纯化与精制- 色谱技术讲解109页PPT
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《色谱分析基础》课件
薄层色谱法：利用薄层色谱技术， 分离和分析液体和固体混合物
色谱分析的原理
色谱分析是一种分离和鉴定混合物的方法 原理：利用不同物质在固定相和流动相中的分配系数不同，实现分离 色谱分析包括气相色谱和液相色谱两种类型 气相色谱适用于分析挥发性物质，液相色谱适用于分析非挥发性物质
色谱柱的选择和使用
色谱柱类型： 填充柱、毛细 管柱、微板柱
法
样品保存：选 择合适的保存 方法和保存条
件
样品预处理： 包括样品的粉 碎、研磨、过
筛等
样品提取：选 择合适的提取 方法和提取条
件
样品净化：去 除样品中的杂 质和干扰物质
样品浓缩：将 提取液浓缩至 适宜的浓度进
行色谱分析
进样技术
进样方式：手动进样、自动进样 进样量：根据样品浓度和检测需求确定 进样时间：根据仪器性能和样品性质确定 进样温度：根据样品性质和检测需求确定
检测：选择合适的检 测器，如紫外检测器、 荧光检测器等，检测 样品的响应信号
添加标题
数据处理：对检测信 号进行数据处理，如 峰面积、保留时间等， 得到样品的定性和定 量结果
实验结果和数据分析
实验结果：色谱图中的峰高、峰面积、保留时间等参数 数据分析：通过峰高、峰面积、保留时间等参数进行定性和定量分析 结果解释：根据分析结果，对样品进行定性和定量分析 数据处理：对实验数据进行处理，如平滑、基线校正等 结果报告：撰写实验报告，包括实验方法、结果、讨论和结论等
施
实验结束后， 及时清理实验 现场，确保实
验室整洁
仪器设备安全防范措施
确保仪器设备接地良好，避免静电 干扰
操作仪器设备时，应佩戴防护眼镜 和手套等防护用品
添加标题
添加标题
[课件]生物分离与纯化技术(生化工艺)第7章 色谱分离技术PPT
![[课件]生物分离与纯化技术(生化工艺)第7章 色谱分离技术PPT](https://img.taocdn.com/s3/m/8609cdf6b9f3f90f76c61b29.png)
固定相：在色谱分离中固定不动、对样品产生保留的一相。
流动相：与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的一相
2018/12/4
色谱分离技术的特点
特点：
（1） 纯化倍数高 （2） 操作规模小，放大困难 （3） 终产品纯化 （ 4 ） 操作成本高、适用于价格昂贵 的产品
2018/12/4
色谱分离的基本原理
2018/12/4
第3节
离子交换色谱
一、离子交换概述 离子交换过程的本质及选择性
离子交换是离子交换剂上的反离子电离至水溶液中而溶液中其 他与固定电荷带有相反电荷的离子通过静电吸引力而被吸附在 固定电荷，其本质上是一个可逆化学反应（平衡反应）。
－ － － － — R B A — R A B
第3节
离子交换色谱
三、离子交换色谱操作 离子交换剂预处理
阴离子交换剂：酸－碱－酸 或 碱－酸 阳离子交换剂：碱－酸－碱 或 酸－碱
对于疏水载体骨架构成的离子交换剂应先用乙醇浸泡，再用水 稀，然后再采用相应的酸碱处理
装柱、上样、洗脱基本与吸附色谱相同。
2018/12/4
第4节
凝胶色谱
一、凝胶色谱原理 凝胶色谱所用的层析剂是一类无吸附能 力的多孔凝胶颗粒，多孔颗粒孔隙内的溶液 为固定相，颗粒间隙中的溶液为流动相，由 于不同分子大小不同而在颗粒内外分布不同 ，因此洗脱速度不同而实现对分子大小不同 的混合物分离。
[ — R A][ B ] K p [ — R B][ A ]
不同离子交换反应平衡常数不同，因 而荷点溶质分配在离子交换剂与水溶 液中的比例不同
2018/12/4
第3节
离子交换色谱
一、离子交换概述 影响离子交换选择性的因素
流动相：与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的一相
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色谱分离技术的特点
特点：
（1） 纯化倍数高 （2） 操作规模小，放大困难 （3） 终产品纯化 （ 4 ） 操作成本高、适用于价格昂贵 的产品
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色谱分离的基本原理
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第3节
离子交换色谱
一、离子交换概述 离子交换过程的本质及选择性
离子交换是离子交换剂上的反离子电离至水溶液中而溶液中其 他与固定电荷带有相反电荷的离子通过静电吸引力而被吸附在 固定电荷，其本质上是一个可逆化学反应（平衡反应）。
－ － － － — R B A — R A B
第3节
离子交换色谱
三、离子交换色谱操作 离子交换剂预处理
阴离子交换剂：酸－碱－酸 或 碱－酸 阳离子交换剂：碱－酸－碱 或 酸－碱
对于疏水载体骨架构成的离子交换剂应先用乙醇浸泡，再用水 稀，然后再采用相应的酸碱处理
装柱、上样、洗脱基本与吸附色谱相同。
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第4节
凝胶色谱
一、凝胶色谱原理 凝胶色谱所用的层析剂是一类无吸附能 力的多孔凝胶颗粒，多孔颗粒孔隙内的溶液 为固定相，颗粒间隙中的溶液为流动相，由 于不同分子大小不同而在颗粒内外分布不同 ，因此洗脱速度不同而实现对分子大小不同 的混合物分离。
[ — R A][ B ] K p [ — R B][ A ]
不同离子交换反应平衡常数不同，因 而荷点溶质分配在离子交换剂与水溶 液中的比例不同
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第3节
离子交换色谱
一、离子交换概述 影响离子交换选择性的因素
色谱法概论PPT课件
能。
色谱法与其他技术的联用
色谱-质谱联用（GC-MS, LC-MS）
通过将色谱的分离能力与质谱的高灵敏度检测相结合，可实现对复杂样品中目标化合物 的定性和定量分析，广泛应用于药物代谢、环境监测等领域。
色谱-光谱联用（GC-IR, LC-UV/Vis）
色谱与光谱技术的联用可以提供更丰富的化合物结构和组成信息，有助于深入了解化合 物的性质和行为。
实验材料
确保色谱柱、试剂、溶 剂等材料的质量和纯度，
以满足实验要求。
实验设备
检查色谱仪、检测器、 注射器等设备的运行状 况，确保实验过程中设
备正常工作。
实验设计
根据实验目的和要求， 设计合理的色谱条件和
实验方案。
实验安全
注意实验过程中的安全 问题，如使用有毒有害
试剂时的防护措施。
实验操作步骤
色谱柱安装与条件设置
数据整理
整理实验过程中记录的数据，包括 色谱图、峰面积等。
结果分析
对实验结果进行深入分析，探究可 能的原因和影响因素。
03
02
结果判断
根据实验目的和要求，判断实验结 果是否符合预期。
结论总结
总结实验结果，得出结论，并提出 进一步改进和完善的建议。
04
04 色谱法在分析化学中的应 用
在食品分析中的应用
食品成分分析
色谱法用于分离和检测食品中的营养 成分，如脂肪、蛋白质、碳水化合物、 维生素和矿物质等，以确保食品质量 和安全。
食品添加剂分析
食品污染物分析
色谱法用于检测食品中的有害物质， 如农药残留、重金属、霉菌毒素等， 以防止食品污染和保障食品安全。
色谱法用于检测食品中添加的防腐剂、 色素、香料等成分，以控制食品添加 剂的使用量，保障消费者健康。
色谱分析法色谱法概述PPT(完整版)
气液色谱的固定相: 固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。
第五节 色谱定性、定量方法
由 担体和固定液所组成。
第四节 气相色谱操作条件选择
不不适适用用于于高高沸沸点点、、难难固挥挥发发定、、热热液不不稳稳对定定物物试质质的的样分分析析中。。 各组分的溶解能力的不同。
适用于沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。
分配系数 K的讨论
组分在固定相中的浓度 K 组分在流动相中的浓度
ª一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢； ª试样一定时，K主要取决于固定相性质； ª每个组份在各种固定相上的分配系数K不同； ª选择适宜的固定相可改善分离效果； ª试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础； ª某组分的K = 0时，即不被固定相保留，最先流出。
气相色谱：流动相为气体（称为载气）。
用K 表示，即： 一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢；
不适用于高沸点、难挥发、热不稳定物质的分析。 试样一定时，K主要取决于固定相性质； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。 不适用于高沸点、难挥发、热不稳定物质的分析。
组分在固定相中的浓度 九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器。
固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱；
K 按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱 组分在流动相中的浓度 复杂混合物，有机同系物、异构体。
按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱；
色谱法
当流动相中携带的混合物流经固定相时， 其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组 分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生 的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移 动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡 ，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而 按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检 测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检 测。 ¨ 两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础
纯化与精制- 色谱技术讲解
2019/6/9
16
（8）色谱柱的理论塔板：流动相与固定相平均浓度 达传质平衡时的一段柱高（塔板高度）
反应不同时刻溶质在色谱柱中的分布以及分离度与 柱高之间的关系
理论塔板数的计算方法：
N 5.54( tR )2 W1/ 2
N---理论塔板数
N 16( tR )2 Wb
tR---保留时间
W1/2---半峰宽
Wb---峰底宽度
理论塔板高度：H
L---柱长
L
H
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N
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6.色谱分离操作
（1）装柱 （2）上样 （3）淋洗 （4）洗脱方法 按操作方式 a 恒定洗脱 b 分步洗脱 c 梯度洗脱 按洗脱机理 专一性洗脱（specific elution） 非专一性洗脱（nonspecific elution）
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18
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19
（1）装柱
装柱的质量直接影响到分离的效 果，因而装柱是分离成功的最关键的 一步。
目前，装柱的方式主要采用自然 沉降法、加压法等。
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自然沉降法装柱的要点
1.先在柱内注入约1/3柱高的起始缓冲液，并排除好 气泡；
2.将填充层析介质慢慢地、连续不断地添加到装有缓 冲液的柱中，确保装柱均匀、不断层、无气泡；
（2）基线：在操作条件下，色谱柱出口没有 组分流出，仅有流动相流过监测器，此时流 出的曲线。
（3）色谱峰：当样品中的组分随流动相流入 监测器时，监测器的响应信号随时间变化所 形成的峰形图形。
201（9/6/94）峰形：对称于峰尖的正态分布曲线。 12
洗脱曲线
返回
2019/6/9
《色谱法概述》课件
分类
色谱法可根据流动相的性质和 分离机理进行分类，如气相色 谱法和液相色谱法。
常见的色谱技术
气相色谱法
利用气相作为流动相进行分离，适用于挥发性和热稳定 的分子。
液相色谱法
利用液相作为流动相进行分离，适用于非挥发性和热敏 感的分子。
应用领域
1 化学分析
色谱法在药物分析、环境分析等领域起到关键作用。
2
分析技术示例
使用色谱法确定药物的纯度、成分和含量。
3
结果解读
解读色谱法获得的数据，确定药物的品质和有效成分。
总结
色谱法在分析领域的重要性
色谱法是一种高效、可靠的分离技术，在药物分析、环 境监测和科学研究中发挥着重要作用。
对学习和研究的建议
细致学习色谱法原理和技术，持续实践并不断探索创新， 在科学研究和分析工作中取得更好的成果。
《色谱法概述》PPT课件
本课程将介绍色谱法及其在分析领域的重要性。通过详细的概述、分析技术 和案例分析，学习者将全面了解这一强大的分离技术并获得相关建议。
概述
定义
色谱法是一种基于溶液中溶质 与固定相间的分配和吸附现象 实现分离的技术。
原理
色谱法利用固定相与流动相之 间的源自互作用，实现溶质的分 离和纯化。2 生物医药
用于分离和纯化药物、蛋白质和其他生物分子。
3 环境监测
可以分析环境中的有机物、无机物和污染物。
色谱法的优势和局限性
优势
高分离能力、快速分析速度、广泛适用性、高检测灵 敏度。
局限性
复杂的样品制备、需要专业知识和经验、某些样品难 以分离。
案例分析
1
色谱法在药物分析中的应用
通过实际案例，展示了色谱法在制药行业及药物分析中的重要价值。
色谱法基本理论PPT课件
阐述本ppt课件的目的，即帮助学习者 系统了解和掌握色谱法的基本原理、 技术和应用，提高分析问题和解决问 题的能力。
02 色谱法的基本原理
分离原理
分离原理
色谱法的基本原理是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡来实现分离。当流动 相经过固定相时，与固定相发生相互作用，使得不同物质在固定相和流动相之间的分配平 衡不同，从而实现分离。
开发新型色谱技术
研究和发展新型色谱技术，如微流控芯片色谱、超临界流体色谱等， 以适应不同类型和规模的样品分析。
联用技术结合
将色谱法与其他分析技术（如质谱、光谱等）联用，可以实现更复杂 样品的高效分离和鉴定。
自动化和智能化发展
通过自动化和智能化技术的引入，实现色谱分析的远程控制、实时监 测和数据分析，提高分析效率和准确性。
感谢您的观看
分配平衡
色谱法中的分配平衡是指物质在固定相和流动相之间的分布情况。物质在两相之间的分配 平衡受到多种因素的影响，如物质的性质、温度、压力等。
相互作用
物质在固定相和流动相之间的相互作用是影响分配平衡的重要因素。不同的物质与固定相 和流动相之间的相互作用力不同，因此表现出不同的分配平衡，从而实现分离。
固定相和流动相
保留机制
01
保留机制
保留机制是指物质在色谱法中通过固定相的保留作用而滞留在固定相中
的过程。物质的保留机制主要取决于物质与固定相之间的相互作用力和
性质差异。
02
竞争吸附
在色谱法中，多种物质会竞争吸附到固定相上，形成竞争吸附现象。竞
争吸附会影响物质的保留时间和分离效果，因此在选择固定相和流动相
时需要考虑竞争吸附的影响。
色谱法可用于研究化学反应动力学，通过分析反应中间产物和产物， 揭示反应机理和速率常数。
02 色谱法的基本原理
分离原理
分离原理
色谱法的基本原理是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡来实现分离。当流动 相经过固定相时，与固定相发生相互作用，使得不同物质在固定相和流动相之间的分配平 衡不同，从而实现分离。
开发新型色谱技术
研究和发展新型色谱技术，如微流控芯片色谱、超临界流体色谱等， 以适应不同类型和规模的样品分析。
联用技术结合
将色谱法与其他分析技术（如质谱、光谱等）联用，可以实现更复杂 样品的高效分离和鉴定。
自动化和智能化发展
通过自动化和智能化技术的引入，实现色谱分析的远程控制、实时监 测和数据分析，提高分析效率和准确性。
感谢您的观看
分配平衡
色谱法中的分配平衡是指物质在固定相和流动相之间的分布情况。物质在两相之间的分配 平衡受到多种因素的影响，如物质的性质、温度、压力等。
相互作用
物质在固定相和流动相之间的相互作用是影响分配平衡的重要因素。不同的物质与固定相 和流动相之间的相互作用力不同，因此表现出不同的分配平衡，从而实现分离。
固定相和流动相
保留机制
01
保留机制
保留机制是指物质在色谱法中通过固定相的保留作用而滞留在固定相中
的过程。物质的保留机制主要取决于物质与固定相之间的相互作用力和
性质差异。
02
竞争吸附
在色谱法中，多种物质会竞争吸附到固定相上，形成竞争吸附现象。竞
争吸附会影响物质的保留时间和分离效果，因此在选择固定相和流动相
时需要考虑竞争吸附的影响。
色谱法可用于研究化学反应动力学，通过分析反应中间产物和产物， 揭示反应机理和速率常数。
生物分离工程124纯化与精制-色谱技术
凝胶色谱
原理
应用
利用凝胶颗粒的孔径大小对不同大小分子 进行分离。
常用于蛋白质、多糖等生物大分子的分离 。
优点
操作简便，分离效果好。
缺点
对高分子量物质有局限性，且凝胶需定期 更换。
03 色谱技术在生物分离纯化 中的应用
蛋白质分离纯化
蛋白质分离纯化是色谱技术的重要应 用之一，通过色谱分离技术，可以将 蛋白质混合物中的各个组分进行分离， 得到高纯度的蛋白质。
色谱技术在蛋白质分离纯化中具有分 离效果好、操作简便、可重复性好等 优点，是生物制品制备过程中不可或 缺的重要环节。
常用的色谱分离方法包括凝胶色谱、 离子交换色谱、亲和色谱等，这些方 法可以根据蛋白质的大小、电荷和亲 和力等性质进行分离。
酶的分离纯化
酶是一种具有催化功能的生物大分子，酶的分离纯化 也是色谱技术的重要应用之一。
应用领域的拓展
生物医药领域
利用色谱技术分离和纯化 生物药物，提高药物质量 和产量。
食品安全领域
用于食品中添加剂、农药 残留等的检测和分离。
环境监测领域
用于空气、水体等环境样 品中污染物的分离和检测。
未来挑战与机遇
挑战
随着分离物种类和分离要求的不 断增加，色谱技术面临的挑战也 越来越大。
机遇
随着科技的不断进步和应用领域 的拓展，色谱技术将迎来更多的 发展机遇。
核酸的分离纯化
核酸是生物体中的重要遗传物 质，核酸的分离纯化也是色谱
技术的一个重要应用方向。
通过色谱技术可以将核酸混合 物中的各个组分进行分离，得
到高纯度的核酸。
常用的色谱分离方法包括离子 交换色谱、凝胶色谱、亲和色 谱等，这些方法可以根据核酸 的大小、电荷和亲和力等性质 进行分离。
《色谱分析基础 》课件
缺点
分离效果相对较差，灵敏度较低。
04 色谱分析实验技术
实验设计
实验目的
明确实验的目标和意义，确保实验具有 实际应用价值。
实验步骤
详细列出实验操作步骤，包括样品处 理、色谱柱选择、进样、洗脱等，确
保实验过程规范、准确。
实验原理
阐述色谱分析的基本原理和实验操作 流程，确保实验的合理性和科学性。
实验安全
数据处理与分析
数据采集
记录实验过程中的各项数据，包 括色谱图、峰高、峰面积等，确 保数据的完整性和准确性。
数据处理
采用适当的数学方法对原始数据 进行处理，如平滑、基线校正、 归一化等，以提高数据的可靠性 和可比性。
结果分析
根据处理后的数据，进行结果分 析和解释，得出实验结论，为实 际应用提供科学依据。
优点
分离效果好、分析速度快、灵 敏度高。
缺点
对于高分子量和热稳定性差的 化合物不太适用。
液相色谱法
原理
利用液体作为流动相，将样品中的各 组分在固定相和流动相之间进行分离 ，再通过检测器进行检测。
应用范围
主要用于分析高分子量、热稳定性差 、不易挥发的有机化合物，如蛋白质 、核酸等生物大分子。
优点
分离效果好、分析速度快、灵敏度高 ，适用于复杂样品的分析。
色谱分析具有高效、高分辨率和高灵敏度等特点，广泛应用于化学、生物、医学 和环境等领域。
色谱分析的原理
分离原理
色谱分析基于不同组分在两相之间的吸附或溶解性能差异进行分离。在流动相 的带动下，各组分在固定相和流动相之间反复分配，最终达到分离。
检测原理
通过检测器对分离后的组分进行检测，将组分的浓度或质量转化为电信号，以 便进行定量和定性分析。常见的检测器有紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、质谱 等。
分离效果相对较差，灵敏度较低。
04 色谱分析实验技术
实验设计
实验目的
明确实验的目标和意义，确保实验具有 实际应用价值。
实验步骤
详细列出实验操作步骤，包括样品处 理、色谱柱选择、进样、洗脱等，确
保实验过程规范、准确。
实验原理
阐述色谱分析的基本原理和实验操作 流程，确保实验的合理性和科学性。
实验安全
数据处理与分析
数据采集
记录实验过程中的各项数据，包 括色谱图、峰高、峰面积等，确 保数据的完整性和准确性。
数据处理
采用适当的数学方法对原始数据 进行处理，如平滑、基线校正、 归一化等，以提高数据的可靠性 和可比性。
结果分析
根据处理后的数据，进行结果分 析和解释，得出实验结论，为实 际应用提供科学依据。
优点
分离效果好、分析速度快、灵 敏度高。
缺点
对于高分子量和热稳定性差的 化合物不太适用。
液相色谱法
原理
利用液体作为流动相，将样品中的各 组分在固定相和流动相之间进行分离 ，再通过检测器进行检测。
应用范围
主要用于分析高分子量、热稳定性差 、不易挥发的有机化合物，如蛋白质 、核酸等生物大分子。
优点
分离效果好、分析速度快、灵敏度高 ，适用于复杂样品的分析。
色谱分析具有高效、高分辨率和高灵敏度等特点，广泛应用于化学、生物、医学 和环境等领域。
色谱分析的原理
分离原理
色谱分析基于不同组分在两相之间的吸附或溶解性能差异进行分离。在流动相 的带动下，各组分在固定相和流动相之间反复分配，最终达到分离。
检测原理
通过检测器对分离后的组分进行检测，将组分的浓度或质量转化为电信号，以 便进行定量和定性分析。常见的检测器有紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、质谱 等。
色谱法导论PPT课件
色谱法的应用领域
01
02
03
04
化学分析
色谱法广泛应用于化学分析领 域，用于分离和测定复杂有机 化合物、无机离子和金属配合 物等。
生物医药
在生物医药领域，色谱法用于 分离和纯化生物分子、药物成 分以及检测药物残留等。
环境监测
在环境监测领域，色谱法用于 检测空气、水和土壤中的有害 物质，如有机污染物、重金属 等。
新型硅胶基质固定相
硅胶基质固定相具有良好的热稳定性和化学稳定性， 可用于分离各种极性化合物。
新型聚合物固定相
聚合物固定相具有高选择性、高柱效和良好的耐受性， 可用于分离复杂样品。
新型手性固定相
手性固定相可用于拆分光学异构体，为手性化合物的 分离提供了新的解决方案。
色谱仪器的发展
高效液相色谱仪
高效液相色谱仪具有高分离效能、高灵敏度和广 泛应用的特点，已成为色谱分析的重要手段。
食品成分分析
色谱法用于分析食品中的营养成分，如脂肪、蛋白 质、糖类等，以评估食品的质量和营养价值。
食品添加剂检测
色谱法用于检测食品中添加剂的含量，确保食品的 安全性和合规性。
食品污染物检测
色谱法用于检测食品中的污染物，如农药残留、重 金属等，保障食品安全和消费者健康。
在环境监测中的应用
01
空气污染物的分离 与测定
食品工业
在食品工业中，色谱法用于检 测食品中的添加剂、农药残留 和营养成分等。
02
色谱法的基本原理
分离原理
分离原理
色谱法通过流动相和固定相之 间的相互作用，使不同组分在 固定相和流动相之间的分配系 数不同，从而实现各组分的分 离。
分配系数
各组分在固定相和流动相之间 的分配系数决定了它们在色谱 分离中的行为。分配系数越大 ，组分在固定相上的保留越强 ，越难以被洗脱。
色谱法概论PPT课件
（9）调整保留时间(tR’)：扣除死时间后的组分实际被固定相所
保留的时间,即tR’= tR-t0 = tR-tm
意义：
组分随流动相移动的时间都是相同的，都是死时间。它与固定相、组 分的性质均无关，只与流动相的流动速度有关，对分离不起作用。
tR’即为组分在固定相中出现的（保留的）时间，即组分被固定相所 滞留的时间，与组分和固定相之间的作用力有关。
11
高效液相系统
液体样品
液体传输
高效液相色谱柱 高效液相系统
检测器
数据处理 12
高效液相系统和色谱柱
Agilent 1100 高效液相系统
高效液相色谱柱
可更换卡套
液体医药样品 溶剂
色谱柱
硅胶填料
以不同速率 流出的组分
结果 检测器
色谱图
13
气相-质谱系 统
色谱柱
14
气相色谱系统
气源
进样器
检测器
流出曲线是柱内组分分离结 果的反映，是研究色谱分离 过程机理的依据，也是定性、
32
定量的依据。
色谱流出曲线的意义：
色谱峰数=样品中单组分的最少个数； 色谱保留值——定性依据； 色谱峰高或面积——定量依据； 色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价
指标； 色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的
5
在分析化学领域，色谱法是一个相对年轻的分支学科。早期的色谱技 术只是一种分离技术而已，与萃取、蒸馏等分离技术不同的是其分离效率 高得多。当这种高效的分离技术与各种灵敏的检测技术结合在一起后，才 使得色谱技术成为最重要的一种分析方法，几乎可以分析所有已知物质， 在所有学科领域都得到了广泛的应用。
色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作
色谱分析法简述PPT资料(正式版)
1.气路系统 (1)气源 一般用氢、氮、氩等。多采用氮气作 为载气，作用主要是把样品输送到色谱柱和 检测器中。 (2)流量调节阀 可以调节载气的流速，常用的 有稳压阀和针形阀。2.进样器和汽化室 (1)进样工具常有定量阀（六通阀）和注射器。 (2)汽化室的作用是将液 体或固体样品瞬间汽 化为蒸汽。
3. 色谱柱 色谱柱至于柱室中，一般常用不锈钢管
或铜管，填充固定相构成，管子成U型或螺旋 形。柱管内径为2—8mm，还有内径更小的称 为毛细管色谱柱， 柱管长度一般为1-4m或更 长。
4.检测器 检测器用来检测色谱柱后流出的组分，并
以电压或电流信号显示出来，常用检测器有 热导；氢焰检测器；电子捕获式和火焰光度 式检测器等。
5.数据记录和处理系统 将检测器输出的信号记录下来，进行定性，
定量分析。
五.氢焰检测器(FID)
优点：结构简单、性能优异、 稳定可靠、操作方便
结构：FID的电离室由金 属圆筒作外罩，底座中心 有喷嘴;喷嘴附近有环状 金属圈(极化极，又称发 射极)，上端有一个金属 圆简(收集极)，两者间加 90～300V的直流电压， 形成静电场 。
色谱分析法简述
色谱法源自于对植物色素分离和提纯， 现代色谱法的原理如下：
混合试样中各组份在流动相和固定相间 的分配系数不同，随着流动相在色谱柱中运 行，各组份就在两相间进行反复多次分配。
由于固定相对各
组份的吸附或溶解 能力不同，因此各 组份在色谱柱中的 运行速度就不同， 经过一定的色谱柱 后，便彼此分离， 按顺序离开色谱柱 进入检测器，产生 的离子流讯号经放 大后，在记录器上 描绘出各组份的色 谱峰。
（3）薄板层析色谱：液体通过毛细作用运 动；
（4）毛细管高效电泳：以电场为推动力， 对蛋白质等生化试样有很高的分离效率 。
色谱分离技术PPT课件
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色谱分类方法
按照分离过程中相系统的形式和特征，可分为： 柱色谱法
填充柱色谱法 毛细管色谱法 平板色谱法
纸色谱法 薄层色谱法
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按流动相，可分为： 气相色谱法 液相色谱法
超临界色谱法 按固定相物态，气相色谱法可分为：
气固色谱法 气液色谱法 按流动相物态，液相色谱法可分为： 液固色谱法 液液色谱法
创始人：茨维特（Tsweet）1906
纸色谱
石油醚
植物色 素的石 油醚提 取液
菊根粉或 碳酸钙
薄层色谱
连续色带—色层或色谱 色谱法得名
气相色谱
高效液相色谱
离子色谱、凝胶色谱、亲和色谱
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2.色谱法的特点
（1）概念 色谱法是一种物理的分离方法，利用不同物质在两相中具有不同的分配系数，并
固定相和流动相、操作条件。
④ 设备简单，操作方便，且不含强烈的操作条件， 因而不容易使物质变性，特别适于不稳定的大分子 有机化合物。
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缺点： 处理量小、操作周期长、不能连续操作，因此主要用于实验室，工业生产上应用较少。
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3.色谱法的分类 吸附色谱法
分配色谱法
分离机理 操作方法
1975
1981
Izmailov, Shraiber Taylor, Uray Martin, Synge Consden等 Macllean Martin, James Van Deemter等
Golay Porath, Flodin
Moore Giddings
Small Jorgenson等
最先使用薄层色谱法。 用离子交换色谱法分离了锂和钾的同位素。 提出色谱塔板理论；发明液-液分配色谱；预言了气体可作为流动相（即气相色
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色谱分类方法
按照分离过程中相系统的形式和特征，可分为： 柱色谱法
填充柱色谱法 毛细管色谱法 平板色谱法
纸色谱法 薄层色谱法
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按流动相，可分为： 气相色谱法 液相色谱法
超临界色谱法 按固定相物态，气相色谱法可分为：
气固色谱法 气液色谱法 按流动相物态，液相色谱法可分为： 液固色谱法 液液色谱法
创始人：茨维特（Tsweet）1906
纸色谱
石油醚
植物色 素的石 油醚提 取液
菊根粉或 碳酸钙
薄层色谱
连续色带—色层或色谱 色谱法得名
气相色谱
高效液相色谱
离子色谱、凝胶色谱、亲和色谱
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2.色谱法的特点
（1）概念 色谱法是一种物理的分离方法，利用不同物质在两相中具有不同的分配系数，并
固定相和流动相、操作条件。
④ 设备简单，操作方便，且不含强烈的操作条件， 因而不容易使物质变性，特别适于不稳定的大分子 有机化合物。
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缺点： 处理量小、操作周期长、不能连续操作，因此主要用于实验室，工业生产上应用较少。
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3.色谱法的分类 吸附色谱法
分配色谱法
分离机理 操作方法
1975
1981
Izmailov, Shraiber Taylor, Uray Martin, Synge Consden等 Macllean Martin, James Van Deemter等
Golay Porath, Flodin
Moore Giddings
Small Jorgenson等
最先使用薄层色谱法。 用离子交换色谱法分离了锂和钾的同位素。 提出色谱塔板理论；发明液-液分配色谱；预言了气体可作为流动相（即气相色