溶血性试验 ppt课件

1 试管编号
2
3
4
5
6
桔梗液ml 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0
生理盐水 ml
2.4
2.3
2.2
2.1
2.0
2.5
2%x血球 混悬液
2.5
2.5
2.5
2.5
2.5
2.5
溶血性试验
实验结果与统计
试管 2%兔血混悬液（ml） 生理盐水（ml） 4%
桔梗煎液(ml) 柴胡注射液（ml） 37℃保温 1h 后
溶血性试验
实验现象
实验器材
实验原理
实验结果
试验方法
实验目的
溶血性试验
原理：溶血性试验是观察受试物是 否引起溶血和红细胞凝聚等反应。
目的：某些中药注射剂，由于含 有溶血成分或物理、化学及生物等方 面的原因，在直接注入血管后可产生 溶血作用；也有些注射剂中因含有杂 质等成分，注入血管后可产生血细胞 凝聚，引起血液循环功能障碍等不良 反应；另外，因中药制剂的成分复杂， 也存在因免疫反应引起的免疫性溶血。 因此，凡是注射剂和可能引起免疫性 溶血或非免疫性溶血反应的其他药物 制剂均应进行溶血性试验。
溶血性试验
小烧杯 竹签（去纤 维蛋白用）,试管，试 管架，吸管，恒温 水
浴锅，离心机。
实验器材
仪器试剂
试 剂
动物
家兔1只 （供采血 用）
4%的桔梗煎液、生 理盐水、蒸馏水
溶血性试验
血球悬浮液的配置
试验方法
步骤一；取兔 血5-10ml加入
洁净干燥的小 烧杯中，用竹签 或玻璃棒搅拌 除去纤维蛋白 元。
凝 集：虽不溶血，但出现红细胞凝集，经振瑶后
不易分散或出现药物沉淀。
溶血性试验
溶血性结果的评价
3、溶血性结果的评价 根据临床前和临床研究的结果，发现目前临床前
体外溶血试验绝大多数为阴性结果，但临床应用 过程中却有许多阳性结果的相关报道，即存在临 床前和临床应用结果不一致的问题。因此，建议 临床前研究中，在利用常规方法的同时，考虑结 合其他的试验方法，特别是在长期毒性试验（静 脉给药）中增加或关注相关指标的检查，以综合 评价中药注射剂的溶血性，增加与临床人用结果 相关性的认识。
溶血性试验
探究：因造成溶血反应的机制复杂，目前尚无全面的临 床前溶血试验方法。中药注射剂溶血性的测定,许多年来一 直采用常规的体外溶血试验，即试管观察法（见附录）。它 是通过肉眼来观察溶血情况，而有色泽中药注射剂对结果判 断的影响较大，难以评价溶血程度。 为了精确检查中药注射剂的溶血性，建议在常规方法的基础 上，结合以下或其他方法进行试验，如分光光度法、体外红 细胞计数法、体内红细胞计数及分析法。这些方法与常规法 比较，尽管前两者的操作相对复杂,影响因素较多，但当采 用常规法测定的结果有疑问或必要时，采用计数法和分光光 度法作为一种辅助方法,可帮助更精确的判断注射剂的溶血 性。 在进行长期毒性试验中，应注意溶血性指标的观察（如红细 胞数量及网织红细胞数的变化、胆红素、尿蛋白、肾炎、脾 脏淤血及骨髓象等）。 当受试物出现体外溶血阳性结果时，应进行体内溶血性试验， 不但可以判断是否存在药物诱发溶血性的可能，而且可以通 过对其他指标的测定提供更多的信息，如网织红细胞是否增 高、是否有血红蛋白尿、球形红细胞是否增多，以及骨髓检 查是否有溶血性贫血现象等。
溶血性试验
的结果 、2%兔血生理盐水混悬液的配制 10-20ml。
Biblioteka Baidu用竹签搅拌以除去纤维蛋白 签搅拌以除去纤维蛋白 注：
1） 2%兔血生理盐水混悬液的配制：取新鲜兔10-
20ml。用竹签搅拌以除去纤维蛋白，然后吸 、2%
兔血生理盐水混悬液的配 2ml， 摇匀即得。 取没有
发生凝血和溶血现象的全血 2ml，加生理盐水稀释至
步骤二；加生理 盐水5-10ml，摇匀， 离心，倾去上清液，
如此反复几次，直
至清液不出现血 色为止。
步骤三；量取 血球，加生理盐 水稀释至2%的 混悬液，供实验 用。
溶血性试验
试验方法
方法 取 7 支试管，编号，按下表加入各种溶液。第 6 管不加入 供试品，
方法 作为空白对照。第 7 管不加供试品并以蒸馏水代替生理盐 水，作为完全溶血对 照。轻轻摇匀后置 37℃的水浴中保温，1h 后观察结果，再离心 5min 后观察结 果。
100ml 摇匀即得。 、4%的桔梗煎液： 4%的溶液
的溶液。 2） 4%的桔梗煎液：取桔梗 4g ，按普通
煎煮法制成 4%的溶液。 、4%的桔梗煎液
结果判断依据：
完全溶血：溶液澄明，红色，管底无红细胞残留。
部分溶血：溶液澄明，红色或棕色，管底尚有少量红
细胞残留。
不 溶 血：红细胞全部沉淀，上层液体物色澄明。