肺炎衣原体IgM说明书
肺炎衣原体感染疾病详解
疾病名：肺炎衣原体感染英文名：chlamydia pneumonia infection缩写：别名：衣原体肺炎感染疾病代码：ICD：A74.8概述：肺炎衣原体感染(chlamydia pneumonia infection)是由肺炎衣原体引起的感染性疾病，主要引起成人及青少年的非典型肺炎，亦可引起支气管炎、咽炎及扁桃体炎等急性呼吸道感染，据统计在引起肺炎的病因中，是继肺炎球菌、流感嗜血杆菌之后引起社区获得性肺炎的第三位主要病原体。
美国报告每年发病约30 万例，而鹦鹉热衣原体引起的肺炎仅约 150 例。
香港亦有类似报告，在呼吸系统感染的患者中，检测血清肺炎衣原体抗体阳性率为 54.8%，严重感染者为24.8%，抗体效价多≥1∶256，而鹦鹉热衣原体抗体之阳性率仅为0.9%，且多为非近期感染。
此外亦发现肺炎衣原体感染与冠心病、心肌梗死及扩张型心肌病等心血管疾病及脑血管疾病等的发生明显相关。
流行病学：1.传染源为患者及无症状病原携带者，后者数量多且不易察觉，故在本病传播上更重要。
2.传播途径经呼吸道传播。
3.人群易感性及免疫力人群普遍易感，隐性感染率高，儿童血清抗肺炎衣原体 IgG 抗体阳性率较低大约10%，10 岁以后迅速上升，且持续多年，许多国家统计成人半数以上血清中可检出抗-肺炎衣原体 IgG 抗体，其阳性率男性高于女性，亦可有健康病原携带者。
但感染后免疫力差，抗体滴度可迅速下降，以后再次感染又出现高滴度抗体，故认为本病不仅感染十分普遍，且再感染及反复发作相当常见。
4.流行特征本病的发生及流行，热带国家地区高于北部发达国家，有的地区 5～14 岁年龄组发病率高于成年人。
发病可有散发和流行交替出现的周期性，散发发病3～4 年后，可有2～3 年的流行期，此间可发生短期暴发。
本病可在家庭、学校或军队中流行，在美国、英国、芬兰、挪威、丹麦及瑞典等国家均有本病流行或暴发流行的报导。
我国 1963 年即有此病原体感染。
肺炎衣原体MOMP抗体IgG检测试剂盒胶体金法作业指导书
肺炎衣原体MOMP抗体IgG检测试剂盒胶体金法作业指导书1 目的建立肺炎衣原体MOMP抗体IgG检测试剂盒（胶体金法）作业指导书，确保生产过程处于受控状态。
2 范围适用于肺炎衣原体MOMP抗体IgG检测试剂盒（胶体金法）相关工序的操作者。
3 职责3.1 操作人员应严格执行本作业指导书。
3.2 生产主管负责监督检查。
3.3 质检部质检员负责抽查执行情况。
4 工作内容4.1 生产工艺流程图※★注：※ 关键过程 ★ 特殊过程4.2 作业内容4.2.1 胶体金制备（柠檬酸三钠还原法）氯金酸（HAuCl4）水溶液放入三角瓶内加热至沸腾→加热柠檬酸三钠溶液→混匀，搅拌煮沸10至15分钟→待胶体金溶液颜色由蓝→紫→红，冷却即可。
4.2.2 金标抗体（反应膜）制备以0.1M碳酸钾溶液调胶体金溶液pH8.0-9.0→加入抗人IgG单抗，15分钟后加入聚乙二醇→离心，调532nm测OD值5～10，方阵滴定法选定标记工作浓度→用无纺布浸湿胶体金溶液，干燥、平整，检测。
4.2.3 金标抗体反应膜质检将制备好的金标抗体反应膜按5‰比例抽检，与标准反应膜匹配组装成品，同时与标准成品作如下对照检测：a) 符合率：样品稀释液、阴性质控血清无假阳性，阳性质控血清均呈阳性；b) 反应强度：+/+++（阳性反应线/阴性反应线）；c) 反应时间：30s～5min。
确认合格后才能转入下一工序。
4.2.4 NC反应膜制备亲和性高分子硝酸纤维素膜→活化处理12小时→用水洗5次，每次20分钟→室温干燥后→取纯化Cpn重组MOPP抗原和兔鼠IgG抗体溶于10%CS中，浓度均为2mg/ml，用Cpn重组MOPP抗原在NC膜上包被肺炎衣原体抗体阳性检测线→用兔抗鼠IgG抗体在NC膜上包被对照线→干燥后，用BS液封闭，H2O 清洗后，室温干燥，备用。
4.2.5 NC反应膜质检4.2.5.1 常规图形模式检测：将制备好的反应膜按5‰比例抽检，与标准金标抗体反映膜匹配组装成品，同时与标准成品对照检测；观察阳性、阴性包被线及本底，要求图形规则程度均匀，无遗漏或重复包被。
肺炎支原体IgM说明书
肺炎支原体抗体（ IgM ）检测试剂盒（胶体金法）说明书【产品名称】肺炎支原体抗体（IgM ）检测试剂盒（胶体金法）【包装规格】40 人份 /盒或 20 人份 / 盒（详细规格见试剂盒包装标签）【预期用途】定性检测人血清中的肺炎支原体IgM 抗体，可用于支原体肺炎的协助诊疗。
【查验原理】本品应用间接法的胶体金标志免疫斑点渗滤原理，质控线采纳双抗夹心的胶体金标志免疫斑点渗滤原理。
该试剂盒里的斑点反响板上的微孔滤膜固相有肺炎支原体P1 蛋白抗原斑点，当待检测的血清中含有肺炎支原体IgM 抗体时，与微孔滤膜上的肺炎支原体P1 蛋白抗原抗原形成复合物，胶体金标志的羊抗人IgM 抗体与上述抗原抗体复合物联合，形成肉眼可见的红色斑点，即为阳性结果，不然为阴性结果。
微孔滤膜上的质控线含有羊抗人IgM 抗体，当待测血清加入后，人血清中的IgM 抗体与质控线上羊抗人IgM 抗体形成复合物，胶体金标志的羊抗人IgM 抗体再与上述复合物联合，形成肉眼可见的红色质控线。
【主要构成成份】1.斑点反响板： 40 块（或 20 块），每块斑点反响板主要由含固相肺炎支原体P1 蛋白抗原斑点的硝酸纤维膜和吸水纸构成。
2.试剂 A： 1 瓶，约 10ml （或 5 ml），无色澄清溶液，主要成份为PH7.4PBS 缓冲液、吐温－20、硫柳汞（ 0.1%）。
3.试剂 B： 1 瓶，约 8ml（或 4ml），深红色澄清溶液，主要成份为胶体金标志的羊抗人IgM 抗体、牛血清白蛋白、硫柳汞（0.1%）。
【储藏条件及有效期】试剂盒一般采纳冷链运输，并采纳最迅速的运输方式，缩短运输时间；冬季运输应注意防备制品冻结。
试剂盒储藏条件为2℃～８℃，有效期为8 个月。
【样本要求】1.本试剂盒产品仅合用于对血清样本的检测，其余样本（如，胸腹水、脑脊液、尿液等）未经过产品预期用途的有关研究，不合用于本产品的检测。
2. 样本收集：采纳静脉血于干净离心管中，不加任何抗凝剂、保护剂，置于37℃水浴 20～ 30 分钟（或置室温 1 小时以上），待纤维蛋白原充足凝结后离心（4000 转/ 分， 5～ 10 分钟）分别血清。
肺炎衣原体肺炎疾病详解
疾病名：肺炎衣原体肺炎英文名：chlamydia pneumoniae pneumonia缩写：别名：疾病代码：ICD：J16.0概述：肺炎衣原体(TWAR 株)(1965 年台湾分离株TW-183 和1983 年华盛顿分离株AR-39)是目前临床上最常引起呼吸道感染的一种衣原体种，目前仅有一种血清型，属严格的人类病原体，不存在动物中间宿主。
流行病学：血清流行病调查显示人类的肺炎衣原体感染是世界普遍性的，与人口密度有正向关系。
儿童感染率在20%左右，随着年龄的增加感染率迅速上升，青壮年可达50%～60%，老年70%～80%。
感染率没有性别差异，四季均可发生。
肺炎衣原体传染途径是通过呼吸道分泌物的人-人传播。
因此，在半封闭的环境如家庭、学校、军队以及其他人口集中的工作区域可存在小范围的流行。
肺炎衣原体的感染还可能与哮喘、冠心病及动脉粥样硬化的发病、慢性阻塞性肺疾病的急性发作和恶化有关。
目前，肺炎衣原体已是继肺炎双球菌和流感嗜血杆菌之后引起社区获得性肺炎的主要病原体，与嗜肺军团菌和肺炎支原体一起成为社区获得性肺炎的三种非典型病原体，占社区获得性肺炎的 10%～20%；我科调查了呼吸道感染的病原学分布情况，肺炎衣原体急性感染率占23%。
病因：肺炎衣原体(TWAR 株)(1965 年台湾分离株TW-183 和1983 年华盛顿分离株AR-39)是目前临床上最常引起呼吸道感染的一种衣原体种，目前仅有一种血清型，属严格的人类病原体，不存在动物中间宿主。
发病机制：肺炎衣原体由上呼吸道吸入，侵入鼻咽等黏膜后，首先引起局部组织炎症细胞的浸润性病变，病原体在单核巨噬细胞中繁殖，进而通过血行扩散。
病变明显多发于肺等下呼吸道，炎性病变由肺门逐步扩大，表现为小叶性及间质性肺炎，多发于肺下部。
伴随肺部的早期炎性反应，呈现多形核白细胞浸润及肺泡的纤维素样渗出，可见肺泡腔充满液体，肺泡壁和肺间质呈明显增厚，可发生水肿、出血及坏死。
呼吸道感染IgM九项联检试剂使用说明终稿
呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）说明书【产品名称】通用名称：呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）英文名称：PNEUMOSLIDE IgM商品名称：PNEUMOSLIDE IgM【包装规格】10人份/盒【预期用途】采用间接免疫荧光法（IFA），同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM 抗体，可检的病原体包括：嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型。
已报道的非典型性肺炎的病原体有很多，其中最常见的有：嗜肺军团菌人最易感染的是嗜肺军团菌血清1型，非典型性肺炎常伴随有全身症状。
10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起的。
在血清学诊断中，间接免疫荧光法（IFA）是唯一的标准技术。
肺炎支原体肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，由于很难将其固定在载玻片上，因此先将肺炎支原体抗原固定在细胞中。
Q热立克次体Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病，会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。
血清学诊断中，IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。
肺炎衣原体肺炎衣原体极易造成呼吸系统感染，特别是支气管炎和肺炎。
在老年人中发病率较高，它所引起的肺炎占所有肺炎病例的10%。
微量免疫荧光法（MIF）是最灵敏和最特异的诊断方法。
腺病毒腺病毒是一种重要的呼吸道病原体，能引起上呼吸道疾病，伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染。
呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒（RSV）是两岁以下幼儿呼吸道感染的主要病原体，在冬季爆发流行。
流感病毒它是流感的病原体，在具有潜在病理学的患者中会产生严重的并发症。
由于它易于与其它呼吸道疾病混淆，所以在流行期临床诊断很困难。
因此，实验室诊断就显得非常重要。
副流感病毒副流感病毒1、2和3型在2-4岁儿童中能引起喉气管支气管炎（哮吼）。
3型具有流行性，1和2型具有地域性。
【检测原理】间接免疫荧光法（IFA）是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。
肺炎衣原体抗体 IgG 检测试剂盒（ELISA）说明书
肺炎衣原体抗体IgG检测试剂盒（ELISA）说明书【产品名称】通用名称：肺炎衣原体抗体IgG检测试剂盒（ELISA）英文名称：SeroCP™ IgG【包装规格】96人份/盒、192人份/盒【预期用途】本试剂盒采用酶联免疫吸附法，用于定性检测人类血清中肺炎衣原体特异性IgG抗体。
本试剂盒可作为肺炎衣原体感染诊断的辅助工具。
仅用于体外诊断。
肺炎衣原体(TWAR)是一种新出现的有传染性的因子，可引起一系列临床表现，包括上呼吸道和下呼吸道感染。
衣原体肺炎感染一般是温和的、无症状的，然而，肺炎衣原体感染可能会引起一些严重的疾病如：咽炎、窦炎、急性支气管炎和社区获得性肺炎。
如果未检测出和未进行治疗，此感染可能会导致长期持久的疾病。
最新的数据显示了肺炎衣原体感染和慢性疾病的关联。
儿童感染肺炎衣原体的几率较低，到中年时感染率急剧增高，到老年时持续增高（>50%）。
样本采集的困难性和被感染部位的不易接近性严重影响直接检测方法的有效性。
因此，在直接检测方法不是很有效的情况下，血清学检测作为远端和慢性衣原体感染鉴定的非入侵性工具，常规应用于临床。
此外，特定的抗体类型的出现也能指示出疾病的状态。
早期衣原体感染的特征是在2-4周内出现IgM抗体，随后6-8周内才有IgA和IgG反应。
在急性感染肺炎衣原体后，IgM抗体在2-6个月内会消失而IgG抗体滴度会慢慢减少，而 IgA抗体趋向于迅速消失。
当怀疑衣原体初步感染时，IgM的检测有高度的诊断意义。
然而，重复和慢性感染时IgM水平是比较低的，因此如果没有检测到IgM并不排除正在感染的可能性。
对于重复感染，IgG和IgA水平升高较快，通常在1至2周内。
IgA抗体是一个可靠的原发性、慢性和再感染性的免疫学标记物。
这些抗体通常在治疗和根除衣原体感染之后快速下降并回复到基线水平。
IgA抗体滴度的维持一般被认为是慢性衣原体感染的标志。
IgG抗体维持长时间并下降较慢。
因此，IgG抗体的出现主要表示衣原体感染尚未解决。
肺炎衣原体肺炎-疾病研究白皮书
肺炎衣原体肺炎-疾病研究白皮书第一部分肺炎衣原体肺炎-疾病概述 (2)第二部分肺炎衣原体肺炎-疾病的病因分析 (4)第三部分肺炎衣原体肺炎-疾病的主要症状及临床表现 (6)第四部分肺炎衣原体肺炎-疾病的发展趋势分析 (9)第五部分肺炎衣原体肺炎-疾病患者的分布情况 (12)第六部分肺炎衣原体肺炎-疾病的鉴别诊断 (14)第七部分肺炎衣原体肺炎-疾病的权威治疗医院与机构 (17)第八部分肺炎衣原体肺炎-疾病的临床治疗方案 (19)第九部分肺炎衣原体肺炎-疾病的护理方案 (21)第十部分肺炎衣原体肺炎-疾病的科学管理 (23)第一部分肺炎衣原体肺炎-疾病概述肺炎衣原体肺炎-疾病概述肺炎衣原体肺炎是一种由肺炎衣原体引起的呼吸道传染病，主要影响人类的呼吸系统。
肺炎衣原体是一种革兰氏阴性细菌，其感染范围广泛，可以引起多种疾病，包括肺炎、支气管炎和喉炎等。
肺炎衣原体感染主要通过空气飞沫传播，也可通过直接接触传播。
流行病学调查显示，肺炎衣原体肺炎在全球范围内均有发生，尤其在学龄前儿童中较为普遍。
该疾病通常在秋冬季节高发，且易于在学校、托儿所和医疗机构等密集场所传播。
病因与传播途径肺炎衣原体是肺炎衣原体科中的一类细菌，主要通过空气飞沫传播，当感染者咳嗽、打喷嚏或说话时，将病原体释放到空气中，其他人通过吸入含有病原体的空气而感染。
此外，直接接触感染者的分泌物或物体也是传播途径之一。
发病与症状肺炎衣原体肺炎的潜伏期通常为1-3周，患者在潜伏期结束后，开始出现一系列症状。
初期症状类似于普通感冒，包括鼻塞、流涕、咳嗽和轻微发热等。
然而，随着疾病的发展，患者可能会出现严重的呼吸困难、高热、乏力和咳嗽加剧等。
诊断与治疗肺炎衣原体肺炎的确诊主要依赖于临床症状和实验室检测。
常用的实验室检测方法包括病原体核酸检测、病原体培养和免疫学检测等。
对于一些病情较轻的患者，可以采取支持性治疗，如适当休息、补充水分、退热等。
对于严重病例，可能需要抗生素治疗。
肺炎衣原体抗体IgM金标检测试剂盒胶体金法作业指导书
肺炎衣原体抗体IgM金标检测试剂盒胶体金法作业指导书4.2.6.1 反应体组装程序：a) 在S6塑料基板上贴双面胶带S5（29，48mm）二条；b) 在S5上贴反应膜S1（20mm），S1上下缘距S6上下缘各29mm；c) 在S6上贴吸水纸S3（30mm），吸水纸下缘与S1上缘交接1mm,上缘与S5的上边缘对齐；d) 在S5下端贴无纺布S2-1，其上缘压住S1下缘1mm；e) 在S2-1上平放金标抗体反应膜S4（10mm）上缘对齐；f) 在S4上平放无纺布S2-2（30mm）上下缘分别S4、S6对齐；g) 将组装成型的反应体系用电脑可调式切割机切成4.2mm测试条，装入干燥器，待包装。
4.2.6.2 成品包装：每支成品先装聚苯乙烯塑料外壳，再用镀铝膜包装加干燥剂，附说明书，打批号入库，每批留样100人份，以备复检．4.2.7 参比品制备4.2.7.1 肺衣IgM阳性血清质控品取临床确诊肺衣病人（临床症状明显、肺炎衣原体培养阳性）血清15份，间接ELISA测定肺炎衣原体IgM抗体阳性，0D492≥0.3，混合血清加防腐剂,分装-70℃保存。
4.2.7.2 肺衣IgM阴性血清质控品取健康人血清（体查健康，培养法和间接ELISA测定肺炎衣原体IgM抗体均阴性，0D492＜0.10）15份，混合血清加防腐剂,分装-70℃保存。
4.3 成品检测产品技术要求应符合《肺炎衣原体抗体IgM金标检测试剂盒（胶体金法）》产品注册标要求。
4.3.1 外观4.3.1.1 要求a)检测条：表面应平整、无划伤、开裂、变形及污渍；检测卡各组分附着牢固、内容齐全；b) 检测卡：外壳应平整，上下盖应均匀合拢，无明显间隙；反应芯试条在外壳内应附着牢固；4.3.1.2 检验在自然光线下，用手感和目力观察方法进行检验。
4.3.2 符合率4.3.2.1 阴性符合率4.3.2.1.1要求试剂卡测试肺炎衣原体IgM抗体阴性质控血清10份，假阳性判断结果不多于1份，符合率应≥90%。
肺炎支原体IgM
• 肺炎支原体主要侵犯呼吸系统，是青少年 呼吸道感染的主要病原体之一。肺炎支原 体感染引起非细菌性肺炎，占非细菌性 33%以上，其治疗方案也与细菌性肺炎不 同。因此，肺炎支原体感 年11月26日获国家食品药品监督管理局(SFDA)批准，是国内第 一家获得三类医疗器械注册证的产品。 • ★ 10 年精心研发，获国家发明专利(200710015485.1)及实用新型专 利(ZL20072002168 4.9) ，拥有完全的自主知识产权。 • ★ 是国内第一家通过中国药品生物制品鉴定所检验合格的产品，并经 过数百万病例临床验证，品质卓越。 • ★ 真正POCT技术,单人份检测，操作简便，无需任何仪器设备，判 读结果仅需3分钟。 • ★ 采用进口NC膜、高纯度抗原、单克隆抗体及独有专利技术，不受 RF等非特异性干扰，无前带现象。 • ★ 检测特异性IgM抗体，可根据显色深浅判定抗体滴度，发病即可检 出，避免了检验总抗体因IgG造成的假阳性，更具临床诊断意义。 • ★ 是鉴别流感及其他呼吸道传染病的最佳选择。
肺炎支原体IgM(MP-IgM)检测
• 肺炎支原体 (Mycoplasma pneumoniae，MP)是 介于病毒和细菌之间的一种微生物，是一类能在 无生命培养基上生长繁殖的最小原核细胞型微生 物。MP感染可在任何年龄发生，尤其以5～20岁 更多见。MP通过飞沫以气溶胶微粒的形式传播， 感染后引起肺炎支原体肺炎（Mycoplasmal pneumonia，MPP），每隔3～5年出现一次地区 性流行，占各类肺炎总数的10%～20%，入伍新 兵患肺炎者30%～50%由肺炎支原体引起；约占 非细菌性肺炎的1／3以上。另外还可引起肺外各 系统改变，且有死亡病例报道，已引起临床关注。
• 实验室检测肺炎支原体IgM(MP-IgM)是确诊 MPP的有效手段。金标免疫斑点法(DIM)是 根据金标免疫渗滤原理，利用MP抗原采用 免疫渗滤技术，检测MP抗体，黄疸、溶血 无影响，分泌物、粪便标本加生理盐水离 心取上清可以检测。但是敏感度略低，有 漏诊的可能；阳性拟然比最高，而且操作 简单快速，是确诊MPP的最好方法。
肺炎衣原体抗体检测SOP
B10.2【实验原理】用肺炎衣原体抗原固相硝酸纤维素膜，应用渗滤式间接法原理，检测血清中肺炎衣原体抗体。
B10.3【样本要求】血清样品不能溶血，应为新鲜血清或2℃～8℃条件保存不超过3天。
高脂血症血清不能使用。
B10.4【样本采集】不抗凝血2ml，避免溶血、混浊、或脂血标本B10.5【试剂盒主要组成成份】斑点反应板：40块（或20块）试剂A： 1瓶, 约10ml试剂B: 1瓶,约8ml, 胶体金标记物B10.6【储存条件及有效期】产品应储存在2℃～8℃条件中，不能冷冻；有效期8个月。
B10.7【检验方法】滴入二滴试剂A于反应板中央孔中，待完全渗入；滴入150µl血清于反应板孔中，待完全渗入；滴加三滴试剂B于反应板孔中，待完全渗入；渗入三滴试剂A于反应板孔中，待完全渗入。
B10.8【结果解释】阳性：反应板孔中出现红色圆斑和清晰的红色质控线，为肺炎衣原体抗体阳性；阴性：反应板孔中只显现清晰的红色质控线，为肺炎衣原体抗体阴性；失效: 反应板孔中未显现红色质控线，为操作失误或试剂失效。
B10.9【检验方法的局限性】本试剂试验仅用于检测肺炎衣原体抗体而非直接检测肺炎衣原体，因而阳性结果并不能确诊是肺炎衣原体感染。
对患者状况的诊断应结合患者临床体征与症状和试验结果的综合分析。
抗体含量低的血清样品，不能被检测出来是可能的。
部份肺炎衣原体感染的患者，不产生抗体或产生少量的抗体。
此时，可能显示阴性结果。
试验结果可疑时，应用培养基进行培养确诊。
B10.10【产品性能指标】批内精密度：阳性符合率和阴性符合率均应≥95%，反应斑点颜色深浅程度应接近。
批间精密度：阳性符合率和阴性符合率均应≥95%。
B10.11【注意事项】1.本产品仅用于体外诊断。
本产品的检测结果仅可作为疾病的辅助诊断指标。
2.斑点反应板为一次性检测用品，不可重复使用。
3.不同批号的试剂盒产品，其中的各组成部分不可混用。
4.试验一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。
呼吸道感染IgM九项联检试剂说明书终稿
呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）说明书【产品名称】通用名称：呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）英文名称：PNEUMOSLIDE IgM商品名称：PNEUMOSLIDE IgM【包装规格】10人份/盒【预期用途】采用间接免疫荧光法（IFA），同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM 抗体，可检的病原体包括：嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型。
已报道的非典型性肺炎的病原体有很多，其中最常见的有：嗜肺军团菌人最易感染的是嗜肺军团菌血清1型，非典型性肺炎常伴随有全身症状。
10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起的。
在血清学诊断中，间接免疫荧光法（IFA）是唯一的标准技术。
肺炎支原体肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，由于很难将其固定在载玻片上，因此先将肺炎支原体抗原固定在细胞中。
Q热立克次体Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病，会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。
血清学诊断中，IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。
肺炎衣原体肺炎衣原体极易造成呼吸系统感染，特别是支气管炎和肺炎。
在老年人中发病率较高，它所引起的肺炎占所有肺炎病例的10%。
微量免疫荧光法（MIF）是最灵敏和最特异的诊断方法。
腺病毒腺病毒是一种重要的呼吸道病原体，能引起上呼吸道疾病，伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染。
呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒（RSV）是两岁以下幼儿呼吸道感染的主要病原体，在冬季爆发流行。
流感病毒它是流感的病原体，在具有潜在病理学的患者中会产生严重的并发症。
由于它易于与其它呼吸道疾病混淆，所以在流行期临床诊断很困难。
因此，实验室诊断就显得非常重要。
副流感病毒副流感病毒1、2和3型在2-4岁儿童中能引起喉气管支气管炎（哮吼）。
3型具有流行性，1和2型具有地域性。
【检测原理】间接免疫荧光法（IFA）是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。
ELISA法检测肺炎衣原体(IgM)抗体测定(CP-IgM)标准操作程序
1.检测原理采用间接法原理检测人血清样品中肺炎衣原体（IgM）抗体（CP-IgM），包被抗原。
待测样本加入已包被抗原的反应孔内孵育，若标本中含有CP-IgM抗体，则该抗体与微孔内抗原形成抗原抗体复合物，加入辣根过氧化物酶标记的抗体，经孵育后，酶标记物连接至抗原抗体复合物上，在TMB底物参与反应的情况下，产生显色反应。
2. 样本类型及处理3.试剂注意事项：开启所有试剂（包括校准品、标准品、质控品）需注明日期及签名。
每个试剂容器都需贴上写有以下内容的标签：启用日期、截止日期。
开启时应检查试剂是否变色，是否肉眼可见的细菌生长迹象、浊度、沉淀反应等，这些表示试剂已经变质或超过保质期。
4.仪器设备备注：“溯源方式”栏填写送较、自校、送检、自检、比对等。
5.质量控制5.1使用的质控品5.2质控周期5.2.1每一批次标本均需运行一次质控。
5.2.2每一批标本最大量为：44个标本。
5.3变异系数CV<20%5.4质控判断标准即时质控法5.5失控处理：对质控失控需查找原因并进行分析5.5.1先观察整块酶标板显色是否正常。
5.5.2查找操作过程是否按照SOP文件进行。
5.5.3质控品S/CO值>3SD或质控品S/CO值<3SD，结合模式报告结果。
6.操作步骤6.1选用试剂：北京贝尔生物工程股份有限公司6.2平衡：从冷藏环境中取出的试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔反应条应放置室温平衡30分钟后方可使用，余者应及时放入有干燥剂的自封袋封存于冰箱中备用。
在平衡试剂的同时，待测标本需放置室温平衡30分钟后再行测试。
6.3配液：将20×洗涤液用纯化水做20倍稀释后备用。
配制好的洗涤液如用不完可放置2-8℃冷藏储存，使用前应放置室温平衡20分钟后方可使用。
6.4加样：用移液器在反应孔中分别加入阴、阳性对照血清和CP-IgM质控品各100ul，测定孔中加入样品稀释液100ul，再依次加入待测血清样品10ul（待测血清用生理盐水作1:10稀释），用封口膜封板。
肺炎支原体IgM抗体检测SOP
肺炎支原体IgM抗体检测SOP一、检验目的规范实验室人员操作，以保证实验结果的准确性。
二、预期用途该产品用于定性检测血清、血浆或全血中的肺炎支原体IgM抗体。
是引起社区获得性呼吸道感染的主要病原体之一，可以导致支气管炎和非典型性肺炎。
主要引起人非典型肺炎、气管炎及支气管炎，多经口和呼吸道等途径传播，多发于儿童和青年人。
MP感染已占小儿呼吸道疾病30%以上，且有增加趋势。
人体感染肺炎支原体后，能产生特异性IgM和IgG抗体。
IgM 抗体出现早，一般在感染后1周出现，3~4周达高峰，以后逐渐降低。
再次感染或重复感染后，常在1-2周内出现较高水平的IgG抗体。
MP肺炎与一般呼吸道感染和肺炎的临床症状没有明显区别，MP感染早期诊断有利于MP肺炎的治疗。
血青学诊断法是临床常用的主要诊断方法之一，灵敏度和特异性适中，常用的主要有酶联免疫吸附试验和凝集试验。
三、检验原理本产品以胶体金作为指示标记，用胶体金标记抗人IgM单抗，以基因工程技术表达肺炎支原体P1蛋白抗原标被硝酸纤维素膜，应用“间接法”免疫层析技术原理，检测的肺炎支原体感染病人血清、血浆或全血中的肺炎支原体抗体IgM,在检测过程中，若样本中存在肺炎支原体抗体gM, 则肺炎支原体抗体1gM与样本吸附垫中的胶体金一抗人IgM单抗结合物形成复合物，复合物沿硝酸纤维素膜移动到检测区，与检测线上包被的肺炎支原体P1蛋白抗原结合，多余的未被结合的结合物继续移动到质控区，与质控线上包被的羊抗鼠IgG 抗体结合，反应膜上出现1条红色的检测线和1条红色的质控线；若样本中不存在肺炎支原体抗体IgM,则胶体金一抗人IgM单抗结合物直接沿硝酸纤维素膜移动到质控区，与质控线上包被的羊抗鼠IgG抗体结合，仅形成一条红色的质控线。
四、主要组成成份1、试剂盒组分包括肺炎支原体1gM抗体检测卡，样品稀释液。
1.1、检测卡主要组分：包括金标垫和硝酸纤维素检测膜，金标垫内包被有胶体金标记的抗人IgM单克隆抗体；硝酸纤维素检测膜的检测线上包被有基因工程技术表达的肺炎支原体P1蛋白抗原，质控线上包被有羊抗鼠IgG抗体。
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从试剂瓶移取试剂时 应使用无菌操作以避 免污染，否则可能得 出错误结果。 防止试剂过度光照。 保存在＋4℃下。 开始测定时应当为＋ 20℃℃＋25℃。
6、孵育时间太短。 7、互换试剂。
孵育 1 个小时（允许 误差为±5 分钟）或 30 分钟。 不要将不同批号的试 剂混用或互换。
底物液加入一次性的试剂槽中（试剂盒内提供 6 个）。将未用完的液体丢弃，不要将其倒回原瓶内。 当加底物时，加样器头部不要与微孔壁接触。 3.洗涤时可以手工操作或者用洗板机进行。在洗 涤后，将微孔板在纸巾上将水拍干。 4.在 450nm 处以空气调零，参考波长是 620nm （590-690nm）。大多数的微孔板读数仪可以自动 地扣除试剂空白。样本的吸光值可以自动地扣除 试剂空白。然而，试剂空白的吸光值应该在指控 范围内。 注意：所有的肺炎支原体、肺炎衣原体、百日咳 杆菌的 IgG、IgA、IgM 抗体可以用相同的稀释样 本来进行检测，这样在实验开始时用肺炎支原体或 百日咳杆菌检测试剂盒内的样本稀释液对样本进行 稀释是非常重要的。详细的情况看试剂盒的说明 【参考值范围】 结果计算 结果以吸光值 ⁄ 临界值（S⁄CO）单位表示。 用下列公式计算：
对照品
即用型
酶结合物
即用型
TMB 底物溶液 即用型
终止液
即用型
打开/稀释后试 剂的稳定性 （+2-8℃） 6 个月﹡）
6 个月﹡）
6 个月﹡）
6 个月﹡）
6 个月﹡）
6 个月﹡） 丢弃试剂槽中未 使用的试剂。底 物中出现深蓝色 表明溶液已被污 染，必须丢弃 6 个月﹡）
浓缩洗涤液 （10X）
用蒸馏水 1+9 稀 释 （1：10）
【检验方法】 A.实验前的控制与操作 在实验开始前，将试剂和微孔板平衡至室温（+20 ℃~25℃）。 并将孵育器预热至 37℃。 B.实验设计 样品分配方案如下所示：
微孔板
1
234567891 1 1
012
A BLK S1
B BLK S2
C NC S3
D NC S4
E CO S5
F CO S6
G PC S7
2、酶结合物被溅出的 人血清污染
解决方法
在 37℃±1℃下孵育。 不同恒温箱的加热效 率差异很大。最好使 用加热效率高且加热 均匀的恒温箱。 所有的吸光值均低。
只要少量的血清就足
以阻断其活性，要特
别注意防止污染。
3、溅出的人血清污染 了微孔
只有少数几个孔的吸 光值非常低，要特别 注意防止污染。
4、试剂变质。 ﹡由于污染或酶结合 物中的辣根过氧化物 酶变质所致。 ﹡由于储藏不当所致。
阴性对照
≤0.150 *)
临界值质控
≥0.200*)
S/Co
阳性质控
2.5-6.1
﹡）已经从这些值中减去了空白孔吸光度。
B. 结果解释
灰区
根据对大约500名芬兰献血者血清和血浆标本进行
分析以及计算 S⁄CO值的分 布 参数，疑 似区 间为
0.5‐1.1。换句话说，得出结果为0.5‐1.1 S⁄CO的
+4℃下一个月， 室温下一个星期
﹡）由铝箔包装的微孔板在打开后，应该和干燥剂 一起密封保存在＋2℃‐＋8℃下，将其开口密封好。 开封试剂只有在＋2℃‐＋8℃下正确的保存条件 下，它们才可保持好的稳定性，高的环境温度和污 染可降低试剂的稳定性。 【储存条件及有效期】 本试剂盒储存于+2--8 ℃，有效期 18 个月。 【适用仪器】 A.该试剂盒适用于各种酶标仪 【样本要求】 血清和血浆标本采集后应冷藏（＋4℃），如果不能 在48个小时内进行试验，标本应冷冻（‐20℃或 ‐70℃中各适合的温度下）。标本不应反复冻融。 由于叠氮化钠可使辣根过氧化物酶失活，因此不要 使用叠氮化钠作为防腐剂。 血清或血浆的热灭活（＋56℃，30分钟）可能引起 非特异性结果。 如果被微生物污染、严重溶血或高脂的血清和血浆， 可能产生错误结果。 长期保存血清（冷冻超过一年）可能导致形成脂质 聚集物。这些聚集物可能引起非特异性结果。
20~200ul、100~1000ul和多道50~300ul）。
纸巾或吸水纸。
定时器，至少可测60分钟。
微孔板恒温孵育箱。
酶标仪。
洗板机。
次氯酸钠溶液，游离有效氯为50‐500 mg/l。
一次性手套。
C.实验中各组份的准备
试剂
准备
包被好的微孔 板 样本稀释液
即用型 即用型
肺炎衣原体 IgG 即用型 去除剂
S⁄CO标本＝（A标本‐A空白）⁄（A临界‐A空白） 其中A标本＝标本的吸光度
A空白＝空白孔的平均吸光度 A临界＝临界对照品的平均吸光度
S/Co ＜0.5 0.5＜S/Co＜1.1 ＞1.1
结果 阴性 灰区 阳性
【检测结果的解释】
A. 判断标准
当满足以下条件时，测定的结果可被接受：
吸光值
空白
≤0.100
精密度差
原因⁄错误
解决方法
1、液体处理设备未正 检查移液器设备的校准。 确校准。
2、由于污染了清洗头 定期清洗清洗头的尖端。
尖端不能正常洗涤。
3、洗涤后反应板放置 严格遵循试剂盒说明。 的时间太长（干燥反应
板）。
4、反应板加热不均匀。 维修使用的恒温箱
所有吸光度值均很低 原因⁄错误 1、孵育温度太低。
10X）用酶免级用水进行 10 倍稀释，（1+9）
(二) 试验操作
1.首先加入 100 ul IgG 去除剂（2a 瓶）到每一个试
验所需的微孔中。
2.留出两个孔作为试剂空白对照。
3.加入 10 ul 稀释过的样品到样品孔中。
4.再分别加入 10 ul 对照品到对照品孔（3a,3b,3c 瓶），
一式两份。
5.贴上封口箔后在 37℃下孵育 60 分钟。
6.洗板。每孔加入 300-400ul 洗液，洗 5 次，每次
间浸泡 15-30 秒。
7.向每个孔中加入 100 ul 酶结合物（4 号瓶）。
8.贴上封口箔后在 37℃下孵育 60 分钟。
9.洗板。每孔加入 300-400ul 洗液，洗 5 次，每次
间浸泡 15-30 秒。
10.向每个孔中加入 100 ul TMB 底物液（5 号瓶）。
11.避光室温下孵育 30 分钟。
12.向每孔中加入 100 ul 终止液（6 号瓶）。
13.在 450nm 和 620nm（590-690nm）处读取吸光度值
注意：
为了提高效率和精密度，建议使用 8 通道加样器。
1.用样本稀释液对样本进行 1：101 稀释（5ul 的样 本加入到 500ul 样本稀释液中），混合均匀。临界值 对照须加两个样本孔。稀释后的样本在 4℃下至少 可以稳定 2 周。对照品不要进行稀释。 2.避免污染：当从试剂瓶中吸取液体时，要运用无 菌技术以避免污染。每一份样本在吸取时都要使用 新的吸头。将所需的样本稀释液、酶结合物、TMB
H PC S8
图例：BLK＝空白 NC＝阴性对照 PC＝阳性对照
CO=临界值对照
S＝样品
C.检测方法步骤
(一) 试验准备：
1.试剂盒取出后在室温下放置 20-30 分钟，使其恢
复到室温。
2.稀释血清：取 5ul 的血清加入到 500ul 的样本稀释
液中（2 号瓶），稀释比例为 1：101。
3.配制洗涤液：浓缩洗液（WASHING SOLUTION
每个组分的标签及包装上均印有效期。
避免不必要的光照，主要是预防试剂受光影响，因
为酶结合物及 TMB 底物溶液都是光敏感试剂。
不同试剂盒中的以下几种成分可以通用：
洗液、TMB 底离子水，最好是无菌的。
用于稀释试剂的刻度量筒。
保存稀释试剂的试剂瓶。
精密加样器（比如：单道量程为0.5‐10ul、5~50ul、
标本被认为是可疑的，应当用成对标本定时地重新
测定以监测IgM抗体的动态。
急性传染： 原发急性传染时，第一份血清标本中已经可能检测 到 IgM 应答。再感染时 IgM 可能保持阴性。Ani Labsystems 肺炎衣原体 IgA 和 IgG 酶免疫测定为 诊断急性肺炎衣原体感染提供了辅助信息。 非急性传染： 稳定或降低的IgG和⁄或IgA水平加上阴性或疑似的 IgM表明可能存在以下一种感染：既往感染、近期 感染、感染已愈或持续感染。
C. 疑难解答 空白太高 原因⁄错误 1、污染，其它孔有溢出 液。 2、没有正确稀释浓缩洗 涤液。 3、洗涤效果差。 4、试剂槽中的 TMB 底物 溶液被污染。
解决方法 避免污染。
应该按 1∶10（1＋ 9）稀释。 检查洗板机。 保留剩余底物溶液 直到完成试验。检 查试剂槽中的底物 是否变蓝。变蓝表 明存在污染。
酶与色原反应生成有色终产物。加入酸（H2SO4）
终止显色反应。颜色强度与患者标本中的肺炎衣原
体抗体浓度成正比。
【主要组成成分】
A.主要组成成分： 1.微孔板，12×8孔 包被好的微孔板。 2.样本稀释液，100毫升 磷酸盐缓冲液，含有专利商品添加剂、蓝色显色剂 和0.05％Bronidox®作为防腐剂。 2a.肺炎衣原体IgG去除剂，20毫升 含有抗人IgG，溶于含有专利商品添加剂和0.05％ Bronidox®作为防腐剂的磷酸盐缓冲液。 3a.阴性对照品，1.0毫升 肺炎衣原体抗体阴性的稀释人血清，含有作为防腐 剂的0.05％Bronidox®和红色显色剂。 3b.临界值对照品，1.0毫升 肺炎衣原体IgM抗体处于临界的稀释人血清，含有作 为防腐剂的0.05％Bronidox®和红色显色剂。 3c.阳性对照品，1.0毫升 含有作为防腐剂的 0.05％Bronidox®和红色显色剂 的稀释人血清。 4.酶结合物，30毫升 缓冲盐溶液，含有专利商品添加剂、红色显色剂、 与辣根过氧化物酶结合的抗人IgM（羊）和作为防腐 剂的0.1％N‐甲基异噻唑酮。 5.TMB底物溶液，即用型, 18毫升 含有专用商品添加剂和0.01％凯松作为防腐剂的 3,3',5,5'‐四甲基联苯胺和过氧化氢柠檬酸缓冲 液。 6.终止液，25毫升 0.45 M H2SO4 7.洗涤液，100毫升 浓缩的柠檬酸缓冲盐水、含有专有添加剂和作为防 腐剂的0.05％Bronidox®。 微孔板贴膜 2个 试剂槽 6 个 注：试剂应保存在+2℃~+8℃下。