实验五尿HCG检测(金标法)及家兔心脏采血(精)

5、将抽出的血液放于清洁干燥的试管中（每小 组4支）。抽完后在试管上标记被免疫的抗原 种类、班级、小组号。 6、血液凝固后分离血清，4℃冰箱中保存备用。

注意事项 1、固定好家兔，找准心脏位置（剑突上两横 指偏左）。 2、抽血时速度不要过快，容易导致家兔死亡。 3、做好自我保护，防止抓伤或咬伤。 4、整理桌面！
实验五
Part1
尿HCG检测
（金标法）
主讲：胡荣
HCG概述


1、HCG（人绒毛膜促性腺激素）； 2、是妊娠期胎盘滋养层细胞分泌的糖蛋白激 素，有α和β两种亚基，α亚基与卵泡刺激素
（FSH）、黄体生成素（LH）和促甲状腺素 （TSH）相似，β亚基是其特有的； 3、妊娠后体内浓度增加； 4、β-HCG是诊断滋养层细胞肿瘤敏感性最高的 标志物。

（一）免疫层析试验双抗体夹心法测尿HCG原理图
B
C
T
R
A
A处：吸水材料 B处：滴加尿液 C处：金标抗α-hCG单抗（来源于小鼠） T处：包被抗β-hCG单抗 R处：包被抗小鼠IgG 阳性：T\R两条带； 阴性：R一条带
（二）试剂及器材
胶体金早早孕检测试纸、尿标本（晨尿最佳） （三）实验方法
1:32 2＋
2＋ 2＋ 3＋ 2＋
1:64 ＋
＋ ＋ 2＋ 3＋
1:128 ＋
＋ ＋ ＋ ＋
1:256 ＋
＋ ＋ ＋ ＋
不稀释 4＋
1:2 1:4 1:8 1:16 2＋
1:32
1:64
＋
2＋
2＋
＋
＋
2＋
注：表中红色者表示出现沉淀最快，二者最适比例始终是1:4。
（五） 注意事项
1.当HCG浓度很高时，检测线颜色可能变浅； 2.灵敏度不高； 3.酒精可能干扰实验结果，不宜饮酒后使用； 4.子宫肌瘤、葡萄胎或更年期HCG含量较高， 可能会出现阳性结果。
Part2
家兔心脏采血
主讲：胡荣

实验材料 一次性塑料手套、剪刀、碘酒、酒精、注射器 （20mL）、大试管4支（清洁、干燥，自己准 备）
实验对象 已免疫伤寒杆菌“O”抗原的家兔【每班12只】

家兔心脏采血步骤
1、固定家兔并定位心脏位置 剑突上两横指偏左，心脏搏动最强处。 2、去毛消毒 分别用碘酒和酒精消毒。 3、检查注射器（20ml） 4、抽血 将稍微后拉的注射器针头由剑状软骨左侧呈 30-45°刺入心脏，当家兔略有颤动时，表明针头 已刺入心脏，然后轻轻的抽取，如有回血，即可抽 血，若无回血，可将针头退回一些，重新插入心腔 内，见回血即可抽血。
第6号染色体短臂
B
DP
A
B
DQ
A
B
B
DR
A
B C4
A
Bf
C2
B
C
A
HLAⅡ百度文库基因区
HLAⅢ类基因区
HLAⅠ类基因区
HLAⅠ类分子 肽结合区
HLAⅡ类分子
免疫球蛋白样区
跨膜区
胞浆区
抗体 稀释
抗原稀释
不稀释 1:2 4＋
4＋ ＋
1:4 4＋
4＋ ＋
1:8 3＋
3＋ 3＋ ＋
1:16 3＋
3＋ 3＋ ＋
1、待测样品、检测试纸平衡至室温。 2、将测试纸有箭头的一端插入尿液标本中 （不可超过MAX标志线），5秒后取出平放，5分 钟内观察显示结果。
（四） 结果报告
姓名 ；尿HCG 。
前带
游离抗体 游离抗原 免疫复合物沉淀
等价带
后带
+ -
+ -
+ -
+ -
+ -
-
-
+
- + +
加入抗原
着丝点
HLA复合体