同源重组的分子机制
同源重组的分子机制
方记向的相同重的组一条，单它链们； 都含有•3 一个异源双链区。
3. 切开的单链交换重接;
4. 形成交联桥结构； 5. 分支迁移：形成一大段异源 •4
双链DNA(Holliday结构)
•5
6. 绕交联桥旋转1800，形成
Holliday异构体；
• •7
7. 切开与重接：
左右切，形成非重组体
上下切，形成重组体。
•(2). 一个杂种分子得到校正，另一条未校正，有丝分裂后 分离形成 5:3 或 3:5 的分离比，属于半染色单体转变；
•(3). 两个杂种分子都被校正到同一种类型，有丝分裂后分 离形成 6:2或2:6 的分离比，属于染色单体转变；
•(4). 两个杂种分子都被校正到不同类型，有丝分裂后分离 形成 4:4 分离比，未出现基因转变；
哈工大-遗传学
同源重组的分子机制
(二)、基因转变及其分子机理
1、异常分离与基因转变 粗糙脉孢菌： pdxp：酸度敏感的VB6依赖型 pdx： 酸度不敏感的VB6依赖型
哈工大-遗传学
同源重组的分子机制
+ pdxp
× pdx +
•585个子囊中
孢子对
①
子囊
②
③
④
1 2
•? + pdxp pdx +
+ + pdx +
•-
•-
•-
因的遗传+ 学现象（源于-基因内重组）。+
•+
•+
•+
+
+
+
•+ -
••+-+-
••+-+-
同源重组的分子机制
同源重组的分子机制一、断裂重接模型（breakage joining model）C．D．Darlington 1936年提出。
在同源染色体联会时，由于染色体的缠绕而产生张力，两个相对染色单体在同一位置断裂，然后彼此和另一染色单体重新连接起来从而形成重组并消除这种张力。
二、基因转换现象Olive等广泛研究粪生粪壳菌g座位，g-决定子囊孢子灰色，g+决定子囊孢子的黑色，在g+×g-的杂交中，他们分析了20万子囊，发现0.06%是5∶3分离，0.05%是6∶2分离，0.008％是3∶1∶1∶3（或异常4∶4）分离。
图示． (1)一个孢子中的两个孢子有着不同的基因型。
(2)分离比例不是4∶4。
(3)邻近的基因A/a都呈现正常分离。
断裂重接模型则无法解释异常现象。
1930年，德国遗传学家H．温克勒把这种不规则分离现象解释为减数分裂过程中同源染色体联会时一个基因使相对位置上基因发生相应的变化所致，因而称就基因转变。
好象是由于一个基因转换为另一等位基因，所以称为基因转换（gene conversion）。
以后由于发现一个基因发生基因转变时，它两旁的基因常同时发生重组：在5∶3和6∶2分离的子囊中，大约有30%也在g座位的这边或那边发生重组；有基因转换的子囊中，基因转换和遗传重组都发生在同样两个单体的子囊比例竟高达90%。
所以认为基因转变是某种形式的染色体交换的结果。
因此，基因转变的研究，实质上也是染色体交换机制的研究。
三、同源重组的Holliday模型1964年，R. Holliday提出了重组的杂合DNA模型(hybrid DNA mode)，并作修正。
图示．过程：A．同源的非姊妹染色体的DNA配对。
B-C．同源非姊妹染色单体DNA中两个方向相同的单链在DNA内切酶的作用下，在相同位置上同时切开。
D．切开单链交换重接，形成交联桥结构（cross-bridged structure）。
E．交联桥的位置可以靠拉链式活动，沿着配对DNA分子“传播”—桥迁（Bridge migration），其中互补碱基间形成的氢键从一条链改变另一条链。
同源重组法分子克隆 -回复
同源重组法分子克隆 -回复同源重组法是分子克隆技术中的一种重要方法，其基本原理是利用DNA的同源性重组来插入外源DNA序列到宿主DNA中。
同源重组法在基因克隆、遗传工程等领域得到了广泛应用。
本文将详细介绍同源重组法的原理、步骤及应用。
一、同源重组法的原理同源重组法的原理基于DNA分子的自身结构和功能，DNA分子在某些条件下能够进行重组、修复和重复。
同源重组是指两个DNA分子之间具有相似序列（同源）的区域进行交换而形成的DNA分子重组。
同源重组法基于此原理，通过在宿主DNA中引入重组的同源片段，将外源DNA序列插入到宿主DNA中。
同源重组法的原理可以分为两个步骤：相互间接断裂和互补配对。
两个DNA分子的同源片段同时发生间接断裂，获得可供基因重组的末端。
接下来，由于互补配对的作用，从两个DNA分子中间的同源片段在一定条件下进行配对，形成插入、缺失、互换等不同类型的重组产物。
1. 构建载体DNA：载体DNA是将外源DNA插入到宿主DNA中的重要工具，构建载体DNA 需要选择有适当限制酶切位点的载体和外源DNA。
一般来说，常用的载体包括质粒、噬菌体、噬菌体样颗粒等。
2. 制备DNA片段：外源DNA片段可以通过PCR扩增、酶切和DNA合成等技术制备。
需要注意的是，PCR扩增要确保扩增的DNA片段与宿主DNA具有一定的同源性。
3. 利用限制酶切割载体和外源DNA：根据预定的酶切位点设计限制酶切位点并进行酶切。
4. 进行杂交和拼接：将外源DNA片段与载体DNA杂交，并通过互补配对将DNA片段与载体DNA进行拼接。
5. 转化大肠杆菌：利用化学方法或电击法将构建好的载体DNA转化到大肠杆菌中，转化后得到含外源DNA的菌落。
6. 筛选阳性菌落：利用选择性培养基和荧光素酯分析方法等技术筛选阳性菌落。
7. 测序鉴定：对筛选出的阳性菌落进行测序，并鉴定插入的外源DNA序列是否正确。
同源重组法是分子克隆领域中一种非常实用的技术。
同源重组技术的原理和应用
同源重组技术的原理和应用同源重组技术（Homologous recombination technology，HRT）是一种常用的基因编辑技术，它能够在特定部位改变DNA序列，用于治疗某些遗传性疾病、研究基因表达调控和蛋白质结构等方面。
本文将介绍同源重组技术的原理和应用。
1. 同源重组技术的原理同源重组技术是利用质粒、病毒等载体携带的外源基因通过靶向指向的方式将其导入到细胞或生物体中，从而达到改变生物体基因组的目的。
具体来说，同源重组技术是基于DNA的相互作用原理进行的。
DNA由四种碱基（腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶）构成，它们之间形成了氢键，使得两条互补的DNA链可以通过这些氢键相互结合。
在同源重组中，DNA分子的另一端则通过DNA酶和锌指核酸酶来实现切割和精准定位。
一旦发现了具备相同序列的区域，这些酶就会将外源基因定向到位点，与染色体上的同源序列组成DNA双链，从而取代了原有的序列，以达到修复或替换某些基因的效果。
2. 同源重组技术的应用同源重组技术的应用广泛，其中最重要的是对基因的编辑和修复。
以下将介绍几种常见的同源重组技术应用：(1)质粒介导同源重组质粒介导同源重组是一种常用的基因工程技术。
这种技术主要是利用菌单倍体的同源重组能力，通过转化质粒来实现有选择性地在DNA的特定区域插入新基因。
这种技术特别适用于菌类以及一些单细胞真菌和原生生物。
(2)病毒介导同源重组病毒介导同源重组则运用了病毒自身的重组机制特征，对其进行了改造，使其能够以带选择性的方式在目标细胞中整合外源基因。
这种方法目前已经广泛应用于人类基因治疗领域，尤其在修复致病基因和引入新基因方面取得了显著进展。
(3)基因组编辑基因组编辑技术可以通过同源重组来治疗遗传性疾病。
比如，在用于治疗Friedreich's ataxia（FA）的基因治疗研究中，研究团队采用基因克隆技术构建了能够靶向FA基因的重组质粒，并通过同源重组的方式将其导入细胞中。
同源重组和相同的DNA修复机制
同源重组和相同的DNA修复机制DNA是构成生命体的基础，也是遗传信息的载体，但是在DNA复制和细胞分裂过程中，会出现许多突变和错误，因此细胞需要一套完善的机制来修复DNA，同时也需要一些特殊的机制来保证在细胞分裂时基因组的稳定性。
同源重组和相同的DNA修复机制就是其中两个非常重要的机制。
一、同源重组机制同源重组是一种重要的基因修复机制，主要发生在有性生殖的生物中。
在染色体发生断裂或受到多种损害的情况下，同源重组机制可以把损坏的DNA修复完整。
同源重组是指两条相同的DNA分子发生互相配对、断裂和重组的过程。
它需要两个相同的DNA分子在某些区域上具有完全相同的序列，即同源序列。
同源重组机制主要有两种形式：交叉连锁重组和非同源重组。
交叉连锁重组发生在有性生殖中，受交叉点的影响，在两条染色体的相同区域，交换杂交合子的DNA片段。
非同源重组则是发生在细胞中，DNA损伤时，细胞会短暂停止复制，启动同源重组，使恢复DNA的完整性。
同源重组机制在细胞遭遇致命DNA损伤时起着重要的角色，例如辐射、化学致癌剂、紫外线等。
同源重组机制除了能够修复DNA，还可以使DNA序列多样化，对物种的进化也起着非常重要的作用。
二、相同的DNA修复机制DNA修复机制是细胞保持基因组完整性的重要机制。
现有的DNA修复机制主要有四种：直接损伤修复、错配修复、基础切割修复和同源重组修复。
这些机制在基本原理上相似，它们的共同目标是清除损伤的DNA和重建功能完整的DNA双链。
相同的DNA修复机制是指在两个不同的细胞中，进行基本相同的DNA修复方案。
相同的DNA修复机制经常发生在原核和真核生物的细胞中，如细菌和哺乳动物细胞的DNA修复机制基本上是相同的。
DNA修复机制在生命的演化过程中起着至关重要的作用，它不仅可以减少DNA突变的发生，还能使DNA序列得以多样化。
此外，DNA修复机制对生命组织的功能、表现异同以及物种演化等都有一定的影响和意义。
同源重组对细胞DNA修复的影响研究
同源重组对细胞DNA修复的影响研究同源重组是一种基因重组方式，它能够在细胞分裂过程中发挥重要的作用。
该机制与DNA修复之间的联系是非常紧密的。
对同源重组在DNA修复中的影响进行研究，有助于加深我们对基因组稳定性和肿瘤发生机制的认识。
一、同源重组的基本原理同源重组是指两条相似的DNA分子在某些相同的区域发生交换，从而形成新的组合。
通常这两条DNA分子来自于染色体的不同部位，但具有相同的段落（称为同源序列）。
这种现象发生在细胞分裂过程中的染色体重组、染色体修复和重组修复等过程中。
同源重组的过程可以简单地追溯到三步：切割、粘贴和合并。
首先，一个酶复合物切割了某一条DNA分子上的一段序列。
该序列携带着细胞所需的信息，或者在分裂时出现了错误。
然后，这个酶复合物将切下的DNA分子与与其同源的另一条DNA分子的相应区域做粘接。
最后，经过一系列复杂的过程，这两个DNA分子被合并在一起。
这样，DNA序列得到了更新或修复，细胞分裂能够继续进行。
二、同源重组在细胞DNA修复中的作用DNA本身存在着各种自我修复机制，但当DNA发生严重的损伤时，这些自我修复机制就显得十分有限。
这时，就需要依靠其他机制，如同源重组，来修复损伤。
基于同源重组的DNA修复途径主要有两种：相互重组和非同侧重组。
相互重组指的是两条同源DNA分子在某一段区域发生切割和交错，形成新的组合。
非同侧重组则是通过同源重组的机制，在DNA双链断裂时使另一条同源染色体的DNA序列参与合并，从而对受损的DNA分子进行修复。
同源重组的作用不仅局限于DNA修复，它还能够在细胞周期中发挥调节作用。
一些先前的研究表明，同源重组失调可能会导致染色体不稳定、癌症等疾病的发生。
因此，深入研究同源重组的分子机制及其在细胞周期中的作用，对防治某些疾病具有重要的意义。
三、同源重组对DNA修复的影响研究同源重组在DNA修复中的重要作用已经得到了广泛的关注。
最近的研究显示，某些蛋白质对同源重组在DNA修复中的发挥具有重要作用。
同源重组的原理及过程
同源重组的原理及过程【最新版】目录1.什么是同源重组2.同源重组的基本过程3.同源重组的相关酶及其功能4.同源重组的种类5.异常重组6.总结正文一、什么是同源重组同源重组是分子生物学中的一个基本概念，它指的是在 DNA 双链断裂后，通过引入断裂的 DNA 片段并将其与同源 DNA 分子连接起来，从而完成 DNA 修复的过程。
在这个过程中，需要通过一定的机制来保证连接的准确性，这个机制就是同源重组。
二、同源重组的基本过程同源重组的过程可以分为以下几个步骤：1.两个同源 DNA 分子的联会：在 DNA 双链断裂后，两个同源 DNA 分子会在断裂部位形成一个联会结构，从而为后续的修复提供准确的模板。
2.引入断裂 DNA：在联会结构形成后，需要将断裂的 DNA 片段引入到联会结构中，这样才能保证后续的修复能够准确地进行。
3.在两条重组 DNA 间形成碱基互补的段片段起始区：在断裂 DNA 片段被引入到联会结构后，会在两条重组 DNA 间形成一个碱基互补的段片段起始区，这个起始区将为后续的链入侵提供起点。
4.链入侵后两个 DNA 分子相互交叉的 DNA 链联系在一起：在形成碱基互补的段片段起始区后，断裂 DNA 片段会通过链入侵的方式与同源DNA 分子连接起来，从而使得两条 DNA 分子相互交叉的 DNA 链联系在一起。
5.Holliday 联接体的剪切：在链入侵完成后，会形成一个称为Holliday 联接体的结构，这个结构需要通过剪切来完成 DNA 修复的最后一步。
三、同源重组的相关酶及其功能在同源重组的过程中，需要通过一些酶的参与来完成 DNA 的修复，这些酶包括：1.RecBCD：具有解螺旋核酸内切酶活性，能拆分 Holliday 结构。
2.RecA：能促进同源 DNA 单链的结合，具有单链、双链结合活性，NTP 酶活性。
四、同源重组的种类同源重组可以分为以下几种类型：1.位点特异性重组：这种类型的重组需要特异性位点和特异性位点的核酸内切酶参与。
同源重组及其在进化中的作用
同源重组及其在进化中的作用进化是一种自然的现象，是指生物种类逐渐改变和适应随时间的变化。
进化是生物体基因变异和重组的结果。
遗传是生命的基本属性，也是进化的源泉。
一种生物体内所有的细胞都拥有相同的DNA序列，但是由于基因突变、重组或DNA修饰等原因，会产生遗传差异，这种差异对于生物体适应环境和进化具有非常重要的意义。
同源重组（homologous recombination, HR）指的是一种DNA重组方式，其发生在非常相似的DNA序列之间。
在真正的同源重组中，则要求参与重组的DNA 序列不仅相似，而且需要有一些共同的结构域，比如同源片段在两个DNA序列上的同一位置位置上等等。
同源重组在有性生殖中广泛发生，是维持生物种的基因稳定性和多样性的重要机制。
同源重组如何发生？同源重组依赖于多种复杂的分子机制，大体上可以分为DNA双链断裂、单亲链入侵和DNA捻合等三个步骤。
首先，DNA双链断裂是同源重组的第一步，它使染色体上的两条DNA链之间产生了断裂，并暴露了互补的OPPOSITE链。
产生DNA双链断裂的原因很多，包括化学物质暴露、紫外线，线粒体中的自由基等。
除此之外，还有一些DNA复制和DNA修复所必需的酶也能活跃于同源重组中。
接着，被双链断裂的DNA会产生单链断裂，并对同源DNA序列寻找搭档。
通过串列基因串和复制蛋白的帮助，单亲链进入互补的DNA序列，形成互补的串列基因串复合物。
随后，一个方向由长的DNA绳血运动，完成侵入后，原DNA 则绕过侵入的DNA，在同一水平上，形成了基因串的聚集。
第三步是捻合，转移，连结和合裂。
基因串复合体往往形成循环，导致同源DNA序列双层发生交叉。
经过一系列的分子机制调控，这些交叉连接点被被形成DNA切割，转移和连接的一系列酶切断和再重组，在整个复合体的作用下，完成同源重组的全过程。
同源重组在进化中的作用同源重组在进化过程中有着十分重要的作用。
首先，同源重组是一种保留和传递优良基因的机制。
DNA同源重组修复的分子机制
・综述・作者单位:300192 天津,中国医学科学院放射医学研究所DNA 同源重组修复的分子机制王勇 樊飞跃 电离辐射直接造成生物靶分子细胞DNA 的损伤,DNA 的损伤类型很多,其中以DNA 双链断裂(double strand break ,DS B )最为严重。
DNA DS B 的修复较其他类型的DNA 损伤更加困难,不修复则可能导致染色体断裂和细胞死亡,而修复不当则可能导致染色体缺失、重排、转位和倒置等,从而易于形成肿瘤等疾病[1]。
DNA 损伤的不完全修复可导致基因组不稳定,机体细胞为了对抗损伤,发展出多个修复系统来保证基因组的完整性,同源重组修复(hom olog ous recombinationrepair ,HRR )是DNA DS B 损伤修复的主要方式,对于保持哺乳动物细胞的基因组完整性十分重要[2]。
重组即遗传物质的重排,同源重组是指发生在同源DNA 序列间的重组,主要是利用DNA 序列间的同源性来识别,而负责配对和重组的蛋白质因子并无碱基序列特异性。
本文综述了国外近来对HRR 分子机制的研究进展,包括引发HRR 的DNA 损伤机制;HRR 的基本修复过程和多条修复通路;HRR 关键分子重要功能的实现机制;HRR 与细胞周期调控等其他事件的相互关系;辐射和HRR 及其与肿瘤之间的关系。
11DNA 损伤的感受识别:HRR 参与的蛋白质有RAD51,RAD51b ,c ,d ,RAD52,RAD54,BRC A1,BRC A2,XRCC2,XRCC3和MRN 复合物等,另外还需大量起始和损伤应激感受分子,包括AT M ,ATR 和DNA 2PK cs [3]。
细胞在受到电离辐射照射后,一系列重组或修复蛋白及复合物重新定位形成核焦点,以应答DNA 损伤。
这些蛋白有γ2H2AX ,AT M ,RAD51,BRC A1,BRC A2,NBS1,RPA 和MRN ,它们相互作用,完成DNA 损伤信号的接受功能并转导信号给其他蛋白质,介导并协调包括周期检控点、凋亡、修复的损伤应答。
同源重组的分子机制_2.pptx
四分子分析
两个基因作图原理与方法
非顺序四分子遗传分析
相关概念：四分子、顺序四分子、第一次分裂分离(MI模式)、 第二次分裂分离(MII模式)、子囊型(PD、NPD和T)
第六章 同源重组的分子机制
哈工大-遗传学
第六章 同源重组的分子机制
一、概念
同源重组：依赖大范围的DNA同源序列的联会，重组过 程中，两个染色体或DNA分子交换对等的部分。
1、异常分离与基因转变 粗糙脉孢菌： pdxp：酸度敏感的VB6依赖型 pdx： 酸度不敏感的VB6依赖型
哈工大-遗传学
第六章 同源重组的分子机制
+ pdxp
× pdx +
585个子囊中
孢子对
①
子囊
②
③
④
1 2
? + pdxp pdx +
+ + pdx +
+ + pdx + + pdxp + pdxp
3. 切开的单链交换重接;
4. 形成交联桥结构； 5. 分支迁移：形成一大段异源 4
双链DNA(Holliday结构)
5
7
6. 绕交联桥旋转1800，形成
Holliday异构体；
7. 切开与重接：
左右切，形成非重组体
上下切，形成重组体。
支持Holliday遗传重组模型的证据： 1、形态学上，Holliday中间体(Chi 结构)的电镜照片；
第六章 同源重组的分子机制
哈工大-遗传学
第六章 同源重组的分子机制
左右切
异源双链区
D/d
A
G
B
A
A
B
同源重组构建方法
同源重组构建方法引言：同源重组是一种常用的分子生物学技术，它可以通过将不同来源的DNA片段进行重组，创造出新的DNA序列，从而产生具有新功能的蛋白质或基因。
本文将介绍同源重组的基本原理、方法和应用。
一、同源重组的基本原理同源重组是指通过DNA的互补配对原则，将两个或多个DNA片段合并成一个新的DNA序列的过程。
同源重组的基本原理是依赖于DNA双链的互补配对能力，通过酶的介导，在互补的DNA片段之间形成骨架连接，从而实现DNA片段的重组。
二、同源重组的构建方法1.限制性内切酶切割法限制性内切酶切割法是同源重组中最常用的方法之一。
首先，使用限制性内切酶对目标DNA片段进行切割，生成具有互补末端的DNA片段。
然后，将不同来源的DNA片段进行混合，通过DNA 配对，使用DNA连接酶将其连接成一个新的DNA序列。
2.聚合酶链式反应法聚合酶链式反应法是一种利用DNA聚合酶复制DNA的特性，实现同源重组的方法。
首先，设计引物，使其与目标DNA片段的两个末端互补。
然后，在聚合酶链式反应体系中，加入不同来源的DNA片段和引物，通过DNA聚合酶的作用，使引物与DNA片段进行互补配对，从而实现DNA片段的重组。
3.化学合成法化学合成法是一种利用化学方法构建同源重组DNA的方法。
通过化学合成的方式，合成具有互补序列的DNA片段。
然后，将不同来源的DNA片段进行混合，通过DNA配对，将其连接成一个新的DNA序列。
三、同源重组的应用1.基因工程同源重组在基因工程中发挥着重要作用。
通过将不同基因的DNA 片段进行重组，可以产生具有新功能的蛋白质或基因。
这对于研究基因功能、开发新药物等具有重要意义。
2.基因组编辑同源重组也可以用于基因组编辑。
通过将外源DNA片段与目标基因进行同源重组，可以实现基因的敲除、替换或插入，从而实现对基因组的精确编辑。
3.物种改良同源重组在物种改良中也有广泛应用。
通过将不同物种的DNA片段进行重组，可以产生具有新特性的物种，如抗病性植物、高产量农作物等。
2μ的同源重组机制
2μ的同源重组机制
2μ的同源重组机制指的是2μ质粒在酵母细胞中的重组机制。
在酵母细胞中，2μ质粒是一种含有两个同源拷贝的环状DNA 分子。
它们存在于细胞核内，并通过复制和分离机制来保持其遗传稳定性。
重组是指DNA分子之间的交换与重组，通过这种机制，2μ质粒可以进行同源重组，从而产生新的2μ质粒。
同源重组的机制涉及到以下几个步骤：
1. DNA切割：同源重组通常发生在两个同源DNA分子之间。
在同源重组过程中，DNA酶首先切割DNA分子的两个链，形成断裂末端。
2. 同源配对：断裂末端上的单链DNA碱基对儿缝合成一个DNA双链，这个过程称为同源配对。
同源配对可以通过碱基序列的同源性进行，即两条DNA链的碱基序列相似，从而可以互相匹配。
3. DNA链侵入：在同源配对之后，DNA链侵入发生。
其中一条DNA链侵入另一条DNA分子，从而形成一个介于两个DNA分子之间的DNA垫片。
4. DNA合成和连接：在DNA链侵入后，DNA聚合酶将缺失的DNA片段补充完整，形成新的DNA链。
最后，DNA连接酶将两个DNA分子连接在一起。
通过这些步骤，2μ质粒可以通过同源重组机制进行重组。
同源重组可以导致2μ质粒的结构和功能的重组，从而产生新的
2μ质粒变体。
这种同源重组机制可以增加2μ质粒的遗传多样性，并促进2μ质粒在酵母细胞中的传递和稳定复制。
遗传学 遗传重组
IS
IS
IS
transposition
IS L
IS
R臂
中心区
臂
♣ 两侧的IS既可 以是IR，又可以 是DR状态 （IR多） ♣ 当两个IS组件相同 时，其中任一个都可 行使转座功能
♣ 不同时，主 要依靠一个
C、转座噬菌体 mutator phage, Mu （巨型转座子 ）
以E.coli为寄主的温和型噬菌体（溶源、裂解）
玉米转座因子对胚乳颜色的影响 Ac、Ds的转座属于非复制机制
2）果蝇基因组中的转座子
果蝇的P因子有两种类型： 一类是全长P因子，长2907bp，两端有33bp的反向重复序
列(IR)，有4个外显子(4个ORF)，编码转座酶； 另一类为缺失型P因子，它不能编码转座酶，它的转座
依赖于全长P因子。缺失型P因子都是由活性P因子的中段 缺失衍生而来的，长度从500bp到1400bp不等。
③ 在新的位置上，转座因子两侧出现5~12bp 正向 重复序列
④ 转座过程中出现共联体（cointegrate)，即两个 复制子通过共价键连接形成的一个复制子
2）非复制型转座（nonreplicative transposition) 转座子从供体一个位点转移到受体新位点处，供
体位点留下缺口，受到损伤（严重时致死）或宿主 修复系统识别修复。
Ds因子长0.4-4kb，它的中间(在转座酶基因中)有许多种长度不等的 缺失, 如Ds9缺失194bp，而Ds6则缺失2.5kb，Ds的两端也都有11bp的 反向重复序列。
Ac和Ds的末端反向重复几乎是一样的，只有一个不同之处：Ac两 端最外边的核苷酸是彼此不互补的T:G，而Ds是互补的T:A(图)。
Ac-Ds转座元件结构示意图。右边示Ac及Ds元件的单链DNA末端反向重复 配对所形成的茎环结构，这种结构可能对转座有意义
同源重组的基本原理
同源重组的基本原理同源重组是一种基本的遗传学实验技术，用于将来自不同源的DNA 片段通过杂交反应重新组合在一起。
它的原理是通过DNA的互补碱基配对来实现。
同源重组的基本原理是利用DNA的两条链之间的互补碱基配对规则，将来自不同源的DNA片段重新组合在一起。
DNA的碱基配对规则是腺嘌呤（A）与胸腺嘧啶（T）之间形成双氢键，鸟嘌呤（G）与胞嘧啶（C）之间形成三氢键。
这种互补配对规则使得DNA具有特殊的结构稳定性，同时也为同源重组提供了可行性。
在同源重组的实验中，首先需要获得来自不同源的DNA片段。
这些DNA片段可以来自不同的细胞、不同的生物体甚至不同的物种。
接下来，需要将这些DNA片段在实验室中进行体外杂交反应。
杂交反应的过程中，DNA片段会通过互补碱基配对的方式相互结合。
同源重组的关键是要有相应的DNA连接酶参与。
DNA连接酶是一种酶类蛋白质，能够识别DNA链的断裂位点，并将两条DNA链连接在一起。
在同源重组实验中，DNA连接酶起到了至关重要的作用。
它能够识别来自不同源的DNA片段之间的互补碱基序列，并将它们连接在一起，形成一个新的重组DNA分子。
同源重组的成功与否，往往取决于两个关键因素。
首先是DNA片段之间的互补配对能力。
只有当DNA片段之间存在足够多的互补碱基序列时，才能够进行有效的互补配对反应。
其次是DNA连接酶的活性。
只有当DNA连接酶具有足够的活性和稳定性，才能够在体外条件下完成DNA片段的连接。
同源重组的应用非常广泛。
在基因工程领域，同源重组被广泛用于构建重组DNA分子，包括重组质粒、重组病毒载体等。
通过同源重组，可以将外源基因导入到目标细胞中，并使其在目标细胞中表达。
这为研究基因功能、疾病治疗等提供了重要的工具和手段。
同源重组还可以用于遗传学研究中。
通过同源重组，可以将不同的遗传标记或突变基因导入到目标生物体的基因组中，从而研究这些基因的功能和表达特征。
这为揭示基因与表型之间的关系、探究遗传规律等提供了重要的技术支持。
同源重组的分子机制
同源重组的分子机制同源重组是指在一些生物体内，两个或多个相同的DNA分子发生断裂后重新联接，形成新的DNA分子。
同源重组在维持基因组的稳定性、遗传多样性和进化中起到了重要的作用。
下面将详细介绍同源重组的分子机制。
同源重组发生的分子机制主要包括以下几个步骤：1.DNA的双链断裂：同源重组的第一步是将DNA分子的双链断裂，产生“剪切”点。
这个过程通常由核酸内切酶或其他切割酶完成。
2.定向修复：一旦DNA双链断裂，细胞会启动DNA损伤修复机制。
同源重组的关键步骤是定向修复，即通过与另一个同源DNA分子的配对，完成失配碱基的对齐和DNA链的延伸。
3. 合成DNA片段的消旋：在定向修复过程中，DNA链被切断并重新配对。
这会产生修复延伸片段，通常称为D-loop。
D-loop中未配对的DNA片段称为Holliday结构。
4. 构建交换结构：Holliday结构是同源重组的关键中间产物。
它可以被随后的DNA解旋酶切割，使两个重组DNA分子交换部分DNA片段。
这就形成了交换结构，也称为交叉结构。
5.交叉解除：交叉结构需要通过交叉解除酶进行解旋。
交叉解除酶能够切割并重新连接DNA链，使两个DNA分子在重新联接后恢复原始的连续性。
总的来说，同源重组是通过DNA分子的双链断裂、定向修复、合成DNA片段的消旋、构建交换结构和最后的交叉解除等一系列分子机制来实现的。
同源重组除了上述的分子机制外，还受到一些调控因子的控制。
例如，同源重组过程中参与的酶和蛋白质需要进行相互作用，并受到调控因子的调控。
这些调控因子包括DNA损伤修复蛋白、组蛋白修饰酶、DNA结合蛋白等。
同时，在同源重组的整个过程中，细胞还需要保持恰当的染色质结构和空间组织。
同源重组在生物体中具有多种功能。
一方面，同源重组能够实现DNA分子的修复和保护，维持基因组的稳定性。
另一方面，同源重组还是基因重组和遗传多样性的重要机制之一、在生殖细胞的形成过程中，同源重组可以通过重组DNA片段的交换来增加基因组的多样性。
同源重组酶工作原理
同源重组酶工作原理同源重组酶是一种重要的酶类，它可以促进DNA分子在不同的位置之间发生重组，从而实现DNA片段的重组、插入、剪切等操作。
同源重组酶在生物学研究、基因工程、生物医学等领域都有着广泛的应用，成为了现代生物技术的重要工具之一。
同源重组酶工作原理主要涉及到DNA分子的结构和功能、DNA复制和修复机制等方面的知识。
下面将从这些方面逐一介绍。
一、DNA分子的结构和功能DNA是生物体内存储遗传信息的重要分子，它由四种碱基（腺嘌呤A、鸟嘌呤G、胸腺嘧啶T、胞嘧啶C）组成的碱基对相互配对形成了双螺旋结构。
DNA分子的主要功能是存储和传递遗传信息，它通过遗传密码的方式指导生物体的生长发育、代谢活动等各种生命过程。
二、DNA复制和修复机制DNA复制是指在细胞分裂过程中，DNA分子通过模板作用合成新的DNA分子的过程。
DNA复制的过程包括DNA双链的分离、DNA聚合酶的作用、DNA链的连接等步骤。
DNA复制是生物体维持遗传信息稳定性的基础，它在生命过程中扮演着至关重要的角色。
DNA修复是指在DNA受到损伤或者错误的情况下，通过一系列的修复机制使其恢复正常的过程。
DNA修复的主要机制包括直接修复、错配修复、碱基切除修复、重组修复等。
DNA修复机制可以保证生物体的遗传信息的准确性和完整性，同时也是维持生物体正常生命活动的基础。
三、同源重组酶的作用原理同源重组酶是一种能够催化DNA分子在不同位置之间发生重组的酶类。
同源重组酶主要作用于DNA分子中的同源序列，即两个DNA 分子中具有相同序列的区域。
同源重组酶通过识别同源序列，将两个DNA分子在同源序列处断裂，并将它们重新组合成一个新的DNA分子。
同源重组酶的作用过程主要包括以下几个步骤：1. DNA分子的断裂：同源重组酶在同源序列的位置识别并结合，促进DNA双链在同源序列处发生断裂。
2. 末端处理：断裂后的DNA末端需要经过一系列处理，包括去除末端碱基、平滑末端等操作，以便于末端的配对。
同源重组双交换原理基因敲除
同源重组双交换原理基因敲除一、同源重组原理同源重组是指两个染色体上的相同区域发生交换，交换的两个染色体必须来自于同一个亲本。
同源重组是常见的染色体遗传现象之一。
1.1 同源染色体同源染色体是指来自不同亲本但具有相似基因序列的两条染色体，它们在大小、形态和基因排列方面都相似。
人类有23对同源染色体。
1.2 交叉互换交叉互换是指发生在同源染色体上的交换现象。
在减数分裂中，配子形成前，同源染色体间会发生互换，使得每个配子都包含来自母本和父本的遗传物质。
1.3 同源重组原理在减数分裂中，当两条同源染色体上的相似区域发生交叉互换时，就会产生新的组合形式。
这种现象被称为同源重组。
二、双交换原理双交换原理是指在一对杂合子中，如果两个位点A和B位于不同的染色体上，则它们之间存在独立分离和随机联合关系。
这意味着，位于不同染色体上的两个基因在遗传过程中是相互独立的。
2.1 杂合子杂合子是指一个个体拥有两个不同等位基因的情况。
例如，在人类中，如果一个人的父母分别是Aa和Bb，则该人就是AB杂合子。
2.2 独立分离独立分离是指在一对杂合子中，两个位点A和B之间的遗传关系是相互独立的。
例如，在一个AaBb杂合子中，位于不同染色体上的A和B基因会随机分配到不同的配子中。
2.3 随机联合随机联合是指在一对杂合子中，两个位点A和B之间的遗传关系是随机组合的。
例如，在一个AaBb杂合子中，由于A和B基因在遗传过程中相互独立，所以会出现AB、Ab、aB和ab四种可能性。
三、基因敲除基因敲除是指通过技术手段使得特定基因失去功能或被删除。
这种技术可以用来研究特定基因在生物体发育、生长、代谢等方面所起到的作用。
3.1 RNA干扰技术RNA干扰技术是一种常见的基因敲除技术。
它是通过引入特定的RNA 分子，来抑制目标基因的表达。
RNA干扰技术可以用于研究基因在生物体发育、生长、代谢等方面所起到的作用。
3.2 CRISPR-Cas9技术CRISPR-Cas9技术是一种新兴的基因编辑技术。
同源重组原理
同源重组原理
同源重组的原理主要包括DNA的切割、连接和修复三个步骤。
首先，DNA分子经过特定的内切酶切割成片段，然后这些片段在适当的条件下与另一DNA分子的相应片段进行连接，最后通过细胞内的修复机制，使其形成新的DNA分子。
同源重组在基因工程中有着广泛的应用。
例如，通过同源重组技术可以构建基因敲除的转基因动植物，用于研究基因的功能和生物学过程。
此外，同源重组还可以用于基因治疗，通过修复受损的基因，治疗一些遗传性疾病。
在自然界中，同源重组也是生物体进行遗传信息交换和多样性产生的重要手段。
在有性生殖过程中，同源重组能够将父母亲的基因重新组合，生成具有不同基因组合的后代，增加了种群的遗传多样性，有利于适应环境的变化。
同源重组的原理不仅在生物学研究和基因工程领域有着重要的应用，同时也为我们理解生物遗传规律和进化提供了重要的理论基础。
通过对同源重组原理的深入研究，可以更好地理解生物体的遗传机制，为人类的生命科学研究和医学应用提供更多的可能性。
总的来说，同源重组原理是生物体遗传信息传递和多样性产生
的重要机制，对于基因工程、基因治疗以及生物进化等领域具有重
要的意义。
通过对同源重组原理的深入研究和应用，可以为人类的
健康和生命科学研究带来更多的突破和进展。
同时，对于保护生物
多样性和促进生物资源的可持续利用也具有重要的意义。
因此，我
们应该加强对同源重组原理的研究，不断拓展其在各个领域的应用，为人类社会的发展和进步做出更大的贡献。
dna损伤修复非同源及同源重组分子机制(3篇)
第1篇一、引言DNA作为生物体的遗传物质，在生物体的生长发育、遗传变异和进化过程中起着至关重要的作用。
然而，DNA在复制、转录和修复过程中，由于外界因素或内部错误，会导致DNA损伤。
为了维持生物体的正常功能，细胞必须通过一系列的DNA损伤修复机制来修复受损的DNA。
其中，非同源重组（Non-Homologous End Joining，NHEJ）和同源重组（Homologous Recombination，HR）是两种主要的DNA损伤修复途径。
本文将详细介绍这两种分子机制的原理和作用。
二、非同源重组（NHEJ）1. NHEJ的原理NHEJ是一种在DNA双链断裂（Double-Strand Break，DSB）发生时，直接连接断裂末端的DNA损伤修复途径。
该途径不需要模板DNA，因此具有较快的修复速度，但修复效率较低，容易出现错误连接。
2. NHEJ的分子机制（1）识别和切割断裂末端：在DSB发生时，DNA断裂修复因子（如Mre11、Rad50和Nbs1）形成复合物，识别断裂末端，并通过ATP酶活性切割断裂末端。
（2）末端连接：在Xrcc4和Ligase IV的作用下，将断裂末端的粘性末端连接起来，形成环状中间体。
（3）去除中间体：在DNA聚合酶的作用下，去除中间体，形成完整的DNA分子。
三、同源重组（HR）1. HR的原理HR是一种在DSB发生时，利用未受损的姐妹染色单体或同源染色体作为模板，精确修复断裂末端的DNA损伤修复途径。
HR具有高保真性，但修复速度较慢。
2. HR的分子机制（1）断裂末端的识别和连接：与NHEJ类似，HR也需要识别和切割断裂末端。
在HR过程中，DSS1和RAD51蛋白复合物参与断裂末端的识别和连接。
（2）形成重组中间体：RAD51蛋白复合物与断裂末端结合，形成重组中间体。
（3）分支迁移：在分支迁移酶的作用下，重组中间体在姐妹染色单体或同源染色体上移动，寻找匹配的序列。
（4）交换和连接：在DNA聚合酶和Ligase I的作用下，将断裂末端与匹配的序列连接起来，形成完整的DNA分子。
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(7)
A
B 3'
5'
5
b
3'
分支点移动
B
(8)
A
B
两臂旋转
b a
(9)
A
B
b a
(10)
A
B
A B
b a
(11) A
B
a
b
A
B
a
b
b a
A
b
a
B
A
b
a
B
a
b
支持Holliday遗传重组模型的证据： 1、形态学上，Holliday 中间体(Chi 结构)的电镜照片；
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第六章 同源重组的分子机制
Holliday模型同样适用于环状DNA间的重组 两个环状DNA分子配对、断裂、重接形成“8”字
型结构中间物，根据切割的位置不同，可分别形成两 个亲本环、大的单体环或者是滚环结构， 也可以形成 “χ”结构。
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第六章 同源重组的分子机制
2
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第六章 同源重组的分子机制
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(3). 两个杂种分子都被校正到同一种类型，有丝分裂后分 离形成 6:2或2:6 的分离比，属于染色单体转变；
基因转变的实质：重组过程中留下的局部异源双 链区，在细胞内的修复系统识别下不同的修复产 生的结果；
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第六章 同源重组的分子机制
1 6
2
旋转1800 3
4
5
7
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第六章 同源重组的分子机制
A
G
B
A
A
B
a
C
b
a
T
b
A
G
b
A
A
b
a
C
B
a
T
B
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第六章 同源重组的分子机制
哈工大 -遗传学
第六章 同源重组的分子机制
+ pdxp
× pdx +
585个子囊中
孢子对
①
子囊
②
③
④
1 2
? + pdxp pdx +
+ + pdx +
+ + pdx + + pdxp + pdxp
3 + pdxp + + pdx + + +
4 pdx + + pdxp pdx + pdx +
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+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
-
-
+
+
+
+
+
+
+
?
-
-
-
-
+
+
+
+
?
-
+
?
-
-
-
-
6:2 (或 2:6)
120/200000
5:3 (或 3:5)
100/200000
3:1:1:3
16/200000
2、基因转变的分子机制
①在5：3和6：2分离的子囊中，约有30% 也在g基因两侧 发生重组；
②发生基因转变的子囊中，基因转变和遗传重组都发生 于同样的两个染色单体上的子囊的比例高达 90%；
第六章 同源重组的分子机制
支持Holliday遗传重组模型的证据： 1、形态学上，Holliday 中间体(Chi 结构)的电镜照片； 2、异源双链形成时，产生碱基错配导致与重组相关联 的基因转变的发生；
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第六章 同源重组的分子机制
(二)、基因转变及其分子机理
1、异常分离与基因转变 粗糙脉孢菌： pdxp ：酸度敏感的VB6依赖型 pdx ： 酸度不敏感的VB6依赖型
4
5. 分支迁移：形成一大段异源
双链DNA(Holliday 结构)
5
7
6. 绕交联桥旋转1800，形成源自Holliday 异构体；
7. 切开与重接：
左右切，形成非重组体
上下切，形成重组体。
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第六章 同源重组的分子机制
(1) 5' A 3' 3' 5' a
(2) 5' A 3' 3' 5' a
B 3' 5' 5'
b 3' 联会
B 3' 5' 5'
b 3' 酶切
(3) 5' A 3' 3' 5' a
(4) 5' A 3' 3' 5' a
B 3'
5'
5'
b
3'
游离端移动联会
B 3'
5'
5'
b 3' 游离端交叉连接
(5) 5' A 3' 3' 5' a
B 3' 5' 5'
b3 形成单链交叉
(6) 5' A 3' 3' 5' a
断裂重接模型：不能解释基因转变和极化子现象；
模板选择复制模型： (1) 违背了半保留复制； (2) DNA复制在S期，重组在偶线期，不应同时发生； (3)不能解释3线和4线交换；
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第六章 同源重组的分子机制
二、Holliday 模型
依据：细菌重组 chi结构 基因转变
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Meselson-Radding 模型 1975年Meselson Radding 提出；
哈工大 -遗传学
第六章 同源重组的分子机制
1
2.
断裂重接模型
3.
4.
1．
2.
3.
4.
模板选择复制 模型
图 23-3 断裂重接模型和模板选择复制模型的比较
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第六章 同源重组的分子机制
断裂重接模型和模板选择复制模型存在的问题
第六章 同源重组的分子机制
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第六章 同源重组的分子机制
一、概念
同源重组：依赖大范围的DNA同源序列的联会，重组过 程中，两个染色体或DNA分子交换对等的部分。
例：同源染色体非姐妹单体交换； 细菌的转化、转导、接合； 噬菌体的重组 …
条件： 2个DNA分子序列同源；
不同物种同源重组所需的最小的同源序列不同；
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第六章 同源重组的分子机制
Holliday 模型中，由于重组而产生的异源双链区存在 不配对碱基，可被细胞内的修复系统能够识别并以一条链 为模板进行切除修复：
(1). 两个杂种分子均未得到校正，有丝分裂后分离形成4:4 或 3:1:1:3的异常孢子分离比，属于半染色单体转变；
(2). 一个杂种分子得到校正，另一条未校正，有丝分裂后 分离形成 5:3 或 3:5 的分离比，属于半染色单体转变；
第六章 同源重组的分子机制
(一)、过程
1
1. 同源的非姐妹染色单体联会 ;
6
2. DNA内切无酶论在非H姐o妹ll染id色ay单 结2构断裂是否导致旁侧遗传标
体的相同位置同时切开两个
旋转1800
方记向的相同重的组一条，单它链们； 都含有3 一个 异源双链区 。
3. 切开的单链交换重接;
4. 形成交联桥结构；
第六章 同源重组的分子机制
--
-+
-+
-+
++
++
+-
+-
-+
-+
-+
基因转-变+(gene convers-io-n) ：一个基因-转+变为它的等位基
因的遗+传+学现象（源于+ 基+ 因内重组）。+ +
+-
+-
+-
-+
-+
-+
-+
+-
++
+-
+-
染色单体转变粪生粪壳菌(Oliv半e)染: 色g +单×体g转-变
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第六章 同源重组的分子机制
解释同源重组分子机制的模型：
断裂和重接模型 1937年，Darlington 提出；
模板选择复制模型（ copy choice ） Belling J. 首先提出， 1933年又撤回； 1948年，Hershey 再次提出；
霍利迪(Holliday) 模型 1964年Robin Holliday 提出；