最新绿叶中色素的提取和分离
高考生物实验突破 专题07 绿叶中色素的提取和分离(含解析)-人教版高三全册生物试题
专题07绿叶中色素的提取和分离1.提取绿叶中的色素①原理：绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中。
②步骤取材：称取5 g 新鲜绿叶 ↓研磨：剪碎叶片，放入研钵中，加少许二氧化硅和碳酸钙，再加入10 mL 无水乙醇，迅速、充分研磨 ↓过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布，将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤 ↓收集：用小试管收集色素滤液，及时将试管口用棉塞塞严 2.分离绿叶中的色素①原理：不同色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢。
②步骤制备滤纸条⎩⎪⎨⎪⎧剪滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与直径的 滤纸条，并在一端剪去两角↓铅笔画线：在距滤纸条去角的一端1 cm 处用铅笔画一条细的横线↓画滤液细线⎩⎪⎨⎪⎧取滤液：用毛细吸管吸取少量滤液↓画线：沿铅笔线均匀地画出一条细线↓重复画线：待滤液干后，重复画细线1～2次↓分离绿叶中的色素：将适量的层析液倒入试管中，将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)轻轻插入层析液中，随后用棉塞塞紧试管口↓观察并记录结果：滤纸条上出现4条色素带3.实验中的材料试剂及操作目的考点一：实验的基本原理和过程分析例一、甲、乙、丙、丁四位同学，在利用新鲜绿色菠菜叶为实验材料，用层析法进行叶绿体中色素的提取和分离实验时，由于操作不同，得到了四种不同的层析结果(如图所示)。
下列分析错误的是( )A．甲可能误用蒸馏水作提取液和层析液B．乙可能是因为研磨时加入无水乙醇过多C．丙可能是正确操作得到的理想结果D．丁可能是研磨时未加入CaCO3【答案】 C【解析】甲图中看不到色素带，叶绿体中的色素属于有机物，易溶于酒精等有机溶剂，难溶于水，所以出现甲图结果可能是误用蒸馏水作提取液和层析液导致的，A项正确；乙图中每种色素都有，但含量很少，可能是无水乙醇过多，色素浓度太低导致的，B项正确；丙图中每种色素都有，但是胡萝卜素和叶黄素含量较多，叶绿素a和叶绿素b含量较少，这不是正确操作得到的理想结果，C项错误；丁结果中叶绿素a和叶绿素b含量很少，可能是研磨时未加入CaCO3，破坏了叶绿素类物质造成的，因为与类胡萝卜素相比，叶绿素更易受到破坏，D项正确。
绿叶中色素的提取和分离
实验结果分析
胡萝卜素（橙黄色）
叶黄素萝卜素
叶绿素
分析实验结果： 1、叶绿体中含量最多的色素是 叶绿素a 。 2、溶解度最大的色素是 胡萝卜素 ，最小的是 叶绿素b
。
实验拓展
绿叶中的色素主要吸收红光和蓝紫光
菠菜叶色素分离结果
绿叶中的色素
形成和 破坏的原因
武威三中
张玉才
一. 实验原理：
1. 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，可以用无水 乙醇提取绿叶中的色素。
2. 绿叶中的色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随层析液在 滤纸条上扩散速度快。
二.目的要求：
1.初步掌握绿叶中的色素提取和分离的方法。 2.探索绿叶中有几种色素。
叶绿体的结构
基粒：囊状结构 的薄膜是绿色的。
基 粒
类囊体
注意事项：
1、取新鲜、深绿色叶片，去除粗大的叶脉
2、将叶片剪碎后，迅速、充分的研磨
3、过滤后及时用棉塞塞紧试管口
4、滤液细线要细且直
5、滤液细线不能触及层析液
培养皿
铅笔线
滤液细线 层析液
注意事项分析
1、石英砂、碳酸钙在实验中起什么作用？ 石英砂：研磨充分 碳酸钙：防止叶绿素被破坏 2、加入丙酮（无水乙醇）的作用是什么？ 叶绿体中色素能够溶解在丙酮中（色素提取的原理） 3、为什么要迅速研磨？ 防止丙酮挥发 4、为什么必须及时用棉塞塞紧试管口？ 防止丙酮挥发 5、为什么色素会在滤纸条上分离？ 不同色素在层析液中的溶解度不同，溶解度大的色素随层析液在滤纸条上的 扩散速度快（色素分离的原理） 6、为什么将干燥的滤纸的一端剪去二个角？ 保证层析液同步到达滤液细线 7、为什么滤液细线越细、越直越好？ 保证滤液细线上的色素可以同时向上扩散，避免色素带重叠 8、为什么画滤液细线需要重复2-3次？ 保证更多的色素转移至细线处 9、为什么滤液细线不能触及层析液？ 防止色素溶解在层析液中 10、为什么烧杯要盖培养皿？ 防止丙酮挥发
绿叶中色素的提取和分离实验结果
绿叶中色素的提取和分离实验结果本实验以水蒸汽处理后从叶片中提取和分离绿叶中色素为主要步骤。
一、实验准备1.调整实验设备：搭建绿叶中色素分离和取样装置，主要包括真空室、汽蒸汽发生器，管棉，真空调节阀，滤筒等。
2.准备实验试剂：调制20 ml的0.1mol/L硝酸钠溶液，调制5 ml的2.0mmol/L次磷酸盐溶液，以及绿叶。
3.收集试剂溢出物：准备抽引器，吸管，滤纸和容器，收集提取中色素时可能溢出的物质以进行分析。
二、实验步骤1. 取一定量的绿叶放入真空室内，将真空室和汽蒸汽发生器连接重新置放，并将次磷酸盐溶液和硝酸钠溶液分别置入空气箱和真空室中，开启真空泵，并调整真空调节阀使汽蒸汽发生器持续稳定运行。
2. 稀释真空室内空气箱中的汽蒸汽，通过管棉将硝酸钠溶液和次磷酸盐溶液内的汽蒸汽持续吹入真空室内，使绿叶吸收汽蒸汽的正、负离子中的染料，并将染料转变为溶液。
3.将真空室内的汽蒸汽中色素提取好后，使用抽引器将色素提出，测定提取的绿叶中色素的稀释度，用滤纸将色素提取溶液过滤，将容器放置在蒸发试管中静置蒸发，研究不同温度下色素的分离效果。
4. 用不同定量的慢性萃取溶剂，将提取物萃取出来，改变萃取时间以及溶剂的比例，用浓度重现来研究色素的稀释度变化情况。
3.结果分析1.检测提取的绿叶中色素的稀释度，色素的稀释度可以衡量提取叶片中色素的效率。
2.通过不同温度对色素的分离效果，可以了解不同温度下提取色素的成功率，并得到适合提取色素的温度参数。
3.通过萃取时间及溶剂比例的研究，可以得出检测不同溶剂和萃取时间下色素稀释度和变化情况，并对样本做出具体分析。
结论：本实验中，我们通过水蒸汽处理及慢性萃取的方法，成功的从绿叶中提取和分离出色素，可以根据实验结果及检测指标得出本次实验获得了较为理想的结果。
叶绿体色素提取与分离实验
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能的色素和结构
（一）捕获光能的色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素的提取和分离实验中在滤纸条上扩散速度 最快的色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
4、在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素进行色素分析， 会得到近似，同心的四个色素环，排到在最里圈的色素是 （） A、橙黄色 B、蓝绿色 C、黄色 D、黄绿色
练习
1、在植物实验室的暗室内，为了尽可能地降
低植物光合作用的强度，最好安装（ B）
A、红光灯 B、绿光灯 C、白炽灯 D、蓝光灯
2、为提高大棚蔬菜的产量，哪项措施更有效
5、下图是叶绿体色素的提取与分离实验中所用的材料与用具。请回答： 分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色的溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表示加，“—”表示不加。
处理 二氧化硅（少量） 碳酸钙（少量） 95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
C、安装绿色透光薄膜 D、安装无色透光薄膜
练习
3．在圆形滤纸的中央点上粘叶绿体的色素滤液， 进行色素分析，会得到近似同心环状的四个色素圈，
排在外圈的色素呈 [ A]
叶绿体中色素的提取与分离
A. ①②③④ C. ④②③①
B. ②④①③ D. ③②①④
捕获光能
色素
色素的种类与颜色：
色素 种类
含量
叶绿 约占 素 3/4
名称 叶绿素a 叶绿素b
颜色
吸收光
蓝绿色 主要吸收红 黄绿色 光和蓝紫光
类胡 萝卜 素
约占 黄色
主要吸收蓝 紫光
画滤液细线 毛细吸管沿铅笔线画一条直的 滤液细线 .
色素分离
干燥后， 重复一两 次 将滤纸条轻轻插入 层析液 中
滤纸条上呈 现四条颜色、 宽度不同的 色素带
用培养皿盖住烧杯
胡萝卜素： 橙黄 色 叶黄素： 黄 色 叶绿素a： 蓝绿 色 叶绿素b： 黄绿 色
1.在提取绿叶中的色素时，研磨绿叶碎片需要
加入碳酸钙，目的是 （ B ）
捕获光能
色素
色素的吸收光谱
延伸拓展
色素的分布： 叶绿体的类囊体薄膜上
色素的作用： 吸收、传递、转化光能
不同颜色的大棚对光和效率的影响： ① 无色透明大棚光和效率最高； ② 绿色塑料大棚光和效率最低。 ③ 在农业生产中，有些温室中悬挂红色或蓝 色光的灯，可有效提高蔬菜产量。
甲＞乙＞丙＞丁
叶绿体中色素
实验目的：
提取和分离
1) 进行绿叶中色素的提取和分离； 2) 探究绿叶中含有几种色素。
材料用具：
新鲜的绿叶、干燥的定性滤纸、无 水乙醇、层析液、二氧化硅、碳酸 钙、毛细吸管、研钵、剪刀、量筒 等。
一、提取绿叶中的色素
1.取材： 5g绿叶+剪碎+研钵 2.研磨： 二氧化硅+碳酸钙+10ml无水乙醇 3.过滤： 玻璃漏斗+单层尼龙布
绿叶中色素的提取和分离
实验原理：
1.提取：绿叶中的色素都能溶解于有机溶剂无水乙醇 中，所以可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。
2.分离：纸层析法
绿叶中的色素不止一种，它们都能溶解在层析液中。 然而，它们在层析液中的溶解度不同。溶解度高的随 层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。这样滤液中不 同的色素就随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。
光能→ATP中活跃的化学能 ATP中活跃的化学能→(CH2O)中稳 定的化学能
①光反应为暗反应提供还原剂[H]、能量ATP；暗反应为光反应提供
关系 ADP和Pi；
小结：
叶绿体是进行光合作用的场所。它内部的 巨大膜表面上，不仅分布着许多吸收光能 的色素分子，还有许多进行光合作用所必 需的酶。
与生活的联系
根据不同色素对不同波长的光的吸收不同 的特点，想一想温室或大棚种植蔬菜时， 应选择什么颜色的玻璃、塑料薄膜或补充 光源？
无色最好，其次是红光或蓝紫光， 最次是绿光
1．研磨绿叶时要加入碳酸钙，其目的是
(C)
A．使各种色素溶解在丙酮中 B．使研磨充分
C．防止色素分子被破坏 D．加速研磨
2．对“叶绿体中色素的提取和分离”实验中，下列描
－
＋
－
注：“＋”表示加；“－”表示不加。试回答： （1）A处理得到的溶液颜色是_黄_绿__色，原因是_部__分__叶__绿__素__受__到__破_。坏 （2）B处理得到的溶液颜色是___ __，原因是_叶__绿__素__不__溶__于__水__。
（3）C处理得到的溶液颜色_深__绿_ 色__，原因是大__量__叶__绿__素__溶__于__乙__醇。中
铅笔线
画铅笔细线
剪角的目的：防止两侧色素扩散快，色素带不整齐
高一生物必修一绿叶中色素的提取和分离
高一生物必修一绿叶中色素的提取和分离
绿叶中色素的提取和分离是生物学中常见的实验。
这些色素包括叶绿素和类胡萝卜素等，它们在植物中扮演着重要的角色。
这里我们将介绍一种用酒精提取绿叶中色素的实验方法。
实验材料：
绿叶片、95%酒精、滤纸、试管、注射器、酒精灯、热水浴
实验步骤：
1.取一片新鲜的绿叶，用滤纸将叶面的水分吸干。
2.将绿叶放置于试管中，加入适量的95%酒精，使酒精淹没叶片。
3.用注射器搅拌试管中的溶液，使绿叶中的色素充分溶解到酒精中。
4.将试管放置于酒精灯上，加热使溶液沸腾，继续加热2-3分钟。
5.将试管从酒精灯上取下，放入热水浴中冷却。
6.待溶液冷却后，用滤纸过滤，将滤液收集到干净的试管中。
7.观察滤液的颜色，可以看到其中含有绿色的叶绿素和黄色的类胡萝卜素等色素。
实验原理：
绿叶中的色素可溶于有机溶剂如酒精中，通过加热使其溶解速度加快。
经过过滤等步骤，可将色素分离出来并得到纯净的溶液。
实验注意事项：
1.实验中要注意安全，避免烧伤或其他意外。
2.使用的酒精必须是95%的，以保证溶解效果。
3.加热时要注意控制温度，避免溶液沸腾溢出。
4.过滤时要用干净的滤纸，避免杂质进入溶液中。
总结：
本实验通过酒精提取的方法，成功地从绿叶中分离出了色素，可以观察到叶绿素和类胡萝卜素等色素。
这种方法简单易行，是初学生物实验的一种不错的选择。
绿叶中色素的提取和分离
C
（P40、2）在下图中，图1、图2为不同材料叶绿体中色素的层 P40、 在下图中， 析结果（示意图）， ），图 析结果（示意图），图3、图4为不同条件下水稻光合作用强度的 变化曲线，其中正确的是 变化曲线，
A
（P40、12）分别在A、B、C三个研钵中加2克剪碎的新鲜菠菜绿叶， P40、12）分别在A 三个研钵中加2克剪碎的新鲜菠菜绿叶， 并按下表所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液， 并按下表所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液， 深绿色、黄绿色（或褐色），几乎无色。试回答： ），几乎无色 即：深绿色、黄绿色（或褐色），几乎无色。试回答： 处理 SiO2（少量） 少量） CaCO3（少量） 少量） A ＋ — B ＋ ＋ — ＋ C ＋ ＋ ＋ —
实验： 实验：绿叶中色素的提取和分离 实验原理： 实验原理： 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中， 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中， 所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。 所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。 绿叶中的色素不只一种， 绿叶中的色素不只一种，它们都能溶解在层析液 然而，它们在层析液中的溶解度不同： 中。然而，它们在层析液中的溶解度不同：溶解 度高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。 度高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。 这样，几分之后，绿叶中的色素就会随着层析液 这样，几分之后， 在滤纸上的扩散而分离开。 在滤纸上的扩散而分离开。
胡萝卜素（橙黄色） 胡萝卜素（橙黄色）
类胡萝卜素
1 /4
叶黄素（黄色） 叶黄素（黄色） 叶绿素a (蓝绿色 叶绿素a (蓝绿色) 蓝绿色)
叶绿素
3 /4
叶绿素b 黄绿色） 叶绿素b（黄绿色）
色素含量：叶绿素a 叶绿素b 叶黄素﹥ 色素含量：叶绿素a﹥叶绿素b ﹥叶黄素﹥胡萝卜素
高中生物绿叶中色素的提取和分离_绿叶中色素的分离原理实验要点及注意事项
实验：绿叶中色素的提取和分离•绿叶中色素的提取和分离：1．原理(1)各种色素能溶解在有机溶剂（无水乙醇等）中形成溶液，使色素从生物组织中脱离出来。
(2)各种色素都能溶解在层析液中，但在层析液中的溶解度不同。
溶解度大的色素分子随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，因而不同色素可以在滤纸上通过扩散分开，各种色素分子在滤纸上可形成不同的色素带。
2．实验过程观察结果：滤纸条上色素带有四条，由上到下分别是胡萝卜素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶绿素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶绿素a、黄绿色的叶绿素b，如图•实验要点及注意事项：1、实验中几种化学药品的作用①加入少量SiO2，可破坏细胞结构，使研磨更充分，便于色素完全释放。
②加入少量CaCO3，，可以中和细胞内的有机酸，防止有机酸夺取叶绿素中的镁离子使叶绿素破坏，从而起到保护色素的作用。
但SiO2.和CaCO3的加入量要少，否则滤液杂质多、混浊、颜色浅，实验效果差。
2、实验成功的关键①叶片要新鲜，颜色要深绿，保证色素的含量。
②研磨要迅速充分。
叶绿素不稳定，易被破坏，时间过长或研磨不充分都会导致色素的量太少而使实验失败。
③滤液细线不仅要求细、直、均匀，而且要求含有较多的色素（可以重复画二至三次）。
④滤液细线不能触及层析液，否则色素溶解到层析液中，将得不到清晰的色素带。
3、注意事项①制备滤纸条时，要剪去两角，这样可以减小边缘效应，使色素在滤纸上扩散均匀，便于观察实验结果。
②收集滤液后，要及时用棉塞将试管口塞紧，防止滤液挥发。
4、滤纸条上的滤液细线，不能触及层析液的原因：滤纸条上的滤液细线如触及层析液，滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中，实验就会失败。
5、提取和分离叶绿体色素的关键：（1）提取叶绿体色素的关键是：①叶片要新鲜、浓绿；②研磨要迅速、充分；③滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以免滤液挥发。
（2）分离叶绿体色素的关键是：①是滤液细线要细且直，而且要重复划几次；②是层析液不能没及滤液线。
5.4.1绿叶中色素的提取和分离实验
思考：
• 3.色素带的宽窄代表什么？ 色素带越宽，代表色素含量越
多，反之越少
• 4.色素带在滤纸条上的排布是怎样的？
从上到下分别是：胡萝卜素、 叶黄素、叶绿素a、叶绿素b 在层析液中的溶解度：胡＞黄＞a＞b
巩固练习
因为叶绿素中吸收最多的 是蓝紫光和红光
• 为什么不使用发绿色光 的灯管作补充光源？
叶绿素对绿光吸收最少
红色日光灯
现代温室大棚的“神器”
红色/蓝色LED灯
二氧化碳发生器
捕获光能的结构——叶绿体
外膜 内膜 基粒
类囊体 基质
★捕获光能的色素分布在_类__囊__体__的__薄__膜__上__ ★酶分布在类__囊__体__薄__膜__和__基__质_ 上
D．色素分子是有机物，不溶于水，所以研磨过程中加
入丙酮是为了溶解色素
2．在圆形滤纸的中央滴上叶绿体的色素滤液进 行色素分离，要看到近似同心环状的四个色素 圈，排列在最外圈的一个呈（ ）。
A. 蓝绿色 B. 黄绿色 C. 黄色 D. 橙黄色
胡萝卜素
叶黄素
叶绿素a
D
叶绿素b
二、色素的作用
➢为什么植物的叶片通常呈绿色？
（2）分离原理: 不同色素在层析液中_溶__解__度__的不同,溶解度__高__的随 层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢。
（所以可以用层析液来分离色素）
2.实验的步骤是怎样？
（1）提取绿叶中的色素 （2）制备滤纸条
（3）画滤液细线
（4）分离绿叶中的色素
（5）观察和记录
3.怎样提取色素？提取过程中需要加入哪些试剂？各自 具有什么作用？
实验,绿叶中色素的提取和分离
答案：B
5．(2013· 黑龙江牡丹江一中期中)如图是新鲜绿叶的四 种光合色素在滤纸上分离的情况，以下说法正确的是 ( )
A．提取色素时加入碳酸钙是为了防止滤液挥发 B．水稻在收获时节，叶片中色素量的变化是(甲＋乙) ＜(丙＋丁) C．四种色素都能溶解在层析液中，乙色素的溶解度 最大 D．四种色素中，丙和丁主要吸收红光
画滤液细线：用毛细吸管吸取少量的滤液，沿铅笔 线均匀地画一条细线，待滤液干后， 再画一两次 分离色素：将适量的层析液倒入试管中，装置如图 所示
滤液细线 层析液
观察结果：滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同 的色素带，如图所示
橙黄色 叶黄素 叶绿素a 最多
黄绿色
1.为什么需要选用新鲜绿色的叶片做实验材料？
(5)实验结束几天后，乙、丙两同学发现部分预留叶片 已变黄。乙同学认为这是由于叶片中某些色素降解所造成 的，丙同学则认为是某些色素含量增加所致。根据所学知 识，你将如何设计实验来判断两个同学的观点是否正确？ _______________________________________________ ___________________________________________________ ___________________________________________________
解析：叶黄素吸收蓝紫光，在层析条带上是第2条。
答案：B
4．为了研究光合作用，生物小组的同学把菠菜叶磨 碎，分离出细胞质基质和全部叶绿体。然后又把部分叶绿 体磨碎分离出叶绿素和叶绿体基质，分别装在四支试管 内，并进行光照。问哪一支试管能检测到光合作用的光反 应过程( )
解析：本题通过实验来研究光反应的场所。叶绿体是 植物进行光合作用的场所。光合作用光反应过程中，H2O 光解，光能转换成活跃的化学能储存在ATP和[H]中，都是 在类囊体薄膜上进行的。类囊体薄膜上有进行光反应所需 要的各种色素和酶，故B试管能检测到光反应过程，A试管 则不能。C试管中缺少光反应所需的色素和酶，D试管中缺 少光反应所需的酶。
绿叶中色素的提取和分离无水乙醇的作用
绿叶中色素的提取和分离无水乙醇的作用是提取色素。
题目
在叶绿体中色素的提取和分离实验过程中，加入无水乙醇的作用是（）
A. 充分研磨
B. 防止色素被氧化破坏
C. 提取色素
D. 破坏叶绿体
答案解析
A、二氧化硅破坏细胞结构，使研磨充分，A错误；
B、碳酸钙能中和液泡中酸性物质，防止色素被破坏，B错误；
C、无水乙醇作为提取液，可溶解绿叶中的色素，C正确；
D、叶绿体中的色素都能溶解于有机溶剂中，如：丙酮、无水乙醇等．所以可以用无水乙醇提取叶绿体中的色素，D错误．
故选：C．。
绿叶中色素的提取和分离
注意：不能让滤 （约占1/4） 叶黄素 的 色 素 叶绿素 叶绿素a （约占3/4） 叶绿素b
(橙黄色)最少
(黄色)较少 (蓝绿色)最多
(黄绿色)较多
讨论
1.制备滤纸条时为什么要剪去两角？ 使层析液同步到达滤液细线 2.为什么画滤液细线时要细、直？为什么要滤液 干后再画一两次？ 防止色素重叠而影响分离效果；滤液干后画是 防止色素带重叠；多画几次是为了积累更多的 色素，使分离后的色素带明显。 3.分离色素时，为什么不能让滤液细线触及层析 液？为什么要用棉塞？ 色素溶于层析液；层析液中的丙酮等成分易挥 发且有毒。
吸收可见光，用于光合作用 二.色素的功能：
叶绿素溶液
色素的吸收光谱图
类 胡 萝 卜 素 ： 主 要 吸 收 蓝 紫 光
叶 绿 素 ： 主 要 吸 收 蓝 紫 光 和 红 光
问题探讨
有些蔬菜大棚内悬挂发红色或蓝色光的
灯管，并且在白天也开灯。
讨 论
1.这种方法的好处是？不同颜色的光
照对植物的光合作用会有影响吗？ 可以提高光合作用强度；不同颜 色的光会影响植物的光合作用。
基 质
基粒
每个基粒都由一 个个圆饼状的囊 状结构堆叠而成。 这些囊状结构称 为类囊体。吸收 光能的四种色素 就分布在类囊体 的薄膜上。
结论:
叶绿体是进行光合作用的场所，它内部 的巨大膜表面上，不仅分布着许多吸收 光能的色素分子，还有许多进行光合作 用所必需的酶。
巩固练习
色素种类 叶绿素a 叶绿素b 胡萝卜素 叶黄素 颜色 扩散速度 吸收光的颜色
为什么植物的叶片大多是绿色的，但有 时叶片也会发黄？ 因为绿叶中所含的色素主要是叶绿素， 但也有其它的一些色素。
思考
绿叶中色素的提取和分离过程
称量：称取 5 g 新鲜绿叶 提 取 色 素 剪碎：去掉叶柄和粗的叶脉 研磨：加入少许SiO2、CaCO3和 10 mL 无水乙醇 过滤：漏斗基部放单层尼龙布 收集滤液：用棉塞将试管口塞严
制备 滤纸 条
①将干燥的滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽 的滤纸条，并在一端剪去两角； ②在距剪去两角的一端 1 cm 处用铅笔画一条细 的横线 ①用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔画线处均匀 画一条直的滤液细线； ②干燥后，再画一两次
画滤 液细 线
①倒入试管 3 mL 层析液
色素 分离
②将滤纸条有滤液细线的一端插
绿叶中色素的提取和分离实验注意事项
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一、光合色素的种类和含量
｛｝
二、实验步骤
1.提取色素
2、制备滤纸条
绿叶中色素的提取与分离知识复习
绿
叶
中
的
色
类胡萝卜素
叶绿素
(占1/4)
(占3/4)
胡萝卜素
叶黄素
叶绿素a
叶绿素b
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3、画滤液细线
4、分离色素
5、观察结果
绿叶中色素的提取与分离知识复习……………………………………………………………最新资料推荐…………………………………………………
实验改进方法
1、制备滤纸条
根据实验所需，将干燥处理的滤纸顺纸纹方向剪成宽1cm的长方形纸条，在纸条的一
端1.5cm用铅笔画一条细线，并剪去内角（剪角时最好使其与端线成70～80℃夹角）。
2、划滤液细线
用盖玻片代替毛细吸管划滤液细线——“印泥法”。
用胶头滴管吸取少量滤液滴在载玻
片上，用另一片载玻片来回推匀，再换用另一盖玻片一侧边缘
蘸取滤液，沿滤纸条上细线轻按一下，待干
燥后再重复2～3次。
印出的色素液线（最佳宽度为1～2mm）又细
又齐又匀，分离效果好。
3、分离色素
将3ml层析液倒入小烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）轻轻插入层析液中，随后用培养皿盖住小烧杯。
注意不能让滤液细线触及层析
液。
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实验方法：实验材料的常用处理方法和技术 【理论指导】 熟悉常用的实验材料处理方法和技术，理解每种方法和技 术的适用情况并熟练掌握其操作技能，可以在设计实验时 进行迁移和利用。常用处理方法主要包括以下几个方面：
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方法
研磨 过滤
适用范围
适用于从 生物组织 中提取物 质，如酶、 色素等
处理方法或原理
研磨时要先将生物材料 切碎，然后加入摩擦剂 (常用二氧化硅)、提取 液及其必要物质，充分 研磨之后，往往要进行 过滤，以除去渣滓，所 用过滤器具则根据需要 或根据试题中提供的器 材加以选用，如可用滤 纸、纱布、脱脂棉、尼 龙布等
教材涉及实验
绿叶中色素的 提取和分离
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方法
素较少的材料。
3.替代实验品
(1)提取液：提取液除用无水乙醇外，还可用丙酮代替。
(2)二氧化硅：用纯净的细河沙代替，使研磨更加迅速充
分。
(3)碳酸钙：用碳酸钠代替碳酸钙，由于碳酸钙不溶于水，
使滤液有许多泡沫，而碳酸钠易溶于水，使滤液泡沫大大
减少。
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二氧化硅、碳酸钙
无水乙醇
一端两个角 用铅笔画线
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1.(2011·江苏高考)某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突
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3.实验中的注意事项及操作目的归纳
过程
注意事项
操作目的
(1) 选新鲜绿色的叶片
使滤液中色素含量高
(2) 研磨时加无水乙醇
溶解色素
提
取 色
(3) 加少量SiO2和CaCO3
研磨充分和保护叶绿素
素 (4) 迅速、充分研磨
防止乙醇挥发，充分溶解 色素
(5)
盛放滤液的试管管 口加棉塞
防止乙醇挥发和色素氧化
绿叶中色素的提取和分离
提取：绿叶中的色素溶于__有__机__溶__剂__无__水__乙__醇____而不溶于水， 可用无_水__乙__醇_________提取色素。
分离：各种色素在__层__析__液___中溶解度不同，_溶__解__度__高__的__随 __层__析__液___在滤纸上扩散得快，反之则慢，从而使各种色素相 互分离。
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过程
注意事项
操作目的
(1) 滤纸预先干燥处理 使层析液在滤纸上快速扩散
分 离
(2)
滤液细线要直、 细、匀
使分离出的色素带平整不 重叠
色 素
(3)
滤液细线干燥后再 画一两次
使分离出的色素带清晰分明
(4)
滤液细线不触及层 析液
防止色素直接溶解到层析液 中
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【技巧点拨台】 1.从色素带的宽度可推知色素含量的多少，色素带越宽， 色素含量越多；从色素带的位置可推知色素在层析液中溶 解度大小，色素带扩散得越远，溶解度越大。 2.在滤纸条上，相邻两条色素带间距离最宽的是胡萝卜素 和叶黄素；相邻两条色素带间距离最窄的是叶绿素a和叶 绿素b。
处理方法或原理 教材涉及实验
将洋葱根尖放入盛有盐 观察根尖分生
酸和酒精混合液的玻璃 组织细胞的有
皿中室温下解离
丝分裂
恒温 技术
适用于有酶 参与的生化 反应
一般用水浴或恒温箱
探究温度对酶 活性的影响
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方法
同位 素示 踪技 术
适用范围
用于物质代谢 以及其他实验 中以了解物质 来源或去向， 或者区分事情 结果是由于此 还是彼的缘故
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橙黄色 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b 黄绿色
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1.为什么要在滤纸条一端剪去两角？ 提示：防止层析液在滤纸条的边缘扩散过快而形 成弧形色素带。 2.试分析分离色素时色素带颜色过浅的原因。 提示：(1)叶片颜色太浅； (2)叶片放置时间太久； (3)研磨不充分； (4)未加CaCO3粉末； (5)加入提取液量太多。
处理方法或原理 教材涉及实验
光合作用光反
应产物——氧
气中氧的来源，
用同位素标记某种 特定元素或化合物
二氧化碳形成 葡萄糖的途径， 确定什么是遗
传物质的噬菌
体侵染细菌的
实验等
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【典例分析】某同学在做“绿叶中色素的提取和分离”实验时，在实 验报告中写的原理是：绿叶中色素的提取——纸层析法；叶绿体中色 素的分离——无水乙醇提取法。该同学在做绿叶中色素的提取时，改 用下列处理方法：①绿叶放在盛有清水的烧杯中静置2 h；②绿叶放在 盛水的烧杯中，煮沸3 min后取出，放入盛乙醇的烧杯中，隔水加热； ③绿叶放在盛乙醇的烧杯中，隔水加热；④绿叶放在盛水的烧杯中， 煮沸10 min； ⑤绿叶放在研钵中研磨，然后放在盛乙醇的烧杯中。 请分析该实验的原理是否正确；改变处理方法后哪些溶液会变绿。
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【分析】(1)绿叶中色素的提取——无水乙醇提取法；绿 叶中色素的分离——纸层析法。 (2)色素是有机物，在水中不溶解。绿叶中的色素能溶解 在乙醇、丙酮等有机溶剂中。当绿叶放在盛水的烧杯中， 煮沸后，由于细胞膜和叶绿体膜变成了全透性，叶绿素会 扩散进入水中。绿叶放在研钵中研磨时会破坏细胞膜和叶 绿体膜，叶绿体色素溶解在乙醇中。
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1.实验中几种化学试剂的作用
化学试剂 无水乙醇
层析液 二氧化硅
碳酸钙
作用
_提__取__绿叶中的色素 _分__离__绿叶中的色素
增加杵棒与研钵间的摩擦力，破坏细胞结构，
使_研__磨__充分 防止研磨过程中_色__素__被破坏
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2.替代材料
可用其他绿色叶片代替菠菜叶，但不能用大白菜等含叶绿
纸层 析法
适用范围
适用于溶 液中物质 的分离
处理方法或原理
教材涉及实验
纸层析法是利用物质随 层析液在滤纸上扩散速 度不同的原理，达到将 物质分离的目的。主要 步骤包括制样、制备滤 纸条、画滤液细线和层 析分离
绿叶中色素的 提取和分离
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方法
解离 技术
适用范围
用于破坏细 胞壁，分散 植物细胞， 制作临时装 片
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
【拓展】 (1)若②③④中都变绿，颜色的深浅一样吗？ 提示：不一样。由于受加热条件的影响，溶解量不等，所 以烧杯中的颜色深浅不同。 (2)在检测绿叶进行光合作用产生淀粉时为什么要将绿叶 放在盛乙醇的烧杯中隔水加热？ 提示：放在乙醇中是为了脱去色素，避免对实验现象的干 扰。因为淀粉的检测是利用淀粉与碘反应呈现蓝色的原理。 隔水加热是为了受热均匀和安全。因为酒精易燃。