猪免疫球蛋白A

猪免疫球蛋白A
猪免疫球蛋白A

5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min ,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。

7、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min 。

8、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min ,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B 液 50μL,平板混匀器混匀30s (或用手轻轻震荡混匀30s),37℃避光显色15min 。

10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm 波长测量各孔的吸光值(OD 值)。

12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD 值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD 值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【猪免疫球蛋白A(IgA)Elisa 试剂盒样本要求】

1、样本不能含叠氮钠(NaN 3),因为叠氮钠(NaN 3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。

2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【猪免疫球蛋白A(IgA)Elisa 试剂盒注意事项】

1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。

2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。

4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。

5、本试剂盒定量范围为2.5-80μg/mL,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(2.5-80μg/mL 范围内),乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。

6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。

7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。9、底物B 对光敏感,避免长时间暴露于光下。

【猪免疫球蛋白A(IgA)Elisa 试剂盒操作程序总结】1、准备试剂,样品和标准品

2、加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟

3、洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟

4、洗板4次,加入显色液A 、B ,37℃显色15分钟

、管路敷设技术通过管线不仅可以解决吊顶层配置不规范高中资料试卷问题,而且可保障各类管路习题到位。在管路敷设过程中,要加强看护关于管路高中资料试卷连接管口处理高中资料试卷弯扁度固定盒位置保护层防腐跨接地线弯曲半径标等,要求技术交底。管线敷设技术中包含线槽、管架等多项方式,为解决高中语文电气课件中管壁薄、接口不严等问题,合理利用管线敷设技术。线缆敷设原则:在分线盒处,当不同电压回路交叉时,应采用金属隔板进行隔开处理;同一线槽内强电回路须同时切断习题电源,线缆敷设完毕,要进行检查和检测处理。、电气课件中调试对全部高中资料试卷电气设备,在安装过程中以及安装结束后进行

高中资料试卷调整试验;通电检查所有设备高中资料试卷相互作用与相互关系,根据生产工艺高中资料试卷要求,对电气设备进行空载与带负荷下高中资料试卷调控试验;对设备进行调整使其在正常工况下与过度工作下都可以正常工作;对于继电保护进行整核对定值,审核与校对图纸,编写复杂设备与装置高中资料试卷调试方案,编写重要设备高中资料试卷试验方案以及系统启动方案;对整套启动过程中高中资料试卷电气设备进行调试工作并且进行过关运行高中资料试卷技术指导。对于调试过程中高中资料试卷技术问题,作为调试人员,需要在事前掌握图纸资料、设备制造厂家出具高中资料试卷试验报告与相关技术资料,并且了解现场设备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况

,然后根据规范与规程规定,制定设备调试高中资料试卷方案。

、电气设备调试高中资料试卷技术电力保护装置调试技术,电力保护高中资料试卷配置技术是指机组在进行继电保护高中资料试卷总体配置时,需要在最大限度内来确保机组高中资料试卷安全,并且尽可能地缩小故障高中资料试卷破坏范围,或者对某些异常高中资料试卷工况进行自动处理,尤其要避免错误高中资料试卷保护装置动作,并且拒绝动作,来避免不必要高中资料试卷突然停机。因此,电力高中资料试卷保护装置调试技术,要求电力保护装置做到准确灵活。对于差动保护装置高中资料试卷调试技术是指发电机一变压器组在发生内部故障时,需要进行外部电源高中资料试卷切除从而采用高中资料试卷主要保护装置。

体液免疫球蛋白测定

体液免疫球蛋白测定 第一节血清IgG、IgA、IgM测定 血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM定量测定方法一般有单向环状免疫扩散法、火箭免疫电泳法、ELlSA、免疫比浊法、放射免疫分析法等。临床常用单向环状免疫扩散法和免疫比浊法来测定血清免疫球蛋白含量。 一、血清IgG、IgA、lgM测定 (一)单向环状免疫扩散法 该法的原理是将抗血清均匀地分散于琼脂或琼脂糖凝胶内,胶板上打孔,孔内注入抗原或待测血清,抗原在含有抗血清的胶内呈放射状(环状)扩散,在抗原抗体达到一定比例时形成可见的沉淀环。在一定条件下,抗原含量越高,沉淀环越大。 (二)免疫比浊法 该法具有检测范围宽、测定结果准确、精密度高、检测时间短(一般在几分钟内即可完成测试)、敏感度高、稳定性好等优点。 二、血清IgG、IgA、IgM测定的临床意义 (一)年龄 新生儿可由母体获得通过胎盘转移来的IgG,故血液中含量较高,接近成人水平。 (二)免疫球蛋白IgG、IgA、IgM均升高 慢性肝脏疾病如慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、隐匿性肝硬化患者血清中可见3种Ig均升高。慢性细菌感染如慢性支气管炎、肺结核,血IgG可升高。宫内感染时脐血或出生后的新生儿血清中IgM含量可增高。SLE患者以IgG、IgA升高较多见。类风湿关节炎患者以IgM增高为主。 (三)单一免疫球蛋白升高 主要是指患者血清中某一类免疫球蛋白含量显著增多,大多在30g/L以上,这种异常增多的免疫球蛋白其理化性质十分一致,称为单克隆蛋白(MP)即M蛋白。此类异常增多的免疫球蛋白多无免疫活性,故又称副蛋白。由它所致的疾病称为免疫增殖病如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等。 (四)免疫球蛋白降低 先天性低Ig血症,主要见于体液免疫缺陷病和联合免疫缺陷病。IgA缺乏患者,易发生反复呼吸道感染。IgG缺乏患者,易发生化脓性感染。IgM缺乏患者,易发生革兰阴性细菌败血症。 第二节血清IgD和IgE测定 正常人血清中IgD含量很低,仅占血清免疫球蛋白总量的0.2%。膜结合型IgD(mIgD)构成BCR,是B 细胞分化发育成熟的标志。未成熟的B细胞仅表达mIgM,成熟B细胞可同时表达mIgM和mIgD。活化的B 细胞或记忆B细胞其表面的mIgD逐渐消失。 IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白,要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌。其重要特征为糖含量高达12%。IgE为亲细胞抗体,可引起Ⅰ型超敏反应。IgE可能与机体抗寄生虫免疫有关。 第1页

抗中性粒细胞胞浆抗体ANCA的检测及临床意义

抗中性粒细胞胞浆抗体A N C A的检测及临床意 义 文稿归稿存档编号:[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测及临床意义 ――间接荧光免疫(IIF)方法(欧盟) 一、ANCA概念及分类 抗中性粒细胞胞浆抗体是一种以中性粒细胞和单核细胞胞浆成份为靶抗原的自身抗体,对系统性血管炎炎症性肠病等多种疾病的诊断和鉴别诊断具有重要的意义,已成为自身免疫性疾病的一项非常重要的常规检测项目。 目前,已经有十余种中性粒细胞胞浆成分被证实为ANCA的靶抗原,蛋白酶 3(PR3),髓过氧化物酶(MPO),人白细胞弹性蛋白酶(HEL),乳铁蛋白(LF),组织蛋白酶G(Cath G),杀菌/通透性增强蛋白(BPI),人溶酶体相关膜蛋白2 (H-LAMP2),溶菌素(LYS),天青杀素,防御素,烯醇化酶,葡萄糖醛酸酶。 根据乙醇固定的中性粒细胞基质片中,可以区分两种不同的荧光模型: 一种胞浆型(c-ANCA),是均匀分布在整个中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光,细胞核无荧光。在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中,其荧光模型表现相同。其主要的靶抗原是蛋白酶3(PR3)。 另一种是核周型(p-ANCA),是围绕中性粒细胞细胞核周围的平滑带状荧光。由多种抗原引起,主要靶抗原是髓过氧化物酶(MPO),人白细胞弹性蛋白酶(HEL),乳铁蛋白(LF),组织蛋白酶G(Cath G),杀菌/通透性增强蛋白(BPI),人溶酶体相关膜蛋白2 (H-LAMP2),溶菌素(LYS)等。不同抗体在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中,其荧光模型表现有所不同。抗MPO抗体产生的p-ANCA因耐甲醛,其荧光模型与在乙醇固定的中性粒细胞中出现的c-ANCA类似故叫甲醛抗性的p-ANCA。而其他非MPO抗体不与甲醛固定的中性粒细胞反应,无荧光表现,这种类型又称为甲醛敏感的p-ANCA。故根据乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片表现,可初步判定ANCA的靶抗原PR3,MPO,非MPO三类。 二、ANCA的检测

免疫比浊法检测免疫球蛋白

免疫比浊法检测免疫球蛋白 一、实验目的 利用免疫比浊法绘制标准曲线,并检测样品中免疫球蛋白的浓度。(本小组检测的为IgG样品) 二、实验原理 1.抗原抗体反应(Antigen-antibody reaction):抗原与其刺激机体产生的相应抗体在体内或体外发生特异性结合的反应。反应特点有:特异性、比例性、可逆性、敏感性。影响因素有:电解质、温度、酸碱度。 2.免疫比浊法:合适比例的抗原抗体形成的免疫复合物,在PEG作用下形成微粒,使样品浊度发生变化。当一束光线通过溶液受到光散射和光吸收两个因素的影响而使光的强度减弱,根据光的强度改变可测得微粒浓度。 分类:①透射比浊法(Transmission tubidimetry)当一定波长光线通过浊度发生变化的反应混合物时,由于被不溶性免疫复合物吸收而减弱,故在一定范围内吸光度与免疫复合物量呈正相关。当抗体浓度固定(过量),样品的浊度与其中所含抗原量成正比。(特点)透射比浊操作简便,适用于普通的自动生化分析仪和普通的分光光度计,几乎所有的实验室均能开展。不足的是灵敏度和精密度均不够理想,所需的抗血清量大,检测的时间较长。②散射比浊法(Nephelometry)光线通过检测溶液时,被其中所含的抗原抗体复合物折射而部分偏转,产生散射光,其强度与复合物的数量和散射夹角成正比,与光的波长成反比。(特点)优点是灵敏度、精密度均较高,检测快速。其缺点是需特定的分析仪器,试剂价格高。 本实验采用透射法。 3.聚乙二醇PEG的作用:在免疫反应中,为增强抗原抗体反应常使用增聚剂,3~4%的聚乙二醇,可破坏抗原抗体的水化层,促进抗原抗体靠近反应,但如浓度不适合,会影响其它溶质或产生非特异性聚集影响结果。 三、实验材料 免疫球蛋白A,G(IgA,IgG)测定试剂(试剂1[PEG],试剂2[羊抗人IgA, IgG])(1管/每组)免疫球蛋白A, G(IgA,IgG)校准品,蒸馏水,血清样本(1管) 微量加样枪、ep管(1.5mL离心管) 酶标仪、水浴箱 四、实验步骤 1.在7个EP管中各加250μL IgG试剂1(PEG)。 2.7管分别加入蒸馏水、校准品原液、1:2校准品、1:4校准品、1:8校准品、1:16校准品、样本各2μL。 3.混匀后37℃水浴5min。 4.7管各加入85μL IgG试剂2(羊抗人IgG)。 5.混匀后37℃水浴10min。 6.分别吸取200μL至96孔酶标板中,用酶标仪在700nm处读取OD值。 五、实验结果与数据处理 2.标准曲线

猪蓝耳病免疫程序-文

猪蓝耳病免疫程序 ————深圳市安多福收集整理 蓝耳病,又称猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),猪蓝耳病是最难控制的一种病情。接种蓝耳疫苗能刺激猪体产生保护性免疫反应,养猪场需要根据当地蓝耳病流行情况,并且通过抗体监测来制定猪蓝耳病免疫程序。 一、猪蓝耳疫苗情况 1)蓝耳灭活苗:安全性好,不存在散毒危险。如果疫苗抗原与野毒的基因序列相似,有很好的保护作用。同时,灭活疫苗使用注射剂量大、免疫抗体产生慢。如果疫苗抗原与野毒的基因序列不相似,则保护力比较差。 2)蓝耳弱毒苗:抗体产生快,有毒力返强的危险。疫苗抗原与临床野毒在传播方式、存留时间、经胎盘传播和先天性感染和精液外排及诱导免疫反应的时间等方面极其相似。此外蓝耳病毒株众多,根据疫苗株与野毒株之间的同源性高低而效果不一。同时免疫后抗体监测无法与野毒感染相区分。 二、蓝耳病疫苗怎样注射 1、蓝耳病弱毒活疫苗:

1)仔猪:14日龄首次,每头肌注1头份;2周后2次,每头1头份。 2)后备种猪:第一次发情前3周加强免疫1次,每头肌注2头份。 3)生产种猪:每四个月免疫1次,每次于配种前15天免疫,每头肌注2头份。妊娠母猪不准接种蓝耳病弱毒活苗。 2、蓝耳病灭活疫苗 1)保护力低、产生抗体时间长,蓝耳病免疫效果不佳,尽可能不使用。 2)免疫时注意:蓝耳病弱毒活疫苗能干扰猪瘟疫苗产生抗体,影响猪瘟疫苗的免疫效果。两个活疫苗不能同时接种,应间隔5-7天分别接种,即可避免其干扰作用。同时蓝耳病弱毒疫苗又受圆环病毒的干扰,当猪群中存在隐性感染猪圆环病毒时,接种蓝耳病弱毒疫苗,其免疫效果也受到影响。 在猪场的猪都做好猪蓝耳病免疫时,也应该相应的加强猪场的环境卫生与消毒,日常也应有必要的消毒设备和消毒药品,猪场消毒应订立制度以保证实施。 场区内消毒地面每周用安多福万金水1:2500倍稀释消毒一次,猪栏、墙壁、棚顶每周用百毒杀等消毒药喷雾消毒一次,产房每天载猪消毒1次。 消毒工作看起来不太芜杂,但它是屏障,消毒工作做好了,可以防患未然。 做好猪蓝耳病免疫程序,做好环境卫生消毒,就能有效的预防蓝耳病等各种疾病。

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测及临床意义

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测及临床意义 一、ANCA概念及分类 抗中性粒细胞胞浆抗体是一种以中性粒细胞和单核细胞胞浆成份为靶抗原的自身抗体,对系统性血管炎炎症性肠病等多种疾病的诊断和鉴别诊断具有重要的意义,已成为自身免疫性疾病的一项非常重要的常规检测项目。 目前,已经有十余种中性粒细胞胞浆成分被证实为ANCA的靶抗原,蛋白酶3(PR3),髓过氧化物酶(MPO),人白细胞弹性蛋白酶(H EL),乳铁蛋白(LF),组织蛋白酶G(Cath G),杀菌/通透性增强蛋白(BPI),人溶酶体相关膜蛋白2 (H-LAMP2),溶菌素(LYS),天青杀素,防御素,烯醇化酶,葡萄糖醛酸酶。 根据乙醇固定的中性粒细胞基质片中,可以区分两种不同的荧光模型: 一种胞浆型(c-ANCA),是均匀分布在整个中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光,细胞核无荧光。在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中,其荧光模型表现相同。其主要的靶抗原是蛋白酶3(PR3)。 另一种是核周型(p-ANCA),是围绕中性粒细胞细胞核周围的平滑带状荧光。由多种抗原引起,主要靶抗原是髓过氧化物酶(MPO),人白细胞弹性蛋白酶(HEL),乳铁蛋白(LF),组织蛋白酶G(Cath G),杀菌/通透性增强蛋白(BPI),人溶酶体相关膜蛋白2 (H-LAMP2),溶菌素(LYS)等。不同抗体在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中,其荧光模型表现有所不同。抗MPO抗体产生的p-ANCA因耐甲醛,其荧光模型与在乙醇固定的中性粒细胞中出现的c-ANCA类似故叫甲醛抗性的p-ANCA。而其他非MPO抗体不与甲醛固定的中性粒细胞反应,无荧光表现,这种类型又称为甲醛敏感的p-ANCA。故根据乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片表现,可初步判定ANCA的靶抗原PR3,MPO,非M PO三类。 二、ANCA的检测 间接荧光免疫方法是检测ANCA的参考方法或者标准方法,至今也是最常用的经典方法。IIF是区分c-ANCA和p-ANCA的基础,有较高敏感性,可半定量,但IIF测定的是总ANCA,不能准确区分靶抗原,需特异性的检测方法作为补充。 由于多种免疫性疾病患者存在ANA,用IIF法检测ANCA时,会产生干扰实验结果的判断。为避免干扰现象,采用了四基质联合的检测即:乙醇固定的粒细胞;甲醛固定的粒细胞;Hep-2(人喉癌细胞)细胞;猴肝细胞。基质片各细胞分布及意义如表一所述。ANCA 荧光模型及表现如表二所述。 三、注意事项 为提高对疾病诊断的特异性,检测时应注意以下问题 1、检测ANCA,一般建议同时做IIF初筛和确认实验,以提高ANCA的临床应用价值,不做单独初筛或单独确认实验,以免降低对疾病诊断的特异性。 2、不能仅检测抗PR3和MPO两种特异性抗体,而不检测,这样容易限制ANCA对疾病诊断的特异性。 3、用IIF检测时,仅使用乙醇固定的粒细胞片,这样不能严格排除ANA的干扰,容易出现假阳性。 四、临床意义 (一)ANCA与原发性小血管炎 韦格纳肉芽肿(WG),显微多动脉炎(MPA),坏死性新月体性肾小球肾炎(NCGN)和变应性肉芽肿性血管炎(CSS)等等原发性系统性小血管炎的发病与ANCA密切相关,临床上已将上述疾病统称为ANCA相关小血管炎。ANCA,特异性PR3抗体和抗MPO抗体的检测已成为原发性小血管炎的敏感特异的血清学检测项目。 1、抗PR3抗体 特异性PR3抗体为WG的标志性抗体,抗PR3抗体荧光模型以c-ANCA为主。但以c-ANCA诊断WG特异性为90%,而以抗PR3抗体的特异性可超过95%。抗PR3抗体在其他的原发性血管炎中业可以检测出来,但阳性率较低。 抗PR3抗体敏感度与疾病的活动性及病程有关,在疾病的早期症状不明显时,就可出现阳性。因而抗PR3抗体常作为WG的早期诊断、疗效判断、复发估计的指标,对临床治疗有重要的参考价值。 2、抗MPO抗体 抗MPO抗体荧光模型以p-ANCA为主,主要与MPA、NCGN、CSS相关。还可见于其他疾病,如节结性多动脉炎,抗肾小球基底膜肾病,WG,SLE,RA,药物诱导的狼疮,Felty综合症等。抗体滴度与疾病活动性相关,可用于早期诊断、疗效判断、复发估计的指标,对临床治疗有重要的参考价值。

实验室血清学常用检测方法

常用血清学检测方法介绍 一、酶联免疫吸附试验诊断技术 目前,该项技术已在兽医学上得到广泛的应用,大多数动物传染病都已经研制成 ELISA检测方法。 1、酶联免疫吸附试验的原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的 抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应o用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。 再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相矢,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 2、ELISA的类型根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。用于动物疫病检测的ELISA主要有以下几种类型: ①?双抗体夹心法测抗原 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质、微生物病原体第二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。例如猪瘟病毒检测ELISA、禽流感病毒抗原捕获ELISA,就是根据这种原理设计的。 ②?双抗原夹心法测抗体 反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。乙肝HBs的检测 常采用本法。本法尖键在于酶标抗原的制备,需要根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法。 此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于于间接法。此外,该方法不受被检动物种属差异的限制。 ③?间接法测抗体

免疫球蛋白A测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求baiding

免疫球蛋白A测定试剂盒(免疫比浊法) 适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中免疫球蛋白A的含量。 1.1 包装规格 1×40mL 1×50mL 1×36mL 4×60mL 12×60mL 4×80mL 8×80mL 2×50mL (2×200tests) 36×4.5mL (400tests) 校准品(单水平,选配):1×1mL 产品组成: 成分浓度 试剂咪唑缓冲液,pH7.5 0.1mol/L 羊抗人IgA抗体≥1mg/L 防腐剂0.95g/L 校准品(单水平, 选配)人血清基质免疫球蛋白A 靶值范围5.5g/L -6.5g/L, 靶值批特异,详见瓶标签 2.1 外观 2.1.1 试剂为无色透明液体,无混浊,无未溶解物。 2.1.2 校准品为无色透明液体,无混浊,无未溶解物。

2.1.3 标签内容清晰,字迹牢固不易脱落。 2.2 试剂装量 液体试剂的净含量不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 A≤0.10(光径1.0cm,340nm±20nm 波长)。 2.4 分析灵敏度 测定0.50g/L样本,吸光度变化在0.02~0.20范围内。 2.5 线性区间 2.5.1 [0.037,6.50]g/L。在规定的线性范围内,测定值与样本浓度值的相关系数(r)应不低于0.990。 2.5.2[0.037,0.5]g/L范围内,线性绝对偏差应不超过±0.05g/L; (0.50,6.50]g/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。 2.6 精密度 2.6.1 重复性 变异系数CV≤6.0%。 2.6.2 批间差 批间相对极差≤8.0%。 2.7 准确度 相对偏差在±10%范围内(测定国际参考物质ERM-DA470k(IFCC))。 2.8 稳定性 原装试剂2℃~8℃保存,有效期12个月,有效期满后2个月内测定结果应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、和2.7要求。

免疫球蛋白的结构

第一节免疫球蛋白的结构(The Structure of Immunoglobulin) B淋巴细胞在抗原刺激下增殖分化为浆细胞,产生能与相应抗原发生特异性结合的免疫蛋白,这类免疫球蛋白被称为抗体(antibody, Ab)。 1937年,Tiselius用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等组分,其后又证明抗体的活性部分是在γ球蛋白部分。因此,相当长一段时间内,抗体又被称为γ球蛋白(丙种球蛋白)。 实际上,抗体的活性除γ球蛋白外,还存在于α和β球蛋白处。1968年和1972年的两次国际会议上,将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统一命名为免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。 Ig是化学结构的概念,它包括正常的抗体球蛋白和一些未证实抗体活性的免疫球蛋白,如骨髓瘤病人血清中的M蛋白及尿中的本周氏(Bence Jones, BJ)蛋白等。 免疫球蛋白可分为分泌型(secreted Ig,SIg)和膜型(membrane Ig, mIg)。前者主要存在于血清及其他体液或外分泌液中,具有抗体的各种功能;后者是B细胞表面的抗原识别受体。 ☆☆相关素材☆☆ 图片正常人血清电泳分离图 一免疫球蛋白的基本结构 The basical structure of immunoglobulin 免疫球蛋白分子是由两条相同的重链(heavy chain,H链)和两条相同的轻链(light chain,L链)通过链间二硫键连接而成的四肽链结构。 X射线晶体结构分析发现,IgG分子由3个相同大小的节段组成,位于上端的两个臂由易弯曲的铰链区(hinge region)连接到主干上形成一个"Y"形分子,称为Ig分子的单体,是构成免疫球蛋白分子的基本单位。

血清免疫球蛋白测定.docx

血清免疫球蛋白测定 B-淋巴细胞受抗原刺激后,引起一系列细胞形态与生化特性变化,转化为淋巴母细胞并增生繁殖,最后演化为浆细胞,合成免疫球蛋白。免疫球蛋白普遍存在于生物体的血液、体液、外分泌液及某些细胞(如淋巴细胞)的细胞膜上。免疫球蛋白是一组具有抗体特性的球蛋白,其分子量很大,含有1000个以上的氨基酸分子,均由其共同抗原的两个相同的轻链(L链)和具有特异性抗原的两个不同的重链(H链)组成。 1分类 根据重链的氨基酸组成不同,免疫球蛋白可分为分五类:免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)。 1.1IgG IgG是人体的主要免疫球蛋白,也是唯一能通达胎盘的免疫球蛋白。根据IgG的重链氨基酸顺序的差别,可分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4各亚类。IgG是主要抗感染抗体,对各种细菌、病DU有抗体活性,并有激活补体的作用。 1.2IgA IgA是分泌液中主要抗体,可分为IgA1和IgA2两个亚类。存在于血清中的称血清型IgA,存在于泪液、乳汁、胃肠道、呼吸道和泌尿生殖道分泌液中的称分泌型IgA,对局部粘膜有抗菌和抗病DU作用。

1.3IgM IgM可分为IgM1和IgM2两个亚类。是抗原刺激最先产生的免疫球蛋白,有较强的固定补体、溶解细菌及细胞的能力。IgM是抗革兰氏阴性菌和异体红细胞的主要抗体,也是存在于B淋巴细胞表面的主要免疫球蛋白。 1.4IgD 其作用与过敏反应有关。据报道,IgD可对某些抗原起反应,如青霉素、胰岛素、核抗原、甲状腺抗原等。它存在于B淋巴细胞表面,构成早期的膜受体,具有识别抗原,制动B淋巴细胞的分化作用。 1.5IgE 与I型变态反应有关,具有亲细胞特性。IgE通过Fc段与肥大细胞、嗜碱粒细胞上的Fc受体结合,故属亲同种细胞性抗体。当机体再次接触同种抗原后,过敏原即与结合在细胞表面的IgE作用,使细胞释放介质,引起平滑肌痉挛,血管通透性增加等过敏反应,还具有抗寄生虫感染作用。 2正常参考值 IgG:8~16g/L,IgA:1~4g/L,IgM:0.5~1.9g/L,IgD:0.01~0.4g/L,IgE:0.001~0.009g/L。 3临床意义 3.1血清免疫球蛋白降低 血清免疫球蛋白水平取决于免疫球蛋白合成和分解代谢的速率以及由体内丢失的程度。血清免疫球蛋白降低可由于合成不足,丢失

猪蓝耳病

猪蓝耳病 1 病原学 2 流行病学 3 致病机理 4 临床症状 5 病理变化 6 流行现状 7 诊断 8 综合防治 9 综合防治重点难点解析 参考文献 猪蓝耳病,学名猪繁殖与呼吸障碍综合症(Porcine Reproductiv and Respiratory Syndrome, PRRS)。由于该病发病猪有耳朵变蓝症状,故俗称为猪蓝耳病。其致病病原,为猪蓝耳病病毒(Porcine Reproductiv and Respiratory Syndrome Virus, PRRSV)。 鉴于目前国内已将高致病性猪蓝耳病分类为一种新猪病,以下为叙述方便,将高致病性猪蓝耳病(Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome)简称为HP-PRRS,高致病性猪蓝耳病病毒简称为HP-PRRSV。相应地,将经典或低致病性猪蓝耳病(Lowly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome)简称为LP-PRRS,经典猪或低致病性猪蓝耳病病毒简称为LP-PRRSV。 越来越多的猪场生产实践证明:随着免疫效果确切的PRRS弱毒苗研制成功并被批准在生产上应用,PRRS(包括HP-PRRS和LP-PRRS)已经完全可以通过疫苗免疫的方法进行预防和控制,PRRS可治可防。 然而,由于不少养猪生产者对PRRS的一些特异性病原学和流行病学特征认识不足,生产上在对PRRS作疫苗免疫时经常会出现一些意想不到的问题,加以一些热衷于炒作“高科技”的厂商乃至学者们把PRRSV基因序列变异问题“妖魔化”,使很多人都错误地认为PRRS是一种无法通过疫苗免疫进行有效预防的猪病,对于猪场蔓延不断的PRRS,简单地采取一些抗生素、中草药或免疫增强剂保守疗法被动应对。面对每天因PRRSV感染带来的大量发病和死亡,徒唤奈何! 1 病原学 PRRSV为一种正链小RNA囊膜病毒,直径50~65nm。基因组长约15kb,共含有6个(或7个)结构蛋白,其中三个主要的结构蛋白,分别为GP5, M和N。N蛋

##(已经打印)分泌型免疫球蛋白A的研究进展

分泌型免疫球蛋白A的研究进展 张宝中1,2,冉多良2,童贻刚1 1.军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京100071; 2.新疆农业大学动物医学学院,新疆乌鲁木齐830052 [摘要]大部分感染都起源于黏膜表面,而黏膜免疫的主要抗体是分泌型免疫球蛋白A(SIgA),它能有效地阻断病原体的感染和侵入。SIgA是由1个IgA二聚体、1条J链和1个分泌片(SC)共价结合构成的异源十聚体。IgA和J链由活化B细胞产生,SC则由黏膜上皮细胞合成。SIgA分子具有极高的稳定性和极强的抗微生物活性。我们就SIgA合成的相关机制、IgA 单体和SIgA的结构与功能,以及重组SIgA的研究进展简要综述。 [关键词]分泌型免疫球蛋白A;多聚免疫球蛋白受体;重组分泌型免疫球蛋白A [中图分类号]R392.1[文献标识码]A[文章编号]1009-0002(2009)02-0263-03 Advances in Research on Secretory Immunoglobulin A ZHANG Bao-Zhong1,2,RAN Duo-Liang2,TONG Yi-Gang1 1.State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity,Institute of Microbiology and Epidemiology,Academy of Military Med-ical Sciences,Beijing100071;2.College of Veterinary Science,Xinjiang Agricultural University,Urumqi,830052;China [Abstract]The majority of infections origin from the mucous membrane surface.The mucosa immunity mainly relies on secretory immunoglobulin A(SIgA),which blocks infection and invasion of the pathogens effectively.SIgA is composed of an IgA dimer,a J chain and a secretory component(SC),which forms a hetero-decamer by covalent interactions.IgA and J chain are produced by activated B cells,while SC is synthesized by mucous membrane epithelial cells.SIgA molecules are extremely stable and have very high anti-microbe activity.In this review we summarized the SIgA synthesis related mechanism,structure and functions of IgA monomer and SIgA,as well as the advances in recombinant SIgA. [Key words]secretory immunoglobulin A(SIgA);poly immunoglobulin receptor;recombinant SIgA doi:10.3969/j.issn.1009-0002.2009.02.032综述 分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A,SIgA)是20世纪60年代初在外分泌液中发现的一种IgA抗体,主要存在于乳汁、胃肠液、呼吸道分泌液等外分泌液中。SIgA分子是由2个IgA单体(每个单体含2条轻链和2条重链)、1条J链和1条分泌片(secretory component,SC,为多聚免疫球蛋白受体的胞外裂解片段)构成的异源十聚体[1],为了与血清IgA单体相区别而被命名为SIgA。研究表明,SIgA是外分泌液中存在的一种主要抗体,是呼吸道、消化道、泌尿生殖道等抵御病原体及有害物质的第一道免疫防线,是机体黏膜免疫最重要的抗体[2-4]。 1分泌型IgA合成的相关机制 二聚体IgA(dIgA)或多聚体IgA(pIgA)从浆细胞分泌出来后,在上皮细胞的嗜碱性侧与多聚免疫球蛋白受体(poly im-munoglobulin receptor,pIgR)以共价健形成dIgA-pIgR或pIgA-pIgR复合物,然后通过内吞作用和转运被运输到黏膜外侧,此后完整的SIgA分子通过pIgR分裂(pIgR C端跨膜部分和胞内部分在黏膜上皮细胞内降解)释放出来。SIgA在保护机体免受黏膜表面的微生物侵袭方面起着非常重要的作用,其合成与抗原提呈、淋巴细胞归巢迁移(trafficking)及周围环境中的细胞因子均有很大关系[5]。在黏膜免疫诱导部位,抗原加工、提呈后,形成针对抗原的IgA型B细胞。在此过程中,B细胞的分化、增殖有赖T 细胞的帮助[6]。其中多种Th2样因子参与了诱导部位B细胞增殖、分化,相关因子包括TGF-β、IL-4等。前体B细胞在诱导部位内进行同种型转换(isotype switch),形成膜表面抗体IgA阳性的B细胞,同种型转换是形成IgA型浆细胞的关键之一。体外研究发现[7],在TGF-β作用下,B细胞基因重排,使Cα基因得以表达,从而使其转型为IgA型B细胞。但有研究证实IL-4的作用远高于TGF-β。在体内实验中[8],证实IL-4是调控B细胞在PP (潘氏结)内分化的主要因子,IL-4-/-小鼠失去合成IgA的功能,提示IL-4对于IgA的合成十分重要。 2SIgA的结构特征 IgA在分泌物中主要以二聚体形式存在,SIgA是由十肽组成的免疫球蛋白,来自2个不同的细胞系,沉降系数为11S,它包含2个单体的IgA、1条J链和1个分泌片,它们通过共价结合就形成所谓的SIgA。 [收稿日期]2008-08-06 [基金项目]国家自然科学基金(30872223) [作者简介]张宝中(1982-),男,硕士研究生 [通信作者]童贻刚,(E-mail)tongyg@hotmail.com

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的检测及临床意义教学提纲

抗中性粒细胞胞浆抗体(A N C A)的检测及临 床意义

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测及临床意义 ――间接荧光免疫(IIF)方法(欧盟) 一、ANCA概念及分类 抗中性粒细胞胞浆抗体是一种以中性粒细胞和单核细胞胞浆成份为靶抗原的自身抗体,对系统性血管炎炎症性肠病等多种疾病的诊断和鉴别诊断具有重要的意义,已成为自身免疫性疾病的一项非常重要的常规检测项目。 目前,已经有十余种中性粒细胞胞浆成分被证实为ANCA的靶抗原,蛋白酶3(PR3),髓过氧化物酶(MPO),人白细胞弹性蛋白酶(HEL),乳铁蛋白(LF),组织蛋白酶G(Cath G),杀菌/通透性增强蛋白(BPI),人溶酶体相关膜蛋白2 (H-LAMP2),溶菌素(LYS),天青杀素,防御素,烯醇化酶,葡萄糖醛酸酶。 根据乙醇固定的中性粒细胞基质片中,可以区分两种不同的荧光模型: 一种胞浆型(c-ANCA),是均匀分布在整个中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光,细胞核无荧光。在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中,其荧光模型表现相同。其主要的靶抗原是蛋白酶3(PR3)。 另一种是核周型(p-ANCA),是围绕中性粒细胞细胞核周围的平滑带状荧光。由多种抗原引起,主要靶抗原是髓过氧化物酶(MPO),人白细胞弹性蛋白酶(HEL),乳铁蛋白(LF),组织蛋白酶G(Cath G),杀菌/通透性增强蛋白(BPI),人溶酶体相关膜蛋白2 (H-LAMP2),溶菌素(LYS)等。不同抗体在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中,其荧光模型表现有所不同。抗MPO抗体产生的p-ANCA因耐甲醛,其荧光模型与在乙醇固定的中性粒细胞中出现的c-ANCA类似故叫甲醛抗性的p-ANCA。而其他非MPO抗体不与甲醛固定的中性粒细胞反应,无荧光表现,这种类型又称为甲醛敏感的p-ANCA。故根据乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片表现,可初步判定ANCA的靶抗原PR3,MPO,非MPO三类。

猪蓝耳病抗体检测卡

猪蓝耳病抗体检测卡 原理 猪蓝耳病抗体检测试剂盒(胶体金法),系采用国际最先进的胶体金免疫层析技术检测样本(全血、血清、血浆)中抗猪蓝耳病抗体的方法。整个试验只需20分钟,操作简便、快速、准确,灵敏度高、结果直观、容易判定。本试剂盒内还设计一张“金标试纸与ELISA试验实物参照图”,用试纸检测线的颜色与实物参照图对照,便可粗略估计样品中抗体的滴度。 操作方法 ?在检测卡的加样孔内加入2滴(100ul)待检血清或血液样品。 ?将检测卡平放于桌面上,在室温下静置5-20分钟内判定结果。超过20分钟的结果只能作为参考。结果判定 ?阳性:在观察孔内,检测线区(T)及对照线区(C)同时出现紫红色线。猪蓝耳病抗体滴度越高,检测线(T)颜色越深。 ?弱阳性:在观察孔内,检测线区(T)及对照线区(C)同时出现紫红色线,但检测线区(T)出现的颜色很浅。 ?阴性:在观察孔内,只有对照线区(C)出现一条紫红色线。 ?失效:在观察孔内,对照线区(C)和检测线区(T)都不出现色线;或仅检测线区(T)出现色线。 诊断参考 1.如果该猪未接种过猪蓝耳病毒疫苗:

?当被检样品检测线(T)处无明显色带出现,说明被检测样品中没有猪蓝耳病毒抗体。如果猪群健康,应当及时进行猪蓝耳病毒疫苗接种。 ?当被检样品检测线(T)处有明显色带出现,则该猪有可能为野毒感染,应进一步观察验证。2. 如果该猪已接种过猪蓝耳病毒疫苗: ?当被检样品检测线(T)条带的色泽≥对照卡中1:40效价时,说明猪蓝耳病毒抗体的滴度较高,已达到抵御强毒攻击的保护水平。 ?当被检样品检测线(T)条带的色泽<对照卡中1:40效价时,说明猪蓝耳病毒抗体效价未达到抵御猪蓝耳病毒强毒攻击的最低保护滴度,建议进行疫苗补种。 注意事项 铝箔袋打开后,检测卡应尽快使用;受潮后检测卡将失效。常温保存,保质期18个月。 特点 ?方便:肉眼判断、无需仪器、操作简单; ?快速:5-20分钟即可出结果,有利于疫情的快速鉴别和免疫水平监测; ?用途:适合于各级防检部门、猪场、兽医站广泛使用。

免疫球蛋白IgE

免疫球蛋白I g E This manuscript was revised on November 28, 2020

免疫球蛋白IgE 免疫球蛋白lgE(人体的一种抗体),存在于血中。是正常人血清中含量最少Ig,可以引起I型超敏反应 球蛋白偏高,与慢性肝病,机体免疫系统有关。人血浆内的免疫球蛋白大多数存在于丙种球蛋白(γ-球蛋白)中。可分为五类,即免疫球蛋白G (IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)。其中IgG是最主要的免疫球蛋白,约占人血浆丙种球蛋白的70%,分子量约15万,含糖2~3%。IgG分子由4条肽链组成。其中分子量为2.5万的肽链,称轻链,分子量为5万的肽链,称重链。轻链与重链之间通过二硫键(—S—S—)相连接。免疫球蛋白是机体受抗原(如病原体)刺激后产生的,其主要作用是与抗原起免疫反应,生成抗原-抗体复合物,从而阻断病原体对机体的危害,使病原体失去致病作用。另一方面,免疫球蛋白有时也有致病作用。在慢性乙肝患者,长期白、球比例倒置,警惕有肝硬化迹象免疫球蛋白Ig的医学定义是具有免疫功能或结构与抗体相似的球蛋白,其基本结构是:两条相同的重链和两条相同的轻链由链间二硫键连接而成。重链根据恒定区中氨基酸种类和排列顺序不同分为5种:α,γ,δ,ε,μ。分别对应5种含相应重链的免疫球蛋白:IgA,IgG,IgD,IgE,IgM。 血清免疫球蛋白E(IgE)又称为反应素,是血清中含量最少的一类免疫球蛋白,只占血清总量的0.001%。IgE测定用国际单位IU或ng表示, 1IU=2.4ng,相当于WHO标准冻干血清制剂0.00928内所含的IgE量。 IgE是正常人血清中含量最少的Ig,正常浓度是5×10的-5次方 mg/ml。正常人群IgE水平受环境、种族、遗传、年龄、检测方法及取样标准等因素的影响,各家各医院的正常值相差甚远。它是一种亲细胞抗体,与具有吞噬作用的肥大细胞,嗜中性粒细胞(可以吞噬被细菌,病毒等有害病原体感染的细胞)有很高的亲和力。因此可以介导Ⅰ型超敏反应,即我们平时所说的过敏反应。此外,IgE可能与抗寄生虫感染有关。 一般大于100-333IU/ml(ku/L)即大于250-800ng/ml(μg/L)即表现为增高,主要见于过敏性体质及过敏性疾病,如哮喘、过敏性鼻炎、荨麻疹等。

抗中性粒细胞胞浆抗体

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)最佳检测方案 同时采用间接免疫荧光法和靶抗原(尤其是PR3和MPO)明确的酶联免疫法检测抗中性粒细胞胞浆自身抗体可以获得更高的诊断灵敏度。但是基于成本和最优化选择因素的考虑,可以首先单独采用免疫荧光法进行检测,然后对阳性结果再进行特异性ELISA法检测。 乙醇固定的人中性粒胞是间接免疫荧光法检测ANCA的标准基质。该基质可区分出两种荧光模型:与Wegener,s肉芽肿相关的胞浆型(cA NCA)和对多种疾病有提示作用的核周型(pANCA)。pANCA与抗核抗体(ANA)常常难以区分,因此,另外增加了Hep-2细胞基质(可能有粒细胞沉积)。灵长类肝脏基质的作用:肝细胞核和血窦中的中性粒细胞处于同一视野中,如果同时存在ANA和pANCA,中性粒细胞的荧光强度比肝细胞核更强。 欧蒙生物薄片技术可以将所有实验基质整合在同一反应区,所以不需要在另一张载片上平行温育人上皮细胞以排除抗核抗体的干扰。第四种生物薄片是甲醛固定的中性粒细胞,主要用于检测具有诊断价值的髓过氧化物酶,而其它pANCA(尤其对胃肠疾病较为重要)和几乎所有的抗核抗体则完全被抑制。 欧蒙推荐间接免疫荧光法的起始稀释度为1:10,但检测不到一些低滴度抗体(主要是抗PR3抗体)。因此Wegener,s患者采用间接免疫荧光法的检出率为80%-90%(cANCA),94%的cANCA阳性病例可通过最新抗PR3-hn-hr ELISA得到确证(传统抗PR3 ELISA为79%)。许多Wegener ,s患者在检查时并无该疾病征兆或其临床活动性很低。但多数情况下这些结果对此类患者并没有治疗意义,因此在常规实验室诊断中采用上述经济适用的方案较为合适。但是如果临床症状和实验室检查结果不符时,建议同时开展所有可能检测方法。 ANA:抗核抗体;BPI:杀菌/通透性增强蛋白;cANCA:抗中性粒细胞胞浆抗体胞浆型;CD:克罗恩病;CSS:Churg-Strauss综合征;EL:弹性蛋白酶;EOH:乙醇;HCHO:甲醛;HEp-2:人上皮细胞;IFT:免疫荧光检测法;LF:乳铁蛋白;MPA:显微多动脉炎;MPO:髓过氧化物酶;PAN:结节性多动脉炎;pANCA:抗中性粒细胞胞浆抗体核周型;PR3:蛋白酶3;PSC:原发性硬化性胆管炎;RA:类风湿性关节炎;SLA:系统性红斑狼疮;UC:溃疡性结肠炎;WG:Wegener ,s肉芽肿。

血清免疫球蛋白测定(一)

血清免疫球蛋白测定(一) B-淋巴细胞受抗原刺激后,引起一系列细胞形态与生化特性变化,转化为淋巴母细胞并增生繁殖,最后演化为浆细胞,合成免疫球蛋白。免疫球蛋白普遍存在于生物体的血液、体液、外分泌液及某些细胞(如淋巴细胞)的细胞膜上。免疫球蛋白是一组具有抗体特性的球蛋白,其分子量很大,含有1000个以上的氨基酸分子,均由其共同抗原的两个相同的轻链(L链)和具有特异性抗原的两个不同的重链(H链)组成。 1分类 根据重链的氨基酸组成不同,免疫球蛋白可分为分五类:免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)。 1.1IgG IgG是人体的主要免疫球蛋白,也是唯一能通达胎盘的免疫球蛋白。根据IgG的重链氨基酸顺序的差别,可分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4各亚类。IgG是主要抗感染抗体,对各种细菌、病毒有抗体活性,并有激活补体的作用。 1.2IgA IgA是分泌液中主要抗体,可分为IgA1和IgA2两个亚类。存在于血清中的称血清型IgA,存在于泪液、乳汁、胃肠道、呼吸道和泌尿生殖道分泌液中的称分泌型IgA,对局部粘膜有抗菌和抗病毒作用。 1.3IgM IgM可分为IgM1和IgM2两个亚类。是抗原刺激最先产生的免疫球蛋白,有较强的固定补体、溶解细菌及细胞的能力。IgM是抗革兰氏阴性菌和异体红细胞的主要抗体,也是存在于B淋巴细胞表面的主要免疫球蛋白。 1.4IgD 其作用与过敏反应有关。据报道,IgD可对某些抗原起反应,如青霉素、胰岛素、核抗原、甲状腺抗原等。它存在于B淋巴细胞表面,构成早期的膜受体,具有识别抗原,制动B淋巴细胞的分化作用。 1.5IgE 与I型变态反应有关,具有亲细胞特性。IgE通过Fc段与肥大细胞、嗜碱粒细胞上的Fc受体结合,故属亲同种细胞性抗体。当机体再次接触同种抗原后,过敏原即与结合在细胞表面的IgE作用,使细胞释放介质,引起平滑肌痉挛,血管通透性增加等过敏反应,还具有抗寄生虫感染作用。 2正常参考值 IgG:8~16g/L,IgA:1~4g/L,IgM:0.5~1.9g/L,IgD:0.01~0.4g/L,IgE:0.001~0.009g/L。3临床意义 3.1血清免疫球蛋白降低 血清免疫球蛋白水平取决于免疫球蛋白合成和分解代谢的速率以及由体内丢失的程度。血清免疫球蛋白降低可由于合成不足,丢失增多和分解加快引起。合成不足:血清免疫球蛋白降低可由于原发性或继发性合成缺陷所致。原发性免疫缺陷病有性联先天性丙种球蛋白缺乏症、婴儿暂时性丙种球蛋白低下症、伴IgM升高的性联低丙种球蛋白血症、选择性IgA缺乏症、选择性IgM缺乏症、选择性IgG亚类缺乏症等。继发性免疫缺陷病有慢性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症和恶性肿瘤等。丢失增多:从胃肠道丢失的见于溃疡性结肠炎、消化道癌肿、吸收不良综合征、淋巴瘤、肠淋巴管扩张症。从皮肤丢失的有急性灼伤、特异反应性皮炎。从浆膜腔丢失的有胸膜炎、腹膜炎、反复抽胸腹水。从肾脏丢失的有肾小球肾炎(微小病变型、膜性、增殖性)、肾静脉血栓形成、SLE和淋巴瘤。主要是由于蛋白从尿中丢失或毒素抑制免疫球蛋白合成,后者首先影响IgM,其次影响IgA,然后再影响IgG。分

猪蓝耳病

猪高致病性蓝耳病 (张华)

病原 ?猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒为单股正链RNA病毒,属套式病毒目,动脉炎病毒科,动脉炎病毒属。病毒为圆形,直径为50~60nm,含有20~35nm的核衣壳,在氯化铯中浮密度为1.19g/cm3;有囊膜,对乙醚、氯仿敏感;病毒基因组为单股正股RNA,分子量约1.5×106道尔顿。不凝集鸡、哺乳动物和人的O型红细胞。有严格的宿主专一性,对巨噬细胞有专嗜性。病毒的增殖具有抗体依赖性增强作用,好在中和抗体水平存在的情况下,在细胞上的复制能力反而得到增强。该病毒在外界环境中的抵抗力相对较弱,对高温敏感。在深冻组织中病毒可存活数年,但在4℃仅存活1个月,37℃存活18h,56℃存活15min以内。在pH6.0时稳定,在pH5.0以下和pH7.0以上均易失活,将肉尸保存于4℃18h仍能发现其中有活病毒。

流行病学 ?本病是一种高度接触性传染病,呈地方流行性。 PRRSV只感染猪,各种品种、不同年龄和用途的猪均可感染,但以妊娠母猪和1月龄以内的仔猪最易感。患病猪和带毒猪是本病的重要传染源。主要传播途径是接触感染、空气传播和精液传播,也可通过胎盘垂直传播。易感猪可经口、鼻腔、肌肉、腹腔、静脉及子宫内接种等多种途径而感染病毒,猪感染病毒后2~14周均可通过接触将病毒传播给其他易感猪。从病猪的鼻腔、粪便及尿中均可检测到病毒。易感猪与带毒猪直接接触或与污染有 PRRSV的运输工具、器械接触均可受到感染。感染猪的流动也是本病的重要传播方式。 ?持续性感染是PRRS流行病学的重要特征,PRRSV可在感染猪体内存在很长时间。

发病机理 ?PRRSV可通过血液循环穿过胎盘使胎猪受到感染,从而引起妊娠后期母猪流产等繁殖障碍。 临诊症状 ?本病的潜伏期差异较大,引入感染后易感猪群发生PRRS的潜伏期,最短为3天,最长为37天。本病的临诊症状变化很大,且受病毒株、免疫状态及饲养管理因素和环境条件的影响。低毒株可引起猪群无临诊症状的流行,而强毒株能够引起严重的临诊疾病,临诊上可分为急性型、慢性型、亚临诊型等。

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