溶血性试验 ppt课件

溶血性试验
步骤二；加生理 盐水5-10ml，摇匀， 离心，倾去上清液，
如此反复几次，直
至清液不出现血 色为止。
步骤三；量取 血球，加生理盐 水稀释至2%的 混悬液，供实验 用。
溶血性试验
试验方法
方法 取 7 支试管，编号，按下表加入各种溶液。第 6 管不加入 供试品，
方法 作为空白对照。第 7 管不加供试品并以蒸馏水代替生理盐 水，作为完全溶血对 照。轻轻摇匀后置 37℃的水浴中保温，1h 后观察结果，再离心 5min 后观察结 果。
1 试管编号
2
3
4
5
6
桔梗液ml 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0
生理盐水 ml
2.4
2.3
2.2
2.1
2.0
2.5
2%x血球 混悬液
2
2.5
2.5
溶血性试验
实验结果与统计
试管 2%兔血混悬液（ml） 生理盐水（ml） 4%
桔梗煎液(ml) 柴胡注射液（ml） 37℃保温 1h 后
溶血性试验
实验现象
实验器材
实验原理
实验结果
试验方法
实验目的
溶血性试验
原理：溶血性试验是观察受试物是 否引起溶血和红细胞凝聚等反应。
目的：某些中药注射剂，由于含 有溶血成分或物理、化学及生物等方 面的原因，在直接注入血管后可产生 溶血作用；也有些注射剂中因含有杂 质等成分，注入血管后可产生血细胞 凝聚，引起血液循环功能障碍等不良 反应；另外，因中药制剂的成分复杂， 也存在因免疫反应引起的免疫性溶血。 因此，凡是注射剂和可能引起免疫性 溶血或非免疫性溶血反应的其他药物 制剂均应进行溶血性试验。
凝 集：虽不溶血，但出现红细胞凝集，经振瑶后
不易分散或出现药物沉淀。
溶血性试验
溶血性结果的评价
3、溶血性结果的评价 根据临床前和临床研究的结果，发现目前临床前
体外溶血试验绝大多数为阴性结果，但临床应用 过程中却有许多阳性结果的相关报道，即存在临 床前和临床应用结果不一致的问题。因此，建议 临床前研究中，在利用常规方法的同时，考虑结 合其他的试验方法，特别是在长期毒性试验（静 脉给药）中增加或关注相关指标的检查，以综合 评价中药注射剂的溶血性，增加与临床人用结果 相关性的认识。
100ml 摇匀即得。 、4%的桔梗煎液： 4%的溶液
的溶液。 2） 4%的桔梗煎液：取桔梗 4g ，按普通
煎煮法制成 4%的溶液。 、4%的桔梗煎液
结果判断依据：
完全溶血：溶液澄明，红色，管底无红细胞残留。
部分溶血：溶液澄明，红色或棕色，管底尚有少量红
细胞残留。
不 溶 血：红细胞全部沉淀，上层液体物色澄明。
的结果 、2%兔血生理盐水混悬液的配制 10-20ml。
用竹签搅拌以除去纤维蛋白 签搅拌以除去纤维蛋白 注：
1） 2%兔血生理盐水混悬液的配制：取新鲜兔10-
20ml。用竹签搅拌以除去纤维蛋白，然后吸 、2%
兔血生理盐水混悬液的配 2ml， 摇匀即得。 取没有
发生凝血和溶血现象的全血 2ml，加生理盐水稀释至
溶血性试验
小烧杯 竹签（去纤 维蛋白用）,试管，试 管架，吸管，恒温 水
浴锅，离心机。
实验器材
仪器试剂
试 剂
动物
家兔1只 （供采血 用）
4%的桔梗煎液、生 理盐水、蒸馏水
溶血性试验
血球悬浮液的配置
试验方法
步骤一；取兔 血5-10ml加入
洁净干燥的小 烧杯中，用竹签 或玻璃棒搅拌 除去纤维蛋白 元。
溶血性试验
探究：因造成溶血反应的机制复杂，目前尚无全面的临 床前溶血试验方法。中药注射剂溶血性的测定,许多年来一 直采用常规的体外溶血试验，即试管观察法（见附录）。它 是通过肉眼来观察溶血情况，而有色泽中药注射剂对结果判 断的影响较大，难以评价溶血程度。 为了精确检查中药注射剂的溶血性，建议在常规方法的基础 上，结合以下或其他方法进行试验，如分光光度法、体外红 细胞计数法、体内红细胞计数及分析法。这些方法与常规法 比较，尽管前两者的操作相对复杂,影响因素较多，但当采 用常规法测定的结果有疑问或必要时，采用计数法和分光光 度法作为一种辅助方法,可帮助更精确的判断注射剂的溶血 性。 在进行长期毒性试验中，应注意溶血性指标的观察（如红细 胞数量及网织红细胞数的变化、胆红素、尿蛋白、肾炎、脾 脏淤血及骨髓象等）。 当受试物出现体外溶血阳性结果时，应进行体内溶血性试验， 不但可以判断是否存在药物诱发溶血性的可能，而且可以通 过对其他指标的测定提供更多的信息，如网织红细胞是否增 高、是否有血红蛋白尿、球形红细胞是否增多，以及骨髓检 查是否有溶血性贫血现象等。