RCS大鼠病变发育过程中视网膜神经节细胞形态学变化的研究
不同发育阶段大鼠视神经的观察-发育生物学论文-生物学论文
不同发育阶段大鼠视神经的观察-发育生物学论文-生物学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——视神经是视觉传导的通路，属中枢神经，由视网膜节细胞发出的神经纤维及神经胶质细胞组成，不含神经元胞体，因此常用作中枢神经损伤再生研究较理想的实验材料[1、2],但有关不同发育阶段大鼠视神经的变化目前还未见系统报道。
本研究从组织形态学的角度，采用常规HE及免疫组织化学染色，结合电镜技术，通过对不同发育阶段大鼠视神经的观察，以期揭示其变化规律，为进一步进行有关视神经的研究提供实验资料。
1 材料和方法1.1 动物及主要试剂来源实验动物由第三军医大学动物实验中心提供成年Wistar品系大鼠，种鼠按雄：雌1∶2笼养交配，次晨检查出现阴栓为妊娠零天。
实验试剂为抗CNPase单抗（23-cyclic nucleotide 3-phosphohydrolase,CNPase,Promega公司）用于标记整个发育阶段的少突胶质细胞，抗GalC（Galactocere-broside GalC,Sigma公司）多抗用于标记成熟的少突胶质细胞。
抗胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acid-ic protein,GFAP,重庆医科大学）单抗用于标记星形胶质细胞。
SP免疫组化试剂盒为中山公司产品。
1.2 分组与检测方法1.2.1动物分组及取材按产后（postnatal）0、3、5、8、15、20、90天平均分成7组，分别命名为P0d、P3d、P5d、P8d、P15d、P20d及P90d,每组4只。
其中HE染色、抗CNPase、GalC和GFAP免疫组化染色2只，电镜2只。
动物断头后1分钟内用显微手术器械于视交叉向前一直达眼球完整取出视神经。
电镜标本放入3%的戊二醛中固定，HE及免疫组化染色标本放入4%的多聚甲醛/PB中固定，常规石蜡包埋切片。
1.2.2免疫组化染色观察操作步骤按说明书进行，只作少许修改，即石蜡切片常规脱蜡至水，3%H2O2/甲醇10min,PBS 洗3min3次，7%山羊血清/PBS室温孵育30min,CNPase（1∶1000）单抗，GalC多抗（1∶100）及GFAP单抗（1∶100）4∶过夜，PBS洗5min3次，生物素化IgG（1∶200）37∶6h,PBS 5min3次，HRP标记的链霉卵白素（1∶200）37∶2h,PBS5min3次后，DAB显色光镜观察。
RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞增殖能力的变化及其Shhptc信号调控的开题报告
RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞增殖能力的变化及其Shhptc信号调控的开题报告
题目：RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞增殖能力的变化及其Shhptc信号调控
背景与意义：
视网膜是人类视觉的重要组成部分，包括视杆细胞和视锥细胞等视觉光感受器，这些细胞的死亡会导致视网膜退行性疾病。
RCS大鼠是视网膜色素上皮细胞脱落的动物模型，是研究视网膜退行性疾病的重要模型之一。
干细胞治疗作为一种新兴的治疗方法，已经被广泛应用于多种疾病的治疗中，包括视网膜细胞的再生。
因此，在RCS大鼠视网膜退行性疾病的治疗中，生发区干细胞的增殖能力和调控机制是非常重要的研究内容。
研究方法：
本研究将RCS大鼠的视网膜边缘生发区干细胞收集分离。
通过构建光学相干断层扫描显微镜（OCT）和电子显微镜（TEM）实验模型，观察干细胞在体内的行为，检测干细胞增殖率，并进一步分析其中的分子调控机制。
同时，建立Shhptc信号转导和NF-κB通路的启动模型，探讨其中的调节机制。
预期结果：
本研究预计可以探索到RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞增殖能力的变化，并且能够深入分析干细胞增殖的分子机制。
同时，预计能够揭示Shhptc信号转导和NF-κB通路的启动机制，为干细胞治疗的实践提供实验依据和理论指导。
结论：
本研究的主要目的是探究RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞的特性和机制。
预计相关研究成果将有望为视网膜退行性疾病以及干细胞治疗提供一定的理论基础和实践指导，具有重要的临床应用价值。
糖尿病大鼠早期视网膜神经节细胞凋亡机制的探讨
糖尿病大鼠早期视网膜神经节细胞凋亡机制的探讨谷瑞东;郝莹莹;陈晓隆【期刊名称】《国际眼科杂志》【年(卷),期】2014(14)3【摘要】目的：探讨糖尿病大鼠模型早期视网膜神经节细胞（ retinal ganglion cells ，RGCs）凋亡的机制。
<br> 方法：SD大鼠60只，随机分为对照组（ CON ）及糖尿病组（ DM），糖尿病组一次性腹腔注射1％STZ诱发糖尿病鼠模型，两组于第4，8，12 wk分别行HE、透射电镜及TUNEL法检测RGCs的凋亡情况，并应用激光共聚焦显微镜检测RGCs内钙离子浓度的变化。
<br> 结果：糖尿病组第8 wk开始出现RGCs数量减少、细胞排列紊乱的病理改变，第12 wk更为明显。
糖尿病组透射电镜下可见第4 wk 时 RGCs 出现线粒体肿胀；第8 wk 时RGCs内肿胀的线粒体更为明显、数目增多，染色质边集于核膜周边，部分细胞体积缩小、细胞器减少；第12 wk时出现RGCs体积变小，甚至出现细胞核断裂。
TUNEL阳性RGCs最早于糖尿病组第4wk时出现，随病程延长凋亡的阳性细胞逐渐增多，凋亡指数与同期对照组相比，差异有统计学意义（P＜0．01）。
糖尿病组第8，12wk 时RGCs内钙离子浓度明显高于同期对照组，差异显著（ P＜0．01）；糖尿病组第8 wk与第12 wk比较，升高差异亦有统计学意义（P＜0．05）。
<br> 结论：糖尿病早期出现了视网膜神经节细胞的凋亡，其机制可能与细胞内钙离子浓度升高有关。
%AIM:To investigate the mechanism of retinal ganglion cell apoptosis in early stage of streptozotocin ( STZ )-induced diabetic rats. <br> METHODS: Sixty SD rats were randomly divided into two groups:control group ( CON) and diabetesmellitus group ( DM ) . Diabetic rat model was produced by intraperitoneal injection of 1% STZ in 30 adult male SD rats.At 4, 8, 12wk,the rats were killed and eyeballs were enucleated for the HE staining, TUNEL staining, transmission electron microscopy detection respectively, and laser confocal microscope detection was used to detect the calcium ion concentration. <br> RESULTS: At 8wk RGCs decreased gradually and appeared disordered arrangement and got worse at 12 wk in DM group.In DM group, mitochondrial swelling was detected at 4wk., and became more obvious, more in number at 8wk with reduction in some cells'volume and the number of organelles decreased.In DM group, few TUNEL positive RGCs were seen at 4wk, and became more and more at 8 and 12wk.The apoptosis index was significantly higher in DM group compared with CON group in different time points ( P<0.01).Intracellular calcium ion concentration of RGCs in DM group began to elevate obviously at 8 and 12wk in contrast with CON group in the same time point (P<0.01).In DM group, Intracellular calcium ion concentration of RGCs increased difference was statistically significant between 8 and 12wk (P<0.05). <br> CONCLUSION: The study suggested that RGCs apoptosis occurs in early stage of diabetes, the mechanism might be associated with increased intracellular calcium ion concentration.【总页数】5页(P402-406)【作者】谷瑞东;郝莹莹;陈晓隆【作者单位】110004 中国辽宁省沈阳市，中国医科大学附属盛京医院眼科;110004 中国辽宁省沈阳市，中国医科大学附属盛京医院妇产科;110004 中国辽宁省沈阳市，中国医科大学附属盛京医院眼科【正文语种】中文【相关文献】1.大鼠糖尿病早期给光/撤光中心视网膜神经节细胞分层的变化 [J], 秦要武;徐格致;王文吉2.洛美利嗪对糖尿病早期大鼠视网膜神经节细胞的保护作用 [J], 谷瑞东;郝莹莹;陈晓隆3.Nogo受体在早期糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡中的作用 [J], 左中夫;刘万鹏;刘学政4.神经生长因子玻璃体腔注射对早期糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用 [J], 吕航;王启常;唐罗生5.神经生长因子玻璃体腔注射对早期糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用 [J], 吕航; 王启常; 唐罗生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
视网膜变性模型大鼠部分生物学特性分析
率 和 后 代 公 母 比例 。
１ 材 料 与方 法
１１ 实验 动物 及其繁 殖方 法 ．
１ 。 生产发育指标观察 ．２ ３
取４ 周龄的视网膜变性
模 型大 鼠 ２ ４只（ 雌雄 各 半） — ２周龄 每 周称 重 一 ，４ １
次 ：ｌ ～ ０周 龄 每 ２周 称 重一 次 ，绘 制 生长 曲线 ， ２３
随机选取 ８ ～ Ｏ日 ５ ９ 龄视 网膜变性模型大 鼠 ８ ０
［ 收稿 日期】 ０ ００ ．１ ２ １ ．６２ 【 作者简介】 沈 艳（９ ７）女， １７ ． ， 硕士， 主要从事动物模型的建立
及实验研究， — ｉ ｓｅ ｙ ＠ｓａｈ ． ｇ Ｅ ｍａ ：ｈｎ ａ ｈ ｐ ｃ ｒ ｌ ｎ ｏ
１３ 实验 方 法 ．
系大 鼠的报道研究仍甚少。为此， 作者通过定期测定 视网膜变性模型大 鼠的体重， 观察繁殖特性， 检测血液 生理与 生化指标 ， 了解其生物学特性， 为视 网膜变性模 型大鼠的推广与应用提供基础的生物６ ．１ ３ 胎，离乳后种 鼠 亦 同 居 交 配 。记 录 每 胎 产 仔 数 、 仔 鼠雌 雄 比 例 、
【 关键词】 网膜变性模型大鼠； 视 生物学特性； 繁殖性能； 生长发育； 理化指标
【 中图分类号］ ９ ．３ 【 Ｑ ５３ 文献标识码】 ［ Ｂ 文章编号】 ６ ４５ １ （ １） —２ ０ １７ —８７２ ０ ０ １—４ ０１ ３ １
视 网膜 变 性模 型大 ￣（ ｙｌ ｏｌ ｅｏ ｕｇ ｏ ｒ ａ ｃｌｇ ｆｓｒｅｎ ｏ ｔ ｒｔＲＣＳ，是 英 国皇 家 外科 学 院将 白毛 鼠和 棕 斑 、 ａ， ） 粉 眼 、 营养 不 良鼠通 过 一 系 列 回交 培 育 而 成 的 鼠 种， 是第 一个被发 现具有人类 视 网膜 变性主要特 征 的 动物模型【 １ 卜３ 。该 品系 大 鼠的 鼠体 特 征 为 ：粉 眼 ， 全 身 多 为 白毛 ， 颈 部 背 部 有 深 棕 色 不 规 则 花 斑 。 视 网膜变性模型大 鼠已经是 国际上一种成熟 的用 于研 究视 网膜退化 的动物模 型， 目前 国内对 于此 品 但
大鼠视神经损伤致视网膜病变的病理形态学定量分析
大鼠视神经损伤致视网膜病变的病理形态学定量分析邹倩;叶剑;冯联兵【期刊名称】《实用医药杂志》【年(卷),期】2005(022)006【摘要】目的研究视神经损伤后视网膜的病理形态学变化.方法利用大鼠视神经钳夹伤模型,运用图像分析和形态计量技术对视神经损伤后视网膜中视神经神经元胞体的节细胞(RGCs)核体积密度进行了定量分析,对视网膜各层厚度进行了测量比较.结果①光镜下观察见正常对照组视网膜各层排列整齐而致密,RGC层胞核清晰,各层界限较为清楚,内核层和外核层细胞排列紧密而整齐.损伤后1d可见节细胞层有出血,损伤7d后,节细胞核明显稀疏,外核层及内核层细胞明显减少,核排列不整齐,内网状层亦变薄,视网膜总厚度变薄;②图像分析显示:视神经损伤后7、14、28d视网膜RGCs核体积密度明显下降(P<0.01),分别下降了27.5%、39.8%、49.0%;伤后28d视网膜节细胞层和内网状层厚度明显减少(P<0.05).结论视神经不全损伤导致了视网膜形态结构的变化,伤后7d节细胞明显丢失,28d视网膜出现了萎缩,厚度变薄.【总页数】3页(P526-528)【作者】邹倩;叶剑;冯联兵【作者单位】153医院眼科,河南,郑州,450042;第三军医大学大坪医院眼科,重庆,400042;153医院眼科,河南,郑州,450042【正文语种】中文【中图分类】R774【相关文献】1.以脑源性神经营养因子等干预视神经损伤大鼠视神经蠕变分析 [J], 王瑛韬; 郭鑫; 齐兵2.锌、硒拮抗镉致妊娠大鼠肝细胞损伤的研究──Ⅰ．不同剂量的复方锌对镉致妊娠大鼠肝细胞损伤的保护作用 [J], 韩国安;姜会敏;甄秀梅;周洪军;徐彩珍;田济溪;李素英3.锌、硒拮抗镉致妊娠大鼠肝细胞损伤的研究──Ⅱ．不同剂量硒对镉致妊娠大鼠肝细胞损伤的保护作用 [J], 韩国安;姜会敏;甄秀梅;周洪军;徐彩珍;田济溪;李素英4.异丙基肾上腺素致大鼠心肌损伤的病理形态学研究 [J], 崔松山;王柏苓;黄琪;崔华子;班翔;李树祥;张殿清;关承华;薛玉洁5.烟草尘致大鼠肺脏损伤的病理形态学观察 [J], 张维东;张莉;孙顺仙;李少玲;朱传菊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基于RCS大鼠模型的视网膜色素变性治疗
后果 ， 就限制了其 在临床上 的应用 。 这
２ 细胞 移植
Ｒ Ｐ是一种细胞功 能缺 陷性疾 病 ， 由于 视 网膜 下腔 属于相 对免疫赦免 区域 ， 细胞移植 到视 网膜下腔治疗 Ｒ 使 Ｐ成为可能 ， 至今 已有多种细胞被成功地移植到 Ｒ Ｓ大 鼠视网膜下腔 ， Ｃ 并且 起 到了某种程度地治疗作用 。但是也应 看到 ， 种免疫赦免并 这
３ ８ ９
Ｃ ｉ Ｏ ｈｈ ｌ ｏ ａ ｄ Ｏ ｏｈｎ ｌ ｙ ｇ ｌ ｏ ｅ ｂ ｒ ０ ８ Ｖ ｌ ． ｏ ６ ｂｎ Ｊ ｐ ｔａｍ ｌ ｎ ｔ ｉｏ ｒｎ ｏ ，Ｎ ｖ ｍ ｅ ０ ， ｏ ８ Ｎ ． ｒ ａ ２
・
综
述 ・
基 于 Ｒ Ｓ大 鼠模 型 的视 网膜 色素 Ｃ
传 、 色体显性遗传 、 常染 性连锁 遗传 等， 皇家外科学院 （ｏａ ｃｌ ｒｙｌ ｏ —
ｌ ｅｓｒｅｎ ，Ｒ Ｓ 大鼠为常染色体 隐性遗传 Ｒ ｅ ｇｏ ｓ Ｃ ） ｇ ｕ Ｐ动物模 型 ， 从 出生后 １ ， ８ｄ起 光感受器 细胞 数 目开始逐 渐减少 ， ３个月 时 至 大 部分光 感受 器细胞 消 失 ， 变机 制 主要是 视 网膜 色 素上皮 病 （ｅｉ ｌ ｉ ｅｔ ｐ ｈｌ ｍ， Ｐ ） ｒｔ ａ ｐｇ ｎ ｅｉ ｅ ｕ Ｒ Ｅ 细胞 中编码受体酪 氨酸激酶 的 ｎ ｍ ｔ ｉ 部分基 因缺失 ， 无法 正常编码酪氨酸激酶 Ｍｅ ｋ 导致 Ｒ Ｅ细胞 Nhomakorabeaｒ， ｔ Ｐ
变 性 治 疗
张萌 莫晓芬
【 摘要】 视网膜色素变性是一类以光感受器细胞及色素上皮细胞功能丧失为共同表现的疾病 ， 具有遗传
倾 向性 ， 通过选择不 同的视网膜色素变性（ｅｎｔ ｉ ｎｏａ Ｒ ） ｒｌ ｉｓ ｇ ｔ ， Ｐ 动物模型可 以针对不同遗传方式的 Ｒ ｉ ｉｐ ｍｅ ｓ Ｐ进行 研究 ， 皇家外科学 院（ｏａ ｃｌ ｇ ｕｇｏｓ Ｒ Ｓ 大 鼠是常染色体 隐性遗传 的经典 动物模 型 ， ｒｙｌ ｏ ｅｅｓｒｅｎ ， Ｃ ） ｌ 现将 基于 Ｒ Ｓ大 Ｃ 鼠模型 的 Ｒ Ｐ治疗研究进展综述如下。 目前 已经发现的视网膜色素变性 （ｅ ｎ ｉ ｐｇ ｅｔｓ， Ｐ ｒｔ ｉｓ ｉ ｎｏａ Ｒ ） ｉ ｔ ｍ 相关基 因约 １０多个 ０ ， ０ 其遗传方式 主要包括常染 色体隐性遗 尽管蛋 白注 射 的治疗 是有 效 的 ， 但这 种 方式 作用 时 间短 暂， 若反复注射易导致 视网膜 出血 、 网膜 脱离 、 视 眼内炎等严重
大鼠视神经损伤视网膜节细胞凋亡的实验研究
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参 考文献 ：
【 吴 琦 ， 志 斌 ， 忠 良 ，等 ．针 刺 配 合 静 滴 醒 脑 静 治 疗 缺 血 性 脑 梗 １ Ｊ 沈 王 塞 ６ Ｏ例 【】 Ｊ ．中 医 药 信 息 ， ９ ９ １ （ ）４ １９ ，６ ５ ：３—４ ． ５ 【 】 长 山 ， 祥 林 ， 德 清 ， ．针 刺 对 缺 血 性 中 风 患 者 超 氧 化物 歧 ２周 吴 孔 等 化 酶 活 性 变 化 的 临 床 观 察 【 Ｊ ．中 国 针 灸 ，９ ３ １ （ ：９—２ ． Ｊ １９ ，３ ６） １ Ｏ 【 】 Ｒ ＡＷＡ Ｍ， Ａ ３ Ｈｌ ＡＫ Ｔ ＭＡ ＲＡ Ａ， Ｇ ＨＩ ｅ １ Ｄ ｓｕｂ ｎ ｅ ｏ Ｕ ＮＡ ＡＳ ＭＡ Ｈ， ｔ ． ｉ ｒａ ｃ ｆ ａ ｔ ｒｔｎｉｎ ｏ ｍ ｒ ， ａｔｒｆ ａ ｃ ｒ ｂａ ｓｈ ｍｉ ｉ ｒｔ【 】 ． ｔ ｋ ， ｅｅ ｔ ｆ ｏ ｍｅ ｏ ｙ ｆ ｃ ｌ ｅｅ ｒｌｉ ｅ ａ ｎ ａ Ｊ Ｓｒ ｅ ｅ ｏ ｃ ｓ ｏ
【推荐下载】金纳多对RCS鼠视网膜色素变性神经元保护作用研究
金纳多对RCS鼠视网膜色素变性神经元保护作用研究 2012-12-13 【编者按】：医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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金纳多对RCS鼠视网膜色素变性神经元保护作用研究 【摘要】目的探讨金纳多(Ginaton，EGb761)对RCS大鼠视网膜色素变性神经元保护作用的机制。
方法将出生后雄性RCS大鼠48只随机分为给药组和对照组。
给药组大鼠从生后7 d开始腹腔注射金纳多，每3 d注射一次，剂量为100 mg/kg。
对照组大鼠注射生理盐水，剂量相同。
苏木精?伊红染色和TUNEL检测观察EGb761对视网膜色素变性神经元的保护作用。
应用免疫组织化学方法检测Caspase?2蛋白的表达。
结果给药组大鼠生后20和25 d，感光细胞的数目与对照组大鼠比较明显增加(t=3.32、3.56,P 0.05)。
给药组大鼠生后25 d TUNEL检测阳性细胞数目比对照组少，差异有统计学意义(t=3.74,P 0.05)。
生后25～40 d，给药组和对照组大鼠在节细胞层和内核层观察到Caspase?2阳性染色。
给药组大鼠生后20和25 d时内核层Caspase?2阳性细胞数少于对照组(t=2.87,P 0.05)。
结论在RCS大鼠视网膜变性的早期，EGb761对神经元起保护作用，其作用机制可能与Caspase?2蛋白的低表达有关。
【关键词】视网膜炎色素性金纳多细胞凋亡Caspase?2蛋白大鼠 [ABSTRACT]ObjectiveTo explore the protective mechanisms of Ginaton (EGb761) on hereditary retinal dystrophy in RCS rats.MethodsA total of 48 male RCS rats were randomly divided into treated and control groups. EGb761 100 mg/kg was injected intra?peritoneally, once every three days in treated group，starting from seven days after birth; saline was given to the controls, dose and medication being the same as the treated group. The protective effect of EGb761 against retinal dystrophy was assessed by HE staining and TUNEL. The expression of Caspase?2 was detected by immunohistochemistry. ResultsThe number of photoreceptor in the treated group was more than that in the controls at 20 and 25 days after birth (t=3.32,3.56;P 0.05). Twenty?five days after birth, the number of TUNEL?positive cells of the treated group was obviously less than that of the controls (t=3.74,P 0.05). From 25 to 40 days after birth, the Caspase?2?positive cells were seen in the ganglion cell layer and inner nuclear layer in both treated and control groups. The number of positive cells in the inner nuclear layer of treated group was less than that of the control group (t=2.87,P 0.05). ConclusionEGb761 has a protective effect on the early stage of retinal degeneration of RCS rats, its mechanisms may be related to the low expression of Caspase?2. [KEY WORDS]retinitis pigmentosa; EGb761; apoptosis; Caspase?2 protein; rats 视网膜色素变性是一种眼科十分常见的致盲性疾病，到目前为止，其发病机制尚不清楚，亦无有效的防治办法。
巨噬细胞培养液对离体培养的大鼠视网膜神经节细胞的作用研究
巨噬细胞培养液对离体培养的大鼠视网膜神经节细胞的作用研究王艳华;王一;曾玉晓;王东武【期刊名称】《眼科新进展》【年(卷),期】2006(26)10【摘要】目的研究巨噬细胞培养液对离体培养的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活和生长的作用,探讨损伤晶状体促进RGCs存活和轴突再生的作用物质,为视神经损伤和再生的基础研究提供理论依据.方法制备大鼠巨噬细胞培养液,分别用巨噬细胞培养液及DMEM对RGCs进行离体培养,观察RGCs在体外存活的时间,测量培养1 d、3 d和5 d有突起的RGCs数目及最长突起长度,进行组间比较.结果 (1)对照组离体培养的细胞于培养5～6 d崩解死亡,而巨噬细胞培养液组细胞能存活6～8 d;(2)培养1 d、3 d和5 d,巨噬细胞培养液组有突起的RGCs数目分别为(59.74±2.04)个·mm-2、(96.78±4.11)个·mm-2和(99.26±3.04)个·mm-2,均明显多于同期对照组,差异非常显著(P＜0.01);(3)培养1 d和3 d,巨噬细胞培养液组RGCs最长突起长度分别为(39.70±0.71)μm和(76.19±1.56)μm,较对照组延长,差异非常显著(P＜0.01).培养5 d,RGCs最长突起长度与对照组比较差异显著(P＜0.05).结论巨噬细胞培养液可促进离体培养的RGCs存活和生长.【总页数】4页(P740-743)【作者】王艳华;王一;曾玉晓;王东武【作者单位】400038,重庆市,第三军医大学西南医院眼科;400038,重庆市,第三军医大学西南医院眼科;400038,重庆市,第三军医大学西南医院眼科;030600,山西省晋中市武警8650部队医院【正文语种】中文【中图分类】R774.1;Q959.836【相关文献】1.活化的巨噬细胞在体内对成年大鼠视神经夹伤后视网膜神经节细胞的保护作用[J], 苏颖;王继群;王峰;山艳春;徐锦堂;陈剑2.视网膜神经节细胞无血清上清培养液诱导大鼠视网膜干细胞的分化 [J], 戴敏;张青;郑志坤;沈蔚3.沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)调控p38MARK信号通路对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及机制 [J], 钱道卫;廖燕秋;李远存;郭海科;伍岚4.RU486通过Notch1/Hes-1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及机制研究 [J], 刘文强; 刘学政; 左中夫5.黄芪对保护高眼压大鼠视网膜神经节细胞的作用研究 [J], 张曙光;项杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠视网膜发育的形态学变化
大鼠视网膜发育的形态学变化
孟旭霞;牛膺筠;张燕;于晓
【期刊名称】《解剖学杂志》
【年(卷),期】2009(032)004
【摘要】本实验观察胚胎及出生后不同日龄大鼠视网膜发育的形态学变化，并与人胚胎视网膜不同阶段的发育相比较，为视网膜疾病的研究提供形态学依据。
【总页数】3页(P551-553)
【作者】孟旭霞;牛膺筠;张燕;于晓
【作者单位】青岛大学医学院附属医院眼科,青岛,266003;青岛大学医学院附属医院眼科,青岛,266003;青岛大学医学院附属医院眼科,青岛,266003;青岛大学医学院附属医院眼科,青岛,266003
【正文语种】中文
【中图分类】R651.15
【相关文献】
1.大鼠肾小体发生发育的形态学变化 [J], 宋小峰;张振兴;郭敏
2.不同病程糖尿病大鼠的视网膜血管形态学变化 [J], 李石良;陈汉平
3.大鼠晶状体胚胎发育形态学变化及HIF-1α的表达 [J], 胡迭;孟旭霞;王海韬;于志颖
4.生后早期大鼠下丘脑核团发育的形态学变化 [J], 邵珩;舒衡生;刘津平;杨振芳
5.RCS大鼠病变发育过程中视网膜神经节细胞形态学变化的研究 [J], 张辰星;阴正勤;许红霞;王仕军;姚军平
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ptc信号调控的开题报告
RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞增殖能力的变化及其Shh/ptc信号调控的开题报告
题目：RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞增殖能力的变化及其
Shh/ptc信号调控
摘要：RCS大鼠是一种具有遗传性视网膜色素变性的模型动物，但
其视网膜边缘生发区的干细胞具有一定的增殖能力。
本研究旨在研究
RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞增殖能力的变化及其Shh/ptc信号调控。
方法：将RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞分离培养，并进行免疫
荧光染色鉴定；采用CCK-8试剂盒和EdU染色法检测干细胞增殖能力；
利用荧光定量PCR检测Shh和ptc mRNA表达水平，以及Western blot
检测Shh和ptc的蛋白表达水平；最后，利用孔雀绿染色观察干细胞的
形态学变化。
预期结果：相对于野生型大鼠，RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞
的增殖能力有所下降。
同时，Shh和ptc的表达水平与RCS大鼠干细胞
增殖能力呈负相关。
此外，Shh/ptc信号通路对RCS大鼠干细胞的形态学也有一定的调控作用。
意义：本研究对深入了解RCS大鼠视网膜边缘生发区干细胞特性，
探索其治疗视网膜病变的潜力具有重要的指导意义。
不同生长期晶状体蛋白对体外培养的大鼠视网膜神经节细胞存活的促进作用
不同生长期晶状体蛋白对体外培养的大鼠视网膜神经节细胞存活的促进作用王文军;唐罗生;杨新光【摘要】Objective To study whether crystallin of rats at different growth stages has different protective effects on survival and growth of rat retinal ganglion cells (RGCs) in vitro. Methods RGCs in SD rats were cultured in DMEM/F12 containing crystallin of different age rats (1 day, 2 weeks, 6 months and 1 year). The RGCs survival time, process growth and apoptosis were observed. Results The best concentration of soluble crystallin was 10-5g/L after comparing three different concentrations. Crystallin of different growth stage rats could prolong RGCs' survival time, which increased with the increase of growth period. However, 1 d group and 2w group did not differ significantly. RGCs' apoptosis decreased after crystallin was added and it gradually decreased with prolonged growth period. Conclusion Crystallin can significantly promote the survival and growth of rat RGCs in vitro. And crystallin of 10-5 g/L is the most effective concentration among various concentrations. Crystallin of different growth stages has a different neuroprotective effect, which is enhanced with the extension of growth period.%目的观察不同生长期大鼠的晶状体蛋白对体外培养的大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells, RGCs)是否具有不同的保护作用.方法分别提取出生后1d、2周、6月、1年期的SD大鼠晶状体可溶性蛋白,加入培养的RGCs中,观察其对RGCs存活时间、突触生长状况及凋亡的影响.结果同期提取的晶状体蛋白各不同浓度作用于RGCs,促进其存活的作用有差异,最佳有效浓度为10-5g/L.不同生长期大鼠的晶状体蛋白可以延长RGCs存活时间,并随生长期增长而延长,但1d组与2周组无显著性差异.加入晶状体蛋白后RGCs凋亡减少,随生长期增长而逐级减少.结论晶状体可溶性蛋白可显著促进离体培养的RGCs的存活和生长,晶状体蛋白的最佳有效质量浓度为10-5g/L.不同生长期晶状体蛋白的神经保护作用有所不同,随生长期延长,作用逐渐增强.【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2011(032)002【总页数】5页(P175-179)【关键词】晶状体蛋白;视网膜神经节细胞;细胞凋亡;大鼠;细胞培养【作者】王文军;唐罗生;杨新光【作者单位】西安交通大学医学院附属广仁医院眼科,陕西西安,710061;西安市第四医院眼科,陕西西安,710004;中南大学湘雅二医院眼科,湖南长沙,410011;西安交通大学医学院附属广仁医院眼科,陕西西安,710061;西安市第四医院眼科,陕西西安,710004【正文语种】中文【中图分类】R774.6研究发现晶状体损伤可成功保护视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活并促进轴突再生,但作用机制并不明确。
大鼠视网膜变性相关组织形态及功能研究
大鼠视网膜变性相关组织形态及功能研究余涛;阴正勤;王仕军【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2004(023)001【摘要】目的探讨视网膜变性RCS(Royal College Surgeon)大鼠的视网膜形态及功能特点.方法应用HE染色、免疫组化染色和眼电生理技术,对比研究正常和变性两组大鼠视网膜特点.结果 1.RCS大鼠在3月龄时,视网膜外核层和感光细胞内外节完全消失;突触素免疫组化染色显示外丛状层不着色;视紫红质免疫组化染色显示原视网膜外层部位有阳性反应;胶质纤维酸性蛋白染色显示原视网膜外层部位有强阳性反应.2.RCS大鼠的闪光视网膜电图(flash electronicretinogram,FERG)a、b波振幅较正常Wistar大鼠明显降低(P<0.01).结论在形态和功能上,3月龄RCS大鼠视网膜与人类晚期视网膜色素变性极为相似,因此可用于视网膜联合移植研究.【总页数】4页(P12-15)【作者】余涛;阴正勤;王仕军【作者单位】第三军医大学西南眼科医院,重庆,400038;第三军医大学西南眼科医院,重庆,400038;第三军医大学西南眼科医院,重庆,400038【正文语种】中文【中图分类】Q95-33【相关文献】1.丹参川芎嗪对脑出血大鼠模型组织形态神经功能和血流灌注的作用研究 [J], 易智峰;方好;程谦;王杰;张宁;张川2.雄蚕益肾方对迟发性性腺功能减退症大鼠睾丸组织形态学改变及抗氧化作用研究[J], 唐雪;李波男;周海亮;何清湖;周青;熊伟;高瑞松;林群芳;周兴3.肝损伤大鼠肝组织内内皮素含量与病理形态学改变相关性研究 [J], 郭传勇;李定国;陆汉明;钟敏章;钱珍华4.去卵巢大鼠椎骨组织形态计量学、生物力学特点及相关性研究 [J], 崔燎;陈槐卿;许碧连;刘钰瑜;吴铁;陈孟诗;李良5.肝纤维化大鼠肝表面温度与肝组织形态学变化的相关性研究 [J], 江涛;吕少文;张诗武;李红;赵丽君;庞奕晖;何文彤;赵宏伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
RCS大鼠与SD大鼠的视网膜结构和光感受器形态观察
RCS大鼠与SD大鼠的视网膜结构和光感受器形态观察宋国祥;夏小平;唐香成;蔺红梅【期刊名称】《新医学》【年(卷),期】2011(42)1【摘要】Objective： To observe and compare the morphologic differences of retina and photoreceptor between SD rat and RCS rat models of inherited retinitis pigmentosa.Methods： Eight RCS rats (RCS-p+ rats) and 8 SD rats with 30 days of age were executed.Eyeballs were enucleated, fixed in stationary mixed liquid for 24 hours and processed with vertical division, alcohol dehydration, paraffin imbedding, meridian cutting as 4μm section and s taining with HE.The morphologic differences between RCS and SD rats were compared, while external nuclear layer (ONL) thickness and number were recorded.And the data was analyzed.Results: Significant thinner ONL and less photoreceptor count were revealed in RCS rats, compared with those in SD rats (P ＜ 0.05).Conclusion: ONL is thinner and the number of photoreceptors is reduced in RCS rats, which is probably directly associated with apoptosis of photorecrptor cells.%目的:比较遗传性视网膜色素变性动物模型RCS大鼠与SD大鼠视网膜及光感受器细胞形态学差异.方法:取变性中期(日龄30 d)RCS(RCS-p+ rats)大鼠及SD大鼠各8只,断颈处死后取新鲜眼球,于80%乙醇、40%甲醛和95%冰醋酸混合固定液(85:10:5)中固定24 h,垂直切开眼球,常规乙醇脱水,石蜡包埋,作经线方向4 μm的垂直切片,苏木素-伊红染色,光镜下观察两组大鼠视网膜形态和结构,显微镜测微器测定两组光感受器细胞外核层厚度,记录外核层细胞层数,并进行比较.结果:RCS大鼠和SD大鼠视网膜形态学有明显差异,主要表现为光感受器细胞层菲薄(P＜0.05),细胞核数目减少.结论:视网膜色素变性动物模型RCS大鼠视网膜厚度、外核层变薄,光感受器细胞减少,这可能与视网膜色素变性光感受器细胞的凋亡有着直接的因果关系.【总页数】4页(P32-34,封3)【作者】宋国祥;夏小平;唐香成;蔺红梅【作者单位】深圳市第三人民医院眼科,518020;中山大学附属第三医院眼科,510630;中山大学附属第三医院眼科,510630;中山大学附属第三医院眼科,510630【正文语种】中文【相关文献】1.不同MNU剂量诱导大鼠视网膜光感受器细胞损伤的视网膜电图和病理形态改变[J], 邓新国;葛坚;何梅凤;高杨;钟志强2.骨髓间充质干细胞视网膜下移植对光损伤SD大鼠光感受器细胞凋亡的影响 [J], 张钰;张弛;王薇3.早期衰老大鼠视网膜色素上皮-光感受器细胞复合体超微结构的变化 [J], 李臻;李捷;王蓉;李林;卢艳4.BMSCs视网膜下移植对大鼠视网膜光感受器细胞凋亡的影响及机制研究 [J], 王宁;孙海霞5.455～470nm波长的面阵蓝光对SD大鼠视网膜组织结构的影响 [J], 李慧丽; 陈治威; 孙小红; 董国军; 王大洪; 肖胜燕; 李小丹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠受损视神经中神经前体细胞的变化及预变性腓总神经的调节
大鼠受损视神经中神经前体细胞的变化及预变性腓总神经的调节刘芳;许家军;郭金萍;袁建明;蔺海燕【期刊名称】《神经解剖学杂志》【年(卷),期】2008(24)3【摘要】为了研究大鼠受损视神经内神经前体细胞的变化及调节,本研究建立了成年雄性大鼠视神经损伤及自体腓总神经移植模型,分正常组、损伤组和移植组,体外培养视神经的神经前体细胞,在相差显微镜下观测各组神经前体细胞神经球的形态和数目,以免疫荧光细胞化学方法对神经球细胞进行鉴定。
结果显示:正常组神经球较小、较少,多数细胞表达nestin、GFAP或半乳糖脑苷脂(GC);视神经损伤后神经球的总数有所增加,但大神经球数明显减少,nestin、GFAP或GC阳性细胞也明显减少;神经移植后增加了各类神经球数,nestin、GFAP或GC阳性细胞也明显增加。
本研究提示成年大鼠视神经内神经前体细胞较少,增殖能力较弱;视神经损伤也伤及其神经前体细胞并抑制其增殖;自体神经移植能保护神经前体细胞并促进其增殖。
【总页数】5页(P261-265)【关键词】视神经;损伤;神经移植;神经前体细胞;神经球【作者】刘芳;许家军;郭金萍;袁建明;蔺海燕【作者单位】第二军医大学基础医学部解剖学教研室【正文语种】中文【中图分类】Q421;Q959.460.2【相关文献】1.实验性外伤性视神经病变大鼠脾细胞中Th17细胞数量与视网膜中IL-17表达的变化 [J], 郑华宾;颜华;2.实验性外伤性视神经病变大鼠脾细胞中Th17细胞数量与视网膜中IL-17表达的变化 [J], 郑华宾;颜华3.Neuritin基因对视网膜神经节细胞调节以及大鼠受损视神经的修复作用 [J], 伟伟;杨佳4.外伤性视神经损伤后大鼠视网膜中细胞因子的变化和来源 [J], 聂祖庆;张琼;王鹏飞;杨丽娟;杨雯虹;王若花;马林昆;杨明;;;;;;;;5.外伤性视神经损伤后大鼠视网膜中细胞因子的变化和来源 [J], 聂祖庆;张琼;王鹏飞;杨丽娟;杨雯虹;王若花;马林昆;杨明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠视神经的发育学研究
大鼠视神经的发育学研究何家全;杨忠;蔡文琴【期刊名称】《西部医学》【年(卷),期】2015(27)4【摘要】目的观察不同发育阶段大鼠视神经的变化.方法采用常规HE染色、免疫组织化学染色及电镜技术,对28只不同发育阶段大鼠的视神经进行观察.结果新生大鼠视神经无髓,其髓鞘的形成大约在出生后第5天左右;在发育大鼠视神经中,出生后的前3天少突胶质细胞数迅速增加,而星形胶质细胞数在出生3天后迅速减少;随着视神经的不断发育成熟,视神经内成熟的少突胶质细胞数量也迅速增加.结论本研究从组织形态学上初步阐明了发育大鼠视神经的变化规律,即视神经发育成熟的过程是由少突胶质细胞逐渐形成髓鞘的过程.【总页数】4页(P486-489)【作者】何家全;杨忠;蔡文琴【作者单位】川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院神经外科,四川南充637000;第三军医大学基础部组织胚胎学教研室,重庆400038;第三军医大学基础部组织胚胎学教研室,重庆400038【正文语种】中文【中图分类】R339.14+6【相关文献】1.铅暴露对生长发育期大鼠肝、肾功能及血液学指标的损伤作用研究 [J], 徐焰;车红磊;张建彬;黄萍;柯涛;袁亚娟;郝晓柯;陈景元2.大强度耐力训练对发育期雄性大鼠骨骼肌运动终板形态学影响的研究 [J], 邹明新3.大强度持续跑训练对发育期大鼠腓肠肌外侧头肌纤维形态学影响的研究 [J], 邹明新;宋吉锐;董敏辉4.肾阳虚型大鼠子宫发育不良模型的建立及其特征研究--子宫组织形态学特性研究[J], 范扶民;陈晓钟5.雌激素膜性受体GPR30在生后雌性大鼠海马内的发育学表达与细胞内定位研究[J], 赵承军; 邓其跃; 张东梅; 蔡文琴; 张吉强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
对大鼠受损视网膜节细胞形态影响因素的研究
对大鼠受损视网膜节细胞形态影响因素的研究
雷季良;王淑玲;于恩华
【期刊名称】《神经解剖学杂志》
【年(卷),期】1993(9)2
【摘要】切断大鼠视神经后,将坐骨神经段和视神经段以不同方式植入眼玻璃体内,4周后观察视网膜节细胞的形态,并用计算机图像分析仪(IBAS-2000)测量胞体截面积。
结果表明,不同种类的移植物对受损视网膜节细胞形态影响是不同的。
在坐骨神经段植入的胞体截面积均值和特巨细胞构成比均增大。
如预先把坐骨神经挤压1周后再植入,或者一眼同时植入坐骨神经段和视神经段时,则增大更明显。
【总页数】4页(P213-216)
【关键词】视网膜节细胞;周围神经;神经再生
【作者】雷季良;王淑玲;于恩华
【作者单位】北京医科大学解剖学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R361.3
【相关文献】
1.移植新生大鼠顶盖或坐骨神经对受损视网膜节细胞影响的研究 [J], 雷季良;王淑玲;于恩华
2.Neuritin基因对视网膜神经节细胞调节以及大鼠受损视神经的修复作用 [J], 伟伟;杨佳
3.新生大鼠嗅球纤维层组织移植促进受损视网膜节细胞存活和再生的研究 [J], 赵君朋;雷季良;杨磊;王珂
4.大鼠坐骨神经移植段对受损的视网膜节细胞影响的形态学研究—存活时间因素的影响 [J], 雷季良;王淑玲;于恩华
5.大鼠坐骨神经移植段对受损的视网膜节细胞影响的形态学研究 [J], 雷季良;王淑玲;于恩华
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Wistar鼠和RCS鼠视网膜神经递质的分布和比较
Wistar鼠和RCS鼠视网膜神经递质的分布和比较潘峰;王薇;张惠蓉;由德勃;沈丽;杨磊【期刊名称】《中华实验眼科杂志》【年(卷),期】2001(019)002【摘要】目的观察正常Wistar大鼠和皇家外科学院鼠(RCS)的视网膜兴奋性神经递质谷氨酸(Glutamate)和抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)的分布和两者间的差异.方法 74天Wistar鼠和RCS鼠各6眼分为2组,免疫组织化学染色法,光镜下观察上述组织视网膜内谷氨酸和GABA的分布.结果 Wistar鼠视网膜GABA阳性免疫反应分布于视网膜内丛状层的部分神经纤维、GABA阳性免疫反应的无长突细胞和节细胞层的部分纤维.RCS鼠则分布于视网膜内丛状层的少量神经纤维、极少量GABA阳性免疫反应的无长突细胞和节细胞层的部分纤维.Wistar鼠视网膜Glutamate阳性免疫反应主要分布于外丛状层、内丛状层及节细胞层的神经纤维.RCS鼠则主要分布于内丛状层及节细胞层的神经纤维.RCS鼠视网膜中Glutamate阳性免疫反应的神经纤维的相对密度和GABA阳性免疫反应的无长突细胞的相对密度减少.结论 74天时RCS鼠视网膜中的视细胞完全萎缩,使Glutamate和GABA的分布受到影响.【总页数】3页(P138-140)【作者】潘峰;王薇;张惠蓉;由德勃;沈丽;杨磊【作者单位】北京医科大学第三临床医学院眼科 100083;北京医科大学第三临床医学院眼科 100083;北京医科大学第三临床医学院眼科 100083;北京医科大学第三临床医学院眼科 100083;北京医科大学解剖学系;北京医科大学解剖学系【正文语种】中文【中图分类】R774.1【相关文献】1."经轻方"干预肝郁模鼠和高雌模鼠的神经递质、性激素的比较研究 [J], 陈淑涛;相宇;郝世凤;朱鸿秋;张庆文2."经轻方"干预肝郁模鼠和高雌模鼠的神经递质、性激素的比较研究 [J], 陈淑涛;相宇;郝世凤;朱鸿秋;张庆文3.视细胞移植术后RCS鼠视网膜谷氨酸的分布 [J], 王薇;潘峰;沈丽;杨磊4.Wistar鼠和RCS鼠的视网膜超微结构观察 [J], 潘峰;王薇;张惠蓉;由德勃;沈丽;杨磊5.Wistar鼠和RCS鼠视网膜内一氧化氮合酶的分布 [J], 潘峰;王薇;张惠蓉;由德勃;任蕾;沈丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
视网膜神经节细胞多种培养方法的实验研究
视网膜神经节细胞多种培养方法的实验研究
胡竹林;杜蜀华
【期刊名称】《中华实验眼科杂志》
【年(卷),期】2002(020)001
【摘要】目的探讨视网膜神经节细胞(RGCs)的多种培养方法. 方法 (1)在涂有鼠尾胶原的器皿上通过调整培养液培养:①乳鼠混合及纯化的RGCs;②单层星型胶质细胞上种植纯化的乳鼠RGCs;③引产胎儿混合RGCs.(2)检验鼠尾胶原及中脑顶盖提取液(Te)对培养的乳鼠RGCs的影响. 结果 (1)混合培养的乳鼠及引产胎儿RGCs大多能存活2周以上;(2)纯化的乳鼠RGCs大多能存活48h;(3)单层星型胶质细胞上种植的纯化乳鼠RGCs能存活4周以上;(4)鼠尾胶原及Te对培养的乳鼠RGCs的贴壁及生长有明显的促进作用. 结论通过调整培养液及改善微环境能用多种方法培养RGCs.
【总页数】5页(P30-34)
【作者】胡竹林;杜蜀华
【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科,武汉,430030
【正文语种】中文
【中图分类】R774
【相关文献】
1.合用多种草药提取液促进轴突切断的视网膜神经节细胞的存活和再生 [J], CheungZH;武明媚
2.左卡尼汀对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞保护作用的实验研究 [J], 于常红;韩彦弢;曹玉;安明;时肖;杨军廷;焦俊;李胜;王春波
3.天麻钩藤饮抗大鼠视网膜神经节细胞凋亡机制的实验研究 [J], 吕繁涛;李玉洁;马科;王海燕
4.Brn-3a标记大鼠视网膜神经节细胞的实验研究 [J], 林俊;朱益华
5.荧光金逆行标记乳鼠视网膜神经节细胞的实验研究 [J], 李静波;徐尤学;方家华;张祖海
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文章编号:100025404(2005)0820749204 论著RCS大鼠病变发育过程中视网膜神经节细胞形态学变化的研究张辰星,阴正勤,许红霞,王仕军,姚军平 (第三军医大学西南医院全军眼科中心,重庆400038) 提 要:目的 研究皇家外科学院大鼠(royal college of surgeon rat,RCS)病变发育过程中视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RG Cs)形态学变化。
方法 取RCS大鼠、RCS2rdy+大鼠3、5、7、9、11周龄视网膜,固定后行视网膜平铺片,甲酚紫染色,使用LEIC A DM TRET显微镜及自带的LEIC A Q WI N系统软件,观察视网膜神经节细胞层细胞数量总数及RG Cs 亚群数量上的变化。
结果 RCS大鼠病变发育过程中,其节细胞层中细胞横径≥12μm的细胞在数量上,7、9、11周龄段相较与3周龄段出现显著减少(P<0101)。
相同周龄段上的视网膜节细胞层中,RCS大鼠与RCS2rdy+大鼠在横径≥12μm的细胞数量上相互比较,可见RCS大鼠从5周龄段开始相较于RCS2rdy+大鼠出现显著减少(P<0105),7、9、11周龄段相较与RCS2rdy+大鼠减少更为显著(P<0101)。
但是节细胞层细胞总数及横径≥9μm的细胞数量上,RCS大鼠自身发育前后对照以及与RCS2rdy+大鼠相比较没有显著差异。
结论 RCS大鼠视网膜色素变性过程中,随着光感受器细胞的变性和缺失,虽然视网膜节细胞层细胞在整体数量上没有明显变化,但是RCS大鼠视网膜病变发育早期,其节细胞层中胞体横径≥12μm的RG Cs在数量上开始出现明显缺失。
关键词:RCS大鼠;视网膜;神经节细胞 中图法分类号:R322.91;R329.24;R774.13 文献标识码:AStudy on morphological characteristics in the development of the retinal ganglion cells of RCS ratsZH ANG Chen2xing,YI N Zheng2qin,X U H ong2xia,W ANG Shi2jun,Y AO Jun2ping(Ophthalm ology Research Center,S outhwest H ospital,Third Military Medical University,Chongqing400038,China) Abstract:Objective T o study the m orphological diversity of retinal ganglion cells in the pathological develop2 ment of retinitis pigmentosa in royal college of surgeon(RCS)rats.Methods The retinal whole m ount preparations of RCS and RCS2rdy+rats of3,5,7,9,11weeks were stained by cresyl violet to count the number of the different subpopulation of the RG Cs and the number of all the cell of the entoretina.Re sults In the development of the reti2 na of the RCS rats,there was significant difference of the am ount of the cell diameter m ore than12μm in the ganglion cell layer between the postnatal3weeks and the postnatal7,9,11weeks.There was als o significant difference of the am ount of the cell diameter m ore than12μm in the ganglion cell layer between RCS and the RCS2rdy+rats of differ2 ent ages.But there was no significant difference between all the cell of the entoretina and the cell diameter m ore than 9μm.Conclusion In the pathological development of retinitis pigmentosa,accom panied with the loss of the sens ory retinal neuron,s ome kind of the subpopulation of the retinal ganglion cells have lost,although the am ount of all the cell of entoretina was stable. K ey w ords:royal college of surgeon rat;retina;ganglionic cells 视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)是一组导致进行性感光细胞变性和视觉障碍的遗传病征候 基金项目:国家自然科学基金资助项目(302704577) Su pported by the National Natural S cience F oundation of China(302704577) 作者简介:张辰星(1977-),男,重庆市人,硕士研究生,医师,主要从事视觉发育基础方面的研究。
电话:(023)68754403 通讯作者:阴正勤,电话:(023)68754401,E2mail:Zqyin@ 收稿日期:2005201226;修回日期:2005203217群,是致盲的重要疾病。
既往的研究认为,在视网膜的变性过程中,当色素细胞及光感受器细胞发生变性和缺失后,其视网膜内层神经元仍然能够长期保持相当数量的正常细胞结构和突触连接1。
尤其在黄斑区,即使是在变性晚期仍有相当数量的神经节细胞存活并维持正常的突触结构2。
Marc等3人为将视网膜色素变性分为3个阶段,并认为随着光感受器细胞开始出947第27卷第8期2005年4月 第 三 军 医 大 学 学 报ACT A AC ADE MI AE ME DICI NAE MI LIT ARIS TERTI AEV ol.27,N o.8Apr.2005现变性和缺失,节细胞早期即出现死亡。
但是随着异位细胞的迁入,星型胶质细胞的增生,这种节细胞数量上的缺失被掩盖以致难以发现,故而观测到的轻微的节细胞数量上的改变可能都意味着比较严重的节细胞数量缺失。
神经节细胞是视网膜内惟一向高级视觉中枢投射的神经元,研究其在视网膜变性疾病中在形态学和数量上的变化,可以为阐明视网膜变性的机制奠定基础,并为将来的视网膜移植研究提供一定的依据。
皇家外科学院大鼠RCS为遗传性视网膜色素变性的经典动物模型,该鼠患有一种因视网膜色素上皮细胞吞噬视细胞外节膜盘能力的缺陷,致使视细胞碎屑堆积,最终导致光感受器细胞进行性变性为特征的常染色体隐性遗传病。
其发病机制和转归与人类有相似点。
本研究,对RCS大鼠视网膜变性进程中神经节细胞进行数量上的分析,为进一步阐述视网膜色素变性病变过程及发病机制提供一定的理论依据。
1 材料与方法1.1 实验动物 出生后RCS及正常对照RCS2rdy+大鼠,前者为变性鼠,后者为正常对照鼠。
两种大鼠均无色素沉着。
两种大鼠3、5、7、9、11周龄段各3只,雌雄不限,由第三军医大学大坪医院野战外科研究所实验动物中心提供,符合国家医用动物实验标准,标准号为清洁级。
1.2 材料及器械 麻醉液:20%乌拉坦;固定液:4g多聚甲醛+30g蔗糖Π011 m olΠL P B(pH712)100ml;染色剂:甲酚紫液浓度1%,甲酚紫1gΠ100ml蒸馏水;甲酚紫由SIG M A公司提供;载玻片:玻片浓硫酸浸泡24h以,生理盐水漂洗,乙醇漂洗晾干后,多聚赖氨酸包埋;显微镜:型号LEIC A DM TRET;分析软件LEIC A Q WI N,运行环境WI N98。
1.3 方法1.3.1 视网膜平铺片的制备和处理 20%乌拉坦按照5mlΠkg腹腔注射麻醉大鼠。
取出大鼠双侧眼球,显微镜下沿角巩膜缘剪除角膜,去除晶体虹膜及玻璃体组织。
迅速置于固定液中,恒温4℃固定48h后,解剖显微镜下完整剥离完整视网膜,尽量剥离玻璃体,去除脉络膜组织及色素上皮层。
剥离好之视网膜于011m olΠL P B(pH712)液中漂洗。
视网膜上、下、颞、鼻4个方向向心剪开,平铺于多聚赖氨酸处理之玻片。
常温下甲酚紫液染色30min。
显微镜下观察显色后,011m olΠL P B(pH 712)小心洗去多余甲酚紫。
乙醇、二甲苯梯度脱水去脂后,中性树脂封片。
1.3.2 电脑处理图像并分类细胞计数 LEIC A DM TRET倒置显微镜下(物镜×20,目镜×10),在视网膜铺片4个象限中的每个象限各取3个取景框,使用LEIC A Q WI N操作软件将图像输入与LEIC A DM TRET显微镜相连的电脑。
使用LEIC A DM TRET显微镜操作系统中自带的细胞计数软件,每个取景框选取3个单位面积计数框(单位面积计数框以μm2计),在选定的单位面积计数框中,按照细胞横径≥12μm、≥9μm及全部细胞3种标准分别计数。
以均数估算整个视网膜平铺片单位面积细胞数量[( x±s)Πmm2]。
1.4 统计方法 采用SPSS10.1软件包,两组以上均数比较采用单因素方差分析,两组间均数比较采用独立样本t检验。
2 结果2.1 视网膜平铺片甲酚紫染色和LEIC A DM TRET处理图像 RCS大鼠3周龄段获得完整视网膜铺片4个,5、7、9、11周龄段各5个。
RCS2rdy+大鼠3、7、9周龄段获得完整视网膜铺片各5个,5周龄段3个,11周龄段获得4个。
所有视网膜铺片甲酚紫染色后很好的显示了视网膜节细胞层所有细胞(图1),经过LEIC A DM TRET显微镜输入电脑后的图像满足计数要求。
用软件LEIC A Q WI N本身自带的计数系统,选取单位面积计数框(μm2),测量胞体横径,按照细胞横径≥12μm、≥9μm及全部细胞3种标准,分别计数框内满足不同标准的细胞数量(图2)。