结核分枝杆菌概论

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结核分枝杆菌
一、分类
结核分枝杆菌（Mycobacterium Tuberculosis，TB）复合群：
人结核分枝杆菌(M.tuberculosis) 牛分枝杆菌(M.bovis)
非洲分枝杆菌 田鼠分枝杆菌
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一、生 物 学 特性
1.形态结构 无鞭毛 无芽孢 有荚膜
目前全球有1/3人口即17亿人感染了结核病,每1秒 钟就有1人受感染。
发病人数占前五位的国家分别为印度、中国、印度 尼西亚、尼日利亚、南非。
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二、致病性与免疫性
（一）致病物质
TB不产生内毒素、外毒素 也不具有侵袭性酶 致病物质主要是菌体成份
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荚膜 与细胞表面受体结合（粘附与入侵作用）
抗酸染色法(acid-fast stain) ：以5％ 石炭酸复红加温染色，再用3％盐酸 酒精脱色，然后用美蓝复染，则分枝 杆菌呈红色(+)，其他细菌和背景物质 为蓝色(-)。
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二、分类
根据国际分枝杆菌分类研究组（IWGMT）的 方案将本菌分为三类：
缓慢生长菌 迅速生长菌 不能培养菌
快速生长菌 慢生长菌
动物试验
涂片镜检 菌种19 鉴定
标本采集
感染部位不同，取不同的标本，宜用能抑制污染菌的方法
常见标本：痰、尿、胸腹水等
检查方法
1.显微镜检查
1）直接涂片：用萋－尼氏法染色，若镜检找到抗酸性杆 菌，通常应报告：“查到抗酸性杆菌”，需进一步分离 培养鉴定。
2）浓缩集菌涂片：如标本中菌量少，杂菌和杂质多时，
亦失去索状生长现象。
有毒株和无毒株 的区别
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6. 抵抗力
四怕
乙醇 湿热 紫外线 抗痨药物 （链霉素、异烟肼、利福平等）
四不怕
干燥 酸（3% HCl或6% H2SO4) 或碱（4% NaOH) 有抵抗力 碱性染料 青霉素等抗生素
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临床意义
全球形势严峻
WHO2009年全球结核病控制报告显示，全球现有结 核病患者1370万，每年发病人数为927万，每年死 亡人数177万。结核病仍为单一病原菌引起疾病死 因的第一位。
传播途径：呼吸道、消化道、破损的皮肤粘膜
等途径。
免疫力低下：全身粟粒 性结核
肺部感染
原发感染：多见于儿童 免疫力正常：不治而愈，
结核结节
继发感染：多见于成人，慢性肉芽肿炎症
肺外感染：脑、肾、肠结核，结核性腹膜炎等。
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（三）免疫性
1.带菌免疫（传染性免疫）:细菌在机体消
失或死亡后，其免疫也终止。
结核分枝杆菌有无超敏反应可判定对结核有无免疫力，常用结核菌素来测定。
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四、微生物学检验
临床标本
涂片检查
分离培养
核酸检测 抗体检测
直接涂片 集菌涂片 处理标本或无污染标本
染色 抗酸.. 金胺O..
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液体培养基 固体培养基
（罗氏或米氏）
37℃，
仪器培养
＜7天生长
＞7天生长
附近淋巴 结肿大
已感染过的豚鼠 迅速 局部发生溃疡，
第二次
但较浅易愈合
皮下注射
1～2d
细菌扩 散全身
结核分枝杆菌核糖体RNA（rRNA）引起免疫反应
结核菌素蛋白与蜡质D共同刺激产生迟发性超敏反应
附近淋巴 结不肿大
细菌很 少扩散
意义：因为在自然感染过程中，细胞免疫与迟发性超敏反应同时存在。因此通过测定机体对
分枝杆菌属 （mycobacterium）
试讲人：陈洁
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概述
一.主要特点 形态上：细长弯曲，分枝状生长 结构上：细胞壁富含脂质（分枝菌酸） 染色上：呈抗酸染色阳性 致病性上：引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿
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抗酸染色
由于细菌细胞壁中含大量脂质，一般 不易着色，若经加温或延长染色时间 而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精 的脱色，故又称抗酸杆菌(acid-fast bacilli)
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5.生化反应：不活跃
源自文库
1．各型菌均不发酵糖类，产生H2O2酶。
结核分枝杆菌触酶（+）、热触酶（-）
非结核分枝杆菌两种均为（+） 。
二者鉴别的依据
2．人型结核分枝杆菌能合成烟酸，还原硝
酸盐，耐受噻吩-2-羧酸酰肼。
二者鉴别的依据
而牛型结核分枝杆菌不能。
3．有毒株中性红试验阳性，无毒株则阴性，
结核杆菌的L型：颗粒状、丝状（Much颗粒）
抗酸（+） （-）
菌落 R
S
毒力变异：如卡介苗BCG：
是Calmette和Guérin将牛分枝杆菌经13年230次传代而获 得的减毒活疫苗株
耐药性变异：
多重耐药结核病（MDRTB）
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菜花样菌落
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➢4.培养特性
专性需氧菌，对营养要求严格
齐尼（Ziehl-neelsen)抗酸染色呈红色
荧光金胺O染色呈橘黄色
L型细菌呈非抗酸性 G＋性颗粒（Much颗粒）
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（二）菌体成分
1脂质：
磷脂 脂肪酸
蜡质
蜡质D 索状因子 分枝菌酸
2蛋白质：结核菌素 3多糖
免疫佐剂：胞壁酰二肽
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3 变异性
形态及菌落变异：
2.细胞免疫（主要作用）与体液免疫分离:
细胞免疫随病情加重而减弱，体液免疫则相反。
3.机体免疫与迟发性变态反应：不同T细胞
介导。
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超敏反应
何谓郭霍现象（Koch phenomenon）？
将一定量结 核分枝杆菌
健康豚鼠 第一次 皮下注射
10 ～ 14d 局部发生坏死性 溃疡，不易愈合
用离心沉淀法将菌浓缩聚集，再取沉淀物涂片作抗酸染
致
含多种酶（分解利用营养物质）
病
保护（抑制溶酶体与吞噬体的融合）
脂质
物
质
索状因子（破坏线粒体膜--抑制细胞代谢 抑制白细胞游走--引起肉芽肿）
磷脂（形成结核结节，干酪样坏死）
硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合）
蜡质D（引起迟发性过敏反应） 蛋白质 引起迟发性过敏反应
（二）所致疾病
传染源：病人
——结核，尤其以肺结核多见。
➢ 丑--典型菌落为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，不 透明，乳白色或淡黄色，如菜花样。
懒--生长缓慢，14～18h分裂1次，在固体培养基 上2～5w才出现肉眼可见的菌落。
挑--营养要求较高，必须在含血清、卵黄等物质 的特殊培养基（罗氏）上才能生长良好。
液体培养基---生长较快呈粗糙皱纹状菌膜生长，有毒
株可呈索状生长（吐温干扰）。