培养基配制中注意事项
培养基配制的四大原则
培养基配制的四大原则1.确定微生物所需的营养成分各种微生物有着不同的生长要求，因此需要在培养基中添加适当的营养成分。
培养基的配制需要先了解所需培养微生物的营养成分需求，例如氮、碳、磷、镁、铁等元素和氨基酸、维生素、核苷酸等有机物。
如果不添加足够的必需营养素，微生物无法正常生长和繁殖，因此配制培养基时需要首先确定微生物所需的营养成分。
2.选择合适的碳源和氮源在培养基中，碳源和氮源也是微生物生长所需的重要成分。
不同的微生物对碳源和氮源的要求不同，因此选择合适的碳源和氮源是极其重要的。
碳源可以是葡萄糖、果糖、乳糖等，而氮源可以是胰蛋白水解物、酵母提取物、氨基酸等。
需要根据不同微生物的要求选择合适的碳源和氮源，以保证微生物的正常生长。
3.考虑微生物对pH值和温度的要求微生物对pH值和温度的敏感度较高，因此在培养基的配制中需要考虑微生物对pH值和温度的要求。
常规的抗生素筛选培养基在制备时一般采用pH为7.0-7.2的中性环境，而一些微生物只能在酸性或碱性环境中生长。
此外，微生物对温度的要求也需要被考虑到。
常规的培养温度为30℃至37℃，但是也有一些微生物需要更低或更高的温度才能生长，因此在配制培养基时需要根据微生物的生长特性进行适当的温度调节。
4.配置时使用无菌技术微生物对细菌、真菌和其他微生物的污染敏感，因此在配制培养基时需要使用无菌技术。
使用无菌技术可以保证培养基中没有任何细菌或其他微生物的存在影响微生物的生长和繁殖。
在使用无菌技术时需要注意，将培养基加热到正确的温度，以确保培养基中的细菌和其他微生物都被杀灭，以免影响到有创意研究和生产。
总之，培养基配制是微生物学研究以及微生物技术应用的重要环节。
在配制培养基时，需要了解所需微生物的营养成分需求，选择合适的碳源和氮源，考虑微生物对pH值和温度的要求，并使用无菌技术保证培养基的无菌。
只有按照这四个原则进行培养基配制，才能得到优质的培养基，使微生物能够良好地生长和繁殖。
培养基配置和灭菌的注意事项
培养基配置和灭菌的注意事项一、培养基配置1.选用适当的培养基组成：根据实验的需要选择适当的培养基成分，包括碳源、氮源、矿质盐、维生素等。
根据不同微生物的要求，可以选择不同的培养基，如富集培养基、选择性培养基等。
2.正确计量和混合培养基成分：根据实验需要和比例，精确地称取和混合培养基成分。
注意避免污染和交叉污染，使用干燥器、称重纸和清洁器具等进行操作。
3.正确调节培养基的pH值：根据不同微生物的偏好，调节培养基的pH值。
使用pH计和相应的酸碱溶液进行调节，确保培养基的pH值符合微生物的需求。
4.加热溶解和固化培养基：将培养基成分加入适量的蒸馏水中，加热搅拌溶解，然后分装到培养皿或试管中。
对于固化培养基，需要加入适量的琼脂或琼脂糖，在混合均匀后加热至溶解，然后分装到培养皿或试管中。
二、培养基灭菌1.选择合适的灭菌方法：有常见的三种灭菌方法，包括热处理（如蒸汽灭菌、热风灭菌）、化学灭菌和滤器灭菌。
根据实验需求和培养基的性质选择合适的灭菌方法。
2.准备合适的灭菌器具：根据实验需求和培养基的量，选择合适的灭菌器具，如蒸馏锅、高压灭菌器、紫外线灭菌箱等。
3.正确操作灭菌设备：根据灭菌设备的说明和操作指南，正确操作和调节灭菌设备。
4.合理选择灭菌时间和温度：根据不同培养基的特性和实验需求，合理选择灭菌时间和温度。
通常情况下，蒸汽灭菌的时间为15-30分钟，温度为121摄氏度；热风灭菌的时间为1-2小时，温度为160摄氏度。
5.注意灭菌后的处理：在灭菌后，及时关闭灭菌设备，避免灭菌后的污染。
将培养基冷却后，进行温度验证，然后保存在合适的温度和条件下。
配置培养基注意事项
准备工作液体培养基1.清洗试管，烘干2.配液体培养基，例如硝化菌，亚硝化菌，反硝化菌，氨化菌的配制。
3.计算每个菌所需要的试管数目，计算方法：稀释度数X平行数X水样数+稀释度数X平行数X泥样数。
例如，亚硝化菌，有4个水样，7个泥样，稀释度为4，平行为3.则4X4X3+4X7X3=132，需要132个试管。
以此计算其他菌种。
4.分装：根据计算的试管数，每只试管用移液枪加入4.5ml,加盖包装灭菌，分类保存。
5.配制0.9%的NaCl的溶液，主要目的是获得不同的稀释度，可以每个18ml，看具体情况。
计算方法：水样数X稀释度数6.枪头灭菌。
开始实验稀释度，枪头从浓度低的向浓度高的不需要换，即从稀释度大的向稀释度小的不需要换枪头。
稀释完之后，一般每个稀释度有三个平行样，对应相应的稀释度，每次取0.5ml加入到已经灭菌的装有相应培养基的试管中，试管中的液体为4.5ml.注意：试管瓶盖上要写明是那个样，水还是泥，什么菌哪个稀释度、、、取之前要把锥形瓶中的液体摇匀，然后用枪头吸取，试管打开的时候要靠近酒精灯，整个过程在酒精等附近操作。
固体培养基1.清洗培养皿，烘干。
然后包装起来，进行灭菌。
包装注意培养皿朝同一个方向。
2.配固体培养基，注意要先溶琼脂，固体培养基一般都需要琼脂。
溶完之后，再加入其他成分。
然后将培养基灭菌。
3.在超净工作台里倒平板。
开始实验从低到高配置各个不同的稀释度，一定要换枪头！然后从高到低用枪头吸取之后加入到每个培养基中，一般是两个平行样，然后涂布，一定要在酒精等附近操作。
注意：在小盖上写明哪个菌哪个样哪个稀释度，涂布完之后要先底朝下等一会，放到培养箱的时候要底朝上！培养一定的天数，然后计数。
对于泥样：要先用灭完菌的装有18ml生理盐水的锥形瓶，称取一定质量（2g）的泥放入，称的时候要把酒精灯放在电子天平附近，然后摇半个小时。
固体培养基的制备流程和注意事项
固体培养基的制备流程和注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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1. 配制培养基溶液。
根据培养基配方，将所需的成分溶解于适量去离子水中。
MS培养基及配制注意事项
word格式-可编辑-感谢下载支持、MS培养基母液的配制注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2・2巧0单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称(或编号)，浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2・2H2O配制同上置于另一小口瓶中。
2．微量元素母液的配制各种生长调节剂）word 格式-可编辑-感谢下载支持按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO 4・7H 2O 和Na 2-EDTA.2H 2O ）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml 容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。
3.铁盐配制将FeSO 4・7H 2O 和Na Q -EDTAZ^O 分别溶于450ml 蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH 至5.5加水定容至1000ml ，置于小口瓶中，贴上标签。
4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml 容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。
5.母液最好在2〜4°C 的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。
1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。
2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。
．生长调节剂母液配制：为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。
不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA ），吲哚乙酸（IAA ），赤霉素（GA 3），2,4-D 等生长素和玉米素（ZT ）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。
制备培养基的操作要点和注意事项
制备培养基的操作要点和注意事项制作培养基就像微生物实验室的家常便饭，培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，培养基由于富含营养物质，易被污染或变质，配制过程中有多个注意事项和操作要点需要我们掌握。
一、什么是培养基？培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。
培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。
二、培养基的种类。
培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。
三、培养基配制须知。
培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌。
培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。
配好后不宜久置，最好现配现用。
四、玻璃器皿的清洗在制备培养基的过程中，首先要使用一些玻璃器皿，如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。
这些器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。
有的还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才能使用。
1新购的玻璃器皿除去包装沾染的污垢后，先用热肥皂水刷洗，流水冲净，再浸泡于１～２％的工业盐酸中数小时，使游离的碱性物质除去，再以流水冲净。
对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入浓盐酸少许，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上将水空干，即可使用。
2用过的玻璃器皿凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用后可随时冲洗，吸取过化学试剂的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。
有可能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，将污垢除去，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。
培养基制备的基本方法和注意事项
培养基制备的基本方法和注意事项1.培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。
因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对．再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。
2 ．培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录，包括培养推各称，配方及其来源．和各种成份的牌号。
最终pH 值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。
3.培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱．最好一次完成，不要中断。
可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。
完全称取完毕后．还应进行一次检查。
4.培养基各成份的混合和溶化培养基所用化学药品均应是化学纯的。
使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。
最好使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。
在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。
待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。
如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。
在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，最后必须加以补足。
5.培养塞pH 的初步调整培养基各成分完全溶解后，应进行pH 的初步调正，因培养基在加热消毒过程中、pH 会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低pH0.2.而肠浸液pH 却会有显著的升高。
因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH ，保证培养基的质量。
pH 调正后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。
液体培养基必须绝对澄清，琼脂培养基也应透明无显著沉淀，因此，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。
配制培养基的注意事项
配制培养基的注意事项配制培养基是微生物实验中非常重要的步骤，它直接影响到实验的结果和可靠性。
以下是配制培养基的注意事项：1. 实验环境要清洁：为了避免无菌培养基受到污染，操作区域应保持清洁，并定期对工作台、试剂瓶、实验仪器等进行消毒。
2. 确保试剂质量：应选择高质量的试剂，并检查试剂的保存状态，确保其不受潮、变质或受到其他污染。
3. 严格按照配方配制：根据所需的培养基类型严格按照配方中各种组分的比例配制。
使用称量仪器准确称量所需的试剂量，并避免出现误差。
4. 使用高质量的水：培养基的配制需要使用无菌纯水。
可以使用经反渗透或蒸馏的水，并在制备过程中避免其受到污染。
5. 消毒培养器具：使用高压蒸汽消毒器具，如试剂瓶、棉塞、烧杯等实验器材，以保证其无菌。
6. 培养基溶解：将配制好的培养基按照介质的要求溶解。
注意加热和搅拌使其彻底溶解。
如果配制固体培养基，需要先将其加热至沸腾溶解，然后冷却。
7. 调节 pH 值：根据所需的菌种和用途，调节培养基的 pH 值。
使用 pH 仪器测量并调节 pH 值，确保其在适宜范围内。
8. 灭菌和保存：将配制好的培养基进行高压灭菌，消除其中的微生物污染。
然后将培养基盛装在无菌容器中，严密封闭并存放在低温下保存。
9. 记录配制信息：为了追踪和记录培养基的配制过程，需要准确记录所使用的试剂、配制日期、灭菌信息等重要信息。
10. 严格执行实验室操作规范：在培养基配制过程中，必须遵守实验室的操作规范和规定，如佩戴手套、严格消毒操作台面等，以防止污染。
总之，配制培养基是非常细致和复杂的实验步骤，需要高度的注意和谨慎。
只有遵循上述注意事项，才能保证培养基的质量和有效性，确保实验结果的准确性和可靠性。
培养基配置和灭菌的注意事项
培养基配置和灭菌的注意事项
培养基是微生物学研究和实验室操作中常用的一种物质，而培养基的配制和灭菌是关键的步骤。
以下是培养基配置和灭菌的注意事项： 1. 培养基配制：在配制培养基时，应选用优质原料，精确称量，严格按照配方比例配制，避免过量或不足的添加。
同时要注意加热溶解固体成分时的温度和时间，以及液体成分的搅拌均匀程度。
2. 培养基灭菌：灭菌是为了保证培养基中没有外来微生物的存在，从而保证实验结果的准确性和可靠性。
传统的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌和干热灭菌，但这些方法的使用需要设备和条件的支持。
常用的方法是使用过滤器将培养基过滤，去除其中的微生物。
过滤器的选择应根据微生物的大小和过滤效率来确定，同时要注意滤器的细胞毒性和耐温性。
3. 培养基贮存：培养基的贮存也很重要，应将其保存在干燥、
阴凉、避光的环境中，避免受潮、受热、受光等影响。
同时要注意不同类型的培养基的贮存条件和有效期限。
总之，培养基的配制和灭菌是微生物学研究和实验室操作中至关重要的一部分，需要严格按照操作规程和注意事项进行，以保证实验结果的准确性和可靠性。
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培养基的配制及使用记录
培养基的配制及使用记录一、引言在微生物学实验过程中，培养基的配制及使用记录是非常重要的实验步骤之一、正确的培养基配制可以提供适宜的营养物质和环境条件，促进微生物的生长和繁殖。
本文将详细介绍培养基的配制和使用记录，以及注意事项和实验结果的记录。
二、培养基的配制1.根据实验需要选择合适的培养基配方。
常见的培养基有肉汤培养基、浓缩肉汤培养基、天然培养基、合成培养基等。
2.按照培养基配方准确称取所需的物质，如蛋白胨、葡萄糖、酵母粉等。
3.将物质加入蒸馏水中，并用玻璃棒搅拌均匀，直至溶解完全。
4.调整pH值。
使用pH计将溶液的pH值调整到所需范围内，通常为6.8-7.25.配制完毕的培养基通过高温高压灭菌器进行灭菌，保持高温高压一段时间。
6.灭菌后的培养基应待其冷却到室温后使用或储存，避免细菌的再度污染。
三、培养基的使用记录1.填写培养基使用记录表。
记录培养基的配制日期、配制者、培养基批号等信息。
2.记录每次使用的培养基的用量。
可通过称重器或容量杯进行测量，确保使用的培养基量能满足实验需要。
3.记录每次使用的细菌菌种名称和数量。
用标准测量容器或移液器进行测量和记录。
4.注意培养基的贮存条件。
培养基应存放在阴凉、干燥、无菌的环境中，避免阳光直射或高温暴晒。
四、注意事项1.在培养基的配制和使用过程中，要严格遵守无菌操作规范，防止微生物的污染。
2.注意培养基的保存时间，过期的培养基会导致细菌的生长受阻。
3.培养基使用完后应及时清洗容器并进行消毒处理，以防止细菌的残留和传播。
4.注意培养基的pH值和温度控制，过高或过低的pH值和温度会影响微生物的生长和繁殖。
五、实验结果的记录1.记录每次实验的细菌生长情况，包括菌落形态、菌液浑浊程度以及生长速度等。
2.对于培养基配制不当或实验操作失误导致的异常结果，要仔细记录并分析原因，以便调整实验方法和改进配制过程。
六、结论培养基的配制和使用记录是微生物学实验的重要步骤之一，正确的配制和使用可以提供适宜的环境条件促进微生物的生长和繁殖。
培养基的配制
一、用品的准备：
1、无菌物品：盐水瓶数个（能装1000ml液体），盐水胶塞数个，1000ml 超滤器。 2、培养基专用量筒1000ml 1个，三角烧瓶1个，手动压力表1个。 3、超纯水或三蒸水1L。 4、培养基1包/L，青霉素及链霉素各10万单位/L，HEPES、碳酸氢钠。
二、注意事项：
1、配制培养基前应紫外灯照射培养室及超净工作台30分钟。 2、抽负压时压力表不能超过-15KPa。 3、使用此批次培养基前，应吸取少量培养基放进培养箱进行培养，确定无 细菌生长后方可使用。 4、短时间内不）
• 氯化钠：8克；氯化钾：0.2克； • • • • Na2HPO4·12H2O:3.489克；KHPO:0.2克。 加入蒸馏水，定溶到1000ml。 调pH7.2～7.4。 分装、高压消毒。
培养基的配制原则及配制时应注意的问题和比较各种水解糖制备方法的优缺点
1.培养基的配制原则及配制时应注意那些问题？答：配置原则：第一，根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。
第二，营养成分的恰当配比；培养基中的碳氮的比例(C／N)在发酵工业中尤其重要。
第三，渗透压；渗透压一定要与微生物的自然生存环境相符。
第四，ＰＨ值；一般霉菌和酵母菌比较适于微酸性环境，放线菌和细菌适于中性或微碱性环境。
第五，氧化还原电位；厌氧菌，由于氧的存在对其有毒害作用，因而往往在培养基中加入还原剂一降低氧化还原电位，所一必须考虑氧化还原电位。
注意问题：1、培养基配方的选定；同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。
因此需依据自己的使用目的，加以选用，记录其来源。
2、的制备记录；每次制备均应有记录。
3、成分的称取；各种成分必须精确称取，最好一次完成，不要中断。
4、各成份的混合和溶化；化学药品均应是化学纯的，最好使用不锈钢锅加热溶化。
5、pH的初步调正；因在加热消毒过程中、pH会有所变化，各成分完全溶解后，应进行PH的初步调正。
6、的过滤澄清；液体必须绝对澄清，琼脂也应透明无显著沉淀，因此，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要。
7、分装；应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。
8、灭菌；一般可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。
9、质量测试；每批制备好以后，应仔细检查一遍，发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被沾染等、均应挑出弃去，并测定其最终pH。
10、保存；应存放于冷暗处，最好能放于普通冰箱内。
2.培养基的碳氮比对菌体的生长和产物形成的影响？答：发酵培养基应该选用适当的碳氮比。
培养基中碳氮比的影响极为明显。
一般情况下，碳氮比偏小，能导致菌体的旺盛生长，易造成菌体提前衰老自溶，影响产物的积累；碳氮比过大，菌体繁殖数量少，不利于产物的积累；碳氮比较合适，但碳源、氮源浓度高，仍能导致菌体的大量繁殖，增大发酵液粘度，影响溶解氧浓度，容易引起菌体的代谢异常，影响产物合成；碳氮比较合适，但碳源、氮源浓度过低，会影响菌体的繁殖，同样不利于产物的积累。
培养基制备的基本方法和注意事项
培养基制备的基本方法和注意事项1.培养基配方的选定2.3.同一种培养基的配方在不同着作中常会有某些差别;因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对．再依据自己的使用目的加以选用,记录其来源;4.5.2．培养基的制备记录6.7.每次制备培养基均应有记录,包括培养推各称,配方及其来源．和各种成份的牌号;最终pH值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱;8.9. 3.培养基成分的称取10.11.培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱．最好一次完成,不要中断;可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方上做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧;完全称取完毕后．还应进行一次检查;12.13.4.培养基各成份的混合和溶化14.15.培养基所用化学药品均应是化学纯的;使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长;最好使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化;在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动,以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备;待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸;如为琼脂培养基,应先用一部分水将琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合;在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,最后必须加以补足;16.17.5.培养塞pH的初步调整18.19.培养基各成分完全溶解后,应进行pH的初步调正,因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,例如,牛肉浸液约可降低.而肠浸液pH却会有显着的升高;因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH,保证培养基的质量;pH调正后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出;20.21.6．培养基的过滤澄清22.23.液体培养基必须绝对澄清,琼脂培养基也应透明无显着沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求;一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂;24.25.琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤;亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤;新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去,再用滤纸反复过滤;如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法;即将冷却至55-60℃的培养基放入大的三角烧瓶内,装入量不得超过烧瓶容量的1/2,每1000ml培养基加入1-2个鸡蛋的蛋白．强力振摇3-5分钟,置高压蒸汽灭菌器中、121℃加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可;26.27.若能自行沉淀者,亦可静置冰箱中1-2日、吸取其上清液即可;28.29.7.培养基的分装30.31.培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内;分装量不得超过容器装盛量的2/3;容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还双用防水纸包扎现试管一般多有用螺旋盖者;分装时最好能使用半自动或电动的定量分装器;分装琼脂抖面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为恰当;分装容器应予先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌;每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基最终pH之用;32.33.8.培养基的灭菌34.35.一般培养基可采用121℃高压蒸汽灭菌15分钟的方法;在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌;36.37.某些畏热成分,如糖类,应另行配成20%如或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基;明胶培养基亦应用较低温度灭菌;血液、体液和抗生素等则应从无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50℃左右的培养基中;38.39.琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出、待冷至55-60℃时,摆置成适当斜面、待其自然凝固;40.41.9.培养基的质量测试42.43.每批培养基制备好以后．应仔细检查一遍：如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去;并测定其最终pH;44.45.将全部培养基放入36±1℃恒温箱培养过夜,如发现有菌生长,即弃去;46.47.用有关的标准菌株接种1-2管或瓶培养基,培养24-48小时,如无菌生长或生长不好;应追查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该批培养基即应弃去,不能使用;48.49.10.培养基的保存50.51.培养基应存放于冷暗处,最好能放于普通冰箱内;放置时间不宜超过一周,倾注的平板培养基不宜超过3天;每批培养基均必须附有该批培养基制各记录副页或明显标签;培养基的常规配制程序一、目的要求了解培养基的配制原理;了解培养基常规配制程序;了解培养基配制过程各环节的要求和注意事项;二、基本原理正确掌握培养基基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础,由于微生物种类及代谢类型的多样性,因而用于培养微生物培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法虽各有差异;但一般培养基的配制程序却大致相同,例如器皿的准备,培养基的配制与分装,棉塞的制作,培养基的灭菌,斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相向;三、实验材科一药品待配各种培养的组成成分,琼脂,1mol/LNaOH溶液,1mol/l升,统一用大写HCl溶液;二仪器天平或台秤,高压蒸汽灭菌锅;三玻璃器皿移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、玻璃漏斗等;四其他物品药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸等;四、实验内容一玻璃器皿的洗涤和包装1．玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净;将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中,用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净;移液管先用含有洗涤剂的水浸泡;再用自来水及蒸馏水冲洗,洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用;2．灭菌前玻璃器皿的包装1培养皿的包装培养皿由一盖—底组成一套;可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌;包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用;2移液管的包装在移液管的上端塞入—小段棉花勿用脱脂棉;它的作用是避免外界及口中杂菌吹入管内,并防止菌液等吸入口中;塞入此小段棉花应距管口约0.5cm左有;棉花自身长度约1-1．5cm;塞棉花时,可用一外圈拉直的曲别针,将少许棉花塞入管口内;棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准;先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端,约成45度角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,右手将移液管压紧,在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来;上端剩余纸条,折叠打结,准备灭菌见图5—1—1;二液体及固体培养基的配制过程1．液体培养基配制1称量一般可用1/100粗天平称量配制培养基所需的各种药品;先按培养基配方计算各成分的用量,然后进行准确称量;2溶化将称好的药品置于一烧杯中,先加入少量水根据实验需要可用自来水或蒸馏水,用玻棒搅动,加热溶解;3定容待全部药品溶解后,倒入一量筒中,加水至所需体积;如某种药品用量太少时,可预先配成较浓溶液,然后按比例吸取一定体积溶液,加入至培养基中;4调pH一般用pH试纸测定培养基的pH;用剪刀剪出一小段pH试纸,然后用镊子夹取此段pH试纸,在培养基中蘸一下,观看其pH范围,如培养基偏酸或偏碱时,可用1mol/lNaOH或1mol/lHCl溶液进行调节;调节pH时,应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱,破坏培养基中成分;边加边搅拌,并不时用pH试纸测试,直至达到所需pH为止;5过滤用滤纸或多层纱布过滤培养基;一般无特殊要求时,此步可省去;2．固体培养基的配制配制固体培养基时,应将已配好的液体培养基加热煮沸,再将称好的琼脂1．5％-2％加入,并用玻棒不断搅拌,以免糊底烧焦;继续加热至琼脂全部融化,最后补足因蒸发而失去水分;三培养基的分装根据不同需要,可将己配好培养基分装入试管或锥形瓶内,分装时注意不要使培养基沾污管口或瓶口,造成污染;如操作不小心,培养基沾污管口或瓶口时,可用镊子夹一小块脱脂棉,擦去管口或瓶口的培养基,并将脱脂棉弃去;1．试管的分装取一个玻璃漏斗,装在铁架上,漏斗下连一根橡皮管,橡皮管下端再与另一玻璃管相接,橡皮管的中部加一弹簧夹;分装时,用左手拿住空试管中部,并将漏斗下的玻璃管嘴插入试管内,以右手拇指及食指开放弹簧夹,中指及无名指夹住玻璃管嘴,使培养基直接流入试管内图5—1—2;装入试管培养基的量视试管大小及需要而定,若所用试管大小为15×150 mm时,液体培养基可分装至试管高度1／4左右为宜；如分装固体或半固体培养基时,在琼脂完全融化后,应趁热分装于试管中;用于制作斜面的固体培养基的分装量为管高1／5约3—4m1；半固体培养基分装量为管高的1／3为宜;2．锥形瓶的分装用于振荡培养微生物用时,可在250 m1锥形瓶中加入50ml的液体培养基,若用于制作平板培养基用时,可在250 m1锥形瓶中加入150ml培养基,然后再加入3g琼脂粉按2％计算,灭菌时瓶中琼脂粉同时被融化;四棉塞的制作及试管、锥形瓶的包扎为了培养好气性微生物,需提供优良通气条件,同时为防止杂菌污染,则必须对通入试管或锥形瓶内空气预先进行过滤除菌;通常方法是在试管及锥形瓶口加上棉花塞等;1．试管棉塞的制作制棉塞时,应选用大小、厚薄适中的普通棉花一块,铺展于左手拇指和食指扣成的圆孔上,用右手食指将棉花从中央压入团孔中制成棉塞,然后直接压入试管或锥形瓶口;也可借用玻璃棒塞入,也可用折叠卷塞法制作棉塞图5—1—3;制作的棉塞应紧贴管壁,不留缝隙,以防外界微生物沿缝隙侵入;棉塞不宜过紧或过松,塞好后以手提棉塞,试管不下落为准;棉塞的2／3在试管内,1／3在试管外图5—1—4;目前也有采用金属或塑料试管帽代替棉塞;直接盖在试管口上;灭菌待用;将装好培养基并塞好棉塞或盖好管帽的试管拥成一捆,外面包上一层牛皮纸;用铅笔注明培养基名称及配制日期,灭菌待用;2．锥形瓶棉塞制作通常在棉塞外包上一层纱布,再塞在瓶口上;有时为了进行液体振荡培养加大通气量,则可用8层纱布代替棉塞包在瓶口上;目前也有采用无菌培养容器封口膜直接盖在瓶口,既保证良好通气,过滤除菌又操作简便,故极受欢迎;在装好培养基并塞好棉塞或包上八层纱布或盖好培养容器封口膜的锥形瓶口上,再包上一层牛皮纸并用线绳捆好,灭菌待用;五培养基的灭菌培养基经分装包扎之后,应立即进行高压蒸汽灭菌,100Pa灭菌20min灭菌条件根据培养基不同有所差异,含糖培养基105℃,30min;如因特殊情况不能及时灭菌,则应暂存于冰箱中;六斜面和平板的制作1．斜面的制作将已灭菌装有琼脂培养基的试管,趁热置于木棒上,使成适当斜度,凝固后即成斜面图5—1—5;斜面长度不超过试管长度1／2为宜;如制作半固体或固体深层培养基时,灭菌后则应垂直放置至冷凝; 2．平板的制作将装在锥形瓶或试管中已灭菌的琼脂培养基融化后,待冷至50℃左右倾入无菌培养皿中;温度过高时,皿盖上的冷凝水太多,温度低于50℃,培养基易于凝固而无法制作平板;平板的制作应采用无菌操作,左手拿培养皿,右手拿锥形瓶的底部或试管,左于同时用小指和手掌将棉塞打开,灼烧瓶口,月左手大拇指将培养皿盖打开一缝,至瓶口正好伸入,倾入10-12m1的培养基,迅速盖好皿盖,置于桌上,轻轻旋转平皿、使培养基均匀分布于整个平皿中、冷凝后即成平板图5—1—6;七培养基的无菌检查灭菌后的培养基,一般需进行无菌检查;最好从中取出1-2管瓶,置于37℃恒温箱中培养1—2天,确定无菌后方可使用;八无菌水的制备在每个250mL的锥形瓶内装99mL的蒸馏水并塞上棉塞;在每支试管内装4.5m1蒸馏水;塞上棉塞或盖上塑料试管盖;再在棉塞上包上一张牛皮纸;高压蒸汽灭菌,100Pa灭菌20分钟;。
培养基配制的注意事项有
培养基配制的注意事项有
培养基是微生物常用的一种实验工具，科学合理的配制有助于保证实验的准确性和可重复性。
下面就是培养基配制的注意事项。
1. 器皿清洁要求高：事先用洗洁精清洗干净后再用去离子水冲洗干净，避免残留杂质影响实验结果。
2. 培养基量化准确：配制前需要准确称量每个成分，保证每次实验中的培养基浓度一致。
3. 使用质量好的原料：高质量的原料可以保证培养基配制的稳定性和准确性，同时也有利于细菌生长。
4. 阴离子吸附：注意有些组分具有阴离子吸附能力，建议在 PH 6.8 ~ 7.2 条件下调整，比如利用 pH计对溶液的酸碱值进行测定，以避免对细菌的影响。
5. 隔离菌株时添加抗生素：当需要隔离单一种类的菌株时，通常需要在培养基中添加适量的抗生素。
6. 热灭菌前要自洁：配制好的培养基需在高温下热灭，因此要注意控制温度和时间，并保证热灭前培养瓶内部和外部都需要用酒精或高温消毒液进行自洁。
7. 去除气泡：在灭菌后迅速倒入培养皿中，通过震荡或旋转培养皿去除气泡，以便于细菌长得更好更均匀。
培养基很重要，需要基于实验目的、生长条件和生物需求来调配，建议高质量的培养基应该通过定期监测和检测来保证其质量和效果，
帮助研究人员更好地理解微生物生长和发展的基础规律。
组培培养基配制流程及注意要点
配制培养基时要预先做好准备，首先要依据培养物和培养目的确定其培养基配方；再根据培养材料以及实验处理的多少，确定其培养基的用量；然后准备好所需的用具。
培养基配制程序如下：1. 将贮存的各种母液按顺序依次放好。
2. 将各种洁净的玻璃器皿如培养瓶、量筒、烧杯、吸管、玻璃棒、漏斗等，放在指定的位置。
准备好蒸馏水或无离子水及瓶盖或封口膜、包纸、橡皮筋等。
3. 称取规定量的琼脂和蔗糖，将琼脂置于精钢锅或者电饭煲中，加水至培养基最终容积的3/4或1/2，随之加热并用玻璃棒进行搅拌使之溶解，注意防止煳锅底和溢出。
琼脂必须完全溶化，以免造成浓度不均。
琼脂不能过多，不然会导致培养基太硬，含水太少，通气不良；反之，培养基太软，植物材料则难以固定。
由于琼脂较难溶解，所以在制备培养基时，应首先加热溶解。
4. 按母液顺序，根据不同母液的浓缩倍数移取规定的量（查看）。
各母液移取量计算公式为：母液移取量（ml）= 待配制培养基体积（ml）/母液的扩大倍数激素母液移取量（ml）= 培养基所需的激素质量（mg）/ 母液浓度（mg/ml）如配制1L MS培养基移取扩大10倍的大量元素母液为100mL。
母液加完后，再经过计算加入所需要的植物生长调节剂。
在加入母液或生长调节剂时，应事先检查这些药品是否已经变色或产生沉淀，若出现这些现象就停止使用。
加完后一并倒入已溶化的琼脂中。
5. 加蒸馏水定容至培养基的最终容积。
6. pH值调整。
培养基的pH值（酸碱度）直接影响培养物对离子的吸收，所以过酸或过碱都会影响植物的生长。
此外，琼脂培养基的pH值还影响到其凝固程度，所以当培养基配制好以后，应随即进行pH值的调整（一般pH值为5.6-6.0）。
最好是用酸度计测试，即快又准，如无此设备也可以用精密pH试纸（应在干燥容器中保存，以免吸潮而失效）。
若培养基偏酸就用1mol/L的氢氧化钠来调节，偏碱则用1mol/L的盐酸来调节。
经高压蒸汽灭菌后，由于某些成分的分解（如蔗糖）或氧化，使培养基的pH值会降低（一般会降低0.2左右）。
培养基制备的基本方法和注意事项
培养基制备的基本方法和注意事项1.培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。
因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对．再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。
2 ．培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录，包括培养推各称，配方及其来源．和各种成份的牌号。
最终pH 值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。
3.培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱．最好一次完成，不要中断。
可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。
完全称取完毕后．还应进行一次检查。
4.培养基各成份的混合和溶化培养基所用化学药品均应是化学纯的。
使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。
最好使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。
在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。
待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。
如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。
在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，最后必须加以补足。
5.培养塞pH 的初步调整培养基各成分完全溶解后，应进行pH 的初步调正，因培养基在加热消毒过程中、pH 会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低pH0.2.而肠浸液pH 却会有显著的升高。
因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH ，保证培养基的质量。
pH 调正后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。
6．培养基的过滤澄清液体培养基必须绝对澄清，琼脂培养基也应透明无显著沉淀，因此，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。
培养基制备的基本方法和注意事项
培养基制备的基本方法和注意事项1.培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。
因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对．再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。
2 ．培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录，包括培养推各称，配方及其来源．和各种成份的牌号。
最终pH 值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。
3.培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱．最好一次完成，不要中断。
可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。
完全称取完毕后．还应进行一次检查。
4.培养基各成份的混合和溶化培养基所用化学药品均应是化学纯的。
使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。
最好使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。
在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。
待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。
如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。
在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，最后必须加以补足。
5.培养塞pH 的初步调整培养基各成分完全溶解后，应进行pH 的初步调正，因培养基在加热消毒过程中、pH 会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低pH0.2.而肠浸液pH 却会有显著的升高。
因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH ，保证培养基的质量。
pH 调正后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。
6．培养基的过滤澄清液体培养基必须绝对澄清，琼脂培养基也应透明无显著沉淀，因此，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。
培养基的配制与灭菌的注意事项
培养基的配制与灭菌的注意事项
-按照比例将各种成分称量加入蒸馏水中，搅拌至完全溶解。
- 调整pH值，通常在6.8左右。
- 用蒸馏水将溶液补至预设体积。
- 过滤灭菌，最好使用0.22μm的滤器。
2. 培养基的灭菌：
- 培养基灭菌前要进行充分的准备工作，将所有操作用具消毒并擦干。
- 常用的灭菌方法包括高温高压灭菌、滤器灭菌和紫外线灭菌，具体选择方法根据实验需求和培养基成分而定。
- 确保灭菌过程中没有任何污染，例如灭菌器的密封性、滤器的完整性等。
- 灭菌后的培养基要尽快使用，以避免再次受到污染。
注意事项：
- 配制培养基和进行灭菌时，要注意操作的严谨性和卫生性，避免污染。
- 不同类型的培养基可能有不同的配制方法和灭菌方法，要根据实验需求选择合适的方法。
- 培养基的质量和灭菌效果对实验结果有重要影响，要特别注意。
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B5培养基成分使用浓度(mg/L)
大量元素KNO3 2500 MgSO4·7H2O 250
CaCl2·2H2O 150 (NH4)2SO4 134
微量元素KI 0.75 H3BO4 3.0
MnSO4·4H2O 10 ZnSO4·7H2O 2.0
Na2MoO4·2H2O 0.25 CoCl2·6H2O 0.025
铁盐CuSO4·5H2O 0.025 Na2-EDTA 37.3
FeSO4·7H2O 27.8
有机成分肌醇100 烟酸 1.0
盐酸吡哆醇 1.0 盐酸硫铵10
注意事项
1、现在一般用通用铁盐代替草酸铁。
2、过磷酸钙先用盐酸溶解，再加入培养基中。
3、现在琼脂质量较好，具体用量，自己掌握。
4、用于兰花播种和组织培养，具有较好的缓冲能力
B5培养基的组成和配方
组成成分数量(mg/l）
KNO3 2500
大量元素CaCl2·2H2O 150
MgSO4·7H2O 250
(NH4)2SO4 134
KI 0.75
H3BO4 3.0
MnSO4·4H2O 10
微量元素ZnSO4·7H2O 2.0
Na2MoO4·2H2O 0.25
CoCl2·6H2O 0.025
CuSO4·5H2O 0.025
铁盐Na2-EDTA 37.3
FeSO4·7H2O 27.8
肌醇100
烟酸 1.0
有机成分盐酸吡哆醇 1.0
盐酸硫铵10
N6培养基配方组成成分数量(mg/l）
硝酸钾(KN03) 2830
硫酸铵(NH4SO4) 463
大量元素氯化钙(CaCl2·2HzO) 166
硫酸镁(MgSO4·7H20) 185
磷酸二氢钾(KH2PO4) 400
硫酸亚铁(FeSO４·7H20) 27.8
硫酸锰(MnS04·4H20) 4.4
微量元素硫酸锌(ZnSO4·7H20) 1.6
硼酸(H2BO3) 0.8
碘化钾(KI) 1.6
甘氨酸 2
有机成分烟酸0.5
盐酸硫胺素(维B1) 1.0
盐酸吡哆素(维B6)
1、大量元素母液的配制
各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。
后用蒸馏水定容到1000ml的容量瓶中，即为10倍的大量元素母液。
到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。
配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。
注意：
(1) 配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+、SO42－、Mg 2+和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。
为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。
特别应将Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。
(2)CaCl2·2H2O要在最后单独加入，在溶解CaCl2·2H2O 时，蒸馏水需加热沸腾，除去水中的CO2，以防沉淀。
另外，CaCl2·2H2O放入沸水中易沸腾，操作时要防止其溢出。
２、微量元素母液的配制
MS培养基的微量元素无机盐由7种化合物（除Fe ）组成。
微量元素用量较少，特别是CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O ，因此在配制中分微量Ⅰ、Ⅱ配制。
按照表2，表3配方，用电光天平称量，其它同大量元素。
配制培养基时，每配制1L培养基，取微量Ⅰ10ml，微量Ⅱ0.1ml。
3、铁盐母液的配制
铁盐不是都需要单独配成母液，如柠檬酸铁，只需和大量元素一起配成母液即可。
目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物，必须单独配成母液。
这种螯合物使用起来方便，又比较稳定，不易发生沉淀。
配制方法同上，直接用蒸馏水加热搅拌溶解，定容至
1L。
配制培养基时，配制1L取此液10ml。
注意：
在配制铁盐时，如果加热搅拌时间过短，会造成FeS04和Na2-EDTA 鳌合不彻底，此时若将其冷藏，FeSO4会结晶析出。
为避免此现象发生，配制铁盐母液时，FeSO4和Na2-EDTA 应分别加热溶解后混合，并置于加热搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热20 - 30 min)，调pH值至5 .5，室温放置冷却后，再冷藏。
4、有机母液的配制
MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、盐酸硫胺素和盐酸吡哆素。
培养基中的有机成分原则上应分别单独配制。
配制直接用蒸馏水溶解，定容至1L，注意称量时用电子分析天平。
配制培养基时，每配1L培养基取此液5ml。
注意：
由于维生素母液营养丰富，因此贮藏时极易染菌。
被菌类污染的维生素母液，有效浓度降低，并且易给后期培养造成伤害，不宜再用。
避免此现象发生的方法是:配制母液时用无菌重蒸馏水溶解维生素，并贮存在棕色无菌瓶中，或缩短贮藏时间。
5、激素母液配制
植物组织培养中使用的激素种类及含量需要根据不同的研究目的而定。
一般激素母液的配制的终浓度以0.5mg/ml为好，需要注意的是：
（１）配制生长素类，例如IAA、NAA、2.4-D、6BA，应先用少量95%乙醇或无水乙醇充分溶解，或者用1mol/L的NaOH溶解，然后用蒸馏水定容到一定的浓度。
（２）细胞分裂素，例如KT，应先用少量95%乙醇或无水乙醇加3~4滴1mol/L的盐酸溶解，再用蒸馏水定容。
（３）配制生物素，用稀氨水溶解，然后定容。
注意：
所有的母液都应保存在0~4℃冰箱中，若母液出现沉淀或霉团则不能继续使用。