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《生物化学原理》之DNA复制

《生物化学原理》之DNA复制
第十十一一章 DNA的复制、修复及重组
•・ DNA的复制 •・ DNA的损伤和修复 •・ 遗传重组
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RNA
一一、DNA的复制:指亲代DNA链双螺旋解开,分别作为模版, 指导子子代DNA合成的过程。
•・ 半保留复制:DNA复制后产生生的新链中,一一条来自亲代的 DNA,另一一条是新合成的新链。


•・ DNA聚合酶:参与DNA复制的主要酶,它催化四种dNTP 合成DNA双链。 ✦ DNA聚合酶的作用特点:
1.以四种dNTP为底物
2.反 应必须接受模板的指导 3.反应必须有3’-OH的存在 4.反应必须有二二价金金属Mg2+的存在
5.DNA链的合成方方向是从5’➝3’
•・ 复制的起始:DNA复制开始于特定的位置,即DNA的复制 有特定的复制起始点(replication origin)。在起始位点处, DNA双螺旋打开,以两条DNA单链为模版,向两端开始复 制。
双向复制


•・ 复制叉:DNA复制过程中,亲代的DNA双链从复制起点开 始逐步解链,形成一一个分叉状结构,称为复制叉。
和单个酶的直接修复作用。











光修复
•・ 切除修复:指在一一系列酶的催化下,将DNA分子子中受损的 部分切除,并以完整的那条单链为模板,合成切除部分的 过程。
•・ 错配修复:修复在复制过程中错配且没有被校正的碱基。
•・ SOS反应和易错修复:SOS反应是指细胞DNA受到大大面积 损伤或者DNA复制系统受到抑制的情况下的应急效应。
DNA聚合酶Ⅰ的3’➝5’核酸 外切酶活性在DNA复制过 程中起重要的校对作用。

生物竞赛讲义-生物化学-20生物氧化-《生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)》

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生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
电子传递体在呼吸链中的位置与其E0'之间的关系
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
几种呼吸链抑制剂的作用位点
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武


生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
呼吸链的组分
NAD+及与NAD+偶联的脱氢酶:NAD+是一种流 动的电子传递体。 黄素及与黄素偶联的脱氢酶 辅酶Q:属于一种流动的电子传递体。 铁硫蛋白 细胞色素:细胞色素c是一种流动的电子传递体 氧气
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
复合体 IV 即细胞色素c氧化酶
有4个氧还中心 主要成分为细胞色素a和a3 电子来自还原性的细胞色素c,电子的最终 受体为氧气 一对电子可产生2个质子梯度
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
电子在复合体IV上的传递
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
氧化磷酸化的偶联机制
˟ ˟ √ 化学偶联假说 构象偶联假说 化学渗透学说:该学说由Peter Mitchell于1961年 提出,其核心内容是电子在沿着呼吸链向下游传 递的时候,释放的自由能转化为跨线粒体内膜 (或跨细菌质膜)的质子梯度,质子梯度中蕴藏 的电化学势能直接用来驱动ATP的合成。驱动 ATP合成的质子梯度通常被称为质子驱动力 (pmf),它由化学势能(质子的浓度差)和电 势能(内负外正)两部分组成。

(杨荣武)生物竞赛讲义-生物化学-30胆固醇代谢-《生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)》(33P

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生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
胆固醇合成的四个阶段反应
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
HMG-CoA 还原酶
内质网膜整合蛋白 催化的是不可逆反应 胆固醇合成的限速酶
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
主要 成分
主要载 脂蛋白
主要功能
脂肪
脂肪
脂肪, 胆固醇
A,B-48, CI,II,III, E
B-100, C-I,II,III, E
B-100, E
运输食物中的脂肪 和胆固醇 运输内源的脂肪
一部分被肝吸收, 一部分转变为LDL
胆固醇 B-100
蛋白质 A, CI,II,III, D, E
将胆固醇转运到外 周组织
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
胆固醇合成的第二个阶段的反应
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
第三阶段:6个异戊二烯单位→鲨烯
此阶段主要包括三步反应,首先在二甲烯丙基 转移酶的催化下,一个二甲烯丙基与一个异戊 二烯焦磷酸头尾缩合成牻牛儿焦磷酸;随后在 牻牛儿转移酶催化下,牻牛儿焦磷酸与另一个 异戊二烯焦磷酸头尾缩合成法尼焦磷酸;最后, 在法尼转移酶或鲨烯合酶催化下,两个法尼焦 磷酸头头缩合并被NADPH还原为含有30个碳 的碳氢化合物——鲨烯。
的激活剂 参与胆固醇的逆向运输 (好胆固醇) 通过受体介导的内吞被肝细胞吸收
生物竞赛-生物化学原理(第二版)(代谢生物化学)-南京大学杨荣武
胆固醇代谢的调节
胆固醇合成的限速酶是HMG-CoA还原酶 调节的方式包括

高职、专科专用医学生物化学课件--DNA复制

高职、专科专用医学生物化学课件--DNA复制

子 (replicon)。 • 复制子是独立完成复制的功能单位。
真核生物多个复制起始点、复制子与复制叉
真核生物的多复制子复制电镜图
三、复制的半不连续性
3
领头链 (leading strand)
5
3
解链方向
随从链 (lagging strand)
5
• 顺着解链方向生成的子链,复制是连续 进行的这股链称为领头链。
基础,但不是绝对的。
二、双向复制 复制时,DNA从起始点(origin)向两个方 向解链,形成两个延伸相反的复制叉,称为 双向复制。
复制时双链打开,分开成两股,各自作
为模板,子链沿模板延长所形成的Y字形的
结构称为复制叉(replication fork) 。
5' 3' 3' 5' 5' 3' 5'
生物化学
Biochemistry
第 九 章
核酸的生物合成
基 因 (gene):
DNA分子中编码蛋白质或RNA的功能 片段,是以碱基排列顺序的方式储存的遗 传信息。 基 因 组(genome): 某一物种拥有的全部遗传物质,从分 子意义上说,是指全部DNA序列。
* 中心法则(the central dogma)
碱基选择与配对
一、原核生物的DNA生物合成
(一)复制的起始
需要解决两个问题: 1. DNA解开成单链,提供模板。
2. 合成引物,提供3-OH末端,形成引发体。
原核生物复制起始的相关蛋白质
蛋白质(基因) 通用名 功能 辨认起始点
DnaA (dnaA) DnaB (dnaB) DnaC (dnaC)
AMP 5’ 3’

生物竞赛-生物化学-43真核生物的基因表达调控-杨荣武《生物化学原理(第二版)(三)》

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生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
DNA甲基化与印记
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
多个启动子的选择性使用
某些真核生物的基因不止一个启动子,例如,抗肌营
养不良蛋白有8个启动子,通过使用不同的启动子可转 录出不同长度的mRNA,它们经过翻译可产生不同性 质或功能的蛋白质产物。 人谷胱甘肽还原酶的基因具有两个启动子,这两个启 动子分别指导定位于细胞质和线粒体的谷胱甘肽还原 酶的合成。指导线粒体谷胱甘肽还原酶的启动子在指 导细胞质谷胱甘肽还原酶启动子的上游。显然,上游 启动子转录出来的mRNA要比下游启动子转录出来的 mRNA要长。分析它们的核苷酸序列以后发现,长 mRNA的起始密码子位置前移,因而会多翻译一段指 导进入线粒体的信号肽序列。
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
DNA重排

B淋巴细胞在成熟过程Ig基因经历的重排 锥体虫主要的表面抗原基因发生的重排 酿酒酵母在交配类型转换过程中发生的基因 重排
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
抗体基因多样性产生的分子机制
1. 2.
3. 4. 5.
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
在染色质水平上的基因调控
组蛋白的共价修饰; 染色质重塑因子对染色质的作用; 组蛋白变体取代标准组蛋白。
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
组蛋白不同化学修饰对基因表达的影响以及其他功能
修饰形式
乙酰化 单甲基化
修饰位点
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武

高中生物必修二《DNA的复制》PPT课件

高中生物必修二《DNA的复制》PPT课件
2n-2个
⑤含亲代母链的DNA分子数与子代DNA分子数之比为:
2/ 2n
二、脱氧核苷酸链数
亲代DNA分子经 n 次复制后,则
①子代DNA分子中脱氧核苷酸链数:
2n+1条
②亲代脱氧核苷酸链数:
2条
③新合成的脱氧核苷酸链数:
2n+1-2条
三、消耗的脱氧核苷酸数
若一亲代DNA分子含有某种 脱氧核苷酸m个,则
→ 7、结果:1个DNA分子 两个完全相同的DNA分子
1
2
4
……
2n
8、意义: 使遗传信息从亲代传给子代, 保证了遗传信息的连续性。
总结提升
DNA分子复制的相关计算
动动手:
画出一个被15N标记的DNA分子在含14N的 培养基中培养3代的DNA复制过程(标 出每条链是15N还是14N)
亲代 第一代
亲代DNA分子
半 保 留 复 制
一、对DNA复制的推测
有人持不同观点,提出全保留复制等不同假说。
亲代DNA分子
全 保 留 复 制










思考:1.怎样验证这个假说呢? 2.关键思路?
区分亲代和子代的DNA,标记亲 代DNA链,然后观察它们在子代DNA 中如何分布。
二、DNA半保留复制的实验证据 背景知识:
15N
15N
14N
15N
14N
15N 21
第二代
14N
14N 14N
14N
22
第三代
23Leabharlann 两 无论DNA复制多少次,含有15N-DNA分子永远只有

一.DNA分子数

生物化学简述dna复制过程

生物化学简述dna复制过程

生物化学简述dna复制过程DNA复制是指在细胞分裂过程中,DNA分子通过一系列酶的协同作用,复制成两条完全相同的DNA分子的过程。

这个过程是生物体遗传信息传递的基础,也是细胞分裂的前提。

DNA复制的过程可以分为三个主要步骤:解旋、复制和连接。

DNA分子的双螺旋结构需要被解旋。

在细胞分裂的准备阶段,酶复合物会结合到DNA分子的起始位点,解开DNA双螺旋结构,形成一个称为“复制起始点”的开放区域。

该复制起始点是DNA复制的起点,也是DNA复制酶的结合位点。

然后,DNA复制酶开始复制DNA分子。

在复制起始点,一个名为DNA聚合酶的酶复合物结合到DNA分子上,开始合成新的DNA 链。

DNA聚合酶在复制过程中,沿着DNA模板链读取碱基序列,并将对应的互补碱基加入到新合成的DNA链上,形成一个完全相同的DNA分子。

这个过程称为链合成。

在DNA复制过程中,有两个新合成的DNA链是以不同的方式合成的。

一个新合成的链称为“领先链”,它可以沿着DNA模板链连续地合成。

另一个新合成的链称为“滞后链”,它必须以片段的形式合成。

DNA聚合酶在滞后链上合成片段时,需要不断地重新结合到DNA模板链上,形成一个个短的DNA片段。

这些片段称为“Okazaki片段”。

新合成的DNA链需要被连接在一起。

在DNA复制过程中,另一个酶复合物称为DNA连接酶,负责将领先链和滞后链上的DNA片段连接在一起,形成连续的DNA链。

这个过程称为连接。

整个DNA复制过程是一个高度协调和精确的过程。

在细胞分裂过程中,每次DNA复制都需要在正确的时间和位置进行,以确保每个细胞都能获得完整的遗传信息。

此外,DNA复制过程还需要保证复制的准确性,以避免遗传信息的错误传递。

总结起来,DNA复制是生物体遗传信息传递的基础,也是细胞分裂的前提。

它通过解旋、复制和连接三个主要步骤,将DNA分子复制成两条完全相同的DNA分子。

这个过程需要一系列酶的协同作用,以确保复制的准确性和时机的控制。

汇智2024生物联赛答案

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汇智2024生物联赛答案一.生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学(共31题,44分)1.下列不属于真核生物基因组DNA特点的是:A.大部分为非编码序列;B.含有大量重复序列,例如高度重复的卫星DNA;C.功能相关的基因串联在一起,转录产生一条mRNA链;D.基因组的完整复制依赖于逆转录。

2.下列实验方法中能直接鉴定蛋白质磷酸化位点的有:A.蛋白质免疫印迹法;B.酶联免疫吸附;C.酵母双杂交系统;D.质谱分析。

3.关于豆科植物与根瘤菌的共生关系,下列叙述正确的是(多选):A.根瘤菌为豆科植物提供含氮化合物;B.根瘤菌固定的氮元素不会释放到土壤中;C.豆科植物为根瘤菌提供生长所需氨基酸;D.豆科植物分泌特殊物质,诱导根瘤菌靠近并感染其根部。

4.三羧酸循环由8步反应组成,其中不可逆的反应是(多选):A.柠檬酸经顺乌头酸转变为异柠檬酸;B.异柠檬酸氧化脱羧转变为α-酮戊二酸;C.α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶A;D.琥珀酰辅酶A经底物水平磷酸化形成琥珀酸。

5.与胆固醇合成密切相关的HMG-COA还原酶(H酶)位于内质网膜。

研究者在培养细胞CHO中表达了跨膜结构域融合了GFP的H酶,即H-GFP。

经不同浓度的胆固醇和二氢羊毛甾醇(DHL)处理后,用免疫印迹法检测H酶的表达。

如图所示的实验结果不支持的结论有(多选):A.H酶在DHL缺乏的条件下比较稳定;B.DHL能够直接与H酶跨膜结构域结合;C.DHL对维持胆固醇稳态发挥调控作用;D.DHL导致H酶的翻译过程受阻。

6.溶菌酶是一个碱性蛋白质,其相对分子质量约为14kDa,用以下方法从蛋清中得到溶菌酶,纯度最高的方法是:A.硫酸铵沉淀,然后有机溶剂沉淀;B.硫酸铵沉淀,然后离子交换层析;C.等电点沉淀,然后离子交换层析;D.有机溶剂沉淀,然后凝胶过滤层析。

7.已知在正常人体内X蛋白有155个氨基酸,在某疾病中该蛋白长度变为165个氨基酸,下列密码子突变可造成该现象的有(多选):A.GAU→GAC;B.CGA→UGA;C.UAA→CAA;D.UGA→AGU。

生化竞赛讲义【高中生物竞赛 生物化学】

生化竞赛讲义【高中生物竞赛 生物化学】
1.构型
指一个分子由于其中各原子特有的固定的空间排列,而使该分子所具有的特定的 立体化学形式----构型
如:甘油醛
分子式----C3H6O3
结构式--构型----
O C-H CHOH CH2OH
CHO HO C H
CH2OH
L-型
一对对映体 (平面投影式)
CHO H C OH
CH2OH
D-型
CHO C
※ 蛋白质含量=氮的量×100/16
2、蛋白质的氨基酸组成 (1)氨基酸的结构天然蛋白质中存在的氨基酸都是L-a-氨基酸
COOH | NH2 —C— H | R L- a-氨基酸
一种为脯氨酸,它也有类似结构,但侧链与氮原子相接形 成亚氨基酸。
除甘氨酸外,蛋白质中的氨基酸都具有不对称碳原子 ,都有L—型与D一型之分,为区别两种构型,通过与 甘油醛的构型相比较,人为地规定一种为L型,另种为 D一型。当书写时—NH2写在左边为L型,-NH2在右为 D一型。已知天然蛋白质中的氨基酸都属L型。
4、蛋白质的理化性质 (1)胶体性质 :布朗运动、丁达尔现象、不能通过半透膜;蛋白质颗粒比较稳定 ,不易沉淀。
(2)两性电解质:蛋白质与多肽一样,能够发生两性离解。 (3)沉淀反应:破坏蛋白质的水膜及中和蛋白质的电荷出现沉淀现象。高浓度盐类 (称为盐析),有机溶剂(如酒精、丙酮),重金属盐,某些酸类。
注:由于静电作用,在等电点时,氨基酸的溶
•色氨酸最大吸收波长为279nm,
解度最小,容易沉淀--分离某些氨基酸(如 :谷)
•酪氨酸最大吸收波长278nm,
•苯丙氨酸最大吸收波长为259nm。 注:蛋白质的紫外吸收最大值在
280而核酸在260
生物化学P10-11

2024全国生物竞赛试题

2024全国生物竞赛试题

选择题下列关于DNA复制的说法中,哪一项是正确的?A. DNA复制只发生在细胞分裂的间期B. DNA复制是半保留复制,新合成的每个DNA分子都含有一条原始链和一条新链(正确答案)C. DNA复制需要RNA作为模板D. DNA复制过程中,碱基配对遵循A-U、G-C的规则下列哪一项不是细胞膜的功能?A. 控制物质进出细胞B. 进行细胞间的信息交流C. 提供细胞识别的信号D. 完成基因的表达过程(正确答案,基因表达主要在细胞核和细胞质中的核糖体进行)在植物光合作用的光反应阶段,下列哪个过程是正确的?A. 水在光下分解,产生氧气和[H],同时释放能量(正确答案)B. 二氧化碳被固定成三碳化合物C. ATP中的化学能转变为有机物中的化学能D. [H]与二氧化碳结合生成葡萄糖下列关于遗传密码的描述,哪一项是错误的?A. 遗传密码具有方向性,从mRNA的5'端到3'端B. 遗传密码具有连续性,每三个相邻的碱基组成一个密码子C. 遗传密码具有通用性,几乎所有生物都使用同一套遗传密码D. 遗传密码具有简并性,但每个氨基酸只对应一个密码子(正确答案)下列哪一项不是生物多样性的直接价值?A. 为人类提供食物和药物资源B. 为科学研究提供材料C. 具有旅游观赏价值D. 对生态系统的调节作用(正确答案)下列关于神经递质的叙述,哪一项是正确的?A. 神经递质只能由突触前膜释放,作用于突触后膜B. 神经递质都是小分子物质,可以通过血脑屏障C. 神经递质与受体结合后,会引起突触后膜电位的变化(正确答案)D. 神经递质一旦发挥作用,就会被立即灭活,不会重复使用下列关于生态系统稳定性的说法,哪一项是错误的?A. 生态系统的稳定性包括抵抗力稳定性和恢复力稳定性B. 抵抗力稳定性高的生态系统,其恢复力稳定性往往较低C. 生态系统的稳定性与生物多样性密切相关D. 增加生态系统中的生物种类,一定会提高其稳定性(正确答案)下列关于基因工程的叙述,哪一项是正确的?A. 基因工程可以直接向植物或动物体内导入有益基因B. 基因工程的操作对象通常是整个基因组C. 基因工程育种的优点是能定向改造生物的性状(正确答案)D. 基因工程完全摒弃了自然选择和人工选择的过程下列关于人体免疫系统的说法,哪一项是错误的?A. 人体免疫系统包括非特异性免疫和特异性免疫B. 淋巴结、脾脏和扁桃体等是免疫系统的重要组成部分C. 疫苗是通过刺激机体产生特异性免疫反应来预防疾病的D. 过敏原第二次进入机体时,不会引起免疫反应(正确答案)。

高中生物DNA复制PPT

高中生物DNA复制PPT

小颗粒
中颗粒 大颗粒
(二)实验过程:
大肠杆菌在含15N的培养基中生长若干代
转移到 N的 培养液中
14
15
15 N/ N 的DNA 重带
细胞分裂一次
15
14 N/ N 的DNA 中带
细胞分裂两次
14 15
14 N/ N 的DNA 轻带
14
N/ N 的DNA 中带
【题2】将大肠杆菌放在含 15 N的环境中若干代后,转移到含 14 N的环境中 继续培养,当DNA复制到第n次时,进行密度梯度离心,其中重密度DNA
【题5】如果把细胞中的一个DNA分子用32P进行标记,此细胞经过 4次有丝分裂,则含有的标记链数和含有标记链的DNA分子数分别 占总数的( C )
A.1/30,1/32
C.1/16,1/8
B.1/16,1/15
D.1/8,1/4
脱氧核苷酸为原料,按照碱基互补配对原则
合成子链。
(3)螺旋化:每条子链与其对应的母链 盘绕成双螺旋结构。
5.特点:边解旋边复制;半保留复制 亲代DNA分子的两条母链。 模板:____________________________
6.条件:
细胞中游离的4种脱氧核苷酸。 原料:_____________________________ ATP 能量:________ DNA解旋酶,DNA聚合酶、DNA连接酶等。 酶:___________________________________
进行。
【题1】如图为真核生物染色体上DNA分子复制过程示意图,有关叙述
错误的是
B
A.图中DNA分子复制是从多个起点开始的
B.图中DNA分子复制是边解旋边双向复制的 C.真核生物DNA分子复制的过程需要解旋酶

生物化学中复制的名词解释

生物化学中复制的名词解释

生物化学中复制的名词解释
复制(DNA复制)在生物化学中是一个关键的研究领域。

在生物学中,DNA是遗传物质,它携带了人类的基因组信息,控制了人类的生长、发育和疾病。

在复制过程中,DNA会从一个细胞中被复制到另一个细胞中,以确保遗传信息的传递。

在生物化学中,复制过程涉及到许多不同的步骤。

首先,DNA需要在适当的条件下保持稳定,包括高温、高压和特定的化学物质。

这些条件确保了DNA不会被分解或损坏。

然后,DNA分子需要被分离出来,并使用特定的试剂盒进行复制。

这些试剂盒可以用于将DNA分子从一条链上复制到另一条链上。

在复制过程中,一个重要的步骤是DNA聚合酶的参与。

DNA聚合酶是一种酶,它连接DNA分子的两条链,并将它们互补配对。

这种酶可以在DNA复制过程中发挥关键作用,确保DNA复制的正确性和完整性。

此外,在复制过程中,还需要使用一些其他酶和蛋白质,如DNA连接酶和DNA修复酶,以确保复制过程顺利进行。

复制在生物化学中是一个复杂的研究领域,涉及到许多不同的分子和酶。

这些分子和酶的相互作用和控制对于确保DNA的正确性和完整性至关重要,对于人类的生物学和医学研究以及治疗方法的开发具有重要意义。

生物竞赛-生物化学-44重组DNA技术-杨荣武《生物化学原理(第二版)(三)》

生物竞赛-生物化学-44重组DNA技术-杨荣武《生物化学原理(第二版)(三)》

生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
将重组DNA引入到宿主细胞的途径
1. 转化 2. 转染 3. 电穿孔 4. 脂质体介导 5. 弹道基因转移
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
重组体的选择和筛选
直接筛选
① ② ③ ④ ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ 根据抗生素敏感性和抗性变化进行筛选 根据营养需要进行筛选 根据噬菌斑类型进行筛选 蓝白斑选择 核酸杂交法 PCR法 免疫化学 受体/配体的结合性质 Southwestern/Northwestern DNA限制性内切酶图谱分析 DNA序列分析
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
重组DNA技术的基本步骤
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
基因克隆的载体


载体的作用是容纳被克隆的目标基因,以便将它们 带入到特定的宿主细胞中进行扩增或表达。 一种理想的载体至少包括:
① 大多数载体含有原核细胞DNA复制起始区,以便于在原核 系统中的扩增; ② 某些载体还含有真核细胞DNA复制起始区,以方便在真核 细胞内的自主复制; ③ 含有集中了多种常用的限制性内切酶切点的多克隆位点记,有利于克隆的筛 选和鉴别; ⑤ 某些载体含有可诱导的或组织特异性的启动子或增强子序 列,有利于控制被插入的基因在转染细胞或转基因动物内 的表达; ⑥ 现代的载体一般含有多功能的结构元件,同时兼顾到克隆、 DNA测序、体外突变、转录和自主复制。
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
克隆基因在宿主细胞中的表达
要使克隆基因在宿主细胞中表达,首先需要将目的基
因亚克隆到带有基因表达所必需的各种元件的载体之 中,这些载体通称为表达载体。目的基因可以放在不 同的宿主细胞中表达。针对不同的表达系统,需要构 建不同的表达载体。 表达载体可分为融合载体和非融合载体两类,前者在 插入位点上“预装”了另外一个蛋白质或多肽的基因, 因此,插入的外源基因将会与它发生融合,表达出来 的是一种融合蛋白。使用融合载体的主要好处是方便 了目的蛋白的纯化。 理想的表达系统应该满足以下条件:(1)表达载体具 有合适的MCS,以便使外源基因能够插入到正确的表 达位置,或者至少是含有3个以上阅读框架的系列; (2)能够形成正确的翻译后修饰和三维结构,以形成 有活性的或有功能的分子;(3)为可诱导的表达系统, 允许细胞生长和诱导表达,防止毒性蛋白质的积累; (4)易于分离和纯化;(5)最好能分泌到胞外。

生物竞赛-生物化学-38基因组RNA的复制-杨荣武《生物化学原理(第二版)(三)》(45张PPT)

生物竞赛-生物化学-38基因组RNA的复制-杨荣武《生物化学原理(第二版)(三)》(45张PPT)

生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
艾滋病毒与宿主细胞的附着
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
艾滋病毒外被与宿主细胞膜的融合
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
HIV-1病毒的附着与融合
融合肽 gp120
C N
CD4
C N
gp41 病毒外膜
趋化因子受体
逆转录病毒的结构
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
逆转录病毒的基因组RNA的结构
逆转录病毒的基因组RNA等同于一个全长的病毒 mRNA,其非编码序列包括5'端的帽子结构、5'端的 末端直接重复序列(R)、5'端特有的序列(U5)、 引物结合位点(PBS)、剪接信号、引发第二条链 合成的多聚嘌呤区域(PPT)、3' 端的多聚腺苷酸 尾巴、3' 端特有的序列(U3)和3'端的末端直接重 复序列。编码序列通常含有3个结构基因,它们是 编码MA、CA和NC的gag基因,编码逆转录酶、整 合酶和蛋白酶的pol基因以及编码SU和TM的env基 因。如果是肿瘤病毒,还含有编码癌蛋白的癌基因 onc。
逆转录病毒的RNA复制 逆转座子 端聚酶催化的逆转录反应 某些DNA病毒生活史中的逆转录现象
1. 2. 3. 4.
生物竞赛—生物化学原理(分子生物学)—南京大学杨荣武
依赖于RNA的RNA合成
1. RdRP主要由病毒基因组编码,有的还需要宿 主细胞编码的辅助蛋白 2. 合成的方向总是5′→3′ 3. 绝大多数在模板的一端从头启动合成,少数 需要合成引物 4. 属于易错、高突变合成 5. 对放线菌素D不敏感,但对核糖核酸酶敏感 6. 复制的场所绝大多数在宿主细胞的细胞质, 少数在细胞核

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生物化学各章节习题集锦--第一章蛋白质化学测试题--一、单项选择题1.测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g,此样品约含蛋白质多少?A.2.00g B.2.50g C.6.40g D.3.00g E.6.25g2.下列含有两个羧基的氨基酸是:A.精氨酸B.赖氨酸C.甘氨酸D.色氨酸E.谷氨酸3.维持蛋白质二级结构的主要化学键是:A.盐键B.疏水键C.肽键D.氢键E.二硫键4.关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是:A.天然蛋白质分子均有的这种结构B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性C.三级结构的稳定性主要是次级键维系D.亲水基团聚集在三级结构的表面bioooE.决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基5.具有四级结构的蛋白质特征是:A.分子中必定含有辅基B.在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上,肽链进一步折叠,盘曲形成C.每条多肽链都具有独立的生物学活性D.依赖肽键维系四级结构的稳定性E.由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成6.蛋白质所形成的胶体颗粒,在下列哪种条件下不稳定:A.溶液pH 值大于pIB.溶液pH 值小于pIC.溶液pH 值等于pID.溶液pH 值等于7.4E.在水溶液中7.蛋白质变性是由于:bioooA.氨基酸排列顺序的改变B.氨基酸组成的改变C.肽键的断裂D.蛋白质空间构象的破坏E.蛋白质的水解8.变性蛋白质的主要特点是:A.粘度下降B.溶解度增加C.不易被蛋白酶水解D.生物学活性丧失E.容易被盐析出现沉淀9.若用重金属沉淀pI 为8 的蛋白质时,该溶液的pH 值应为:A.8 B.>8 C.<8 D.≤8 E.≥810.蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸?A.半胱氨酸B.蛋氨酸C.胱氨酸D.丝氨酸E.瓜氨酸二、多项选择题(在备选答案中有二个或二个以上是正确的,错选或未选全的均不给分)1.含硫氨基酸包括:A.蛋氨酸B.苏氨酸C.组氨酸D.半胖氨酸2.下列哪些是碱性氨基酸:A.组氨酸B.蛋氨酸C.精氨酸D.赖氨酸3.芳香族氨基酸是:A.苯丙氨酸B.酪氨酸C.色氨酸D.脯氨酸4.关于α-螺旋正确的是:A.螺旋中每3.6 个氨基酸残基为一周B.为右手螺旋结构C.两螺旋之间借二硫键维持其稳定D.氨基酸侧链R 基团分布在螺旋外侧5.蛋白质的二级结构包括:A.α-螺旋B.β-片层C.β-转角D.无规卷曲6.下列关于β-片层结构的论述哪些是正确的:A.是一种伸展的肽链结构B.肽键平面折叠成锯齿状C.也可由两条以上多肽链顺向或逆向平行排列而成D.两链间形成离子键以使结构稳定7.维持蛋白质三级结构的主要键是:A.肽键B.疏水键C.离子键D.范德华引力8.下列哪种蛋白质在pH5 的溶液中带正电荷?A.pI 为4.5 的蛋白质B.pI 为7.4 的蛋白质C.pI 为7 的蛋白质D.pI 为6.5 的蛋白质9.使蛋白质沉淀但不变性的方法有:A.中性盐沉淀蛋白B.鞣酸沉淀蛋白C.低温乙醇沉淀蛋白D.重金属盐沉淀蛋白10.变性蛋白质的特性有:A.溶解度显著下降B.生物学活性丧失C.易被蛋白酶水解D.凝固或沉淀一、单项选择题1.B 2.E 3.D 4.B 5.E 6.C 7.D 8.D 9.B 10.E二、多项选择题1.AD 2.ACD 3.ABD 4.ABD 5.ABCD6.ABC 7.BCD 8.BCD 9.AC 10.ABC一、单项选择题1.自然界游离核苷酸中,磷酸最常见是位于:A.戊糖的C-5′上B.戊糖的C-2′上C.戊糖的C-3′上D.戊糖的C-2′和C-5′上E.戊糖的C-2′和C-3′上2.可用于测量生物样品中核酸含量的元素是:A.碳B.氢C.氧D.磷E.氮3.下列哪种碱基只存在于RNA 而不存在于DNA:A.尿嘧啶B.腺嘌呤C.胞嘧啶D.鸟嘌呤E.胸腺嘧啶4.核酸中核苷酸之间的连接方式是:A.2′,3′磷酸二酯键B.糖苷键C.2′,5′磷酸二酯键D.肽键E.3′,5′磷酸二酯键5.核酸对紫外线的最大吸收峰在哪一波长附近?A.280nmB.260nmC.200nmD.340nmE.220nm6.有关RNA 的描写哪项是错误的:A.mRNA 分子中含有遗传密码B.tRNA 是分子量最小的一种RNAC.胞浆中只有mRNAD.RNA 可分为mRNA、tRNA、rRNAE.组成核糖体的主要是rRNA7.大部分真核细胞mRNA 的3′-末端都具有:A.多聚A B.多聚U C.多聚T D.多聚C E.多聚G8.DNA 变性是指:A.分子中磷酸二酯键断裂B.多核苷酸链解聚C.DNA 分子由超螺旋→双链双螺旋D.互补碱基之间氢键断裂E.DNA 分子中碱基丢失9.DNA Tm 值较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致?A.G+A B.C+G C.A+T D.C+T E.A+C10.某DNA 分子中腺嘌呤的含量为15%,则胞嘧啶的含量应为:A.15%B.30%C.40%D.35%E.7%二、多项选择题1.DNA 分子中的碱基组成是:A.A+C=G+T B.C=G C.A=T D.C+G=A+T2.含有腺苷酸的辅酶有:A.NAD+ B.NADP+ C.FAD D.FMN3.DNA 水解后可得到下列哪些最终产物:A.磷酸B.核糖C.腺嘌呤、鸟嘌呤D.胞嘧啶、尿嘧啶4.关于DNA 的碱基组成,正确的说法是:A.腺嘌呤与鸟嘌呤分子数相等,胞嘧啶与胸嘧啶分子数相等B.不同种属DNA 碱基组成比例不同C.同一生物的不同器官DNA 碱基组成不同D.年龄增长但DNA 碱基组成不变5.DNA 二级结构特点有:A.两条多核苷酸链反向平行围绕同一中心轴构成双螺旋B.以A-T,G-C 方式形成碱基配对C.双链均为右手螺旋D.链状骨架由脱氧核糖和磷酸组成6.tRNA 分子二级结构的特征是:A.3′端有多聚A B.5′端有C-C-AC.有密码环D.有氨基酸臂7.DNA变性时发生的变化是:A.链间氢链断裂,双螺旋结构破坏B.高色效应C.粘度增加D.共价键断裂8.mRNA 的特点有:A.分子大小不均一B.有3′-多聚腺苷酸尾C.有编码区D.有5′C-C-A 结构9.影响Tm 值的因素有:A.一定条件下核酸分子越长,Tm 值越大B.DNA 中G,C 对含量高,则Tm 值高C.溶液离子强度高,则Tm 值高D.DNA 中A,T 含量高,则Tm 值高10.真核生物DNA 的高级结构包括有:A.核小体B.环状DNAC.染色质纤维D.α-螺旋参考答案一、单项选择题1.A 2.D 3.A 4.E 5.B 6.C 7.A 8.D 9.B 10.D二、多项选择题1.ABC 2.ABC 3.AC 4.BD 5.ABCD6.DE 7.AB 8.ABC 9.ABC 10.AC--第三章酶测试题--一、单项选择题(在备选答案中只有一个是正确的)1.关于酶的叙述哪项是正确的?A.所有的酶都含有辅基或辅酶B.只能在体内起催化作用C.大多数酶的化学本质是蛋白质D.能改变化学反应的平衡点加速反应的进行E.都具有立体异构专一性(特异性)2.酶原所以没有活性是因为:A.酶蛋白肽链合成不完全B.活性中心未形成或未暴露C.酶原是普通的蛋白质D.缺乏辅酶或辅基E.是已经变性的蛋白质3.磺胺类药物的类似物是:A.四氢叶酸B.二氢叶酸C.对氨基苯甲酸D.叶酸E.嘧啶4.关于酶活性中心的叙述,哪项不正确?A.酶与底物接触只限于酶分子上与酶活性密切有关的较小区域B.必需基团可位于活性中心之内,也可位于活性中心之外C.一般来说,总是多肽链的一级结构上相邻的几个氨基酸的残基相对集中,形成酶的活性中心D.酶原激活实际上就是完整的活性中心形成的过程E.当底物分子与酶分子相接触时,可引起酶活性中心的构象改变5.辅酶NADP+分子中含有哪种B 族维生素?A.磷酸吡哆醛B.核黄素C.叶酸D.尼克酰胺E.硫胺素6.下列关于酶蛋白和辅助因子的叙述,哪一点不正确?A.酶蛋白或辅助因子单独存在时均无催化作用B.一种酶蛋白只与一种辅助因子结合成一种全酶C.一种辅助因子只能与一种酶蛋白结合成一种全酶D.酶蛋白决定结合酶蛋白反应的专一性E.辅助因子直接参加反应7.如果有一酶促反应其〔8〕=1/2Km,则v 值应等于多少Vmax?A.0.25B.0.33C.0.50D.0.67E.0.758.有机磷杀虫剂对胆碱酯酶的抑制作用属于:A.可逆性抑制作用B.竞争性抑制作用C.非竞争性抑制作用D.反竞争性抑制作用E.不可逆性抑制作用9.关于pH 对酶活性的影响,以下哪项不对?A.影响必需基团解离状态B.也能影响底物的解离状态C.酶在一定的pH 范围内发挥最高活性D.破坏酶蛋白的一级结构E.pH 改变能影响酶的Km 值10.丙二酸对于琥珀酸脱氢酶的影响属于:A.反馈抑制B.底物抑制C.竞争性抑制D.非竞争性抑制E.变构调节11.Km 值的概念是:A.与酶对底物的亲和力无关B.是达到Vm 所必须的底物浓度C.同一种酶的各种同工酶的Km 值相同D.是达到1/2Vm 的底物浓度E.与底物的性质无关二、多项选择题1.关于酶的竞争性抑制作用的说法哪些是正确的?A.抑制剂结构一般与底物结构相似B.Vm 不变C.增加底物浓度可减弱抑制剂的影响D.使Km 值增大2.关于酶的非竞争性抑制作用的说法哪些是正确的?A.增加底物浓度能减少抑制剂的影响B.Vm 降低C.抑制剂结构与底物无相似之处D.Km 值不变3.酶与一般催化剂的不同点,在于酶具有:A.酶可改变反应平衡常数B.极高催化效率C.对反应环境的高度不稳定D.高度专一性4.FAD 分子组成是:A.含有维生素B2B.是一种二核苷酸C.含有GMP 组分D.含有ADP 组分5.关于同工酶,哪些说明是正确的?A.是由不同的亚基组成的多聚复合物B.对同一底物具有不同的Km 值C.在电泳分离时它们的迁移率相同D.免疫学性质相同6.常见的酶活性中心的必需基团有:A. 半胱氨酸和胱氨酸的巯基B.组氨酸的咪唑基C.谷氨酸,天冬氨酸的侧链羧基D.丝氨酸的羟基7.酶的专一性可分为:A.作用物基团专一性B.相对专一性C.立体异构专一性D.绝对专一性8.有关变构酶的叙述是:A.大多数变构酶是多聚复合物B.是体内快速调节酶含量的重要方式C.可有调节亚基和催化亚基D.酶从一种构象转变为另一种构象时,酶活性发生改变9.影响酶促反应的因素有:A.温度,pH 值B.作用物浓度C.激动剂D.酶本身的浓度10.酶的活性中心是指:A.是由必需基团组成的具有一定空间构象的区域B.是指结合底物,并将其转变成产物的区域C.是变构剂直接作用的区域D.是重金属盐沉淀酶的结合区域参考答案一、单项选择题1.C 2.B 3.C 4.C 5.D 6.C 7.B 8.E 9.D 10.C二、多项选择题1.ABCD 2.BCD 3.BCD 4.ABD 5.AB6.BCD 7.BCD 8.ACD 9.ABCD 10.AB--第四章糖代谢测试题--一、单项选择题(在备选答案中只有一个是正确的)1.正常人清晨空腹血糖浓度为(以mg/100ml)计:A.60~100B.60~120C.70~110D.80~120E.100~1202.糖代谢中间产物中含有高能磷酸键的是:A.6-磷酸葡萄糖B.6-磷酸果糖C.1,6-二磷酸果糖D.3-磷酸甘油醛E.1.3-二磷酸甘油酸3.丙酮酸氧化脱羧生成乙酰辅酶A 与许多维生素有关,但除外:A.B1B.B2C.B6D.PPE.泛酸4.在糖原合成中作为葡萄糖载体的是:A.ADPB.GDPC.CDPD.TDPE.UDP5.下列哪个激素可使血糖浓度下降?A.肾上腺素B.胰高血糖素C.生长素D.糖皮质激素E.胰岛素6.下列哪一个酶与丙酮酸生成糖无关?A.果糖二磷酸酶B.丙酮酸激酶C.丙酮酸羧化酶D.醛缩酶E.磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶7.肌糖原分解不能直接补充血糖的原因是:A.肌肉组织是贮存葡萄糖的器官B.肌肉组织缺乏葡萄糖激酶C.肌肉组织缺乏葡萄糖-6-磷酸酶D.肌肉组织缺乏磷酸酶E.肌糖原分解的产物是乳酸8.葡萄糖与甘油之间的代谢中间产物是:A.丙酮酸B.3-磷酸甘油酸C.磷酸二羟丙酮D.磷酸烯醇式丙酮酸E.乳酸9.1 分子葡萄糖酵解时净生成多少个ATP?A.1B.2C.3D.4E.510.磷酸果糖激酶的最强变构激活剂是:A.AMPB.ADPC.ATPD.2,6-二磷酸果糖E.1,6-二磷酸果糖11.三羧酸循环和有关的呼吸链反应中能产生ATP 最多的步骤是:A.柠檬酸→异柠檬酸B.异柠檬酸→α-酮戊二酸C.α-酮戊二酸→琥珀酸D.琥珀酸→苹果酸E.苹果酸→草酰乙酸12.丙酮酸羧化酶的活性可被下列哪种物质激活?A.脂肪酰辅酶AB.磷酸二羟丙酮C.异柠檬酸D.乙酰辅酶AE.柠檬酸13.下列化合物异生成葡萄糖时净消耗ATP 最多的是:A.2 分子甘油B.2 分子乳酸C.2 分子草酰乙酸D.2 分子琥珀酸E.2 分子α-酮戊二酸14.位于糖酵解、糖异生、磷酸戊糖途径、糖原合成和糖原分解各条代谢途径交汇点上的化合物是:A.1- 磷酸葡萄糖B.6-磷酸葡萄糖C.1,6-二磷酸果糖D.3-磷酸甘油酸E.6-磷酸果糖15.红细胞中还原型谷胱甘肽不足,易引起溶血,原因是缺乏:A.葡萄糖-6-磷酸酶B.果糖二磷酸酶C.磷酸果糖激酶D.6-磷酸葡萄糖脱氢酶E.葡萄糖激酶二、多项选择题1.从葡萄糖合成糖原需要哪些核苷酸参与:A.ATPB.GTPC.UTPD.CTP2.磷酸戊糖途径的重要生理功能是生成:A.6-磷酸葡萄糖B.NADH+H+C.NADPH+H+D.5-磷酸核糖3.1 分子丙酮进入三羧酸循环及呼吸链氧化时:A.生成3 分子CO2 B.生成15 个ATPC.有5 次脱氢,均通过NAOH 进入呼吸链氧化生成H2O D.所有反应均在线粒体内进行4.三羧酸循环中不可逆的反应有:A.乙酰辅酶A+草酰乙酸→柠檬酸B.异柠檬酸→α-酮戊二酸C.α-酮戊二酸→琥珀酰辅酶A D.琥珀酰辅酶A→琥珀酸5.糖异生途径的关键酶是:A.丙酮酸羧化酶B.磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶C.磷酸甘油激酶D.磷酸二磷酸酶6.只在胞液中进行的糖代谢途径有:A.糖酵解B.糖异生C.磷酸戊糖途径D.三羧酸循环7.糖异生的原料有:A.乳酸B.甘油C.部分氨基酸D.丙酮酸8.丙酮酸脱氢酶系的辅助因子有:A.FAD B.TPP C.NAD+ D.CoA9.能使血糖浓度升高的激素有:A.生长素B.肾上腺素C.胰岛素D.甲状旁腺素10.葡萄糖有氧氧化中,通过作用物水平磷酸化直接生成的高能化合物有:A.ATP B.GTP C.UTP D.CTP11.指出下列胰岛素对糖代谢影响的正确论述:A.促进糖的异生B.促进糖变为脂肪C.促进细胞膜载体转运葡萄糖入细胞D.促进糖原合成12.糖无氧酵解和有氧氧化途径都需要:A.乳酸脱氢酶B.3-磷酸甘油醛脱氢酶C.磷酸果糖激酶D.丙酮酸脱氢酶系13.葡萄糖进入肌肉细胞后可以进行的代谢是:A.糖异生B.糖原合成C.有氧氧化D.糖酵解14.肝脏对血糖的调节是通过:A.糖异生B.糖有氧氧化C.糖原分解D.糖原合成15.琥珀酰辅酶A 在代谢中的作用有:A.是糖异生的原料B.是三羧酸循环中作用物水平上磷酸化的供能物质C.氧化供能D.参与酮体氧化参考答案一、单项选择题1.C 2.E 3.C 4.E 5.E 6.B 7.C 8.C9.B 10.D 11.C 12.D 13.C 14.B 15.D二、多选题1.AC 2.CD 3.ABD 4.ABC 5.ABD 6.AC 7.ABCD8.ABCD9.AB 10.AB 11.BCD 12.BC 13.BCD 14.ACD 15.ABCD--第五章脂类代谢测试题--一、单项选择题1.脂肪酸在血中与下列哪种物质结合运输?A.载脂蛋白B.清蛋白C.球蛋白D.脂蛋白E.磷脂2.关于载脂蛋白(Apo)的功能,在下列叙述中不正确的是:A.与脂类结合,在血浆中转运脂类B.Apo AⅠ能激活LCATC.Apo B 能识别细胞膜上的LDL 受体D.Apo CⅠ能激活脂蛋白脂肪酶E.Apo CⅡ能激活LPL3.正常血浆脂蛋白按密度低→高顺序的排列为:A.CM→VLDL→IDL→LDL B.CM→VLDL→LDL→HDLC.VLDL→CM→LDL→HDL D.VLDL→LDL→IDL→HDLE.VLDL→LDL→HDL→CM 4.电泳法分离血浆脂蛋白时,从正极→负极依次顺序的排列为:A.CM→VLDL→LDL→HDLB.VLDL→LDL→HDL→CMC.LDL→HDL→VLDL→CMD.HDL→VLDL→LDL→CME.HDL→LDL→VLDL→CM5.胆固醇含量最高的脂蛋白是:A.乳糜微粒B.极低密度脂蛋白C.中间密度脂蛋白D.低密度脂蛋白E.高密度脂蛋白6.导致脂肪肝的主要原因是:A.食入脂肪过多B.食入过量糖类食品C.肝内脂肪合成过多D.肝内脂肪分解障碍E.肝内脂肪运出障碍7.脂肪动员的关键酶是:A.组织细胞中的甘油三酯酶B.组织细胞中的甘油二酯脂肪酶C.组织细胞中的甘油一酯脂肪酶D.组织细胞中的激素敏感性脂肪酶E.脂蛋白脂肪酶8.脂肪酸彻底氧化的产物是:A.乙酰CoAB.脂酰CoA C.丙酰CoAD.乙酰CoA 及FAD?2H、NAD++H+E.H2O、CO2 及释出的能量9、关于酮体的叙述,哪项是正确的?A.酮体是肝内脂肪酸大量分解产生的异常中间产物,可造成酮症酸中毒B.各组织细胞均可利用乙酰CoA 合成酮体,但以肝内合成为主C.酮体只能在肝内生成,肝外氧化D.合成酮体的关键酶是HMG CoA 还原酶E.酮体氧化的关键是乙酰乙酸转硫酶10.酮体生成过多主要见于:A.摄入脂肪过多B.肝内脂肪代谢紊乱C.脂肪运转障碍D.肝功低下E.糖供给不足或利用障碍11.关于脂肪酸合成的叙述,不正确的是:A.在胞液中进行B.基本原料是乙酰CoA 和NADPH+H+C.关键酶是乙酰CoA 羧化酶D.脂肪酸合成酶为多酶复合体或多功能酶E.脂肪酸合成过程中碳链延长需乙酰CoA 提供乙酰基12.甘油氧化分解及其异生成糖的共同中间产物是:A.丙酮酸B.2-磷酸甘油酸C.3-磷酸甘油酸D.磷酸二羟丙酮E.磷酸烯醇式丙酮酸13.体内合成卵磷脂时不需要:A.ATP 与CTPB.NADPH+H+C.甘油二酯D.丝氨酸E.S-腺苷蛋氨酸14.合成胆固醇的限速酶是:A.HMG CoA 合成酶B.HMG 合成酶与裂解酶C.HMG 还原酶D.HMG CoA 还原酶E.HMG 合成酶与还原酶15.胆固醇在体内不能转化生成:A.胆汁酸B.肾上腺素皮质素C.胆色素D.性激素E.维生素D3二、多项选择题1.人体必需脂肪酸包括:A.软油酸B.油酸C.亚油酸D.亚麻酸2.使激素敏感性脂肪酶活性增强,促进脂肪动员的激素有:A.胰岛素B.胰高血糖素C.肾上腺素D.促肾上腺皮质激素3.低密度脂蛋白:A.在血浆中由前β-脂蛋白转变而来B.是在肝脏中合成的C.胆固醇含量最多D.富含apoB1004.临床上的高脂血症可见于哪些脂蛋白含量增高?A.CMB.VLDLC.IDLD.LDL5.脂肪酸β-氧化的产物有:A.NADH+H+B.NADPH+H+C.FAD?2HD.乙酰CoA6.乙酰CoA 在不同组织中均可生成:A.CO2、H2O 和能量B.脂肪酸C.酮体D.胆固醇7.能产生乙酰CoA 的物质有:A.葡萄糖B.脂肪C.酮体D.氨基酸8.酮体:A.水溶性比脂肪酸大B.可随尿排出C.是脂肪酸分解代谢的异常产物D.在血中含量过高可导致酸中毒9.合成酮体和胆固醇均需:A.乙酰CoAB.NADPH+H+C.HMG CoA 合成酶D.HMG CoA 裂解酶10.能将酮体氧化利用的组织或细胞是:A.心肌B.肝C.肾D.脑11.出现酮症的病因可有:A.糖尿病B.缺氧C.糖供给不足或利用障碍D.持续高烧不能进食12.合成脑磷脂、卵磷脂的共同原料是:A.α-磷酸甘油B.脂肪酸C.丝氨酸D.S-腺苷蛋氨酸13.卵磷脂在磷脂酶A2 作用下,生成:A.溶血卵磷脂B.α-磷酸甘油C.磷脂酸D.饱和脂肪酸14.血浆中胆固醇酯化需要:A.脂酰CoAB.乙酰CoAC.卵磷脂D.LCAT15.乙酰CoA 是合成下列哪些物质的唯一碳源A.卵磷脂B.胆固醇C.甘油三酯D.胆汁酸参考答案一、单项选择题1.B 2.D 3.B 4.D 5.D 6.E 7.D 8.E9.C 10.E 11.E 12.D 13.B 14.D 15.C二、多项选择题1.CDE 2.BCD 3.AC 4.BD 5.ACD 6.ABD 7.ABCD 8.ABD9.AC 10.ACD 11.ACD 12.ABC 13.A 14.CD 15.BD--第六章生物氧化测试--一、单项选择题1.体内CO2 来自:A.碳原子被氧原子氧化B.呼吸链的氧化还原过程C.有机酸的脱羧D.糖原的分解E.真脂分解2.线粒体氧化磷酸化解偶联是意味着:A.线粒体氧化作用停止B.线粒体膜ATP 酶被抑制C.线粒体三羧酸循环停止D.线粒体能利用氧,但不能生成ATPE.线粒体膜的钝化变性3.P/O 比值是指:A.每消耗一分子氧所需消耗无机磷的分子数B.每消耗一分子氧所需消耗无机磷的克数C.每消耗一分子氧所需消耗无机磷的克原子数D.每消耗一分子氧所需消耗无机磷的克分子数E.每消耗一分子氧所需消耗无机磷的克数4.各种细胞色素在呼吸链中传递电子的顺序是:A.a→a3→b→c1→c→1/2O2B.b→a→a3→c1→c→1/2O2C.c1→c→b→a→a3→1/2O2D.c→c1→aa3→b→1/2O2E.b→c1→c→aa3→1/2O25.细胞色素b,c1,c 和P450 均含辅基:A.Fe3+B.血红素CC.血红素AD.原卟啉E.铁卟啉6.下列哪种蛋白质不含血红素:A.过氧化氢酶B.过氧化物酶C.细胞色素bD.铁硫蛋白E.肌红蛋白7.劳动或运动时ATP 因消耗而大量减少,此时:A.ADP 相应增加,ATP/ADP 下降,呼吸随之加快B.ADP 相应减少,以维持ATP/ADP 恢复正常C.ADP 大量减少,ATP/ADP 增高,呼吸随之加快D.ADP 大量磷酸化以维持ATP/ADP 不变E.以上都不对8.人体活动主要的直接供能物质是:A.葡萄糖B.脂肪酸C.磷酸肌酸D.GTPE.ATP9.下列属呼吸链中递氢体的是:A.细胞色素B.尼克酰胺C.黄素蛋白D.铁硫蛋白E.细胞色素氧化酶10.氰化物中毒时,被抑制的是:A.Cyt bB.Cyt C1C.Cyt CD.Cyt aE.Cyt aa311.肝细胞胞液中的NADH 进入线粒体的机制是:A.肉碱穿梭B.柠檬酸-丙酮酸循环C.α-磷酸甘油穿梭D.苹果酸-天冬氨酸穿梭E.丙氨酸-葡萄糖循环12.ATP 的贮存形式是:A.磷酸烯醇式丙酮酸B.磷脂酰肌醇C.肌酸D.磷酸肌酸E.GTP二、多项选择题1.NAD+的性质包括:A.与酶蛋白结合牢固B.尼克酰胺部份可进行可逆的加氢和脱氢C.每次接受一个氢原子和一个电子D.为不需脱氢酶的辅酶2.铁硫蛋白的性质包括:A.由Fe-S 构成活性中心B.铁的氧化还原是可逆的C.每次传递一个电子D.与辅酶Q 形成复合物存在3.苹果酸天冬氨酸穿梭作用可以:A.生成 3 个ATPB.将线粒体外NADH 所带的氢转运入线粒体C.苹果酸和草酰乙酸可自由穿过线粒体内膜D.谷氨酸和天冬氨酸可自由穿过线粒体膜4.氧化磷酸化的偶联部位是:A.复合体Ⅱ→泛醌B.NADH→泛醌C.Cyt b→Cyt cD.复合体Ⅲ→1/2O25.抑制氧化磷酸进行的因素有:A.COB.氰化物C.异戊巴比妥D.二硝基酚6.下列关于解偶联剂的叙述正确的是A.可抑制氧化反应B.使氧化反应和磷酸反应脱节C.使呼吸加快,耗氧增加D.使ATP 减少7.不能携带胞液中的NADH 进入线粒体的物质是:A.肉碱B.草酰乙酸C.α-磷酸甘油D.天冬氨酸参考答案一、单选题1.C 2.D 3.C 4.E 5.E 6.D 7.A.8.E 9.C 10.E 11.D 12.D二、多选题1.BCD 2.ABC 3.ABD 4.C 5.ABCD 6.BCD 7.ABD--第七章氨基酸代谢测试题--一、单项选择题1.生物体内氨基酸脱氨基的主要方式为:A.氧化脱氨基B.还原脱氨基C.直接脱氨基D.转氨基E.联合脱氨基2.成人体内氨的最主要代谢去路为:A.合成非必需氨基酸B.合成必需氨基酸C.合成NH4+承尿排出D.合成尿素E.合成嘌呤、嘧啶、核苷酸等3.转氨酶的辅酶组分含有:A.泛酸B.吡哆醛(或吡哆胺)C.尼克酸D.核黄素E.硫胺素4.GPT(ALT)活性最高的组织是:A.心肌B.脑C.骨骼肌D.肝E.肾5.嘌呤核苷酸循环脱氨基作用主要在哪些组织中进行?A.肝B.肾C.脑D.肌肉E.肺6.嘌呤核苷酸循环中由IMP 生成AMP 时,氨基来自:A.天冬氨酸的α-氨基B.氨基甲酰磷酸C.谷氨酸的α-氨基D.谷氨酰胺的酰胺基E.赖氨酸上的氨基7.在尿素合成过程中,下列哪步反应需要ATP?A.鸟氨酸+氨基甲酰磷酸→瓜氨酸+磷酸B.瓜氨酸+天冬氨酸→精氨酸代琥珀酸C.精氨酸代琥珀酸→精氨酸+延胡素酸D.精氨酸→鸟氨酸+尿素E.草酰乙酸+谷氨酸→天冬氨酸+α-酮戊二酸8.鸟氨酸循环的限速酶是:A.氨基甲酰磷酸合成酶ⅠB.鸟氨酸氨基甲酰转移酶C.精氨酸代琥珀酸合成酶D.精氨酸代琥珀酸裂解酶E.精氨酸酶9.氨中毒的根本原因是:A.肠道吸收氨过量B.氨基酸在体内分解代谢增强C.肾功能衰竭排出障碍D.肝功能损伤,不能合成尿素E.合成谷氨酸酰胺减少10.体内转运一碳单位的载体是:A.叶酸B.维生素B12C.硫胺素D.生物素E.四氢叶酸11.下列哪一种化合物不能由酪氨酸合成?A.甲状腺素B.肾上腺素C.多巴胺D.苯丙氨酸E.黑色素12.下列哪一种氨基酸是生酮兼生糖氨基酸?A.丙氨酸B.苯丙氨酸C.丝氨酸D.羟脯氨酸E.亮氨酸13.鸟氨酸循环中,合成尿素的第二分子氨来源于:A.游离氨B.谷氨酰胺C.天冬酰胺D.天冬氨酸E.氨基甲酰磷酸14.下列中心哪一种物质是体内氨的储存及运输形式?A.谷氨酸B.酪氨酸C.谷氨酰胺D.谷胱甘肽E.天冬酰胺15.白化症是由于先天性缺乏:A.酪氨酸转氨酶B.苯丙氨酸羟化酶C.酪氨酸酶D.尿黑酸氧化酶E.对羟苯丙氨酸氧化酶二、多项选择题1.体内提供一碳单位的氨基酸有:A.甘氨酸B.亮氨酸C.色氨酸D.组氨酸2.生酮氨基酸有:A.酪氨酸B.鸟氨酸C.亮氨酸D.赖氨酸3.组织之间氨的主要运输形式有:A.NH4ClB.尿素C.丙氨酸D.谷氨酰胺4.一碳单位的主要形式有:A.-CH=NHB.-CHOC.-CH2-D.-CH35.直接参与鸟氨酸循环的氨基酸有:A.鸟氨酸,瓜氨酸,精氨酸B.天冬氨酸C.谷氨酸或谷氨酰胺D.N-乙酰谷氨酸6.血氨(NH3)来自:A.氨基酸氧化脱下的氨B.肠道细菌代谢产生的氨C.含氮化合物分解产生的氨D.转氨基作用生成的氨7.由S-腺苷蛋氨酸提供甲基而生成的物质是:A.肾上腺素B.胆碱C.胸腺嘧啶D.肌酸8.合成活性硫酸根(PAPS)需要:A.酪氨酸B.半胱氨酸C.GTPD.ATP9.苯丙氨酸和酪氨酸代谢缺陷时可能导致:A.白化病B.尿黑酸症C.镰刀弄贫血D.蚕豆黄10.当体内FH4 缺乏时,下列哪些物质合成受阻?A.脂肪酸B.糖原C.嘌呤核苷酸D.RNA 和DNA参考答案一、单选题1.E 2.D 3.B 4.D 5.D 6.A 7.B 8.C9.D 10.E 11.D 12.B 13.D 14.C 15.C二、多选题1.ACD 2.DE 3.CD 4.ABCD 5.AB6.ABC 7.ABD 8.BD 9.AB 10.CD--第八章核苷酸代谢测试题--一、单项选择题1.嘌呤核苷酸从头合成时首先生成的是:A.GMPB.AMPC.IMPD.ATPE.GTP2.人体内嘌呤核苷酸分解的终产物是:A.尿素B.肌酸C.肌酸酐D.尿酸E.β丙氨酸3.最直接联系核苷酸合成与糖代谢的物质是:A.葡萄糖B.6 磷酸葡萄糖C.1 磷酸葡萄糖D.1,6 二磷酸葡萄糖E.5 磷酸葡萄糖4.体内脱氧核苷酸是由下列哪种物质直接还原而成?A.核糖B.核糖核苷C.一磷酸核苷D.二磷酸核苷E.三磷酸核苷5.HGPRT(次黄嘌呤-鸟嘌磷酸核糖转移酶)参与下列哪种反应:A.嘌呤核苷酸从头合成B.嘧啶核苷酸从头合成C.嘌呤核苷酸补救合成D.嘧啶核苷酸补救合成E.嘌呤核苷酸分解代谢6.氟尿嘧啶(5Fu)治疗肿瘤的原理是:A.本身直接杀伤作用B.抑制胞嘧啶合成C.抑制尿嘧啶合成D.抑制胸苷酸合成E.抑制四氢叶酸合成7.提供其分子中全部N 和C 原子合成嘌呤环的氨基酸是:A.丝氨酸B.天冬氨酸C.甘氨酸D.丙氨酸E.谷氨酸8.嘌呤核苷酸从头合成时GMP 的C-2 氨基来自:A.谷氨酰胺B.天冬酰胺C.天冬氨酸D.甘氨酸E.丙氨酸9.dTMP 合成的直接前体是:A.dUMPB.TMPC.TDPD.dUDPE.dCMP10.在体内能分解为β-氨基异丁酸的核苷酸是:A.CMPB.AMPC.TMPD.UMPE.IMP11.使用谷氨酰胺的类似物作抗代谢物,不能阻断核酸代谢的哪些环节?A.IMP 的生成B.XMP→GMPC.UMP→CMPD.UMP→dTMPE.UTP→CTP二、多项选择题1.下列哪些反应需要一碳单位参加?A.IMP 的合成B.IMP→GMPC.UMP 的合成D.dTMP 的生成2.嘧啶分解的代谢产物有:A.CO2B.β-氨基酸C.NH3D.尿酸3.PRPP(磷酸核糖焦磷酸)参与的反应有:A.IMP 从头合成B.IMP 补救合成C.GMP 补救合成D.UMP 从头合成4.下列哪些情况可能与痛风症的产生有关?A.嘌呤核苷酸分解增强B.嘧啶核苷酸分解增强C.嘧啶核苷酸合成增强D.尿酸生成过多5.嘌呤环中的氮原子来自A.甘氨酸B.天冬氨酸C.谷氨酰胺D.谷氨酸6.下列哪些化合物对嘌呤核苷酸的生物合成能产生反馈抑制作用?A.IMPB.AMPC.GMPD.尿酸7.6-巯基嘌呤抑制嘌呤核苷酸合成,是由于:A.6-巯基嘌呤抑制IMP 生成AMPB.6-巯基嘌呤抑制IMP 生成GMPC.6-巯基嘌呤抑制补救途径D.6-巯基嘌呤抑制次黄嘌呤的合成8.别嘌呤醇的作用:。

《生物化学》第三十四章 DNA复制

《生物化学》第三十四章   DNA复制

DNA复制的一般特征
① 以原来的DNA两条链作为模板,四种dNTP为 前体,还需要Mg2+
② 作为模板的DNA需要解链 ③ 半保留复制 ④ 需要引物——主要是RNA,少数是蛋白质 ⑤ 复制的方向始终是5′→3′ ⑥ 具有固定的起点 ⑦ 多为双向复制,少数为单向复制 ⑧ 半不连续性 ⑨ 具有高度的忠实性和进行性
Cairns证明大肠杆菌DNA双向复制的实验
三、DNA的半不连续复制
(semi-discontinuous replication)
5’
Direction of unwinding
3’
3’ 5’ Primer 3’
Continuous replication
5’ 3’
Discontinuous replication
b. If the enzyme (DNA ligase) is absent, these short pieces of DNA ought to be detectable even after relatively long time of pulses.
Evidence for Semi-Discontinuous Replication (pulse-chase experiment)
a. If the replication of DNA is semidiscontinuous, one ought to be able to label and catch these short pieces before they are ligated together by pulses of labeling.
Some phages (e.g.,λ):
3’ 3’
3’
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