鸡传染性贫血病的实验室诊断技术
肉鸡传染性贫血的临床症状 肉鸡传染性贫血的防控措施 - 养鸡技术
肉鸡传染性贫血的临床症状肉鸡传染性贫血的防控措施-养鸡技术鸡传染性贫血病也叫做贫血性皮炎综合征、出血性综合征和蓝翅病等,是由于感染鸡传染性贫血病毒而发病,主要是导致雏鸡全身性淋巴组织萎缩和再生障碍性贫血,还会影响生长发育,甚至发生死亡,还能够由于发生免疫抑制而继发感染其他病原微生物,严重损害养鸡业的经济效益。
下面我们就一起来了解一下：肉鸡传染性贫血的临床症状肉鸡传染性贫血的防控措施。
1、流行特点肉鸡传染性贫血是由鸡传染性贫血病毒引起的一种以再生障碍性贫血、免疫器官萎缩以及皮下和肌肉出血为主要特征的免疫抑制病。
该病的病原是传染性贫血病毒，在自然条件下仅鸡对该病易感，并且所有年龄的鸡都会感染此病，自然感染常见于2～7周龄的雏鸡，1-7日龄的雏鸡是最易感群体。
随着肉鸡年龄的增加，鸡对该病的易感性减少，并且发病率和死亡率都降低。
肉鸡要比蛋鸡易感，公鸡比母鸡易感。
该病可以通过垂直传播和水平传播，其中垂直传播是母鸡在感染后使种蛋带毒，带毒的雏鸡在孵出后就会发病死亡，水平传播则是通过口腔、呼吸道和消化进行传播，一般不会发病。
该病的潜伏期为8～12天，一般在感染后的10天发病，1-7日龄的雏鸡感染此病后会出现贫血，同时可眼观到明显的病理变化。
2周龄以上的鸡和带有母源抗体的雏鸡虽然可被感染，但是不会发病，仅成为带毒者。
因该病会造成机体的免疫抵抗，因此易继发或并发多种细菌以及病毒感染而加剧病情，提高病鸡的死亡率。
2、临床症状该病的潜伏期为8～12天，其特征性的症状是发生贫血，通常在感染10天后发病，在14-16天达到高峰。
病鸡表现为精神萎顿，虚弱，皮肤、喙、肉髯以及可视黏膜苍白，羽毛蓬乱无光泽，逐渐的消瘦，生长发育不良，体重明显下降，翅膀发生皮炎或者出现蓝翅，有的病例头部、颈部、胸前、腹部以及腿部会出现出血点、局部出血，发生水肿，严重者会发生坏死。
病鸡在临死前可见腹泻的现象。
该病一般在发病5-6天后开始出现死亡，一般呈急性经过，死亡率受到饲养环境以及其他因素的影响，通常为10%～50%不等，一般仅单纯感染此病的病鸡，尤其是通过水平感染的不会引起高的死亡率，但是该病易继发感染细菌、病毒性疾病，可使病情加重，死亡率增加[养殖:/]。
鸡传染性贫血病
05
案例分析和实战演练
案例描述
以下是一个典型的鸡传染性贫血病案例
在某大型养鸡场中，发现一群鸡出现食欲不振、体重 下降、羽毛蓬松等症状。经过初步诊断，疑似为鸡传 染性贫血病。为了进一步确诊和制定有效的防控措施 ，养鸡场主决定进行详细的案例分析和实战演练。
案例分析
在案例分析阶段，主要进行了以下几个方面的分 析
鸡传染性贫血病
汇报人： 日期:
目录
• 鸡传染性贫血病概述 • 病症表现和诊断 • 预防和控制措施 • 研究和进展 • 案例分析和实战演练
01
鸡传染性贫血病概述
病因
• 病毒感染：鸡传染性贫血病是由传染性法氏囊病毒引起的。该病毒具有高度传染性，可通过直接接触或间接接触感染。
症状
01
02
03
贫血
病毒感染导致鸡体出现贫 血症状，表现为面色苍白 、眼睑和喙部呈淡蓝色。
诊断和检测技术进展
临床症状识别
深入了解鸡传染性贫血病的临床症状，如贫 血、消瘦、产蛋下降等，提高对该病的初步 诊断能力。
实验室诊断方法
运用分子生物学、免疫学等技术手段，开发 快速、准确、敏感的实验室诊断方法，提高 鸡传染性贫血病的检出率。
疫苗和防治策略研发
疫苗研发
积极开展鸡传染性贫血病疫苗的研究和开发 工作，通过临床试验验证疫苗的安全性和有 效性，为防控该病提供有力武器。
通过案例分析和实战演 练，养鸡场主成功控制 了鸡传染性贫血病的传 播和蔓延，减少了经济 损失，也为今后防控类 似疾病提供了有益的参 考。
THANKS
感谢观看
综合防治策略
制定综合防治策略，包括疫苗接种、生物安 全措施、饲养管理改进等，以降低鸡传染性
贫血病的发生率和传播风险。
鸡传染性贫血―诊断
鸡传染性贫血―诊断本病根据流行病学特点、症状和病理变化可作出初步诊断，血常规检查有助诊断，但最终的确诊需要作病原学和血清学等方面的工作。
（一）病毒分离：病毒的分离培养是CIAV鉴定中最常用的方法。
肝脏含有高滴度的病毒，是分离CIAV病毒的最好材料，可将肝脏制成匀浆，离心取上清液，加热70℃5min或用氯仿处理去除或灭活可能的污染物，用于雏鸡、鸡胚或细胞培养接种。
1.接种雏鸡：1日龄SPF雏鸡是初次分离CIAV最特异、最可靠的动物实验方法。
用肝脏病料1∶10稀释肌肉或腹腔接种1日龄SPF 雏鸡,每只0.1ml，观察典型症状和病理变化。
2.接种鸡胚：用肝脏病料卵黄囊接种4～5日龄鸡胚，无鸡胚病变，孵出小鸡发生贫血和死亡。
3.接种细胞培养物：MDCC-MSB1常被作为体外分离鉴定CIAV的主要细胞。
病鸡的肝、脾、胸腺、骨髓等均可作为分离病毒用的病料。
初次接种病料的细胞看不到细胞病变，一般须经过5～6次盲传后，可见感染细胞肿胀、边缘破裂，死亡细胞逐渐增多，最后细胞大部分死亡，表明有CIAV感染。
(二)血清学诊断：目前已建立的CIAV血清学诊断技术有VN、IFN、ELISA，可用于检测感染鸡血清中的抗体。
其中，ELISA是检测CIAV 抗体的一种良好的血清学方法，其敏感性高，操作简便、快速，所需血样少，可以同时检测大量样品，利于大规模普查。
近年来以重组VP1、VP2、VP3做为包被抗原建立的ELISA技术取得了重大进展，可用以检测CIAV抗体。
与传统的全病毒抗原相比，重组抗原更具优势。
可用免疫荧光抗体试验和免疫过氧化物酶试验检测发病鸡组织或细胞培养物中的病毒抗体。
(三)分子生物学诊断：目前有许多分子生物学方法，如核酸探针技术和PCR等技术，用于组织或细胞中病毒的检测，其敏感性和特异性都比较高。
(四)鉴别诊断：该病应该与成红细胞引起的贫血、MDV和IBDV感染、腺病毒感染、球虫病以及高剂量的磺胺类药物和真菌毒素中毒进行区别。
鸡传染性贫血的实验室诊断及防治措施
所 取代 。由 于胸 腺 和 法 氏 囊 等 淋 巴器 官 萎 缩 导 致 免 疫
缺陷， 因此 ， 接种各 种疫苗 效果较差 ， 若有继 发细菌感
染。 则 可 见 坏 疽 性 皮 炎 等 。
２ 实 验 室 诊 断
以康复。 产蛋鸡感染后 ， 临床表现不明显 ， 但产蛋量会受
到 一定 影响 ， 感 染后 ２ ０ － － ４ ２ ｄ内所产 的蛋带 毒量 最 高 【 ４ ］ 。
１ ． ２ 病理变化
剖检可见 ： 病鸡 的皮下 出血 ， 肌肉、 内
且生长速度缓慢 ， 因此 ， 病毒分离不便广泛进行 。目前 ， 实验窒最常用的诊断方法是血清学试验 。如 酶联免疫 吸 附试 验 （ Ｅ Ｌ Ｌ Ｓ Ａ） 、 荧光抗体试验 （ Ｉ Ｆ Ａ） 、 中 和 试 验 （ Ｖ Ｎ ） 等， 这些方法均可用于鸡传染性贫血病 的诊断 。
畜牧 与 饲 料 科 学
Ａ ｎ ｉ ｍａ ｌ Ｈ ｕ ｓ ｂ ａ ｎ ｄ ｒ ｙ ａ ｎ ｄ Ｆ ｅ ｅ ｄ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ
２ ０ １ ３， ３ ４ （ ４） ： １ １ ３
鸡传染性贫血的实验室诊断及防治措施
双 全 龙
（ 内蒙古 阿 鲁科 尔 沁 旗绍 根 镇 动物 卫 生 监督 站 ， 内蒙 古 阿 鲁科 尔沁 旗 ０ ２ ５ ５ ５ ０ ）
现 细胞病变 ，则表 明有鸡 传染性贫 血病毒 的存在 。 用 电镜 检查或荧光抗 体法检 查病毒抗 原 ， 可见 细胞 内有
大 小 不 等 的 黄绿 色荧 光 ］ 。 ２ ． ２ 血 清 学 方 法 由 于 病 毒 分 离 虽 然 是 诊 断 Ｃ Ｉ Ａ 最 有 效 的手 段 ，但 Ｃ Ｉ Ａ Ｖ 只能 在 少 数 肿 瘤 细 胞 上 生 长 。 而
鸡贫血病毒实验室检测方法研究进展
性 贫血 和免疫抑制 为主要 特征 的传染病 ， 是导致许 多疫 苗免 疫失败以及雏鸡 死亡的主要 原 因之一 。 鸡贫血病毒在世界 范围 内广泛 存在 ， 是养鸡 业潜藏的 巨大威胁 。 本文主要 阐述 了该病毒的病毒分 离鉴 定、 清学方法和分子生物 学方 法等 实验 室检 测方法 ， 血 旨在
细胞 。
数 的倒数 表示 。
２ ２ 免疫荧 光试验 （ Ａ） ． Ｆ 荧光 抗体 试验 既可 检￣ Ｃ Ｖ抗 原 ， 可检 测抗 体 ， ＵＡ 又
１ １ Ｓ Ｆ 胚接种 ． Ｐ 鸡
肌 注或腹 腔 内接种 １ 日龄 Ｓ Ｆ 鸡 是 初 次 分 离 Ｐ 雏
ＣＡ 最 特 异 、 靠 的动 物 实验 方 法 。 Ｖ 可 试验 证 明 １ 日龄雏 均 用 Ｃ Ｖ感染 ＭＤＣＣ ＭＳ Ｉ 胞 进 行 。 方 法符 合 率 Ａ ． Ｂ￣ ｍ 该 鸡 接 种感 染Ｃ Ｖ后７ｄ 毒滴 度达 最 高 ， 中胸腺 内病 极 高 ， 用较 多 。 体方 法是在 开始 出现 细胞 溶解 之前 Ａ 病 其 使 具
中国动物检疫 ２ １ 第 ２ ０ ２年 ９卷第 １ 期 ０
７ ５
鸡贫 血病 毒 实验 室检测 方法研究进 展
庄 金秋 ， 建 国 ， 志 强 梅 ～沈
（． １ 山东省滨州畜牧兽 医研究院， 山东滨州 ２ ６０ ； ． ５ ６０ ２ 吉林大学畜牧兽 医学院， 吉林长春 １０６ ） ３０２
毒 含量 高 于肝脏 和骨 髓 ， 因此 在所 有 的病鸡 组织 中 ， 以 收集 以Ｃ Ｖ感 染 的ＭＤＣ ＭＳ １ 胞 ， 个 时 间通 常 Ａ Ｃ． Ｂ 细 这
鸡传染性贫血病诊断及防控措施
鸡传染性贫血病诊断及防控措施作者：吴坤，徐正军，董永毅，薛忠家来源：《畜牧兽医科学》 2019年第13期吴坤，徐正军，董永毅，薛忠家（江苏省动物疫病预防控制中心，南京 210036）摘要：鸡传染性贫血病是由该病毒引起的一种免疫抑制性疾病，雏鸡多发，其他不同品种和日龄的鸡均可感染，会导致免疫机能减弱，出现免疫抑制，严重影响鸡的生长发育和生产性能，同时给养殖场户带来巨大经济损失。
该文结合该病的病毒特征、流行病学特点、诊断技术及防控措施进行探讨，供同行交流学习。
关键词：鸡；传染性贫血病；流行病学；防控措施中图分类号：S858.31文献标识码：Bdoi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.13.0720 引言鸡传染性贫血病（CIA）是由该病毒（CIAV）感染雏鸡而引起的一种免疫抑制性疾病，该病以再生障碍性贫血和全身性淋巴组织萎缩为特征。
鸡传染性贫血病最早在日本发现，随后在全球多个国家流行，1992年我国从患病鸡群中分离到鸡传染性贫血病病原。
近年，通过对该病的流行病学调查显示，感染率逐渐上升，高者可达70%左右。
目前鸡传染性贫血病逐渐呈地方性流行，严重影响养鸡行业的健康发展，同时给养殖户带来巨大经济损失。
1 病毒特征鸡传染性贫血病毒（CIAV）属于圆环病毒科圆环病毒属，为环状的单链DNA病毒，无囊膜，直径约为23 nm，该病毒的复制型基因组大约由2 300 bp组成。
病毒对外界有较强的抵抗力，对高温耐受性强，可在100 ℃开水中耐15 min以上，病毒在一般环境中最长可存活数月[1]。
该病毒耐酸性强，可在pH值为3的酸性溶液中保持3 h以上，但易被氧化，苯酚、次氯酸盐等消毒剂对该病毒有较好的杀灭作用。
2 流行病学鸡传染性贫血病（CIA）在任何季节都有发生，鸡是传染性贫血病毒的唯一宿主，不同品种不同日龄的鸡均能感染该病毒并发病，但日龄越小，易感性越强，病死率也就越高，30日龄内的雏鸡是该病最主要的鸡群，通常在2周龄左右突然发病，病程持续1～2周，鸡群患病3 d后开始出现死亡，7 d达到高峰。
鸡传染性贫血病流行特点与诊断方法
维普资讯
Ｈｅｌｎ ｊ ｎ ｏ ｒａ ｛ ｉ ｌ ｉ ｇｉ ｇＪ ｕ ｎ ｌ０ Ａｎｍａ ｏ ａ Ｓ ｉ ｃ ｎ ｔｒ ａｙＭ ｅ ｉｉｅ ２ ｃｅ ｅａ ｄＶｅｅｉ ｒ ｄｃｎ ７ ｎ ｎ
鸡传 染性 贫血病 流行特点 与诊 断方法 一熊永忠
子 （ ｈｃｅ ｎｍｉ ｇ ｔ Ｃ Ａ） 鸡传染性 贫 血病毒 （ ／ ｅ Ｃ ｉ ｎａ ｅ ａａ ｅ ， Ａ 或 ｋ ｎ ｃｎ ｋ
ｉｆｃｏ ｓ ｎｍｉ ｖｒｓ ＣＩ ， ｎｅｔ ｕ ｅ ａ ｉ ， ＡＶ） 以后 逐 渐 统 一 称 作 鸡 贫 血 病 毒 ｉ ａ ｕ
（ ／ｅ 口 ｈ ｋ Ｃ ｃｎ ｉ ｕ ， ＡＶ） 。 ｃＡ 由 日本 学 者 Ｙｕｓ ｖｒｓ Ｃ … Ｉ ａａ等 于
本、 德国 、 典 、 国 、 拿 大 和 美 国， 常 从 鸡 群 中 分 离 到 瑞 英 加 经 Ｃ Ｖ。澳大 利亚及 一些 欧洲 、 Ａ 非洲 和 亚洲 国 家通 过 血清 学 普
查 ， 现 普 遍 可 以检 测 到 Ｃ Ｖ 抗 体 阳 性 。 我 国 鸡 群 中 Ｃ 发 Ａ ＡＶ 感 染 情 况 也 十分 严 重 。 鸡是 Ｃ ＡＶ 的 主 要 自然 宿 主 ， 种 品 系 的鸡 均 有 易 感 性 ， 各 其 中 自来 航 鸡 易 感 性 最 高 ， 有 报 道 海 兰 白 蛋 鸡 和 艾 维 茵 肉 鸡 较 也 为 易 感 。 另 外 Ｔ． ａｋ ｓ Ｆ ｒａ 等 研 究 发 现 ， 鸡 以 外 日本 的 鹌 鹑 、 除 鸽子 、 鸦也可 能是另外宿 主。许多国家 的种用小母鸡群 和 肉 乌 用 雏 鸡 群 中 都 有 Ｃ Ａ 感 染 流 行 。 各 年 龄 组 雏 鸡 对 本 病 均 有 易 Ｉ 感 性 ， 鸡 胚 和 １ 日龄 以 内的 雏 鸡 易 感 性 最 强 ， 病 率 最 高 。 但 ４ 发 Ｃ ＡＶ 既 可 经 卵 垂 直 传 播 ， 可 由被 污 染 的 粪 便 、 舍及 工 也 房
鸡传染性贫血病的研究进展
了一 个新 病毒 科 ，命名 为 圆环病毒 科
（ ｉｃｖｒ ａ ） Ｃ ｒｏ ｉｉ ｅ。但 三者 之 间并 没有 相 ｄ
同 的 抗 原 决 定簇 ， 且 Ｐ Ｖ、Ｐ Ｆ Ｖ 并 Ｃ Ｂ Ｄ
Ｃ Ａ 与 猪 圆环 状 病 毒 （ Ｖ） 和 鹦 鹉 ＩＶ ＰＣ
三 流 行病 学
鸡 是 Ｃ ＡＶ 的 唯 一 自然 宿 主 ， 至 Ｉ 今 未 发 现 其 他 禽 类 对 本 病 易 感 ， 肉 鸡
啄 羽 病 毒 （Ｂ Ｄ 归 为 一 类， 成 立 Ｐ Ｆ Ｖ）
贫血 病 毒核 酸的 检测 。结果 检测 的病
蛋 白存 在 一 些 差 异 。Ｔ０ ｄ 等 发 现 来 自 ｄ 不 同 国 家 的 Ｃ Ａ 分 离 株 之 间 其 限 制 ＩＶ 性 酶 切 位 点 存 在 差 异 ，但 绝 大 多数 毒
的趋 势。杨克礼 等 ２ ０ ０４年 报道安徽 省 所 检 测 的 ９ 个 病 例 中 ， 结 果 Ｃ ＡＶ ５ Ｉ
鸡传染性贫血病 的研 究进 展
王 亮 ’ 王 刚 ，常维 山 ’ ６４Ｏ １ 山东农业大学动物科技学 院 ．山东泰 安 ２ １ １ ２ 山东 ７Ｏ ８
鸡 传染 性 贫血 病 （ Ｉ 是 由鸡 传 Ｃ Ａ） 染性 贫血病毒 （ Ｉ Ｖ） ｃ Ａ 引起 的一种以雏
显 的 贫 血 病 变 ， 但 可 引 起 不 同 程 度 的
缩 为 主要特 征 的病毒 性 传染病 。它 和 马立克 氏病 病毒 （ ＭＤＶ） 、传染 性法 氏 囊病病 毒 （ Ｄ 、网状 内皮 增生症 病 Ｉ Ｖ） Ｂ 毒 （ Ｖ） ＲＥ 、禽 白血病病毒 （ Ｖ）和禽 ＡＬ
呼 肠孤 病毒 （ Ｖ） 是 危 害 养 鸡 业 最 常 ＡＲ
鸡传染病性贫血-V1
主要临床特征是贫血,血稀如水
病鸡皮肤苍白，发育迟缓，精神沉郁
翅膀皮炎或蓝翅，全身点状出血，水肿
病理变化
病理组织学特征性变化是再生障碍性贫血和全身 淋巴组织萎缩。血液稀薄如水，凝血时间长。 骨髓呈黄白色，胸腺和法氏囊萎缩
皮下出血， 多见于翅部
诊断
2-3周龄鸡最易感 贫血为主要的临床症状 骨髓脂肪样黄色 胸腺萎缩
鸡传染性贫血
（Chicken Infectious Anaemia,CIA)
鸡贫血因子
(Chicken Anaemia Agent,CAA)
概述
鸡 传 染 性 贫 血 病 (CIA) 是 由 鸡 传 染 性 贫 血 病 毒 (CIAV) 引起的一种以雏鸡再生障碍性贫血和全身 淋巴组织萎缩为主要特征的病毒性传染病，是危害 养鸡业最常见的免疫抑制性病毒。 本病于1979年被Yuasa 等首次在日本发现。我国于 1992年报道发现该病。目前，鸡传染性贫血病及其 诱发的疾病已经成为一个严重的问题，已被列入世 界范围的重要禽病研究行列
确诊需要血清学等实验室方法诊断
防制
无特异的治疗方法，必须时可使用抗生素防止细 菌继发感染。
重视日常管理
加强检疫，禁止引进感染CIAV 的种鸡和种蛋;加强 种鸡和后备种鸡的检疫，及时淘汰感染鸡是控制本 病的关键。 免疫接种。对12 ～ 16 周的种鸡饮水免疫，6 周后 能产生坚强的免疫力，可有效防止子代发病。免疫 6 周后的蛋可留作种蛋。 不能在产蛋前3-4周免疫，以避免通过种蛋传播疫 苗病毒。
病原
鸡传染病贫血病毒（ＣＩＡＶ）
圆环病毒属，单链ＤＮＡ，无囊膜。
鸡传染性贫血病毒感染的症状及诊断技术
鸡传染性贫血病毒感染的症状及诊断技术鸡传染性贫血病，是由鸡贫血病毒( ciav)引起的再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩性免疫缺陷病，常给养鸡业造成巨大的经济损失。
下面我们了解一下鸡传染性贫血病毒感染的症状及诊断技术。
一、鸡传染性贫血的主要症状(1)6周龄以内小鸡，尤其是肉仔鸡出现严重贫血，生产性能降低和死亡率升高，有明显免疫抑制，应考虑到cav感染的可能性。
(2)病鸡精神沉郁、食欲减退，发育受阻，冠及髯苍白，羽毛蓬乱。
感染鸡常见皮肤或皮下点状出血，翼部、头部、臀部、腹部发生灶状淤血及出血；病变部皮肤变蓝和破溃，流出血样渗出物；病变部易继发细菌感染，导致坏疽性皮炎。
二、鸡传染性贫血的流行特点(1) cav只能使鸡发病，感染率在20% - 60%，所有年龄的鸡都可感染，肉鸡比蛋鸡易感，公鸡比母鸡易感。
(2)对本病毒的易感性随日龄的增长而急剧下降。
1 -7日龄雏鸡最易感，而有完全免疫力的2-3周龄的雏鸡对本病的易感性迅速降低，6周龄以上多呈亚临床感染。
(3)垂直感染为本病的主要传播方式。
该病死亡率在5%- 10%，最高可达60%，如继发其他疾病，则可加重病情，提高死亡率。
三、鸡传染性贫血的剖检所见(1)以胸腺、骨髓萎缩、肌肉与内脏器官贫血、苍白最具特征。
(2)胸腺体积缩小，呈深红褐色。
随着年龄的增加，胸腺萎缩比骨髓的病变更易观察到。
法氏囊体积缩小，显著萎缩。
(3)股骨的骨髓萎缩、脂肪化，呈淡黄红色或粉红色。
除此以外，全身各处肌肉及内脏器官贫血、苍白，有时还可观察到与严重贫血症有关的其他病变，如肝脏、肾脏肿大、褪色，脾脏褪色萎缩，心脏扩张，心肌柔软，腺胃黏膜皮下及肌肉出血。
四、鸡传染性贫血的实验室诊断方法(1)临床诊断主要根据病鸡的临床症状和病理变化，确诊必须进行病毒分离及血清学试验。
(2)病毒分离一般取病鸡的肝脏匀浆后，加等量氯仿处理，离心取上清液，肌肉接种1日龄spf雏鸡，隔离饲养14 - 16天后血液压积低于27%，骨髓变黄者为阳性。
鸡传染性贫血病的诊断及防治
黄 氏升 补 巾气 为 主 药 ， 氏 、 参 黄 党 补 正气 ， 虚 汗 ； 苓 强 心 利 尿 ； 术 止 茯 白 补脾 治 劳 倦 ：五 味 于 收敛 肺 气 ；赤 石 脂 ， 】 肉 涩 汤 止 泻 ： 皮 、 皮 和 解 ｉ子 ｉ 『 青 陈 郁滞之 气 ， 肝木舒畅 ， 使 以缸 通 脾 土 ， 互得其养 ； 麻能提升清阳气于上焦 ， 升 不使养分再坠下 ； 山药 补 虚 治 体 瘦 ， 重 用 可生膘 ： 蒲强 心 以补 脾 虚 。 酉 以上 诸
害。
目 前 该 病 在 世 界 范 围 呈 蔓 延 趋 势 ． 为危 害 养 鸡 业 的 主要 疾 病 之一 。 成 Ｃ Ｖ主要 侵 害鸡 的造 血 器 官 和 淋 巴组 Ａ 织． 导致 雏 鸡 贫 血 、 出血 或 成 鸡 免 疫 抑 制 ．耳 能 加剧 同其 它 疾 病 如 马 立 克 氏
丰堡 村 马某 １ 岁 牛来 就 诊 。主 诉 ： 头４ 该
ａｅ ａｖｒｓＣ Ｖ ￣ 起 的一 种 病 毒 性 ｎｍｉ ｉ ，Ａ ）ｌ ｕ 传 染 病 ，是 鸡 主 要 的 免 疫 抑 制 病 之
一
牛 １ ３ 由于 经常 使役 ．时泻 时 止 ， ０１前 曾 灌 服 氯 霉 索 片 、 氟 沙 星 胶囊 ， 效 甚 诺 收 微 ． 目前 大便 又转 溏 稀 ． 草减 少 ， 两 吃 甚 是 顽 固。症 见形体 消瘦 ， 被毛 粗乱 ， 神 精 沉郁 ， 粪便 稀 溏完 谷 不化 ， 色淡 白 ， 唇 舌 色青 。笔者 给服 本方 １ 剂痊 愈。
下 和肌 肉有时 可见 出 血性 变化 ４ 诊 断
文就 该 病 的发 病 情 况 、 床症 状 、 检 临 剖 变化 、 防治 措 施 等 方 面 做 一 概述 ， 广 供 大养 殖 户 和 兽 医临 床 工 作 者参 考 。
鸡传染性贫血的诊断与防控
2020年第08期鸡传染性贫血是一种比较严重的免疫抑制病，是由鸡传染性贫血病毒(CIAV)引起的，其典型症状为贫血，可引起全身性淋巴组织萎缩。
此病以1~3周龄的雏鸡最易感，常导致死亡。
由于养鸡业的规模化、集约化发展，由此病引起的多种疾病的免疫失败现象越来越多，逐渐引起广大畜牧兽医工作者的重视。
此病的流行范围广，给养鸡业带来严重的经济损失，因而早期诊断尤为重要。
1流行特点鸡是鸡传染性贫血唯一易感的动物，其中肉用公鸡最易感。
1~7日龄的雏鸡最易感，6周龄以内的雏鸡也可以感染发病，6周龄以上的一般多为亚临床感染。
此病主要通过种蛋垂直传播，当雏鸡体内母源抗体不足时，也可以通过水平传播。
据研究表明，大多数的种鸡群在8~12周后，会发生CIAV 抗体阴转阳的现象，表明此病存在水平感染。
种鸡在开产前或者在产蛋期感染了CIAV 的8~14d 后，会有3~6周的垂直感染期，此时种鸡没有明显的症状，产蛋性能和种蛋的质量也不会受到影响，但是病毒会经过种蛋传给雏鸡。
雏鸡出生2周左右就会发生CIA 发病症状，死亡率可高达15%左右。
鸡传染性贫血可以和其他的很多病毒性疾病混合感染，加重病情，并形成免疫抑制，如鸡传染性贫血病毒和马立克病毒混合感染后，就会抑制疫苗对马立克氏病的免疫力，而同时马立克氏病毒也会加重CIAV 的致病力。
种鸡感染传染性贫血的严重性，不仅仅体现在后代雏鸡的出血、贫血以及死亡，更为严重的是其普遍性的亚临床感染以及其对养鸡场造成的经济损失。
2临床症状鸡感染传染性贫血病以后，典型症状是贫血和免疫抑制，雏鸡还表现为精神萎靡，生长发育受阻，皮肤粘膜苍白，体乏无力，死亡率大大提升等。
雏鸡出现临床症状的5~6d 后，出现死亡高峰，以后死亡率会逐渐降低。
病情严重的，还会出现腹泻、皮下出血、水肿。
3病理变化鸡感染CIAV 后，会出现再生障碍性贫血，全身淋巴组织萎缩。
解剖病死鸡，可以发现其骨髓发育不全或萎缩，窦内成熟红细胞的数量显著减少，脂肪细胞或增生的基质细胞替代了造血细胞。
江苏1株鸡传染性贫血病毒的分离鉴定
江苏1株鸡传染性贫血病毒的分离鉴定作者：杜宗沛等来源：《江苏农业科学》2015年第09期摘要：利用MDCC-MSB1细胞系从江苏省泰州市发病鸡中分离获得1株病毒，通过间接荧光抗体试验（IFA）确定该病毒为鸡传染性贫血病毒（CAV）。
利用PCR扩增、电泳、克隆、核酸测序得到全长2 324 bp的基因编码区序列，该序列碱基完整，无缺失和插入。
经遗传学方法分析发现，该株序列与GenBank中已收录的可见CAV序列同源性为96.5%～99.8%。
CAV的3个编码基因序列VP1（1 315 bp）、VP2（643 bp）、VP3（366 bp）均有不同程度变异，以VP1变异程度最大。
使用电子显微镜观察到病毒粒子与鸡传染性贫血病毒一致，证实该病毒为鸡传染性贫血病毒新亚型，将其命名为CAV MY1305-30株并提交至GanBank，编号为KF318725、KF318726。
关键词：鸡；传染性贫血病毒；分离鉴定；基因序列；编码中图分类号： S855.3文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）09-0244-03鸡传染性贫血病（Chicken infectious anemia，CIA）最早被称为贫血综合征、贫血-皮炎综合征、出血性贫血病、贫血因子病等，其病原于1979年被首次分离并确定，早期称其为鸡贫血因子（chicken anemia agent，CAA）、鸡传染性贫血病毒（chicken infectious anemia virus，CIAV），之后逐渐统一称作鸡贫血病毒（chicken anemia virus，CAV）。
CAV的核酸为环状单股负链DNA，在1995年第6次国际病毒分类大会上将其与猪圆环病毒（PCV）、长尾鹦鹉啄羽病病毒（PBFDV）一起归属于圆环病毒科（Circoviridae），该科病毒是已知最小的动植物病毒，因此很少有人能通过电子显微镜观察到CAV。
从CAV感染的MDCC-MSB1（鸡马立克氏病成淋巴细胞样细胞系）细胞培养液中纯化的病毒粒子，经负染后在电子显微镜下呈直径约为20 nm的球状。
鸡传染性贫血病
鸡传染性贫血病鸡传染性贫血病又名出血性综合症或贫血性皮炎综合症，是由鸡贫血病毒引起雏鸡再生障碍性贫血、全身淋巴组织萎缩、皮下和肌肉出血、骨髓萎缩变色为特征的一种免疫抑制性疫病。
(一)病原鸡贫血病毒可在鸡胚中繁殖，也可在MDCC-MSB1细胞系上生长繁殖。
病毒能耐受50％氯仿处理15分钟、50％乙醚处理18小时、pH3.0处理3小时，对热有较强的抵抗力，用5％酚处理5分钟病毒即失去其感染性。
(二)流行病学自然条件下只有鸡对本病易感，不同品种的鸡都能感染本病。
随着年龄增加，本病对鸡的易感性明显减少。
主要发生在2～3周龄内的雏鸡，1～7日龄雏鸡最易感，其中以肉鸡尤其是公鸡更易感染。
本病主要通过蛋垂直传播，水平传播一般不引起发病，但有抗体产生。
病愈鸡可产生中和抗体。
带有母源抗体的雏鸡一般不感染发病，但抗体水平低或母源抗体水平正常而混合其它病原体感染或继发感染均可能发病。
与马立克氏病毒混合感染，会造成鸡的早期死亡，与法氏囊病毒混合感染会大大提高鸡的死亡率。
该病也可能是造成鸡新城疫免疫失败的原因之一。
1日龄无母源抗体无特定病原的雏鸡经口接种病毒，一般10～16日龄开始发病，发病率高达100％，死亡率为50％。
(三)临床症状本病的主要临床特征是贫血，一般在感染后10～12天症状表现最明显，病鸡表现精神沉郁、消瘦、苍白、翅膀皮炎或蓝翅，体重减轻，全身或头颈部皮下出血、水肿，2～3天后开始死亡，死亡率不一致，通常为10％～50％。
本病导致鸡体骨髓造血细胞形成紊乱而产生贫血症状。
感染鸡血稀如水，血凝时间延长，血细胞容积可降低到20％以下，红、白细胞数量减少，可分别降到100万/毫升和5000万/毫升以下。
(四)病理变化剖检可见肌肉、内脏器官及全身苍白贫血，肝脏肿大，脾、肾肿大，腺胃粘膜、肌肉、皮下都可见有出血斑，胸腺和法氏囊明显萎缩。
最特征的病理变化是骨髓的萎缩性病理变化，小鸡股骨的骨髓从正常的深红色变为脂肪色、淡黄色或浅红色。
鸡传染性贫血―诊断
鉴别诊断
排除其他类似疾病，如禽白血 病、禽网状内皮组织增生症等
。
确诊与排除其他疾病
确诊
结合临床症状、实验室检查结果，确诊鸡群是否感染鸡传染性贫血病毒。
排除其他疾病
确诊后需进一步排除其他类似疾病，以确保诊断的准确性。
05
诊断注意事项
注意样本采集的时机和部位
样本采集时机
为了确保检测结果的准确性，样本采集应 选择在鸡只患病早期或典型症状出现时进 行。
鸡传染性贫血―诊断
2023-11-04
contents
目录
• 鸡传染性贫血概述 • 临床诊断 • 实验室诊断 • 诊断流程 • 诊断注意事项
01
鸡传染性贫血概述
定义和症状
定义
鸡传染性贫血（CIA）是一种由鸡传染性贫血病毒（CIAV）引起的传染病。
症状
CIA的典型症状包括贫血、黄疸、免疫抑制和生长迟缓。这些症状在感染后的 1-2周内出现，并且可能在2-6周内达到高峰。此外，感染鸡还可能表现出羽 毛发育异常、皮肤出血和关节肿胀等症状。
样本采集部位
通常采集患病鸡只的血液、组织样品，如 淋巴结、脾脏等，以及排泄物和环境样品 ，如饮水和饲料。
实验室检测中的注意事项
选用合适的检测方法
根据实际情况选择适合的实验室检测方法，如血清学检测、基因 检测等。
避免交叉污染
在实验操作过程中，应严格遵守无菌操作规程，避免样品之间交 叉污染，影响检测结果。
诊断方法概述
临床诊断
根据鸡的典型症状（如贫血、黄疸等）和生长迟缓等体征进行初步诊断。
实验室诊断
实验室诊断方法包括病毒分离与鉴定、抗体检测和分子生物学检测。其中，病毒分离与鉴 定可以确定病原的存在；抗体检测可以评估鸡群的免疫状态；分子生物学检测可以通过检 测病毒的特异性基因片段来快速诊断CIA。
鸡传染性贫血病研究进展_杨克礼
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!收稿日期：２００７－０２－１４中图分类号：Ｓ８５８．３１５．３文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－１０８５（２００７）０４－００４１－０５ｂｒｏｉｌｅｒｃｈｉｃｋｓａｆｔｅｒｈａｔｃｈｉｎｇ［Ｊ］．ＢｒｉｔｉｓｈＰｏｕｌｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅ．１９９１；３２：５１５－５２３．８Ｎｏｙ，Ｙ．ｅｔ，ａｌ．Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎａｎｄａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｉｎｔｈｅｙｏｕｎｇｃｈｉｃｋ［Ｊ］．ＰｏｕｌｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，１９９５，７４：３６６－３７３．９ＬａｃｅｙＪＭ，ＷｉｌｍｏｒｅＤＷ．Ｉｓｇｌｕｔａｍｉｎｅａｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｌｌｙｅｓｓｅｎ－ｔｉａｌａｍｉｎｏａｃｉｄ［Ｊ］．Ｎｕｔｒ．ｒｅｖ，１９９０，４８：２９７．１０施用晖，乐国伟，刘建文，吴辛驰．外源核苷酸对肉鸡生产性能的影响［Ｊ］．无锡轻工大学学报，２０００，１９（６）．１１邬小兵．日粮核苷酸营养初探［Ｄ］．雅安：四川农业大学，１９９９．１２唐方，指阿部博马．锌缺乏对小鼠巨噬细胞与小肠粘膜上皮细胞的影响［Ｊ］．营养学报，１９９２，１４（４）：３３５．１３ＺｅｈａｖａＵｎｉ，ＧｉｄｉＺａｌｒ，ＲａｍＲｅｉｆｅｎ．ＶｉｔａｍｉｎＡｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｉｎｄｕｃｅｓｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｉｅｃｈａｎｇｅｓａｎｄｄｅｃｒｅａｓｅｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉ－ｔｙｉｎｃｈｉｃｋｅｎｓｍａｌｌｉｎｔｅｓｔｉｎｅ［Ｊ］．ＢｒｉｔｉｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｕｔｒｉ－ｔｉｏｎ，１９９８，８０：４０１－４０７．１４Ｕｎｉ，Ｚ，Ｅｔａｋｏ，Ｏ．Ｇａｒｂｅｒ，ａｎｄＤ．Ｓｋｌａｎ．２００３ｂ．Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｍｏ－ｌｅｃｕｌａｒ，ａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ；ｃｈａｎｇｅｓｉｎｔｈｅｃｈｉｃｋｅｎｓｍａｌｌｉｎｔｅｓ－ｔｉｎｅｏｆｔｈｅｌａｔｅｔｅｒｍｅｍｂｒｙｏ［Ｊ］．Ｐｏｕｌｔ．Ｓｃｉ，１９８２：１７４７－１７５４．１５高景编译．给鸡胚饲喂有助健康并降低死淘［Ｊ］．家禽科学，２００３（０９）．１６Ｕｎｉ，Ｆｅｒｋｅｔ．Ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｅａｒｌｙｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｉｒｐｏｔｅｎｔｈｌ［Ｊ］．Ｗｏｒｌｄ＇ＳＰｏｕｌｔｓｃｉＪ，２００４，６０：１０１－１１１．１７黄小春，吴灵英．鸡胚给养氮基酸对肉仔鸡孵化率和胚胎生长的影响［Ｊ］．中国饲料，２００５年第２３期：１９－２０．１８Ｏ．Ｔ．Ｆｏｙｅ，Ｚ．Ｕｎｉ，Ｊ．Ｐ．ＭｃＭｕｒｔｒｙａｎｄＰ．Ｒ．ＦｅｒｋｅｔＴｈｅＥｆｆｅｃｔｓｏｆＡｍｎｉｏｔｉｃＮｕｔｒｉｅｎｔＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，“ＩｎｏｖｏＦｅｅｄｉｎｇ”ｏｆＡｒｇｉｎｉｎｅＡｎｄ／ｏｒβ－Ｈｙｄｒｏｘｙ－β－ＭｅｔｈｙｌＢｕｔｙｒａｔｅ（ＨＭＢ）ｏｎＩｎｓｕｌｉｎｌｉｋｅＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒｓ，ＥｎｅｒｇｙＭｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄＧｒｏｗｔｈｉｎＴｕｒｋｅｙＰｏｕｌｔｓ［Ｊ］．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｏｕｌｔｒｙＳｃｉ－ｅｎｃｅ，２００６，５（４）：３０９－３１７．１９ＰｅｔｅｒＲ．Ｆｅｒｋｅｔ＆ＵｎｉＺｅｈａｖａ．ＧａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌＤｅｖｅｌｏｐ－ｍｅｎｔａｔＨａｔｃｈ［Ｊ］．ＭａｒｙｌａｎｄＮｕｔｒｉｔｉｏｎＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅ２００３．２０Ｅ．Ｔａｋｏ，Ｐ．Ｒ．Ｆｅｒｋｅｔ，ａｎｄＺ．Ｕｎｉ．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＩｎＯｖｏＦｅｅｄｉｎｇｏｆＣａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓａｎｄβ－Ｈｙｄｒｏｘｙ－β－ＭｅｔｈｙｌｂｕｔｙｒａｔｅｏｎｔｈｅＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＣｈｉｃｋｅｎＩｎｔｅｓｔｉｎｅ［Ｊ］．ＰｏｕｌｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，２００４（８３）：２０２３－２０２８．２１ＡＩ－ＭｕｒｒａｎｉＷＫ．Ｅｆｅｃｔｏｆｉｎｊｅｃｔｉｎｇａｍｉｎｏａｃｉｄｓｉｎｔｏｔｈｅｅｇｇｏｎｅｍｂｒｙｏｎｉｃａｎｄｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｇｒｏｗｔｈｉｎｔｈｅｄｏｍｅｓｔｉｃｆｏｗｌ［Ｊ］．ＢｒＰｏｕｌｔＳｃｉ，１９８２，２３：１７１－１７４．□鸡传染性贫血病研究进展杨克礼，徐涤平，梁望旺，刘泽文，汪宏才（湖北省农科院畜牧兽医研究所，湖北武汉４３００６４）鸡传染性贫血（Ｃｈｉｃｋｅｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓａｎｅｍｉａ，ＣＩＡ）是由鸡传染性贫血病毒（ｃｈｉｃｋｅｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓａｎｅｍｉａｖｉｒｕｓ，ＣＩＡＶ）引起的一种以雏鸡再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征的病毒性传染病，是鸡重要的免疫抑制病之一。
鸡贫血病毒病的流行诊断和防治措施
鸡贫血病毒病又称鸡传染性贫血、“蓝翅病”、贫血性皮炎综合征、出血性再生障碍性贫血综合征。
本病以雏鸡再生障碍性贫血、全身淋巴组织萎缩、皮下和肌肉出血为主要特征，具有较高的死亡率。
1病原、流行与病机鸡传染性贫血病毒（CAV）直径为25nm，单链，无囊膜的二十面体病毒，DNA基因组为环状，是圆环病毒科环状病毒属的唯一成员。
基因组编码3个病毒蛋白（VP）。
VP1是衣壳蛋白，但需要骨架蛋白VP2才能正常折叠。
VP2还具有双重特异性蛋白磷酸酶（OSP）活性，基因变异可影响DSP活性，导致体内病毒复制能力减弱。
VP3（又称为凋亡因子），是一种非结构蛋白，能引起感染细胞发生细胞凋亡。
虽然已在日本鹌鹑中检测到抗体，但鸡传染性贫血病毒只感染鸡。
经血清学和病毒分离证实，目前在世界上广泛存在该病毒。
商品化养鸡的大多数国家都有本病的描述。
CAV的水平传播是经粪便-口腔途径，也可经呼吸道和羽毛囊传播。
当血清学阴性母鸡受到感染时，可出现垂直传播，并一直持续到出现中和性抗体为止。
感染种蛋孵出的雏鸡可发生病毒血症，使CAV由感染鸡迅速水平传播至母源抗体阴性的易感雏鸡。
公鸡通过精液排毒是CAV垂直传播的另一个途径。
建议在产蛋之前给血清学阴性鸡群接种疫苗，以防止垂直传播。
母源抗体阴性的雏鸡，在1~2周龄很容易感染和发病。
相比之下，母源抗体阳性的雏鸡可避免发病，也可能会避免感染。
雏鸡在约1周龄时，开始出现疾病的年龄抵抗力，但不是针对感染。
免疫抑制性病毒，如鸡传染性法氏囊病病毒，鸡马立克病病毒和禽网状内皮组织增生症病毒的并发感染，可以克服年龄抵抗力。
许多SPF鸡群在性发育期间或开产后，可产生抗CAV抗体。
来源于CAV污染鸡胚或细胞培养的疫苗可能会造成病毒的传播。
给1日龄易感雏鸡肌内注射CAV，可在24h内发生病毒血症。
接种后35d内，可从大部分器官和直肠内容物中再次分离到病毒。
CAV的主要复制部位是骨髓的原始血细胞、胸腺皮质的前体T细胞以及脾脏的CD8细胞。
浅谈鸡传染性贫血的诊治技术
属 于 磺 胺 类 药 物 ．其 对 雏 鸡 的 刺 激 较 大 ．可 能 导 致 肾脏 承 受 功 能 减 弱 而 引 起 鸡 只 死 亡 ５３ 通 过 预 防 接 种 是控 制 本 病 的 有效 ． 方 法 建 议 普通 蛋 鸡 养殖 场 在 １ ｔ 同 龄 Ｅ
黏膜 、 肉 、 下都 可见有 出血斑 ， 肌 皮 胸 腺 和 法 氏囊 明显 萎 缩 最 特 征 的病 变
血 和 死 亡 细 菌 培 养分 离 病 毒 。 进 用 并
行 病 毒 鉴定 ４３ 血 清 学 方 法 ．
成 年 种 鸡 感 染 Ｃ Ｖ后 一 般 不 表 现 Ａ 临 床 症 状 ， 蛋 量 、 精 率 、 化 率 等 产 受 孵
鸡 表 现 精 神 沉 郁 、 瘦 、 白 、 膀 皮 消 苍 翅 炎 或 蓝 肢 ． 重 减 轻 ． 身 或 头 颈 部 皮 体 全
下 出 血 、 肿 ，～ 后 开 始 死 亡 ， 亡 水 ２ ３ｄ 死
萎 缩 、骨 髓 脂 肪 样 变 以 及 局 部 皮肤 坏
死 等 特 征 性 症 状 和 病 变 ．可作 出初 步
注 意与 球 虫 病 、磺 胺 药 物 中毒 等
病 症相 区分 ｆ 与球 虫 病 区别 ： Ｉ 没 有 血 便 。 １ ） ＣＡ 肠 道见 不 到 点 状 出血 ：球 虫 病 引 起 的
症 状 容 易 误 诊 为 小 肠 球 虫 以 及 新 城
体。 以备 日后 再 次 发 病 的 治 疗之 用 。 ５５ 雏 鸡 一 旦 感 染 传 染 性 法 氏囊 病 ．
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鸡贫血病毒（CA V）是免疫抑制性疾病～鸡传染性贫血病（CIA）的主要病原，其不但引起骨髓等造血组织萎缩，导致严重贫血甚至死亡，而且引起胸腺等淋巴组织萎缩，导致免疫抑制。
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自日本1979年首次报道该病以来，世界主要养禽国家，如英国、丹麦、波兰、美国、澳大利亚、荷兰、巴西和阿根廷等国先后发现该病的存在。
我国于1992年在黑龙江首次分离到该病毒，随后在辽宁、吉林、山东、江苏、河南等地的鸡群中也陆续发现。
该病在世界范围内广泛分布，正在直接或间接地对世界养禽业造成巨大的经济损失。
下面就对该病的诊断方法作一综述。
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1临床症状yz.ag365yz.ag365
采用1日龄SPF雏鸡接种感染CA V后发生贫血症状，测定红细胞压积值，病鸡血液的血细胞压积值（HCT）明显降低，各种血液细胞数量明显减少，发病严重情况下HCT值可降到10%以下，血细胞数可降到1×10E6/ml以下。
实验室内常将HCT作为CIA的一个诊断指标，一般将HCT低于27%判为发病。
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2病原学诊断yz.ag365yz.ag365
2.1病毒的分离yz.ag365yz.ag365
无菌操作采集可疑病例的肝脏，也可采集胸腺、骨髓、脾脏等组织。
将采集的病料用灭菌PBS研磨，加入终浓度1000IU/ml的双抗于37℃作用30min，反复冻融3～4次，离心;上清液加入50%体积氯仿作用15min，期间不停振摇，70℃处理5min，离心;上清液经0.22μm 滤膜过滤，置低温冰箱冻存，待进行病毒分离试验。
体内病毒分离实验的接种对象为1日龄SPF雏鸡，体外病毒分离用MDCC～MSB细胞。
过滤除菌后的病料上清接种MSBl细胞培养，可以用于鸡贫血病毒的分离鉴定。
接种病毒后，每隔2～3天传代一次，连续传4～7代，如果出现细胞肿胀，变大变圆，随后有侧解，细胞培养液不再变色，无法继续传代，可以初步确定为有CA V的存在。
MSBl细胞也可以用于鸡贫血病毒的毒价滴定，连续稀释后的病毒接种MSBl细胞，在细胞板上连续传4代以上，观察细胞病变，也可以传1代后，用荧光抗体来检查鸡贫血病毒的存在和病毒的滴度。
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2.2病毒鉴定yz.ag365yz.ag365
病毒的鉴定可以采用间接荧光法检测抗原。
取敏感动物实验感染鸡肝脏做组织冰冻切片，CA V感染阳性组织切片在显微镜下可见荧光标记。
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CA V感染阳性细胞涂片在荧光显微镜下可见MDCC～MSBl细胞肿胀，细胞核内颗粒状或弥散状荧光标记，荧光标记细胞的多少与毒株的感染力有关。
阳性对照可见到同样结果，荧光标记细胞在30%～60%左右，阴性对照细胞内不出现荧光颗粒。
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3血清学诊断yz.ag365yz.ag365
CA V感染1日龄雏鸡后产生的中和抗体能维持20周，感染10周龄以上的成鸡后所产生的中和抗体能维持10～63周（一般为44周以上）。
但是目前的研究一致表明，CA V感染鸡血清中的中和抗体滴度较低，最高值为1∶5120，最低值为1∶20，低水平的母源抗体能有效地抵抗CA V的感染。
病毒中和试验（VN）、间接荧光抗体试验、免疫过氧化物酶试验（IFA）和ELISA试验可用于检查血清和卵黄中的抗体。
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3.1VN试验yz.ag365yz.ag365
以56℃灭活30min的血清与2×10E3CEDso（可使50%雏鸡致病的有效剂量）或200TCID50的病毒等体积混匀，37℃1h或4℃过夜，然后肌肉接种1日龄雏鸡，连续观察14天，鸡健存;或MSBl细胞连续传代培养7代以上，细胞新陈代谢仍活跃，可判定抗体阳性。
若作大批血清样本检测，一般采用微量VN反应法。
有时较低稀释度的血清对细胞会有毒性或易引起对病毒的非特异性抑制。
VN法的检测灵敏度要高于其他血清学方法。
在CA V感染鸡产生的中和抗体的维持时间要明显长于IFA抗体维持时间。
此方法有二个局限性：（1）使用该
方法需至少培养7代MSBl细胞才可获得血清的终点滴度;（2）VN法不适用于一些在MSBl 不同的亚系上生长不良或不能复制的CA V毒株。
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3.2间接荧光抗体试验（1FA）MDCC～MSBl细胞培养收获的病毒可作为细胞抗原检测血清。
该抗原可与CA V阳性血清反应，用荧光标记的抗鸡IgG显示，荧光显微镜下观察，在肿胀的细胞核区出现较小的、形态不规则的荧光染色颗粒或轮环状结构，可判为抗体阳性。
但应设立严格的阳性血清、阴性血清和非CA V感染细胞作对照，以排除非特异性荧光和可能掩盖特异性反应的背景染色。
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3.3ELISA试验yz.ag365yz.ag365
以部分纯化的细胞培养毒直接包被ELISA板或用单克隆抗体包板捕获细胞培养物中的病毒，可用于检测血清抗体，并且都已用于商品化试剂盒的生产，但由于病毒复制量较低，成本较大，难以大批量生产和推广。
Kling（1991）、Otaki（1991）和王笑梅（1998）用病毒感染细胞或裂解上清液作为包被抗原建立了ELISA检测方法，但效果不如纯化或半纯化的病毒。
Pallister（1994）以大肠杆菌内表达的重组VPl建立间接ELISA、Kato（1995）以大肠杆菌内表达的LacZ～VP3重组物建立间接ELISA、1wata（1997）以昆虫细胞内表达的VP2和/或VP3表达物包板建立ELISA，都可检测鸡血清中的CA V抗体，并且与其他检测方法（如IFA、VN等）结果的吻合性较好。
因此，由于各CA V毒株的基因序列的保守性，以CA V 基因的体外表达产物纯化物作ELISA检测原，用于检测鸡血清抗体的ELISA，被证明是既特异又敏感的方法，为CA V血清学诊断开辟了一条新的途径。
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4生物技术方法诊断yz.ag365yz.ag365
随着分子生物学新方法的不断出现，PCR技术、核酸探针技术以及第二代ELISA技术等已用于CA V特异性检测。
对CA V抗原的检测可采用PCR方法，C.Some（1993）报道，利用PCR技术可以从CA V感染鸡体组织内或感染细胞内检测其DNA。
Noteborn等采用同位素标记克隆化的CA V基因组作探针进行杂交实验，能够检测出不同毒株感染的细胞中双链复制型及单链环状CA V基因组。
Todd等用P32标记的克隆化CA VDNA片段作探针，可检测到CA V感染鸡组织中特异性DNA，随后Noteborn等用非放射性的地高辛（Digoxigenin）标记探针，成功地检测了多株CA V分离株。
1995年Nielsen等用生物素标记的双股DNA探针进行原位杂交试验，不仅可以检测到人工感染发病鸡体内的CA V，而且可以检测患蓝翅病病鸡体内所含的CA VDNA。
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为适应检测敏感性的需要，CA V特异性PCR技术在实验室诊断及疫苗试验上充分体现了该法不可比拟的优势，它不仅与病毒分离法一样敏感，而且能检测到高背景DNA下的CA V 分子。
Soine等利用套式PCR法（多组引物）扩增出能和特异性探针发生杂交的CA V基因，但此法易造成假阳性结果。
CA V感染剂量大小将直接影响其致病程度，故检出敏感细胞或组织中的病毒含量尤为重要。
Dren等采用热启动PCR法不仅克服了上述缺陷，而且还成功地检测到一个感染细胞，相当于10TCIDs0的CA V分子。
gja0jbk5m 实验室规划。