色谱分离技术ppt课件
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色谱分离技术—吸附色谱分离技术
4.2 吸附色谱分离技术
4.色谱分离技术
吸附色谱分离技术
1
基本原理
2
吸附剂与展开剂
3
影响吸附分离的因素
4
薄层色谱分离技术
5
柱色谱分离技术
6
吸附色谱分离技术在生产中的应用
基本原理
利用各组分与吸附剂之间的分子吸附力(范德华力，包括色散力、诱导力、 定向力以及氢键)的差异而实现分离。
基本原理
平衡系数（分配系数、吸附系数、选择性系数）
柱色谱分离技术
3.上样
➢湿法上样：把被分离的物质溶在少量色谱最初用的洗脱剂中，小心加在吸附剂 上层，注意保持吸附剂上表面仍为一水平面，打开下口，待溶液面正好与吸附剂 上表面一致时，在上面撒一层细砂，关紧柱活塞。 ➢干法上样：可选用一种对其溶解度大而且沸点低的溶剂，取尽可能少的溶剂将 其溶解。在溶液中加入少量吸附剂，拌匀，挥干溶剂，研磨使之成松散均匀的粉 末，轻轻撒在色谱柱吸附剂上面，再撒一层细砂。
柱色谱分离技术
4.洗脱
➢恒定洗脱法 ➢逐次洗脱法 ➢梯度洗脱法
吸附色谱分离技术的应用
吸附色谱法主要用于具有不同官能团或具有相同官能团但数目不同的极性 化合物及异构体等生物小分子物质的分离分析。
成分鉴别 分离纯化
吸附色谱分离技术的应用
硅胶吸附色谱 应用比较广泛，多用于中药成分的分析检测。
例：牛黄解毒片的鉴别
1cm≤点间距≤1.5cm
薄层色谱分离技术
3.展开
➢展开剂要接触到吸附剂下沿， 但切勿接触到样点。 ➢盖上盖子，展开。 ➢观察展开情况。 ➢取出薄层板
展开示意图
薄层色谱分离技术 3.展开
上升法
倾斜上行法
下降法
薄层色谱分离技术
4.色谱分离技术
吸附色谱分离技术
1
基本原理
2
吸附剂与展开剂
3
影响吸附分离的因素
4
薄层色谱分离技术
5
柱色谱分离技术
6
吸附色谱分离技术在生产中的应用
基本原理
利用各组分与吸附剂之间的分子吸附力(范德华力，包括色散力、诱导力、 定向力以及氢键)的差异而实现分离。
基本原理
平衡系数（分配系数、吸附系数、选择性系数）
柱色谱分离技术
3.上样
➢湿法上样：把被分离的物质溶在少量色谱最初用的洗脱剂中，小心加在吸附剂 上层，注意保持吸附剂上表面仍为一水平面，打开下口，待溶液面正好与吸附剂 上表面一致时，在上面撒一层细砂，关紧柱活塞。 ➢干法上样：可选用一种对其溶解度大而且沸点低的溶剂，取尽可能少的溶剂将 其溶解。在溶液中加入少量吸附剂，拌匀，挥干溶剂，研磨使之成松散均匀的粉 末，轻轻撒在色谱柱吸附剂上面，再撒一层细砂。
柱色谱分离技术
4.洗脱
➢恒定洗脱法 ➢逐次洗脱法 ➢梯度洗脱法
吸附色谱分离技术的应用
吸附色谱法主要用于具有不同官能团或具有相同官能团但数目不同的极性 化合物及异构体等生物小分子物质的分离分析。
成分鉴别 分离纯化
吸附色谱分离技术的应用
硅胶吸附色谱 应用比较广泛，多用于中药成分的分析检测。
例：牛黄解毒片的鉴别
1cm≤点间距≤1.5cm
薄层色谱分离技术
3.展开
➢展开剂要接触到吸附剂下沿， 但切勿接触到样点。 ➢盖上盖子，展开。 ➢观察展开情况。 ➢取出薄层板
展开示意图
薄层色谱分离技术 3.展开
上升法
倾斜上行法
下降法
薄层色谱分离技术
《液相色谱技术》课件
通过液相色谱技术，可以检测环境中的有毒有害物质，如农药、酚类等，为环境治理和保护提供科学依据。
生态毒理学研究
液相色谱技术可以用于研究环境污染物对生物体的毒理学效应，有助于了解环境污染对生态系统的危害。
液相色谱技术的未来发展与挑战
高效液相色谱法（HPLC）
HPLC是液相色谱技术中的一种，具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点，被广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。随着技术的不断发展，HPLC的分离柱、检测器等关键部件也在不断改进，提高了分离效果和检测灵敏度。
智能化与自动化：随着机器人技术和自动化控制技术的发展，液相色谱技术的操作将更加智能化和自动化。未来的液相色谱仪将更加便捷、高效，能够实现自动化进样、自动优化分离条件等功能，大大提高分析效率。
感谢观看
THANKS
流动相的准备与更换
根据实验要求，准备好适量的流动相，并定期更换以保证实验结果的准确性。
定期清洗进样器、色谱柱和检测器，保持仪器表面清洁。
日常保养
定期校准
常见故障排除
对仪器进行定期校准，确保检测结果的准确性。
遇到问题时，应先检查电源、管线连接等基本情况，再根据仪器手册排查故障。
03
02
01
液相色谱技术的实验设计
色谱柱
检测色谱柱流出的组分，并将其转化为电信号，便于记录和检测。
检测器
用于采集、处理、分析和存储色谱数据。
数据处理系统
数据处理与分析
采集色谱数据，进行峰识别、定量和合适的流速、检测波长等参数，开始色谱分离。
进样
将样品注入进样器，设定进样量，启动进样程序。
准备工作
检查仪器是否正常，准备好流动相、色谱柱和样品。
样品前处理的挑战：液相色谱技术对于样品的要求较高，需要进行适当的前处理以去除杂质、提高分离效果。目前常用的样品前处理方法包括沉淀、萃取、吸附等，但这些方法操作繁琐、耗时长且效果不稳定。为解决这一问题，新型的样品前处理技术如固相萃取、免疫吸附等正在不断发展，以提高样品处理的效率和效果。
生态毒理学研究
液相色谱技术可以用于研究环境污染物对生物体的毒理学效应，有助于了解环境污染对生态系统的危害。
液相色谱技术的未来发展与挑战
高效液相色谱法（HPLC）
HPLC是液相色谱技术中的一种，具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点，被广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。随着技术的不断发展，HPLC的分离柱、检测器等关键部件也在不断改进，提高了分离效果和检测灵敏度。
智能化与自动化：随着机器人技术和自动化控制技术的发展，液相色谱技术的操作将更加智能化和自动化。未来的液相色谱仪将更加便捷、高效，能够实现自动化进样、自动优化分离条件等功能，大大提高分析效率。
感谢观看
THANKS
流动相的准备与更换
根据实验要求，准备好适量的流动相，并定期更换以保证实验结果的准确性。
定期清洗进样器、色谱柱和检测器，保持仪器表面清洁。
日常保养
定期校准
常见故障排除
对仪器进行定期校准，确保检测结果的准确性。
遇到问题时，应先检查电源、管线连接等基本情况，再根据仪器手册排查故障。
03
02
01
液相色谱技术的实验设计
色谱柱
检测色谱柱流出的组分，并将其转化为电信号，便于记录和检测。
检测器
用于采集、处理、分析和存储色谱数据。
数据处理系统
数据处理与分析
采集色谱数据，进行峰识别、定量和合适的流速、检测波长等参数，开始色谱分离。
进样
将样品注入进样器，设定进样量，启动进样程序。
准备工作
检查仪器是否正常，准备好流动相、色谱柱和样品。
样品前处理的挑战：液相色谱技术对于样品的要求较高，需要进行适当的前处理以去除杂质、提高分离效果。目前常用的样品前处理方法包括沉淀、萃取、吸附等，但这些方法操作繁琐、耗时长且效果不稳定。为解决这一问题，新型的样品前处理技术如固相萃取、免疫吸附等正在不断发展，以提高样品处理的效率和效果。
高效液相色法分离芳香烃ppt
在环境监测中的应用前景
污染源监测
高效液相色谱法可以用于监测工业废水和废 气中的芳香烃，了解污染源的排放情况。
生态风险评估
通过高效液相色谱法对环境中的芳香烃进行检测， 可以评估其对生态系统的风险，为环境保护提供科 学依据。
土壤和地下水监测
高效液相色谱法可以用于监测土壤和地下水 中的芳香烃，了解环境污染的程度和范围。
03
高效液相色谱法分离芳香烃的 实验条件
流动相的选择
总结词
流动相的选择对芳香烃的分离效果具 有重要影响。
详细描述
流动相的选择应考虑芳香烃的溶解度、 分离效率和实验操作条件。常用的流 动相包括有机溶剂和水，应根据芳香 烃的性质和分离要求进行选择。
固定相的选择
总结词
固定相的选择对芳香烃的分离效果具有关键作用。
实验结果的应用
01
质量控制
过程优化
03
科学研究
通过高效液相色谱法分离芳香烃， 可以控制产品的质量，确保产品 的纯度和一致性。
根据实验结果，可以优化分离条 件和参数，提高分离效率和效果。
高效液相色谱法分离芳香烃在化 学、生物学等领域有广泛的应用， 为科学研究提供有力支持。
06
高效液相色谱法分离芳香烃的 优缺点
高效液相色谱法在芳香烃分离中的应用
芳香烃是一类具有芳香性结构的烃类化合物，在化学工业、医药、染料等 领域具有广泛应用。
高效液相色谱法在芳香烃分离中具有较高的分离效率和准确性，能够快速 分离和纯化各种芳香烃。
通过选择合适的固定相和流动相，高效液相色谱法可以实现对芳香烃的精 细分离和纯化，为后续的制备和应用提供高质量的原料。
流动相选择
根据待分离芳香烃的性质 选择合适的流动相，流动 相应具有良好的化学稳定 性和分离效果。
色谱法概论PPT课件
能。
色谱法与其他技术的联用
色谱-质谱联用（GC-MS, LC-MS）
通过将色谱的分离能力与质谱的高灵敏度检测相结合，可实现对复杂样品中目标化合物 的定性和定量分析，广泛应用于药物代谢、环境监测等领域。
色谱-光谱联用（GC-IR, LC-UV/Vis）
色谱与光谱技术的联用可以提供更丰富的化合物结构和组成信息，有助于深入了解化合 物的性质和行为。
实验材料
确保色谱柱、试剂、溶 剂等材料的质量和纯度，
以满足实验要求。
实验设备
检查色谱仪、检测器、 注射器等设备的运行状 况，确保实验过程中设
备正常工作。
实验设计
根据实验目的和要求， 设计合理的色谱条件和
实验方案。
实验安全
注意实验过程中的安全 问题，如使用有毒有害
试剂时的防护措施。
实验操作步骤
色谱柱安装与条件设置
数据整理
整理实验过程中记录的数据，包括 色谱图、峰面积等。
结果分析
对实验结果进行深入分析，探究可 能的原因和影响因素。
03
02
结果判断
根据实验目的和要求，判断实验结 果是否符合预期。
结论总结
总结实验结果，得出结论，并提出 进一步改进和完善的建议。
04
04 色谱法在分析化学中的应 用
在食品分析中的应用
食品成分分析
色谱法用于分离和检测食品中的营养 成分，如脂肪、蛋白质、碳水化合物、 维生素和矿物质等，以确保食品质量 和安全。
食品添加剂分析
食品污染物分析
色谱法用于检测食品中的有害物质， 如农药残留、重金属、霉菌毒素等， 以防止食品污染和保障食品安全。
色谱法用于检测食品中添加的防腐剂、 色素、香料等成分，以控制食品添加 剂的使用量，保障消费者健康。
《色谱分离法》课件
按分离机制分类
吸附色谱法
利用固体吸附剂对不同组分的 吸附能力差异进行分离。
分配色谱法
利用固定相和流动相之间的分 配平衡实现分离。
离子交换色谱法
利用离子交换剂对不同离子的 亲和力差异进行分离。
空间排阻色谱法
利用凝胶的分子筛效应，根据 分子大小进行分离。
03 色谱分离法的操作流程
CHAPTER
样品前处理
度法、荧光光谱法等。
检测灵敏度设置
根据待分离物质的浓度设置合适 的检测灵敏度，以提高检测准确
性。
收集结果
根据检测结果将各组分分别收集 起来，并进行后续处理和利用。
04 色谱分离法的优缺点
CHAPTER
优点
分离效果好
色谱分离法可以将混合物中的各组分 进行高效分离，得到较为纯净的单一 组分。
适用范围广
在药物分离纯化中的应用
药物分离纯化是色谱分离法应用的重 要领域之一。通过色谱分离法，可以 将混合药物中的有效成分与杂质进行 分离，提高药物的纯度和药效。
在药物分离纯化中，色谱分离法可以 用于中药、西药、生物药物等的分离 纯化，如大黄素、紫杉醇、蛋白质等 物质的分离纯化。
在食品检测中的应用
01
色谱分离法在食品检测中也有广 泛应用，主要用于食品中农药残 留、添加剂、有害物质的检测。
1950年代
出现了气相色谱法，利用气体 作为流动相，广泛应用于气体
和挥发性化合物的分析。
1960年代
出现了高效液相色谱法，利用 高分离效能的色谱柱和高压泵 ，提高了分离速度和灵敏度。
色谱分离法的应用领域
医药工业
用于药物生产和质量控制，以 及生物样品的分离和纯化。
食品工业
色谱法原理及应用ppt课件
2024/8/5
5. 联机的定性方法 色谱-质谱联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱联用仪； 组分的结构鉴定
1.0 DEG/MI N
HEWLET PTACKAR
5972A
D
Mass Selectiv eDetecto r
Sample
DC AB
Sample
HEWLETT PACKARD
5890
2024/8/5
2.色谱法分类
气相色谱：流动相为气体（称为载气）。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； 按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱
1952年James和Martin发表了 从理论到实践比较完整的气液 色谱方法，因而获得了1952年 的诺贝尔化学奖。
2024/8/5
液相色谱：流动相为液体（也称为淋洗液）。 按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。 离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固定相， 不同pH值的水溶液为流动相。
2024/8/5
（2）碳数规律定性 同系物间，在一定温度下，调整保留值的对数与该分子
的碳数成线性关系，即
2024/8/5
4、影响保留值测定准确性的因素 1．死时间的影响及计算方法
2．载体吸附作用的影响 3．进样量的影响 4．载气纯度的影响 （1）载气中水分对保留值的影响 （2）载气中含氧量对保留值的影响 5．固定液纯度的影响
Gas Chromatograph (GC)
B A CD
Separation
Mass Spectrometer (MS)
A B C D
Identification
2024/8/5
二、色谱定量分析方法
1、定量分析的基本公式 2、定量校正因子的测定
5. 联机的定性方法 色谱-质谱联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱联用仪； 组分的结构鉴定
1.0 DEG/MI N
HEWLET PTACKAR
5972A
D
Mass Selectiv eDetecto r
Sample
DC AB
Sample
HEWLETT PACKARD
5890
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2.色谱法分类
气相色谱：流动相为气体（称为载气）。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； 按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱
1952年James和Martin发表了 从理论到实践比较完整的气液 色谱方法，因而获得了1952年 的诺贝尔化学奖。
2024/8/5
液相色谱：流动相为液体（也称为淋洗液）。 按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。 离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固定相， 不同pH值的水溶液为流动相。
2024/8/5
（2）碳数规律定性 同系物间，在一定温度下，调整保留值的对数与该分子
的碳数成线性关系，即
2024/8/5
4、影响保留值测定准确性的因素 1．死时间的影响及计算方法
2．载体吸附作用的影响 3．进样量的影响 4．载气纯度的影响 （1）载气中水分对保留值的影响 （2）载气中含氧量对保留值的影响 5．固定液纯度的影响
Gas Chromatograph (GC)
B A CD
Separation
Mass Spectrometer (MS)
A B C D
Identification
2024/8/5
二、色谱定量分析方法
1、定量分析的基本公式 2、定量校正因子的测定
色谱分析(气相)PPT课件
在进行实验之前，应仔细阅读实验指导手 册，了解实验步骤、注意事项和可能的风 险。
使用正确的实验器材
注意实验室通风
确保使用与实验要求相符的器材，如色谱 柱、进样针、检测器等，避免因器材不当 导致实验失败或安全事故。
在实验过程中，应确保实验室通风良好， 避免有害气体积聚。
废弃物处理及环保要求
分类收集废弃物
型。
根据分离要求选择
根据所需的分离度、分析时间 、峰形等要求选择合适的色谱 柱类型和规格。
根据仪器条件选择
根据仪器的型号、规格、操作 条件等选择合适的色谱柱类型 和规格。
根据经验和实践选择
根据实验室经验和实践，选择 常用的、性能稳定的色谱柱类
型和规格。
05
实验操作过程及注意事项
仪器启动与关闭流程
色谱分析(气相)PPT课件
目 录
• 色谱分析概述 • 气相色谱仪器组成及工作原理 • 样品前处理与进样技术 • 色谱柱类型与选择依据 • 实验操作过程及注意事项 • 结果评价与质量控制方法 • 实验安全规范与环保意识培养
01
色谱分析概述
色谱法定义与原理
定义
色谱法是一种物理分离技术，利用物质在固定相和流动相之间的分配平衡，实 现对复杂样品中各组分的分离与纯化。
鼓励使用可再生资源和可降解材料，减少对环境的负担。同时，实验 室也应积极推广循环经济和资源回收利用的理念。
THANK YOU
数据处理
对采集的数据进行定性定量分析，包括峰识 别、积分、校正等步骤。
注意事项
在数据采集和处理过程中要确保数据的准确 性和可靠性，避免误差的产生。
06
结果评价与质量控制方法
定性分析方法
保留时间定性
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- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
是产品的最后纯化工序（精制），即在用色 谱纯化之前需要经过其他方法进行提取和初步 纯化。
近40年来，色谱技术已成为生物大分子分离 和纯化技术中极重要的组成部分。
胰岛素、干扰素、疫苗、抗凝血因子、生长 激素等。
.
概述
化学分析方法的基本要求是其选择性要高。即，在分析过程 中，待测物与潜在的干扰物的分离是最为重要的步骤！
Izmailov, Shraiber Taylor, Uray Martin, Synge Consden等 Macllean Martin, James Van Deemter等
Golay Porath, Flodin
Moore Giddings
Small Jorgenson等
最先使用薄层色谱法。 用离子交换色谱法分离了锂和钾的同位素。 提出色谱塔板理论；发明液-液分配色谱；预言了气体可作为流动相（即气相色
20 世纪中期，大量采用一些经典的分离方法：沉淀、蒸馏和 萃取。
现代分析中，大量采用色谱和电泳分离方法。迄今为止，色 谱 方法是最为有效的分离手段！其应用涉及每个科学领域。 1903年，俄国植物学家MikhailTswett 最先发明。他采用填充 有固体CaCO3细粒子的玻璃柱，将植物色素的混合物(叶绿素和 叶 黄素chlorophylls & xanthophylls)加于柱顶端，然后以溶剂淋 洗，被分离的组份在柱中显示了不同的色带，他称之为色谱(希 腊 语中“chroma”=color; “graphein”=write) 。 20世纪50年代，色谱发展最快（一些新型色谱技术的发展， 复杂组分分析发展的要求）。
.
年代 1906 1931 1938 1938
1941
1944 1949 1952 1956 1957 1958 1959 1964 1965
1975
1981
色谱法的发展历史
发明者 Tswett Kuhn, Lederer
发明的色谱方法或重要应用 用碳酸钙作吸附剂分离植物色素。最先提出色谱概念。 用氧化铝和碳酸钙分离a-、b-和g-胡萝卜素。使色谱法开始为人们所重。
第七章 色谱分离技术
.
产生的必然性
随着科学的进步，某些关系到人们生命安全 的生物药品，尤其是注射药品和生物工程产品 等，都需要高度纯化。但是，经典的分离方法 （如萃取、结晶等）很难满足需要。 色谱法应运而生。
.
色谱分离是一组相关技术的总称，又叫做色 谱法、层析法，是一种高效而有用的生物分离 技术。
.
概述 吸附色谱法 分配色谱法 离子交换色谱法 凝胶色谱法 高效液相色谱法 亲和色谱法
.
一、概述 1.发展史
创始人：茨维特（Tsweet）1906
纸色谱
石油醚
植物色 素的石 油醚提 取液
菊根粉或 碳酸钙
薄层色谱
连续色带—色层或色谱 色谱法得名
气相色谱
高效液相色谱 离子色谱、凝胶色谱、亲和色谱
.
2.色谱法的特点
柱色谱法的分类见表8-1。
.
.
按色谱动力学过 程，可分为： 洗脱色谱 顶替色谱 迎头色谱
洗脱色谱(a)、顶替色谱(b)、迎头色谱(c)
.
按组份在固定相上的物理化学原理，分为： 吸附色谱：不同组份在固定相的吸附作用不同； 分配色谱：不同组份在固定相上的溶解能力不同； 离子交换色谱：不同组份在固定相（离子交换
谱）。
发明了纸色谱。 在氧化铝中加入淀粉黏合剂制作薄层板使薄层色谱进入实用阶段。
从理论和实践方面完善了气-液分配色谱法。 提出色谱速率理论，并应用于气相色谱。 基于离子交换色谱的氨基酸分析专用仪器问世。
发明毛细管柱气相色谱。 发表凝胶过滤色谱的报告。 发明凝胶渗透色谱。 发展了色谱理论，为色谱学的发展奠定了理论基础。 发明了以离子交换剂为固定相、强电解质为流动相，采用抑制型电导检测的新型
离子色谱法。
创立了毛细管电泳.法。
色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作
年代 1937 1938 1939 1950 1951 1955 1958 1961 1970 1970 1972 1972
获奖学科 化学 化学 化学
生理学、医学 化学 化学 化学 化学
生理学、医学 化学 化学
生理学、医学
获奖研究工作 类胡萝卜素化学，维生素A和B 类胡萝卜素化学 聚甲烯和高萜烯化学 性激素化学及其分离、肾皮素化学及其分离 超铀元素的发现 脑下腺激素的研究和第一次合成聚肽激素 胰岛素的结构 光合作用时发生的化学反应的确认 关于神经元触处迁移物质的研究 糖核苷酸的发现及其在生物合成碳水化合物中的作用 核糖核酸化学酶结构的研究 抗体结构的研究
.
色谱分离基本原理：
使用外力使含有样品的流动相（气体、液体或超 临界流体）通过一固定于柱或平板上、与流动相互 不相溶的固定相表面。处于柱起始端的样品中各组 份与两相进行不同程度的作用。与固定相作用强的 组份随流动相流出的速度慢，而与固定相作用弱的 组份随流动相流出的速度快。由于流出的速度的差 异，使得混合组份最终形成各个组份的“带(band)” 或“区(zone)”，对依次流出的各个组份物质可分 别进行定性、定量分析。
.
.
色谱分类方法 按照分离过程中相系统的形式和特征，可分为：
柱色谱法 填充柱色谱法 毛细管色谱法
平板色谱法 纸色谱法 薄层色谱法
.
按流动相，可分为： 气相色谱法 液相色谱法
超临界色谱法 按固定相物态，气相色谱法可分为：
气固色谱法 气液色谱法 按流动相物态，液相色谱法可分为： 液固色谱法 液液色谱法
（1）概念 色谱法是一种物理的分离方法，利用不同物
质在两相中具有不同的分配系数，并通过两相 不断的相对运动而实现分离的方法。
其中一相是固定相，通常是表面积很大的或多 孔性固体；另一相是流动相，是液体或气体。
剂）上的亲和力不同； 凝胶色谱:（尺寸排阻色谱）：不同尺寸分子在固
定相上的渗透作用；
.
色谱法的特点
1 分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。
2 灵敏度高 可以检测出10-11—10-13g的物质量。
3 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。
4 应用范围广 气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。 不足之处：
近40年来，色谱技术已成为生物大分子分离 和纯化技术中极重要的组成部分。
胰岛素、干扰素、疫苗、抗凝血因子、生长 激素等。
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概述
化学分析方法的基本要求是其选择性要高。即，在分析过程 中，待测物与潜在的干扰物的分离是最为重要的步骤！
Izmailov, Shraiber Taylor, Uray Martin, Synge Consden等 Macllean Martin, James Van Deemter等
Golay Porath, Flodin
Moore Giddings
Small Jorgenson等
最先使用薄层色谱法。 用离子交换色谱法分离了锂和钾的同位素。 提出色谱塔板理论；发明液-液分配色谱；预言了气体可作为流动相（即气相色
20 世纪中期，大量采用一些经典的分离方法：沉淀、蒸馏和 萃取。
现代分析中，大量采用色谱和电泳分离方法。迄今为止，色 谱 方法是最为有效的分离手段！其应用涉及每个科学领域。 1903年，俄国植物学家MikhailTswett 最先发明。他采用填充 有固体CaCO3细粒子的玻璃柱，将植物色素的混合物(叶绿素和 叶 黄素chlorophylls & xanthophylls)加于柱顶端，然后以溶剂淋 洗，被分离的组份在柱中显示了不同的色带，他称之为色谱(希 腊 语中“chroma”=color; “graphein”=write) 。 20世纪50年代，色谱发展最快（一些新型色谱技术的发展， 复杂组分分析发展的要求）。
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年代 1906 1931 1938 1938
1941
1944 1949 1952 1956 1957 1958 1959 1964 1965
1975
1981
色谱法的发展历史
发明者 Tswett Kuhn, Lederer
发明的色谱方法或重要应用 用碳酸钙作吸附剂分离植物色素。最先提出色谱概念。 用氧化铝和碳酸钙分离a-、b-和g-胡萝卜素。使色谱法开始为人们所重。
第七章 色谱分离技术
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产生的必然性
随着科学的进步，某些关系到人们生命安全 的生物药品，尤其是注射药品和生物工程产品 等，都需要高度纯化。但是，经典的分离方法 （如萃取、结晶等）很难满足需要。 色谱法应运而生。
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色谱分离是一组相关技术的总称，又叫做色 谱法、层析法，是一种高效而有用的生物分离 技术。
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概述 吸附色谱法 分配色谱法 离子交换色谱法 凝胶色谱法 高效液相色谱法 亲和色谱法
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一、概述 1.发展史
创始人：茨维特（Tsweet）1906
纸色谱
石油醚
植物色 素的石 油醚提 取液
菊根粉或 碳酸钙
薄层色谱
连续色带—色层或色谱 色谱法得名
气相色谱
高效液相色谱 离子色谱、凝胶色谱、亲和色谱
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2.色谱法的特点
柱色谱法的分类见表8-1。
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按色谱动力学过 程，可分为： 洗脱色谱 顶替色谱 迎头色谱
洗脱色谱(a)、顶替色谱(b)、迎头色谱(c)
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按组份在固定相上的物理化学原理，分为： 吸附色谱：不同组份在固定相的吸附作用不同； 分配色谱：不同组份在固定相上的溶解能力不同； 离子交换色谱：不同组份在固定相（离子交换
谱）。
发明了纸色谱。 在氧化铝中加入淀粉黏合剂制作薄层板使薄层色谱进入实用阶段。
从理论和实践方面完善了气-液分配色谱法。 提出色谱速率理论，并应用于气相色谱。 基于离子交换色谱的氨基酸分析专用仪器问世。
发明毛细管柱气相色谱。 发表凝胶过滤色谱的报告。 发明凝胶渗透色谱。 发展了色谱理论，为色谱学的发展奠定了理论基础。 发明了以离子交换剂为固定相、强电解质为流动相，采用抑制型电导检测的新型
离子色谱法。
创立了毛细管电泳.法。
色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作
年代 1937 1938 1939 1950 1951 1955 1958 1961 1970 1970 1972 1972
获奖学科 化学 化学 化学
生理学、医学 化学 化学 化学 化学
生理学、医学 化学 化学
生理学、医学
获奖研究工作 类胡萝卜素化学，维生素A和B 类胡萝卜素化学 聚甲烯和高萜烯化学 性激素化学及其分离、肾皮素化学及其分离 超铀元素的发现 脑下腺激素的研究和第一次合成聚肽激素 胰岛素的结构 光合作用时发生的化学反应的确认 关于神经元触处迁移物质的研究 糖核苷酸的发现及其在生物合成碳水化合物中的作用 核糖核酸化学酶结构的研究 抗体结构的研究
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色谱分离基本原理：
使用外力使含有样品的流动相（气体、液体或超 临界流体）通过一固定于柱或平板上、与流动相互 不相溶的固定相表面。处于柱起始端的样品中各组 份与两相进行不同程度的作用。与固定相作用强的 组份随流动相流出的速度慢，而与固定相作用弱的 组份随流动相流出的速度快。由于流出的速度的差 异，使得混合组份最终形成各个组份的“带(band)” 或“区(zone)”，对依次流出的各个组份物质可分 别进行定性、定量分析。
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色谱分类方法 按照分离过程中相系统的形式和特征，可分为：
柱色谱法 填充柱色谱法 毛细管色谱法
平板色谱法 纸色谱法 薄层色谱法
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按流动相，可分为： 气相色谱法 液相色谱法
超临界色谱法 按固定相物态，气相色谱法可分为：
气固色谱法 气液色谱法 按流动相物态，液相色谱法可分为： 液固色谱法 液液色谱法
（1）概念 色谱法是一种物理的分离方法，利用不同物
质在两相中具有不同的分配系数，并通过两相 不断的相对运动而实现分离的方法。
其中一相是固定相，通常是表面积很大的或多 孔性固体；另一相是流动相，是液体或气体。
剂）上的亲和力不同； 凝胶色谱:（尺寸排阻色谱）：不同尺寸分子在固
定相上的渗透作用；
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色谱法的特点
1 分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。
2 灵敏度高 可以检测出10-11—10-13g的物质量。
3 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。
4 应用范围广 气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。 不足之处：