植物组织培养植物器官以及组织培养

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植物组织培养

1.植物组织培养（离体培养）：是指在无菌条件下，将植物体的任何一部分，培养在人工配制的培养基上，并给予合适的培养条件，使之发育形成完整植物体的过程。

2、植物组织培养的类型（1）根据培养基的类型分为:固体培养液体培养半液半固体培养（2）根据培养材料（外植体类型）分为：植株培养器官培养组织培养原生质体培养胚胎培养细胞培养（3）按培养过程分：初代培养继代培养生根培养3、植物组织培养的一般工作流程1.准备阶段：（1）查阅资料，制定培养方案；（2）清洗组培用器皿、工具；（3）配制所需试剂和培养基；（4）试剂、培养基及器皿、工具的灭菌。

2.外植体的选择与消毒；3.初代培养；4.继代培养；5.生根培养；6.炼苗移栽4、植物细胞的全能性概念：指植物体的每个活细胞都携带有该物种的全套遗传信息，在适宜条件下，离体细胞都具有发育为一个完整植株的潜在能力。

注意：（1）活细胞（2）离体细胞（3）细胞全能性表达的难易程度取决于细胞的分化程度5、细胞全能性的强弱表现：（1）植物细胞全能性根据细胞的性质不同由强到弱：营养生长中心＞形成层＞薄壁细胞＞厚壁细胞（木质化细胞）＞特化细胞（导管等）（2）植物细胞全能性根据所处的组织不同由强到弱：顶端分生组织＞侧生分生组织＞居间分生组织＞薄壁组织＞厚角组织＞输导组织＞厚壁组织6、植物组织培养中全能性表达的条件：1.无菌条件；2.离体条件；3.一定的营养物质；4.植物生长调节物质；5.适宜的外界条件。

7、胚性细胞的特点：未分化状态；细胞具有旺盛分裂能力；具有两极性8、脱分化：指在一定条件下，已分化成熟的细胞、组织或器官恢复到未分化的分生状态，并进行细胞分裂形成未分化的细胞团，如愈伤组织的形成过程。

9、愈伤组织形成的三个时期：（1）诱导期又称启动期（最难）。

（2）分裂期（3）分化期10、优良愈伤组织的特征：（1）具有旺盛的增殖能力；（2）容易散碎；（3）具有高度的胚性或再分化能力，便于植株再生；（4）经过长期的继代保存而不丧失胚性。

植物组织培养

植物组织培养的含义：将植物的离体材料（器官、组织、细胞、原生质体等）无菌培养，使其生长、分化、繁殖，再生出完整植株或生产次生代谢物质的技术。

植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性：指一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息，在适宜条件下具有发育成完整植株的能力。

外植体：在植物组织培养中，在活体植物上提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。

外植体选择的原则：①、再生能力强；②、遗传稳定性好；③、来源丰富；④、灭菌容易。

植物组织培养的类型：根据培养材料（即外植体）的不同，可将植物组织培养划分为植株、胚胎、器官、组织、细胞和原生质体五个水平上的培养类型。

愈伤组织：原指植物在受伤后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组织培养中，则指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。

植物组织培养的特点：①、培养材料经济；②、培养条件可以人为控制；③、生长周期短，繁殖率高；④、管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。

White（1943）撰写的《植物组织培养》是第一部有关植物组织培养的专著。

PH值最适5.6，高温、高压灭菌后PH值会降低，配制时一般为5.7~5.8，若PH值偏高，培养基会偏硬，会不利于植物材料吸取营养；PH值偏低，培养基凝固不好，不利于植物材料的固定。

MS培养基特点：①、无机盐成分很高，硝酸盐、NH+、K+含量高；②、元素平衡较好；③、缓冲性能也比较好；④、微量元素、有机成分丰富、齐全。

无机盐母液适度冷藏保存。

维生素等有机营养元素在—20℃保存，使用前用温水溶解。

MS培养基母液的成分：大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机物母液。

CuSO4、CuCl2取25mg溶于10mL，制成2.5mg/mL溶液，配制50mL微量元素母液，吸取该溶液0.05mL。

灭菌的条件：培养基的成分：1、水分2、无机盐①、大量元素：指植物生长发育所需浓度大于0.5mmol/L的营养元素。

植物的器官和组织培养

二、植物根段培养
植物根段培养是指以植物的根切段为外植体进行离体培养，再生完整植株的过程。是研究根系生理代谢、器官分化及形态建成的良好实验体系。培养方法与叶片培养相似。
培养过程包括愈伤组织诱导、不定芽分化、无菌苗的增殖与生根等。
大蒜根尖培养及植株再生
三、植物茎段培养
植物茎段培养是指对植物的带有定芽或不定芽的外植体进行离体培养，再生完整植株的过程。
利用灭菌剂对外植体灭菌
无菌水冲洗 3-5次
1、茎尖、茎段、叶片的灭菌 2、根、块茎、鳞茎的灭菌 3、花蕾的灭菌 4、果实、种子的灭菌
二、初代培养物的建立
（一）无菌环境（二）规范操作（三）条件合适
三、形态发生和植株再生
外植体愈伤组织
体胚途径
植株
具根茎的两极器官
器官化途径
先茎后根
单极器官
先根后茎
对培养的要求：成熟种子萌发培养所用培养基成分简单，不需生长调节剂；未成熟种子萌发培养则需要添加一定的营养成分和生长调节剂。若需要其形成愈伤组织，需要相应的生长调节剂及营养物质。
第四节植物组织培养和脱毒苗的生产
一、植物分生组织(meristem culture)培养：
定义：是指对植物的分生组织进行离体培养的技术，包括植物根尖、茎尖等顶端分生组织和形成层组织的培养。其中茎尖培养广泛应用于植物再生和脱病毒研究。
植物茎尖培养过程
➢茎尖离体培养可能出现的培养反应：
生长太慢生长过旺，愈伤增多生长正常
三、利用茎尖培养生产脱毒苗
脱毒苗生产的意义茎尖脱毒机理基本技术规程影响脱毒效果的因素
1、脱毒苗生产的意义：
目前受病毒危害严重影响生产的有：

植物组织培养笔记111

第一章绪论植物组织培养（Plant tissue culture）广义上是指无菌条件下，在特定的培养基上对离体的植物器官、组织、细胞和原生质体甚至包括完整植株进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。

植物组织培养类型:1、完整植株培养（Plant Culture）：对幼苗和较小植株等的培养。

2、胚胎培养（Embryo Culture）：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。

3、器官培养（Organ Culture）包括离体根、茎、叶、果实、种子、花等器官的培养。

4、组织培养（Tissue Culture）如分生组织、薄壁组织、输导组织、愈伤组织培养。

5、细胞培养（Cell Culture）：指对单细胞或较小的细胞团进行培养。

6、原生质体培养（Protoplast Culture）指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。

组培的一般过程：初代培养—继代培养—生根培养—驯化培养植株的再生途径：1）器官发生途径（Organogenesis）：植物器官可以直接由外植体上诱导。

如茎尖培养。

间接器官发生途径：成熟细胞经过脱分化（dedifferentiation）及再分化（redifferentiation）过程而形成新的组织和器官的过程2）体细胞胚胎发生途径（Somatic embryogenesis）: 体胚发生途径是指二倍体或单倍体的细胞在特定条件下，未经性细胞融合而产生与合子胚结构、功能类似的胚的过程。

经体胚发生形成类似合子胚的结构称为胚状体（embryoid）或体细胞胚(somatic embryo). 组培的应用：1、优质种苗的快速无性繁殖：1）无性繁殖作物及不易繁殖作物的快繁2）通过茎尖培养生产脱毒种苗2、用于植物遗传育种：种质资源离体保存；花粉花药培养产生单倍体；胚乳培养产生三倍体；离体授粉克服远缘杂交不亲和性；胚培养拯救杂种胚；原生质体培养进行体细胞杂交；植物体细胞无性系变异诱导和筛选；用于植物基因转移操作等3、大规模植物细胞、组织和器官培养生产次生代谢物质；4、用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。

植物组织培养技术的应用

植物组织培养技术的应用
植物组织培养技术是一种利用植物细胞、组织和器官进行人工培养的技术。

它具有广泛的应用，包括以下几个方面：
1. 繁殖和育种：通过组织培养技术，可以实现无菌条件下的无限繁殖植物，从而达到育种的目的。

此外，还可以利用组织培养技术进行杂交、突变和基因工程等技术，以实现更准确、更高效的育种。

2. 生产药物和化学品：植物组织培养技术可以用于生产药品和化学品。

例如，可利用植物细胞和组织生产抗癌药物、抗生素、香料和色素等物质。

3. 植物保育：植物组织培养技术可以用于保护濒危植物和珍稀植物。

通过无菌的组织培养技术，可以繁殖珍稀植物，以避免其在自然界中灭绝。

4. 研究和教育：植物组织培养技术可以用于研究植物生长、发育和代谢等方面的基础知识。

此外，还可以作为教育工具，帮助学生更好地了解植物的生长过程。

总之，植物组织培养技术在农业、医药、环境和教育等领域都有着广泛的应用。

植物器官和组织培养的基本程序

植物器官和组织培养的基本程序离体的植物器官和组织在人工培养条件下，通过不同的器官发生途径，形成体细胞胚或茎芽，进一步再生成完整植株。

因此，植物器官和组织培养的基本程序包括：无菌外植体的获得、初代培养物的建立、形态发生、植株再生以及培养产物的观察记载。

一、无菌外植体的获得从自然界和室内采集的植物器官和组织材料携带有各种微生物，这些污染源一旦进入培养容器中，造成培养基和培养材料污染，实验无法进行。

所以，污染是组织培养的一大障碍。

利用各种灭菌剂可以进行外植体的灭菌，但不同植物或同一植物不同器官和组织的带菌程度不同，所用灭菌剂的种类、浓度及灭菌方法也不尽相同。

(一)茎尖、茎段、叶片的灭菌灭菌前外植体用清水冲洗，茸毛较多的外植体用皂液洗涤后再用清水冲洗、用吸水纸吸干表面水分；将外植体浸泡在0.1%～0.2%的氯化汞溶液中2～10min，或先在70%～75%酒精中浸数秒，然后在10%次氯酸钙溶液中浸泡10～20min。

或先在70%～75%酒精中浸泡数秒，再在2%次氯酸钠溶液中浸泡15～30min进行灭菌；灭菌后倒掉灭菌液，无菌水冲洗外植体3～5次，置外植体于无菌滤纸上吸干表面水分，适当分割后接种。

(二)根、块茎、鳞茎的灭菌这类材料生长在土中，灭菌较困难，且挖取时易受损伤。

所以灭菌前应仔细清洗，对凹凸不平及鳞片缝隙处，需用软刷清洗，并切除损伤部位。

灭菌时应增加灭菌时间或增大灭菌剂浓度，如将外植体浸泡在0.1%～0.2%氯化汞溶液中5～12min，或在70%～75%酒精中浸数秒，然后用6%～10%次氯酸钠溶液浸5～20min进行灭菌。

灭菌后的操作步骤同上。

(三)花蕾的灭菌未开放花蕾中的花药为花被包裹，处于无菌状态，所以采摘后可直接灭菌。

灭菌时先在70%～75%酒精中浸蘸10～30s，然后在0.1%氯化汞溶液中浸泡3～10min或在1%次氯酸钠溶液中浸泡10～20min。

灭菌后的处理同上。

(四)果实、种子的灭菌这类材料有的表皮具有茸毛或蜡质。

植物组织培养(全)

(3)胚培养
胚培养是器官培养的一种。选用的外植体是成熟或未成熟的胚进行离体无菌培养。其具体方法是将取出放在液体或固体培养基上培养，由于胚包含在胚珠和子房里，因而进行胚胎培养时，常常是将胚珠和子房放在培养基上培养。
胚培养用途：1.拯救胚2.研究胚的发育营养研究3.一些特殊的领域的研究。
(4)细胞和原生质体培养
二是要给予它们适当的刺激，即给予它们一定的营养物质，并使它们受到一定的激素的作用。
全能性体现的两个过程
一个已分化的细胞要表现它的全能性，必须经历两个过程，即首先要经历脱分化过程，然后再经历再分化过程。
再分化的过程有两种方式：
一是器官发生方式二是胚胎发生方式
2.激素（植物生长调节剂）调控
后来证明，激素可调控器官发生的概念对于多数物种都可适用，只是由于在不同组织中这些激素的内生水平不同，因而对于某一具体的形态发生过程来说，它们所要求的外源激素的水平也会有所不同。
⑤1958年，Wickson和Thimann指出，应用外源细胞分裂素可促成在顶芽存在的情况下处于休眠状态的腋芽的生长。
当把茎尖接种在含有细胞分裂素的培养基上以后，将可使侧芽解除休眠状态，而且，能够从顶端优势下解脱出来的不只是那些既存于原来茎尖上的腋芽，此外，还有由原来的茎尖在培养中长成的侧枝上的腋芽，结果就会形成一个郁郁葱葱的结构，里面包含了数目很多的小枝条，其中每个小枝条又可取出来重复上述过程，于是在相当短的时间内，就可以得到成千上万的小枝条。当把这些小枝条转够到另外一种培养基上诱导生根以后，即可移植于土壤中。
奠基阶段（从20世纪30年代中至20世纪50年代末）
30年代中期，植物组织培养领域两个重要的发现，其一是认识了B族维生素对植物生长的重要意义；二是发现了生长素--一种天然的生长调节物质。

植物组织培养技术

初代培养（ culture）初代培养（primary culture）：指在组织培养过程中，最初建立的外植体无菌培养阶段。由于首批外植体来源复杂，携带较多细菌，要对培养条件进行适应，因此，初代培养一般比较困难。继代培养（ subculture）继代培养（ subculture ）：在组织培养过程中，当外植体被接种一段时间后，将已经形成愈伤组织或已经分化根、茎、叶、花等的培养物重新切割，转接到其它培养基上以进一步扩大培养的过程称为继代培养。
另一为药物和生物制品的工业生产，探索天然药物生产工业化的途径是当前药物生产的一个新方向，有可能用组织培养法来代替全植物提取有效成分。组织培养应用在药学方面的工作虽然历史不长，但发展很迅速，它具有如下一些优点： 1．利用组织培养代替原植物的栽培以获得所需的有效成分，达到产量高，成本低的目的，还可节约土地。 2．除了应用于产生次生物质外，还可应用于生物转化。例如烟草组织培养中蒂巴因去甲基后可能生成吗啡。
目前中国已成功地将麦角菌、灵芝、猴头菇等真菌进行工业化生产，高等植物组织培养在工业化中的应用也正在研究。总之，植物组织培养这一新技术在中草药方面应用的前途是无限广阔的，它不仅有利于探讨和阐明药用植物生理、遗传和成分生物合成等一系列理论问题，而且一旦工业化生产问题得到解决，将可以为防病治病做出很大的贡献。
2 培养基的种类 MS培养基、B5培养基、White培养基、N6培养基等等。 3 培养基的配制（1）混和培养基中的各成分（2）融化琼脂（3）调整pH为5.8 （4）分装（5）灭菌（6）放置备用
二组织培养操作的一般流程
1 2 3 4 5 6 器皿的洗涤培养基的配制和灭菌接种室及用具消毒材料灭菌：70％酒精、氯化汞接种无菌培养

植物组织培养

植物组织培养作业姓名：班级：学号：学院：植物组织培养在花卉生产上的应用摘要：植物组织培养在花卉产业中应用非常广泛, 组织培养技术促进了花卉的快速繁殖和生产脱毒苗及其在花卉产业中的应用，具有广泛的应用前景。

植物组织培养（tissue culture）是指在无菌条件下将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体培养在人工配制的培养基上,给予适当的培养条件,使其增殖、生长、分化形成小植株的一种新型繁殖方法。

是当前快速繁殖植物新品种的最重要方法。

植物组培育苗技术在我国已得到广泛应用,其研究的深度和广度在国际上都居先进水平,但其产业化程度不高,据不完全统计,目前我国花卉组培苗的年产量约为0.5亿株，发展空间广阔。

1 、花卉组培育苗概况传统的花卉生产大多采用播种、扦插、分株等方法进行繁殖,其繁殖系数低、苗木质量差、繁殖周期长、品种推广慢,且易受季节和自然条件的限制,严重阻碍了花卉业在我国的迅速发展。

组培技术的研究几乎涉及到了所有重要的花卉,其中,兰花是最早运用该技术也是最成功的花卉。

目前,国际上80%~85%的兰花都是用植物组织培养法进行脱毒和快速繁殖的。

组培技术为花卉的快速繁殖和无病毒苗的获得提供了一条经济有效的途径。

植物组织培养技术已成为种苗生产的主要技术之一,经组织培养,可增加繁殖系数,加快繁殖速度,生产出种性纯、品质好、产花量高的生产性用苗。

有的花卉植物靠分株来增加数量是非常难的,利用组织培养可在短期内迅速而且大量的繁殖与母株一模一样的种苗。

还有一些花卉本身是三倍体或多倍体,很难产生种子,因此就无法进行有性繁殖。

利用组织培养技术还可以迅速的繁殖苗木,满足生产的需求。

利用植株的病害传递给子代,从而达到脱毒的目的。

如今,脱病毒技术已被部分花卉所应用。

利用组织培养技术保存种质资源还有诸多优点:(1)占空间小;(2)可防止病虫;(3)可以迅速大量繁殖;(4)费用低;(5)便于交流。

此外，组织培养还具有产生单倍体植株、缩短育种周期、改良品种、不受季节限制、有利于工厂化生产等优点。

植物组织培养名词解释

植物组织培养名词解释植物组织培养是指将植物体的一部分或细胞外植体（包括种子、芽、刺、茎尖、叶尖等）在无菌条件下培养和繁殖，以便快速、大规模地繁殖植物。

植物组织培养是一项重要的生物技术，可应用于种苗繁殖、植物改良、品种保存和组织工程等领域。

植物组织培养涉及许多名词，下面对其中一些常见的名词进行解释。

1. 细胞分裂：细胞分裂是指细胞分裂成两个或多个细胞的过程。

细胞分裂是植物组织培养中细胞增殖的基础。

2. 培养基：培养基是提供植物组织或细胞生长所需的营养物质和植物激素的培养介质。

培养基可以根据不同的植物种类和培养目的进行调配。

3. 愈伤组织：愈伤组织是植物在外界刺激下形成的生长异常组织，具有无定向分裂和再生能力。

愈伤组织培养能够实现无性繁殖，即从愈伤组织中培养出整个植株。

4. 植株再生：植株再生是指在培养基上通过愈伤组织培养得到新的植株。

植株再生可以通过不同的途径实现，如愈伤组织诱导再生、原球茎诱导再生等。

5. 轮回：轮回是指将植物体分离为单细胞再进行培养和繁殖的过程。

轮回可以大大提高植物的繁殖速度和效率。

6. 培养器：培养器是植物组织培养过程中用于装载培养基和植物细胞的容器。

常见的培养器有试管、培养瓶和培养皿等。

7. 无菌技术：无菌技术是一种用于消灭或控制培养中的微生物污染的方法。

无菌技术在植物组织培养中非常重要，可以确保培养体系的纯净性和成功的培养结果。

8. 再生植株硬化：再生植株硬化是指通过逐渐减少对植物的外界保护和提供适宜的环境条件，使得再生植株逐渐适应自然条件。

再生植株硬化是植物组织培养最后一个重要环节，可以确保再生植株的生长和生产力。

总之，植物组织培养是利用植物细胞的再生分裂能力进行无性繁殖和植物改良的生物技术。

在植物组织培养过程中，一系列名词的应用和理解对于成功进行培养和繁殖非常重要。

植物组织培养复习资料

第一章绪论植物组织培养类型根据培养材料不同分为：（1）完整植株培养：对幼苗和较大植株等的培养。

（2）胚胎培养：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。

（3）器官培养：包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。

（4）组织培养：如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。

（5）细胞培养：指对单细胞或较小的细胞团进行培养。

（6）原生质体培养：指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。

根据再生途径分为：（1）器官发生途径（2）体细胞胚胎发生人工种子：是指植物离体培养产生的胚状体或不定芽被包裹在含有营养和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒体。

作为繁殖材料。

植物组织培养技术的应用：1、优质种苗的快速无性繁殖1）无性繁殖作物及不易繁殖作物的快速繁殖2）通过茎尖培养生产脱毒健康种苗2、用于植物遗传育种包括种质资源离体保存；花粉花药培养产生单倍体；胚乳培养产生三倍体；胚培养拯救杂种胚克服远缘杂交障碍；原生质体培养进行体细胞杂交；植物体细胞无性系变异诱导和筛选；用于植物基因转移操作等。

3、大规模植物细胞、组织和器官培养生产次生代谢物质4、用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等第二章植物组织培养的基本技术组培实验室：包括化学实验室或准备室、接种室以及培养室三部分，并且按顺序排列。

在化学实验室与接种室之间应留有缓冲空间。

（1）准备室：用于培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和灭菌、试管苗的出瓶及整理等工作。

冰箱、天平、高压灭菌锅、pH计、干燥箱、实验台、水槽、凉干架、药品柜、离心机、水浴锅、微波炉、电炉、磁力搅拌器、蠕动泵、移液器、各种玻璃器皿（烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶、三角瓶等）及培养基分装用品等。

（2）接种室：植物材料的灭菌、接种以及培养物的继代转接等。

超净工作台、紫外灯、小推车、搁架、磁盘、接种工具（各种镊子、解剖刀、手术剪、普通剪刀接种针、酒精灯、手持喷雾器、细菌过滤器等）等。

植物组织培养教学内容

植物组织培养植物组织培养：在无菌的条件下，将离体的植物材料包括器官，组织，细胞以及原生质体在人工培养基上进行培养，使其再生发育成完整植株的过程，又称植物离体培养。

细胞全能性：植物体的任何一个细胞都携带该物种的全部遗传信息，离体细胞在一定的条件下具有发育成完整植株的潜在能力。

外植体：植物组织培养中离体的植物材料，包括植物器官，胚胎、组织、细胞和原生质体。

细胞分化：导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。

脱分化：已分化成熟的植物组织或器官回复到分生状态，细胞开始分裂形成无组织结构的细胞团或愈伤组织的过程。

再分化：是指在一定条件下，脱分化形成的愈伤组织转变成为具有一定结构、执行一定生理功能的细胞团和组织、并进一步形成完整植株的过程，即从愈伤组织再生形成完整植株的过程。

愈伤组织：植物体受伤后的伤口处或在植物组织培养中外植体切口处产生的一团不定型的薄壁组织。

离体无性繁殖：根据植物细胞全能性原理，在无菌条件先短时间内形成大量植株。

玻璃化苗：在植物组培中，茎叶形成透明矮小肿胀的形态，生根能力差。

问答题：1、无菌操作是贯穿于整个组织培养过程的一门关键技术，请根据自己的体会论述如何在植物组织培养过程中做到无菌？1）取少菌的材料（春夏，中午的幼芽）2）严格灭菌3）合理安排操作程序4）无菌保存5）操作规范2、组培在生产上的应用有哪些？学好植物组培的意义？1）植物快速繁殖：增殖速度快，成本低，易于批量生成和管理。

比如利用一小块叶片或一个茎尖，一年内可繁殖出1000-100000株幼苗2）脱除病毒：植物在生长过程中几乎都要蒙受到病毒的危害，采用茎尖培养方法可以除去植物体内的病毒。

脱毒苗恢复了原有的优良种性，生长势明显增强，整齐一致。

3）培养新品种：克服远缘杂交不亲合性；克服远缘杂交的不孕性；选择细胞突变体；单倍体育种；转基因育种。

4）植物次生代谢产物生产：利用植物组织后细胞的大规模培养，可以生产一些天然有机化合物，这些次生代谢产物，往往具有一些特定的功能，对人类有重要的影响和作用。

植物组织培养

植物组织培养：①概念：在无菌和人工控制的环境下，利用适当的培养基，对离体的植物器官，组织，细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。

②分类：愈伤组织培养、悬浮细胞培养、器官培养、茎尖分生培养、组织培养、原生质体培养。

③理论依据：细胞的全能性：任何有完整细胞核的植物细胞，具有全部的遗传信息，在一定条件下均具有分化，发育成一个完整植株的潜在能力。

细胞全能性实现条件：⒈组织或器官离体（解除植物其余部分对这些细胞质的抑制性）⒉给与所需营养条件，特别是激素对器官分化起决定性作用。

④分化途径：外植体（离体的植物器官、组织、细胞）经过脱分化形成愈伤组织，经过再分化形成不定根、不定芽和胚状体，最后形成植株，或者直接由外植体分化形成不定根、不定芽和胚状体，然后形成植株。

⑤应用前景：⒈理论研究方面的应用：研究细胞分化和器官建成响应因素的主要方法⒉植物离体快繁⒊人工种子的制备⒋次生产代谢物的产生⒌脱毒培养⒍种质资源的保存和交换⒎遗传操作实验室：⒈准备室：功能：材料培养器械的清洗，培养基、灭菌的准备工作①普通化学实验室：仪器：纯水仪、冰箱、移液枪、过滤灭菌器、电炉、微波炉、磁力搅拌器、低速台式离心机、电脑。

作用：配制培养基②洗涤室：仪器：储存器皿设备、鼓风干燥箱。

作用：洗涤用具③灭菌室：仪器：棉塞、无菌纸。

作用：灭菌消毒⒉无菌操作室：功能：进行植物材料分离接种的重要场所，需长时间的无菌操作对组织培养成功起关键作用。

仪器：超净工作台、紫外灯、固定式和移动载物台、消毒器、酒精灯、广口瓶、酒精棉、机械支架、手术剪、解离刀、解剖针⒊培养室：功能：进行材料的培养场所。

设备：可控光、温、湿度等设备，固定式培养架，转床，摇床，适当的培养基⒋细胞学实验室：功能：细胞学和组织学观察。

设备：高倍显微镜，切片机，相机，恒温箱⒌温室：功能：组培苗的移栽锻炼。

灭菌方法及适用范围：①概念：⒈灭菌：灭杀或出去物体表面和空隙内的所有微生物。

植物组织培养知识点归纳

植物组织培养知识点归纳1第1章植物组织培养:指植物器官、组织、细胞、原生质体等的培养。

体内使用人工培养基使它们生长成完整的植物2，外植体:在植物组织培养中，为无菌细胞、组织、器官等。

从活植物中提取并接种在培养基上的称为外植体。

3，愈伤组织:指在人工培养基上无序地从外植体中生长出来的大量薄壁细胞。

4.1的应用。

1农业应用。

幼苗的快速繁殖。

无病毒培养3。

(1)倍性育种，缩短育种年限，具有明显的杂种优势；(2)克服远缘杂交(胚胎培养)的不亲和性和不育性；(3)种质保存(4)变异2的创造，在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。

用于基因工程创造植物新种质用于植物生长发育的理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学、细胞和分子生物学等。

3。

使用组织培养材料作为植物生物反应器第2章1，全能性:任何具有完整细胞核的植物细胞都具有形成完整植物所必需的所有遗传信息以及发育成完整植物的能力。

2，细胞分化:指导致细胞形成不同结构和功能变化或潜在发育模式的过程3，去分化:指在体外生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构，恢复分生组织状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织的过程4，再分化:指去分化细胞恢复其分化能力并形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚至植物的过程5，植物组织培养中经常遇到的问题及解决方法1，污染与预防:1，真菌污染后，如果孢子已经形成，必须在高压灭菌后丢弃然而，在细菌污染的情况下，只要及时发现，材料仍然可以使用，并且材料上部不易受细菌影响的部分被切割和转移。

2.用抗生素等抗菌剂处理会影响植物材料的正常生长第二，的褐变和防止(1)选择合适的外植体(2)适宜的培养条件(3)用抗氧化剂连续转移(4)，玻璃化和防止(1)提高培养基中的溶质水平和降低培养基中的水势；(2)减少培养基中氮化合物的量；(3)增加光照；(4)增加容器通气量和施用CO2肥料对降低试管苗玻璃化有明显效果。

植物组织培养

绪论植物组织培养（Plant tissue culture）广义上是指无菌条件下，在特定的培养基上对离体的植物器官、组织、细胞和原生质体甚至包括完整植株进行培养的技术。

外植体：愈伤组织：一、植物组织的主要特征：（1）在培养容器中进行；（2）无菌培养环境，排除了微生物如真菌、细菌以及害虫等的侵入；（3）各种环境因子如营养因子、激素因子以及光照、温度等物理因子处于人工控制之下，并可达到最适条件。

（4）通常打破了正常的植物发育过程和格局；（5）随着单细胞和原生质体培养技术的发展，对植物显微结构进行操作成为可能。

二、植物组织培养类型：根据不同分类的依据可以分为不同类型。

1、根据培养材料不同分为：（1）完整植株培养（Plant Culture）：对幼苗和较大植株等的培养。

（2）胚胎培养（Embryo Culture）：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。

（3）器官培养（Organ Culture）：包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。

（4）组织培养（Tissue Culture）：如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。

（5）细胞培养（Cell Culture）：指对单细胞或较小的细胞团进行培养。

（6）原生质体培养（Protoplast Culture）：指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。

三．植物组培的应用1.植物离体快繁。

2.无病毒苗木培养。

3.培育新品种或创制新物种。

4.次生代谢物生产。

5.植物种质资源的离体保存。

6.人工种子。

第一章1.）实验室包括：准备室，无菌操作室，培养室，温室。

2.）器具的灭菌：1、器具灭菌：培养皿、解剖刀、镊子等用品。

（1）干热灭菌：铝箔包好后，放于恒温干燥箱内，150 ℃保温2小时，成本较高。

（2）高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌锅内120 ℃15－20分钟。

（3）灼烧灭菌：接种时，解剖刀及镊子等浸入95％乙醇，然后取出在酒精灯火焰上灼烧杀菌。

2、培养基灭菌：采用高压蒸汽灭菌。

植物组织培养与器官培养

• 这几种常见的培养基为是：MS、ER、 B5、N6、NT、White等，其配方如下：
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培养基分类
• 根据培养基无机盐含量的差异将其分为以下4类：
①高无机盐含量培养基（植物器官、花药、细胞及原生质体培养）；-MS
②较高硝酸盐含量培养基（木本、十字花科和单子叶植物的组织和花药培养）；-B5
材料灭菌培养基筛选
器
官发
增殖、分化
培养基中激素配比
生
型
激素种类及浓度
基本
植株再生及鉴定基本培养基组成
程
渗透压
序
炼苗和移植
逐步过渡
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胚状体发生型(embryogenesis type)：
• 指植物器官、组织和细胞外植体经培养脱分化形成胚状体再成苗的方式。
• 技术关键：提高不同外植体胚状体发生及萌发率和提高胚状体同步化率。
FLash
• 技术关键：打破顶端优势，促使腋芽增殖并促其生根。
• 特点：繁殖率高、保持物种的遗传稳定性，多用于林木
的繁殖。
器官型(organ type)
• 指直接从茎、叶、鳞片等外植体上诱导不定芽或带芽的休眠器官（如小鳞茎、小球茎、小块茎）产生再生成植株的方式。
• 技术关键：对培养基要求高，控制好激素浓度，避免愈伤组织发生。
来自茎尖或茎段
培养物的不定芽。
• 通常玻璃化苗
恢复正常的比例很低，
在继代培养中仍然
形成玻201璃9/10化/6 苗。
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玻璃化的解决方法
1. 增加培养基中的溶质水平，以降低培养基的水势；

植物组织培养植物器官以及组织培养

植物组织培养

植物组织培养

植物的器官和组织培养

植物组织培养笔记111

植物组织培养技术的应用

植物器官和组织培养的基本程序

植物组织培养(全)

植物组织培养技术

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植物组织培养与器官培养

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