人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒
抗凝血酶III(AT III)活性测定
出凝血6.1抗凝血酶III（AT III）活性测定（第四版）出凝血6.2 原理：抗凝血酶III能和凝血酶形成复合物，使之丧失转化纤维蛋白原为纤维蛋白的酶活性。
在血浆中加入过量的凝血酶后，凝血酶与血浆中的AT III形成1︰1复合物，剩余的凝血酶作用于显色剂，裂解出显色基团，其显色程度与血浆中的AT III活性呈负相关。
出凝血6.3标本处理：患者处于休息状态下，采空腹静脉血（急诊病人除外）。
采血者应技术熟练，“一针见血”，以防止组织损伤，使外源性凝血因子进入标本。
最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。
采完血后，将血液沿管壁缓缓注入试管，避免产生气泡；然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀，避免用力震荡。
全血要在1小时内分离血浆。
分离乏血小板血浆时，要在室温下3000rpm离心10分钟，室温下可存放4小时。
全部试验不能在4小时内完成，应将乏血小板血浆分装在0.5～1.0ml的小试管中快速冷冻，储存于-20℃冰箱中。
冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果会不准确。
冷冻血浆融化时，应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化。
出凝血6.4 试剂：试剂购于天津威士达公司AT III试剂盒：试剂盒代号OWWR 15。
试剂包括6×15ml凝血酶试剂；6×3ml底物试剂；1×100ml缓冲液。
凝血酶试剂每瓶用15ml 缓冲液复溶，室温平衡30分钟。
底物试剂每瓶用3ml蒸馏水复溶，室温平衡30分钟。
出凝血6.5仪器：使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。
出凝血6.6 操作：按仪器操作步骤执行标准操作。
出凝血6.６.1开机：按下机器侧面的POWER 按钮。
开机后机器进行自检，当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。
出凝血6.６.2检查消耗品：1、准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量，不足时，需及时添加。
（一次性最多可放1000 个杯子）2、准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把试剂准备好，放到仪器内相应位置，注意查看试剂的量和有效期。
tat过敏试验实验报告
tat过敏试验实验报告实验目的：本实验旨在通过TAT（Thrombin Antibody Test）过敏试验，检测个体对凝血酶（Thrombin）的过敏反应，以评估个体对凝血酶的敏感性，并为临床治疗提供参考。
实验原理：TAT过敏试验是一种体外诊断方法，通过检测血清中凝血酶抗体的存在来评估个体对凝血酶的过敏反应。
凝血酶是一种在血液凝固过程中起关键作用的酶，某些个体可能对其产生过敏反应。
实验材料：1. 受试者血清样本2. 凝血酶试剂3. 标准对照血清4. 酶联免疫吸附测定（ELISA）板5. 洗涤液6. 酶标抗体7. 显色剂8. 终止液9. 微量移液器10. 酶标仪实验步骤：1. 准备ELISA板，每个样本和对照设置三个重复孔。
2. 将受试者血清样本和标准对照血清按照适当稀释比例稀释。
3. 将稀释后的血清样本和对照血清加入ELISA板的相应孔中，每孔100μL。
4. 将板放入37°C恒温箱中孵育1小时。
5. 取出板，用洗涤液洗涤三次，去除未结合的血清。
6. 加入酶标抗体，每孔100μL，再次孵育1小时。
7. 重复洗涤步骤。
8. 加入显色剂，每孔100μL，孵育15分钟。
9. 加入终止液，每孔50μL，终止显色反应。
10. 使用酶标仪测定各孔的吸光度（OD值）。
结果分析：1. 根据标准曲线计算受试者血清中凝血酶抗体的浓度。
2. 比较受试者血清样本的OD值与标准对照血清的OD值，评估受试者对凝血酶的过敏反应。
3. 结果以OD值表示，高于正常范围的OD值可能提示过敏反应。
结论：通过本次TAT过敏试验，我们能够评估受试者对凝血酶的过敏反应。
实验结果将有助于医生了解受试者的过敏状态，并为临床治疗提供重要信息。
需要注意的是，本实验结果仅为初步筛查，最终诊断需结合临床症状和其他检测结果综合判断。
注意事项：1. 实验操作过程中应严格遵守无菌操作规程。
2. 所有试剂和样本应在使用前进行适当的稀释和准备。
3. 实验数据应准确记录，并进行适当的统计分析。
腺苷酸激酶5(AK5)ELISA试剂盒说明书
腺苷酸激酶5(AK5)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液腺苷酸激酶5(AK5)ELISA试剂盒说明书试验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
腺苷酸激酶5(AK5)ELISA试剂盒说明书自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
腺苷酸激酶5(AK5)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
腺苷酸激酶5(AK5)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
人凝血酶原复合物
人凝血酶原复合物
血栓溶解因子（凝血酶原复合物）是一种促进血栓溶解的蛋白质复合物，其蛋白质包含十一肽链，在肽链的中间由一个中心四肽锚锚定在血漿蛋白质A和血漿蛋白E的抗原复合体上。
凝血酶原复合物由血栓溶解因子十二和血小板原生物激活因子构成。
血栓溶解因子十二是一种价态的钙离子蛋白质，由血漿蛋白质A结合血漿蛋白E形成。
血小板原生物激活因子是一种无电荷的定量蛋白质，由血小板表面抗原复合体及一抗体结合发挥抗血栓作用。
凝血酶原复合物具有重要的生理功能，它与血栓精细的形成、溶解及稳定息息相关。
血栓形成是由血小板细胞激活，活化的血小板表面抗原复合体与血浆蛋白结合，形成血栓聚合物。
而凝血酶原复合物能够有效地减少血栓聚合物的形成，对抑制血栓的形成具有重要作用。
同时，凝血酶原复合物还可以促进现有血栓的溶解，这有助于预防和控制血栓性疾病发生及发展。
此外，血栓溶解因子（凝血酶原复合物）还参与血液凝固，抑制血液凝固时间的延长，它的作用在调节血液粘度中也发挥着重要的作用。
总而言之，血栓溶解因子（凝血酶原复合物）是血液凝固中必不可少的蛋白质复合物，具有重要的生理功能、调节血液粘度
以及抑制及溶解血栓的作用，着力于保持血液正常流动性，为人体健康提供了帮助。
抗凝血酶测定
抗凝血酶（AT）测定1. 实验原理在待测血浆中加入过量的凝血酶，凝血酶与血浆中的AT形成1:1的复合物，剩余的凝血酶作用于显色肽S2765，裂解出显色基团对硝基苯胺(pNA)，用405nm测吸光度，显色程度与剩余凝血酶的量成正相关，而与血浆AT的量呈负相关。
2. 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。
2.23.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml，混匀。
3. 标本存放：全血贮存在4～10oC不超过2小时，最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆，此血浆在室温22～24oC下可存放2小时，在2～4oC可存放4小时，在-20oC 可存放2周，长时间保存需在冰冻条件下，在-70oC可存放6个月。
冷冻血浆融化时，应将盛血浆的容器置37oC水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解冻后立即测试。
冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果不准确。
4. 标本运输：低温条件下运输。
5. 标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作该项目检测。
6. 实验材料：6.1每个试剂均购自德国Dade Behring Marburg公司。
1）AT测定试剂盒（代号P/N:20008900）冻干发色底物S2765 2瓶（6mg/瓶)冻干活化X因子试剂（包括牛活化X因子、肝素、缓冲液、牛血清白蛋白）2瓶2）定标血浆Calibration Plasma（代号P/N:8467300）3）正常质控血浆Normal control plasma（代号P/N:8467011）4）异常水平发色底物法质控血浆Abnormal chromogenic control plasma level I/II（代号P/N:8467600）5）Cleaning agent（代号P/N:9832700）6）Cleaning solution（代号P/N:9831700）6.2试剂准备发色底物：用2mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶冻干发色底物，盖上盖子，轻摇至完全溶解，置15～25oC30分钟，用前摇匀，勿用力振摇。
体外诊断试剂产品分类细则及分类目录
体外诊断试剂产品分类细则1、对于第二类产品中的新产品（未在国内批准注册的产品或被测物相同但分析灵敏度指标不在国家已批准注册产品范围内，且具有新的临床诊断意义），采用与第三类产品相同的技术要求。
2、如有不能按照上述原则进行界定的试剂产品，由国家食品药品监督管理局组织界定。
3、国家法定用于血源筛选的体外诊断试剂、采用放射性核素标记的体外诊断试剂不属于本办法管理的范围。
体外诊断试剂分类目录（征求意见稿）按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂一、临床血液学和体液学检验试剂1.1 血液学检验试剂（盒）1.1.1 血液一般检验试剂（盒）1.1.2 溶血试验试剂（盒）1.1.3 血栓与止血检验试剂（盒）1.2 组织配型类试剂（盒）1.3 尿液检验试剂（盒）、试纸1.4 粪便检验试剂（盒）、试纸1.5 其他体液及排泄物检验试剂（盒）二、临床化学检验试剂2.1 无机离子检验试剂（盒）2.2 蛋白质检验试剂（盒）2.3 糖类检验试剂（盒）、试纸2.4 酶类检验试剂（盒）2.4.1 肝脏疾病诊断试剂（盒）2.4.2 肾脏疾病诊断试剂（盒）2.4.3 心肌疾病诊断试剂（盒）2.4.4 体液和其他酶测定试剂（盒）2.5 非蛋白含氮类化合物检测试剂（盒）2.6 脂类检验试剂（盒）2.7 血气与电解质分析试剂（盒）2.8 内分泌检验试剂（盒）2.8.1 下丘脑垂体激素测定试剂（盒）2.8.2 甲状腺激素测定试剂（盒）2.8.3 肾上腺激素测定试剂（盒）2.8.4 性腺激素测定试剂（盒）2.8.5 胰腺和肠胃激素测定试剂（盒）2.8.6 其他激素测定试剂（盒）2.9 维生素和药物及代谢物类检验试剂（盒）2.9.1 维生素测定类试剂（盒）2.9.2 药物和药物代谢物检测试剂（盒）三、临床免疫学检验试剂3.1 传染病免疫学诊断检验试剂（盒）3.1.1 肝炎病毒血清学标志物检验试剂（盒）3.1.2 其他病毒血清学标志物检验试剂（盒）3.1.3 细菌血清学检验试剂（盒）3.1.4 其他微生物血清学检验试剂（盒）3.2 肿瘤标志物类试剂（盒）3.3 细胞免疫检验测定试剂（盒）四、微生物学检验试剂4.1 培养基4.2 微生物学检验类试剂（盒）4.3 微生物抗原、抗体及核酸检测类试剂（盒）4.4 药敏试剂4.5 生化鉴定培养基4.6 染色液五、组织细胞学检验试剂5.1 细胞、组织化学染色剂类试剂5.2 免疫组化与人体组织细胞类试剂（盒）六、变态反应、自身免疫诊断检验试剂（盒）七、遗传性疾病检验试剂八、分子生物学检验试剂8.1 分子诊断试剂（盒）8.1.1 分子杂交诊断试剂（盒）8.1.2 PCR 试剂（盒）8.2 人类基因检测类试剂（盒）8.3 生物芯片类试剂（盒）8.3.1 基因芯片类检测试剂（盒）8.3.2 蛋白质芯片类检测试剂（盒）8.3.3 其他生物芯片类检测试剂（盒）九、其它检验试剂（盒）按药品受理和审评的体外诊断试剂*1.ABO 血型定型试剂（盒）*2.乙型肝炎表面抗原（HBsAg）试剂（盒）*3.丙型肝炎病毒（HCV）抗体试剂（盒）*4.人类免疫缺陷病毒 HIV（1＋2 型）抗体试剂（盒）人类免疫缺陷病毒抗原/抗体诊断试剂（盒）*5.梅毒螺旋体抗体试剂（盒）6.放免试剂(盒)注：以上带*号的五个品种，预期用途为血源筛查时按药品受理和审评，为临床诊断时，按第三类医疗器械进行管理。
凝血酶-抗凝血酶复合物检测方法建立及初步应用
４
引
言
凝血酶一抗凝血酶复合物（ｔｈｒｏｍｂｉｎ—ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ，ＴＡＴ）是 人体内凝血和抗凝血相互作用以维持生理平衡的产物，是凝血酶 （ｔｈｒｏｍｂｉｎ，Ｔ）生成和凝血系统激活的标志物之一。
肝素（ｈｅｐａｒｉｎ，Ｈ）催化ＴＡＴ的形成，首先肝素结合抗凝血酶 （ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎ，ＡＴ），形成肝素一ＡＴ二联体（Ｈ—Ｔ），使ＡＴ抗凝活性基团暴
一 经过抗体配对试验，用针对ＴＡＴ的凝血酶部位的Ⅺ号单抗作捕获抗
体，用针对ＴＡＴ之抗凝血酶部位的Ⅲ号抗体作酶标检测抗体，建立了检测
ＴＡＴ的双抗体夹心法酶联免疫吸附试验。该法的线性检测范围为
０．４—６３．Ｏ！ＬＬｇ／Ｌ，批内ｃＶ为３．９％一５．９％，批间ｃＶ为９．１％一１３．３％，回收率为
９２．６％一１０４．９％。加入２０“ｇｍｌ的ＡＴ和凝血酶原对ＴＡＴ检测无影响。检测
ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｒｏｍｂｉｎ’Ｓ ａｎｄ ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎ’Ｓ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｗｉｌｌ ｅｍｅｒｇｅ．ＳＯ ＴＡＴ
ｓｈｏｕｌｄ ｈａｖｅ ｎｅｏａｎｔｉｇｅｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｆｒｏｍ ｔｈｒｏｍｂｉｎ ａｎｄ ａｎｔｉｔｈｒｏｌＩ虹ｉｎ．Ｂａｓｅ ０ｎ
ｔｈｏｓｅ ｃａｓｅｓ，ａｎｄ ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｍｅｒｅ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｏ ＴＡＴ ｔｈｅ ｓＮｉｌｅ ｔｉｍｅ ｒｅｄｕｃｅ ｃｒｏｓｓ－ａｃｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ｔｈｒｏｍｂｉｎ ｏｒ ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎ，ｗｅ
ｓｉｔｕａｔｉｏｎｓ．
Ｂｅｈｒｉｎｇ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｉｎ Ｇｅｒｍａｎｙ ｃｏａｔｅｄ ｍｉｃｒｏｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｐｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｒａｂｂｉｔ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｈｕｍａｎ ｔｈｒｏｍｂｉｎ，ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ ｔｏ
人凝血酶(TM)说明书
人凝血酶（TM）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，组织及相关液体样本中凝血酶（TM）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人凝血酶（TM）水平。
用纯化的人凝血酶（TM）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入凝血酶（TM），再与HRP 标记的凝血酶（TM）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的凝血酶（TM）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人凝血酶（TM）浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：45ng/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)酶联免疫分析
人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E08431h检测范围：0.312 ng/ml - 20 ng/ml最低检测限：0.078 ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人TAT，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中TAT含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗TAT抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗TA T抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的TAT呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate )：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
人脑出血后血肿周围缺血半暗带中凝血酶与脑水肿的关系
人脑出血后血肿周围缺血半暗带中凝血酶与脑水肿的关系惠卫宁;邵国平;黄炜;褚荣涛;张志越;施振华;张绪明【摘要】目的研究人脑出血后,血肿周围缺血半暗带脑组织中凝血酶与脑水肿的关系及二者的变化规律.方法以脑出血患者术中需要切除的缺血半暗带脑组织为实验组,远离血肿需要内减压切除的脑组织为对照组.用ELISA法检测脑组织凝血酶含量；干-湿重法测脑组织含水量；在电镜下,观察脑组织显微结构.比较两组脑组织含水量和凝血酶含量的差异,并分析不同时间窗入院患者这两个指标的变化规律.结果实验组脑组织中凝血酶的含量明显高于对照组.实验组脑组织含水量明显高于对照组.电镜下,实验组脑水肿明显比对照组严重.结论脑出血后,血肿周围缺血半暗带中凝血酶含量明显增高,凝血酶与脑水肿密切相关.【期刊名称】《临床神经外科杂志》【年(卷),期】2013(010)005【总页数】3页(P281-283)【关键词】脑出血;缺血半暗带;凝血酶;脑水肿【作者】惠卫宁;邵国平;黄炜;褚荣涛;张志越;施振华;张绪明【作者单位】215500 常熟市第二人民医院神经外科;215500 常熟市第二人民医院神经外科;215500 常熟市第二人民医院神经外科;215500 常熟市第二人民医院神经外科;215500 常熟市第二人民医院神经外科;215500 常熟市第二人民医院神经外科;215500 常熟市第二人民医院神经外科【正文语种】中文【中图分类】R651.1脑出血(ICH)是一种常见的急性脑血管病，发病率、死亡率均很高。
ICH后继发性脑水肿引起的颅高压是病情加重和致死的重要原因之一。
2009年3月～2013年4月，在我院因ICH行开颅血肿清除术的患者中，有34例因单纯去骨瓣减压效果不佳，行脑叶切除内减压，经伦理学审查，符合实验要求。
通过对ICH患者脑水肿的病理生理做进一步研究，以期为ICH的临床研究和治疗提供一定的借鉴。
1 资料与方法1.1 临床资料男23例，女11例，年龄39～74岁，平均62.5岁。
【检验通讯】血栓分子标志物检测及临床应用
【检验通讯】⾎栓分⼦标志物检测及临床应⽤⼀、概述⼈体内出凝⾎系统是⼀个⾮常庞⼤且繁杂的系统，机体通过凝⾎、纤溶、⾎⼩板、内⽪四个系统的参与时刻维持着动态平衡。
促凝与抗凝活性的失衡将直接导致⾎栓性疾病与出⾎性疾病的发⽣，且⾎栓性疾病更常见。
⽬前实验室凝⾎常规检测项⽬，如PT、APTT、TT、Fbg、D-⼆聚体、FDP、抗凝⾎酶、凝⾎因⼦等已涵盖凝⾎、纤溶等系统，但都属于在⾎栓形成后的被动检测、晚期筛查项⽬，对⾎栓前状态、Pre-DIC等疾病不敏感，同时对于溶栓治疗监测不能在第⼀时间反馈效果。
⾎栓分⼦标志物（TAT、PIC、TM、tPAI-C）与D-⼆聚体、FDP联合检测，可在早期更加敏感、可靠的向临床反馈⾎栓的发⽣与形成、术后⾎栓与出⾎情况的监控、Pre-DIC的状态、溶栓治疗的效果、⾎管内⽪系统损伤等情况。
⼆、临床意义注：TAT：凝⾎酶抗凝⾎酶复合物；PIC：纤溶酶-抗纤溶酶复合物；TM：⾎栓调节蛋⽩；t-PAIC：组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活抑制复合物；AT：抗凝⾎酶；PC：蛋⽩C；PS：蛋⽩S；APC：活化的蛋⽩C；FV/FⅧ：凝⾎因⼦V/Ⅷ；α2-PI：ａ２-纤溶酶激活抑制物；t-PA：组织型纤溶酶原激活物；PAI：纤溶酶激活抑制物；FDP／DD：纤维蛋⽩（原）降解产物／D-⼆聚体；PAF：⾎⼩板活化因⼦；vWF：Vonwilebrand因⼦图1：凝⾎标志物活化⽰意图1、凝⾎酶-抗凝⾎酶复合物（TAT）凝⾎酶⽣成是静脉⾎栓形成的关键环节，它作⽤于纤维蛋⽩原使其转变为纤维蛋⽩⽽形成⾎栓。
但凝⾎酶在⾎液中半衰期不到1分钟，会很快被抗凝物质中和，因此直接检测凝⾎酶⾮常困难。
⽽作为凝⾎酶与抗凝⾎酶1:1结合形成的复合物，TAT可作为凝⾎酶⽣成的分⼦标志物，直接证实凝⾎系统的活化。
正常参考区间：0-4.0ng/mLTAT升⾼见于：1) DIC，DIC前期状态2) 深静脉⾎栓（DVT），肺栓塞（PE）3) 某些⼼房颤动，与⼆尖瓣狭窄相关的⼼房颤动4) 其他凝⾎系统激活状态2、组织型纤溶酶原激活剂及其抑制剂复合物（tPAI-C）当凝⾎活化，纤维蛋⽩形成后可以激活组织型纤溶酶原激活剂（t-PA），活化的t-PA进⼀步激活纤溶酶原转化为纤溶酶，后者降解纤维蛋⽩形成D-⼆聚体。
体外诊断试剂分类
体外诊断试剂产品分类表（一）、临床血液学和体液学检验试剂 1.1血液学检验试剂（盒） 1.1.1血液一般检验试剂（盒）品名举例： 血液分析仪用溶血剂 网织红细胞试剂 血液分析仪用稀释液 血液分析仪用清洗液 血液分析仪用鞘液 血液分析仪用染色液 1.1.2溶血实验试剂（盒）品名举例： 葡萄糖—6—磷酸脱氢酶荧光斑点试验试剂（盒） 血红蛋白A2试剂（盒） 胎儿血红蛋白分析仪试剂（盒） 糖化血红蛋白分析仪试剂（盒） 高铁血红蛋白还原试验试剂（盒） Hb —F 碱变性试验试剂（盒） Hb —F 酸洗脱试验试剂（盒） 血浆游离血红蛋白测定试剂（盒） 硫血红蛋白分析试剂（盒） 丙酮酸激酶活力测定试剂（盒） 镰状细胞试验试剂（盒） 其它溶血试验试剂（盒） 红细胞自身溶血试验试剂（盒） 血浆血红蛋白测定试剂（盒） 血红蛋白电泳检查试剂（盒） 异常血红蛋白分析试剂（盒） 一氧化碳血红蛋白检测试剂（盒） 血清结合珠蛋白（HP ）测定试剂（盒） 镰状细胞试验试剂（盒） 1.1.3血栓与止血检验试剂（盒）品名举例： 凝血酶原时间（PT ）测定试剂（盒） 肝促凝血酶原激酶(HPT) 试剂（盒） 肝素或类肝素抗凝物质测定试剂（盒） 肝素辅因子II （HC —II ）测定试剂（盒） 纤溶酶（PLM ）活性测定试剂（盒） 纤溶酶原（PLG ）活性测定试剂（盒） 组织先溶酶原激活物（t —PA ）测定试剂（盒） 组织纤维蛋白酶激活剂、抑制剂—1复合体试剂（盒） 纤溶酶原激活抑制物（PAI ）活性测定试剂（盒） 纤维蛋白溶酶原试剂（盒） 纤维蛋白溶酶—α2—血纤维蛋白溶酶复合体试剂（ 盒）α2—纤溶酶抑制物（α2—PI ）活性测定试剂（盒）α—2抗纤溶酶（α—PA ）测定试剂（盒） 血清纤维蛋白降解产物（FDP ）测定试剂（盒）纤维蛋白肽A 试剂（盒） 凝血酶原消耗试验试剂（盒）凝血酶原第七凝血因子试验及血栓试剂（盒） 可溶性纤维蛋白单体复合物蛋白物测定试剂（盒） D —二聚体胶乳法测定试剂（盒）D —二聚体ELISA 测定试剂（盒）血浆硫酸鱼精蛋白副凝固时间（3P ）试剂（盒） 凝血酶时间（TT ）测定试剂（盒）活化全血凝血时间试剂（盒）活化部分凝血活酶时间（APTT ）测定试剂（盒）凝血酶原片段F1+2测定试剂（盒） 抗凝血酶Ⅲ（AT —Ⅲ）测定试剂（盒）抗凝血酶Ⅷ抑制物测定试剂（盒）凝血酶原断片F1+2试剂（盒）凝血酶、抗凝血酶Ⅲ复合体（TA T ）试剂（盒） 凝血因子II （II ：C ）活性测定试剂（盒）凝血因子Ⅴ测定试剂（盒）第五凝血因子DNA 突变检测试剂（盒）蝰蛇毒时间（RVVT ）测定试剂（盒）第Ⅷ因子相关抗原试剂（盒）第Ⅷ因子利托菌辅因子试剂（盒）凝血因子Ⅷ(Ⅷ：C),Ⅸ(Ⅸ：C),Ⅺ(Ⅺ：C)Ⅻ(Ⅻ：C) 第ⅩⅢa 凝固因子试剂（盒）第ⅩⅢ凝固因子试剂（盒）第Ⅹa 因子抑制剂试剂（盒）蛋白C(PC)活性测定试剂（盒）蛋白S(PS)测定试剂（盒）蛋白C 抵抗实验(APCR) 试剂（盒）活性蛋白C 抵抗性第Ⅴ因子试剂（盒）狼疮抗凝因子（LA ）测定试剂（盒）血栓调节素试剂（盒）纤维蛋白原（Fbg ）测定试剂（盒） 血小板凝集能力试剂（盒）血管性假血友病因子抗原ELISA 试剂（盒）6—酮—前列腺素F1αELISA 试剂（盒）β—凝血酶球蛋白试剂（盒）血浆β—血小板蛋白(β—TG)ELISA 试剂（盒） 血小板第3因子有效性（PF3aT ）检测试剂（盒） 血小板第4因子（PF4）ELISA 试剂（盒）血小板相关抗体(PAIgG ,PAIgA,PAIgM)ELISA 试剂（盒） 1.2组织配型检查试剂（盒） 品名举例：HLA 组织配型（DR,A 和B ）试剂（盒）人类白细胞抗原等级二决定因子抗体试剂（盒）A—转移酶活性及B—转移酶活性试剂（盒）ABO血型定型试剂（盒）（临床诊断用）1.3尿液检验试剂（盒）、试纸品名举例：干化学尿液分析试纸条尿淀粉酶试剂（盒）尿本—周氏蛋白测定试剂（盒）尿肌红蛋白测定试剂（盒）尿酮体测定试剂（盒）尿胆素测定试剂（盒）尿蛋白1（UP1）测定试剂（盒）尿转铁蛋白（TRF）测定试剂（盒）尿微量蛋白（UALB）测定试剂（盒）尿微量白蛋白（UALB）测试卡尿白蛋白试剂（盒）尿过氧化氢酶试剂（盒）尿氨试剂（盒）尿δ—氨基—酮戊酸试剂（盒）尿肌酸酐试剂（盒）尿黄体生成素（LH）试剂（盒）尿香草扁桃酸（VMA）试剂（盒）尿人生长激素（LH）试剂（盒）尿δ2—微球蛋白试剂（盒）尿碱性磷酸酶（ALP）试剂（盒）尿钙目测试纸尿镁（MG）试剂（盒）尿谷氨酰转肽酶（δ—GTP）试剂（盒）尿无机磷（IP）试剂（盒）尿睾丸素试剂（盒）尿皮质醇试剂（盒）尿氨甲蝶呤试剂（盒）尿人免疫球蛋白G（IgG）试剂（盒）尿铁传递蛋白试剂（盒）尿尿酸（UA）试剂（盒）尿C—肽（CRP）试剂（盒）尿尿素氮（UN）试剂（盒）尿肌酸试剂（盒）尿淀粉酶同工酶试剂（盒）1.3粪便检验试剂（盒）、试纸品名举例：便隐血（OB）试纸（化学法、免疫法）粪血红蛋白试剂（盒）粪胆素检查试剂（盒）粪铁传递蛋白试剂（盒）1.4其他体液及排泄物检验试剂（盒）品名举例：髓液蛋白试剂（盒）髓液球蛋白试剂（盒）髓液葡萄糖试剂（盒）羊水PH试剂（盒）唾液潜血试剂（盒）(二)、临床化学检验试剂2.1无机离子检验试剂（盒）品名举例：铝（AL）试剂（盒）镉（CD）试剂（盒）铬（CR）试剂（盒）钼（MO）测定试剂（盒）铅（PB）测定试剂（盒）硒（SE）测定试剂（盒）钴（CO）测定试剂（盒）锰（MN）测定试剂（盒）碳酸氢盐测定试剂（盒）钾测定试剂（盒）钠测定试剂（盒）氯测定试剂（盒）钙测定试剂（盒）磷测定试剂（盒）镁测定试剂（盒）锂测定试剂（盒）铜测定试剂（盒）锌测定试剂（盒）铅测定试剂（盒）铁测定试剂（盒）总铁结合力（TIBC）测定试剂（盒）不饱和铁结合力测定试剂（盒）血清HCO3\总CO2测定试剂（盒）2.2蛋白质检验试剂（盒）品名举例：总蛋白（TP）测定试剂（盒）白蛋白（ALB）测定试剂（盒）硫酸锌混浊实验（ZTT）试剂（盒）脑磷脂胆固醇（CCLF）试剂（盒）钴反应试剂（盒）糖化血红蛋白测定试剂（盒）前白蛋白（PA）测定试剂（盒）免疫球蛋白（PA）测定试剂（盒）分泌型免疫球蛋白（SIgA）试剂（盒）免疫球蛋白IgM测定试剂（盒）免疫球蛋白IgM测定试剂（盒）免疫球蛋白IgG测定试剂（盒）免疫球蛋白（IgG）亚基试剂（盒）免疫球蛋白IgD测定试剂（盒）免疫球蛋白IgE测定试剂（盒）免疫球蛋白轻链K\λ试剂（盒）α1—酸性糖蛋白（AAG ）测定试剂（盒） 维生素A 醇结合蛋白（RBP ）试剂（盒） C —反应蛋白（CRP ）ELISA 测定试剂（盒） 冷球蛋白测定试剂（盒） 转铁蛋白（TRP ）ELISA 测定试剂（盒） 血液结合素（HX ）试剂（盒） 人体心脏脂肪酸结合蛋白（H —FABP ）试剂（盒） 铜蓝蛋白（CP ）测定试剂（盒） 肌红蛋白（MB ）测定试剂（盒） 视黄醇结合蛋白（RBP ）测定试剂（盒） 肌球蛋白轻链试剂（盒） 纤维连接蛋白试剂（盒） 酸溶原胶原三肽试剂（盒）血清α1—微球蛋白（α1—MG ）测定试剂（盒） 总补体溶血活性（CH50）测定试剂（盒） 补体价（CH50）试剂（盒） 补体旁路活化的溶血活性（AP —H50）测定试剂（盒） 补体成分C3C 试剂（盒） 补体成分C1灭活因子试剂（盒） C3激活剂原试剂（盒） 补体控制因子试剂（盒） 基质金属蛋白酶—3（MMP3）试剂（盒） 组胺游离试验试剂（盒） 肺表面活性载脂蛋白—A （SP —A ）试剂（盒） 表面活性载脂蛋白D （SP —D ）试剂（盒） 涎液化糖链抗原KL —6试剂（盒） 粒细胞弹性蛋白酶试剂（盒） 血清透明酸(HA)测定试剂（盒） Ⅳ型胶原试剂（盒） Ⅳ型胶原7S 试剂（盒） A\G 比试剂（盒） 糖化血红蛋白A1C 试剂（盒） 铁蛋白试剂（盒） 铁传递蛋白（TF ）试剂（盒） 触珠蛋白(hp)测定试剂（盒） 前清蛋白\转甲状腺素试剂（盒） 血清α2巨球蛋白测定试剂（盒） β2—微球蛋白测定试剂（盒） 补体C3测定试剂（盒） 补体C4测定试剂（盒） 2.3糖类检验试剂（盒）、试纸品名举例： D —阿糖醇试剂（盒） 自测用β—羟基丁酸（BHB ）测定试剂（盒） 岩藻糖测定试剂（盒） 尿葡萄糖检测试剂（盒） 丙酮酸(PA)测定试剂（盒） 血酮体试剂（盒） 全血半乳糖（GT ）测定试剂（盒）半乳糖—1—磷酸试剂（盒）1，5脱水山梨酸（1,5—AG ）试剂（盒）山梨醇试剂（盒）果糖胺检测试剂（盒）血清乙酰乙酸（ACAE ）测定试剂（盒）血糖试纸血糖（GLU ）测定试剂（盒）乳糖（LA ）测定试剂（盒）3—羟丁酸试剂（盒）血清β—羟基丁酸（BHB ）测定试剂（盒） 2.4酶类检验试剂（盒） 2.4.1肝脏疾病诊断试剂（盒）品名举例：丙氨酸氨基转移酶（ALT ）测定试剂（盒）天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）测定试剂（盒） 血清天门冬氨酸氨基转移酶同工酶测定试剂（盒） 单胺氧化酶（MAO ）测定试剂（盒）碱性磷酸酶（ALP ）测定试剂（盒）碱性磷酸酶同工酶测定试剂（盒）谷氨酸脱氢酶（GLDH ）测定试剂（盒）谷氨酸脱氢酶测定试剂（盒）γ—谷氨酰转移酶（γ—GT ）测定试剂（盒） 血清γ谷氨酰转移酶同工酶测定试剂（盒） 血清α—L —岩藻苷酶（AFU ）测定血清亮氨酰氨基肽酶（LAP ）测定试剂（盒） 血清总胆汁酸酶法测定试剂（盒）血清5′—核苷酸酶（5′—NT ）测定试剂（盒） 2.4.2肾脏疾病诊断试剂（盒）品名举例：尿γ—谷氨酰基转移酶（γ—GT ）测定试剂（盒） 尿丙氨酰氨基态酶(γ—UAAP)测定试剂（盒） 尿碱性磷酸酶（UALP ）测定试剂（盒）β型促尿钠肽检测试剂（盒）2.4.3心肌疾病诊断试剂（盒）肌酸激酶（CK0检测试剂（盒）肌酸激酶同工酶（CK —MB ）测定试剂（盒） 乳酸脱氢酶（LDH ）测定试剂（盒）乳酸脱氢酶同工酶（LDH ）测定试剂（盒）α—羟丁酸脱氢酶（α—HBDH ）测定试剂（盒） 丙酮酸激酶（PK ）测定试剂（盒）肌钙蛋白C （cTnC ）测定试剂（盒）肌钙蛋白T(cTnT)测定试剂（盒）肌钙蛋白I(cTnI)测定试剂（盒）2.4.4体液和其他酶测定试剂（盒）品名举例：末端转移脱氧核苷酰酶（TDT ）试剂（盒）亮氨酸氨基肽酶 脱氧胸苷激活酶试剂（盒） 溶菌酶试剂（盒） 丙酮酸激酶（PK ）试剂（盒） 磷酸己糖异构酶试剂（盒） 2—5A 合成酶试剂（盒） 脯氨酰羟化酶（PH ）试剂（盒） 超氧化物岐化酶（SOD ）试剂（盒） 鸟嘌呤酶（GUA ）试剂（盒） 异柠檬酸脱氢酶测定试剂（盒） 淀粉酶（AMS ）测定试剂（盒） 血清酸性磷酸酶（ACP ）测定试剂（盒） 酸性磷酸酯酶（ACP ）同工酶（包括前列腺或酒石 酸抑制剂型(ACP) 试剂（盒） 鸟氨酸转氨甲酰酶（OCT ）试剂（盒） 前列腺酸性磷酸酶（PAP ）测定试剂（盒） 腺苷脱氨酶（ADA ）测定试剂（盒） 血清醛缩酶（ALD ）测定试剂（盒） 血清血管紧张素转化酶（ACE ）测定试剂（盒） 血清葡萄糖—6—磷酸脱氢酶测定试剂（盒） 葡萄糖氧化酶试剂（盒） β—N —乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG ）测定试剂（盒） 血清胰蛋白酶测定试剂（盒） 糜蛋白酶试剂（盒） 胰蛋白酶抑制剂（PST ）试剂（盒） 磷脂酶A2（PLA2）试剂（盒） 血清氨基肽酶测定试剂（盒） 胆碱酯酶（CHE ）测定试剂（盒） α—1抗胰蛋白免疫检测试剂（盒） α—1抗胰凝乳蛋白免疫检测试剂（盒） 血清脂肪酶（LPS ）测定试剂（盒） 淀粉酶同工酶（AMS —P ）测定试剂（盒） 2.5非蛋白含氮类化合物检测试剂（盒）品名举例： 总胆红素（TBIL ）测定试剂（盒） 直接胆红素（DBIL ）测定试剂（盒） 偶合胆红素试剂（盒） 尿酸(UA)测定试剂（盒） 残留氮（NPN ）试剂（盒） 氨基酸组分试剂（盒） 总分支氨基酸试剂（盒）P —对氨基马尿酸（RPF ）试剂（盒） P —对氨基苯甲酸（PABA ）试剂（盒） 总分支链氨基酸\酪氨酸（BTR ）试剂（盒） 肌酐（CR ）测定试剂（盒） 氨基酸氮测定试剂（盒） 尿高胱氨酸测定试剂（盒） 血尿素氮（UN ）试剂（盒） 尿素（UREA ）测定试剂（盒）甲硫氨酸试剂（盒）氨基酸试剂（盒）组氨酸试剂（盒）血浆氨测定试剂（盒）苯丙氨酸测定试剂（盒）酪氨酸测定试剂（盒）唾液酸试剂（盒）2.6脂类检验试剂（盒）品名举例：血清甘油三酯（TG ）测定试剂（盒）甘油三酯试剂（盒）2、3—二磷酸甘油酸试剂（盒）总脂试剂（盒）血清总胆固醇（TC ）测定试剂（盒）胆固醇测定试剂（盒）胆固醇组分（TC 组分）试剂（盒）血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL —C)测定试剂（盒） 血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL —C)测定试剂（盒） β—脂蛋白（β—LP ）试剂（盒）脂蛋白组分试剂（盒）脂蛋白脂肪酶（LPL ）试剂（盒）卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT ）试剂（盒） 载脂蛋白检测试剂（盒）胆固醇基脂输送蛋白（CETP ）试剂（盒）脂蛋白检测试剂（盒）脂蛋白（a ）ELISA 检测试剂（盒）血清总胆汁酸（TBA ）检测试剂（盒）血清游离胆固醇（F —CHO ）测定试剂（盒） 血清磷脂（PL ）测定试剂（盒）血清非酯化脂肪酸测定试剂（盒）2.7血气与电解质分析试剂品名举例： 电解质分析仪随机试剂生化分析仪用参比液生化分析仪用7%牛血清白蛋白生化分析仪用柠檬酸溶液生化分析仪用免疫冲洗液生化分析仪用磁性HDLC 试剂2.8内分泌检验试剂（盒） 2.8.1下丘脑垂体激素测定试剂（盒） 品名举例：自测用黄体生成素（LH ）测定试剂（盒）自测用雌酮—3—葡萄糖苷酸（E3G ）测定试剂（盒） 胰岛素生长因子I 试剂（盒）胰岛素生长因子结合蛋白1型（IGFBP-1）试剂（盒） 胰岛素生长因子结合蛋白3型(IGFBP —3) 试剂（盒）精氨酸血管加压素（A VP）试剂（盒）促肾腺上皮激素（ACTH）测定试剂（盒）卵泡雌激素（FSH）测定试剂（盒）黄体生成素（LH）测定试剂（盒）生长素（GH）测定试剂（盒）促甲状腺素（TSH）测定试剂（盒）2.8.2甲状腺激素测定试剂（盒）品名举例：血清降钙素（CT）测定试剂（盒）血清甲状旁腺激素（PTH）测定试剂（盒）甲状旁腺激素片段试剂（盒）甲状旁腺激素相关肽试剂（盒）三碘甲状腺原氨酸摄取率试剂（盒）甲状腺素结合能力（TBC）试剂（盒）血清游离甲状腺素（FT4）测定试剂（盒）甲状腺素结合球蛋白测定试剂（盒）甲状腺自体抗体免疫球蛋白测定试剂（盒）血清总T3测定试剂（盒）血清总T4测定试剂（盒）血清甲状腺素（T4）测定试剂（盒）血清三碘甲状腺原氨酸（T3）测定试剂（盒）甲状腺素球蛋白（Tg）试剂（盒）血清游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）测定试剂（盒）血清反三碘甲状腺原氨酸（γT3）测定试剂（盒）2.8.3肾上腺激素测定试剂（盒）品名举例：尿17—酮类固醇（17—KS）测定试剂（盒）尿17—羟皮质类固醇（17—OHCS）测定试剂（盒）儿茶酚胺（CA）测定试剂（盒）血管紧张素Ⅰ（AT—Ⅰ）测定试剂（盒）血管皮质醇Ⅱ（AT—Ⅱ）测定试剂（盒）血清皮质醇测定试剂（盒）尿游离皮质醇（UFC）测定试剂（盒）脱氢表雄酮（DHEA）测定试剂（盒）脱氢异雄甾酮—硫化物（DHEA—S）试剂（盒）雄烯二酮试剂（盒）去甲肾上腺素（NA）测定试剂（盒）肾上腺素（NA）测定试剂（盒）多巴胺（DA）测定试剂（盒）尿高香草酸（HV A）测定试剂（盒）血浆肾素活性（PRA）测定试剂（盒）促红细胞生成素（EPO）测定试剂（盒）香草扁桃酸（VMA）试剂（盒）尿5—羟吲哚酸（5—H—AA）测定试剂（盒）2.8.4性腺激素测定试剂（盒）品名举例：人β—绒毛膜促性腺激素试剂（盒）(绒毛膜癌)人绒毛膜促性腺激素\早早孕（HCG）检测试纸游离睾酮试剂（盒）孕烷二醇—3α—葡萄糖甘酸（PB—3G）试剂（盒）雌酮（EI）测定试剂（盒）雌激素试剂（盒）雌三醇—16α—葡萄糖苷酸(E3—16G) 试剂（盒）17α—羟孕酮（17α-OH-P）测定试剂（盒）血清胎盘泌乳素（HPL）测定试剂（盒）黄体酮试剂（盒）血液睾酮试剂（盒）孕酮（P4）测定试剂（盒）雌二醇（E2）测定试剂（盒）雌三醇（E3）测定试剂（盒）2.8.5胰腺和肠胃激素测定试剂（盒）品名举例：促胰液素（SEC）试剂（盒）胃泌素（GAS）试剂（盒）胃液素试剂（盒）胰泌素试剂（盒）C肽测定试剂（盒）胰高血糖素测定试剂（盒）胰岛素测定试剂（盒）胰岛素酶联免疫法检测试剂（盒）胰岛素原试剂（盒）2.8.6其他激素测定试剂（盒）品名举例：高血压蛋白原酶活性试剂（盒）血管扩张素Ⅰ\高血压蛋白原酶试剂（盒）活化高血压蛋白原酶（PRC）试剂（盒）组胺试剂（盒）环腺苷单磷酸（CAMP）试剂（盒）人脑钠利尿肽（BNP）试剂（盒）降钙素试剂（盒）骨钙素试剂（盒）甘胆酸试剂（盒）心钠素测定试剂（盒）2.9维生素和药物代谢物检验试剂（盒）2.9.1维生素测定类试剂（盒）品名举例：维生素B12测定试剂（盒）1、25-二羟基维生素D3试剂（盒）叶酸测定试剂（盒）维生素A测定试剂（盒）维生素E测定试剂（盒）维生素C测定试剂（盒）2.9.2药物及药物代谢物检验试剂（盒）品名举例：安非它明试剂（盒）地高辛测定试剂（盒）游离卡马西平试剂（盒）游离丙戊酸试剂（盒）N-乙酰普鲁卡因胺试剂（盒）奎尼丁试剂（盒）他可莫司（FK-506）试剂（盒）水杨酸试剂（盒）巴比妥盐试剂（盒）苯丙氨酸试剂（盒）甲喹酮试剂（盒）醋氨酚试剂（盒）胆氨基乙酸试剂（盒）二苯乙内酰脲试剂（盒）吩噻嗪试剂（盒）环磷腺苷（CAMP）试剂（盒）环孢霉素试剂（盒）苯二氮试剂（盒）双去氧卡那霉素试剂（盒）奈替米星试剂（盒）乙醛试剂（盒）溴哌利多试剂（盒）唑尼沙胺试剂（盒）安搏律定试剂（盒）异帕米星试剂（盒）美西律试剂（盒）可待因试剂（盒）甲乙琥珀亚胺试剂（盒）甲基丙二酸（非定量）试剂（盒）卡那霉素试剂（盒）可卡因及其代谢物试剂（盒）立待可因试剂（盒）水杨酸盐试剂（盒）美沙酮试剂（盒）普里米酮试剂（盒）庆大霉素试剂（盒）三环抗抑郁药试剂（盒）罂粟试剂（盒）洋地黄霉素试剂（盒）对乙酰氨基酚试剂（盒）卡马西平试剂（盒）乙琥胺试剂（盒）苯巴比妥试剂（盒）扑米酮试剂（盒）游离苯妥英钠试剂（盒）苯妥英钠试剂（盒）丙戊酸试剂（盒）达舒平试剂（盒）利多卡因试剂（盒）普鲁卡因胺试剂（盒）阿米卡星试剂（盒）妥布霉素试剂（盒）血液氨甲喋呤试剂（盒）氟哌啶醇试剂（盒）万古霉素试剂（盒）（三）、临床免疫学检验试剂3.1 传染病免疫学诊断检验试剂（盒）3.1.1 肝炎病毒血清学标志物检验试剂（盒）品名举例：乙型肝炎核心抗体（抗HBc）检验试剂（盒）乙型肝炎核心抗原（HBcAg）检验试剂（盒）乙型肝炎e抗原(HBeAg)检验试剂（盒）乙型肝炎e抗体（HBe）检验试剂（盒）乙型肝炎表面抗原（HBsAg）试剂（盒）（临床诊断用）白蛋白受体（HBs抗原。
播散性血管内凝血应该做哪些检查？
播散性血管内凝血应该做哪些检查？*导读：本文向您详细介播散性血管内凝血应该做哪些检查，常用的播散性血管内凝血检查项目有哪些。
以及播散性血管内凝血如何诊断鉴别，播散性血管内凝血易混淆疾病等方面内容。
*播散性血管内凝血常见检查：常见检查：血浆凝血酶调节蛋白活性测定、凝血因子活性测定(因子Ⅷ∶C、Ⅸ∶C)、血浆激肽释放酶原测定、简易凝血酶生成试验、复钙时间、复钙交叉试验（CRT,PRT）*一、检查DIC实验室检查的基本要求有三：①由于DIC多数起病急骤，发展迅猛，故除研究性者外，实验室检查力求简便快速，一般应在2h内能出具检测结果报告。
②目前大多数DIC实验项目尚不具备诊断特异性，因此实验检测意义应密切结合临床，综合分析。
③多项凝血检测正常值，生理波动范围较大，DIC不同阶段的实验检测结果亦有差异，因此动态检测对DIC的诊断价值更大。
*二、血小板量与质(1)血小板计数减少：血小板减少是DIC最常见、最重要的实验室异常。
Danus等认为，在非血小板增多性疾病患者，如果血小板数超过150×109/L，基本上可排除DIC诊断。
DIC血小板减少的发生率一般在90%左右，而且多为重度减少。
(2)平均血小板体积增大：循环中血小板正常体积平均为(10.46±2.80)fl，在DIC时，由于血小板大量破坏，年轻的血小板比例增加，故平均体积增大，可达(12.8±3.6)fl，而体积增大是血小板破坏加速的证据之一。
(3)血小板功能异常：获得性血小板功能缺陷也是DIC常见的实验异常之一。
在急性和慢性DIC，其异常率可达50%和90%。
主要表现为：①聚集功能异常，早期聚集性增强，随后降低。
DIC 时纤维蛋白降解产物的形成，特别是早期纤维蛋白降解产物碎片X、Y可抑制血小板聚集。
②抗纤维蛋白溶解活性明显降低。
③黏附性异常，DIC早期黏附性增强，中、晚期可降低。
(4)释放及代谢产物增加：DIC发病过程中，由于原发病，广泛血管内皮损伤及凝血酶等的作用，血小板大量活化，血浆中其释放及代谢产物明显增加，其中某些血小板特异性分子标志物的检测对DIC特别是慢性DIC的诊断具有较大意义。
凝血酶—抗凝血酶Ⅲ复合物测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求万孚
2性能指标
2.1外观
外观应符合如下要求：
a)磁珠包被物R1 摇匀后应为棕褐色悬浊液；静止久后，棕褐色磁珠沉降于底部，上清液应为无色液体；酶标记物R2 应为无色液体，无沉淀或絮状物；校准品应为外观均匀，成形完整，呈乳白色的冻干品，复溶后较清亮，无浑浊及沉淀；
b)试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；
c)中文包装标签清晰，无磨损。
2.2准确度
将两个正确度控制品进行检测，测定结果的相对偏差在±10%范围内。
2.3空白限
空白限不大于0.4 ng/mL；
2.4线性
试剂盒在0.4 ng/mL～120 ng/mL 区间内，其相关系数（r）的绝对值不低于0.9900。
2.5重复性
变异系数CV≤8.0%。
2.6批间差
变异系数CV≤10.0%。
2.7校准品
2.7.1校准品准确度
测定校准品，测定结果的相对偏差在±10%范围内。
2.7.2校准品瓶内均一性
校准品瓶内均一性≤8.0%。
2.7.3校准品瓶间均一性
校准品瓶间均一性≤5.0%。
凝血酶抗凝血酶复合物联合纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物诊断创伤性弥散性血管内凝血的临床价值
医学研究生学报 2020 年12 月第 33 卷第 12 期J Afaj Po取ra,V〇1.33, No.12, December, 2020• 1283 ■论著(临束研究）凝血酶-抗凝血酶复合物联合纤溶酶-a2抗纤溶酶复合物诊断创伤性弥散性血管内凝血的临床价值胡艳晶，张益明，宋景春，张昕，林青伟，钟林翠，李兆芳[摘要]目的凝血酶-抗凝血酶复合物(T A T)和纤溶酶-a2抗纤溶酶复合物（PIC)均采用高敏化学发光法检测，具有灵敏度高、检测速度快等优点。
文中探讨TAT联合P1C诊断创伤患者相关弥散性血管内凝血（D IC)的临床价值3方法收集2018年5月至2019年12月解放军联勤保障部队908医院重症医学科收治的82例创伤患者临床资料。
按照患者人院时创伤 严重程度分为普通创伤组U = 63)和创伤性D IC组19)。
比较组间患者T A T及P IC水平;分析P IC、纤维蛋白降解产物(F D P)与D-二聚体水平的相关性。
结果与普通创伤组患者T A T[21.7(10.6〜47.6)n g/m L]和P IC[2.4(0.9~6.8)jjig/m L] 水平相比，创伤性DIC 组的TAT[ 120.0(63.3 ~ 120.0) n g/m L]和 PIC[7.0(4.8~ 10.0) |xg/m L]均显著升高（P<0.05).p TAT 与F D P和D-二聚体呈高度相关;H C与FDP和D-二聚体均呈强相关，且TA T与D IC评分呈强相关。
结论TAT爸42.3 ng/mL 且PIC英3.3 g/m L可作为创伤性D1C更灵敏的诊断标准。
[关键词]创伤;弥散性血管内凝血;凝血酶-抗凝血酶复合物;纤溶酶-a2抗纤溶酶复合物[中图分类号]R552 [文献标志码] A [文章编号]1008-8199(2020) 12-1283-05[DO I] 10.16571/ki. 1008-8199.2020.12.010Clinical value of thrombin-antithrombin complex combined with 〇2-plasmin inhibitor-plasmin complex in the diagnosis of traumatic disseminated intravascular coagulationHU Yan-jing, ZHANG Yi-ming, SONG Jing-chun, ZHANG Xin, LIN Qing-wei, ZHONG lin-cui, LI Zhao-fang (In te n s iv e C are U n it,908；/，H o sp ita l o f C h in ese P L A L o g istic a l S u p p o rt F o rc e, N a n c h a n g 330002, J ia n g x i, C h in a)[Abstract] Objective To investigate the clinical value of thrombin-antithrombin complex (TAT) and a2-plasmin inhibitor- plasmin complex (PIC) in the diagnosis of disseminated intravascular coagulation ( DIC) in trauma patients. Methods From May 2018 to December 2019, the clinical data of 82 trauma patients in the Department of critical medicine of the 908th Hospital of PLA were collected. The patients were divided into two groups: the general trauma group (n = 63) and the traumatic DIC Group (汀=19). The levels of TAT and PIC were compared and the correlation among PIG, FDP and DD were analyzed. Results Compared with the levels of TAT [21.7 ( 10.6-47.6) ng/m L] and PIC [2.4 (0.9-6.8) j j l g/m L] in the general trauma group, the levels of TAT [ 120.0 (63.3-120.0) ng/m L] and PIC [7.0 (4.8-10.0) (j l g/m L] in the traumatic DIC Group were significantly higher (P<0.05).T A T washighly correlated with FDP and DD, PIC was strongly correlated withFDP and DD, and TAT was strongly correlated with DIC score.基金项目：江西省卫健委科技计划（20204819)Conclusion TAT ^42.3 ng/mL and PIC ^3.3(xg/mL are more sensitive diagnostic criteria for traumatic DIC.作者单位:330002南昌，解放军联勤保障部队第九〇八医 院重症医学科[胡艳晶（医学硕士）、张益明、宋景春、张昕、林青伟、钟林翠、李兆芳][Key words ] trauma ；disseminated intravascular coagulation ；thrombin-antithrombin complex ；a2-plasmin inhibitor-plasmin complex通信作者：宋景春，E-mail :songjingchun@ !•1284 •医学研究生学报2020 年12 月第33 卷第12 期J M<y/ P〇W a,V ol.33, No.12, December, 2020〇引言创伤是危害国民健康的主要公共卫生问题，占据疾病死亡谱的第3位，已成为全球40岁以下人群 死亡的第一因素〜3]。
凝血)
1. 筛选实验：（1）血小板计数（PLT）及功能检测PLT<50*10^9/L，或进行性下降，血小板功能进一步减低。
（2）纤维蛋白原（FIB）检测肝病并发DIC时75%患者FIB<1.5g/L，45%患者FIB<1.0g/L，或进行性下1. 筛选实验：（1）血小板计数（PLT）及功能检测PLT<50*10^9/L，或进行性下降，血小板功能进一步减低。
（2）纤维蛋白原（FIB）检测肝病并发DIC时75%患者FIB<1.5g/L，45%患者FIB<1.0g/L，或进行性下降。
（3）凝血酶原时间（PT）及活化部分凝血活酶时间（APTT）检测肝病并发DIC时PT>25秒或动态变化，延长率为95-100%；APTT缩短或延长10秒以上，延长率为86-95%。
2. 分类实验：（1）凝血因子的活性和抗原检查肝病并发DIC时，其重要的病理生理改变是血浆凝血因子水平由于合成减少和（或）消耗增多而进一步减低。
FVII：C、FV：C、FVIII：C常低于30%，此时，FVIII：C降低，VWF：AG明显增高，故VWF：AG /FVIII：C比值更加增高，这是诊断肝病DIC的重要指标之一。
（2）纤溶活性检查I. 纤溶酶原（PLG）检查肝病DIC时，PLG100%降低，PLG：AG常低于0.6g/L，PLG：A常低于25%。
II. 纤维蛋白（原）降解产物（FDP）检查FDP是纤溶活性的筛选试验之一，反映的是纤维蛋白原降解产物（FgDP）和纤维蛋白降解产物（fdp）的总水平。
FDP含量常大于60mg/L，其阳性率大于90%。
III.凝血酶时间（TT）检查TT延长率为85-98%。
（3）特异试验I. 纤维蛋白肽A（FPA）检测FPA是纤维蛋白的降解产物A片段，是反映凝血活性的分子标志物之一。
肝病并发DIC时，血和尿FPA含量明显增高，其阳性率为95-98%。
II. D-二聚体检测D-DIMER是纤溶酶降解交联纤维蛋白的产物之一，它的增高反映继发性纤溶增强。
凝血酶抗凝血酶复合物参考范围
凝血酶抗凝血酶复合物参考范围1. 什么是凝血酶抗凝血酶复合物？大家好，今天咱们来聊聊一个听起来很高大上的医学名词——凝血酶抗凝血酶复合物。
乍一听，可能很多朋友都觉得这像是天书，其实它就是我们身体里一种重要的物质，用来帮助控制血液的凝固。
就好比在家里煮饭，火候掌握得好，饭才能煮得恰到好处；而这个复合物就像是我们身体里的“火候调节器”，确保血液在需要的时候能够适时凝固，保持健康。
那么，凝血酶抗凝血酶复合物（我们简称它为ATIII吧）其实是个什么东西呢？简单来说，它是由凝血酶和抗凝血酶结合而成的。
在正常情况下，凝血过程是个精密的系统，既要保证伤口愈合，又不能让血液在体内“乱成一锅粥”。
而ATIII则在这个过程中起到了制衡的作用，防止过度凝血，保护我们的血管。
就像有时候你吃辣椒，嘴里火辣辣的，那就得找点牛奶来降降火，对吧？2. 凝血酶抗凝血酶复合物的参考范围2.1 正常范围提到参考范围，咱们就得聊聊“正常”的事儿了。
一般来说，健康成年人的ATIII水平大致在80%到120%之间。
如果你的检测结果在这个范围内，那就说明你的血液系统运转得不错，像是个勤快的小蜜蜂，忙忙碌碌却又不乱。
如果低于这个范围，可能就是身体在提醒你，该注意了，得去找医生看看，是不是哪里出问题了。
2.2 影响因素当然，ATIII的水平可不是一成不变的，很多因素都会影响到它。
比如说，年龄、饮食、运动，甚至是压力，都是“潜在的搅局者”。
想象一下，年纪大了，像是老旧的车，发动机可能不如年轻时候那么有劲儿了。
再说饮食，如果你天天大鱼大肉，少吃蔬菜，身体自然会不高兴，可能会影响到ATIII的水平，造成一些不必要的麻烦。
还有，大家都知道，运动是个好东西，但运动过度了，也可能让ATIII的水平下降。
毕竟，过犹不及嘛！再加上压力过大，就像锅里加了太多的水，最终也会导致“溢出”。
所以啊，生活中得保持一个好心态，平衡饮食和运动，才能让自己在健康的道路上稳步前行。
凝血酶抗凝血酶复合物13.5
凝血酶抗凝血酶复合物13.5一、引言凝血酶是一种参与血液凝固的蛋白酶，而抗凝血酶（AT）则是人体内一种重要的血浆蛋白，能够与凝血酶结合并抑制其活性。
凝血酶抗凝血酶复合物13.5是两者之间相互作用的重要产物，对于了解凝血过程和血栓性疾病的治疗具有重要意义。
本文将对凝血酶抗凝血酶复合物13.5进行深入探讨和研究。
二、研究方法本研究采用的方法主要包括文献综述、实验测定和分析等。
首先，对现有文献进行了系统梳理，了解了凝血酶、抗凝血酶以及复合物的结构和功能等方面的知识。
其次，通过实验室实验方法，对凝血酶抗凝血酶复合物13.5的浓度、活性及其影响因素进行了测定和分析。
最后，运用统计学方法对实验数据进行处理和分析。
三、结果与分析1. 凝血酶抗凝血酶复合物13.5的含量和活性分析：通过对不同来源的血浆样品中复合物的检测，发现其浓度在正常范围内，且具有较强的生物学活性。
同时，研究发现温度、pH值等因素对其稳定性和活性影响较小。
2. 复合物形成的影响因素分析：研究表明，复合物的形成受到凝血酶和AT 浓度、比例等多种因素的影响。
当凝血酶和AT浓度过高或过低时，会影响复合物的生成；而在正常的生理条件下，复合物能够较好地形成并保持稳定。
3. 结论分析：综合以上实验数据和文献资料，可以得出以下结论：（1）凝血酶抗凝血酶复合物13.5是一种重要的生物活性物质；（2）该复合物在体内外的稳定性较高，受多种因素的影响较小；（3）复合物的形成和作用机制需要进一步研究和阐明。
四、讨论与展望本研究的重点是对凝血酶抗凝血酶复合物13.5进行深入研究，以期为血栓性疾病的诊断和治疗提供新的思路和方法。
然而，由于研究条件和技术手段的限制，目前的研究成果仍然有限。
未来可以从以下几个方面展开进一步的研究：1. 研究复合物在不同病理状态下的变化规律及作用机制；2. 利用基因敲除动物模型探究复合物在体内的作用效果；3. 通过药物干预调节复合物的生成和作用，探索其在预防和治疗血栓性疾病中的应用价值；4. 对复合物的结构进行分析，为其药物的制备和应用提供理论依据。
tat的原理和临床应用
TAT的原理和临床应用概述Thrombin-antithrombin complex (TAT)是指由凝血酶和抗凝血酶复合物（antithrombin）形成的一种复合物。
在凝血系统中，凝血酶和抗凝血酶复合物起着重要的调控作用。
了解TAT的原理及其临床应用对于相关疾病的诊断和治疗具有重要意义。
原理TAT的形成是通过凝血酶和抗凝血酶复合物结合而产生的。
凝血酶是通过凝血酶原转化而来，它在凝血过程中起着至关重要的作用。
凝血酶可以将凝血因子转化为活性的凝血因子，从而引发凝血过程。
抗凝血酶复合物是一种抗凝血因子，在正常情况下起到抑制凝血的作用。
当凝血系统激活时，凝血酶和抗凝血酶复合物结合形成TAT。
应用TAT的测定是一种常见的临床检测方法，用于评估出凝血系统的活性和状态的变化。
下面是TAT的一些临床应用：1.血栓性疾病的诊断和监测：TAT的浓度在血栓性疾病患者中通常会升高。
血栓性疾病包括深静脉血栓形成、肺栓塞等。
通过测定TAT的浓度，可以提供评估血栓形成和凝血活性的指标。
2.凝血异常的诊断和监测：许多凝血异常疾病的发病机制与凝血酶和抗凝血酶之间的平衡失调有关。
通过测定TAT的浓度，可以帮助确定凝血异常的原因和类型。
3.评估抗凝治疗效果：在抗凝治疗中，TAT的测定可以用于评估抗凝剂的疗效。
抗凝剂可以降低凝血酶和抗凝血酶复合物的形成，从而减少血栓形成的风险。
测定TAT的浓度可以评估抗凝治疗的效果。
4.预测疾病进展和复发风险：TAT的水平可以用于预测疾病的进展和复发风险。
例如，在冠心病患者中，TAT的浓度与再灌注后心肌损伤的风险相关。
通过测定TAT的浓度，可以提供冠心病患者的风险评估。
结论TAT是凝血酶和抗凝血酶复合物的一种复合物，对于凝血系统的调控起着重要的作用。
通过测定TAT的浓度，可以评估凝血系统的活性和状态的变化，并在临床上具有重要的应用。
TAT的测定在血栓性疾病的诊断和监测、凝血异常的诊断和监测、评估抗凝治疗效果以及预测疾病进展和复发风险等方面具有广泛的应用前景。
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微孔酶标板12 孔×8 条12 孔×4 条无
标准品0.3mL*6 管0.3mL*6 管无
样本稀释液6mL 3mL 无
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL 无
底物B 6mL 3mL 无
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒组成:
终止液6mL 3mL Байду номын сангаас
封板膜2 张2 张无
说明书1 份1 份无
自封袋1 个1 个无
注:标准品(S0-S5)浓度依次为：0、30、60、120、240、480 pg/mL
试剂的准备:
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法:
1.自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
7.每孔加入终止液50μL，15min 内，在450nm 波长处测定各孔的OD值。
结果判断:绘制标准曲线,在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能:
1.灵敏度：最低检测浓度小于1.0pg/mL。
2.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品:
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项:
1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒
拜力生物编辑整理：
人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断
人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒使用说明书
检测原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。
3.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
4.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月
2.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
操作步骤:
1.从室温平衡20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。
样品收集、处理及保存方法:
1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。