提取方法对茶多酚氧化酶活性的影响
连翘发酵茶多酚类物质提取工艺优化及抗氧化活性研究
连翘发酵茶多酚类物质提取工艺优化及抗氧化活性研究
连翘是一种常见的中药材，具有清热解毒、消肿止痛等功效。
近年来，研究表明连翘中含有丰富的多酚类物质，具有很好的抗氧化活性。
因此，对连翘发酵茶多酚类物质提取工艺进行优化，并研究其抗氧化活性，具有一定的研究意义。
本研究以连翘为原料，通过发酵和提取等工艺，提取出多酚类物质，并对其进行抗氧化活性研究。
首先，对发酵条件进行优化。
在发酵过程中，控制温度为30℃，湿度为80%，发酵时间为48小时。
通过比较不同发酵条件下的多酚类物质含量，确定了最佳的发酵条件。
接着，对提取工艺进行优化。
采用乙醇提取法和水提取法进行比较，结果表明乙醇提取法提取出的多酚类物质含量更高。
在乙醇提取法中，控制乙醇浓度为70%，提取时间为2小时，提取温度为60℃。
通过比较不同提取条件下的多酚类物质含量，确定了最佳的提取条件。
最后，对提取出的多酚类物质进行抗氧化活性研究。
采用DPPH自由基清除率和还原力两种方法进行测定。
结果表明，连翘发酵茶多酚类物质具有很好的抗氧化活性，能够有效清除自由基。
综上所述，本研究通过优化连翘发酵茶多酚类物质提取工艺，并研究其抗氧化活性，得出了一些有意义的结论。
这些结论对于进一步开发和利用连翘中的多酚类物质具有一定的指导意义。
山茶多酚的提取工艺优化及其抗氧化活性研究
山茶多酚的提取工艺优化及其抗氧化活性研究在当今社会中，人们对健康和美容的追求越来越重要。
而山茶作为一种常见的植物，其多酚具有出色的抗氧化性能，被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。
因此，对山茶多酚的提取工艺进行优化，并研究其抗氧化活性成为具有重要意义的研究课题。
首先，针对山茶多酚的提取工艺进行优化是必要的。
目前常用的提取方法包括水煮法、超声波辅助提取法和微波辅助提取法等。
在这些方法中，微波辅助提取法被普遍认为是一种高效、环保的方法，可以极大地提高提取效率。
因此，可以通过微波辅助提取法对山茶多酚进行提取。
其次，为了进一步优化山茶多酚的提取工艺，可以尝试不同的溶剂和提取时间。
由于山茶多酚具有一定的亲水性，因此水和乙醇都可以作为合适的溶剂。
此外，提取时间也会对提取效果产生影响，过长或者过短的提取时间都可能导致多酚的流失或者未完全提取。
因此，在实验中可以尝试不同的提取溶剂和时间，通过较多的实验数据寻找最佳的提取条件。
提取山茶多酚之后，可以进行进一步的抗氧化活性研究。
抗氧化活性是衡量物质抵抗氧化损伤能力的指标。
目前主要采用的方法包括DPPH自由基清除能力实验、金属离子螯合能力实验和过氧化氢酶活力实验等。
通过这些实验可以评估山茶多酚的抗氧化性能。
此外，还可以结合动物模型进行体内试验，研究其对抗自由基和氧化应激的作用。
除了研究山茶多酚的抗氧化活性，还可以进一步探索其在食品和化妆品领域的应用。
由于山茶多酚具有良好的抗氧化、抗菌和抗炎特性，可以应用于食品防腐剂、抗衰老保健品以及护肤品等方面。
因此，可以将山茶多酚应用于食品模型体系和皮肤模型体系，评估其抗氧化和保健特性，为其进一步应用提供支持。
综上所述，山茶多酚的提取工艺优化及其抗氧化活性研究是一个具有重要意义的课题。
通过优化提取工艺和研究其抗氧化活性，可以为山茶多酚的应用提供科学依据，并为保健品和化妆品的开发提供技术支持。
希望未来能有更多的研究在这个领域取得突破，为人们的健康和美容事业做出更大贡献。
茶多酚的提取方法及应用前景
茶多酚的提取方法及应用前景摘要：茶多酚是目前尚不能人工合成的纯天然、多功能、高效能的抗氧化剂和自由基净化剂,可用超临界CO2萃取法、离子沉淀提取法、树脂吸附分离法、有机溶剂萃取法提取。
茶多酚具有防癌抗癌、降脂降压降糖、美容健身等功能。
关键词：抗氧化剂；茶多酚；提取；应用1 茶多酚简介茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称，又称茶鞣质或茶单宁，是一种易溶于水及有机溶剂的白色晶体，味苦涩，耐热性及耐酸性好,在pH = 2～7 范围内均十分稳定，在碱性介质中不稳定,易氧化褐变。
本草千叶IT茶中含有丰富的茶多酚，其主要组分为儿茶素类(黄烷醇类)、黄酮及黄醇类、花色素类和酚酸及缩酚酸类多酚化合物的复合体,其抽取混合物称茶多酚其中儿茶素类约占总量的80%,包括4种形式儿茶素：没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、没食子儿茶素( EGC)、儿茶素没食子酸酯(ECG)、儿茶素( EC)。
2 提取方法茶多酚的生产提取方法有多种。
效果较好的是离子沉淀提取法、溶剂提取法、树脂吸附分离法、超临界CO2萃取法、微波浸提法、超声波浸提法等方法。
2.1 离子沉淀提取法盐沉淀提取法根据茶多酚能与无机盐中的金属离子反应生成沉淀的特性来生产茶多酚,是生产高纯度茶多酚的一种简单而廉价方法，有效成分含量可大于95% ，提取率可达7.0%～10.5 %。
此法将茶叶用热水或乙醇溶液浸提过滤,调节滤液的pH值为碱性，在滤液中加入沉淀剂使茶多酚沉淀,过滤后滤液用于提取咖啡因,沉淀用稀H2SO4溶解后用乙酸乙酯萃取,得到含茶多酚的乙酸乙酯溶液，再经减压蒸馏浓缩、干燥得到茶多酚。
目前,常用沉淀剂有三种:重金属碱式盐,如Pb(OH)Ac、Cu(OH)Ac等;氢氧化物,如Ca(OH)2强碱,均有腐蚀作用；离子,如Ca2+、Mg2+、Al3+、Zn2+等,可在碱性条件下沉淀,在酸、中性条件下转溶，这些金属离子可以单独使用,也可以复合使用。
沉淀法因不用或少用有机溶剂、工艺简化,现已有工业化生产,但茶多酚得率较低, 且产品品质含量稍有增加。
茶多酚的提取纯化及其抗氧化性能研究
茶多酚的提取纯化及其抗氧化性能研究茶叶是中国优秀的传统农产品，因其含有大量的茶多酚，在人们的生活中受到广泛的关注。
茶多酚具有抗氧化、杀菌、抑菌等多种生物活性，对人体健康具有积极的作用。
因此，提取茶多酚并进行纯化研究具有重要的意义。
一、茶多酚的提取茶多酚可以从茶叶中提取获得。
一种较常用的提取方法是利用溶剂法进行提取。
首先，将茶叶样品晒干后研磨成粉末，然后将茶叶粉末放入瓶子中，并加入合适的溶剂。
通过反复提取，可以使茶多酚充分溶解到溶液中。
常用的溶剂有乙醇、丙酮等，数字上要求浓度不同。
最终，通过蒸馏或冷冻干燥获得茶多酚。
另一种提取方法是超临界流体萃取法。
超临界萃取通常利用超临界二氧化碳作为溶剂，其优点在于无毒性、无残留、操作简单等。
超临界萃取法在提取茶多酚时不需要高温，更适合提取易挥发性的成分。
二、茶多酚的纯化茶叶中的茶多酚含量较低，需要进行纯化提高其含量。
Fetrow 和 Avila 等人就茶多酚的纯化进行了研究。
首先，利用海绵吸附柱进行预处理，将杂质去除。
然后进行阴离子交换色谱分离和高效液相色谱纯化。
最终，通过Vacuum-drying的方法获得纯的茶多酚。
该方法能够有效地去除杂质，获得高纯度的茶多酚。
三、茶多酚的抗氧化性能茶多酚作为一种抗氧化剂，可以中和自由基，并减缓细胞的氧化损伤，起到延缓衰老、促进健康的作用。
针对茶多酚的抗氧化性能，当今的研究主要集中在其体外和体内抗氧化性能的测定上。
体外抗氧化性能研究目前，体外抗氧化性能评价主要采用自由基清除试验、铁离子螯合能力试验、脂质过氧化反应试验及还原能力测定试验等方法。
针对这些方法，茶多酚的抗氧化性能也被广泛研究。
Zhao 等人通过自由基清除试验评价绿茶中茶多酚的抗氧化性能，发现含量高的多酚对自由基有很好的清除作用。
Jia 等人则借助铁离子还原势和铁离子离解势阐述了绿茶中茶多酚与铁对接反应的机理。
体内抗氧化性能研究体内抗氧化性评价方法主要包括病理学观察法、生物化学分析法和红细胞型抗氧化性测定等。
超声波萃取提取工艺对茶多酚的影响研究
超声波萃取提取工艺对茶多酚的影响研究茶多酚是茶叶中具有重要生物活性的成分之一，具有很多的营养和保健功效，如抗氧化、抑制肿瘤、降低胆固醇等。
因此，研究茶多酚的提取工艺具有重要意义。
本文旨在探究超声波萃取提取工艺对茶多酚的影响。
一、超声波萃取技术原理及特点超声波萃取技术是一种利用超声波来帮助提取物质的技术，其原理是将超声波引入被提取物质中，使物质的细小颗粒被分散，加速提取物质的扩散速率。
该技术具有操作简单、高效、快速等特点，并且对反应物质质量的损伤小，因此逐渐成为提取工艺中的重要手段。
二、超声波萃取技术在茶多酚提取中的应用超声波萃取技术已经被广泛应用于茶多酚的提取中。
以往的研究表明，超声波能够有效地促进茶多酚的提取，提取率高达90%以上。
此外，超声波还能改善茶多酚在提取过程中的稳定性，保证成分的含量和质量。
三、超声波萃取时间对茶多酚含量的影响超声波萃取时间是影响茶多酚提取的一项重要因素。
若超声波时间太短，则无法充分破碎组织细胞，难以提取更多的茶多酚；若超声波时间太长，则容易使茶多酚降解、氧化，从而导致茶多酚含量降低。
因此，在茶多酚提取中需要掌握适当的超声波萃取时间。
四、超声波功率对茶多酚含量的影响超声波功率也是影响茶多酚提取的重要因素之一。
一般来说，超声波功率越高，茶多酚的提取效率越高，但过高的超声波功率也会破坏茶多酚的结构，导致茶多酚含量降低。
因此，需要在优化超声波功率与茶多酚含量之间的关系，并寻找合适的超声波功率条件以达到最佳提取效果。
五、超声波频率对茶多酚含量的影响超声波频率也是影响茶多酚提取的因素之一。
研究表明，超声波频率越高，茶多酚的提取效率越高。
这是因为超声波在引入叶片的过程中产生了高频率的振动，使茶多酚的细小颗粒能够得到更好的分散，提高其可溶性。
但是，过高的超声波频率也会影响茶多酚的稳定性，导致茶多酚含量下降。
因此，在超声波提取茶多酚时，也需要对超声波频率进行优化。
六、总结综合以上讨论，超声波萃取技术在茶多酚提取过程中具有很大的应用前景。
茶多酚的提取方法及应用研究进展
茶多酚的提取方法及应用研究进展一、本文概述茶多酚，作为茶叶中的重要成分，近年来在食品、医药、化妆品等领域受到了广泛关注。
茶多酚具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性，对人体健康有着积极的影响。
因此，研究茶多酚的提取方法及其应用进展对于推动相关产业的发展具有重要意义。
本文旨在综述茶多酚的提取方法及其在各领域的应用研究进展，以期为相关领域的研究者和从业者提供有益的参考。
文章将首先介绍茶多酚的基本概念、化学结构和生物活性，为后续的研究进展奠定理论基础。
接着，重点阐述茶多酚的提取方法，包括传统的水提法、有机溶剂提取法以及新型的超声波辅助提取、微波辅助提取等现代提取技术。
在提取方法介绍的基础上，文章将综述茶多酚在食品、医药、化妆品等领域的应用研究进展，特别是在抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等方面的应用效果。
文章将展望茶多酚的未来研究方向和应用前景，以期为推动茶多酚产业的发展提供有益的思路和建议。
通过本文的综述，希望能够为相关领域的研究者和从业者提供全面的茶多酚提取方法及应用研究进展信息，为茶多酚产业的持续发展做出贡献。
二、茶多酚的提取方法茶多酚的提取是茶叶深加工的关键步骤，其提取方法的选择直接影响到茶多酚的产量、纯度和活性。
目前，茶多酚的提取方法主要包括溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超临界流体萃取法以及酶法提取等。
溶剂提取法：这是最早也是最常用的提取方法。
利用茶多酚在不同溶剂中的溶解度差异，选择合适的溶剂进行提取。
常用的溶剂有乙醇、丙酮、甲醇等。
该方法操作简便，成本较低，但提取时间较长，且易受到温度、pH值等因素的影响。
超声波辅助提取法：利用超声波产生的空化效应、机械效应和热效应，增强溶剂对茶多酚的渗透能力和溶解能力，从而加速提取过程。
这种方法提取时间短，提取效率高，但设备成本较高。
微波辅助提取法：微波能够穿透物料内部，使物料分子在微波场的作用下高速运动，产生热能，从而加速茶多酚的溶解和扩散。
这种方法提取效率高，操作简便，但需要注意微波功率和提取时间的控制，以避免破坏茶多酚的结构。
茶叶多酚提取及其抗氧化性能研究
茶叶多酚提取及其抗氧化性能研究茶叶多酚是指从茶叶中提取出来的一种黄色或浅绿色的化学物质，具有抗氧化、抗菌、降脂、预防癌症、降血压等多种保健作用。
茶叶多酚的提取与抗氧化性能研究一直是茶叶工业和医药学界的研究热点。
一、茶叶多酚的提取方法1. 溶剂提取法：将茶叶粉末用不同种类的溶剂进行提取，在加入起薪和浓缩等多个步骤后即可得到茶叶多酚。
但是该方法提取效率不高，且在测定茶多酚含量时较易受其他因素的影响，共存物质干扰比较大。
2. 家用咖啡机提取法：将适量的茶叶粉末放入家用咖啡机中，加入适量的水后进行提取，可以得到带有浓郁茶香的茶叶多酚液。
该方法操作方便，提取效率较高，但工业生产难以应用。
3. 超声波辅助提取法：利用超声波的高频振动原理，将茶叶粉末在超声波的辅助下进行提取，可以提高提取效率及茶多酚的纯度。
同时，该方法不需要额外添加任何化学试剂，安全无毒，具有很好的应用前景。
二、茶叶多酚的抗氧化性能研究茶叶多酚在营养保健领域中的应用主要是基于其抗氧化功能。
氧化是机体内部发生的一种化学反应，会释放出大量的自由基，自由基的积累会对身体健康造成很大影响。
而茶叶多酚具有很强的自由基清除能力，故具有一定的抗氧化性能。
可以通过下面两个方面来研究茶叶多酚的抗氧化性能：1. 体外实验：一个比较常见的方法是利用DPPH实验法研究提取得到的茶叶多酚在体外清除自由基的能力。
使用DPPH自由基与提取得到的茶叶多酚反应后，反应液颜色会逐渐由紫色转为黄色，实验将变化后的DPPH溶液的吸光度值与茶叶多酚的浓度相关联，由此得到了茶叶多酚的抗氧化能力。
结果表明，提取得到的茶叶多酚具有良好的抗氧化性能。
2. 体内实验：通过给实验动物灌胃茶叶多酚，然后检测动物体内的抗氧化指标是否有所提高，来研究茶叶多酚的体内抗氧化性能。
在不同剂量给予小鼠茶叶多酚后，测定了小鼠血浆和组织中的抗氧化酶活性，发现灌注茶叶多酚的小鼠血液及组织中的SOD酶活性、谷胱甘肽过氧化氢酶（GPx）活性均显著高于对照组，可见茶叶多酚具有良好的体内抗氧化性能。
茶多酚的提取方法研究
茶多酚的提取方法研究论文导读：茶多酚是一类存在于茶叶中的多羟基酚性化合物的混合物,具有良好的抗氧化性能,其抗氧化性能比维生素E的抗氧化效价高10～20倍,而且无毒,因此是一种理想的食品天然抗氧化剂。
目前国内外茶多酚粗品的提取的方法主要有:溶剂提取法、离子沉淀法、树脂吸附分离法、超临界流体萃取法、超声波浸提方法、微波浸提法等6种方法.此外,还有低温纯化酶提取法,和盐吸法等。
沉淀法的优点是:①减少了有机溶剂的使用量,从而大大减少了环境污染,生产安全性好;②工艺比较简单:茶叶经浸泡后,加入沉淀剂即可得到茶多酚与金属结晶性沉淀物,不必浓缩提液,可在一定程度上降低能耗,成本低;③选择性强,因而产品的纯度较好,可达95%以上,有的高达99.5%;④产品色泽好,水溶性好.缺点是:①无机盐沉淀剂沉淀转溶时pH值波动大,而茶多酚在碱性条件下易氧化,影响产品品质;②过滤和稀酸转溶过程中茶多酚的损失较大;③溶液中咖啡碱等干扰物质因与茶多酚配合物的吸附产生共沉淀作用而被带入沉淀中,影响茶多酚的纯度.此外,有些金属盐残留对产品安全性也构成隐患;④工艺操作控制比较严格,废渣、废液处理量大。
关键词：茶多酚，溶剂提取，沉淀法，超临界流体微波萃取0.引言茶多酚是一类存在于茶叶中的多羟基酚性化合物的混合物, 具有良好的抗氧化性能, 其抗氧化性能比维生素E的抗氧化效价高10 ～20 倍,而且无毒, 因此是一种理想的食品天然抗氧化剂。
茶多酚（Tea Polyphenols）是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。
其中以黄烷醇类物质（儿茶素）最为重要。
茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。
本草千叶IT茶中含有丰富的茶多酚(学名Camelliasinensis)。
日本千叶大学山下泰德教授等科学家研究表明，茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锶90和钴60迅速排出体外，被健康及医学界誉为“辐射克星”。
茶多酚的提取技术
论文导读：茶多酚是一类存在于茶叶中的多羟基酚性化合物的混合物,具有良好的抗氧化性能,其抗氧化性能比维生素E的抗氧化效价高10～20倍,而且无毒,因此是一种理想的食品天然抗氧化剂。
目前国内外茶多酚粗品的提取的方法主要有:溶剂提取法、离子沉淀法、树脂吸附分离法、超临界流体萃取法、超声波浸提方法、微波浸提法等6种方法.此外,还有低温纯化酶提取法,和盐吸法等。
沉淀法的优点是:①减少了有机溶剂的使用量,从而大大减少了环境污染,生产安全性好;②工艺比较简单:茶叶经浸泡后,加入沉淀剂即可得到茶多酚与金属结晶性沉淀物,不必浓缩提液,可在一定程度上降低能耗,成本低;③选择性强,因而产品的纯度较好,可达95%以上,有的高达99.5%;④产品色泽好,水溶性好.缺点是:①无机盐沉淀剂沉淀转溶时pH值波动大,而茶多酚在碱性条件下易氧化,影响产品品质;②过滤和稀酸转溶过程中茶多酚的损失较大;③溶液中咖啡碱等干扰物质因与茶多酚配合物的吸附产生共沉淀作用而被带入沉淀中,影响茶多酚的纯度.此外,有些金属盐残留对产品安全性也构成隐患;④工艺操作控制比较严格,废渣、废液处理量大。
关键词：茶多酚，溶剂提取，沉淀法，超临界流体微波萃取0.引言茶多酚是一类存在于茶叶中的多羟基酚性化合物的混合物,具有良好的抗氧化性能,其抗氧化性能比维生素E的抗氧化效价高10～20倍,而且无毒,因此是一种理想的食品天然抗氧化剂。
茶多酚（TeaPolyphenols）是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。
其中以黄烷醇类物质（儿茶素）较为重要。
茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。
本草千叶IT茶中含有丰富的茶多酚(学名Camelliasinensis)。
日本千叶大学山下泰德教授等科学家研究表明，茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锶90和钴60迅速排出体外，被健康及医学界誉为“辐射克星”。
茶叶中天然抗氧化剂茶多酚的提取方法及应用研究进展
茶叶中天然抗氧化剂茶多酚的提取方法与应用研究进展1引言1.1研究目的和意义由于人们生产、生活需求的不断扩大，天然产物有效成分的提取分离与应用研究获得了前所未有的发展。
绿色天然提取物茶多酚，在绿色的二十一世纪极具发展潜力。
据有关专业人士介绍，目前，茶多酚在全球年消耗量约1800吨，其中，美国约700吨，西欧500吨，日本500吨，其他国家和地区约400吨。
近年来除欧美国家需求逐年增加外，东南亚、南亚等消费量也有较快增长。
因此，当前茶多酚的市场前景广阔，有关专家预计，未来几年，国内外茶多酚需求量将迅速从目前的1800吨攀升至2100吨以上，其市场规模可达十几亿元。
我国是世界茶叶生产大国之一，每年约有70万吨茶叶，其中有约15万吨茶片、茶末，可供提取2.3吨食品级茶多酚。
因此开发天然抗氧化剂茶多酚将有充足的资源保证。
自从新世纪对茶多酚类开展系统研究以来，茶多酚的许多功能被陆续发现。
大量的研究表明，茶多酚不仅是一种天然的无毒的抗氧化剂，而且也是一种理想的天然药物，具有清除自由基和抗氧化等生物活性。
1.2国内外研究现状我国对茶多酚的研究开始于五六十年代，而专业研究开始于七十年代，目前我国对茶多酚的研究在国际上处与领先水平。
国内生产的茶多酚含量大于89%，咖啡碱小于2%。
当前茶多酚已被广泛应用于食品工业与医药行业。
由于茶多酚具有生物活性的特性，不断地对茶多酚进行研究，不断地出现新的研究成果。
王玉春在茶多酚的提取方法及应用研究进展一文中就茶多酚提取的各种方法的基本流程及各自得优缺点和茶多酚的用途做一综述。
曹群在茶多酚的提取方法研究中对现如今对茶多酚的提取方法进行简单的归纳，并比较各种提取工艺的优缺点。
李俊华在茶多酚的提取工艺研究中经过对茶多酚的性质及现有提取方法利弊的分析，确定采用超临界二氧化碳萃取技术对茶叶中的茶多酚进行了萃取研究，结果表明超临界二氧化碳萃取技术是可行的，并探讨了其较佳的提取工艺参数。
王艳在天然抗氧化剂—茶多酚提取、分离和纯化方法一文对其性质、结构和组成做了简单的介绍，重点介绍了茶多酚的主要提取、分离和纯化方法。
山茶花中多酚提取的方法及其抗氧化活性测定研究
提取 方 法 的 多酚 得 率及 纯度 ， 测定其清除 １ ， １ 一 二 苯基一 ２ ＿ 三 硝 基 苯肼 （ Ｄ Ｉ ） Ｐ Ｈ） 、 对 羟 自由基 （ ・ Ｏ Ｈ） 、 抗超氧 阴离子 （ ０ ） 和总抗氧化能力 ， 为 山茶 多酚抗 氧化 活性物 的鉴定和 综合 利 用提供
参考 。结果表 明： 大孔树 脂吸 附法提 取 多酚 （ ８ ９ ． ３ ４ ９ ／ ６ ） 纯度 比有 机溶 剂提 取 多酚 （ ７ ２ ． ２ ８ ） 纯度 好 。以大孔树脂吸 附法提 取的茶 多酚做 抗氧化 活性试验表 明， 茶 多酚对 Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ 的最大清除率达
第一 作者 简 介 ： 邹 家丽 （ １ ９ ８ ７ 一 ） ， 女， 硕 士， 现 主要 从 事植 物 生物 化
学研 究 工作 。Ｅ － ｍａ ｉ ｌ ： ｚ ｏ ｕ ｊ ｉ ａ ｌ ｉ １ ９ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｒ ｎ ．
试验采用有机 溶剂 法和大 孑 Ｌ 树脂 吸 附法提取 山茶 花 中 的多酚 ， 对２ 种方法提取所 得的多酚得 率及纯度 进行 比 较。通过测定 山茶花多 酚清 除 １ ， １ 一 二 苯基一 ２ 一 三硝基 苯 肼（ Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ） 、 对羟 自由基（・ ＯＨ） 、 抗超氧 阴离子 （ ０ ） 和 总抗氧化能力来评价其抗氧化活性 ， 以期为 山茶花 多酚 抗 氧化活性物的鉴定及综合利用提供参考 。
法［ ３ 、 超临界流体萃取法ｌ ４ 等 。体外抗氧化活性 的测
定方法 主 要 有 抗 的 产 生Ｌ ４ 引， 总抗 氧 化 能 力 的 测 定［ ４ ， 清除 自由基［ ４ ４ ＿ ４ ６ ］ ， 抗油脂 自动氧化［ “ 等 。该
氧化的作 用ｌ Ｉ 驼 。 。以其 酚羟基 作 为氢 供 体 ， 与 多 种 活性氧 作用 ， 可将 高活性 物质 还原 成较 稳定 的物 质 ，
茶多酚提取论文
茶多酚提取的研究进展院系：xxx班级：文生105-2姓名：xxx学号：************茶多酚提取的研究进展摘要：本文阐述了茶多酚的提取的方法及其优缺点并介绍了新工艺。
关键词：茶多酚；提取前言茶是人们日常生活中一种常见的保健饮品,在中国饮茶有着几千年的历史。
明朝李时珍在《本草纲目》中记载说:“茶苦而寒, 最能降火,火为百病之因,火降则百病清也。
”说明茶具有独特的药理作用, 该作用是由茶叶中特定的化学成分决定的。
茶叶主要化学成分有: 多酚类、氨基酸和蛋白质、芳香类物质、生物碱、糖类化合物、色素及其他化学成分[1]。
其显著特点是富含酚类化合物,茶叶的许多作用是其中茶多酚在起作用。
目前,国内外有关茶多酚的应用研究已有很多方面, 主要包括抗癌、抗氧化和延缓衰老、抗菌和抗病毒、降血脂、油脂抗氧化作用、色素保护作用、除臭剂、防龋作用、抑制动脉粥样硬化等多种功能。
其抗氧化活性高于一般非酚性或单酚羟基类抗氧化剂[2]。
茶多酚已成为医药、食品界开发的热点,目前除了茶多酚片剂、胶囊剂等外,作为抗氧化剂和食品添加剂,在粮油食品、方便食品、水产品、肉制品、调味品、糖果、饮料等多类食品中均可应用, 有强劲的市场需求,其开发和应用前景十分广阔。
茶多酚的强还原性可以防止天然色素如胡萝卜素、叶绿素红花黄、胭脂红和维生素B 等色素受光氧化作用而褪色，可作为保鲜剂保持色泽鲜艳稳定[6]。
中国是世界上茶叶产量最高的国家,每年约产65万吨茶叶,其中约有13万吨的茶片和茶末,现已研制出茶多酚胶囊、片剂、含片等多种剂型 [7]。
中国的茶叶资源十分丰富, 在茶叶生产过程中会产生的大量修剪叶,另外还有滞销的粗茶、老茶,如果能从中提取茶多酚,将会有充分的资源保证。
茶多酚的检测原理是根据《GB 8313-87 茶多酚的测定》,茶叶中的多酚类物质能和亚铁离子形成紫蓝色物质,利用分光光度法可测定其含量。
[1]茶多酚的提取方法1 盐析法盐析法的原理是在水溶液中加入无机盐饱和时,可使某些物质溶解度降低,甚至沉淀析出。
茶多酚的提取工艺及其抗氧化活性研究
茶多酚的提取工艺及其抗氧化活性研究茶多酚是茶叶中的一种重要活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性。
因此，研究茶多酚的提取工艺和抗氧化活性具有重要意义。
本文将介绍茶多酚的提取工艺及其抗氧化活性研究。
一、茶多酚的提取工艺茶叶中茶多酚的提取工艺一直是茶叶加工技术的重要环节。
现阶段常用的茶多酚提取方法有溶剂提取法、酶法、超声波提取法等。
溶剂提取法是最常见的茶多酚提取方法之一。
通过使用有机溶剂（如乙醇、丙酮等）将茶叶中的茶多酚从茶叶中提取出来。
这种方法具有操作简单、成本低廉等优点，但有可能存在有机溶剂残留的问题。
酶法是利用酶的作用将茶多酚从茶叶中提取出来。
通过将茶叶与酶液反应，利用酶的水解作用将茶多酚释放出来。
这种方法具有营养价值高、提取效果好等特点。
超声波提取法是一种较新的茶多酚提取方法。
通过超声波的机械作用，使茶叶细胞破碎，茶多酚从细胞中释放出来。
这种方法提取效率高、时间短，但设备较为昂贵。
二、茶多酚的抗氧化活性研究茶多酚作为一种重要的抗氧化剂，其抗氧化活性也成为研究的重点之一。
抗氧化活性主要通过测定抗氧化指标来评估，如DPPH自由基清除能力、超氧阴离子清除能力、还原力等。
DPPH自由基清除能力是常用的评估茶多酚抗氧化活性的方法之一。
DPPH是一种自由基，通过测定茶多酚样品对DPPH自由基的清除能力，可以评估茶多酚的抗氧化活性。
研究表明，茶多酚的抗氧化活性与其浓度呈正相关关系。
超氧阴离子清除能力是评估茶多酚抗氧化活性的另一种指标。
超氧阴离子是一种高活性的自由基，能与DNA、脂质等生物分子发生反应，导致细胞损伤。
茶多酚通过清除超氧阴离子，可以保护细胞免受损伤。
还原力是茶多酚抗氧化活性的指标之一。
通过测定茶多酚还原双铁氰化钾的能力，可以评估茶多酚的还原力，进而评估其抗氧化活性。
研究表明，茶多酚具有显著的抗氧化活性，可以清除自由基，保护细胞免受氧化损伤。
茶多酚的抗氧化活性主要受其提取工艺、浓度及茶叶品种等因素的影响。
生物酶在茶叶提取加工技术中的应用研究
生物酶在茶叶提取加工技术中的应用研究一、综述随着科技的不断发展，茶叶提取加工技术也在不断地改进和完善。
生物酶作为一种天然、高效的催化剂，已经在茶叶提取加工过程中发挥了重要作用。
本文将对生物酶在茶叶提取加工技术中的应用研究进行综述，以期为茶叶产业的发展提供有益的参考和借鉴。
首先生物酶在茶叶提取过程中可以提高提取效率，茶叶中含有丰富的酚类、儿茶素、咖啡碱等有效成分，这些成分的提取过程往往受到温度、pH值等因素的影响，导致提取效率较低。
而生物酶具有专一性酶活性的特点，可以根据茶叶中不同成分的特性选择合适的酶类进行催化反应，从而提高提取效率。
此外生物酶还可以通过降低化学反应活化能的方式加速反应速率，进一步提高提取效率。
其次生物酶在茶叶提取过程中可以提高产品品质，茶叶中的有效成分往往在提取过程中容易发生氧化、聚合等不良变化，影响产品的品质。
而生物酶具有抗氧化、抗聚合等作用，可以在提取过程中保护茶叶中的有效成分，减少不良变化的发生，从而提高产品品质。
此外生物酶还可以促进茶叶中有效成分的溶解和扩散，有利于产品的形成和稳定。
再次生物酶在茶叶加工过程中可以降低能耗和环境污染，传统的茶叶加工方法往往需要较高的能耗和较长的时间，而且会产生一定的环境污染。
而生物酶作为绿色、环保的催化剂，可以在茶叶加工过程中替代部分化学试剂，降低能耗和环境污染。
同时生物酶的应用还可以简化加工工艺流程，提高生产效率。
本文还将对目前生物酶在茶叶提取加工技术中的研究进展进行梳理和总结，以期为相关领域的研究者提供参考。
A. 研究背景和意义随着科技的不断发展，生物酶在茶叶提取加工技术中的应用越来越受到人们的关注。
生物酶是一种具有催化功能的蛋白质，具有高效、环保、无毒副作用等特点，因此在茶叶提取加工过程中具有广泛的应用前景。
本研究旨在探讨生物酶在茶叶提取加工技术中的应用研究，为茶叶产业的发展提供技术支持和理论依据。
茶叶作为一种传统的饮品，在全球范围内有着广泛的消费群体。
普洱茶多酚的提取及抗氧化作用
茶多酚的
酯体积比萃取
获得率（%）
2：1
35
1：1
48
1: 2
52
1: 3
52
·241·
当代教育实践与教学研究
比较表中茶多酚的获取率可知在浸提液与乙酸乙酯体积比
1:2 时，茶多酚的获得率不再增加。
2. 普洱生茶普洱熟茶提取率
加剂（GB12493-1990）。此外，它还具有清除自由基、抗衰老、
抗辐射、减肥、降血脂、防癌、防止心血管病、抑菌抑酶、沉
淀金属等多方面的功能。茶多酚在食品加工、医药保健、日用
化工等领域具有广阔的应用前景。本实验主要研究从云南普洱
茶叶中提取天然抗氧化剂 —— 茶多酚的方法，工艺包括沸水提
取、沉淀、酸化萃取、脱溶剂及真空干燥，其特点在于提取液
加 0.01％过氧化氢 1mL，于 37℃保持 60min，于 536nm 处测其
吸光度，其值为 Ap。用 1mL30％乙醇代替 1mL 过氧化氢，测
得吸光度为 Ab。用 1mL 试样代替 1mL 蒸馏水，测得吸光度为
AS。羟自由基清除率（d）按下式计算：
d=（As － Ap）/(Ab － Ap)×10OH
OH
OH
OH
OR2 H
R1
OH
L-EC: R1=H R2=H
OH
L-EGC: R1=OH R2=H
OH
L-ECG: R1=H R2= C O
OH L-EGCG: R1=OH R2= C
O OH
图1 茶多酚的结构式
OH OH
茶多酚是一种理想的天然食品抗氧化剂，已被列为食品添
化合物的总称，其抗氧化的活性高于一般非酚类或单酚羟基类
抗氧化剂。茶多酚的主要成分是儿茶素，占茶多酚含量的 80%
茶多酚提取分离技术研究进展
的产 品［ ６ ］ 。 就提 高生产效益这一 问题上 ， 湖北省化学研究院
＂ 采用复合溶剂二氯 甲烷 和乙醇 、 二 氯甲烷和丙酮 、 三氯 甲 烷和 乙醇 、三氯 甲烷和丙酮的 四组双组分溶剂脱 除茶多酚 水溶液 中的咖啡因 ，最终得 到的茶多酚含 量 ≥９ ５ ％，咖啡
碱 ≤０ ． ５ ％。
溶液 中形 成不 同溶解 性 的衍 生物 ，可将 其从 浸提 液 中去 除， 与原工艺 相 比， 能得 到理化特性 、． ｏ ０ 李 军等 四级龙井 ２ １ ． ｏ ｏ 朱 尚彬 等 庐 山毛尖 ２ ２ ． ０ ０ 宓晓黎等 宜兴茶场产 ４ １ ． ３ ７ 于基 成等 绿茶 （ 毛峰 ） ２ ５ ． Ｏ Ｏ 李 林 绿茶 ２ ５ ． ０ ０ 王小梅等 粗茶 叶 ２ ０ ． ０ Ｈ Ｄ
， ，
闪 式 浸提率提高 ， 浸提时间短 提取法 （ 几十秒 ） 酶法 逆流提取 浸提率高于沸水浸提法
常温操作 ， 能有效保 乙醇用量较常规法减少 操作简便 持Ｔ Ｐ的活性 ４ ６ 节约能源 ， 生产成本较低 ７ ％， 环境 友好
，
．
浸提温度为 ５ Ｏ ～ 反应条件温和 ， 无有机溶 需控制温度 ６ ０ ℃ ｐ Ｈ和时 间等 ， 较常规方法繁琐 保持 Ｔ Ｐ的活性 剂， 环境友好无污染
在纯化茶多酚之前 ， 要对浸提液进行初步提纯。 目前采 用较多的有超滤和离心两种方法 ， 得到的初提纯液再进 行进
一
步 的提纯。
１ ． 溶 剂 萃 取 法
有机溶剂萃取法是较传统 的茶多酚纯化方法 ， 利用 茶多 酚和茶叶中其他成分在不 同溶 剂 中的溶解度 差异进行分 离 提纯 。 由于咖啡碱和茶多酚在 氯仿等 卤代烃 中的溶解度 不 同， 可由此 除去咖啡碱 ； 可用石油醚等脱色素 ； 由于茶多酚易
白茶中茶多酚提取工艺及抗氧化活性的研究
白茶中茶多酚提取工艺及抗氧化活性的研究杨皓彬杨娜柏雪欧阳秋芷陆诗莹蔡雪梅王鸿飞*（宁波大学食品科学与工程系浙江宁波315211）摘要采用水提法研究白茶中茶多酚的提取工艺及其抗氧化活性。
先分别研究浸提时间、浸提温度和液料比3个单因素对白茶中茶多酚提取率的影响，然后在单因素试验的基础上以响应面分析优化提取工艺条件；以白茶中茶多酚的总抗氧化能力、清除DPPH 自由基和清除·OH 自由基能力来评价其抗氧化活性。
结果表明：适宜的工艺条件是：时间2.5h ，温度60℃，液料比40mL/g 。
在该条件下白茶中茶多酚的提取率为5.65%。
白茶中茶多酚具有很强的抗氧化能力，对DPPH 、·OH 有清除能力，自由基的IC 50为0.181，6.20μg/mL 。
关键词白茶；茶多酚；提取工艺；抗氧化文章编号1009-7848（2014）12-0024-08白茶（White Tea ）在中国已有千余年的历史，白茶树分布于福建、广东、浙江、安徽、湖北等地，其茶叶是一种轻微发酵而成的茶，味道毫香清鲜，茶汤颜色清澈显绿[1]。
白茶中含有丰富的茶多酚、黄酮等物质。
白茶中茶多酚又叫茶单宁、茶鞣质，是多羟基酚类化合物的总称，简称TP （Teaupolyphenl ），其主要成分有茶素类（黄烷醇类）、酚酸、黄酮醇类、缩酚酸类等，其中儿茶素类化合物占茶多酚总量的65％～80％[2]。
茶多酚作为抗氧化剂可应用于肉制品加工、油脂贮藏及焙烤食品、乳制品种饮料配制等方面[3]。
其作为保鲜剂，能够减缓采摘后水果和蔬菜的生化活动，推迟其后熟期；可以防止天然色素（如胡萝卜素、叶绿素、维生素B 2及胭脂红等）受光氧化作用而退色[4]。
本文通过水提法研究白茶茶多酚的提取工艺，并研究裂白茶茶多酚的抗氧化性，为白茶开发利用开辟一条新途径。
1材料和方法1.1材料与试剂白茶：产于浙江丽水；茶多酚：生化试剂，上海源叶生物科技有限公司；TPTZ （三吡啶三吖嗪）：分析纯（≥99%），购于sigma-Aldrich 公司；DPPH（1，1-二苯基-2-三硝基苯肼），和光纯药工业株式会社；磷酸氢二钠：分析纯，天津市巨星圣源化学试剂有限公司；磷酸二氢钾：分析纯，国药集团化学试剂有限公司；酒石酸钾钠：分析纯，国药集团化学试剂有限公司；无水乙醇：分析纯，国药集团化学试剂有限公司。
不同提取方法对茶叶中药用成分茶多酚含量影响的比较研究
关键词 ：茶叶 ； 提取 ； 茶 多酚溶 出量 ； 没食子酸 ； 含 量比较 中图分类号 ： Ｒ ２ ８ ４ 文献标 志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ７— ２ ３ ４ ９ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ９— ０ ０ ６ ６— ０ ３ 化合物是茶 多酚的主要成 分 ， 也是茶 叶的特有成 分¨ ］ 。茶 多酚中几种 含量较 高的儿 茶素分 别是 ： 左旋 一表 没食 子儿茶
摘 要 ： 目的 研 究茶 叶 中天 然 抗 氧 化 剂 一 茶 多酚 的最 佳 提 取 条 件 。 方 法 对 不 同茶 叶 采 用加 热 回 流 、 常温浸提 、 ７ ０ ￣ Ｃ温 浸 、
超声 、 重 复提取 等方法。以提取物 的量为评价标 准 ， 优选 出提取粗茶 多酚的最佳提 取工艺 ， 采 用紫外 一可见分 光光度法测 定其茶 多酚含量。结果 超声和 多次重复提取对茶 多酚的提取 效率 最佳 。结论 超声和 多次重 复提 取 法作 为茶 叶 中茶 多酚含量 测定
ＯＨ ＯＨ
经》 记载 ： “ 神农尝百 草 ， 日遇 七 十二 毒 ， 得茶 乃 解 ” 。唐代 陈 藏器在《 本草拾遗》 中说 ： “ 诸药 为各病 之药 ， 茶 为万病 之药” 。 明朝李 时珍 在《 本 草纲 目》 中记载 说 ： “ 茶 苦 而寒 ， 最 能降火 ，
火为百病之 因， 火 降则百病 清也 ” ， 顾元庆 《 茶谱 》 记载： “ 饮茶 能止渴 、 消食 、 除痰 、 少睡 、 利尿道、 明 目益思 、 除烦 、 去腻 ， 人固 不可一 日无茶” ｌ ２ 。近年来 ， 国内外的 大量研究 表 明， 茶 叶具
云 南 中 医 中 药 杂 志
２ ０ １ ４年第３ ５ 卷第９ 期
茶多酚的提取影响因素分析
茶多酚的提取影响因素分析
茶多酚的提取影响因素分析包括以下几个方面：
1. 原料选择：茶多酚主要存在于茶叶中，茶叶的品种、采摘季节和处理工艺等因素会影响茶多酚的含量和品质。
一般来说，新鲜嫩叶中的茶多酚含量较高。
2. 提取溶剂选择：茶多酚的提取溶剂对提取效果有很大影响。
常用的溶剂包括水、乙醇、丙酮等。
不同溶剂对茶多酚的溶解度和选择性不同，会导致提取效果的差异。
3. 提取条件：提取温度、时间和比例等条件也会影响茶多酚的提取效果。
一般来说，较高的温度和较长的提取时间有利于提取茶多酚，但过高的温度和过长的时间可能导致茶多酚的降解。
4. 提取方法：常用的茶多酚提取方法包括水煮、溶剂提取、超声波辅助提取等。
不同的提取方法对茶多酚的提取效果也有影响。
5. 提取设备：提取设备的选择和操作方式也会影响茶多酚的提取效果。
例如，超声波辅助提取时超声波功率和频率的选择会影响提取效果。
综上所述，茶多酚的提取影响因素包括原料选择、提取溶剂选择、提取条件、提取方法和提取设备等多个方面。
研究和优化这些因素可以提高茶多酚的提取效果。
茶多酚的提取工艺研究
2、超声波辅助提取法
超声波辅助提取法能够利用超声波的机械能破碎茶叶细胞，从而使得茶多酚 更容易从细胞内部释放出来。这种方法的优点是提取时间短、效率高，同时还可 以减少溶剂的使用量。
3、微波辅助提取法
3、微波辅助提取法
微波辅助提取法利用微波的电磁场使茶叶中的分子产生振动和旋转，从而破 坏茶叶细胞，使得茶多酚更容易被提取出来。这种方法的优点是提取时间短，效 率高，但是设备的成本较高。
3、色谱分离法
3、色谱分离法
色谱分离法是一种常用的分离方法，可以将茶多酚溶液中的不同组分进行分 离。常用的色谱柱包括硅胶柱、大孔树脂柱等。色谱分离法的优点是分离效果好， 产品品质高，但是需要较高的设备成本。
3、色谱分离法
结论： 茶多酚的提取纯化工艺是提高其品质和产量的关键环节。各种新型的提取纯 化工艺不断涌现，如超声波辅助提取法和微波辅助提取法等，这些新技术的应用 可以大大提高茶多酚的提取效率。在纯化工艺方面，沉淀法、膜分离法和色谱分 离法等方法都具有各自的优点和局限性。为了更好地满足实际生产需求，未来需 要进一步探索新的工艺和技术，实现茶多酚的工业化生产。
超临界流体萃取法是一种新型的提取方法。该方法利用超临界流体作为萃取 剂，从茶叶中萃取茶多酚。超临界流体具有高渗透能力和良好的传质性能，能够 有效地将茶多酚从茶叶中分离出来。超临界流体萃取法的优点在于选择性强、提 取效率高，且对环境友好。
二、提取溶剂的选择
二、提取溶剂的选择
溶剂的选择是茶多酚提取过程中的关键因素之一。不同极性的溶剂对茶多酚 的溶解度不同，因此需要根据茶多酚的化学结构和性质选择合适的溶剂。常用的 溶剂包括有机溶剂和水。对于有机溶剂，其极性越接近茶多酚，越有利于提取。 研究表明，乙醇是一种良好的溶剂，其与茶多酚的极性相似，能够有效地溶解茶 多酚。此外，甲醇、乙酸乙酯等有机溶剂也可用于茶多酚沉淀法
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李立祥吴红梅
（安徽农业大学农业部茶叶生物技术重点开放实验室合肥230036）摘要本文采用不同缓冲液匀浆法及其浸提法、丙酮粉法提取茶多酚氧化酶，比较提酶方法对酶活性和
酶剂活性的影响。
结果表明：缓冲液匀浆法提取酶活性的效果优于珍酮粉法；匀浆浸提法提取酶活性的效果高于
缓冲液匀浆法；并以柠檬酸盐缓冲液匀浆浸提法提取效果最好。
而酶制剂的单位酶活性则是丙酮粉法较高，分别
为缓冲液匀浆法及匀浆浸提法的12－35倍。
关键词提取方法茶多酚氧化酶酶活性酶制剂
茶多酚氧化酶（氧化还原酶，PPO，EC.1.10.3.1）是茶中一类重要末端氧化酶类，它不仅在茶树生理代谢过程中起着重要的作用，而且在茶叶加工中，尤其在红茶加工过程中对于催化多酚类物质的氧化变化也起着主导作用。
茶氧化酶类的研究始于19世纪末20世纪初，近百年来人们进行了大量的研究和探索，已取得巨大的成就，但较多的集中于研究多酚氧化酶的性质、同工酶、活性及影响因子，而对多酚氧化酶的应用研究很少；随着当前茶色
素研究的深入，体外应用酶促氧化茶多酚制取茶色素是未来趋势，开展茶多酚氧化酶应用研究尤为重要和迫切。
笔者就茶多酚氧化酶提取方法对其活性的影响进行了研究，旨在为茶多酚氧化寻求较好的制备方法，为应用酶促茶多酚氧化制取茶色素奠定基础。
1 实验材料与方法
1.1 材料
鲜叶采摘于安徽农业大学茶园福鼎大白茶品种一芽二叶及一芽三叶初展，洗净后放入冰箱待用。
1.2 茶多酚氧化酶提取
1.2.1 丙酮粉法：称取洗净茶鲜叶（－20℃冷冻）25g，放入组织捣碎机内，加225ml冷丙酮（－20℃）捣碎5′（即5min，下同）（3′+2′分两次进行，中间停5′），然后迅速抽滤，滤渣用80%的冷丙酮洗至液体无色为止，所得的滤渣即为丙酮粉，干燥后的丙酮粉置于冰箱中备用。
称取1g丙酮粉放于研钵中，加10ml0.1M柠檬酸－0.2M磷酸氢二钠缓冲液，2g石英砂，
2gPVP，冰浴研靡20′，离心（400rpm）10′，取上清液，即为粗酶液。
1.2.2 匀浆法：称取茶鲜叶（冷冻）25g，放入组织捣碎机内，加PVP50g，再分别加入冷藏的柠檬酸－－磷酸盐缓冲液（pH5.6）或柠檬酸盐缓冲液
（pH5.6）或磷酸盐缓冲液（pH5.8，已是最低pH值）。
捣碎5′（3′+2′分两次进行，中间停5′），四层纱布抽滤，压挤法挤出滤液，滤渣放入研钵中，加入25g石英砂，25ml缓冲液于冰浴中研磨（匀浆5′），尼龙布过滤，压挤法挤出滤液，把两次滤液合并，4000rpm离心10′，取上清液即为粗酶液。
1.2.3 匀浆浸提法（亦又称匀浆法，但笔者为区别匀浆法将其称为匀浆浸提法）：将上述不同缓冲液匀浆法所制取的滤液分别取10ml，放置4℃冰箱中浸提12h，中间搅拌3次，离心（4000rpm）15′，取上清液即为粗酶液。
1.3 PPO酶活性测定
取粗酶液1ml，加2mlpH5.6的0.1柠檬酸盐缓冲液，加入反应混合液
3ml（反应混合液按0.1柠檬酸盐缓冲液pH5.6:0.1%脯氨酸:1%邻苯二酚＝10:2:3配制）；37℃恒温水浴锅保温10′，立即加入1N偏磷酸0.7ml终止瓜，460nm波长处用10mm比色皿比色，空白混合液中用柠檬酸盐缓冲液pH5.6
增加0.1为1个活力单位。
代替邻苯二酚。
酶活性以每分钟OD
460nm
2 结果与讨论
2.1 提酶方法对PPO酶活性的影响
茶叶酶学研究中影响酶活性的因素很多，缓冲液的组成、pH值、提酶温度、茶多酚除尽程度、匀浆方法及浸提等均影响酶的活性。
本实验的结果（表
1）可以看出，在提酶温度、PVP相同的条件下，缓冲液的组成和pH值对酶活性影响较大，酶活性表现为柠檬酸－－磷酸盐缓冲液＞柠檬酸盐缓冲液＞磷酸盐缓冲液，pH5.6＞pH5.8，缓冲液pH值和组成不同对酶活性产生的影响达一倍；笔者采用缓冲液匀浆浸提法可获得较同类型缓冲液匀浆法高的酶活性，平均高出30%，与刘仲华和Roberts的结果相一致。
同时，丙酮粉法对酶活性损失较大，其鲜叶总酶活性仅是缓冲液匀浆法和浸提法的1/5、1/7。
很明显在茶PPO酶活性提取方面，缓冲液匀浆法和匀浆浸提法丙酮粉法具有优势。
茶叶中PPO酶可分为液离态和束缚态两类，通常丙酮粉法所得的是PPO 总酶活，而匀浆法所得则为可深性酶活性。
Tween－80增容、鲜叶萎凋和匀浆浸提均有利于洲离态可溶性酶活性提高。
笔者研究的结果也证实了匀浆浸提对PPO酶活性确有提高；从本实验和过去的研究可以看出，茶鲜叶中游离态和部分束缚态PPO酶以缓冲液匀浆法提取较为有利，一方面由于缓冲液匀浆法体积较大，酶蛋白易于溶出，采用浸提法可使束缚态的PPO酶部分转化为可溶性的酶溶出，提高PPO酶得率；另一方面缓冲液较接近茶鲜叶细胞液生理特性，酶溶出后活性损失较小。
因此，茶样品PPO酶活性研究应选择缓冲液匀浆浸提法。
表1 提酶方法对酶活性及酶剂活力的影响
2.2 提酶方法对酶剂活力的影响
从鲜叶中提PPO酶的活性方面，丙酮粉法提酶效果最差，但其酶制剂中单位酶活性却很高，分别是缓冲液法及缓冲液浸提法的12－35倍；丙酸粉法酶剂重量较少，仅为缓冲液法及缓冲液浸提法的1/10，因此，丙酮粉法由于操作简便、体积小、易于贮存、酶剂活性较高，仍应是茶叶PPO酶提取酶制剂较好的方法。
作为茶PPO酶的应用，酶制剂不仅要考虑酶活性得率，更要着眼酶制剂本身的活性、体积和应用性。
缓冲液匀浆法虽然提取活性得率较高，但酶液本身活性不高，不得于酶的应用，尚需进行浓缩、提纯才能达到的应用要求；
就目前国内条件而言，高活性PPO酶大量的生产尚不具备条件。
相对而言，丙酮粉法虽对PPO酶提取活性损失较大，活性得率较低，但其酶粉本身活性尚可、体积小和便于贮存，只直接应用，因此具有茶PPO酶应用的优势。
另据报导采用匀浆法和丙酮粉法二者结合的方法，提取茶鲜叶PPO酶，酶活性可达到200U/g，且体积较小，是一种很好的提酶方法。
笔者亦进行了尝试性实验，未获得预想的结果，仍需继续进行研究。