实验二 试管苗增殖与生根培养
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② White培养基(1963) White1963设计 特点 具有较低的无机盐。 细胞分化过程中对无机盐要求较低,有利于 分化。特别适用于根的分化。
三、实验操作
无菌操作同前
增殖培养基(有标签 Z)
生根培养基
三、实验操作
(一)试管苗增殖培养
1.实验材料:文心兰 2.增殖培养基配方: MS+6-BA 2 mg/L+琼脂粉 5.5 mg/L+糖 30 mg/L pH 6.0 1L
文心兰试管苗继代增殖
3.操作步骤 3.1 铺开无菌纸,将一丛文心兰试管苗置于无菌纸 上,分离成单株。 3.2用手术刀认真清理基部的老叶、黄叶和残留培 养基。 3.3接种至增殖培养基上,4个单株/人。 3.4标签上记录姓名、日期。
(二)试管苗生根培养
1.实验材料:滁菊 2.生根培养基配方: MS+琼脂粉 5.5 mg/L+糖 30 mg/L pH 6.0 1L
65
1.5 7
3
0.0001 5560 7460
100
0.3 0.1 0.1 3
盐酸硫胺素
甘氨酸
①MS培养基
1962年日本的Murashige 和美国的Skoog 二人为烟草 培养设计。是最常用的,也是最基本的培养基。
特点 无机盐含量较高,配比合理,符合植物细胞生长的营 养生理需求;硝酸盐含量和氨离子浓度较高。
植物组织培养过程
1
离体条件 5 2
3
4
White培养基配方(mg/L)
成份 Na2SO4 含量 200
KNO3
CaNO3.4H2O MgSO4.7H2O NaH2PO4.H2O
80
300 720 16.5
KCl
H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O MoO3 FeSO4.7H2O Na2.EDTA.2H2O 肌醇 烟酸 盐酸吡哆醇
五、注意事项
(一)每位同学一张无菌纸。 (二)下次试验培养基由第二组配制。 (三)下次试验材料由每位同学自己摘取(大叶黄 杨—带有生长点)。 (四)第二组打扫卫生。
滁Baidu Nhomakorabea生根
3.操作步骤 3.1 铺开无菌纸,用剪刀将培养瓶中的滁菊单株从 基部分离,置于无菌纸上。 3.2用剪刀将滁菊单株剪成2-3段。 3.3接种至生根培养基上。 3.4贴上标签,记录姓名、日期。
四、实验记录
(一)增殖率、增殖数的计算
增殖率(%)=有新芽的外植体数/接种外植体数 平均增殖数=新芽数/接种外植体数 (二)生根率、生根数的计算
实验二
试管苗增殖与生根培养
一、实验目的
1.掌握试管苗增殖与生根的基本方法。 2.了解外源激素和营养物质对试管苗生长发 育的调节作用。
二、实验原理
1.增殖和生根是植物组织培养实现快速繁殖 的基本环节。 2.细胞分裂素能实现植物的增殖,生长素或 不加任何激素能够实现植物生根,很多时 候生根时会降低培养基的无机盐浓度。