药物分析实验 葡萄糖杂质检查
生物药物分析实验指导书
生物药物分析实验指导书蚌埠学院生物与食品工程系二0一0年十二月目录目录 ----------------------------------------------------------1 实验一药物分析基本操作 --------------------------------------2 实验二葡萄糖的杂质检查 ------------------------------------6 实验三药物的鉴别试验-----------------------------------------9 实验四异烟肼片含量测定--------------------------------------10 实验五阿司匹林含量测定--------------------------------------11 实验六阿司匹林片剂含量分析----------------------------------12 实验七对乙酰氨基酚片的含量测定------------------------------14 实验八片剂的含量均匀度与溶出度测定 -------------------------15 参考文献------------------------------------------------------17实验一药物分析基本操作一、目的要求1、掌握电子分析天平的使用与维护；2、掌握容量仪器和滴定管的使用二、主要仪器与药品电子分析天平、容量瓶、酸式滴定管、碱式滴定管。
三、实验方法1-1电子分析天平的使用与维护分析天平是定量分析工作的最常用的仪器之一，称量准确与否对分析结果有重大影响。
因此，必须掌握天平的正确使用和必要的日常维护，以保证仪器的精度和分析结果的准确性。
1、称量前检查与校正水平位置：揭去天平罩，检查天平的水平位置，调节天平底座后面的两个脚扭，使水泡置于圆圈中央。
察看天平上标明的最大载重量，称量时切勿超过最大载重量。
实验二 葡萄糖的杂质检查
实验二葡萄糖的杂质检查一、实验目的1、掌握葡萄糖一般杂质检查的目的和原理；2、熟悉杂质检查的操作方法。
二、实验原理1、酸碱度检查：是用药典规定的方法对药物中的酸度、碱度及酸碱度等酸碱性杂质进行检查。
检查时应以新沸并放冷至室温的水为溶剂。
不溶于水的药物，可用中性乙醇等有机溶剂溶解。
常用的方法有酸碱滴定法，指示剂法以及pH值测定法。
2、溶液的澄清度与颜色检查供试品的水溶液应澄清无色，如显浑浊，不得比1号浊度标准溶液更浓；如显色，不得比对照液更深。
3、氯化物检查法：氯化物在硝酸溶液中与硝酸银作用，生成氯化银沉淀而显白色浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液和硝酸银在同样条件下用同法处理生成的氯化银浑浊程度相比较，测定供试品中氯化物的限量。
反应离子方程式：Cl- + Ag+ → AgCl↓（白色）4、硫酸盐检查法：药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡沉淀而显白色浑浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下，用同法处理生成的浑浊比较，判断药物中含硫酸盐的限量。
反应离子方程式：SO42- + Ba2+ → BaSO4↓(白色)5、亚硫酸盐与可溶性淀粉供试品水溶液加碘试液应显黄色。
6、蛋白质检查供试品水溶液加磺基水杨酸不得发生沉淀。
7、铁盐检查三价铁盐在硝酸酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色可溶性的硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。
反应离子方程式：Fe3+ + 3SCN- → Fe（SCN）3（红棕色）8、重金属检查供试品的醋酸盐缓冲溶液与硫代乙酰胺溶液加热后，溶液颜色不得比对照管更深。
三、试剂与仪器四、实验步骤1、酸度取本品2.0g，加水20ml溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）0.20ml，应显粉色。
2、溶液澄清度取本品5g，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10ml，溶液应澄清无色，如显浑浊，与1号浊度标准液（chp2000，附录ⅨB）比较，不得更浓；如显色，不得比对照液更深。
药物分析实验讲义药本
第三部分药物分析实验内容实验一葡萄糖的分析一、目的要求1.掌握氯化物、铁盐、重金属限度检查的方法、原理、反应条件及其计算；2.正确使用纳氏比色管。
二、方法原理1.氯化物中国药典对氯化物的检查是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，浊度不得更大。
2.铁盐铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，再与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色进行比较，颜色不得更深。
3.重金属硫代乙酰胺在弱酸性(pH3．5醋酸盐缓冲液)条件下水解，产生硫化氢，与微量重金属离子生(以pb2+为代表)生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较,颜色不得更深。
三、操作步骤1.氯化物取本品0.6g，置50ml纳氏比色管中，加水溶解使成25ml，再加稀硝酸10ml；加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。
另取标准氯化钠溶液（10µgCl-/ml）6.00ml，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成约40ml，摇匀，即得对照溶液。
于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1ml，用水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，观察比较，即得。
2.铁盐取本品2.0g，加水20ml溶解后，加硝酸3滴，缓缓煮沸5分钟，放冷，移至50ml纳氏比色管中，加水稀释使成45ml，加硫氰酸铵溶液（30→100）3ml，摇匀，如显色，与标准铁溶液（10µgFe/ml）2.00ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。
3.重金属取纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液（10µgPb/ml）2.00ml与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml后，加水稀释使成25ml。
取本品4.0g，置于乙管，加水适量溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，加水稀释使成25ml；再在甲乙两管中分别加入硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深（含重金属不得过百万分之五）。
药物分析实验：实验二 葡萄糖的分析
2013-3-2
12
酸度 新沸过的冷蒸馏水（加水20ml ），加酚酞指示液， 溶液的澄清度与颜色（1号浊度） 乙醇溶液中的澄清度：乙醇 回流 蛋白质：不得发生沉淀。 亚硫酸盐与可溶性淀粉：
6
（三）检查
干燥失重：主要检查药物中的水分及其他挥 发性杂质。系指药品在规定的条件下，经干 燥后所减失的量，以百分率表示。（恒重）
4
（二）鉴别
根据药物的分子结构、理化性质、采用化 学、物理化学或生物学方法来判断药物的 真伪。分为：一般鉴别试验、专属鉴别试 验。
葡萄糖 显色反应 IR
5
（三）检查
药物的杂质检查是控制药物纯度的一个非常重要的方面， 药物纯度检查也可称为杂质检查。 酸碱度检查：用酸度、碱度、酸碱度和pH来衡量药物中 的酸碱性杂质。 澄清度：检查药品溶液的混浊程度，反映药物溶液中微量 不溶性杂质的存在情况，是控制注射用原料药纯度的重要 指标。
砷盐：是利用金属锌与酸作用产生新生态的氢， 与药物中微量砷盐作用生成具挥发性的砷化氢， 遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定 量标准砷溶液所生成的砷斑比较，以判断药物中 砷盐的限量。 AsO33-+3Zn+9H+→AsH3↑+3Zn2++3H2O
• AsH3+2HgBr2→2HBr+AsH(HgBr)2 黄色
• AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3 棕色
炽烧残渣：
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含量测定
供试品：50%葡萄糖溶液 含葡萄糖（C6H12O6·H2O）应为标示量的95.0
％～105.0％。 比旋度计算公式：[a]tD =100a/l*c（其中a为
旋光度；t为温度，20℃；D表示钠光灯源； l为测定管长度，dm；c为溶液浓度， g/100ml） C=100×A/([a]tD ×l) ×(198.18÷180.16) [a]tD=+52.75°
葡萄糖杂质检查
葡萄糖杂质检查一、实验目的1、掌握葡萄糖一般杂质检查的目的和原理；2、熟悉杂质检查的操作方法。
二、实验原理1、酸碱度检查：是用药典规定的方法对药物中的酸度、碱度及酸碱度等酸碱性杂质进行检查。
检查时应以新沸并放冷至室温的水为溶剂。
不溶于水的药物，可用中性乙醇等有机溶剂溶解。
常用的方法有酸碱滴定法，指示剂法以及pH值测定法。
2、氯化物检查法：氯化物在硝酸溶液中与硝酸银作用，生成氯化银沉淀而显白色浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液和硝酸银在同样条件下用同法处理生成的氯化银浑浊程度相比较，测定供试品中氯化物的限量。
反应离子方程式：Cl- + Ag+→ AgCl↓（白色）3、硫酸盐检查法：药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡沉淀而显白色浑浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下，用同法处理生成的浑浊比较，判断药物中含硫酸盐的限量。
反应离子方程式：SO42- + Ba2+ → BaSO4↓(白色)4、干燥失重：主要指水分，包括其它挥发性物质。
用于受热较稳定的药物,温度一般为105℃，在烘箱内干燥至恒重。
4、铁盐检查法：三价铁盐在硝酸酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色可溶性的硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。
反应离子方程式：Fe3+ + 3SCN-→ Fe（SCN）3（红棕色）三、试剂与仪器(1)、酚酞指示液 (2)、氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）(3)、1号浊度标准液 (4)、石蕊试纸(5)、稀硝酸 :取硝酸10.5 ml，加水稀释至100 ml，即得。
本液含HNO3应为9.5％～10.5％(6)、稀盐酸:取盐酸23.4 ml,加水稀释至100 ml，即得。
本液含盐酸分数应为9.5%~10.5%(7)、硝酸银溶液（0.1mol/L） :称取1.75 g硝酸银，溶于100 mL水中。
(8)、标准氯化钠溶液（10μgCl－/ml）:称取氯化钠0.165 g，置1000 ml 量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
药物分析药分实验三、葡萄糖含量测定
•
Ⅰ
• 称量瓶与样品原重（g） 26.9542
• 称取后重量 （g）
26.4531
• 取样重（g）
0.5011
Ⅱ 26.4531 25.9413
0.5118
Ⅲ 25.9413 25.4326
0.5087
原始记录例二
• 时间：2013年9月12日 地点：主楼704实 验室 温度：27.5℃
• NaOH溶液（0.01mol/L）滴定HCl溶液，以酚酞为 指示剂，平行测定两次。
一、目的要求： 1．掌握比旋度的概念和旋光法测定旋光性物质含量的 原理与计算方法 2．熟悉折光法测定葡萄糖注射液含量的原理与计算方 法。 3．熟悉快速分析法(剩余碘量法)测定葡萄糖含量的基 本原理和方法。比较三种分析法的优缺点。
二、基本原理：
(一) 旋光法 葡萄糖为旋光性药物, 其
比旋度为+52.5°, 用旋光计测出样品
严禁迟到早退，中途离开实验室不得超过20分钟。 请假只得60分，旷课0分
• 3、做好原始记录 • 及时 • 原始 • 完整
一、原始记录
1、准备专门的实验记录本，标上页码，不得记录在单页纸 或小纸片上或随意记录在其它任何地方。原始记录必须是 做实验时当场记录下来，不得过后再根据回忆记录或先写 在碎纸片上。
铁盐：
不比对照溶液颜色更深
金属：
不比对照溶液颜色更深
砷盐：
不比对照溶液颜色更深
蛋白质： 发生沉淀
二、实验数据的整理和表达
列三线表 1、表号和表题 2、表格的行首或列首应标明名称和单位 3、若有计算，需在表C NaOH
1000 V NaOH
m KHC 8H 4O4 M KHC 8H 4O
实训一葡萄糖的杂质检查
实训一葡萄糖的杂质检查一、实训目的1、掌握葡萄糖中杂质的检查方法。
2、熟悉供试品溶液与对照品溶液制备、检查、比色等操作方法。
3、了解称量、平行操作、干燥等操作要点。
二、实训原理葡萄糖分子中具有醛基，还原碱性酒石酸铜生成红色氧化亚铜沉淀。
本品除了检查氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等到一般杂质外，还需检查溶液的澄清度与颜色（目的是检查水不溶性物质或有色杂质）、乙醇溶液的澄清度（检查醇不溶性杂质如糊精、蛋白质等）、亚硫酸盐与可溶性淀粉（因为制备时使用的酸可能带有亚硫酸盐，而可溶性淀粉是中间体引入）。
三、实训操作1、干燥失重取本品1~2g，置与供试品同样条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中，使供试品平铺于瓶底，厚度不超过5mm，加盖，精密称定，将称量瓶放入洁净的培养皿中，瓶盖半开或置瓶旁，放入105℃干燥箱中干燥。
取出后迅速盖好瓶盖，置干燥器放冷至室温，迅速精密称重，再于105℃干燥箱中至恒重，即得，减失重量不得过9.5%。
2、性状本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒粉末，无臭，味甜，在水中易溶，乙醇中微溶。
取本品约10g，精密称定，置100ml量瓶中，加水适量与氨试液0.2ml，溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，放置10min，在25℃时测定比旋度，应为52.5~53.0°。
3、酸度取本品2.0g，加新沸过的冷蒸馏水20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴NaOH滴定液0.2ml，应显粉红色。
4、乙醇溶液的澄清度取本品1.0g加90%乙醇30ml，置水浴中加热回流约10min，溶液应澄清。
5、亚硫酸盐与可溶性淀粉取本品1.0g，加水10ml溶解后，加碘试液1滴，应即显黄色。
6、蛋白质取本品1.0g加水溶解后，加磺基水杨酸溶液（1→5）3ml，不得发生沉淀。
7、氯化物取本品0.3g，置于25ml纳氏比色管，加水溶解使成约13ml，再加稀硝酸5ml，加水使成约20ml摇匀，即得供试溶液。
另取标准氯化钠溶液（10ug/ml）3.0ml，置25ml 纳管中，加稀硝酸5ml，加水使成约20ml，摇匀，即得对照溶液。
实验一.葡萄糖的一般杂质检查
10、重金属检查法
硫代乙酰胺法 原理：
CH3CSNH2 H2O pH3.5CH3CONH2 H2S
药物：Pb2 H2S pH3.5PbS黄色～棕黑色
对照：PbNO3c、V H2S pH3.5PbS黄色～棕黑色
重金属检查方法
取50mL纳氏比色管两支，甲管中标准铅 溶液（10μg/mL）2.0mL与醋酸盐缓冲液 （pH3.5）2mL后，加水稀释至25mL;
实验要求
记录每个试验项目的称样质量 记录酸度的检查、溶液的澄清度与颜色检
查、氯化物的检查、硫酸盐的检查的实验 现象 给出实验结果、进行结果判定 实验报告
主要试剂及器皿
试剂：
酚酞指示液 25%氯化钡溶液 0.020mol/L NaOH溶液 稀硝酸 10 μg/mL NaCl标准溶液 稀盐酸 100μg/mLK2SO4标准溶液 器皿： 50mL纳氏比色管 电子天平
硫酸盐的限量
V 2.0mL，c 100g / mL，m 200g
L V c 100% m
L 100 g / mL 2.0mL 100%
2.0g
100 g / mL 2.0mL 100 % 2.01000000 g
1104 100% 1102% 0.01%
9.铁盐的检查
原理：铁盐在酸性溶液中与硫氰酸铵生成 红色可溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量 标准铁溶液同法处理后所呈颜色比较，判 断供试品铁盐是否超限。 Fe3 6SCN H [Fe(SCN)6 ](红)
2．正确选用量具：根据检查试验一般允许误差为±10%的 要求和药品、试剂的取用量。
3．平行操作：标准品与样品必须同时进行实验，加入试 剂量、顺序等均应一致。观察时，两管受光照的程度应 一致，使光线从正面照入，比色时置白色背景上，比浊 时置黑色背景上，自上而下地观察。
药物分析实验-指导书
实验一：葡萄糖的性状、鉴别和检查一、实验目的：1、了解药品鉴别、检查的目的和意义；2、掌握药品性状测定方法和性状的正确描述；3、掌握药物的常用鉴别方法和原理；4、掌握药品中一般杂质检查的方法原理和限量计算方法。
二、实验原理和内容药用葡萄糖或无水葡萄糖为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末；无臭，味甜。
在水中易溶、在乙醇中微溶，利用葡萄糖具有的还原性或其它特性以及存在杂质的特性可对葡萄糖进行鉴别和杂质检查。
三、实验材料、药品和仪器清单红外光谱仪；纳氏比色管；小烧杯；电子天平；台秤。
碱性酒石酸铜试液；酚酞指示液；氢氧化钠滴定液(0.02mol/L，学生用备好的0.1 mol/L稀释即得)；95％乙醇；标准氯化钠溶液(0.01％)；稀硝酸；硝酸银试液；标准硫酸铁铵溶液()标准硫酸钾溶液(0.01％)；碘试液；磺基水杨酸溶液；硫氰酸铵溶液；标准铁溶液(0.001％)；25%氯化钡溶液；葡萄糖-水合物。
四、实验内容（或实验步骤）1、鉴别：(1) 取本品约0.2g于小试管中，加水5m1溶解后，缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀（稍微加热后可加速沉淀的生成）。
(2) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集464图)一致。
2、检查：酸度取本品 2.0g于小烧杯中，加水20m1溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20m1（约1D），应显粉红色。
溶液的澄清度与颜色取本品5.0g于小烧杯中，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10m1，溶液应澄清无色。
乙醇溶液的澄清度取本品1.0g于小烧杯中，加95％乙醇30m1溶解，溶液应澄清。
氯化物取本品0.6g于50mL纳氏比色管中，加水溶解使成25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸(10.5→100学生自配）10ml；溶液如不澄清，应滤过,加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。
另取该品种项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。
实验二-一般杂质检查(葡萄糖中
第三章 药物的杂质检查药物的检查包括四大方面，分别是有效性、均一性、安全性和纯度要求。
药物的纯度是指药物的纯净程度，药物中的杂质是影响药物纯度的主要因素。
因此，药物的纯度检查即是指药物的杂质检查。
根据药物中杂质的来源可分为一般杂质及特殊杂质。
一般杂质是在多数药物的生产和贮藏过程中都容易引入的杂质，如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、炽灼残渣、残留溶剂等，而特殊杂质是各个药物中可能存在的原料、中间体、降解物、异构体、副反应产物等，是该药在生产和贮藏过程中有可能引入的仅属该药特有的一些杂质。
对于药物中所存在的杂质，在不影响疗效、不产生毒性和保证药物质量的前提下，允许药物中含有一定量的杂质。
杂质的限量一般根据杂质的安全性、生产的可行性、产品的稳定性等综合考虑而定。
药物中杂质限量的控制方法一般分两种：一种为限量检查法（limit test ），另一种是对杂质进行含量测定。
限量检查法通常不要求测定其准确含量，只需检查杂质是否超过限量。
进行限量检查时，多数采用标准溶液对照法，此外，还可采用灵敏度法和比较法。
对照法系指取一定量的被检杂质标准溶液和一定量供试品溶液，在相同的条件下试验，比较结果，以确定杂质含量是否超过限量。
由于供试品（S ）中所含杂质的最大允许量可以通过杂质标准溶液的浓度（C ）和体积（V ）的乘积表达，所以，杂质限量（L ）的计算公式为：％供试品量体积）杂质标准溶液（浓度杂质限量＝100⨯⨯ 或%100S V C L ⨯⨯= 采用对照法须注意平行操作原则，即供试溶液和对照溶液应在完全相同的条件下反应，如加入的试剂、反应的温度、放置的时间等均应相同，这样检查结果才有可比性。
灵敏度法系指在供试品溶液中加入一定量的试剂，在一定反应条件下，不得有阳性结果出现，从而判断供试品中所含杂质是否符合限量规定。
该法不需用杂质标准品溶液对比。
如乳酸（lactic acid ）中枸橼酸、草酸、磷酸或酒石酸的检查：取本品0.5g 加水适量使成5ml ，混匀，用氨试液调至微碱性，加氯化钙试液1ml ，至水浴中加热5min ，不得产生浑浊。
药物分析各章节计算题汇总(新)
第三章 药物的杂质检查七、计算题1． 取葡萄糖4.0g ，加水30ml 溶解后，加醋酸盐缓冲溶液(pH3.5)2.6ml ，依法检查重金属(中国药典)，含重金属不得超过百万分之五，问应取标准铅溶液多少ml ？(每1ml 相当于Pb10μg/ml)解： L=CV/S V=LS/C=5×10－6×4.0/10×10－6=2ml2． 检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml(每1ml 相当于1μg 的As)制备标准砷斑，砷盐的限量为0.0001％，应取供试品的量为多少？解： S=CV/L=2×1×10－6/0.00001％=2g 3． 依法检查枸橼酸中的砷盐，规定含砷量不得超过1ppm ，问应取检品多少克？(标准砷溶液每1ml相当于1μg 砷)解： S= CV/ L=2×1×10－6/1ppm=2.0g 4． 配制每1ml 中10μg Cl 的标准溶液500ml ，应取纯氯化钠多少克？(已知Cl ：35.45 Na ：23)解： 500×10×10－3×58.45/35.45=8.24mg 5． 磷酸可待因中检查吗啡：取本品0.1g ，加盐酸溶液(9→10000)使溶解成5ml ，加NaNO 2试液2ml ，放置15min ，加氨试液3ml ，所显颜色与吗啡溶液[吗啡2.0mg 加HCl 溶液(9→10000)使溶解成100ml] 5ml ，用同一方法制成的对照溶液比较，不得更深。
问其限量为多少？ 解：6. 肾上腺素中肾上腺酮的检查：称取肾上腺素0.250g ，置于25mL 量瓶中，加0.05mol/L 盐酸液至刻度，量取5mL 置另一25mL 量瓶中，用0.05mol/L 盐酸液稀释至刻度，用此液照分光光度法，在310nm 处测定吸收度，不得大于0.05，问肾上腺素的限量是多少？（以百分表示，肾上腺素 %1cm 1E =453）答：%055.0%100g250.0ml 5ml25ml 25100145305.0=⨯⨯⨯⨯==S CV L 肾上腺酮的限量为0.055%7. Ch.P.（2010）泼尼松龙中有关物质的检查：取本品，加三氯甲烷-甲醇（9∶1）溶解并稀释制成每1 ml 中约含3 mg 的溶液，作为供试品溶液；精密量取2 ml ，置100 ml 量瓶中，用三氯甲烷-甲醇（9∶1）稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
药物分析实验内容
药物分析实验实验一葡萄糖中一般杂质检查（4学时）【实验目的与要求】1. 了解药物中一般杂质检查的项目、目的和意义；2. 理解杂质限量的概念并掌握其计算方法；3. 掌握氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属限量检查的基本原理和操作方法。
【实验原理】1. 杂质限量：即药物中杂质的最大允许量。
或其中，C为标准溶液浓度，V为标准溶液体积，S为供试品质量，L为杂质限量。
2. 一般杂质的限量检查（1）氯化物的限量检查药物中的氯化物与硝酸银在硝酸酸性溶液中作用，生成氯化银微粒而显白色浑浊，同一定量的标准氯化钠溶液与硝酸银在同样条件下，用同法处理生成的氯化银浑浊程度相比较，判断药物中含氯化物的限量。
Cl- + Ag+→ AgCl ↓（2）硫酸盐的限量检查药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡微粒而显白色浑浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下，用同法处理生成的硫酸钡浑浊程度相比较，判断药物中含硫酸盐的限量。
SO42-+ Ba2+→ BaSO4 ↓（3）铁盐的限量检查药物中的三价铁盐（若含有Fe2+，加硝酸煮沸5分钟，可使Fe2+ 氧化为Fe3+）与硫氰酸盐在硝酸酸性溶液中作用，生成硫氰酸铁配位离子而显红色，与一定量标准铁溶液与硫氰酸盐在相同条件下，用同法处理生成的硫氰酸铁配位离子溶液进行比色，判断药物中含铁盐的限量。
Fe3+ + 6 SCN- → [Fe(SCN)6]3-（红色）（4）重金属的限量检查重金属一般是指能与硫代乙酰胺或硫化钠在弱酸性（pH 3~3.5）溶液中，作用生成硫化物的金属杂质，如铜、银、铅、镉、汞、砷、锑、铋、锡、锌、钴、镍等。
重金属不仅影响药物稳定性，而且在体内容易蓄积，造成慢性中毒，因此必须严格控制限量。
在药品生产过程中遇到铅的机会较多，铅又易积蓄中毒，故以铅为代表。
由于在弱酸性（pH约3.5）溶液中硫代乙酰胺水解，产生硫化氢，可与重金属离子作用，生成有色硫化物沉淀，与标准重金属溶液在同样条件下，按同法处理后进行比较。
实验一-葡萄糖杂质检查(一般杂质检查)
—药/囱分:沂姿蟲r11A-203-1《药物分析实验》要求:实验前：预习实验过程中：安静、整洁、公用试剂的使用.实验原始记录.合作又动手实验结束：清理、实验报告、值日《药物分析专业术语与规定》w 本课程为独立的一门课程，以100分计，具体 分配如下：平时成绩（迟早退、预习提问、态度. 值日等）操作成绩 实验报告 书面考核 实验一葡萄糖杂质检査（一般杂质检査） 一、实验目的◎熟悉药物一般杂质检查的项目.原理和 意义.@掌握一般杂质检查的操作方法。
《药物分析实验》成绩评定标准:20%20%30%30%标准浓度X 体积XlOO%供试品量、溶液的澄清度与颜色！浊度标准液：甲醛腺白色沉淀加水配制颜色对照液：CoCl? l ・5tnL+ KzCqO, l ・5mL + CUSO4 3mL+H2OT 25.0mL0本品5g+热水(vlOmL)溶解T 放冷+水—lOmL 會 S ■: EOmL 颜色对照液+水—lOniL 二、实验内容：3、氯化物！SA 本品0.30g+ 水 12mL.5mL 稀HNO3 +水一＞ 20mL 标准N JJ CI 溶液3.0mlJ T + 0.5mLAgNO,+ 水t 25mL(lOiiffCl/mL)—＞摇匀.暗处放5min —＞比浊不得更深(0.010%)杂质限量％=杂蠶當量“00%二、实验内容:Y 、酸度；本品2・0g(L20mL 溶液 W 0_NaOH比色20mL实验内容：f 6、亚硫酸盐与可溶性淀粉:7*干燥失重: 本品约1窝，平铺于已干燥至恒重/©的称量瓶中，精 称加2 -* 105C 干燥Ih -*冷却称重切3 -*继续1059 干燥1h —»冷却称重加4 —*至恒重△加＜0.3nig —＞失重 率不得超过9.5%.失重率.叫xlOG%<9.5%m 、—專忙、实验内容:' 4.硫酸盐：本品l ・0g +水20mL][+ ImL 稀 IIC1 -> + 2.5mL 25%BaC12标准K,SO4 l.OniL (lOOpg SOymL) +19mL 水5、乙醇中不溶物:+水T25mL T 摇匀，暗处放lOmiti -比浊不得更浓(0.010%) 本品 30mI>应成澄明 ted 90%乙爭 说明不存在淀粉和糊精Id 昱巴土 —应显黄色 HzO 碘试液 本品ixb ；三、下次实验:实验五药用辅料苯甲酸钠的质量分析实验八维生素B12注射液检验。
药物分析实葡萄糖检查
第16组——组员：方璐瑶、陈瑞敏、何泽超实验结果1.酸度原理：供试品中酸性杂质被碱中和，过量的碱使酚酞显粉红色。
实验现象：显粉红色。
结论：葡萄糖样品的酸度检查合格，符合2015年版中国药典规定。
2. 氯化物检查原理：药物中微量的氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应，左为供试品，右为对照品生成氯化银白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较，浊度不得更大。
Ag++Cl-→ AgCl↓(白色)实验现象：供试品混浊度浅于标准对照品。
（< 0.01%）结论：葡萄糖中氯化物检查合格，符合2015年版中国药典规定。
3.硫酸盐检查原理：药物中微量的硫酸盐在稀盐酸酸性条件下与氯化钡反应，生左为对照品，右为供试品成硫酸钡微粒显白色浑浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下产生的硫酸钡浑浊程度比较，浊度不得更大。
SO42- +Ba2+ →BaSO4↓（白色）实验现象：供试品混浊度浅于标准对照品。
结论：葡萄糖中硫酸盐检查合格，符合2015年版中国药典符合规定。
（< 0.01%）4.蛋白质检查原理：蛋白质为两性物质，在酸性环境中氨基酸带正电荷，而磺基水杨酸根带负电，正好与蛋白质结合沉淀，显示液体中有蛋白存在。
磺基水杨酸正好使液体呈酸性，促使二者结合。
实验现象：试管溶液澄清，无沉淀现象。
结论：葡萄糖中蛋白质检查合格，符合2015年版中国药典符合规定。
5.钡盐原理：药物中微量的钡离子在稀盐酸酸性条件下与稀硫酸反应，生成硫酸钡微粒显白色浑浊，与一定量标准钡离子溶液在相同条件下产生的硫酸钡浑浊程度比较，浊度不得更大。
Ba2++H2SO4→ BaSO4↓+2H+ 左为对照品，右为供试品实验现象：两溶液均澄清，供试品较对照品更澄清。
结论：葡萄糖中钡盐检查合格，符合2015年版中国药典符合规定。
6.钙盐原理：药物中微量的钙离子与草酸铵试液反应，生成草酸钙微粒显白色浑浊，与一定量标准钙溶液在相同条件下产生的草酸钙浑浊程度比较，浊度不得更大。
药物分析
一:计算1、葡萄糖中重金属的检查取本品4、0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（ph3、5）2ml，依法检查，所显颜色与标准铅溶液（每1ml相当于10up的pb）2.0制成的对照液比较，不得更深。
求重金属的限量（ppm）2、苯巴比妥钠中重金属的检查：取本品2.0g，加水32ml，溶解后缓缓加1mol/L盐酸8ml，充分振摇，滤过。
取滤液20ml，加酚酞液1滴与氨试液适量至溶液显粉红色，加醋酸盐缓冲液（ph3.5）2ml与水适量使成25ml，依法检查，所显颜色不得比标准管颜色更深，含重金属不得超过百万分之十。
问：应取标准铅溶液（10upPb/ml）多少ml？3、水杨酸中重金属的检查：取本品适量，加乙醇23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液(ph3.5)2ml，硫代乙酰胺试液2ml，如显色，与标准铅溶液（浓度10upPb/ml）1.0ml同法操作所呈颜色比较，不得更深（重金属限量不超过百万分之十）问应取供试品多少g？4、丙谷胺中氯化物的检查：取本品2.0g，加硝酸1ml，加水稀释成50ml，振摇，滤过，取滤液25ml，依法检查，与标准氯化钠溶液（10upCl/ml）5ml制成的对照液比较，不得更深。
求丙谷胺中氯化物的限量（%）5、中国药典规定，磷酸可待因中吗啡的检查方法：取本品0.10g，加盐酸溶液（9→1000）使溶液成5ml，加亚硝酸钠溶液2ml，放置15分钟，加氨试液3ml。
与吗啡溶液【取无水吗啡2.0mg，加盐酸溶液（9→1000）使溶液成100ml】5.0ml，用同一方法制成的对照液比较，不得更深，求其限量%6、异戊巴比妥（C11H18N2O3）的含量测定：精密称取本品0.2012，加甲醇40ml使溶解，再加新鲜配制的3%无水碳酸钠溶液15ml，照电位滴定法，用硝酸银滴定液（0.1mol/L，F=1.005）滴定，至电位产生突跃时需要8.80ml。
每1ml硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于22.63mg的C11H18N2O3,求本品的百分含量7、对乙酰氨基酚（C8H9NO2）的含量测定：精密称取本品0.0415g置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，至100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照紫外—可见分光光度法，在257nm 波长处测定吸光度为0.590，按C8H9NO2的吸收系数（E1%1cm）为715计算，求本品的百分含量8、异烟肼片的含量测定：取本品（标示量0.1g/片）20片，称其重量为2.1250g，研细，称取细粉0.2125g置100ml量瓶中，加水适量，振摇使异烟肼溶解，加水稀释至刻度，过滤，取续滤液25ml，加水50ml，盐酸20ml及甲基橙指示剂1滴，用溴酸钾滴定液（0.01642mol/L）缓缓滴定(保持温度在18—25oC)至溶液显粉红色，消耗此滴定液14.93ml。
药物分析实验 葡萄糖杂质检查
杂质的主要来源 ： 生产过程和贮藏过程 中引入
杂质限量： 在不影响药物疗效 和不发生毒
性的前提下，药物中所含 杂质的最大允许 量，叫做 杂质限量 。通常用百分之几（％）
或百万分之几（ ppm）来表示。
Pharmaceutical Analysis Experiment
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3
一般杂质检查原理
目的：
葡萄糖杂质检查
1）通过葡萄糖杂质检查 ,了解一般杂质检查的项 目、方法和意义
2）掌握葡萄糖中氯化物、硫酸盐、铁盐、重金 属及砷盐限度检查的原理和方法
Pharmaceutical Analysis Experiment
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1
杂质和纯度
一般杂质
生产过程
按来源分 特殊杂质
*来源
杂质
贮藏过程
AsH3 ? As(HgBr)3 ? 3 HBr ? As2Hg 3（棕黑色）
Pharmaceutical Analysis Experiment
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8
操作步骤 ？ ？
观察方法
Pharmaceutical Analysis Experiment
供试品管 氯化物 对照管
本品0.60g
10μgCl-/mL标准 NaCl溶液6.0mL
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5
3. 铁盐(Iron) : 硫氰酸盐法
铁盐在 盐酸酸性 溶液中与硫氰酸铵生成红色 可溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁 溶液同法处理后所呈颜色比较，判断供试品 铁盐是否超限
Fe3? ? 6SCN ? ? ?H ? ? [Fe(SCN)6 ]3? ? (红)
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葡萄糖的一般杂质检查
实验二葡萄糖的一般杂质检查一、目的要求1．掌握一般杂质检查的原理、操作方法及限量计算方法。
2．熟悉药物中一般杂质检查的目的和意义。
二、基本原理葡萄糖是用淀粉以无机酸水解或在酶催化下经过水解得稀葡萄糖液，再经脱色、浓缩结晶制得。
1．国内生产方法有以下几种：⑴酸水解法：以无机酸将淀粉水解为葡萄糖。
(C6H10O5)n + nH2O HCl nC6H12O6⑵双酶水解法：以生物酶为催化剂将淀粉水解为葡萄糖。
(C6H10O5)n + nH2O生物酶nC6H12O6⑶酸酶水解法：以盐酸为液化剂，糖化酶为催化剂，将淀粉水解为葡萄糖。
(C6H10O5)n + nH2O HCl 糖化酶nC6H12O6根据葡萄糖生产工艺特点，应进行氯化物、重金属、砷盐等一般杂质检查，进行蛋白质、可溶性淀粉等特殊杂质检查。
2．各种杂质检查原理如下：⑴氯化物检查法氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量的标准氯化钠溶液和硝酸银在同样条件下处理生成的氯化银浑浊相比较，测定供试品中氯化物的限量。
C1- + Ag+—→AgCl↓⑵硫酸盐检查法药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡微粒而显白色浑浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下，用同法处理生成的浑浊比较，判断药物中含硫酸盐的限量。
SO4 2- 十Ba2+ —→BaS04↓⑶铁盐检查法三价铁盐在硝酸酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色可溶性硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。
Fe3++6SCN-—→[Fe(SCN)6]3- 红色进行葡萄糖的铁盐检查时，需在显色前加硝酸3滴，煮沸5min，使Fe2+氧化为Fe3+。
由于硝酸中可能含有亚硝酸，亚硝酸也能与硫氰酸根离子反应生成红色的亚硝酰硫氰化物，影响比色，因此加入显色剂之前加热煮沸有助于除去氧化氮，以消除氧化氮生产的亚硝酸干扰。
⑷重金属检查法重金属是指在实验条件下，能与S2-作用生成硫化物而显色的金属杂质，如，银、铅、汞、铜、镉、铋、砷、锑、锡、锌、钻、镍等。
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2. 硫酸盐(Sulfates)
硫酸盐在盐酸酸性溶液中与氯化钡试液作 用，生产硫酸钡白色浑浊液，与一定量标
准硫酸钾溶液相同条件下生成的浑浊比较， 判断供试品中的硫酸盐是否符合限量规定。
SO42? ? Ba2? ? ?H?C?l BaSO4 ? (白)
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AsH3 ? As(HgBr)3 ? 3 HBr ? As2Hg 3（棕黑色）
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8
操作步骤 ？ ？
观察方法
Pharmaceutical Analysis Experiment
供试品管 氯化物 对照管
本品0.60g
10μgCl-/mL标准 NaCl溶液6.0mL
5.砷盐(Arsenic) : 古蔡氏法(Gutzeit)
As3? ? 3Zn? 3H? ? 3Zn2? ? AsH3 ?
AsO
33
?
3Zn
?
9H ?
?
3Zn 2? ? 3H 2O ? AsH 3 ?
AsH3 ? 3HgBr2 ? 3HBr ? As(HgBr)3 (黄色）
AsH 3 ? 2As(HgBr)3 ? 3 As(HgBr)2 (棕色）
1．氯化物(Chlorides)
氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作 用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量标
准氯化钠溶液相同条件下生成的氯化银浑 浊液比较，判断供试品中的氯化物是否符 合限量规定
Cl ? ? Ag ? ? ?HN?O3? AgCl ? (白)
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5
3. 铁盐(Iron) : 硫氰酸盐法
铁盐在 盐酸酸性 溶液中与硫氰酸铵生成红色 可溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁 溶液同法处理后所呈颜色比较，判断供试品 铁盐是否超限
Fe3? ? 6SCN ? ? ?H ? ? [Fe(SCN)6 ]3? ? (红)
Pharmaceutical Analy和贮藏过程 中引入
杂质限量： 在不影响药物疗效 和不发生毒
性的前提下，药物中所含 杂质的最大允许 量，叫做 杂质限量 。通常用百分之几（％）
或百万分之几（ ppm）来表示。
Pharmaceutical Analysis Experiment
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3
一般杂质检查原理
摇匀，放置 10min
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4. 重金属(Heavy metals) ：硫代乙酰胺法
CH3CSNH 2 ? H 2O ?? ? CH3CONH 2 ? H2S
H 2S ? Pb2? ? ?pH?3.5? PbS ? ? H ?
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砷盐
供试品试砷瓶
本品2.0g，加水5mL溶解 ？
① +稀硫酸5mL ② +溴化钾溴试液0.5mL
对照试砷瓶
1μgAs/mL标准砷溶 液2.0mL
水浴加热 约20min
放冷
加盐酸5mL与水适量使成约28mL
① +碘化钾试液5mL？ ② +酸性氯化亚锡5滴？
25-40℃，1hour
比较砷斑
加锌粒1.0g
供试品管
本品4.0g
供试品管 +对照管
对照管
本品4.0g
10μgPb2+/mL标准铅 溶液2.0mL
加水适量溶解 加水适量溶解
10μgPb2+/mL标准铅 溶液2.0mL
重金属
pH3.5醋酸盐缓冲液2mL 加水至25mL
硫代乙酰胺试液*2mL 摇匀 放置2min
同置白色背景上比较
*硫代乙酰胺试液制备：混合液（1molNaOH 15mL+水5.0mL+甘油20mL）12 5.0mL +硫代乙酰胺溶液（4%）1.0mL→水浴加热20秒，冷却，立 即使用。
③+水至50 mL 摇匀
放置10min 同置黑色背景上比较
供试品管 铁盐 对照管
本品2.0g
10μgFe3+/mL标准铁溶液2.0mL
+水20mL+硝酸3滴
缓慢煮沸5min 放冷
置50mL纳氏比色管中 ① +水使成约45mL ② +硫氰酸铵溶液 （30→100）3.0mL
加水至50mL，摇匀
11
同置白色背景上比较
最
未反应的原料、中 间体、副产物??
大 允 许
量
杂质限量
分 类
有机杂质 按结构分
无机杂质
信号杂质 按性质分
有害杂质
L
?
C?V S
?100%
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19.4.20
2
药物杂质的概念、来源和控制
杂质:药物中存在的 无治疗作用 ，或影响药物的疗 效和稳定性 ，甚至对人体健康有害 的物质。
目的：
葡萄糖杂质检查
1）通过葡萄糖杂质检查 ,了解一般杂质检查的项 目、方法和意义
2）掌握葡萄糖中氯化物、硫酸盐、铁盐、重金 属及砷盐限度检查的原理和方法
Pharmaceutical Analysis Experiment
19.4.20
1
杂质和纯度
一般杂质
生产过程
按来源分 特殊杂质
*来源
杂质
贮藏过程
加水约25mL溶解
供试品管 硫酸盐 对照管
本品2.0g
100μgSO42-/mL标准 硫酸钾溶液2.0mL
置50mL纳氏比色管中
置50mL纳氏比色管中 ①+稀硝酸10mL？ ②+水使成约40mL ③+硝酸银试液1.0mL
用水稀释至50mL，摇匀 在暗处？放置5min
同置黑色背景上比较
加水约40mL ①+稀盐酸2 mL？ ② +25%氯化钡5.0 mL