生化实验胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响

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血糖测定
试剂 血浆(或血清) 葡萄糖标准液 (5.5mmol/L) 蒸馏水 空白 / / 20 标准 / 20 / 胰前 20 / / 胰后 20 / / 肾前 20 / / 肾后 20 / /
酶酚混合液
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将各管分别混匀后,置37℃恒温水浴保温15min,冷却 至室温,分光光度计波长505nm处,空白管矫正吸光度值为 零,读取数值
实验器材
• 1.胰岛素注射液(市售胰岛素【40IU/ml】 0.3ml加灭菌注射用水7.7ml,混匀,使之成 1.5IU/ml浓度胰岛素应用液。) • 2.肾上腺素注射液 取1:1000的肾上腺素1.5ml 加热煮沸冷却后的生理盐水2.5ml,混匀即得 含原液0.375ml的肾上腺素应用液。 • 3.葡萄糖氧化酶法测定血液的相关试剂。 • 4.二甲苯棉球、干棉球、注射器。 • 5.家兔
胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影 响
实验原理:
• 调节血糖浓度的激素有两大类:升糖激素和降 糖激素。两者的作用相互对抗又彼此协调,共 同维持着血糖浓度的恒定。肾上腺素是重要的 升糖激素,它通过增加血糖的来源,减少血糖 的去路而使血糖浓度增高。胰岛素是唯一的降 糖激素,其作用是增加血糖的去路,从而减少 血糖来源。一旦胰岛素分泌障碍必然导致高血 糖,甚至尿糖。本实验通过给家兔注射肾上腺 素和胰岛素,对比注射前后血糖浓度变化,观 察激素对血糖浓度影响。
结果处理:
• 1.胰前血糖浓度:mmol/L=(胰前管A/标准 管A)*5.5 • 2.胰后血糖浓度:mmol/L=(胰后管A/标准 管A)*5.5 • 3.肾前血糖浓度:mmol/L=(肾前管A/标准 管A)*5.5 • 4.肾后血糖浓度:mmol/L=(肾后管A/标准 管A)*5.5
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操作步骤:
• 1.取预先饥饿一昼夜的家兔2只,分别作注射胰岛素和肾上腺素 标记,称重并记录之。 • 2.取血 固定家兔,用手轻柔耳缘,以二甲苯棉球涂擦耳翼背面, 使耳静脉血管扩张,用抗凝剂处理后的注射器从耳缘静脉远端 刺入血管,一次采血5~10ml,取血后用干棉球压迫耳静脉止血, 立即注入盛有抗凝剂的离心管内,并标明“胰前”、“肾前”, 轻轻摇匀以防血液凝固。冬天室温较低时,耳静脉采血往往失 败,因此可以心脏穿刺采血:左侧3~4肋间,触摸心跳最明显处, 消毒后穿刺进针取血。 • 3.注射激素 向家兔腹部皮下按1ml/kg分别注射胰岛素和肾上腺 素应用液。记录注药时间。 • 4.注射胰岛素50分钟,注射肾上腺素30分钟后,分别按上述方 法取血,标以“肾后”“胰后”。 • 5.3000r/min离心5分钟分离血浆备用。
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