ELISA实验中各种方法原理及优缺点比较

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ELISA 实验中各种方法原理及优缺点比较

ELISE 实验是指酶联免疫吸附试验（enzyme linked

immunosorbent assay)指在固定相上进行免疫酶技术，其依据有1：蛋白质可以吸附到固定相上而不改变其活性，2：抗原或抗体与酶交联以后仍可保持其活性及酶的催化活性，3：交联后的酶可以与反应底物进行反应，并催化其分解，产生有色物质。根据有色物质的多少，即颜色的深浅，通过酶标仪测定其颜色与标准物质颜色的差异，根据酶测曲线得出其浓度。

ELISE 实验基本类型有直接法、间接法、抗体夹心法、竞争法、抑制法。

现将各种方法原理及优缺点总结如下：

一：直接法

直接法利用抗原结合在固定相上面，用酶联抗体直接与抗原结合，而后分解底物。 二：间接法

间接法利用抗原与固定相结合后，用一抗与抗原结合，再用二抗V 区和一抗S 区结合。酶联抗体位于二抗上。由于一抗V 区具有稳定性，S 区具有可变性，所以在与不同抗原结合时，V 区变化

而S 区不变，故间接法可以测定

三：双抗夹心法

利用抗体锚定在固定相上，抗原与其结合后，抗原的另外一个表位与酶联抗体结合，催化底物分解，故双抗夹心法适用于某些大

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分子的具有至少双表位的抗原

四：竞争法

竞争法是指针对抗原上同一抗原表位，分别用抗体与酶联抗体先后与其结合，抗体占据表位后，

故催化底物反应的能力相应下降。

子或只有一个抗原表位或重复抗原表位的抗原。

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