溶液配制参考

一、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事项1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，G．R．）、分析试剂（Antalytical reagent，A．R．）化学纯（Chemical pure，C．P．）和实验试剂（Laboratory reagent，L．R．）等等。

工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。

2．药品称量要精确。

3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在~之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。

４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。

（二）（1/15）Mol/L磷酸缓冲液1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。

2．１/15Mol/L磷酸氢二钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，.）9.47g （或者Na2HPO4·2H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。

3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。

附表1 磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO4pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO4（三）L PB液附表2 LPB液配制法pH L Na2HPO4（ml）L NaH2PO4（ml）Na2HPO4·2H2O分子量= L溶液含26.3g/L。

Na2HPO4·12H2O分子量= L溶液含53.7g/L。

NaH2PO4·H2O分子量= L溶液含20.7g/L。

NaH2PO4·2H2O分子量= L溶液含23.4g/L。

（四）L PB缓冲液附表3 L PB缓冲液配制法pH Mol/L Na2HPO4（ml）L NaH2PO4（ml）L Na2HPO4·2 H2O溶液35.1g/LNa2HPO4·12 H2O溶液含71.64g/LLNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/LNaH2PO4·2 H2O溶液含31.21g/L欲配L PB缓冲液则在L PB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。

欲配制PBS液时，则在溶液中加％的NaCl溶液即可。

（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）（L PH ）NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g（如为Na2HPO4·12H2O，则为2.89g）KH2PO4 0.2g将上述试剂依次溶于 1 000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。

此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。

（六）硼酸盐缓冲液（Borate saline buffer）1．硼酸（Ｈ3BO3）L硼酸：硼酸12.37g加水至1 000ml。

2．硼砂（Na2B4O7）L硼砂：硼砂19.07g加水至1 000ml。

附表4 不同pH的L硼酸缓冲液配制法pH L硼砂（ml）L硼酸（ml）pH L硼砂（ml）L硼酸（ml）（七）巴比妥缓冲液1．离子强度L巴比妥缓冲液巴比妥钠 47.6g蒸馏水 3 000mlHCl（ N HCl=193ml浓HCl加1 807ml蒸馏水）⑴将4.76g巴比妥钠溶于3 000ml蒸馏水。

⑵加 N HCl 55ml。

⑶用HCl调节pH到，并加蒸馏水至4 265ml。

2． L巴比妥缓冲液巴比妥 1.84g巴比妥钠 10.30g加蒸馏水至 13． L巴比妥缓冲液巴比妥 1.66g巴比妥钠 12.76g加蒸馏水 1（八）L醋酸盐缓冲液见表附表5附表5 L醋酸盐缓冲液配制法pH LTris（ml）LHCl（ml）pH LTris（ml）LHCl（ml）23℃37℃23℃37℃25525252525252525252525252525（九）三羟甲基甲烷—盐酸缓冲液（Tris—HCl缓冲液）不同pH，LL三羟甲基氨基甲烷加х，加水稀释至100ml（见下表）附表6 Tris—HCl缓冲液配制法pH LTris(ml)(ml) pH LTris(ml)(ml)23℃37℃23℃37℃2552525252525252525252525252525252525三羟甲基氨基甲烷（Tris）分子量=L三羟甲基氨基甲烷：Tris24.23g，加水至1 000ml。

：取，加水至1 000ml。

（十）L 碳酸盐缓冲液NaHCO3 3.70gNa2CO3 0.60g溶于蒸馏水中即得。

不用时塞紧瓶塞，以免吸收空气中二氧化碳使PH下降。

最好小量配制。

（十一）甘油磷酸缓冲液1．配制磷酸缓冲液L Na2HPO4NaH2PO4混合即可2．9份甘油与1份磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液。

用途：用于免疫荧光试验。

（十二）Hank’s液1．贮存液NaCl 80.00gKCl 4.00gNa2HPO4·12 H2O 1.52gKH2PO4 0.60g葡萄糖 4.00g％酚红液双馏水加至115℃高压灭菌15min，冰冻保存。

2．工作液贮存液 1份双馏水 9份115℃高压灭菌15min。

临用时用灭菌的％NaHCO3液调pH值至左右（溶液呈橙红色）。

（十三）萘（钠）氏试剂（Nessler’s reagent）配方1：氯化汞 6.0g碘化钾 12.4g20％NaOH 30ml加蒸馏水至 100ml配方2：碘化汞 11.5g碘化钾 8g蒸馏水 50ml（完全溶解后）过滤，加20％NaOH 50ml。

用途：检测溶液中氨离子。

（十四）阿氏（Alsever’s）液葡萄糖 2.05g柠檬酸钠 0.80g氯化钠 0.42g蒸馏水 100ml溶解后，以10%柠檬酸调节pH至，过滤，分装，10磅10min灭菌，4℃保存。

（十五）青、链霉素混合液（简称S．P．液或双抗液）青霉素（40万U） 5支链霉素（200万μg） 1支分别溶于100ml灭菌无离子水中或共同溶于200ml灭菌无离子水中，混合后分装小瓶，置-10℃~-20℃冰箱保存备用（1万单位μg/ml）。

临用时，按1%的量加入营养液或其他溶液中，最后浓度是青霉素100U/ml，链霉素100ug/ml。

（十六）洗液（清洁液）配方1：重铬酸钾 150g蒸馏水 300ml浓硫酸 3 000ml将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩埚中加热溶解，然后慢慢加入浓硫酸，边加边搅拌，见发热过剧则稍停，冷却后再继续加。

此为强洗液。

盛清洁液的容器要坚固，上加厚玻璃盖，操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套，以保安全。

洗液一旦变绿，表示铬酸已经还原，失去了氧化能力，不宜再用。

如将这样洗液加热，再加适量重铬酸钾，又可重新使用。

配方2：浓硫酸 50%蒸馏水 50%重铬酸钾 5%此为中等强度洗液。

配方3：重铬酸钾 100g蒸馏水 1 000ml加热溶解，冷却后缓慢加入工业硫酸 100ml此液为弱洗液，为棕红色。

使用此液时，必须预先用热肥皂水将玻璃器皿洗净，经自来水冲洗，沥干然后才能浸入，否则该洗液很快失效。

二、常用化合物的分子量及当量附表7 常用化合物的分子量及当量化合物分子式分子量当量盐酸HCl氢氧化钠NaOH氢氧化钾KOH草酸H2C2O4氯化钠NaCl氯化钾KCl硫酸H2SO4醋酸CH3COOH磷酸H3PO4磷酸二氢钠NaH2PO4磷酸氢二钠Na2HPO4磷酸二氢钾KH2PO4磷酸氢二钾K2HPO4C10H14N2O8Na2二乙胺四乙酸二钠（EDTA—Na2）硝酸HNO3碘I2碘化钾KI硼酸H3BO3碳酸氢钠NaHCO3碳酸钠Na2CO3247四、克分子浓度用1L（1 000ml）溶液中所含溶质的克分子数表示溶液的浓度叫做克分子浓度。

通常用字母M表示。

物质的量用做单位来表示，在数值上与物质的分子量相同，这个量叫做克分子。

例如氯化钠的分子量为，则1个克分子氯化钠的重量是58.44g。

将58.44g氯化钠溶解于水，配制成1L溶液，就是1Mol/L氯化钠溶液。

NaH2PO4·H2O的分子量为,则其1个克分子的重量是138.0克。

将·H2O溶解于水，配制成1L溶液，就是L磷酸二氢钠溶液。

五、离心机与离心力习惯上把每分钟4，000转的离心机称为低速离心机，每分钟20，000转的离心机称为高速离心机，这类离心机有冷冻装置。

每分钟20，000以上的离心机称为超速离心机，为了减少空气的摩擦阻力，它的转头是在真空中运转的。

由于许多样品（如病毒等）都是极小的颗粒或溶质，它们在重力场中沉降速度极慢，同时还存在扩散作用，只有超速离心所产生的强大的离心力场，才有可能它们彼此分离开。

过去的资料中，所用离心条件多用转数表达，现在国际资料中已经改用相对离心力（Relative Centrifugal Force，RCF）表示，因为离心力不仅为转速的函数，也是离心半径的函数。

转速相同时，离心半径越长，离心力越大，故仅以转速表达离心力是不科学的。

相对离心力的单位用重力加速度Gravity，简写为“g”表示。

G=9.8米/秒2离心力和转速的关系附图—1 离心力计算表。