生物物质分离

生物物质分离

一、名词解释

1. 盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，

使原溶解的物质沉淀析出的分离技术•

2. 亲和层析：是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。

3. 萃取：利用溶质在互不相溶的两相中溶解度（或分配系数）的不同而使溶质得到纯化或浓缩的技术。

2.预处理及固液分离

（1 ）发酵液预处理的目的是什么？主要有那几种方法？

目的：

1）改变发酵液的物理性质，提高从悬浮液中固形物沉降的速率；

2）尽可能使产物转入便于后处理的某一相中（多数是液相），

3）去处发酵液中部分杂质，以便后续工序的顺利进行。

方法：①加热法：②调节悬浮液的pH值,；③凝聚和絮凝；④使用惰性助滤剂。

2、绘制结晶过程中饱和曲线和过饱和曲线图，并简述其意义。

结晶过程中的饱和温度曲线和不饱和温度曲线的简图如下图所示：

S-S曲线为饱和温度曲线，在其下方为稳定区，在该区域溶液为不饱和溶液，不会自发

结晶；

T-T曲线为过饱和温度曲线，在其上方为不稳定区，能够自发形成结晶；

S-S曲线和T-T曲线之间为亚稳区，在该区域，溶液为过饱和溶液，但若无晶种存在，也不能自发形成晶体。

二、填空题

1、高效液相色谱分离方法中，液-液色谱是以_液体_作为流动相；以_固定在固

相载体表面的液体_______ 作为固定相。

2、完整的萃取操作过程一共分三个步骤，分别为萃取，洗涤和反萃取

3、离子交换树脂的组成：载体，活性基团和可交换离子。

4、根据分离机理的不同，色谱法可分为吸附色谱，分配色谱，离子交换色谱，凝胶色谱。

5、双相电泳中，第一相是

6、物料中所含水分可分等电凝胶；第二相是凝胶电泳。

化学结合水，物理结合水，机械结合水三种；

7、电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是—引发剂________________ ;甲叉双丙

烯酰胺的作用是交联剂__________ ；TEMED勺作用是_增速剂____________ 。

9、简单地说，离子交换过程实际上只有_外部扩散，内部扩散，化学交换反应_三个步

骤。

10、电泳过程中，加入溴酚兰的目的是_指示蛋白的迁移位置_。

11、吸附剂按孔道结构区分—多孔型___________ 介质和—凝胶—介质。

12、常用的工业起晶方法：自然起晶法、刺激起晶、晶种起晶法

三、名词解释题

凝聚：添加盐类破坏细胞双电层，导致细胞聚集絮凝：添加絮凝剂在细胞间形成桥架作用。

超临界流体萃取：当一种流体处于其临界点的温度和压力之下，则称之为超临界流体。使用

超临界流体作为萃取剂的萃取方法。

膜分离：利用具有一定选择性透过特性的过滤介质进行物质的分离纯化。

包含体：外源基因在基因工程菌中高水平表达时，通常会形成不溶性、无活性的蛋白聚集体。

凝胶过滤色谱（Gle filtration chromatography ）:利用凝胶粒子作为固定相是根据料液中溶质相对分子质量的差别进行分离的液相色谱法

1发酵液常用的固液分离方法有（离心）和（过滤）等。

2•常用的蛋白质沉析方法有（等电点沉淀），（盐析）和（有机溶剂沉淀）。

3•阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为（强酸型），（弱酸型）和（中等强度）；其典

型的活性基团分别有（磺酸基团），（羧基），（磷酸基）。

4. 过饱和溶液的形成方式有：（饱和溶液冷却），（部分溶剂蒸发），（化学反应结晶法）和（解析法）。

5. 蛋白质分离常用的色谱法有（凝胶色谱法），（多糖基离子交换色谱法），（高效液相色谱法）和（亲和色谱法）。

6. 为使过滤进行的顺利通常要加入（惰性助滤剂）。

7. 离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有（pH 梯度）和（离子强度（盐）梯度）。

&阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为（强碱型），（弱碱型）和（中等强度）；其典

型的活性基团分别有（季氨基）、（伯、仲、叔氨）、（强弱基团都具备）。

9. 多糖基离子交换剂包括（葡聚糖离子交换剂）和（离子交换纤维素）两大类。

10. 离子交换树脂由（载体），（活性基团）和（可交换离子）组成。

11. 常用的化学细胞破碎方法有（渗透冲击），（酶消化法），（增溶法），（脂溶法）和（碱处理法）。

12. DEAE Sepharose是（阴）离子交换树脂，其活性基团是（二乙基氨基乙基）。

13. 影响离子交换选择性的因素有（离子化合价）

，（离子水化半径），（溶液浓度），（离子强度），（溶液的pH值），（有机溶剂），（树脂物理结构）和（辅助力）。

14. CM Sepharose是（阳）离子交换树脂，其活性基团是（羧甲基）

15. 工业离心设备从形式上可分为（管式），（套筒式），（碟片式），等型式。

16. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为（微滤膜），（超滤膜），（纳滤膜）和（反渗透膜）。

17. 工业上常用的超滤装置有（板式），（管式），（螺旋卷式）和（中空纤维式）。

18. 影响吸附的主要因素有（吸附剂的性质）,（吸附质的性质），（温度），（溶液pH 值），（盐浓度）和（吸附物浓度和吸附剂用量）。

19. 影响盐析的因素有（溶质种类），（溶质浓度），（pH值）和（温度）。

20. 在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有（自然起晶法）,（刺激起晶法）和（晶种

起晶法）。

21. 简单地说，离子交换过程实际上只有（外部扩散），（内部扩散）和（化学交换反应）三步；

22. 在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式为（Q=

q°C/（ k+C））；

23. 反相高效液相色谱的固定相是（非极性）的，而流动相是（极性）的；常用的固定相

有（C8）和（C8）；常用的流动相有（甲醇）和（乙睛）。

24. 超临界流体的特点是与气体有相似的（粘度（扩散系数）），与液体有相似的（密度）。

25. 离子交换树脂的合成方法有（共聚（加聚））和（均聚（缩聚））两大类；

26. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其（等电点（pl））的不同；

27. 晶体质量主要指（晶体大小），（晶体性状）和（晶体纯度）三个方面；

28. 根据分离机理的不同，色谱法可分为（吸附色谱），（离子交换色谱），（凝胶色谱），（分配

色谱）和（亲和色谱）。

29. 典型的工业过滤设备有（板框压滤机）和（真空转鼓过滤机）。

30. 常用离心设备可分为（离心沉降）和（离心过滤）两大类；

31. 根据物化理论，萃取达到平衡时，溶质在萃取相和萃余相中的（浓度的比值）一定；

32. 根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为（物理）、（化学）、

（极性）和（交换）吸附；

33. 离子交换操作一般分为（动态）和（静态）两种；

34. 蛋白质等生物大分子，在溶液中呈稳定的分散状态，其原因是由于（分子表面电荷）

和（水化层）；

35. 盐析用盐的选择需考虑（盐析作用强）、（溶解度大）、（生物学惰性）和（来源丰富、经济）等几个方面的因素；

36. 影响有机溶剂沉淀的因素有（温度）、（pH）、（样品浓度）、（中性盐浓度）和（金属离子）。

37. 结晶包括三个过程（过饱和溶液的形成）、（晶核的形成）和（晶体的生长）。

38. 过饱和溶液的形成方法有（饱和溶液冷却）、（部分溶剂蒸发）、（解析）和（化学反应结

晶）。

39. 物料中所含水分可分为（结合水）和（非结合水）三种；

40. 根据干燥曲线，物料干燥可分为（恒速干燥阶段）和（降速干燥阶段）两个阶段；

41. 液-液萃取从机理上分析可分为（物理萃取）和（化学萃取）两类；

42. 大孔网状吸附剂有（非极性）、（中等极性）和（极性）三种主要类型；

43. 影响离子交换速度的因素有（树脂粒度）、（交联度）、（溶液流速）、（温度）、（离子的大

小）、（离子的化合价）和（离子浓度）。

44. 分配色谱的基本构成要素有（载体）、（固定相）和（流动相）。

45. 分子筛色谱也称（凝胶色谱）的主要应用是（脱盐）和（分级分离）

46. 根据膜结构的不同，常用的膜可分为（对称性膜）、（非对称膜）和（复合膜）三类；

47. 固体可分为（结晶）和（无定型）两种状态；

48. 结晶的前提是（过饱和溶液的形成）；结晶的推动力是（溶液的过饱和度）；

49. 根据晶体生长扩散学说，晶体的生长包括（溶质借扩散作用从溶液中转移到晶体的表面）、

（溶质长入晶面放出结晶热）和（结晶热传递回到溶液中）三个过程；

50. 影响晶体生长速度的主要因素有（杂质）、（搅拌）、（过饱和度）和（温度）。