医学微生物实验课件实验七 厌氧性细菌 (anaerobic bacteria)
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厌氧性细菌PPT精选课件
紧急预防和治疗：早期足量注射破伤风抗毒素 （tetanus antitoxin，TAT） 注意皮试 和抗生素
特异性预防：注射破伤风类毒素
百白破三联疫苗
免疫程序：3、4、5月 3次
2、7岁加强 2次
特殊情况
1次
20
产气荚膜梭菌
(C．perfringens )
1、气性坏疽和食物中毒主要病原菌 2、厌氧芽孢梭菌
抵抗力强 耐受煮沸60min，干热100℃ 1h可被破坏 在干燥的土壤和尘埃中可存活数十年 繁殖体与其他细菌相似
繁殖体对青霉,局部繁殖,不扩散到血流 1、伤口需形成厌氧微环境
（伤口的厌氧微环境是本菌生长繁殖和致病的 重要条件）： 伤口深而窄（如刺伤） 混有泥土和异物，或大面积创伤，坏死组织、 凝血块较多 同时伴有需氧菌或兼性厌氧菌感染
8
2、致病物质
致病物质
病菌产生的外毒素
即：破伤风溶血毒素和破伤风痉挛毒素
痉挛毒素是主要致病物质，属神经毒素 毒性极强，不耐热，可被胃蛋白酶破坏 对脊髓前角细胞和脑干神经细胞有高度亲和力 有免疫原性，可产生抗毒素 可制备类毒素
9
3、致病机理
阻止上下神经元间 正常抑制性神经冲动传递，造成骨骼肌 强直性痉挛
织结合非常牢固，一旦结合则抗毒素不能发生中 和作用）---------及早治疗 获得有效抗毒素的途径是人工免疫:
主动、被动
18
四、微生物检查
直接涂片染色镜检：一般不进行 典型的症状和病史即可作出诊断 必要时厌氧培养
19
防治原则：一旦发病，疗效不佳，预防较重要
清创：防止创口厌氧微环境的形成
21
22
一、生物学性状
医学微生物学 第13章 厌氧性细菌PPT课件
++ ++ ---
±+ ++ ++ ++± ++ ++
nt +
+
+
-
-
+
-
-
+
-
-
+
+
+
+
+
+
±±
±±
+
+
+
t
43
二、 致 病 性
44
1.气性坏疽： （1）严重创伤感染性疾病； （2）致病条件同破伤风梭菌； （3）细菌多侵入臀部、大腿、
肩胛等肌肉较厚部位；
45
（4）主要致病物质为α毒素及多种侵袭酶 α毒素具有卵磷脂酶活性；
图2 破伤风梭菌培养中期纯培养物的 镜下形态 ( 24-48h,革兰染色)
图3 破伤风梭菌培养晚期纯培养物的
9
镜下形态 (48h后,革兰染色)
1.芽胞正圆形，比菌体粗，位于 菌体顶端, 细菌呈“鼓槌状”， 为本菌特征。
10
2.周身鞭毛
11
3. 芽胞抵抗力很强 75～80℃ 10 min仍保持活力 100℃ 1小时可完全被破坏 干燥土壤和尘埃中可存活数年
35
36
芽胞在无糖培养基易形成
芽胞卵圆形，位于菌体中央或 次极端，不比菌体粗
v
37
*培养特性与生化反应：确诊价值
本菌的特点： 1、“汹涌发酵现象” 2、双层溶血环 3、 Nagler反应
38
39
双层溶血
外层
内层
40
厌氧性细菌Anaerobic bacteriappt课件
厌氧性细菌Anaerobic bacteria
厌氧性细菌 Anaerobic bacteria
缺乏呼吸酶系统.氧对生长不利.
重要的厌氧菌：Main genera
G : 厌氧芽胞梭菌属
Habitat
杆菌 G : 双歧杆菌属
G : 类杆菌属
Gram-negative bacilli Bacteroides类杆菌属 Colon Fusobacterium梭杆菌属 Mouth, colon + Gram-positive bacilli Bifidobacterium双歧杆菌属 Mouth, colon (外源性或内源 Propionibacterium丙酸杆菌属 Skin + Actinomyces放线菌属 性混合感染 Mouth ) Lactobacillus乳酸杆菌属 Vagina Eubacterium真杆菌属 Mouth, colon Gram-positive cocci Peptostreptococcus Colon 正常菌群 Gram-negative cocci Veillonela韦荣球菌属 Mouth, colon 条件致病
双层溶血环
Nagler反应
汹涌发酵
致病物质
荚膜 外毒素（10余种，包括胞外酶）
α毒素（最强、作用） 不耐热肠毒素（致腹泻）
毒素型（致病的主要为A型）
产气荚膜梭菌产生的外毒素和胞外酶
毒素 致 死 毒 素 肠毒素 活 性 卵磷脂酶，增加血管通透性，溶血，坏死 坏死作用 通透性相关酶 坏死，ADP核苷转移酶 溶血 溶血素，细胞毒素 胶原酶，明胶酶，坏死 蛋白酶 透明质酸酶 DNA酶 改变肠粘膜通透性，肠毒性，细胞毒性
所致疾病
–气性坏疽:60～80％由A型菌引起 –食物中毒(1-2d自愈)：
厌氧性细菌 Anaerobic bacteria
缺乏呼吸酶系统.氧对生长不利.
重要的厌氧菌：Main genera
G : 厌氧芽胞梭菌属
Habitat
杆菌 G : 双歧杆菌属
G : 类杆菌属
Gram-negative bacilli Bacteroides类杆菌属 Colon Fusobacterium梭杆菌属 Mouth, colon + Gram-positive bacilli Bifidobacterium双歧杆菌属 Mouth, colon (外源性或内源 Propionibacterium丙酸杆菌属 Skin + Actinomyces放线菌属 性混合感染 Mouth ) Lactobacillus乳酸杆菌属 Vagina Eubacterium真杆菌属 Mouth, colon Gram-positive cocci Peptostreptococcus Colon 正常菌群 Gram-negative cocci Veillonela韦荣球菌属 Mouth, colon 条件致病
双层溶血环
Nagler反应
汹涌发酵
致病物质
荚膜 外毒素（10余种，包括胞外酶）
α毒素（最强、作用） 不耐热肠毒素（致腹泻）
毒素型（致病的主要为A型）
产气荚膜梭菌产生的外毒素和胞外酶
毒素 致 死 毒 素 肠毒素 活 性 卵磷脂酶，增加血管通透性，溶血，坏死 坏死作用 通透性相关酶 坏死，ADP核苷转移酶 溶血 溶血素，细胞毒素 胶原酶，明胶酶，坏死 蛋白酶 透明质酸酶 DNA酶 改变肠粘膜通透性，肠毒性，细胞毒性
所致疾病
–气性坏疽:60～80％由A型菌引起 –食物中毒(1-2d自愈)：
《微生物与免疫学》PPT课件之17章厌氧性细菌
致病性
致病物质
–肉毒毒素
剧毒（对人致死量为0.1µg)
–功能和致病机制与破伤风外毒素相似
所致疾病
食物中毒
– 进食污染食物（多为罐头、肉制品、豆制品） 发生食物中毒---食入毒素 – 临床表现：少见胃肠道症状，主要为神经末 梢麻痹（松驰型）
乏力、头痛→眼肌麻痹：复视、斜视、眼睑下垂 →咽部肌肉麻痹：吞咽、咀嚼困难、口齿不清→ 膈肌麻痹，呼吸困难→窒息死亡 神志清楚 病死率高
二、 产气荚膜梭菌
(C．perfringens )
生物学性状
形态与染色 两端平切粗大杆菌 芽胞位于次极端，呈椭圆形，不大于菌 体 无鞭毛 体内有明显的荚膜
致病物质：侵袭性酶和外毒素 所致疾病：气性坏疽、食物中毒
三、肉梭菌
（C．botulinum）
生物学特性
芽胞呈椭圆形，粗 于菌体，位于次极 端，使细胞呈汤匙 状或网球拍状 肉毒毒素不耐热， 煮沸 1 分钟即可被破 坏
– 属神经毒 (neurotoxin) ，毒性极强 ( 对人致死量 <1µg) – 蛋白质，不耐热
典型的症状
– 苦笑面容 – 角弓反张 – 其它
防治原则
防止创口厌氧微环境的形成 特异性预防：注射破伤风类毒素 三联疫苗 免疫程序：3、4、5月 3次 2、7岁加强 2次 特殊情况 1次 紧 急 预 防 ： 注 射 破 伤 风 抗 毒 素 （ tetanus antitoxin，TAT） 特异性治疗：早期足量使用抗毒素及抗生素
所致疾病-破伤风
致病条件
伤口需形成厌氧微环境
– 伤口窄而深（如刺伤），有泥土或异物污染 – 大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织缺血 – 有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口
厌氧性细菌PPT课件
预防
及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境 预防性的使用抗生素
治疗
局部感染的处理 抗生素 α抗毒素 高压氧舱法
18
肉毒梭菌
（C．botulinum）
生物学特性
芽胞呈椭圆形，位于次极端，大于菌体，使 细胞呈汤匙状或网球拍状 有周鞭毛，无荚膜 专性厌氧 在卵黄培养基上，菌落周围出现混浊圈
19
致病性*致病物质
厌氧性细菌
（anaerobic bacteria）
• 必须在无氧环境下，才能生长繁殖
• 根据能否形成芽胞，可分为
厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌
1
厌氧芽胞梭菌属
(Clostridium)
专性厌氧，革兰阳性、粗大杆菌 芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状， 抵抗力强 周鞭毛，除产气荚膜梭菌外无荚膜 致病菌产生外毒素致病，病情严重 防治：类毒素与抗毒素
4
致病性 所致疾病：破伤风
典型症状：苦笑面容、角弓反张等 致病条件：伤口必须形成厌氧微环境
*伤口窄而深（如刺伤），有泥土或异物污染 *大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织缺血 *有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口
致病物质：主要为破伤风痉挛毒素
(tetanuspasmin)，属神经毒素(neurotoxin)， 毒性极强(对人致死量<1µ g)
β、ε、ι毒素
*引起坏死损伤和血管通透性增加
肠毒素
14
所致疾病
气性坏疽 主要由A型产气荚膜梭菌引起 致病条件与破伤风梭菌相同 潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高 以组织坏死，气肿和全身中毒为特征
组织坏死、血管内皮损伤，通透性上升 出血、水肿、局部坏死
分解糖产气，压迫软组织、血管 加重组织坏死（捻发音）
及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境 预防性的使用抗生素
治疗
局部感染的处理 抗生素 α抗毒素 高压氧舱法
18
肉毒梭菌
（C．botulinum）
生物学特性
芽胞呈椭圆形，位于次极端，大于菌体，使 细胞呈汤匙状或网球拍状 有周鞭毛，无荚膜 专性厌氧 在卵黄培养基上，菌落周围出现混浊圈
19
致病性*致病物质
厌氧性细菌
（anaerobic bacteria）
• 必须在无氧环境下，才能生长繁殖
• 根据能否形成芽胞，可分为
厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌
1
厌氧芽胞梭菌属
(Clostridium)
专性厌氧，革兰阳性、粗大杆菌 芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状， 抵抗力强 周鞭毛，除产气荚膜梭菌外无荚膜 致病菌产生外毒素致病，病情严重 防治：类毒素与抗毒素
4
致病性 所致疾病：破伤风
典型症状：苦笑面容、角弓反张等 致病条件：伤口必须形成厌氧微环境
*伤口窄而深（如刺伤），有泥土或异物污染 *大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织缺血 *有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口
致病物质：主要为破伤风痉挛毒素
(tetanuspasmin)，属神经毒素(neurotoxin)， 毒性极强(对人致死量<1µ g)
β、ε、ι毒素
*引起坏死损伤和血管通透性增加
肠毒素
14
所致疾病
气性坏疽 主要由A型产气荚膜梭菌引起 致病条件与破伤风梭菌相同 潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高 以组织坏死，气肿和全身中毒为特征
组织坏死、血管内皮损伤，通透性上升 出血、水肿、局部坏死
分解糖产气，压迫软组织、血管 加重组织坏死（捻发音）
临床微生物学检验技术-第17章 厌氧菌
二级标本：可能被固有菌群污染，但能保证厌氧培养， 如气管引流液、膀胱穿刺液等。
三级标本：脓肿穿刺液，容易被固有菌群污染，如口腔 脓肿穿刺液
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2. 标本转运和储存
床边接种 不能床边接种
液体或脓液：无氧小瓶运送，针筒运送（次选） 拭子标本：含厌氧培养基的商品化转运拭子 组织块：无菌容器，厌氧罐或厌氧袋中送检 实验室收到标本，20~30min内处理完毕，不超过2h； 如不能及时，置室温保存
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厌氧菌感染的微生物学检验
5 ）次代培养 需做耐氧试验，排除兼性厌氧菌
方法：从每个平板上挑取4-5个不同性状的菌落， 每个菌落分别接种3个平板（每个平板分4-6个区， 可同时做4-6个菌落的次代培养）。分别放有氧、 无氧和含5%-10% CO2环境中培养48ｈ，如只在 厌氧环境中生长的细菌，即为厌氧菌。
其他：气液相色谱、PCR和基因探针等方法。
梅里埃公司生产的API鉴定试剂条
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第二节 梭状芽胞杆菌
梭状芽胞杆菌属（Clostridium）简称梭菌属，是厌
氧芽胞杆菌（anaerobic sporeforming bacilli）的 唯一菌属，有210个种。
革兰染色阳性，芽胞呈圆形或卵圆形，直径大于菌体， 位于菌体中央，极端或次极端，使菌体膨大呈梭状。
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厌氧菌感染的微生物学检验
在培养基使用时应注意：
1. 尽量使用新鲜培养基，2～4ｈ内用完； 2. 使用前放入无氧环境，预还原处理24～48ｈ； 3. 液体培养基应煮沸10 min，驱除溶解氧，并迅
速冷却，立即接种。
厌氧性细菌概述.pptx
DNA 酶
±
神经氨酸酶
改变神经节苷脂受体
+
其它
肠毒素
肠毒素、细胞毒素
+
+ 大多菌株产生；± 某些菌株产生；-不产生；nt 未研究
+± ++ ++
nt +
±±
±±
+
+
+
t
致病物质
• α毒素 –以A型产生量最大 –分解细胞膜上磷脂和蛋白形成的复合 物，造成细胞溶解，引起血管通透性 增加伴大量溶血、组织坏死、肝脏、 心功能受损 –在气性坏疽的形成中起主要作用
• β、ε、ι毒素 –引起坏死损伤和血管通透性增加
致病物质
• 肠毒素 –不耐热的蛋白质，100°C瞬时被破坏 –在结肠经胰酶作用后，其毒力能增加3 倍 –整段肽链嵌入细胞膜，破坏膜离子运 输功能 –可作为超抗原
所致疾病
• 气性坏疽 – 由A型产气荚膜梭菌及其他梭菌引起
– 气性坏疽潜伏期短，发展迅速，病情 险恶
厌氧性细菌 （anaerobic bacteria）
概述
• 必须在无氧环境下，才能生长繁殖 • 根据能否形成芽胞，可分为
– 厌氧芽胞梭菌属 – 无芽胞厌氧菌
第一节 厌氧芽胞梭菌属
(Clostridium)
概述
• 大多为严格厌氧菌，革兰染色阳性 • 芽胞直径比菌体粗，使菌体膨大呈梭状，
对热、干燥和消毒剂均有强大的抵抗力 • 除产气荚膜梭菌等极少数例外，均有周
– 大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局 部组织缺血
– 同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染 的伤口
致病因子
• 对氧敏感的破伤风溶血毒素(tetanolysin) •质粒编码的破伤风痉挛毒素
厌氧性细菌课件
第13章 厌氧性细菌 Anaerobic Bacteria
厌氧性细菌（anaerobic bacteria ）是一大群必须在无氧 环境条件下才能生长繁殖的细菌。
厌氧性细菌
厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌
HigHhiegrhEedruEcadtiuocnaPtiroenssPress
第一节 厌氧芽胞梭菌属
缺血 – 同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口
HigHhiegrhEedruEcadtuiocnaPtiroenssPress
致病因子
? 对氧敏感的破伤风溶血毒素(tetanolysin) ?质 粒 编 码 的 破 伤 风 痉 挛 毒 素
(tetanospasmin)
– 引起破伤风的主要致病物质 – 属神经毒 (neur. 2. The deep wound in the left great toe that became contaminated with Clostridium tetani .
HigHhiegrhEedrucEadtiouncParteiossn Press
Severe case of adult tetanus. The muscles in the back and legs are very tight. Muscle spasms can break bones 痉挛
厌氧芽胞梭菌属（Clostridium ）是一类革兰阳性菌，能 形成芽胞，大多为专性厌氧菌。因芽胞直径比菌体粗，使菌 体膨大呈梭状，故名梭状芽胞杆菌。主要包括破伤风梭菌、 产气荚膜梭菌和肉毒梭菌。
这属细菌侵袭力不强，产生强烈的外毒素，引起特定的 症状；感染的重要条件是伤口的厌氧微环境。
HigHhiegrhEedruEcadtiuocnaPtiroenssPress
厌氧性细菌（anaerobic bacteria ）是一大群必须在无氧 环境条件下才能生长繁殖的细菌。
厌氧性细菌
厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌
HigHhiegrhEedruEcadtiuocnaPtiroenssPress
第一节 厌氧芽胞梭菌属
缺血 – 同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口
HigHhiegrhEedruEcadtuiocnaPtiroenssPress
致病因子
? 对氧敏感的破伤风溶血毒素(tetanolysin) ?质 粒 编 码 的 破 伤 风 痉 挛 毒 素
(tetanospasmin)
– 引起破伤风的主要致病物质 – 属神经毒 (neur. 2. The deep wound in the left great toe that became contaminated with Clostridium tetani .
HigHhiegrhEedrucEadtiouncParteiossn Press
Severe case of adult tetanus. The muscles in the back and legs are very tight. Muscle spasms can break bones 痉挛
厌氧芽胞梭菌属（Clostridium ）是一类革兰阳性菌，能 形成芽胞，大多为专性厌氧菌。因芽胞直径比菌体粗，使菌 体膨大呈梭状，故名梭状芽胞杆菌。主要包括破伤风梭菌、 产气荚膜梭菌和肉毒梭菌。
这属细菌侵袭力不强，产生强烈的外毒素，引起特定的 症状；感染的重要条件是伤口的厌氧微环境。
HigHhiegrhEedruEcadtiuocnaPtiroenssPress
医学微生物学之厌氧性细菌护理课件
厌氧性细菌的控制措施
提高防范意识
严格消毒
加强宣传教育，提高公众对厌氧性细菌感 染的防范意识，注意个人卫生，避免与感 染者接触。
对医疗器械、环境、物品等进行严格消毒 ，确保消毒效果达标，阻断传播途径。
隔离治疗
疫苗接种
对感染厌氧性细菌的患者进行隔离治疗， 减少与他人接触，降低传播风险。
针对特定厌氧性细菌感染，可研发和接种 相应的疫苗，提高人群免疫力，控制疾病 传播。
输标02入题
血液培养是诊断厌氧性细菌感染的重要方法，通过采 集患者血液样本进行培养，可以检测出病菌的存在和 种类。
01
03
细菌分离与鉴定可以通过采集患者的分泌物、排泄物 等样本，在实验室中进行细菌培养和鉴定，确定病菌
的种类和药敏试验，为治疗提供依据。
04
组织病理学检查可以通过对病变组织进行显微镜检查 ，观察组织细胞的形态和结构变化，从而确定感染的 存在和程度。
厌氧性细菌感染的症状
01
厌氧性细菌感染的症状因感染部 位和病菌种类的不同而有所差异 ，常见的症状包括发热、疼痛、 肿胀、恶心、呕吐、腹泻等。
02
在严重的情况下，厌氧性细菌感 染可能会导致败血症、感染性休 克等严重并发症，甚至危及生命 。
厌氧性细菌感染的诊断方法
诊断厌氧性细菌感染需要进行血液培养、组织病理学 检查、细菌分离与鉴定等实验室检查。
厌氧性细菌感染的预防措施
增强免疫力
保持健康的生活方式，包括均 衡饮食、适量运动和充足的休
息，以增强身体免疫力。
保持卫生
经常洗手、清洁环境、避免接 触污染水源和表面，以减少感 染的风险。
疫苗接种
接种相关疫苗，如破伤风疫苗 ，以预防某些厌氧性细菌感染 。
医学微生物学厌氧性细菌培训课件
释放, 肌肉松弛性麻医学微痹生物.学厌氧性细菌
16
所致疾病
食物中毒: 肉制品，发酵豆制品，面制品，蜂蜜(婴 儿)。 潜伏期短至数小时-36小时
临床表现
胃肠道症状少见，主要为神经末梢麻痹症状(乏力 、头痛)
眼肌（复视、斜视、眼睑下垂）
▪ G+细杆状，周毛菌，芽胞正圆形，位于菌体顶
端，大于菌体宽度，呈鼓槌状
▪ 培养特性
▪ 专性厌氧，血平板上呈扩散生长，有β溶血
▪ 抵抗力
▪ 强，芽胞在干燥土壤中可存活数十年，耐热
100℃1h.
医学微生物学厌氧性细菌
4
致病性与免疫性
传染途径及伤口条件 破伤风梭菌由创口侵入人体引起破伤风。 能否发生感染的条件: 伤口的厌氧微环境 伤口窄而深，混有泥土及异物 大面积创伤，坏死组织多，局部缺血 伴有需氧菌或兼性厌氧菌的混合感染
食物中毒(A型) 较轻，1-2天自愈.
坏死性肠炎(C型):
医学微生物学厌氧性细菌
13
微生物学检查与防治
微生物学检查
深部创伤直接涂片镜检:有荚膜的G+大杆 菌、白细胞少且形态不典型(毒素使白细 胞无趋化反应)， 伴其它杂菌。
分离培养鉴定
动物试验
防治原则
及时清创、扩创
切除坏死组织，必要时截肢11Fra bibliotek致病性
致病物质: 能产生十余种外毒素，有的即为胞 外酶
α毒素（卵磷脂酶）:增加血管通透性，溶血 、坏死作用，最重要
κ毒素（胶原酶）: 分解胶原纤维、组织崩解 μ毒素（透明质酸酶）: 有利细菌及毒素扩散 ν毒素（DNA酶）: 降低粘稠度，有利扩散 θ毒素: 溶血毒素、细胞毒素
肠毒素: 增加肠黏膜细胞通透性， 引起腹泻
医学微生物学-厌氧性细菌
三.所致疾病
败血症、中枢神经系统感染 口腔感染、呼吸道感染、生殖道感染
思考题：
厌氧菌的分类？ 破伤风梭菌的致病条件？防治原则？ 产气荚膜梭菌所致疾病？培养特性？ 无芽胞厌氧菌的特点？感染特征？
第二节 无芽胞厌氧菌
一. 常见的无芽胞厌氧菌
脆弱类杆菌（B.fragilis）最常见 双岐杆菌：G+杆菌，抗肿瘤、抗衰老、增
强免疫力
二. 感染特征
◆ 内源性感染 ◆ 无特定病型 ◆ 分泌物或脓液粘稠，有恶臭，有时有气体 ◆ 分泌物直接涂片可见细菌，但常规培养法无细菌生长 ◆ 使用氨基糖苷类抗生素长期治疗无效
一、破伤风梭菌（C．tetani）
1.生物学性状
(1) 芽胞特征：正圆形，位于菌体顶端， 比菌体大，使菌体呈鼓槌状。
(2) 培养特性：专性厌氧，血平板上溶血环
(3) 抵抗力：强
破伤风梭菌形态
2. 致病性与免疫性
(1)致病条件——伤口需形成厌微环境
◆伤口窄而深（如刺伤） ◆有泥土或异物污染 ◆大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织缺血 ◆同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口
第十二章 厌氧性细菌 （anaerobic bacteria）
概述
◆种类分布 有芽胞——厌氧芽胞梭菌，G+杆菌 无芽胞——无芽胞厌氧菌
◆致病特点 厌氧芽胞梭菌—外源性感染，特定病型 无芽胞厌氧菌—内源性感染，无特定病型
◆厌氧菌分离培养（实验课讲）
第一节 厌氧芽胞梭菌
(Clostridium)
G+杆菌，有芽胞，抵抗力强，专性厌氧 主要有以下几种：
◆对人致病的主要为A型
2.致病性
(1) 致病物质 ：多种毒素和酶 (2) 所致疾病 ◆气性坏疽 ◆食物中毒
医学微生物学课件_厌氧性细菌_
破伤风杆菌第12章厌氧性细菌概述厌氧芽胞梭菌无芽胞厌氧菌第12章厌氧性细菌概述厌氧性细菌（anaerobic bacteria）是一大群必须在无氧环境下才能生长的细菌。
分类：厌氧芽胞菌属无芽胞厌氧菌属第12章厌氧性细菌第12章厌氧性细菌第一节厌氧芽胞梭菌属破伤风梭菌产气荚膜梭菌肉毒梭菌第一节厌氧芽胞梭菌属共同特点：G+杆菌有芽胞，抵抗力强；在自然界（水、土等）、动物及人体肠道中广泛存在；产生外毒素致病。
除产气荚膜梭菌外均无荚膜。
破伤风梭菌一般情况破伤风梭菌是破伤风的病原菌，大量存在于人和动物肠道中，由粪便污染土壤；创口污染、分娩时用不洁器械剪断脐带，本菌可从伤口侵入，引起破伤风，患者表现为肌肉痉挛，抽搐，最终呼吸衰竭或窒息而死，发病后，死亡率很高。
破伤风梭菌生物学性状形态染色：G+杆菌有芽胞，呈鼓槌状，有周身鞭毛，破伤风梭菌2.培养：专性厌氧，血平板上菌落呈“羽毛”状（不规则，中心紧密，四周疏松），微溶血 3.抵抗力：芽胞的抵抗力很强：土壤中可存活数十年；能耐煮沸1小时；在适宜条件下可出芽形成繁殖体，产生外毒素。
破伤风梭菌致病性：致病物质：⑴破伤风痉挛毒素化学本质：蛋白质化学结构：菌体外：重链和轻链，以二硫键相连；致病性：只有重链（与受体结合）和轻链（毒性部分）同时存在，才能致病，对人的致死量是1ug。
抗原性：强，可制成类毒素。
破伤风梭菌⑵破伤风溶血毒素：在功能和抗原性上与链球菌溶血素O相似，对氧敏感；可溶解红细胞、白细胞、血小板、巨噬细胞、成纤维细胞等；对破伤风病的作用尚未完全阐明。
破伤风梭菌致病条件：局部厌氧微环境窄而深的伤口；有泥土或异物污染；大面积创伤、烧伤，坏死组织多；局部缺血同时伴有需氧菌、兼性厌氧菌感染；破伤风梭菌免疫性：抗毒素可中和游离毒素的作用；抗毒素不能阻断细胞内毒素轻链的毒性作用；由于极少量毒素即可致病，但却不足以引起免疫，故患过破伤风后不易获得牢固的免疫力破伤风梭菌防治：防：破坏厌氧环境：及时正确清创、扩创人工自动免疫：白百破三联菌苗，DPO 类毒素－－→儿童、军人、野外工作者人工被动免疫：紧急预防：破伤风抗毒素(tetanus antitoxin,TAT) 2. 治：早期足量TAT；抗生素：四环素，红霉素；产气荚膜梭菌 C. perfringens 产气荚膜梭菌 C. perfringens 一般情况：是引起气性坏疽的病原菌，广泛存在于自然界及人和动物肠道中。
微生物学第13章厌氧性细菌PPT课件
• 所致疾病 – 食物中毒 • 进食污染食物（多为罐头、肉制品、豆制品）发生食 物中毒---食入毒素 • 临床表现：少见胃肠道症状，主要为神经末梢麻痹 （松驰型） – 婴儿肉毒病 • 细菌进入肠道，繁殖，产生毒素而致病 • 以6个月以内的小婴儿居多 – 创伤感染中毒
21
艰难梭菌（ C．difficile）
– 临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株 • G-球菌：韦荣菌属
– 咽喉部主要厌氧菌 • G+球菌：消化链球菌属
– 仅次于脆弱类杆菌 – 主要寄居于阴道 • G+杆菌： – 丙酸杆菌属：痤疮丙酸杆菌 – 双歧杆菌属 – 真杆菌属
24
致病条件
• 属正常菌群，在成为条件致病菌后，可引起内 源性感染
• 感染条件 – 寄居部位改变 – 宿主免疫力下降 – 菌群失调 – 厌氧微环境
6
致病物质——破伤风痉挛毒素
• 结构 – 菌体：一条多肽，150KD – 释出菌体：轻链-S-S-重链 – 重链：神经节苷脂结合的单位 – 轻链：毒性作用
7
破伤风痉挛毒素作用机制
• 与神经系统的结合
– 重链识别运动神经元细胞膜上的受体并结合， 促使毒素进入细胞内小泡中
• 内在化作用
– 小泡从外周神经末稍沿神经轴突逆行向上， 到达运动神经元细胞体，进入传入神经末稍， 最终进入中枢神经系统
• 防治原则
– 破坏其成为条件致病菌的条件 – 合理使用抗生素
27
思考题
1. 简述厌氧性细菌感染条件。 2. 试述破伤风痉挛毒素的致病机制。 3. 何谓“汹涌发酵”试验？
28
局部繁殖，并产生痉挛毒素
毒素经突触逆向运输 CNS
毒素经淋巴、血流
毒素经重链与神经细 胞表面受体结合
21
艰难梭菌（ C．difficile）
– 临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株 • G-球菌：韦荣菌属
– 咽喉部主要厌氧菌 • G+球菌：消化链球菌属
– 仅次于脆弱类杆菌 – 主要寄居于阴道 • G+杆菌： – 丙酸杆菌属：痤疮丙酸杆菌 – 双歧杆菌属 – 真杆菌属
24
致病条件
• 属正常菌群，在成为条件致病菌后，可引起内 源性感染
• 感染条件 – 寄居部位改变 – 宿主免疫力下降 – 菌群失调 – 厌氧微环境
6
致病物质——破伤风痉挛毒素
• 结构 – 菌体：一条多肽，150KD – 释出菌体：轻链-S-S-重链 – 重链：神经节苷脂结合的单位 – 轻链：毒性作用
7
破伤风痉挛毒素作用机制
• 与神经系统的结合
– 重链识别运动神经元细胞膜上的受体并结合， 促使毒素进入细胞内小泡中
• 内在化作用
– 小泡从外周神经末稍沿神经轴突逆行向上， 到达运动神经元细胞体，进入传入神经末稍， 最终进入中枢神经系统
• 防治原则
– 破坏其成为条件致病菌的条件 – 合理使用抗生素
27
思考题
1. 简述厌氧性细菌感染条件。 2. 试述破伤风痉挛毒素的致病机制。 3. 何谓“汹涌发酵”试验？
28
局部繁殖，并产生痉挛毒素
毒素经突触逆向运输 CNS
毒素经淋巴、血流
毒素经重链与神经细 胞表面受体结合
医学微生物实验课件实验七 厌氧性细菌 (anaerobic bacteria)
已知Ab检测 未知Ag (玻片 凝集试验)
双糖管等 血清学鉴定
生化反应
• 操作：
– 产气荚膜梭菌致病性试验 – 肠道致病菌粪便标本的分离与鉴定（续）血清学反应
厌氧菌Βιβλιοθήκη G+有芽胞无芽胞
破伤风梭菌 产气荚膜梭菌
肉毒梭菌
艰难梭菌
G+
G-
双歧杆菌
消化链球菌
脆弱类杆菌
韦荣菌属
形
态
破伤风梭菌(C.tetani)革兰染色涂片：
菌体细长，芽胞正圆，比菌体粗，位 于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状。
芽胞呈椭圆形位于次极端不大于菌体体外很少形成芽血平板庖肉培养基紫牛奶培养基破伤风3748h薄膜状爬行生长物边缘不齐伴轻度溶血肉汤混浊肉渣部分被消化呈灰白色无明显改变菌落平整光滑边缘齐
实验七 厌氧性细菌
(anaerobic bacteria)
• 录像：无芽胞厌氧菌的感染 • 示教：
– 破伤风梭菌及产气荚膜梭菌的形态．染色性及培养特 性 – Nagler反应 – 无芽胞厌氧菌的形态 （脆弱类杆菌．消化链球菌） – 厌氧培养方法
→
剖腹→肝脏印
染色
涂片→自然干燥 →染液 →迅速水洗 →印干 →油镜检
厌氧培养方法
1.物理法：厌氧箱或厌氧缸。用物理方法将氧气吸走， 充入氮气、二氧化碳、氢气。
钯
2.化学法：氢气+氧气
水
3生物法：厌氧菌与需氧菌一起放入密闭空间培养。
肠道致病菌粪便标本的分离与鉴定（续） 血清学反应
标本
选择鉴别培养基 (SS平板) 37℃ 24h
Clostridium perfringens shows "stormy fermentation" of litmus milk. Acid turns the pH indicator litmus from blue to pink, acid and enzymes coagulate the proteins in the milk, and gas tears the curds apart.
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厌氧菌
G+有芽胞
无芽胞
破伤风梭菌 产气荚膜梭菌
肉毒梭菌
艰难梭菌
G+
G-
双歧杆菌
消化Hale Waihona Puke 球菌脆弱类杆菌韦荣菌属
形
态
破伤风梭菌(C.tetani)革兰染色涂片：
菌体细长，芽胞正圆，比菌体粗，位 于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状。
破伤风梭菌电镜图
产气荚膜梭菌荚 膜(体内易形成)： 产气荚膜梭菌(C.perfringens)革兰染色涂片：
实验七 厌氧性细菌
(anaerobic bacteria)
• 录像：无芽胞厌氧菌的感染 • 示教：
– 破伤风梭菌及产气荚膜梭菌的形态．染色性及培养特 性 – Nagler反应 – 无芽胞厌氧菌的形态 （脆弱类杆菌．消化链球菌） – 厌氧培养方法
• 操作：
– 产气荚膜梭菌致病性试验 – 肠道致病菌粪便标本的分离与鉴定（续）血清学反应
汹涌发酵：
stormy fermentation
Clostridium perfringens shows "stormy fermentation" of litmus milk. Acid turns the pH indicator litmus from blue to pink, acid and enzymes coagulate the proteins in the milk, and gas tears the curds apart.
→
剖腹→肝脏印
染色
涂片→自然干燥 →染液 →迅速水洗 →印干 →油镜检
厌氧培养方法
1.物理法：厌氧箱或厌氧缸。用物理方法将氧气吸走， 充入氮气、二氧化碳、氢气。
钯
2.化学法：氢气+氧气
水
3生物法：厌氧菌与需氧菌一起放入密闭空间培养。
肠道致病菌粪便标本的分离与鉴定（续） 血清学反应
标本
选择鉴别培养基 (SS平板) 37℃ 24h
已知Ab检测 未知Ag (玻片 凝集试验)
双糖管等 血清学鉴定
生化反应
Nagler 反应
产气荚膜梭菌产生卵磷脂酶(α毒素)，在蛋黄琼脂平板上， 卵磷脂酶分解蛋黄中的卵磷脂，生成的甘油二酯在菌落 周围形成乳白色混浊圈。当加入相应抗毒素后，卵磷脂 酶活性丧失，菌落周围不出现混浊圈。
产气荚膜梭菌致病性试验
培养液注入小鼠腹腔→ 断颈处死 片→石炭酸复红负染
37℃ 5-8h
菌体粗大，两端几乎平切。芽胞呈椭圆形， 位于次极端，不大于菌体，体外很少形成芽 胞。
培养特性
血平板 破伤风 梭菌 庖肉培养基 紫牛奶培养基
无明显改变
37℃ 48h，薄膜状爬 肉汤混浊，肉渣 行生长物，边缘不齐， 部分被消化，呈 伴轻度β 溶血 灰白色
产气荚 膜梭菌
菌落平整，光滑，边 分解肉渣中糖类 分解乳糖产酸，指 缘齐。有双层溶血环： 而产生大量气体。 示剂变黄，培养基 内层完全溶血(θ 毒素 凝固,产生大量气体, 引起)，外层不完全溶 呈蜂窝状,将液面凡 血(α 毒素引起) 士林上推,甚至冲走 管口棉筛。