入杆状病毒杀虫剂以利用病毒的垂直传播的特性等. 与传统育种方法相比，构建的工程菌不仅能提高本身性状，而且可以有目的、定向地增加新的性状. 这些工程菌有的已开发出制剂并投入田间应用，有的还处于研究阶段，它们的应用效果和开发前景还有待实践检验. 虽然大量的苏云金芽孢杆菌基因已进行过序列分析，但毒性受体、作用机制及抗性机制综合研究还很有必要. 苏云金杆菌工程菌建立后，还需考察其基因表达量、遗传稳定性以及生产工艺[9]. ３ 苏云金杆菌的发酵工艺 苏云金芽孢杆菌发酵生产包括液态发酵和固态发酵两种方式.３．１ 液态发酵 液体发酵是目前苏云金杆菌杀虫剂大规模生产中的主要发酵方式，其产品杀虫毒力与其发酵水平有着密切的关系. 发酵过程的研究主要集中在培养基组份和浓度、培养过程的通气量、温度、溶解氧量等因素对芽孢数、伴孢晶体及毒力效价影响的相关性研究上.3.1.1 培养基的优化Yousten等[10], Rogoff等[11], Nickerson等[12]对苏云金杆菌的基本营养需要、代谢途径、伴孢晶体形成和抑制伴孢晶体形成的因素等作了研究，为苏云金杆菌制剂的生产提供了生理学依据[13,14]. 苏云金杆菌对培养基的要求不严，多种因地制宜的农副产品都可被其吸收利用，但对多种不同来源的复合培养基，不同的菌种要实现可行的工业生产需要有针对性地进行培养基优化. Dulmage[15]在研究两种培养基对12个亚种的影响后发现，不同亚种在同一培养基中或同一亚种在不同培养基中，产生的活芽孢数和杀虫活性会相差几倍到几百倍不等. 因此，菌种和培养基组份均对发酵产品的毒力效价有重要影响. 为了获得高效价水平的发酵培养基配方，研究人员相继采用正交设计、快速登高法、优选法或二次正交旋转组织设计等方法进行优化筛选，验证后用于工业生产.在深层液态发酵中，培养基的浓度和碳氮比很重要. 早期研究发现[16]，随培养基营养成份浓度增加，芽孢数和毒蛋白随之增加. Arcas等[17]将培养基中的葡萄糖浓度从8 g/L增加到56 g/L后，毒力水平和芽孢数也分别提高了6和7倍. 但是浓度过高会抑制其生长，不能形成正常的芽孢和毒蛋白. 培养基浓度在一定范围内增加，必需营养元素浓度加大，有利于细胞的生长和芽孢的生成；而当培养基浓度过大，粘度增加，物质交换速度下降，局部代谢产物不能及时排出，氧传递速度降低，苏云金杆菌的生长受到抑制，芽孢数也随之下降.保持合适的碳氮比对高效价产品生产也很关键，不合适的碳氮比会导致pH不能回升而影响最终产量. 在半合成培养基中，苏云金杆菌在对数生长期由于利用葡萄糖产生丙酮酸、醋酸，pH 下降到4.8∼5.0，几小时后这些物质再次被利用，pH回升，芽孢和晶体开始形成. 如果对数生长期后pH不能回升而一直在6.0以下，芽孢和晶体都不能形成. 苏云金杆菌在芽孢形成的初始阶段，菌体合成一种胞外蛋白酶，参与伴孢晶体的蛋白质转化合成过程，而这种酶的合成和酶活性最适pH均为中性，pH在6.5以下或9.1以上该酶活性急剧下降，丧失形成这种酶的能力的变异株既不能形成芽孢也不能形成晶体[14].在培养基优化时要综合考虑碳氮比和营养物浓度这两个因素. 不同的菌种有不同的生理特性和相应的营养需求[18−20]. Farrera等[21]在培养基碳氮比为3∼11和培养基浓度60∼150 g/L条件下分别对苏云金杆菌HD−73实验，发现当碳氮比为7时，不同浓度条件下毒蛋白产量都是最高，而培养基浓度每增加2.5倍，毒蛋白量增加6倍，芽孢数则在碳氮比为4、培养基浓度为150 g/L时最多.一些微量元素对苏云金杆菌的发酵也有明显的作用. 苏云金杆菌生长繁殖过程中，糖的初级异化是通过E−M途径进入TCA循环的，因此KH2PO4是E−M−P途径中磷酸化过程不可缺少的物质；KH2PO4的缓冲作用有利于芽孢和晶体的形成[14]. 矿物质钙元素也是苏云金芽孢杆菌必需的元素. Ca2+在芽孢皮层形成时与DPA结合形成DPA−Ca复合物，促使形成不可逆热稳定芽孢，而且明显影响伴孢晶体的外蛋白酶的合成.苏云金杆菌培养基还可利用碳氮源丰富的工业废水进行生产[22−25]. 例如，味精厂高浓度有机废水本身含有丰富的氮源，酒糟废液中富含未被利用的碳水化合物、脂肪、灰份、氨基酸和多种维生素. 逐渐提高废水浓度和浓缩倍数的方法可使苏云金杆菌适应恶劣的废水培养环境，获得在废水中正常生长且具有高毒力单位的驯化菌株. 在使用废水前进行预处理也很重要，Maria等[26]以7种不同来源的废水交替作为生产苏云金杆菌的培养基，用作培养基的废水包括未经预处理、酸水解处理和水解污泥离心后的上清液，结果发现酸水解处理的培养基毒蛋白产量提高. 这样的发酵过程不仅节约能源，降低了生产成本，而且在治理环境的同时变废为宝.3.1.2 发酵条件目前苏云金杆菌的培养温度多采用(30±1)o C，温度低于28o C发酵的周期会延长，但温度超过37o C时伴孢晶体数量几乎为零. 苏云金杆菌在对数生长期要消耗大量的氧气，并相应释放出大量的热量[27]. 如果中断供氧，细胞停止生长，不能形成芽孢和晶体，最终导致细胞自溶. 通气量与供氧直接相关，增加通气量和搅拌速度可以加速氧传递、代谢物质的交换及热量的释放，具体的数值需根据发酵设备、容量、培养基成份和菌体不同的生长阶段确定.3.1.3 发酵方式液态发酵有分批发酵、补料分批发酵、连续发酵等方式. 分批发酵一次性投料和放罐，产品质量比较稳定，设备和操作技术水平要求不高，目前很多厂家都采用这种方式. 但要达到较高的发酵水平，需要使用高浓度培养基. 在一次性投料时，高浓度培养液容易产生基质和代谢产物的抑制，同时培养基的粘度增加后，由于影响混合和流动而不利于氧的传递. 苏云金杆菌是快速好氧菌，若氧气供应不足生长繁殖就会受到很大影响，因此单纯的分批发酵难以实现细胞的高密度培养. 连续发酵可以解决发酵中存在的这种问题. 由于一级连续发酵芽孢形成率低，研究者尝试使用第一级连续第二级间歇的二级发酵方法以及变温二级发酵. Acras等[17]用梯度连续流加的方法也使芽孢晶体增加1倍多. 但经过较长时间的连续培养后很容易染菌，菌种易发生退化，因此要实现大规模的连续发酵生产仍然存在很多问题，不仅有一定的设备要求，还需要较高的操作技术.补料高密度培养介于分批培养和连续培养之间，兼有两者的优点，而又克服了两者的缺点. 多组实验表明[28]，在其它条件相同的情况下，补料发酵的细胞密度、晶体含量和毒力效价综合平均值高于分批发酵. 寻求最佳的补料时间和流加速率十分重要，对不同的物料和菌种及生产目的，可有多种方案. 在发酵过程中，淀粉首先被液化酶分解为低分子糖，再被利用. 发酵4∼8 h细胞吸收养份，个体增大并且分裂增殖合成蛋白质核酸，碳源等能源物质消耗较快. 针对葡萄糖的消耗情况，在发酵中可以适时适量地添加葡萄糖，在工业生产中也可以使用淀粉液化液达到同样效果. 补料发酵的需氧高峰相对平缓，在生长旺盛期较易避免溶氧低谷，对生产过程改善溶氧从而确保高密度培养具有实际意义[29,30].3.1.4 发酵设备苏云金杆菌的液态发酵设备主要参照传统的抗生素发酵生产模式建立. 发酵过程中的不同阶段耗氧速率各不相同，发酵过程往往会出现低于临界溶氧值的缺氧期，因此加快溶氧速率是工业生产中需要解决的问题. 使用传统的机械搅拌罐可以变速搅拌，在细胞增殖前期和后期采用低转速搅拌，中期采用高速搅拌，不同时期的最佳转速应根据溶氧曲线的变化进行调整[31]. 但机械搅拌罐受结构限制，罐体高径比小，不能较多地利用无菌空气中的氧气. 最近几年新出现的气升式发酵罐无机械搅拌装置，它利用空气作为搅拌动力，使罐内的不同区域形成密度差和宏观循环流得以混合. 它具有结构简单、无运动部件、无菌操作可靠性高、耗电少、造价低等优点，适合苏云金杆菌的发酵. 李稳宏等[32]将冷模实验中优化选择出的外环流气升式反应器与机械搅拌罐作平行实验，结果表明该工艺不仅操作方便、控温精度高，与普通的机械搅拌发酵罐相比，在规模和培养基等条件相同的情况下，发酵周期由42 h缩短到33 h，细胞密度增加了35%. 杨建州[33]的发酵实验表明，折流元件可改善环流反应器的发酵性能，并将研究结果放大到20 m3的气升式环流反应器中，与工厂同等规模的搅拌式发酵罐相比，在完全省去搅拌功耗又不增加空气用量的条件下，菌体密度在1010 ml−1以上，发酵液的毒力效价高于在机械搅拌式发酵罐内的发酵结果约10%，并且节电30%以上.３．２ 固态发酵 固态发酵起源于我国传统的“制曲”技术，是利用颗粒载体表面所吸附的营养物质来培养微生物. 在相对小的空间内，这种颗粒载体可提供相当大的液气界面，从而满足好气微生物增殖所需要的水份、氧气和营养. Mechalas[34]取得了苏云金杆菌的固体发酵专利权. 简单的固态发酵通常是将含有活芽孢的菌粉或种子液加入培养基，根据自然气候状态在网盘、大池或地坪进行半封闭的发酵，虽然成本低，但是设备简陋，条件粗糙，生产质量低. 随着人们对固态发酵苏云金杆菌特有优势的认识和研究的深入，这项技术逐渐成熟. 研究发现液体种子培养基初始pH值、种龄、发酵温度、固体培养基含水量、微量元素等都是影响芽孢形成和毒力效价的重要因素. 控制含水量可协调发酵过程菌体周围的气液环境，发酵基质中若含水量过大则芽孢、晶体游离晚，发酵周期延长；含水量少则扩散阻力使局部代谢产物积累过多，吸收不到营养物质，物料的高粘度还会影响通风和菌体对氧气的利用，减少了固态发酵液气界面的优势，导致发酵受到抑制. 其它条件如pH值、种龄、发酵温度等可借鉴液态发酵. 杨淑兰等[35]通过苏云金杆菌从实验室实验到百公斤级固体发酵实验，研究了适合苏云金杆菌HD−1固体发酵规模生产的各种条件.能用于苏云金杆菌固态发酵的原材料很广泛，但选择时既要考虑到材料的营养性，也要考虑到它的通气性. 通常可分为有机载体和无机载体. 有机载体如麦麸、米糠、黄豆饼粉、花生饼粉等，这些载体本身就是很好的碳氮源；无机载体如多孔珍珠岩、细沙等，这些则需要另外添加营养成份. 在使用时往往是根据需要结合起来，可以因地制宜地选择一些材料. 张怡等[36]尝试使用废次烟草为主要材料，与麸皮相比，可降低粘度，增加孔隙率. 但考虑到植物叶的挥发性物质对菌种生理生化的影响，还需对烟叶进行浸泡预处理. 啤酒糟作为主要原料也可用于苏云金杆菌发酵[37]. 研究发现不同原料对应的最佳含水量差异也很大.传统浅盘静止发酵存在诸多缺陷，固体物料的非均一性会带来温度、湿度、氧传递等问题. 苏云金杆菌在对数生长期会产生大量的热量，如何使发酵过程中所产热量及时排出，避免料层温度升高而影响菌体的生长和杀虫蛋白晶体等合成，需要设计科学合理的应用于苏云金杆菌的固态发酵设备. 压力脉动发酵[38]、全自动固体发酵系统、转鼓发酵、传送带移动式等发酵设备也在不断的研究和应用中，但目前适于大规模固态发酵的先进设备仍然缺乏，成为限制大规模固态发酵生产苏云金杆菌制剂发展的瓶颈.４ 产品的剂型 苏云金杆菌制剂常用的剂型包括以水为介质的水悬剂、以有机溶剂为介质的油悬剂和以固体填充剂为介质的可湿性粉剂. 近10年来还开发出了水分散性粒剂和胶囊剂等新剂型，已投入使用. 应该根据防治对象和所处生态环境选择方便储存和使用的剂型. 与化学农药相比，苏云金杆菌制剂安全性增强，但产品的稳定性差，残效期短，杀虫速度慢，而且受施用环境影响大. 解决这些问题除了使用合适的剂型外，还可以添加一些辅助剂. 为了增加田间残效，目前使用的辅助剂包括由液态发酵产品制成粉剂所需的吸附剂、使菌剂在表面展着的湿润剂、防止芽孢萌发和其它微生物生长的防腐剂、促进昆虫食欲的引诱剂、防紫外的保护剂，还有粘着剂、乳化剂和增效剂等[2].５ 存在问题及展望 苏云金杆菌制剂作为微生物农药，要取代化学农药，除了依靠人们生态意识的提高，更要从技术上达到高效价、低成本、规模化，从选育菌种、降低培养基成本、提高发酵控制水平、减少后处理过程中毒效损失等各环节优化.在发酵及后处理过程中，液态发酵和固态发酵存在各自的优势和缺点. 液态发酵的流动性好，有利于传质、传热和控制，但液态深层发酵在溶氧技术和设备方面还有改善的潜力，气升式反应器有望用于苏云金杆菌大规模液态深层发酵. 除培养基成本外，发酵液的后处理是制约苏云金杆菌液态发酵生产的重要因素之一. 常用的工艺是吸附−压滤法，加入大量碳酸钙作为吸附助滤的载体，占产品质量的80%∼90%，造成产品效价低、体积大. 还可采用离心、沉淀的方法，但离心工艺需投资高转速的离心设备，且上清液流失了很多有效成份，要求回收. 沉淀法简单，但回收效果差，污染环境. 加强发酵液后处理研究，提高有效成份回收率对液态深层发酵具有重要意义.同液态深层发酵相比，苏云金杆菌固态发酵以麸皮等为载体，发酵后可直接进行干燥、粉碎，步骤简单. 固态发酵在后处理过程中节省了能源，但产品存在湿润性能较差的问题. 国内大部分厂家使用麸皮为主原料，麸皮既是碳源，也是发酵载体，但麸皮粘度大，不利于通风散热，且亲水性差，导致有的产品湿润时间高达十几分钟，达不到三分钟以下的部颁标准. 需要寻找新的、廉价的、营养源丰富、通气好、湿润性能强的原料和载体，或选择合适的表面活性剂处理产品，以使在不影响发酵水平和毒力效价的情况下缩短湿润时间. 苏云金杆菌固态发酵的发酵工艺和设备目前普遍的状况是生产规模小、设备简陋、劳动强度大，由于人工操作造成产品质量不稳定，发酵过程产生的热量不能及时排出而影响了菌体生长和伴孢晶体的形成. 固态发酵正在逐步从浅盘发酵向深层发酵发展，从浅盘式半开放式发酵逐步发展成为全封闭、全自动固态发酵，生产过程逐渐实现计算机在线控制，有效地解决了固态发酵过程中的供氧、散热、湿度调节、防止污染等问题. 在物料准备、蒸料、接种、发酵及干燥等方面，采用连续蒸料、接种，使用洁净封闭式固态发酵设备，发酵、烘干过程在同一设备中顺序完成，形成完整的自动化生产流水线，可以大大改善生产环境，消除人为因素对产品质量的影响，提高产品毒力效价.苏云金芽孢杆菌液态发酵与固态发酵各有优点，应因地制宜地选择生产方式. 预计在今后一定时期内，苏云金杆菌的液态发酵与固态发酵将共存.参考文献：[1] Schnepf E, Crickmore N, V an Rie J, et al. 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苏云金芽孢杆菌简介
一、概述
4、菌株用途 随着人们的环保意识不断增强，生物农药正在 引起越来越多的关注. 苏云金杆菌制剂克服了 传统化学农药污染环境、危害人畜、易产生抗 性等缺点，具有选择性强、安全、原料简单等 优点，在生物杀虫剂市场中所占份额也日益增 加。
一、概述
5、菌株用途 苏云金杆菌培养基还可利用碳氮源丰富的工业 废水进行生产。例如，味精中富含未被利 用的碳水化合物、脂肪、灰份、氨基酸和多种 维生素.
一、概述
6、存在问题及展望 苏云金杆菌制剂作为微生物农药，要取代化学 农药，除了依靠人们生态意识的提高，更要从 技术上达到高效价、低成本、规模化，从选育 菌种、降低培养基成本、提高发酵控制水平、 减少后处理过程中毒效损失等各环节优化.
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苏云金芽孢杆菌
概述 菌株特点 分离培养基 纯化培养基 菌株其他特征
菌株应用性
目录
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一、概述
一、概述
1、文章名称《生物农药苏云金芽孢杆菌的研究 进展》 文献来自过程工程学报第4卷 第3期
《生物农药苏云金芽孢杆菌的研究进展》
一、概述
2、菌株名 苏云金芽孢杆菌 1956 年前苏联发表了用液体培养基摇瓶培养 苏云金杆菌并用于防治菜青虫的报道，从而揭 开了苏云金杆菌大规模培养的序幕. 中国从上 世纪 60 年代也开始了规模化生产。
一、概述
3、菌株特征
苏云金芽孢杆(Bacillusthuringiensis,Bt) , 简称苏云金杆菌，革兰氏阳性、杆状、内生芽 孢 ,是一种重要的杀虫细菌。它的主要杀虫成 分是伴孢晶体,伴孢晶体杀虫蛋白的表达及晶体 化通常依赖于芽孢的分化与形成。在芽孢形成 初期会形成杀虫晶体蛋白，对敏感昆虫有特异 性的防治作用.
苏云金芽孢杆菌筛选及其对蚊科幼虫的杀虫活性
苏云金芽孢杆菌筛选及其对蚊科幼虫的杀虫活性【摘要】本研究旨在探讨苏云金芽孢杆菌在控制蚊科幼虫中的杀虫活性及其作用机制。
首先对苏云金芽孢杆菌进行筛选，筛选出具有较强杀虫活性的菌株，然后通过实验验证其对蚊科幼虫的杀虫效果。
结果显示，苏云金芽孢杆菌对蚊科幼虫具有显著的杀虫活性，且其作用机制主要是通过破坏其消化系统导致死亡。
影响因素包括温度、光照和营养条件等。
实验方法主要包括接种培养、杀虫活性测定等。
苏云金芽孢杆菌在控制蚊科幼虫中具有广阔的应用前景，未来可以进一步研究其在防治疟疾和登革热等重要传染病中的应用。
【关键词】苏云金芽孢杆菌、蚊科幼虫、杀虫活性、筛选、作用机制、影响因素、实验方法、应用前景、研究展望1. 引言1.1 研究背景蚊科幼虫是一种常见的害虫，它们可以传播多种疾病，如疟疾、登革热和黄热病等。
当前主要的控制手段是化学农药，但随着环境污染和抗药性的增加，人们对替代方法的需求日益迫切。
苏云金芽孢杆菌是一种广泛存在于自然界中的细菌，具有很强的杀虫活性。
研究苏云金芽孢杆菌在控制蚊科幼虫中的应用具有重要的意义。
苏云金芽孢杆菌可以通过筛选获得高效的菌株，进而发挥其杀虫作用。
了解苏云金芽孢杆菌对蚊科幼虫的杀虫活性、作用机制以及影响因素，有助于提高其在生物防治中的应用效果。
本研究旨在通过对苏云金芽孢杆菌的筛选和杀虫活性进行深入研究，探讨其在蚊科幼虫的控制中的应用前景，并为未来研究提供参考。
1.2 研究目的研究目的是确定苏云金芽孢杆菌对蚊科幼虫的杀虫活性，并揭示其作用机制。
通过筛选出高效的苏云金芽孢杆菌菌株，探讨其在控制蚊科幼虫中的潜在应用前景。
分析影响苏云金芽孢杆菌杀虫活性的因素，为进一步提高其杀虫效果提供理论基础。
通过实验方法的探索，揭示苏云金芽孢杆菌在控制蚊科幼虫过程中的具体作用方式，为新型生物杀虫剂的研发提供参考。
通过对苏云金芽孢杆菌的筛选和杀虫活性研究，探讨了一种环保、高效的蚊科幼虫防治方法，为蚊媒传播疾病的防控提供新的思路和解决方案。
苏云金芽孢杆菌作业
发酵工艺学作业题目苏云金芽孢杆菌生物农药发酵工艺研究进展学院班级学号姓名苏云金芽孢杆菌生物农药发酵工艺研究进展摘要：苏云金芽孢杆菌（Bt）是一种开发和利用较为成功的微生物生物农药，但也存在着生产成本高、发酵条件难控制等缺点。
本文主要综述了Bt生物农药的发酵工艺研究进展，主要包括BT发酵中的培养基、温度、PH值、通氧量以及发酵时间等方面。
并对Bt生物农药的发展前景作出了展望。
关键词：苏云金芽孢杆菌；生物农药；发酵工艺；展望Review on fermentation of Bacillus thuringiensis Abstract:Bacillus thuringiensis (Bt) is a microbial pesticides,Which has been successful developed and used.The fermentation technology of Bacillus thuringiensis (Bt) in recent years were summarized, including raw material, temperature, pH value, oxygen, fermentation time.In this aricle,the development prospct of Bt microbial pesticides is also put forward.Key words: Bt;microbial pesticides; fermentation technology;forward前言生物农药又可称为绿色农药、生态农药，是20世纪70年代提出的，是指可以用来防治病、虫、草、鼠等有害生物及调节植物生长的生物体或源于生物体的各种生理活性物质。
生物农药不仅具有常规农药的高活性，能大规模工业化生产，而且专一性强，一般不伤害虫的天敌和有益生物，对人畜无毒，不污染环境，可在田间大规模应用。
芽孢杆菌生长条件
芽孢杆菌生长条件
芽孢杆菌是一种常见的细菌，具有较强的耐热性和耐酸碱性。
其生长条件主要包括以下几个方面：
1. 温度：芽孢杆菌生长的温度范围较广，一般为20-60℃之间，但最适生长温度为30-37℃。
2. PH值：芽孢杆菌对PH值的适应范围较广，可以在PH值为5-10的环境中生长，但最适PH值为7-8。
3. 湿度：芽孢杆菌需要较高的湿度条件，通常在60%-80%的相对湿度下生长。
4. 氧气含量：芽孢杆菌可以在氧气充足和缺氧的情况下生长，但是在氧气充足的情况下生长速度更快。
5. 营养物质：芽孢杆菌对营养物质的需求较为简单，可以利用各种有机物和无机盐进行生长。
了解芽孢杆菌的生长条件对于其在实验室中的培养和应用有很大的帮助。
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苏云金芽孢杆菌四个亚种对温度和pH值的耐受性
翟兴礼
【期刊名称】《商丘师范学院学报》
【年(卷),期】2009(25)6
【摘要】以4个亚种的苏云金杆菌为材料,测定其对温度及pH值的耐受性.试验结果表明,经70℃水浴10min处理后,存活率为95%-100%,80℃水浴10 min处理后,存活率为45%-70%,90℃水浴10 min后,有27%-40%的存活率.说明这四株苏云
金杆菌对高温有较强的耐受力.当将培养基的pH值调至3时,四株菌都无法生长.当培养基的pH值为4时有两菌无法生长,pH值为5时4个亚种都能生长,pH值为8、9时4个亚种都生长旺盛.说明其在酸性环境中生长性能较差,在弱酸性和微碱性环
境中生长较好.
【总页数】3页(P103-105)
【作者】翟兴礼
【作者单位】商丘师范学院生命科学系,河南商丘,476000
【正文语种】中文
【中图分类】Q939.1
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